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湖南省岳阳市岳阳县岳阳县第一中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题
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这是一份湖南省岳阳市岳阳县岳阳县第一中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题，共23页。
A. 接种麦曲有利于淀粉水解小分子糖，有利于“酒娘”菌种发酵
B. 煎煮的目的是除去发酵产品中的酵母菌等微生物，利于储藏
C. 发酵过程中“开耙”可适当提供O2，活化酵母
D. 黄酒酿制过程中需定期检测亚硝酸盐含量是否超标
【答案】D
【解析】
【分析】1、酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵（反应简式②），可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28 ℃。
2、二氧化碳不仅是酵母菌无氧呼吸的产物，而且也是酵母菌有氧呼吸的产物，因此不都是在酵母菌细胞质基质中经过无氧呼吸产生的，也有的是在线粒体中经过有氧呼吸第二阶段产生的。
【详解】A、淀粉属于生物大分子物质，水解为小分子糖有利于发酵过程中酵母菌对糖类的利用，A正确；
B、煎煮是进行消毒，除去发酵产品中的酵母菌等微生物，利于储藏，B正确；
C、“开耙”（搅摔）是为了让酵母菌进行有氧呼吸，增加酵母菌的数量，有利于活化酵母，C正确；
D、黄酒酿制过程中不产生亚硝酸盐，不需要检测亚硝酸盐含量，D错误。
故选D。
2. 下列关于微生物培养的叙述，正确的是（ ）
A. 高压蒸汽灭菌后，务必在常压下再打开灭菌锅
B. 纯化培养时，在培养皿皿盖做标记后倒置在恒温培养箱中静置培养
C. 涂布接种时，需要将涂布器浸在酒精后再酒精灯外焰引燃后，立刻涂布
D. 用平板划线法对微生物进行分离计数，也可直接用显微镜对某些微生物计数
【答案】A
【解析】
【分析】高压灭菌锅是利用电热丝加热水产生蒸汽，并能维持一定压力的装置。在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在100KPa的压力下，来这里 全站资源一元不到！试卷源自 每日更新，汇集全国各地小初高最新试卷。锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下维持15~30min就可以很快杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、高压蒸汽灭菌后，待灭菌锅内在常压、温度降至60℃以下后，方可取出锅内物品，以免因温度过高而骤然降温导致玻璃器皿炸裂，A正确；
B、纯化培养时，在培养皿皿底做标记后倒置在恒温培养箱中静置培养，这样方便观察，也能防止冷凝水滴落到培养基表面，B错误；
C、涂布接种时，需要将涂布器浸在酒精后再酒精灯外焰引燃后，待其冷却再进行涂布接种，否则高温会杀死菌种，C错误；
D、可用稀释涂布平板法对微生物进行分离计数，也可直接用显微镜对某些微生物计数，平板划线法能够用于微生物分离，不能用于微生物计数，D错误。
故选A。
3. 下列关于腐乳制作的叙述，错误的是（ ）
A. 毛霉可利用其体内的酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸
B. 吃腐乳时，腐乳外部的“皮”是细菌繁殖形成的
C. 用盐腌制腐乳的过程中，要控制盐的用量，盐的浓度过高会影响口味，过低则不足以抑制杂菌的生长，导致豆腐腐败
D. 其制作过程可以表示为让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制
【答案】B
【解析】
【分析】1、豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪，都是大分子有机物，难以消化、吸收，毛霉等多种微生物分泌的蛋白酶能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶能将脂肪分解成甘油和脂肪酸。2、用盐腌制的目的：①盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质；②加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期制作过程中不会过早酥烂；③有调味作用．酒精能抑制微生物的生长，同时使得腐乳具有独特的香味。
【详解】A、毛霉能够产生蛋白酶，该蛋白酶能够将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，A正确；
B、腐乳外部的“皮”是前期发酵时毛霉等微生物在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝)，对人体无害，B错误；
C、用盐腌制腐乳的过程中，要控制盐的用量，盐的浓度过高会影响口味，过低则不足以抑制杂菌的生长，导致豆腐腐败，C正确；
D、腐乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制，整个过程中应注意避免杂菌污染，D正确。故选B。
4. 限量补充培养法可用于营养缺陷型菌株的检出（如图）。将诱变后的菌株接种在基本培养基上，野生型菌株迅速形成较大菌落，营养缺陷型菌株生长缓慢，不出现菌落或形成微小菌落。基本培养基中补充精氨酸后，营养缺陷型菌株快速生长。下列叙述正确的是（ ）
A. 用紫外线照射可诱导野生型菌株发生定向突变
B. 精氨酸缺陷型菌株缺乏吸收利用精氨酸的能力
C. 培养基中添加精氨酸后抑制了野生型菌株生长
D. 挑取图乙中菌落②分离精氨酸营养缺陷型菌株
【答案】D
【解析】
【分析】将诱变后的菌株接种在基本培养基上，野生型菌株迅速形成较大菌落，营养缺陷型菌株生长缓慢，不出现菌落或形成微小菌落。
题图分析：A表示野生型菌株形成的较大的菌落，B表示营养缺陷型菌株形成的较小的菌落。
【详解】A、用紫外线照射诱导野生型菌株发生的变异是基因突变，是不定向的，A错误；
B、精氨酸缺陷型菌株缺乏将其他物质转化为精氨酸的能力，不是缺乏吸收能力，B错误；
C、对比图甲和图乙并结合题干信息可知，培养基中添加精氨酸后促进了野生型菌株①的生长，C错误；
D、对比甲和乙可知，加入精氨酸后才出现的②是精氨酸营养缺陷型菌株，所以可以选择图乙中菌落②获得精氨酸营养缺陷型菌株，D正确。
故选D。
5. 灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（ ）
A. 为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到培养皿中再进行高压蒸汽灭菌
B. 配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行
C. 为防止蛋白质变性，不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D. 可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
【答案】D
【解析】
【分析】消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到锥形瓶中再进行高压蒸汽灭菌，A错误；
B、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行，配制培养基不需要在酒精灯火焰旁进行，B错误；
C、牛肉膏蛋白胨培养基需要利用湿热灭菌法（例如高压蒸汽灭菌法）进行灭菌，C错误；
D、实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等可以使用干热灭菌法进行灭菌，以防止杂菌污染，D正确。
故选D。
6. 生物兴趣小组成员以西瓜5天龄幼苗子叶（子叶尚未完全展开且颜色为淡绿色）为外植体进行相关研究，得到如图所示实验结果。相关叙述错误的是（ ）
A. 实验开始前应对幼苗子叶和MS培养基进行灭菌处理
B. 与愈伤组织细胞相比，胚状体细胞已经分化
C. 暗处理时间长短对细胞脱分化率影响不大，但影响再分化率
D. 结果表明西瓜子叶诱导形成胚状体的最适暗处理时间是1～2周
【答案】A
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、该实验的外植体(幼苗子叶)需要消毒处理，而不是灭菌，灭菌会使得外植体死亡而无法培养出愈伤组织和胚状体，A错误；
B、愈伤组织是由已分化的细胞变为未分化的细胞，胚状体是由愈伤组织分化而来，因此愈伤组织属于未分化细胞组织，胚状体属于已分化细胞组织，B正确；C、愈伤组织的变化属于脱分化，胚状体的变化属于再分化，从图中可以看出，随着时间的变化愈伤组织的诱导率虽然有一个突变，但随着时间的增加，后期变化较小，而胚状体的诱导率随着时间的增加，呈现先增加后逐渐减少且明显的趋势，C正确；
D、由胚状体诱导率的变化趋势来看，在1-2周，诱导率数据较大，因此西瓜子叶诱导形成胚状体的最适暗处理时间为1-2周说法正确，D正确。
故选A。
7. 下列与“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”探究实践相关的叙述，正确的是（ ）
A. 若要判断选择培养基是否起到选择作用，需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照
B. 将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL蒸馏水的试管中依次等比稀释
C. 将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作
D. 待长成的菌落稳定后，要在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数
【答案】C
【解析】
【分析】1、选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抵制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。
2、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。
【详解】A、若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种了的没有选择作用的细菌通用的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，A错误；
B、将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中依次等比稀释，B错误；
C、将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作，防止高温杀死菌种，C正确；
D、待长成的菌落稳定后，可直接观察，无需在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数，D错误。
故选C。
8. 哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段，可以获得孤雌或孤雄单倍体胚胎干细胞，为研究基因功能提供了理想的细胞模型。下图表示研究人员利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞的方法，下列说法错误的是（ ）
A. 方法一中，研究人员需对实验小鼠注射促性腺激素，从而获得更多的卵母细胞
B. 用SrCl2溶液处理的作用是激活卵母细胞，得到孤雌单倍体胚胎干细胞
C. 获得的孤雄单倍体胚胎干细胞需要去除细胞M中的雌原核
D. 若研究Y染色体上的相关基因功能，则应用方法一得到胚胎干细胞
【答案】D
【解析】
【分析】受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带(透明带反应) →卵细胞膜反应(卵黄膜封闭作用) →卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
【详解】A、方法一中，给小鼠注射促性腺激素可促使其超数排卵，可以获得更多卵母细胞，A正确；
B、用SrCl2溶液处理的作用是激活卵母细胞，使其发育形成孤雌单倍体胚胎干细胞，B正确；
C、方法二雌雄个体杂交获得受精卵M，去除细胞M中的雌原核，可获得孤雄单倍体胚胎干细胞，C正确；
D、若研究Y染色体上相关基因功能，应用方法二得到的孤雄单倍体胚胎干细胞，而方法一得到的是孤雌单倍体胚胎干细胞，D错误。
故选D。
9. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列说法错误的是（ ）
A. 分离、提纯获得微生物细胞本身或其代谢产物是发酵工程的中心环节
B. 发酵工程可用诱变育种、基因工程等方法选育出性状优良的工程菌并进行扩大培养
C. 在发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径
D. 通过发酵工程获得的单细胞蛋白可作为食品添加剂，也可制成微生物饲料
【答案】A【解析】
【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。(1)如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来； (2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，发酵罐培养的环境条件会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物代谢产物的形成，A错误；
B、可通过诱变育种、细胞工程、基因工程等方法选育出性状优良的工程菌并进行扩大培养，从而获得人类有用的产品，B正确；
C、在发酵工程的发酵环节中，发酵条件不仅影响微生物的生长繁殖，也会通过影响酶的活性影响微生物的代谢途径，C正确；
D、单细胞蛋白是指利用发酵工程获得的大量的微生物菌体，可作为食品添加剂，例如用酵母菌生产的单细胞蛋白可作为食品添加剂，甚至制成“人造肉”供人们直接使用；也可制成微生物饲料，例如在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，动物食用后能提高免疫力，D正确。
故选A。
10. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①、②、③分别表示其对应的结果，请据图回答下列说法正确的是
A. 若a是胚胎分割技术，则产生的①中，所有个体的基因型和表型一定相同
B. 若b是体外受精技术，则形成②的过程属于克隆
C. 若c是核移植技术，则形成③的过程体现了动物体细胞也具有全能性
D. ①②③生产过程中的代孕母畜必须与供体母畜同期发情
【答案】D
【解析】【分析】1、动物细胞核移植技术表明动物细胞核具有全能性。
2、体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。
3、胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。
4、表现型=基因型+外界环境。
【详解】A、来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此若a是胚胎分割技术，则产生的①中，所有个体的基因型相同，但表型是基因型与环境共同作用的结果，因此表型不一定相同，A错误；
B、体外受精技术涉及精子和卵细胞形成和结合，属于有性生殖，不属于克隆，B错误；
C、若c是体细胞核移植技术，则③反映了动物体细胞的细胞核具有全能性，C错误；
D、①②③生产过程中的代孕母畜必须与供体母畜同期发情，保证胚胎移植入相同的生理环境，D正确。
故选D。
11. 通过植物细胞工程技术，可利用甲（高产不耐盐）、乙（低产耐盐）两种二倍体植物培育高产耐盐的杂种植株，实验流程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 目的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异导致植株不可育
B. 由④到目的植株需进一步筛选的原因是④中含有高产不耐盐品种
C. ①过程应用了酶的专一性和细胞膜具有流动性原理
D. 为提高纤维素酶和果胶酶的处理效果①过程可将植物细胞置于适当浓度的高渗溶液中
【答案】D
【解析】
【分析】植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。题图分析，①是酶解法去除细胞壁，②是诱导原生质体融合，③是杂种细胞，④是筛选获得的具有耐盐特性的胚状体。
【详解】A、甲、乙是二倍体植株，通过体细胞杂交技术获得的目的植株是四倍体，故目的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异，由于含有同源染色体，目的植株是可育的，A错误；
B、④是筛选高产耐盐植株，④中含有耐盐但不一定高产品种，B错误；
C、①过程利用了酶的专一性，即利用纤维素酶和果胶酶获取原生质体的过程，不涉及膜的流动性，C错误；
D、为提高纤维素酶和果胶酶的处理效果①过程可将植物细胞置于适当浓度的高渗溶液中，这样可以避免原生质体因吸水而被涨破，D正确。
故选D。
12. OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是（ ）
A. 可用抗原﹣抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量
B. 四个基因转录时都以DNA的同一条单链为模板
C. 应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞
D. 四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译
【答案】A
【解析】
【分析】1、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
2、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
3、将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
【详解】A、可用抗原-抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量，杂交带相对量越多，表明目的基因翻译成的蛋白质含量越高，A正确；B、由题图可知，在同一个T-DNA中OsGLO1启动子启动转录的方向与其他三个基因的不同，四个基因转录时不都以DNA的同一条单链为模板，B错误；
C、卡那霉素抗性基因不在T-DNA中，而潮霉素抗性基因在T-DNA中，应选用含潮霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞，C错误；
D、由题意知，利用农杆菌转化法转化水稻，可使目的基因插入到水稻细胞中染色体的DNA上，所以与叶绿体转运肽基因连接的四个基因，在水稻细胞核内进行转录，在核糖体中进行翻译，D错误。
故选A。
13. 科学家发现，蜗牛消化道提取液可用来处理植物细胞的细胞壁，从而得到原生质体便于进行植物体细胞杂交等操作。下列有关说法错误的是（ ）
A. 蜗牛消化道提取液含有纤维素酶和果胶酶，可以去除植物的细胞壁
B. 处理后获得的原生质体可用秋水仙素进行诱导融合
C. 诱导原生质体融合后，只考虑两两融合，会产生三种融合细胞
D. 原生质体融合体现了细胞膜的流动性
【答案】B
【解析】
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法(聚乙二醇)或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导。可根据植物细胞的质壁分离和复原鉴定杂种细胞是否再生细胞壁从而确定原生质体融合是否完成。
【详解】A、蜗牛消化道提取液可用来处理植物细胞的细胞壁，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，蜗牛消化道提取液含有纤维素酶和果胶酶，可以去除植物的细胞壁，A正确；
B、诱导原生质体融合最常用的方法是聚乙二醇，秋水仙素不能诱导融合，B错误；
C、诱导原生质体融合后，只考虑两两融合，会产生三种融合细胞，例如A、B两种细胞的融合，会产生A-A、B-B及A-B三种融合细胞，C正确；
D、原生质体融合依靠细胞膜与细胞膜的融合，体现了细胞膜的流动性，D正确。
故选B。
14. 细胞融合技术应用广泛，图为细胞融合的过程。据图分析，下列叙述错误的是（ ）
A. 若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞，则完成融合的标志为再生出新的细胞壁
B. 若细胞d是杂交瘤细胞，则在选择培养基中筛选后即可大规模培养生产单克隆抗体
C. 将基因型AaBb、aaBb植株的花粉细胞诱导融合（只考虑两两融合）可得到9种基因型细胞
D. 如果a，b分别表示优良奶牛的卵母细胞和精子，则体外受精时，精子必须进行获能处理，而卵母细胞需要培养到MⅡ期才能完成受精
【答案】B
【解析】
【分析】分析图形：图中甲是有性杂交产生的后代，则a、b分别表示精子和卵细胞，d表示受精卵；乙是植物体细胞杂交产生的后代，则a、b表示两种植物细胞，融合前需要用酶解法去掉细胞壁；丙是单克隆抗体，是浆细胞和骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞分泌的。
【详解】A、若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞，则完成融合的标志为融合的原生质体再生出新的细胞壁，A正确；
B、若细胞d是杂交瘤细胞，则在选择性培养基中筛选后，还需要经过抗体阳性检测才能大规模培养生产单克隆抗体，B错误；
C、若a和b分别为基因型AaBb、aaBb植株的花粉细胞，AaBb能产生AB、aB、Ab、ab四种花粉，aaBb能产生aB、ab两种花粉，去壁两两融合可以得到AABB、aaBB、AAbb、aabb、Aabb、AaBb、AaBB、AaBb、aaBb共9种基因型的细胞，C正确；
D、体外受精时，精子必须进行获能处理，卵母细胞需要培养到MⅡ期才成熟，这样两者才能完成受精，D正确。
故选B。
15. 植物细胞工程在农业、医药工业方面有着广泛的应用，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 采用茎尖组织培养技术得到脱毒苗的过程中需要多次更换培养基
B. 细胞产物的工厂化生产提高了单个细胞中次生代谢物的含量
C. 可以利用植物组织培养过程中产生的突变体培育新品种
D. 利用微型繁殖技术可以保持优良品种的遗传特性
【答案】B【解析】
【分析】植物细胞工程技术的应用:植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物组织培养过程中，需要更换培养基，提高生长素的比例有利于生根，提高细胞分裂素的比例有利于芽的生长，A正确；
B、细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高总的细胞次生代谢物的含量，但不是提高单个细胞中次生代谢物的含量，B错误；
C、由于植物组织培养容易受到培养条件和外界压力（如射线、化学物质等)的影响而产生突变，所以常利用植物组织培养过程中产生的突变体培育新品种，C正确；
D、植物微型繁殖具有高效、快速的特点，且为无性繁殖，因而能保持亲本的优良性状,，D正确。
故选B。
16. 自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图），通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。
下列相关叙述错误的是（ ）
A. 上述获得蓝色玫瑰的方案中无需转入能调控液泡pH的基因
B. 将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是PmeI和BamHI
C. sfp和idgS基因具有各自的启动子，表达是相互独立进行的
D. 农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上
【答案】B
【解析】【分析】由图可知，将sfp基因插入Ti质粒时若使用的限制酶是PmeI和BamHI，则会将终止子一同切除，故只能用BamHI；将idgS基因插入Ti质粒时可用SpeI和SacI以避免产生的黏性末端环化，增加构建成功的概率。
【详解】A、靛蓝能够稳定显色，不受pH的影响，故本题方案中无需转入能调控液泡pH的基因，A正确；
B、将sfp基因插入Ti质粒时若使用的限制酶是PmeI和BamHI，则会将终止子一同切除，故只能用BamHI，B错误；
C、sfp和idgS基因具有各自的启动子，表达是相互独立进行的，C正确；
D、将目的基因导入植物细胞可采用农杆菌转化法，故农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上，D正确。
故选B。
二．解答题（共4小题，共52分）
17. 植物组织培养狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。
（1）狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都利用了_______技术，三种植株中核遗传物质与甲相同的是_______。
（2）①选择幼嫩的叶用于接种的原因是__________。启动②③过程的关键激素是___________________。MS培养基中的蔗糖的作用是_____________。
（3）正常愈伤组织中几乎没有黄酮类化合物，加入茉莉酸甲酯和水杨酸会明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，且细胞中与黄酮类化合物合成相关的酶含量显著升高，从基因控制生物性状的角度推测，茉莉酸甲酯和水杨酸的作用途径是_____________________________。
（4）⑤需要用___________________处理。通常情况下杂种植株丁不能正常表现出人们所需要的两种植物的优良性状，原因是____________。
【答案】（1） ①. 植物组织培养 ②. 乙、丁 （2） ①. 分裂能力强，分化程度低 ②. 生长素和细胞分裂素 ③. 提供能源，维持渗透压
（3）茉莉酸甲酯和水杨酸诱导了细胞内与黄酮类化合物合成相关酶基因的表达，酶含量升高，催化生成更多的黄酮类化合物
（4） ①. 纤维素酶、果胶酶 ②. 杂种细胞含有两个物种的遗传物质，遗传物质的表达相互干扰
【解析】
【分析】1、植物体的根、茎、叶细胞一般都具有全能性，在一定的营养和激素等条件下， 可以脱分化形成愈伤组织。将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上，就可以诱导其再分化生成胚状体或丛芽，进而发育成完整的小植株。植物组织培养的全过程，证明了分化的植物细胞，仍具有形成完整植株所需要的全部基因。
2、图中①表示将植株甲幼嫩的叶接种到培养基中，使其生长；②表示经过脱分化过程培养出愈伤组织；③表示再分化形成芽、根；④表示对植物的愈伤组织进行诱变处理，促使其发生突变；⑤表示植物体细胞杂交获得原生质体；⑥表示植物体细胞培养。
【小问1详解】
狼爪瓦松植株乙、丙、丁地获得都是经过在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株的过程，都利用了植物组织培养技术；植株丙经历了诱变处理，基因发生了突变，遗传物质与甲植株不同；植株乙、丁形成过程未作诱变处理，遗传物质与甲植株相同。
【小问2详解】
幼嫩的叶有丝分裂旺盛，细胞分裂能力强，分化程度低，有利于植物组织培养，因此①选择幼嫩的叶用于接种；在组织培养中，生长素用于诱导细胞的分裂和根的分化，细胞分裂素的主要作用是促进组织细胞的分裂或从愈伤组织和器官上分化出不定芽，所以启动②脱分化和③再分化的关键激素是生长素和细胞分裂素；MS培养基中的蔗糖的作用是提供能源，维持渗透压。
【小问3详解】
由题意可知，加入茉莉酸甲酯和水杨酸后，愈伤组织细胞中与黄酮类化合物合成相关酶的含量显著升高，明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，说明茉莉酸甲酯和水杨酸诱导了细胞内与黄酮类化合物合成相关酶基因的表达，酶含量升高，催化生成更多的黄酮类化合物。
【小问4详解】
⑤在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体。由于杂种细胞含有两个物种的遗传物质，遗传物质的表达会相互干扰，故通常情况下杂种植株丁不能正常表现出人们所需要的两种植物的优良性状。
【点睛】解答本题的关键在于熟悉植物细胞工程的基本技术及其操作，利用所学知识结合题目信息，在新的情境中合理准确作答。
18. 细胞工程根据操作对象的不同，可分为植物细胞工程和动物细胞工程两大领域。请回答以下相关问题：
Ⅰ.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄-马铃薯杂种植株，其培育过程如下图所示：
（1）番茄细胞和马铃薯细胞融合成功的标志是__________，与图示过程相比，诱导动物细胞融合所特有的方法是__________。
（2）图示步骤③④利用细胞工程技术是__________，该技术的原理是__________。
（3）从步骤③到步骤④需要更换新的培养基，其原因是__________。
Ⅱ.下图是以小鼠甲为实验材料研制抗病毒A的单克隆抗体的实验流程。
（4）实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是__________。
（5）为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于__________，使用该培养基进行细胞培养的结果是__________，图中筛选2所依据的基本原理是__________。
（6）若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有__________和__________。
【答案】（1） ①. 杂种细胞再生出新的细胞壁 ②. 灭活病毒诱导
（2） ① 植物组织培养 ②. 植物细胞具有全能性
（3）脱分化和再分化所需的生长素和细胞分裂素的比例不同
（4）诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞
（5） ①. 选择培养基 ②. 只有杂交瘤细胞可以存活 ③. 抗原与抗体的特异性反应
（6） ①. 将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖 ②. 将杂交瘤细胞在体外培养
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交技术依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。分析题图：图示为植物体细胞杂交过程，其中①是去除细胞壁获得原生质体的过程，该过程常用酶解法；②是再生形成新的细胞壁的过程；③是脱分化过程；④是再分化过程。
2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁；与植物细胞融合方法相比，诱导动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导。
【小问2详解】
植物组织培养原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株，因此，过程③和④利用的是植物组织培养技术。
【小问3详解】
从步骤③到步骤④需要更换新的培养基，其原因是脱分化和再分化所需的生长素和细胞分裂素的比例不同。
【小问4详解】
病毒A相当于抗原，实验前给小鼠甲注射病毒A，是为了诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞。
【小问5详解】
图中筛选1需要用到选择培养基，在该培养基上，未融合的细胞和同种融合的细胞都不能存活，只有杂交瘤细胞可以存活；筛选2是为了获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，该过程要用到抗原抗体杂交，故筛选所依据的原理是抗原与抗体反应具有特异性。
【小问6详解】
获得能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞后，可以在体外培养液中进行培养，或在小鼠的腹腔中进行培养，使杂交瘤细胞大量增殖。
19. 赖氨酸是人体细胞不能合成的必需氨基酸。科学家把某种必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因（R）导入玉米中，使玉米中赖氨酸的含量提高30%。回答下列问题。
（1）利用PCR技术扩增R基因时，需要在一定的缓冲液中才能进行，其中需要加入__________酶和激活该酶所需的 __________。为了特异性扩增R基因序列，需根据 ____________________设计特异性引物。
（2）在构建基因表达载体时，若为了避免R基因和质粒的自连或反向连接，提高重组效率，应该选择的限制酶是 _______________。
（3）随着转化方法的突破，农杆菌侵染玉米这种单子叶植物也取得了成功。科研人员从新鲜的玉米叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养，当农杆菌侵染玉米细胞后，能将 _________上的T﹣DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到 ________________。
（4）检测R基因是否表达的方法是 ___________。
（5）在基因工程中若要培养转基因小鼠，将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是 __________，常用的受体细胞是 ________。
【答案】（1） ①. 耐高温的DNA聚合酶 ②. Mg2+ ③. R基因两端的碱基（核苷酸）序列
（2）PstI、EcRI
（3） ①. Ti质粒 ②. 该细胞的染色体DNA上
（4）抗原﹣抗体杂交技术
（5） ①. 显微注射法 ②. 受精卵
【解析】
【分析】基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程的工具有限制酶、DNA连接酶、基因的载体。
基因工程的基本操作程序：（1）目的基因的获取。（2）基因表达载体的构建。（3）将目的基因导入受体细胞。（4）目的基因的检测和鉴定。
【小问1详解】
利用PCR技术扩增R基因时，需要在一定的缓冲液中才能进行，其中需要加耐高温的DNA聚合酶和激活该酶所需的Mg2+。为了特异性扩增R基因序列，需根据R基因两端的碱基（核苷酸）序列设计特异性引物，其中引物的作用能使DNA聚合酶从引物的3’端链接脱氧核苷酸。
【小问2详解】在构建基因表达载体时，需要用限制酶切割质粒和目的基因，然后用DNA连接酶连接目的基因和质粒。为了避免R基因和质粒的自连或反向连接，应选择两种不同的限制酶去切割质粒和目的基因。图中T-DNA区域只有PstⅠ、EcRⅠ两种限制酶切口，而R基因左边可被PstⅠ切割、右边可被EcRⅠ切割，所以可以选择PstⅠ、EcRⅠ两种限制酶。
【小问3详解】
农杆菌转化法进行时，农杆菌要将Ti质粒上的T-DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到玉米的染色体DNA上。
【小问4详解】
检测R基因是否表达，需要检测R基因控制的蛋白质是否合成，可以用抗原-抗体杂交技术，观察是否产生杂交带。
【小问5详解】
进行转基因动物操作时，需要用显微注射技术将目的基因转入受体细胞，为了发育出转基因小鼠，应选择受精卵作为受体细胞。
20. 濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝。只生活在栽培、圈养条件下即认为该分类单元属于野外灭绝，但在人类活动区会有驯养。近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。回答下列问题：
（1）对A野化单峰骆驼进行超数排卵不能使用性激素，原因是______________。过程①若表示体外受精，则需要将C野化单峰骆驼的精子进行_______处理，才能与处于MⅡ期卵母细胞发生受精作用。
（2）②过程通过______________法去除受体卵子细胞核，其目的是__________________。
（3）③过程使用Ca2+载体激活重构胚，其目的是______________。胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础为____________________________。
【答案】（1） ①. 过量的雌激素会通过负反馈调节抑制卵巢内卵泡的发育 ②. 获能
（2） ①. 显微操作 ②. 使重构胚的核遗传物质完全来自供体B驯养单峰骆驼
（3） ①. 使重构胚完成细胞分裂和发育进程 ②. 受体雌性对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应
【解析】
【分析】据图分析，E后代是试管动物，属于有性生殖，F后代是克隆动物，属于无性生殖，其中①表示体外受精，②表示去掉卵母细胞的细胞核,③表示早期胚胎培养。
【小问1详解】
进行超数排卵，通常需要注射促性腺激素，促使一次有更多的卵泡发育，但不通过直接使用雌激素来直接促进更多的卵泡发育，主要是过量的雌激素会通过负反馈调节抑制卵巢内卵泡的发育。体外受精时，精子需经获能处理。
【小问2详解】
②过程通过显微操作去除受体卵子细胞核，目的是使重组细胞的核遗传物质完全来自供体B驯养单峰骆驼。
【小问3详解】
激活重构胚可使其完成细胞分裂和发育进程。受体雌性对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，因此，胚胎能在D受体雌性体内存活。
【点睛】本题考查试管动物和克隆动物，意在考查学生的理解与表达能力，准确判断题图信息是解题关键。
A. 接种麦曲有利于淀粉水解小分子糖，有利于“酒娘”菌种发酵
B. 煎煮的目的是除去发酵产品中的酵母菌等微生物，利于储藏
C. 发酵过程中“开耙”可适当提供O2，活化酵母
D. 黄酒酿制过程中需定期检测亚硝酸盐含量是否超标
【答案】D
【解析】
【分析】1、酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵（反应简式②），可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28 ℃。
2、二氧化碳不仅是酵母菌无氧呼吸的产物，而且也是酵母菌有氧呼吸的产物，因此不都是在酵母菌细胞质基质中经过无氧呼吸产生的，也有的是在线粒体中经过有氧呼吸第二阶段产生的。
【详解】A、淀粉属于生物大分子物质，水解为小分子糖有利于发酵过程中酵母菌对糖类的利用，A正确；
B、煎煮是进行消毒，除去发酵产品中的酵母菌等微生物，利于储藏，B正确；
C、“开耙”（搅摔）是为了让酵母菌进行有氧呼吸，增加酵母菌的数量，有利于活化酵母，C正确；
D、黄酒酿制过程中不产生亚硝酸盐，不需要检测亚硝酸盐含量，D错误。
故选D。
2. 下列关于微生物培养的叙述，正确的是（ ）
A. 高压蒸汽灭菌后，务必在常压下再打开灭菌锅
B. 纯化培养时，在培养皿皿盖做标记后倒置在恒温培养箱中静置培养
C. 涂布接种时，需要将涂布器浸在酒精后再酒精灯外焰引燃后，立刻涂布
D. 用平板划线法对微生物进行分离计数，也可直接用显微镜对某些微生物计数
【答案】A
【解析】
【分析】高压灭菌锅是利用电热丝加热水产生蒸汽，并能维持一定压力的装置。在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在100KPa的压力下，来这里 全站资源一元不到！试卷源自 每日更新，汇集全国各地小初高最新试卷。锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下维持15~30min就可以很快杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、高压蒸汽灭菌后，待灭菌锅内在常压、温度降至60℃以下后，方可取出锅内物品，以免因温度过高而骤然降温导致玻璃器皿炸裂，A正确；
B、纯化培养时，在培养皿皿底做标记后倒置在恒温培养箱中静置培养，这样方便观察，也能防止冷凝水滴落到培养基表面，B错误；
C、涂布接种时，需要将涂布器浸在酒精后再酒精灯外焰引燃后，待其冷却再进行涂布接种，否则高温会杀死菌种，C错误；
D、可用稀释涂布平板法对微生物进行分离计数，也可直接用显微镜对某些微生物计数，平板划线法能够用于微生物分离，不能用于微生物计数，D错误。
故选A。
3. 下列关于腐乳制作的叙述，错误的是（ ）
A. 毛霉可利用其体内的酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸
B. 吃腐乳时，腐乳外部的“皮”是细菌繁殖形成的
C. 用盐腌制腐乳的过程中，要控制盐的用量，盐的浓度过高会影响口味，过低则不足以抑制杂菌的生长，导致豆腐腐败
D. 其制作过程可以表示为让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制
【答案】B
【解析】
【分析】1、豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪，都是大分子有机物，难以消化、吸收，毛霉等多种微生物分泌的蛋白酶能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶能将脂肪分解成甘油和脂肪酸。2、用盐腌制的目的：①盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质；②加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期制作过程中不会过早酥烂；③有调味作用．酒精能抑制微生物的生长，同时使得腐乳具有独特的香味。
【详解】A、毛霉能够产生蛋白酶，该蛋白酶能够将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，A正确；
B、腐乳外部的“皮”是前期发酵时毛霉等微生物在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝)，对人体无害，B错误；
C、用盐腌制腐乳的过程中，要控制盐的用量，盐的浓度过高会影响口味，过低则不足以抑制杂菌的生长，导致豆腐腐败，C正确；
D、腐乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制，整个过程中应注意避免杂菌污染，D正确。故选B。
4. 限量补充培养法可用于营养缺陷型菌株的检出（如图）。将诱变后的菌株接种在基本培养基上，野生型菌株迅速形成较大菌落，营养缺陷型菌株生长缓慢，不出现菌落或形成微小菌落。基本培养基中补充精氨酸后，营养缺陷型菌株快速生长。下列叙述正确的是（ ）
A. 用紫外线照射可诱导野生型菌株发生定向突变
B. 精氨酸缺陷型菌株缺乏吸收利用精氨酸的能力
C. 培养基中添加精氨酸后抑制了野生型菌株生长
D. 挑取图乙中菌落②分离精氨酸营养缺陷型菌株
【答案】D
【解析】
【分析】将诱变后的菌株接种在基本培养基上，野生型菌株迅速形成较大菌落，营养缺陷型菌株生长缓慢，不出现菌落或形成微小菌落。
题图分析：A表示野生型菌株形成的较大的菌落，B表示营养缺陷型菌株形成的较小的菌落。
【详解】A、用紫外线照射诱导野生型菌株发生的变异是基因突变，是不定向的，A错误；
B、精氨酸缺陷型菌株缺乏将其他物质转化为精氨酸的能力，不是缺乏吸收能力，B错误；
C、对比图甲和图乙并结合题干信息可知，培养基中添加精氨酸后促进了野生型菌株①的生长，C错误；
D、对比甲和乙可知，加入精氨酸后才出现的②是精氨酸营养缺陷型菌株，所以可以选择图乙中菌落②获得精氨酸营养缺陷型菌株，D正确。
故选D。
5. 灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（ ）
A. 为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到培养皿中再进行高压蒸汽灭菌
B. 配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行
C. 为防止蛋白质变性，不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D. 可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
【答案】D
【解析】
【分析】消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到锥形瓶中再进行高压蒸汽灭菌，A错误；
B、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行，配制培养基不需要在酒精灯火焰旁进行，B错误；
C、牛肉膏蛋白胨培养基需要利用湿热灭菌法（例如高压蒸汽灭菌法）进行灭菌，C错误；
D、实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等可以使用干热灭菌法进行灭菌，以防止杂菌污染，D正确。
故选D。
6. 生物兴趣小组成员以西瓜5天龄幼苗子叶（子叶尚未完全展开且颜色为淡绿色）为外植体进行相关研究，得到如图所示实验结果。相关叙述错误的是（ ）
A. 实验开始前应对幼苗子叶和MS培养基进行灭菌处理
B. 与愈伤组织细胞相比，胚状体细胞已经分化
C. 暗处理时间长短对细胞脱分化率影响不大，但影响再分化率
D. 结果表明西瓜子叶诱导形成胚状体的最适暗处理时间是1～2周
【答案】A
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、该实验的外植体(幼苗子叶)需要消毒处理，而不是灭菌，灭菌会使得外植体死亡而无法培养出愈伤组织和胚状体，A错误；
B、愈伤组织是由已分化的细胞变为未分化的细胞，胚状体是由愈伤组织分化而来，因此愈伤组织属于未分化细胞组织，胚状体属于已分化细胞组织，B正确；C、愈伤组织的变化属于脱分化，胚状体的变化属于再分化，从图中可以看出，随着时间的变化愈伤组织的诱导率虽然有一个突变，但随着时间的增加，后期变化较小，而胚状体的诱导率随着时间的增加，呈现先增加后逐渐减少且明显的趋势，C正确；
D、由胚状体诱导率的变化趋势来看，在1-2周，诱导率数据较大，因此西瓜子叶诱导形成胚状体的最适暗处理时间为1-2周说法正确，D正确。
故选A。
7. 下列与“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”探究实践相关的叙述，正确的是（ ）
A. 若要判断选择培养基是否起到选择作用，需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照
B. 将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL蒸馏水的试管中依次等比稀释
C. 将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作
D. 待长成的菌落稳定后，要在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数
【答案】C
【解析】
【分析】1、选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抵制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。
2、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。
【详解】A、若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种了的没有选择作用的细菌通用的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，A错误；
B、将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中依次等比稀释，B错误；
C、将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作，防止高温杀死菌种，C正确；
D、待长成的菌落稳定后，可直接观察，无需在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数，D错误。
故选C。
8. 哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段，可以获得孤雌或孤雄单倍体胚胎干细胞，为研究基因功能提供了理想的细胞模型。下图表示研究人员利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞的方法，下列说法错误的是（ ）
A. 方法一中，研究人员需对实验小鼠注射促性腺激素，从而获得更多的卵母细胞
B. 用SrCl2溶液处理的作用是激活卵母细胞，得到孤雌单倍体胚胎干细胞
C. 获得的孤雄单倍体胚胎干细胞需要去除细胞M中的雌原核
D. 若研究Y染色体上的相关基因功能，则应用方法一得到胚胎干细胞
【答案】D
【解析】
【分析】受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带(透明带反应) →卵细胞膜反应(卵黄膜封闭作用) →卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
【详解】A、方法一中，给小鼠注射促性腺激素可促使其超数排卵，可以获得更多卵母细胞，A正确；
B、用SrCl2溶液处理的作用是激活卵母细胞，使其发育形成孤雌单倍体胚胎干细胞，B正确；
C、方法二雌雄个体杂交获得受精卵M，去除细胞M中的雌原核，可获得孤雄单倍体胚胎干细胞，C正确；
D、若研究Y染色体上相关基因功能，应用方法二得到的孤雄单倍体胚胎干细胞，而方法一得到的是孤雌单倍体胚胎干细胞，D错误。
故选D。
9. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列说法错误的是（ ）
A. 分离、提纯获得微生物细胞本身或其代谢产物是发酵工程的中心环节
B. 发酵工程可用诱变育种、基因工程等方法选育出性状优良的工程菌并进行扩大培养
C. 在发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径
D. 通过发酵工程获得的单细胞蛋白可作为食品添加剂，也可制成微生物饲料
【答案】A【解析】
【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。(1)如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来； (2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，发酵罐培养的环境条件会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物代谢产物的形成，A错误；
B、可通过诱变育种、细胞工程、基因工程等方法选育出性状优良的工程菌并进行扩大培养，从而获得人类有用的产品，B正确；
C、在发酵工程的发酵环节中，发酵条件不仅影响微生物的生长繁殖，也会通过影响酶的活性影响微生物的代谢途径，C正确；
D、单细胞蛋白是指利用发酵工程获得的大量的微生物菌体，可作为食品添加剂，例如用酵母菌生产的单细胞蛋白可作为食品添加剂，甚至制成“人造肉”供人们直接使用；也可制成微生物饲料，例如在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，动物食用后能提高免疫力，D正确。
故选A。
10. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①、②、③分别表示其对应的结果，请据图回答下列说法正确的是
A. 若a是胚胎分割技术，则产生的①中，所有个体的基因型和表型一定相同
B. 若b是体外受精技术，则形成②的过程属于克隆
C. 若c是核移植技术，则形成③的过程体现了动物体细胞也具有全能性
D. ①②③生产过程中的代孕母畜必须与供体母畜同期发情
【答案】D
【解析】【分析】1、动物细胞核移植技术表明动物细胞核具有全能性。
2、体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。
3、胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。
4、表现型=基因型+外界环境。
【详解】A、来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此若a是胚胎分割技术，则产生的①中，所有个体的基因型相同，但表型是基因型与环境共同作用的结果，因此表型不一定相同，A错误；
B、体外受精技术涉及精子和卵细胞形成和结合，属于有性生殖，不属于克隆，B错误；
C、若c是体细胞核移植技术，则③反映了动物体细胞的细胞核具有全能性，C错误；
D、①②③生产过程中的代孕母畜必须与供体母畜同期发情，保证胚胎移植入相同的生理环境，D正确。
故选D。
11. 通过植物细胞工程技术，可利用甲（高产不耐盐）、乙（低产耐盐）两种二倍体植物培育高产耐盐的杂种植株，实验流程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 目的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异导致植株不可育
B. 由④到目的植株需进一步筛选的原因是④中含有高产不耐盐品种
C. ①过程应用了酶的专一性和细胞膜具有流动性原理
D. 为提高纤维素酶和果胶酶的处理效果①过程可将植物细胞置于适当浓度的高渗溶液中
【答案】D
【解析】
【分析】植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。题图分析，①是酶解法去除细胞壁，②是诱导原生质体融合，③是杂种细胞，④是筛选获得的具有耐盐特性的胚状体。
【详解】A、甲、乙是二倍体植株，通过体细胞杂交技术获得的目的植株是四倍体，故目的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异，由于含有同源染色体，目的植株是可育的，A错误；
B、④是筛选高产耐盐植株，④中含有耐盐但不一定高产品种，B错误；
C、①过程利用了酶的专一性，即利用纤维素酶和果胶酶获取原生质体的过程，不涉及膜的流动性，C错误；
D、为提高纤维素酶和果胶酶的处理效果①过程可将植物细胞置于适当浓度的高渗溶液中，这样可以避免原生质体因吸水而被涨破，D正确。
故选D。
12. OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是（ ）
A. 可用抗原﹣抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量
B. 四个基因转录时都以DNA的同一条单链为模板
C. 应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞
D. 四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译
【答案】A
【解析】
【分析】1、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
2、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
3、将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
【详解】A、可用抗原-抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量，杂交带相对量越多，表明目的基因翻译成的蛋白质含量越高，A正确；B、由题图可知，在同一个T-DNA中OsGLO1启动子启动转录的方向与其他三个基因的不同，四个基因转录时不都以DNA的同一条单链为模板，B错误；
C、卡那霉素抗性基因不在T-DNA中，而潮霉素抗性基因在T-DNA中，应选用含潮霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞，C错误；
D、由题意知，利用农杆菌转化法转化水稻，可使目的基因插入到水稻细胞中染色体的DNA上，所以与叶绿体转运肽基因连接的四个基因，在水稻细胞核内进行转录，在核糖体中进行翻译，D错误。
故选A。
13. 科学家发现，蜗牛消化道提取液可用来处理植物细胞的细胞壁，从而得到原生质体便于进行植物体细胞杂交等操作。下列有关说法错误的是（ ）
A. 蜗牛消化道提取液含有纤维素酶和果胶酶，可以去除植物的细胞壁
B. 处理后获得的原生质体可用秋水仙素进行诱导融合
C. 诱导原生质体融合后，只考虑两两融合，会产生三种融合细胞
D. 原生质体融合体现了细胞膜的流动性
【答案】B
【解析】
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法(聚乙二醇)或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导。可根据植物细胞的质壁分离和复原鉴定杂种细胞是否再生细胞壁从而确定原生质体融合是否完成。
【详解】A、蜗牛消化道提取液可用来处理植物细胞的细胞壁，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，蜗牛消化道提取液含有纤维素酶和果胶酶，可以去除植物的细胞壁，A正确；
B、诱导原生质体融合最常用的方法是聚乙二醇，秋水仙素不能诱导融合，B错误；
C、诱导原生质体融合后，只考虑两两融合，会产生三种融合细胞，例如A、B两种细胞的融合，会产生A-A、B-B及A-B三种融合细胞，C正确；
D、原生质体融合依靠细胞膜与细胞膜的融合，体现了细胞膜的流动性，D正确。
故选B。
14. 细胞融合技术应用广泛，图为细胞融合的过程。据图分析，下列叙述错误的是（ ）
A. 若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞，则完成融合的标志为再生出新的细胞壁
B. 若细胞d是杂交瘤细胞，则在选择培养基中筛选后即可大规模培养生产单克隆抗体
C. 将基因型AaBb、aaBb植株的花粉细胞诱导融合（只考虑两两融合）可得到9种基因型细胞
D. 如果a，b分别表示优良奶牛的卵母细胞和精子，则体外受精时，精子必须进行获能处理，而卵母细胞需要培养到MⅡ期才能完成受精
【答案】B
【解析】
【分析】分析图形：图中甲是有性杂交产生的后代，则a、b分别表示精子和卵细胞，d表示受精卵；乙是植物体细胞杂交产生的后代，则a、b表示两种植物细胞，融合前需要用酶解法去掉细胞壁；丙是单克隆抗体，是浆细胞和骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞分泌的。
【详解】A、若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞，则完成融合的标志为融合的原生质体再生出新的细胞壁，A正确；
B、若细胞d是杂交瘤细胞，则在选择性培养基中筛选后，还需要经过抗体阳性检测才能大规模培养生产单克隆抗体，B错误；
C、若a和b分别为基因型AaBb、aaBb植株的花粉细胞，AaBb能产生AB、aB、Ab、ab四种花粉，aaBb能产生aB、ab两种花粉，去壁两两融合可以得到AABB、aaBB、AAbb、aabb、Aabb、AaBb、AaBB、AaBb、aaBb共9种基因型的细胞，C正确；
D、体外受精时，精子必须进行获能处理，卵母细胞需要培养到MⅡ期才成熟，这样两者才能完成受精，D正确。
故选B。
15. 植物细胞工程在农业、医药工业方面有着广泛的应用，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 采用茎尖组织培养技术得到脱毒苗的过程中需要多次更换培养基
B. 细胞产物的工厂化生产提高了单个细胞中次生代谢物的含量
C. 可以利用植物组织培养过程中产生的突变体培育新品种
D. 利用微型繁殖技术可以保持优良品种的遗传特性
【答案】B【解析】
【分析】植物细胞工程技术的应用:植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物组织培养过程中，需要更换培养基，提高生长素的比例有利于生根，提高细胞分裂素的比例有利于芽的生长，A正确；
B、细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高总的细胞次生代谢物的含量，但不是提高单个细胞中次生代谢物的含量，B错误；
C、由于植物组织培养容易受到培养条件和外界压力（如射线、化学物质等)的影响而产生突变，所以常利用植物组织培养过程中产生的突变体培育新品种，C正确；
D、植物微型繁殖具有高效、快速的特点，且为无性繁殖，因而能保持亲本的优良性状,，D正确。
故选B。
16. 自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图），通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。
下列相关叙述错误的是（ ）
A. 上述获得蓝色玫瑰的方案中无需转入能调控液泡pH的基因
B. 将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是PmeI和BamHI
C. sfp和idgS基因具有各自的启动子，表达是相互独立进行的
D. 农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上
【答案】B
【解析】【分析】由图可知，将sfp基因插入Ti质粒时若使用的限制酶是PmeI和BamHI，则会将终止子一同切除，故只能用BamHI；将idgS基因插入Ti质粒时可用SpeI和SacI以避免产生的黏性末端环化，增加构建成功的概率。
【详解】A、靛蓝能够稳定显色，不受pH的影响，故本题方案中无需转入能调控液泡pH的基因，A正确；
B、将sfp基因插入Ti质粒时若使用的限制酶是PmeI和BamHI，则会将终止子一同切除，故只能用BamHI，B错误；
C、sfp和idgS基因具有各自的启动子，表达是相互独立进行的，C正确；
D、将目的基因导入植物细胞可采用农杆菌转化法，故农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上，D正确。
故选B。
二．解答题（共4小题，共52分）
17. 植物组织培养狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。
（1）狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都利用了_______技术，三种植株中核遗传物质与甲相同的是_______。
（2）①选择幼嫩的叶用于接种的原因是__________。启动②③过程的关键激素是___________________。MS培养基中的蔗糖的作用是_____________。
（3）正常愈伤组织中几乎没有黄酮类化合物，加入茉莉酸甲酯和水杨酸会明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，且细胞中与黄酮类化合物合成相关的酶含量显著升高，从基因控制生物性状的角度推测，茉莉酸甲酯和水杨酸的作用途径是_____________________________。
（4）⑤需要用___________________处理。通常情况下杂种植株丁不能正常表现出人们所需要的两种植物的优良性状，原因是____________。
【答案】（1） ①. 植物组织培养 ②. 乙、丁 （2） ①. 分裂能力强，分化程度低 ②. 生长素和细胞分裂素 ③. 提供能源，维持渗透压
（3）茉莉酸甲酯和水杨酸诱导了细胞内与黄酮类化合物合成相关酶基因的表达，酶含量升高，催化生成更多的黄酮类化合物
（4） ①. 纤维素酶、果胶酶 ②. 杂种细胞含有两个物种的遗传物质，遗传物质的表达相互干扰
【解析】
【分析】1、植物体的根、茎、叶细胞一般都具有全能性，在一定的营养和激素等条件下， 可以脱分化形成愈伤组织。将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上，就可以诱导其再分化生成胚状体或丛芽，进而发育成完整的小植株。植物组织培养的全过程，证明了分化的植物细胞，仍具有形成完整植株所需要的全部基因。
2、图中①表示将植株甲幼嫩的叶接种到培养基中，使其生长；②表示经过脱分化过程培养出愈伤组织；③表示再分化形成芽、根；④表示对植物的愈伤组织进行诱变处理，促使其发生突变；⑤表示植物体细胞杂交获得原生质体；⑥表示植物体细胞培养。
【小问1详解】
狼爪瓦松植株乙、丙、丁地获得都是经过在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株的过程，都利用了植物组织培养技术；植株丙经历了诱变处理，基因发生了突变，遗传物质与甲植株不同；植株乙、丁形成过程未作诱变处理，遗传物质与甲植株相同。
【小问2详解】
幼嫩的叶有丝分裂旺盛，细胞分裂能力强，分化程度低，有利于植物组织培养，因此①选择幼嫩的叶用于接种；在组织培养中，生长素用于诱导细胞的分裂和根的分化，细胞分裂素的主要作用是促进组织细胞的分裂或从愈伤组织和器官上分化出不定芽，所以启动②脱分化和③再分化的关键激素是生长素和细胞分裂素；MS培养基中的蔗糖的作用是提供能源，维持渗透压。
【小问3详解】
由题意可知，加入茉莉酸甲酯和水杨酸后，愈伤组织细胞中与黄酮类化合物合成相关酶的含量显著升高，明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，说明茉莉酸甲酯和水杨酸诱导了细胞内与黄酮类化合物合成相关酶基因的表达，酶含量升高，催化生成更多的黄酮类化合物。
【小问4详解】
⑤在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体。由于杂种细胞含有两个物种的遗传物质，遗传物质的表达会相互干扰，故通常情况下杂种植株丁不能正常表现出人们所需要的两种植物的优良性状。
【点睛】解答本题的关键在于熟悉植物细胞工程的基本技术及其操作，利用所学知识结合题目信息，在新的情境中合理准确作答。
18. 细胞工程根据操作对象的不同，可分为植物细胞工程和动物细胞工程两大领域。请回答以下相关问题：
Ⅰ.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄-马铃薯杂种植株，其培育过程如下图所示：
（1）番茄细胞和马铃薯细胞融合成功的标志是__________，与图示过程相比，诱导动物细胞融合所特有的方法是__________。
（2）图示步骤③④利用细胞工程技术是__________，该技术的原理是__________。
（3）从步骤③到步骤④需要更换新的培养基，其原因是__________。
Ⅱ.下图是以小鼠甲为实验材料研制抗病毒A的单克隆抗体的实验流程。
（4）实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是__________。
（5）为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于__________，使用该培养基进行细胞培养的结果是__________，图中筛选2所依据的基本原理是__________。
（6）若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有__________和__________。
【答案】（1） ①. 杂种细胞再生出新的细胞壁 ②. 灭活病毒诱导
（2） ① 植物组织培养 ②. 植物细胞具有全能性
（3）脱分化和再分化所需的生长素和细胞分裂素的比例不同
（4）诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞
（5） ①. 选择培养基 ②. 只有杂交瘤细胞可以存活 ③. 抗原与抗体的特异性反应
（6） ①. 将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖 ②. 将杂交瘤细胞在体外培养
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交技术依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。分析题图：图示为植物体细胞杂交过程，其中①是去除细胞壁获得原生质体的过程，该过程常用酶解法；②是再生形成新的细胞壁的过程；③是脱分化过程；④是再分化过程。
2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁；与植物细胞融合方法相比，诱导动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导。
【小问2详解】
植物组织培养原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株，因此，过程③和④利用的是植物组织培养技术。
【小问3详解】
从步骤③到步骤④需要更换新的培养基，其原因是脱分化和再分化所需的生长素和细胞分裂素的比例不同。
【小问4详解】
病毒A相当于抗原，实验前给小鼠甲注射病毒A，是为了诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞。
【小问5详解】
图中筛选1需要用到选择培养基，在该培养基上，未融合的细胞和同种融合的细胞都不能存活，只有杂交瘤细胞可以存活；筛选2是为了获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，该过程要用到抗原抗体杂交，故筛选所依据的原理是抗原与抗体反应具有特异性。
【小问6详解】
获得能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞后，可以在体外培养液中进行培养，或在小鼠的腹腔中进行培养，使杂交瘤细胞大量增殖。
19. 赖氨酸是人体细胞不能合成的必需氨基酸。科学家把某种必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因（R）导入玉米中，使玉米中赖氨酸的含量提高30%。回答下列问题。
（1）利用PCR技术扩增R基因时，需要在一定的缓冲液中才能进行，其中需要加入__________酶和激活该酶所需的 __________。为了特异性扩增R基因序列，需根据 ____________________设计特异性引物。
（2）在构建基因表达载体时，若为了避免R基因和质粒的自连或反向连接，提高重组效率，应该选择的限制酶是 _______________。
（3）随着转化方法的突破，农杆菌侵染玉米这种单子叶植物也取得了成功。科研人员从新鲜的玉米叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养，当农杆菌侵染玉米细胞后，能将 _________上的T﹣DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到 ________________。
（4）检测R基因是否表达的方法是 ___________。
（5）在基因工程中若要培养转基因小鼠，将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是 __________，常用的受体细胞是 ________。
【答案】（1） ①. 耐高温的DNA聚合酶 ②. Mg2+ ③. R基因两端的碱基（核苷酸）序列
（2）PstI、EcRI
（3） ①. Ti质粒 ②. 该细胞的染色体DNA上
（4）抗原﹣抗体杂交技术
（5） ①. 显微注射法 ②. 受精卵
【解析】
【分析】基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程的工具有限制酶、DNA连接酶、基因的载体。
基因工程的基本操作程序：（1）目的基因的获取。（2）基因表达载体的构建。（3）将目的基因导入受体细胞。（4）目的基因的检测和鉴定。
【小问1详解】
利用PCR技术扩增R基因时，需要在一定的缓冲液中才能进行，其中需要加耐高温的DNA聚合酶和激活该酶所需的Mg2+。为了特异性扩增R基因序列，需根据R基因两端的碱基（核苷酸）序列设计特异性引物，其中引物的作用能使DNA聚合酶从引物的3’端链接脱氧核苷酸。
【小问2详解】在构建基因表达载体时，需要用限制酶切割质粒和目的基因，然后用DNA连接酶连接目的基因和质粒。为了避免R基因和质粒的自连或反向连接，应选择两种不同的限制酶去切割质粒和目的基因。图中T-DNA区域只有PstⅠ、EcRⅠ两种限制酶切口，而R基因左边可被PstⅠ切割、右边可被EcRⅠ切割，所以可以选择PstⅠ、EcRⅠ两种限制酶。
【小问3详解】
农杆菌转化法进行时，农杆菌要将Ti质粒上的T-DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到玉米的染色体DNA上。
【小问4详解】
检测R基因是否表达，需要检测R基因控制的蛋白质是否合成，可以用抗原-抗体杂交技术，观察是否产生杂交带。
【小问5详解】
进行转基因动物操作时，需要用显微注射技术将目的基因转入受体细胞，为了发育出转基因小鼠，应选择受精卵作为受体细胞。
20. 濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝。只生活在栽培、圈养条件下即认为该分类单元属于野外灭绝，但在人类活动区会有驯养。近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。回答下列问题：
（1）对A野化单峰骆驼进行超数排卵不能使用性激素，原因是______________。过程①若表示体外受精，则需要将C野化单峰骆驼的精子进行_______处理，才能与处于MⅡ期卵母细胞发生受精作用。
（2）②过程通过______________法去除受体卵子细胞核，其目的是__________________。
（3）③过程使用Ca2+载体激活重构胚，其目的是______________。胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础为____________________________。
【答案】（1） ①. 过量的雌激素会通过负反馈调节抑制卵巢内卵泡的发育 ②. 获能
（2） ①. 显微操作 ②. 使重构胚的核遗传物质完全来自供体B驯养单峰骆驼
（3） ①. 使重构胚完成细胞分裂和发育进程 ②. 受体雌性对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应
【解析】
【分析】据图分析，E后代是试管动物，属于有性生殖，F后代是克隆动物，属于无性生殖，其中①表示体外受精，②表示去掉卵母细胞的细胞核,③表示早期胚胎培养。
【小问1详解】
进行超数排卵，通常需要注射促性腺激素，促使一次有更多的卵泡发育，但不通过直接使用雌激素来直接促进更多的卵泡发育，主要是过量的雌激素会通过负反馈调节抑制卵巢内卵泡的发育。体外受精时，精子需经获能处理。
【小问2详解】
②过程通过显微操作去除受体卵子细胞核，目的是使重组细胞的核遗传物质完全来自供体B驯养单峰骆驼。
【小问3详解】
激活重构胚可使其完成细胞分裂和发育进程。受体雌性对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，因此，胚胎能在D受体雌性体内存活。
【点睛】本题考查试管动物和克隆动物，意在考查学生的理解与表达能力，准确判断题图信息是解题关键。
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