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山东省烟台市2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题(无答案)
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这是一份山东省烟台市2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题(无答案)，共9页。
注意事项；
1．答题前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1．传统发酵技术大大丰富了食物的品种。酵母菌、毛霉菌、醋酸菌等都是传统发酵技术中的重要菌种。下列说法错误的是
A．家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵
B．果酒发酵瓶内留有一定空间有利于酵母菌的繁殖
C．毛霉能将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸
D．果醋制作过程中出现CO2，说明发酵底物缺少糖源
2．泡菜制作通常是把洗净晾干的蔬菜放入经开水消毒过的泡菜坛中，乳酸菌与酵母菌等多种微生物进行代谢产生乳酸、酒精等物质，赋予了泡菜特殊的风味。泡菜腌制的早期酵母菌代谢活跃，中晚期乳酸菌代谢活跃乳酸积累，其他菌种的代谢被抑制。下列说法错误的是
A．泡菜腌制的全过程需保持密封，以利于菌种的厌氧呼吸
B．酵母菌在中晚期的代谢被抑制的原因是泡菜坛中缺氧
C．泡菜制作过程中冒出气泡是酵母菌等呼吸作用产生的CO2
D．在泡菜坛中加入发酵产生的泡菜汁可以加快发酵进程
3．某种个体较大的细菌不能在固体培养基上生长，需用液体培养基来获得纯培养物。在含该菌种的锥形瓶中各取1mL培养液分别加入若干支盛有9mL培养液的a组平行试管（记作a1、a2、a3、……an）中，在平行试管中各取1mL依次加入若干支盛有9mL培养液的b组平行试管中（a1→b1、a2→b2、a3→b3、……an→bn），重复上述操作（b→c→d→e），培养一段时间后检测各组试管中细菌的生长情况。下列说法错误的是
A．若e组平行试管中只有e3出现了细菌生长，则该试管中可能获得了纯培养物
B．某稀释倍数下有细菌生长的试管所占比例越高，获得纯培养物的概率就越大
C．若d组各平行试管都有细菌生长而e组都没有，则应取d组～e组之间的稀释倍数继续培养
D．不可用显微镜计数某稀释倍数下各试管中生长的细菌来计算锥形瓶中的细菌数量
4．驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合形成杂种细胞，进而培育而成的杂种植株。下列关于驱蚊草培育的说法，正确的是
A．原生质体由细胞膜、液泡膜及两者之间的细胞质组成
B．融合原生质体需放在无菌水中培养，以防杂菌污染
C．驱蚊草将选择性表达天竺葵细胞和香茅草细胞的基因
D．杂种细胞培养成驱蚊草植株的过程利用了染色体数目变异原理
5．紫草宁具有抗菌、消炎、抗肿瘤等活性。图1是悬浮培养紫草细胞制备紫草宁的流程，图2记录了过程②中的一些数据。下列说法错误的是
A．虽然紫草宁具有抗菌作用，但生产时仍需要进行无菌操作
B．可用射线诱变紫草愈伤组织后从突变体中筛选高产细胞株
C．图1中②过程表示悬浮培养，可提高单个细胞中紫草宁的含量
D．由图2可知，紫草细胞的数量和培养时间限制了紫草宁的产量
6．向鼠成纤维细胞中导入Oct3/4、Sx2、Klf4和c-Myc4四种基因，用多能性标志物Fbx15筛选转化后的细胞，可获得诱导多能干细胞（iPS细胞），该种细胞具有与胚胎干细胞（ES）相似的特性。进一步研究发现，除0ct3/4基因外，其余三种基因均可由其他基因代替。下列说法正确的是
A．iPS细胞具有组织特异性，只能分化为特定的细胞
B．可用显微注射法直接将四种基因注入成纤维细胞
C．iPS细胞和ES细胞具有不同的基因组成，但都能体现出细胞的全能性
D．Oct3/4、Sx2、Klf4和c-Myc4四种基因是成纤维细胞转化为iPS细胞的必需基因
7．下图为猪输卵管上皮细胞培养过程示意图。下列说法错误的是
A．甲→乙和丙→丁过程都会发生细胞的分裂和分化
B．丙、丁过程均会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象
C．丙、丁过程中应用松盖培养瓶以保证培养气体需要
D．通过定期更换培养液防止培养过程中有毒物质积累
8．RNAm6A修饰（即RNA某位点的甲基化）可通过提高mRNA结构稳定性来影响猪核移植早期胚胎的发育。在核移植中，核供体细胞的分化程度越高，细胞内甲基转移酶M的表达水平、RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率越低。下列说法错误的是
A．核移植过程通常采用显微操作法去除卵母细胞的细胞核
B．猪胎儿成纤维细胞比胚胎干细胞的RNA修饰水平要低
C．RNAm6A修饰和DNA的甲基化都能影响基因的表达
D．向重组细胞中导入M基因即可提高核移植胚胎的发育能力
9．同尾酶是指一组识别序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶。下图为EcRI、BamHI、BglⅡ和MbI四种限制酶的识别序列及酶切位点。下列说法正确的是
A．BamHI、BglⅡ、MbI属于同尾酶，他们的识别序列相同
B．使用同尾酶构建基因表达载体时，切割位点的选择范围扩大
C．选用两种不同的限制酶切割目的基因，都可以防止目的基因自身环化
D．用DNA连接酶将BamHI和Mbl形成的黏性末端连接后，可被二者重新切开
10．在基因工程中可利用PCR进行体外DNA片段的扩增，PCR产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。下列说法错误的是
A．PCR利用DNA热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚及与引物的结合
B．耐高温的DNA聚合酶需要激活，PCR反应缓冲液中需要添加Mg²+
C．电泳时DNA分子会向它所带电荷相反的电极移动，迁移速率与凝胶浓度、DNA分子大小和构象有关
D．琼脂糖凝胶中的DNA扩增引物分子被核酸染料染色后可在紫外灯下被检测出来
11．巢式PCR是一种使用两对引物扩增完整的片段的PCR。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对为内部引物结合在第一次PCR产物内部，使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增，其过程如下图所示。下列说法错误的是
A．两轮扩增所需引物不同，原料和酶相同
B．DNA的合成总是从子链的5'端向3'延伸与TaqDNA聚合酶的作用有关
C．用内引物进行PCR时，扩增n次后理论上需要2n个引物
D．巢式PCR可增强扩增的特异性
12．控制哺乳动物的性别对于畜牧生产有着十分重要的意义，目前分离精子技术是有效的控制方法，再通过胚胎工程技术就可培育出所需性别的试管动物。下图为试管牛的培育流程。下列说法正确的是
A．过程①的精子要经过获能处理，卵细胞可以直接用于受精
B．过程①在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜会立即发生反应，拒绝其他精子进入
C．经过程①后可以直接进行胚胎移植
D．胚胎移植时受体不会对胚胎发生免疫排斥反应
13．某生物中发现一种基因的表达产物是具有较强抗菌性和溶血性的多肽P1，科研人员预期在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的蛋白质药物。下列说法错误的是
A．预期P1功能的下一步是找到并改变相应的脱氧核苷酸序列
B．对P1进行设计和改造最终必须通过改造基因来完成
C．对表达产物进行检测的原理是抗原抗体的特异性结合
D．研发新的P1的技术属于蛋白质工程
14．胚胎工程理论的发展和技术的应用提高了良种奶牛的繁育速度，保证了我国高品质牛奶的充足供应。如图表示繁殖良种奶牛以及获取胚胎干细胞的流程，下列说法错误的是
A．应选择具有健康的体质和正常的繁殖能力良种母牛作供体
B．进行①胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一
C．可从早期囊胚（b）中的内细胞团细胞获得胚胎干细胞（e）
D．进行②的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
15．现代生物技术在造福人类的同时，也可能引起一系列的安全性和伦理问题。下列说法正确的是
A．整合到油菜叶绿体基因组中的除草剂基因，会通过花粉传入环境，造成基因污染
B．我国对“克隆人”这一技术总体上来说是禁止生殖性克隆，监控和严格审查治疗性克隆
C．设计试管婴儿与普通试管婴儿的区别在于前者在植入前需要对胚胎进行性别鉴定
D．进行基因检测做成基因身份证会造成基因资讯泄露，因此没有必要进行基因检测
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16．影印培养法是指在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落的一种微生物培养方法。野生型大肠杆菌能在基本培养基上生长，营养缺陷型的大肠杆菌需要在添加某些营养物质的完全培养基上才能生长。研究人员用影印培养法对诱变处理后的大肠杆菌进行营养缺陷型突变体筛选的部分流程如下图，1~5为菌落。下列说法正确的是
A．培养基A是基本培养基，培养基B是完全培养基
B．将菌液涂布在培养基表面时可转动培养皿使涂布均匀
C．影印培养操作时，要注意影印的方向不能改变
D．可以从培养基A中挑取菌落3或5进行纯化培养
17．青蒿素是从植物黄花蒿的叶片中所提取的一种代谢产物，而茎及其他部位中的青蒿素含量极其微小。下图为培育黄花蒿植株的过程。下列说法错误的是
A．黄花蒿茎尖需用适宜浓度的酒精和次氯酸钠的混合液消毒
B．过程①②通常要使用适量的生长素和细胞分裂素
C．可通过大量培养愈伤组织以直接获得青蒿素
D．通过图示过程培育的黄花蒿植株具有抗病毒性状
18．下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”—段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药物，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列说法错误的是
A．杂交瘤细胞释放单克隆抗体，体现了细胞膜具有一定的流动性
B．活化阿霉素有选择性杀伤肿瘤细胞的功能
C．仅注射图示“生物导弹”不能对肿瘤细胞起抑制作用
D．使用图示“生物导弹”，可以适当减少阿霉素用量
19．精子进入次级卵母细胞后，次级卵母细胞发育的“开关”即被开启。在雌原核和雄原核接触前去掉雌原核，受精卵还会继续发育，最终获得孤雄胚胎干细胞系，其流程如下图。下列说法正确的是
A．在卵母细胞观察到雌雄原核可以作为受精的标志
B．去掉雌原核也可以用紫外线照射的方法
C．孤雄单倍体胚胎干细胞中的基因和精子中的基因一样
D．单倍体细胞可以作为研究某些隐性基因功能的细胞模型
20．科学家从某植物中提取乙烯受体基因（Ers1），通过基因工程技术将Ers1基因反向连接到质粒中，筛选出转入反义Ers1基因的该种植物，其果实的储藏期将延长，过程如图所示。下列说法错误的是
A．PCR时需在Ers1基因左右两端分别添加XhI、HpaI酶切序列
B．过程②可用氯化钙处理农杆菌，有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中
C．过程③后可在培养基中添加卡那霉素对转化的植物细胞进行筛选
D．可利用抗原—抗体杂交技术检测该植物染色体上是否插入目的基因
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21．（12分）产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。研究人员按照下图所示流程从某土壤样品中筛选得到能高效产脂肪酶的酵母菌菌株。
（1）甲、乙两种培养基所含有的组分有所不同，但都能为酵母菌的生长提供4类营养物质；即__________。图中甲培养基的作用是_________。
（2）实验过程中，通常采用__________方法对培养基进行灭菌。实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证平板上长出的平均菌落数为200个，则应将摇瓶M中的菌液稀释___________倍。
（3）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照使其发生基因突变。将辐照处理后的酵母菌液涂布在以_________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行分离和纯化，获得A、B两突变菌株。分离和纯化培养过程中必须使用固体培养基，理由是_________。
（4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。评价A、B两菌株的相关性能，结果如图。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，依据是_________。
22．（10分）不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体染色质，与未经射线照射的受体融合，所得融合产物含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉能产生抗癌药物紫杉醇，为了培育产生紫杉醇的柴胡，科研人员利用红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了不对称体细胞杂交，获得了不对称红豆杉—柴胡杂种植株。
（1）科研人员剥离红豆杉种子的胚作为外植体经_________（填“灭菌”或“消毒”）后接种于MS．培养基上，诱导形成愈伤组织。选用胚作为外植体的原因是__________。
（2）将红豆杉愈伤组织和柴胡愈伤组织用__________酶分别处理，各自获得有活力的原生质体。用一定剂量的紫外线照射红豆杉原生质体，破坏部分染色体，与未经紫外线照射的柴胡原生质体用化学诱导剂___________诱导融合，得到融合细胞。
（3）科研人员统计了7组染色体数目不大于24条的融合细胞，如下表所示。
科研人员推测组号为___________的细胞为杂种细胞，并进一步采用PCR方法鉴定这几组细胞。红豆杉和柴胡的___________较远，两种植物细胞的染色体间排斥较为明显，应在能够高效合成紫杉醇的杂种细胞中选择__________的核基因含量较低的杂种细胞进行培养。
（4）获得的不对称红豆杉-柴胡杂种植株多数都表现为不育，原因主要是__________。
23．（11分）成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌和结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在的肿瘤标志物。因此抗FGF20单克隆抗体可用于癌症早期诊断筛查。研究者设计如下图流程制备抗FGF20单克隆抗体。
（1）制备抗FGF20单克隆抗体依赖的生物学技术有________（答出两点）。用灭活的FGF20免疫小鼠需要在一定时间内间隔注射3次，其目的是_________。
（2）写出过程①以小鼠脾脏为材料制备单细胞悬液的主要步骤：________。
（3）过程③需要多次筛选，筛选所依据的基本原理是_________。选取的所需细胞群应具备的特点是_________。
（4）体外培养所需细胞后，即可从培养液中提取到抗FGF20单克隆抗体。培养过程中还需要提供95%空气和5%CO2气体环境，分别是为了_________。
24．（8分）研究发现，人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品。科学家将该蛋白基因导入山羊体内使其能够在山羊乳腺细胞中表达，从山羊乳汁中提取人溶菌酶，下图表示培育流程。
（1）获取hLZ基因后构建重组质粒常用到_________酶。为了保证hIZ基因在山羊乳腺中表达，构建基因表达载体时需注意的问题是_________。
（2）胚胎工程最终的技术环节是过程_________（填序号），其实质是_________。
（3）在进行过程④之前，必须获取囊胚的滋养层进行__________，为了获得更多的乳腺生物反应器，可在该时期进行胚胎分割，分割时应注意_________。
（4）为探究冷冻胚胎分割前培养时间对分割后胚胎发育率的影响，每组取60枚同种冷冻胚胎，分别在解冻后培养0、15、30、45、60、90、120min进行分割，将各组半胚和对照组整胚用培养液培养24h，统计胚胎发育率，结果见表。
冷冻胚胎分割前培养时间对胚胎发育率的影响
由表中数据可知，分割造成的损伤会降低胚胎发育率，判断的依据是____________；冷冻胚胎分割前最优培养时间大约是___________分钟。
25．（14分）血管新生在肿瘤发生和发展中起关键作用，为了研究血管生成素（Ang）是否能促进血管生成及作用原理，科学家构建了绿色荧光蛋白（GFP）基因和血管生成素融合基因，将其导入大肠杆菌来生产CFP-Ang融合蛋白，过程如图，字母a~h代表引物，序号①～⑤表示过程。
（1）Ang的cDNA可在细胞中提取mRNA后经_________获得。为了过程②形成正确的GFP-Ang融合基因，在进行过程①（PCR）时需选择正确的引物并在引物_________（填字母）的5'端添加BamHI限制酶识别序列，且添加的识别序列位于GFP基因中终止密码_________（“内侧”或“外侧”）子编码序列的
（2）过程③的目的是__________。此时，为了使融合基因定向插入载体，要选用_______两种限制酶切割融合基因和载体。生产中需要大肠杆菌在某些特定诱导物作用下表达GFP-Ang融合蛋白，则要在载体上构建_________。
（3）以大肠杆菌作为受体细胞的优点有__________（答出两点）。经过程④后的大肠杆菌需培养在含有___________的培养液中，破碎大肠杆菌并提取到发绿色荧光的物质就是GFP-Ang融合蛋白。
（4）鉴定GFP-Ang融合蛋白与天然Ang作用效果差异，科学家取鸡胚分别用缓冲液、缓冲液溶解的天然Ang、缓冲液溶解的GFP-Ang融合蛋白处理，统计鸡胚毛细血管生成情况，结果如下表。
统计结果说明了__________。若进一步观察到绿色荧光分布于毛细血管表面，则说明，Ang发挥作用的方式可能是与细胞表面的__________相结合来实现的。
材料
融合细胞组号
1
2
3
4
5
6
7
染色体条数
9~11
12
12～14
12～16
13
14
24
组别
培养胚胎数/枚
培养24h囊胚数/枚
胚胎发育率/%
对照
60
57
95.00
0min
60
44
73.33
15min
60
32
53.33
30min
60
48
80.00
45min
60
61
85.00
60min
60
41
68.33
90min
60
34
56.67
120min
60
42
70.00
组别
血管数量
缓冲液
7.38
缓冲液溶解的天然Ang
36.5
缓冲液溶解的GFP-Ang融合蛋白
29.94
注意事项；
1．答题前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1．传统发酵技术大大丰富了食物的品种。酵母菌、毛霉菌、醋酸菌等都是传统发酵技术中的重要菌种。下列说法错误的是
A．家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵
B．果酒发酵瓶内留有一定空间有利于酵母菌的繁殖
C．毛霉能将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸
D．果醋制作过程中出现CO2，说明发酵底物缺少糖源
2．泡菜制作通常是把洗净晾干的蔬菜放入经开水消毒过的泡菜坛中，乳酸菌与酵母菌等多种微生物进行代谢产生乳酸、酒精等物质，赋予了泡菜特殊的风味。泡菜腌制的早期酵母菌代谢活跃，中晚期乳酸菌代谢活跃乳酸积累，其他菌种的代谢被抑制。下列说法错误的是
A．泡菜腌制的全过程需保持密封，以利于菌种的厌氧呼吸
B．酵母菌在中晚期的代谢被抑制的原因是泡菜坛中缺氧
C．泡菜制作过程中冒出气泡是酵母菌等呼吸作用产生的CO2
D．在泡菜坛中加入发酵产生的泡菜汁可以加快发酵进程
3．某种个体较大的细菌不能在固体培养基上生长，需用液体培养基来获得纯培养物。在含该菌种的锥形瓶中各取1mL培养液分别加入若干支盛有9mL培养液的a组平行试管（记作a1、a2、a3、……an）中，在平行试管中各取1mL依次加入若干支盛有9mL培养液的b组平行试管中（a1→b1、a2→b2、a3→b3、……an→bn），重复上述操作（b→c→d→e），培养一段时间后检测各组试管中细菌的生长情况。下列说法错误的是
A．若e组平行试管中只有e3出现了细菌生长，则该试管中可能获得了纯培养物
B．某稀释倍数下有细菌生长的试管所占比例越高，获得纯培养物的概率就越大
C．若d组各平行试管都有细菌生长而e组都没有，则应取d组～e组之间的稀释倍数继续培养
D．不可用显微镜计数某稀释倍数下各试管中生长的细菌来计算锥形瓶中的细菌数量
4．驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合形成杂种细胞，进而培育而成的杂种植株。下列关于驱蚊草培育的说法，正确的是
A．原生质体由细胞膜、液泡膜及两者之间的细胞质组成
B．融合原生质体需放在无菌水中培养，以防杂菌污染
C．驱蚊草将选择性表达天竺葵细胞和香茅草细胞的基因
D．杂种细胞培养成驱蚊草植株的过程利用了染色体数目变异原理
5．紫草宁具有抗菌、消炎、抗肿瘤等活性。图1是悬浮培养紫草细胞制备紫草宁的流程，图2记录了过程②中的一些数据。下列说法错误的是
A．虽然紫草宁具有抗菌作用，但生产时仍需要进行无菌操作
B．可用射线诱变紫草愈伤组织后从突变体中筛选高产细胞株
C．图1中②过程表示悬浮培养，可提高单个细胞中紫草宁的含量
D．由图2可知，紫草细胞的数量和培养时间限制了紫草宁的产量
6．向鼠成纤维细胞中导入Oct3/4、Sx2、Klf4和c-Myc4四种基因，用多能性标志物Fbx15筛选转化后的细胞，可获得诱导多能干细胞（iPS细胞），该种细胞具有与胚胎干细胞（ES）相似的特性。进一步研究发现，除0ct3/4基因外，其余三种基因均可由其他基因代替。下列说法正确的是
A．iPS细胞具有组织特异性，只能分化为特定的细胞
B．可用显微注射法直接将四种基因注入成纤维细胞
C．iPS细胞和ES细胞具有不同的基因组成，但都能体现出细胞的全能性
D．Oct3/4、Sx2、Klf4和c-Myc4四种基因是成纤维细胞转化为iPS细胞的必需基因
7．下图为猪输卵管上皮细胞培养过程示意图。下列说法错误的是
A．甲→乙和丙→丁过程都会发生细胞的分裂和分化
B．丙、丁过程均会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象
C．丙、丁过程中应用松盖培养瓶以保证培养气体需要
D．通过定期更换培养液防止培养过程中有毒物质积累
8．RNAm6A修饰（即RNA某位点的甲基化）可通过提高mRNA结构稳定性来影响猪核移植早期胚胎的发育。在核移植中，核供体细胞的分化程度越高，细胞内甲基转移酶M的表达水平、RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率越低。下列说法错误的是
A．核移植过程通常采用显微操作法去除卵母细胞的细胞核
B．猪胎儿成纤维细胞比胚胎干细胞的RNA修饰水平要低
C．RNAm6A修饰和DNA的甲基化都能影响基因的表达
D．向重组细胞中导入M基因即可提高核移植胚胎的发育能力
9．同尾酶是指一组识别序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶。下图为EcRI、BamHI、BglⅡ和MbI四种限制酶的识别序列及酶切位点。下列说法正确的是
A．BamHI、BglⅡ、MbI属于同尾酶，他们的识别序列相同
B．使用同尾酶构建基因表达载体时，切割位点的选择范围扩大
C．选用两种不同的限制酶切割目的基因，都可以防止目的基因自身环化
D．用DNA连接酶将BamHI和Mbl形成的黏性末端连接后，可被二者重新切开
10．在基因工程中可利用PCR进行体外DNA片段的扩增，PCR产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。下列说法错误的是
A．PCR利用DNA热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚及与引物的结合
B．耐高温的DNA聚合酶需要激活，PCR反应缓冲液中需要添加Mg²+
C．电泳时DNA分子会向它所带电荷相反的电极移动，迁移速率与凝胶浓度、DNA分子大小和构象有关
D．琼脂糖凝胶中的DNA扩增引物分子被核酸染料染色后可在紫外灯下被检测出来
11．巢式PCR是一种使用两对引物扩增完整的片段的PCR。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对为内部引物结合在第一次PCR产物内部，使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增，其过程如下图所示。下列说法错误的是
A．两轮扩增所需引物不同，原料和酶相同
B．DNA的合成总是从子链的5'端向3'延伸与TaqDNA聚合酶的作用有关
C．用内引物进行PCR时，扩增n次后理论上需要2n个引物
D．巢式PCR可增强扩增的特异性
12．控制哺乳动物的性别对于畜牧生产有着十分重要的意义，目前分离精子技术是有效的控制方法，再通过胚胎工程技术就可培育出所需性别的试管动物。下图为试管牛的培育流程。下列说法正确的是
A．过程①的精子要经过获能处理，卵细胞可以直接用于受精
B．过程①在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜会立即发生反应，拒绝其他精子进入
C．经过程①后可以直接进行胚胎移植
D．胚胎移植时受体不会对胚胎发生免疫排斥反应
13．某生物中发现一种基因的表达产物是具有较强抗菌性和溶血性的多肽P1，科研人员预期在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的蛋白质药物。下列说法错误的是
A．预期P1功能的下一步是找到并改变相应的脱氧核苷酸序列
B．对P1进行设计和改造最终必须通过改造基因来完成
C．对表达产物进行检测的原理是抗原抗体的特异性结合
D．研发新的P1的技术属于蛋白质工程
14．胚胎工程理论的发展和技术的应用提高了良种奶牛的繁育速度，保证了我国高品质牛奶的充足供应。如图表示繁殖良种奶牛以及获取胚胎干细胞的流程，下列说法错误的是
A．应选择具有健康的体质和正常的繁殖能力良种母牛作供体
B．进行①胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一
C．可从早期囊胚（b）中的内细胞团细胞获得胚胎干细胞（e）
D．进行②的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
15．现代生物技术在造福人类的同时，也可能引起一系列的安全性和伦理问题。下列说法正确的是
A．整合到油菜叶绿体基因组中的除草剂基因，会通过花粉传入环境，造成基因污染
B．我国对“克隆人”这一技术总体上来说是禁止生殖性克隆，监控和严格审查治疗性克隆
C．设计试管婴儿与普通试管婴儿的区别在于前者在植入前需要对胚胎进行性别鉴定
D．进行基因检测做成基因身份证会造成基因资讯泄露，因此没有必要进行基因检测
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16．影印培养法是指在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落的一种微生物培养方法。野生型大肠杆菌能在基本培养基上生长，营养缺陷型的大肠杆菌需要在添加某些营养物质的完全培养基上才能生长。研究人员用影印培养法对诱变处理后的大肠杆菌进行营养缺陷型突变体筛选的部分流程如下图，1~5为菌落。下列说法正确的是
A．培养基A是基本培养基，培养基B是完全培养基
B．将菌液涂布在培养基表面时可转动培养皿使涂布均匀
C．影印培养操作时，要注意影印的方向不能改变
D．可以从培养基A中挑取菌落3或5进行纯化培养
17．青蒿素是从植物黄花蒿的叶片中所提取的一种代谢产物，而茎及其他部位中的青蒿素含量极其微小。下图为培育黄花蒿植株的过程。下列说法错误的是
A．黄花蒿茎尖需用适宜浓度的酒精和次氯酸钠的混合液消毒
B．过程①②通常要使用适量的生长素和细胞分裂素
C．可通过大量培养愈伤组织以直接获得青蒿素
D．通过图示过程培育的黄花蒿植株具有抗病毒性状
18．下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”—段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药物，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列说法错误的是
A．杂交瘤细胞释放单克隆抗体，体现了细胞膜具有一定的流动性
B．活化阿霉素有选择性杀伤肿瘤细胞的功能
C．仅注射图示“生物导弹”不能对肿瘤细胞起抑制作用
D．使用图示“生物导弹”，可以适当减少阿霉素用量
19．精子进入次级卵母细胞后，次级卵母细胞发育的“开关”即被开启。在雌原核和雄原核接触前去掉雌原核，受精卵还会继续发育，最终获得孤雄胚胎干细胞系，其流程如下图。下列说法正确的是
A．在卵母细胞观察到雌雄原核可以作为受精的标志
B．去掉雌原核也可以用紫外线照射的方法
C．孤雄单倍体胚胎干细胞中的基因和精子中的基因一样
D．单倍体细胞可以作为研究某些隐性基因功能的细胞模型
20．科学家从某植物中提取乙烯受体基因（Ers1），通过基因工程技术将Ers1基因反向连接到质粒中，筛选出转入反义Ers1基因的该种植物，其果实的储藏期将延长，过程如图所示。下列说法错误的是
A．PCR时需在Ers1基因左右两端分别添加XhI、HpaI酶切序列
B．过程②可用氯化钙处理农杆菌，有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中
C．过程③后可在培养基中添加卡那霉素对转化的植物细胞进行筛选
D．可利用抗原—抗体杂交技术检测该植物染色体上是否插入目的基因
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21．（12分）产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。研究人员按照下图所示流程从某土壤样品中筛选得到能高效产脂肪酶的酵母菌菌株。
（1）甲、乙两种培养基所含有的组分有所不同，但都能为酵母菌的生长提供4类营养物质；即__________。图中甲培养基的作用是_________。
（2）实验过程中，通常采用__________方法对培养基进行灭菌。实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证平板上长出的平均菌落数为200个，则应将摇瓶M中的菌液稀释___________倍。
（3）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照使其发生基因突变。将辐照处理后的酵母菌液涂布在以_________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行分离和纯化，获得A、B两突变菌株。分离和纯化培养过程中必须使用固体培养基，理由是_________。
（4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。评价A、B两菌株的相关性能，结果如图。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，依据是_________。
22．（10分）不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体染色质，与未经射线照射的受体融合，所得融合产物含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉能产生抗癌药物紫杉醇，为了培育产生紫杉醇的柴胡，科研人员利用红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了不对称体细胞杂交，获得了不对称红豆杉—柴胡杂种植株。
（1）科研人员剥离红豆杉种子的胚作为外植体经_________（填“灭菌”或“消毒”）后接种于MS．培养基上，诱导形成愈伤组织。选用胚作为外植体的原因是__________。
（2）将红豆杉愈伤组织和柴胡愈伤组织用__________酶分别处理，各自获得有活力的原生质体。用一定剂量的紫外线照射红豆杉原生质体，破坏部分染色体，与未经紫外线照射的柴胡原生质体用化学诱导剂___________诱导融合，得到融合细胞。
（3）科研人员统计了7组染色体数目不大于24条的融合细胞，如下表所示。
科研人员推测组号为___________的细胞为杂种细胞，并进一步采用PCR方法鉴定这几组细胞。红豆杉和柴胡的___________较远，两种植物细胞的染色体间排斥较为明显，应在能够高效合成紫杉醇的杂种细胞中选择__________的核基因含量较低的杂种细胞进行培养。
（4）获得的不对称红豆杉-柴胡杂种植株多数都表现为不育，原因主要是__________。
23．（11分）成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌和结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在的肿瘤标志物。因此抗FGF20单克隆抗体可用于癌症早期诊断筛查。研究者设计如下图流程制备抗FGF20单克隆抗体。
（1）制备抗FGF20单克隆抗体依赖的生物学技术有________（答出两点）。用灭活的FGF20免疫小鼠需要在一定时间内间隔注射3次，其目的是_________。
（2）写出过程①以小鼠脾脏为材料制备单细胞悬液的主要步骤：________。
（3）过程③需要多次筛选，筛选所依据的基本原理是_________。选取的所需细胞群应具备的特点是_________。
（4）体外培养所需细胞后，即可从培养液中提取到抗FGF20单克隆抗体。培养过程中还需要提供95%空气和5%CO2气体环境，分别是为了_________。
24．（8分）研究发现，人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品。科学家将该蛋白基因导入山羊体内使其能够在山羊乳腺细胞中表达，从山羊乳汁中提取人溶菌酶，下图表示培育流程。
（1）获取hLZ基因后构建重组质粒常用到_________酶。为了保证hIZ基因在山羊乳腺中表达，构建基因表达载体时需注意的问题是_________。
（2）胚胎工程最终的技术环节是过程_________（填序号），其实质是_________。
（3）在进行过程④之前，必须获取囊胚的滋养层进行__________，为了获得更多的乳腺生物反应器，可在该时期进行胚胎分割，分割时应注意_________。
（4）为探究冷冻胚胎分割前培养时间对分割后胚胎发育率的影响，每组取60枚同种冷冻胚胎，分别在解冻后培养0、15、30、45、60、90、120min进行分割，将各组半胚和对照组整胚用培养液培养24h，统计胚胎发育率，结果见表。
冷冻胚胎分割前培养时间对胚胎发育率的影响
由表中数据可知，分割造成的损伤会降低胚胎发育率，判断的依据是____________；冷冻胚胎分割前最优培养时间大约是___________分钟。
25．（14分）血管新生在肿瘤发生和发展中起关键作用，为了研究血管生成素（Ang）是否能促进血管生成及作用原理，科学家构建了绿色荧光蛋白（GFP）基因和血管生成素融合基因，将其导入大肠杆菌来生产CFP-Ang融合蛋白，过程如图，字母a~h代表引物，序号①～⑤表示过程。
（1）Ang的cDNA可在细胞中提取mRNA后经_________获得。为了过程②形成正确的GFP-Ang融合基因，在进行过程①（PCR）时需选择正确的引物并在引物_________（填字母）的5'端添加BamHI限制酶识别序列，且添加的识别序列位于GFP基因中终止密码_________（“内侧”或“外侧”）子编码序列的
（2）过程③的目的是__________。此时，为了使融合基因定向插入载体，要选用_______两种限制酶切割融合基因和载体。生产中需要大肠杆菌在某些特定诱导物作用下表达GFP-Ang融合蛋白，则要在载体上构建_________。
（3）以大肠杆菌作为受体细胞的优点有__________（答出两点）。经过程④后的大肠杆菌需培养在含有___________的培养液中，破碎大肠杆菌并提取到发绿色荧光的物质就是GFP-Ang融合蛋白。
（4）鉴定GFP-Ang融合蛋白与天然Ang作用效果差异，科学家取鸡胚分别用缓冲液、缓冲液溶解的天然Ang、缓冲液溶解的GFP-Ang融合蛋白处理，统计鸡胚毛细血管生成情况，结果如下表。
统计结果说明了__________。若进一步观察到绿色荧光分布于毛细血管表面，则说明，Ang发挥作用的方式可能是与细胞表面的__________相结合来实现的。
材料
融合细胞组号
1
2
3
4
5
6
7
染色体条数
9~11
12
12～14
12～16
13
14
24
组别
培养胚胎数/枚
培养24h囊胚数/枚
胚胎发育率/%
对照
60
57
95.00
0min
60
44
73.33
15min
60
32
53.33
30min
60
48
80.00
45min
60
61
85.00
60min
60
41
68.33
90min
60
34
56.67
120min
60
42
70.00
组别
血管数量
缓冲液
7.38
缓冲液溶解的天然Ang
36.5
缓冲液溶解的GFP-Ang融合蛋白
29.94
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