河北省大名县第一中学2023-2024学年高二下学期3月月考生物试卷(含答案)

这是一份河北省大名县第一中学2023-2024学年高二下学期3月月考生物试卷(含答案)，共18页。试卷主要包含了单选题，多选题，读图填空题等内容，欢迎下载使用。


一、单选题
1．某同学尝试自己制作泡菜前，查阅资料得知，可以向泡菜坛中加入一些“陈泡菜水”。该同学在泡菜制作过程中，在不同的时间测定了泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是( )
A.不同的腌制时间，泡菜中亚硝酸盐的含量可能相同
B.检测亚硝酸盐含量的目的是为了解乳酸菌的生长状况
C.“陈泡菜水”中含有丰富的乳酸菌，可加快泡菜制作过程
D.加入白酒的目的是抑制杂菌生长，增加醇香，但不能加快发酵进程
2．关于传统发酵中果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作，下列说法正确的是( )
A.制作果酒利用了酵母菌的无氧呼吸产酒精过程
B.制作果醋利用了醋酸杆菌的无氧呼吸产生乙酸过程
C.制作腐乳利用了乳酸菌产生的蛋白酶
D.制作泡菜过程中装八成满是为了有部分空气便于乳酸菌繁殖
3．在一些传统食品的制作过程中，灭菌、消毒、防腐等是控制有害微生物的常用方法。下列说法正确的是( )
A.葡萄制作果酒过程中，葡萄用清水冲洗后需用70%的酒精消毒
B.金华火腿制作过程中盐腌等防腐措施能抑制微生物生长繁殖
C.制作泡菜时泡菜坛要密封，主要目的是避免外界杂菌的污染
D.泡菜腌制过程中，通常用加入抗生素的方法来抑制杂菌
4．利用西柚制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天。下列分析正确的是( )
A.西柚中的葡萄糖是酵母菌发酵的底物，在酵母菌的线粒体中被分解
B.前6天的发酵过程中要注意密封发酵，后5天的发酵过程中要注意通气
C.醋酸杆菌可以将前期产生的乙醇转化为醋酸，此时应适当降低发酵温度
D.果醋制作过程中当缺少糖源时则直接将乙醇转化成乙烯，再将乙烯变为乙酸
5．微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒。下列关于无菌技术的叙述错误的是( )
A.通过煮沸消毒法可以杀死所有病原微生物及其芽孢
B.实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒
C.吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌
D.接种环、试管口通过灼烧灭菌法进行灭菌
6．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的描述正确的是( )
① 等培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板
② 将灭过菌的培养皿放在酒精灯旁的桌面上，左手拔出棉塞
③ 右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰
④ 用左手的拇指和食指打开皿盖
⑤ 右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖
⑥ 等待平板冷却5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上
A.① ② ③ ④B.② ③ ⑤C.④ ⑤ ⑥D.① ② ④ ⑥
7．微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。下列关于酵母菌的纯培养的叙述错误的是( )
A.采用平板划线法和稀释涂布平板法均可分离酵母菌
B.可用湿热灭菌法对培养酵母菌的马铃薯琼脂培养基进行灭菌
C.通过接种环连续蘸取菌液在固体培养基表面划线的操作，可将菌种逐步稀释
D.完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，再将接种后的平板进行培养
8．用固体培养基对大肠杆菌进行纯化培养时，下列实验操作错误的是( )
A.培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质
B.倒平板操作时要左手持培养皿，右手持灭菌后的培养基的锥形瓶
C.稀释涂布时，利用涂布器从盛有菌液的试管中蘸取菌液，进行涂布
D.进行培养前，应在培养皿的皿底上记录菌种、培养时间等
9．野生型大肠杆菌能在基础培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株由于无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长。如图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述正确的是( )
A.A操作的目的是提高基因突变的概率，使其发生定向突变，增加突变株的数量
B.B的正确操作是用接种环蘸取菌液后在②表面涂布来接种菌种
C.图中①②③为完全培养基，培养基一般用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
D.若要获得氨基酸营养缺陷型突变株，可从④中挑取D进行纯化培养
10．发酵工程为人类提供多样的发酵产品。下列关于发酵工程的叙述正确的是( )
A.发酵工程多为厌氧发酵，而传统发酵则多为需氧发酵
B.发酵产物可以是微生物的代谢产物，即单细胞蛋白
C.发酵生产的微生物肥料可能抑制土壤中病原微生物的生长
D.发酵生产的食品添加剂可延长食品保存期，不能食用
11．啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的。下列叙述错误的是( )
A.酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成
B.加大酵母菌种的接种量，可缩短生产发酵周期
C.使用耐热的酿酒酵母，不会降低发酵时冷凝的成本
D.用赤霉素处理大麦，可以使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶
12．如图为培育作物脱毒苗的两条途径。下列有关叙述错误的是( )
A.通过图中两条途径培育脱毒苗的过程均体现了植物细胞的全能性
B.经②处理可使组织中的病毒减少或减弱病毒侵染细胞的能力，脱毒效果更好
C.③过程中一般不需要光照，④过程中每日需要给予适当时间和强度的光照
D.通过图中两条途径培育的脱毒苗都是纯合子，种植脱毒苗可增加作物产量
13．下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是( )
A.菊花组织培养的全过程无菌操作至关重要，所用到的材料、仪器均需灭菌处理
B.培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换
C.为防止杂菌污染，从接种外植体到生成试管苗尽量在同一个锥形瓶内完成
D.组培苗移植之前，需要用流水清洗掉根部的培养基
14．紫草素是从我国传统中药植物紫草中提取出来的一种脂溶性萘醌类化合物。多项研究表明紫草素具有抗炎、免疫抑制作用。下图为紫草素的提取流程图，有关叙述错误的是( )
A.①过程中需要在培养基中加入一定比例的植物激素才能获得愈伤组织
B.紫草素能够从愈伤组织细胞中获得，因此判断紫草素是次生代谢产物
C.在工厂化生产紫草素的过程中，无须培养出完整的紫草植株
D.该流程主要通过促进细胞增殖来提高紫草素的产量
15．樱桃中的槲皮素等酚类化合物具有抗氧化活性。我国已经利用组织培养技术繁育樱桃优良品种，满足人们食用和药用需要。相关叙述正确的是( )
A.应用微型繁殖技术可获得大量樱桃抗毒苗
B.可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体
C.植物组织培养时需加入植物激素赤霉素和细胞分裂素
D.应用樱桃细胞培养可工厂化生产初生代谢产物槲皮素
16．通过细胞培养构建的人造皮肤在治疗大面积烧伤时具有较好的应用前景，下列叙述正确的是( )
A.选择非患者细胞进行培养获得人造皮肤，可以降低免疫排斥的发生
B.细胞培养获得人造皮肤的过程中，可加入纤维素酶处理贴壁的细胞
C.细胞培养时需置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱
D.由于对细胞所需的营养物质未全部研究清楚，培养时通常加入血清
17．动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列有关叙述正确的是( )
A.一般选择幼龄动物的细胞培养，原因是其细胞分化程度低
B.进行细胞传代培养时悬浮培养的细胞直接过滤法收集
C.传代培养前需用胰蛋白酶处理贴壁细胞，制成细胞悬液
D.为保证无菌的环境，需要定期更换培养液，清除代谢物
18．如图为某同学构建的细胞工程知识框架。以下相关说法正确的是( )
A.图中①指植物体细胞杂交，该过程常用灭活的病毒处理两种植物细胞
B.图中②属于分子水平上的生物工程技术
C.动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，依据的原理相同，都能形成杂种细胞和杂种个体
D.用聚乙二醇处理大量混合在一起的两种植物细胞的原生质体，所获得的融合细胞不都具备双亲的遗传特性
19．下列有关细胞工程的叙述错误的是( )
A.选择高度分化的动物体细胞进行培养不利于获得大量细胞
B.选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率
C.植物组织培养过程中形成愈伤组织时需要避光培养
D.用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物细胞原生质体失去了全能性
20．杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等优点。下列有关叙述中，不正确的是( )
A.可用灭活病毒诱导法促进B细胞和骨髓瘤细胞的融合
B.获得所需的杂交瘤细胞须要经过两次筛选
C.在杂交瘤细胞的筛选过程中，需要用到抗原—抗体杂交技术
D.用单克隆抗体诊断肿瘤等疾病时，只能用荧光标记法
二、多选题
二、多选题
21．下列关于传统发酵技术应用的叙述，错误的是( )
A.利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵
B.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵
C.果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反
D.为提高发酵产品的品质，可以加入人工培养的单一菌种
22．刚果红是一种染料，可以与纤维素形成红色复合物，但不能与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生反应，在筛选纤维素分解菌的培养基中加入刚果红染料，观察到如右图所示的几个有透明圈的菌落。据图分析，下列相关叙述正确的是( )

A.图中培养基应该以纤维素为唯一碳源
B.该培养基从物理性质上来看属于液体培养基
C.图中用到的接种方法为稀释涂布平板法
D.菌落③中的菌株降解纤维素的能力相对最强
23．发酵工程是指采用工程技术手段，利用微生物为人类生产有用生物产品的一种技术。下列相关说法正确的是( )
A.杂菌污染可能会使发酵产物被分解，因此培养基和发酵设备都要严格灭菌
B.发酵工程所用的菌种一般为单一菌种，发酵前常需要对菌种进行扩大培养
C.在利用谷氨酸棒状杆菌生成谷氨酸时需将发酵罐内的pH调至中性或酸性
D.若发酵产品为单细胞蛋白，发酵后采用过滤等方法将菌体分离和干燥即可
24．下列关于植物细胞工程的叙述正确的是( )
A.植物组织培养一般先诱导生芽后诱导生根
B.细胞产物的工厂化生产体现了植物细胞的全能性
C.可取马铃薯茎尖进行植物组织培养，获得不带病毒的抗病毒苗
D.植物体细胞杂交包括细胞融合得到杂种细胞和杂种细胞植物组织培养得到杂种植物
25．角膜缘干细胞缺乏症（LSCD）会造成患者严重视力障碍甚至失明。某研究团队将来自捐献者的皮肤细胞编辑为iPS细胞，诱导其分化为所需的角膜细胞并制成细胞薄膜。把细胞薄膜移植给LSCD患者后，细胞薄膜持续不断地生成角膜细胞，患者视力得到恢复且没有出现排斥反应。下列分析错误的是( )
A.iPS细胞的分裂、分化潜能比角膜上皮干细胞低
B.iPS细胞与角膜细胞的基因组成和细胞功能没有区别
C.iPS细胞诱导生成角膜细胞的过程体现了细胞的全能性
D.若移植的新角膜产生其他类型的细胞可导致移植失败
三、读图填空题
26．牛奶是适合微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要用巴氏消毒法消毒，以杀死有害微生物。某小组为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行了如图所示操作。请据图回答下列问题：

(1)图1所示方法为____________，若取最终的牛奶稀释液0.1mL在培养基上进行涂布，应选择的工具是图2中的____________。
(2)理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65、63、64，则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为____________。运用这种方法统计的结果往往较实际值____________（填“大”或“小”），其原因是____________。
(3)接种操作完成后，需将平板倒置放入培养箱中培养，倒置的目的是不仅能防止水分过快挥发，而且可以____________。如果培养基上出现形状、大小、颜色不同的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
(4)要进一步分离纯化菌种，应采用图3中____________（填字母）所示的划线分离操作，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧____________次。

(5)某同学在学习了传统发酵技术的应用后，进行了酸奶制作的实践，制作步骤如下：
①将瓶子（连同盖子）、勺子放在电饭锅中加热煮沸10分钟。
②瓶子稍冷却后，向瓶子中倒入牛奶，再放入电饭锅中沸水浴加热10分钟。
③待牛奶冷却至40℃左右（不烫手）时倒入牛奶量1/5的酸奶作“引子”，用勺子搅拌均匀，拧紧瓶盖。
④将电饭锅温度调至40℃，继续保温7～8h。
酸奶中（作“引子”）的有益菌主要是____________，待牛奶冷却后才能倒入酸奶的原因是____________，将瓶盖拧紧的目的是____________。
27．白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。白菜—甘蓝是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强、易储存等优点，如图为“白菜—甘蓝”的培育过程，请回答下列问题：
(1)为了得到原生质体，需先用_____ 处理白菜和甘蓝的细胞。
(2)植物体细胞杂交依据的生物学原理主要有_______________。
(3)诱导原生质体融合的方法有多种，常用的化学方法是_____ （填写中文名称，写出两种即可），融合完成的标志是_____ 。由杂种细胞得到白菜—甘蓝植株还需经过植物组织培养，其中植物组织培养包括_____ 两个阶段
(4)经花粉直接培育的白菜—甘蓝植株，体细胞的染色体数为_____ 。
(5)植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比的优点是_____ 。
28．非洲猪瘟（ASF）是世界动物卫生组织定义为最危险和最持久的动物疾病之一，以该病毒外壳的p54蛋白为抗原来制备单克隆抗体进行针对性免疫，效果显著。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p54注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗pS4蛋白的单克隆抗体，也可以从该小鼠的血清中直接分离。回答下列有关问题：
(1)实验前将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p54注入小鼠甲体内，该处理的目的是 。
(2)为了得到能产生抗p54蛋白的单克隆抗抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选，图中筛选1所采用的培养基属于 使用该培养基进行细胞培养的结果是 。筛选2对杂交瘤细胞进行 和 ，经过多次筛选，获得施分泌所需抗体的杂交瘤细胞。筛选得到的杂交瘤细胞具备的特点_____ 。
（3）以非洲猪瘟病毒外壳的p54蛋白为抗原来制备单克隆抗体的优点是_______________。
29．科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如图所示)。请结合图示回答下列相关问题：
（1）在进行细胞培养之前，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。
（2）在进行原代培养时，细胞增殖的方式是________。
（3）将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中，去除卵母细胞的细胞核的目的是_____________________。
（4）将重组细胞在培养液中培养成的重构胚移入受体母牛后，该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛，但也不是100%的复制，原因最可能是____________________________。
（5）上述过程中涉及的动物细胞工程技术有________。转基因奶牛克隆成功，说明了动物________具有全能性。
参考答案
1．答案：B
解析：A、酸菜腌制过程中，亚硝酸盐的含量先增加后降低，因此在不同的腌制时间，酸菜中亚硝酸盐的含量可能相同，A正确；B、泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是为了解取食泡菜的最佳时间，B错误；C、泡菜的制作离不开乳酸菌，"陈泡菜水"中含有大量的乳酸菌，C正确；D、加入白酒的目的是抑制杂菌生长和增加醇香，不能促进菌种的生长，也不能加快发酵进行，D正确。故选B。
2．答案：A
解析：制作果酒利用了酵母菌的无氧呼吸产酒精过程,A正确。
3．答案：B
解析：A、发酵瓶需要用70%的酒精消毒，葡萄制作果酒过程中，葡萄用清水冲洗后沥干即可，A错误；
B、金华火腿制作过程中盐腌等防腐措施能抑制微生物生长繁殖，这是因为食盐的主要成分是NaCl，当细胞的盐浓度过高就会导致微生物细胞失水，从而失去活性，B正确；
C、制作泡菜时泡菜坛要密封，主要目的是提供无氧环境，使得乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，C错误；
D、制作泡菜时，泡菜水中含有乳酸菌、硝酸盐还原菌和其他杂菌。乳酸菌可使蔬菜发酵，能有效控制发酵过程，抑制其他菌类和微生物生长，它保存有大量维生素C、L-乳酸菌，使泡好的蔬菜中的营养易被人体吸收利用。盐浓度高以及酒精可抵制杂菌生长，防止泡菜发霉、变质，所以我们在泡菜水中要加盐和白酒来抑制杂菌而非添加抗生素，D错误。
故选B。
4．答案：B
5．答案：A
解析：A、煮沸消毒法不能杀死所有病原微生物及其芽孢，A错误;
B、实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒，以杀死微生物，B正确;
C、吸管和培养皿通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，也可用干热灭菌法进行，C正确;
D、接种环、试管口等实验中频繁使用的常使用灼烧灭菌法，D正确。
6．答案：B
解析：倒平板操作的步骤：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染。
①等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误；②将灭过菌的培养皿放在酒精灯旁的桌面上，左手拔出棉塞，可防止杂菌污染，②正确；③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温可防止杂菌污染，③正确；④用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不能打开皿盖，④错误；⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，并通过酒精灯火焰，⑤正确；⑥等待平板冷却5~10分钟，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误。故选B。
7．答案：C
解析：A、对于微生物进行分离的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；
B、可用湿热灭菌法（通常是高压蒸汽灭菌法）对培养酵母菌的马铃薯琼脂培养基进行灭菌，B正确；
C、通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，该过程中只蘸取一次菌液，C错误；
D、完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板（和一个未接种的平板）倒置培养，D正确。
故选C。
8．答案：C
解析：A、用固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段进行，其中培养基制备的流程是：计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板，A正确； B、倒平板操作时要左手持培养皿，右手持灭菌后的培养基的锥形瓶，B正确； C、稀释涂布平板法操作过程中，应该用微量移液器从盛有菌液的试管中取0.1mL菌液，再用涂布器涂布，C错误； D、进行培养前，应在培养皿的皿底上记录菌种、培养时间等，然后将培养基倒置，D正确。
9．答案：D
解析：A、A操作为紫外线处理，该操作可以提高突变的频率，增加突变株的数量，但无法实现定向突变，A错误；
B、据图分析，B操作是稀释涂布平板分离法，将菌液滴加到培养基表面，再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，B错误；
C、结合题图信息分析可知，野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，而氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，且③中只有部分菌落，故图中①②④为完全培养基，③为基本培养基，C错误；
D、④为完全培养基，③为基本培养基，若要获得氨基酸营养缺陷型突变株，可从④中挑取D（在③中相应位置无菌落）进行纯化培养，D正确。
故选D。
10．答案：C
解析：A、发酵工程多为需氧发酵，如谷氨酸发酵工程、柠檬酸发酵工程等，而传统发酵则多为厌氧发酵，如酿酒、做泡菜等，故A错误;B、发酵产物可以是微生物的代谢产物，如酒精、氨基酸、抗生素、维生素等，也可以是微生物本身，如单细胞蛋白，故B错误;C、发酵生产的微生物肥料中的微生物通过自身生命活动产生丰富的活性物质，这些活性物质可以刺激和调节植物生长发育，改善土壤结构，增加土壤肥力，改善植物营养环境，还可以分解土壤中的有机物质，促进土壤中难溶性物质的溶解，抑制病原微生物的生长和繁殖提高农作物的产量和品质，故C正确;D、发酵生产的食品添加剂可延长食品保存期，如防腐剂，同时也可改善食品品质和色、香、味以及为防腐、保鲜和加工工艺的需要而加入食品中的化合物质或者天然物质，属于可食用的，故D错误。
11．答案：C
解析：A、啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，A正确；B、加大酵母菌的菌种的接种量，可能会使发酵进程加快，发酵时间会缩短，B正确；C、使用耐热的酿酒酵母，能在较高温度下进行发酵，可降低发酵时冷凝的成本，C错误； D、用赤霉素处理大麦，可以使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶，简化了操作程序，节约发酵成本，D正确。
故选C。
12．答案：D
解析：根据图示分析，脱毒苗的培育利用了植物组织培养技术，可体现植物细胞的全能性，A项正确；一定程度的高温处理可使组织中的病毒减少或减弱病毒侵染细胞的能力，脱毒效果更好，B项正确；植物组织培养过程中，诱导愈伤组织期间一般不需要光照，在后续的培养过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照，C项正确；通过图中两条途径培育脱毒苗的繁殖方式均为无性繁殖，脱毒苗的基因型与提供外植体的植物体相同，不一定是纯合子，D项错误。
13．答案：D
解析：A、自然生长茎段的消毒属于外植体消毒不能灭菌，先用70%乙醇，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消毒处理，最后再用无菌水清洗， A错误； B、培养瓶用专用封口膜封口的目的是防止杂菌污染，并不影响气体交换，B错误； C、接种外植体到生成试管苗不能在同一个锥形瓶中完成，因为脱分化和再分化的条件以及培养基都不一样，C错误； D、组培苗需要经过炼苗过程，组培苗移植之前，需要用流水清洗掉根部的培养基，D正确。
故选：D。
14．答案：B
解析：A、①过程表示脱分化过程，需要在培养基中加入一定比例的生长素和细胞分裂素等植物激素才能获得愈伤组织，A正确；
B、在工程技术操作中，可以通过设计让愈伤组织生产次生代谢产物，但愈伤组织中产生的物质不一定是次生代谢产物，因此不能以此来判断紫草素是次生代谢产物，B错误；
C、根据题干信息可知，在工厂化生产紫草素的过程中，只需要把细胞培养到愈伤组织阶段，再扩大培养即可，C正确；
D、依据题图可以发现，该流程主要通过促进细胞增殖，增加产紫草素的细胞数量来提高紫草素的产量，D正确。
故选B。
15．答案：B
16．答案：D
17．答案：C
解析：A、选用幼龄动物的器官或组织进行细胞培养，是因为幼龄动物的器官或组织的分裂能力强，A错误； B、细胞培养中每更换一次培养瓶算是传一代，并不是细胞分裂一次，B错误； C、贴壁细胞会出现相互抑制现象，需用胰蛋白酶处理进行传代培养，C正确； D、为保证无菌、无毒的环境，需要对培养液和培养用具进行灭菌处理及在无菌条件下操作，而不是更换培养液，定期更换培养液，其目的是便于清除代谢物，防止代谢物积累对细胞的毒害，D错误。
18．答案：D
解析：A、分析图示可知,图中①代表的技术手段为植物体细胞杂交,灭活的病毒不能用于植物原生质体融合,A错误;B、图中②为细胞核移植,属于细胞水平上的生物工程技术,B错误;C、动物细胞融合与植物体细胞杂交相比,依据的原理不完全相同,前者的原理是细胞膜的流动性和细胞增殖,后者的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性,前者获得的是杂种细胞,后者获得的是杂种植株,C错误;D、用聚乙二醇处理大量混合在一起的两种植物细胞的原生质体,由于杂种细胞在分裂过程中会出现染色体丢失的现象,因而所获得的融合细胞不都具备双亲的遗传特性,D正确。故选D。
19．答案：D
解析：纤维素酶和果胶酶除去植物细胞的细胞壁,获得的原生质体仍具有全能性,D项错误。
20．答案：D
解析：A、可用灭活病毒诱导法促进B细胞和骨髓瘤细胞的融合，A正确； B、杂交瘤细胞具有既能大量增殖、又能产生抗体的特点，B正确； C、在杂交瘤细胞的筛选过程中，需要经过多次筛选，其中需要用到抗原一抗体杂交技术， C正确； D、用单克隆抗体诊断肿瘤等疾病时，可以使用荧光标记法或同位素标记法，D错误。
21．答案：AC
解析：A、乳酸菌是一种严格的厌氧菌，利用乳酸菌制作酸奶的过程中，应一直处于密闭状态，否则会导致发酵失败，A错误； BD、家庭制作果酒、果醋与腐乳过程中所用的菌种均来源于自然环境，有多种微生物参与发酵过程，所以都不是纯种发酵，会影响产品品质，为提高产品品质，可以加入人工培养的单一菌种，BD正确； C、果酒、果醋制作过程中都有CO2产生，溶液的pH都是逐渐降低，C错误。
故选：AC。
22．答案：AC
解析：A、该培养基应该以纤维素为唯一碳源，A正确；
B、该培养基从物理性质上来看属于固体培养基，B错误；
C、图中用到的接种方法为稀释涂布平板法，C正确；
D、菌落①中透明圈与菌落直径的比值最大，因此①中的菌株降解纤维素能力最强，D错误。
故选AC。
23．答案：ABD
解析：A、杂菌污染可能会使发酵产物被分解，因此培养基和发酵设备都要严格灭菌，A正确；
B、发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种，一旦有杂菌污染，可能号致产量大大下降，发酵前常需要对菌种进行扩大培养，B错误;
C、谷氨酸的发酵生产，在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸：在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N乙酰谷氨酰胺，C错误;
D、单细胞蛋白是通过发酵获得了大量的微生物菌体，发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品，D正确。
故选ABD。
24．答案：AD
25．答案：ABC
解析：A、iPS细胞属于多能干细胞，而角膜上皮干细胞属于专能干细胞，所以IPS细胞的分裂、分化潜能比角膜上皮干细胞高，A错误;
B、IPS细胞与角膜细胞的基因组成相同，都来源于同一个受精卵的分裂和分化，但由于基因的选择性表达，使得它们在功能上出现差异，B错误;
C、细胞的全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整生物体的潜能，IPS细胞诱导生成角膜细胞的过程并未体现了细胞的全能性，C错误;
D、若移植的新角膜没有产生角膜细胞，而是产生其他类型的细胞，患者视力无法恢复，导致移植失败，D正确。
26．答案：(1)稀释涂布平板法；B
(2)6.4×107；小；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
(3)防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染
(4)B；5/五
(5)乳酸菌；防止温度过高而将菌种杀死；乳酸菌是厌氧型细菌，在无氧条件下才能进行发酵
解析：（1）稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。图1所示方法为稀释涂布平板法；A为接种环，划线分离时用，B为涂布器，稀释涂布的时候用于将菌液涂布均匀，C为滴管，D为接种针，划线分离时用，故选B。
（2）培养皿中菌落数分别为65、63、64，因此培养皿中菌落数平均为64个，即0.1mL中含有细菌64个，而这0.1mL是稀释了105后的，因此1mL酸奶中所含细菌数为64×106个，即6.4×107个；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此运用这种方法统计的结果往往较实际值小。
（3）培养基倒入培养皿时还有一定的温度，冷却凝固后形成培养基，为了防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，需将平板倒置放入培养箱中培养。
（4）A、连续划线不易获得单菌落，A错误；
B、从上一次末端开始划线，将菌液不断稀释，可以获得单菌落，进一步分离纯化菌种，B正确；
C、划线时没有从上次划线的地方开始，不利于对菌液进行稀释，C错误；
D、划线时没有从上次划线的地方开始，不利于对菌液进行稀释，D错误。
故选B。
接种前灼烧一次接种环，以使其灭菌，划一次后再进行灼烧一次，一共划了四次，最后将接种环进行灼烧灭菌。故一共五次灼烧。
（5）乳酸菌能产生乳酸，制作酸奶，故酸奶中（作“引子”）的有益菌主要是乳酸菌；要等牛奶冷却后才能倒入酸奶，是为了防止温度过高将酸奶里的菌种杀死。乳酸菌是厌氧型细菌，在无氧条件下才能进行发酵，因此将瓶盖拧紧。
27．答案：(1)纤维素酶、果胶酶
(2)细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
(2)聚乙二醇融合法、高Ca2＋—高pH融合法；形成的杂种细胞再生出新的细胞壁；脱分化和再分化
(3)19；
(4)打破生殖隔离、实现远缘杂交育种，培育植物新品种
28．答案：(1)获得产生针对p54蛋白抗体的B细胞
(2)选择培养基；培养基中只有杂交瘤细胞；克隆化培养；抗体检测
既能迅速大量增殖，又能产生特异性抗体
(3)能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备
29．答案：（1）胰蛋白(或胶原蛋白)
（2）有丝分裂
（3）使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞
（4）生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制；生物的性状还受环境因素的影响
（5）动物细胞核移植、动物细胞培养；体细胞的细胞核
解析：（1）常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织细胞使其分离开来。
（2）在进行原代培养时,细胞以有丝分裂的方式进行增殖,同时表现出贴壁生长和接触抑制的现象。
（3）去除卵母细胞细胞核的目的是使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞。
（4）生物的性状是细胞核基因和细胞质基因共同作用的结果,同时,生物的性状还受环境因素的影响,因此,克隆动物不可能是核供体奶牛100%的复制品。
（5）该克隆动物的培育过程中涉及核移植、动物细胞培养等技术。转基因奶牛克隆成功,说明了高度分化的动物体细胞的细胞核具有全能性。