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宁夏回族自治区石嘴山市平罗县平罗中学2023-2024学年高二下学期4月月考生物试题（原卷版+解析版）
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考试时间：100分钟
一、单选题（1—30题，每小题1分，31—37题，每小题2分，共44分）
1. 在利用香蕉进行DNA粗提取与鉴定实验中，相关叙述错误的是（ ）
A. 研磨前先用液氨冷冻处理香蕉，有利于DNA的释放
B. 香蕉研磨后离心取上清液，加入95%的冷酒精，有利于DNA析出
C. 将出现白色丝状物的溶液倒入离心管中离心，弃上清液取沉淀
D. 将DNA丝状物加入二苯胺试剂，沸水浴加热出现蓝色
【答案】D
【解析】
【分析】DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14ml/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
【详解】A、冷冻研磨可以从各种环境样本中获得高质量的 DNA，研磨前先用液氨冷冻处理香蕉，有利于DNA的释放，A正确；
B、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，香蕉研磨后离心取上清液，加入95%的冷酒精，有利于DNA析出，B正确；
C、将出现白色丝状物（粗提取得到的DNA）的溶液倒入离心管中离心，弃上清液取沉淀，C正确；
D、将DNA丝状物放入物质的量浓度为2ml/L的NaCl溶液中，使其溶解，再加入二苯胺试剂，沸水浴加热出现蓝色，D错误。
故选D。
2. 基因工程、细胞工程都可以克服远缘杂交不亲和的障碍，在农作物新品选育等方面具有广阔的前景和较高的应用价值。下列叙述错误的是（ ）
A. 实验室中将目的基因导入植物细胞采用最多、最有效的方法是显微注射法
B. 农杆菌转化法的原理是 Ti 质粒中的 T-DNA 具有转移到受体细胞并整合到受体细胞 DNA 上的特性
C. 植物体细胞杂交诱导原生质融合时常用聚乙二醇（PEG）做诱导剂
D. 含有目的基因的细胞或融合形成的杂种细胞能培育成植株的理论基础是细胞的全能性
【答案】A
【解析】
【分析】将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
【详解】A、显微注射法是实验室中将目的基因导入动物细胞采用最多、最有效的方法，A错误；
B、农杆菌的Ti质粒存在T-DNA片段，它具有可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上，B正确；
C、常用化学诱导法聚乙二醇（PEG）诱导植物原生质体的融合，C正确；
D、植物组织培养的原理是细胞的全能性，D正确。
故选A。
3. 将基因型为CcDd的水稻的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗甲，对试管苗甲用秋水仙素处理得到植株乙。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 愈伤组织是花粉细胞通过减数分裂后形成的不规则的细胞团
B. 在愈伤组织的形成过程中，必须从培养基中获得水、无机盐和动物血清等物质
C. 为促进花粉细胞分裂生长，需在培养基中加入一定浓度的植物激素
D. 植株乙可能出现的基因型有CD、Cd、cD、cd
【答案】C
【解析】
【分析】植物激素亦称植物天然激素或植物内源激素。是指植物体内产生的一些微量而能调节（促进、抑制）自身生理过程的有机化合物。已知植物体内产生的激素有六大类，即生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯和油菜素甾醇。它们都是些简单的小分子有机化合物，但它们的生理效应却非常复杂、多样。从影响细胞的分裂、伸长、分化到影响植物发芽、生根、开花、结实、性别决定、休眠和脱落等。所以，植物激素对植物的生长发育有重要的调控作用。生长素、赤霉素、细胞分裂素能促进植物生长和发育过程，而脱落酸和乙烯的作用则是抑制植物生长，促进成熟和衰老。
【详解】A、愈伤组织是花粉细胞通过脱分化、有丝分裂后形成的不规则的细胞团，A错误；
B、在愈伤组织的形成过程中，必须从培养基中获得水、无机盐和植物激素等物质，动物血清用于培养动物细胞，植物组织培养不需要血清，B错误；
C、植物组织培养过程，脱分化和再分化过程需要用生长素和细胞分裂素的诱导，所以为促进花粉细胞分裂生长，需在培养基中加入一定浓度的生长素等植物激素，C正确；
D、基因型为CcDd的水稻的花药离体培养形成试管苗甲基因型为CD、Cd、cD、cd，用秋水仙素处理后，染色体数目加倍，所以则植株乙的基因型为CCDD、CCdd、ccDD、ccdd，D错误。
故选C。
4. 中国科学家在广西获得了一块距今2.4万年的古大熊猫化石。将该化石中提取到的线粒体DNA 通过测序分析和比较，发现古大熊猫与现存大熊猫的相关 DNA 序列高度相似，且大熊猫与熊类有共同的远古祖先。下列叙述，不合理的是（ ）
A. 化石证据结合分子生物学分析，可为大熊猫进化提供更可靠的证据
B. 化石中提取的线粒体DNA 通过PCR 进行扩增，作为测序的材料
C. 该研究对获得大熊猫和熊类远古父系祖先的相关信息有直接帮助
D. 造成现存大熊猫与古大熊猫基因差异的根本原因是发生了突变
【答案】C
【解析】
【分析】生物有共同祖先的证据：
(1)化石证据:在研究生物进化的过程中，化石是最重要的、比较全面的证据，化石在地层中出现的先后顺序说明了生物是由简单到复杂、由低等到高等、由水生到陆生逐渐进化而来的。
(2)比较解剖学证据：具有同源器官的生物是由共同祖先演化而来。这些具有共同祖先的生物生活在不同环境中，向着不同的方向进化发展，其结构适应于不同的生活环境，因而产生形态上的差异。
(3)胚胎学证据：人和鱼的胚胎在发育早期都出现鳃裂和尾；人和其它脊椎动物在胚胎发育早期都有彼此相似的阶段。
(4)细胞水平的证据：细胞有许多共同特征，如有能进行代谢、生长和增殖的细胞；细胞有共同的物质基础和结构基础。
(5)分子水平的证据:不同生物的DNA和蛋白质等生物大分子，既有共同点，又存在差异性。
【详解】A、线粒体DNA的测序结果能为生物的进化提供分子水平的证据，不同生物的DNA和蛋白质等生物大分子，既有共同点，又存在差异性，化石证据结合分子生物学分析，可为大熊猫进化提供更可靠的证据，A正确；
A、PCR 技术能在体外对DNA分子进行大量扩增，因此化石中提取的线粒体DNA 通过PCR 进行扩增，能作为测序的材料，B正确；
C、子代线粒体DNA来源于母亲，故该研究对获得大熊猫和熊类远古父系祖先的相关信息没有直接帮助，C错误；
D、突变是生物变异的根本来源，造成现存大熊猫与古大熊猫基因差异的根本原因是发生了突变，D正确。
故选C。
5. 做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ）
A. 高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖
B. 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C. 用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
D. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应立即去挑取菌落
【答案】C
【解析】
【分析】高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板。操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基。
【详解】A、高压灭菌加热结束时，需要等到压力降到零后才能打开排气阀，A错误；
B、倒平板时，用左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（10～20mL）倒入培养皿，立即盖上培养皿的皿盖，而不能打开皿盖放到一边，防止皿盖被杂菌污染，B错误；
C、用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记皿底上，培养时平板需要倒置，C正确；
D、接种环经火焰灭菌后需要冷却后才能挑取菌落，防止高温杀死菌种，D错误。
故选C。
6. 人参皂苷是人参的次级代谢产物，具有增强免疫力、改善心血管功能、抗氧化、抗肿瘤等功能。如图为利用植物细胞培养技术工业化生产人参皂苷的流程。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 过程①不需要光照，细胞不发生基因的选择性表达
B. 可利用培养的动物癌细胞来检测人参皂苷的抗癌活性
C. 人参皂苷属于次级代谢产物，为人参生命活动所必需
D. 过程②利用了细胞分裂的原理，体现了细胞的全能性
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。
【详解】A、过程①为脱分化，不需要光照，细胞发生基因的选择性表达，A错误；
B、分析题意，人参皂苷具有抗肿瘤等功能，可利用培养的动物癌细胞来检测人参皂苷的抗癌活性，B正确；
C、人参皂苷属于次级代谢产物，但不是人参基本生命活动所必需，C错误；
D、细胞全能性是发育为完整植株或分化为其他各种细胞的能力，过程②利用细胞分裂的原理，但未体现细胞具有全能性，D错误。
故选B。
7. 萝卜和甘蓝是亲缘关系较近的两种植物，某研究人员利用植物体细胞杂交技术，以期获得萝卜和甘蓝体细胞杂交植株。下列叙述错误的是（ ）
A. 制备原生质体时常用纤维素酶和果胶酶进行处理
B. 可用离心、PEG、仙台病毒等方法诱导原生质体融合
C. 杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁
D. 杂种细胞经过脱分化、再分化后才能形成杂种植株
【答案】B
【解析】
【分析】进行植物体细胞杂交时先用酶解法去除植物细胞的细胞壁，进行植物原生质体的融合，形成杂种细胞，再通过植物的组织培养将杂种细胞培育成杂种植株。不同种的植物之间具有生殖隔离，该种方法打破了不同种植物间的生殖隔离，克服了远缘杂交不亲和的障碍。
【详解】A、细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，利用纤维素酶和果胶酶去壁后可分离得到原生质体，A正确；
B、诱导植物原生质体融合时，可以采用物理方法（电激、离心、振动等）和化学方法（聚乙二醇PEG），灭活的病毒是诱导动物细胞融合的方法，B错误；
C、细胞壁对于植物细胞具有保护和支持作用，杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁，C正确；
D、杂种细胞经过脱分化（形成愈伤组织）、再分化后才能形成杂种植株，D正确。
故选B。
8. 下列关于植物组织培养的叙述，错误的是（ ）
A. 用于植物组织培养的外植体就是指离体培养的植物器官、组织或细胞
B. 脱分化的实质是通过基因的选择性表达改变细胞的结构和功能
C. 培养基中添加蔗糖的目的只是提供营养物质
D. 进行植物组织培养时，常常需要添加植物激素，但是菊花茎段的组织培养比较容易，可以不必添加植物激素
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。植物组织培养包括脱分化和再分化两个重要的步骤，这两个步骤都需要植物激素诱导，但植物激素的比例不同。
【详解】A、用于植物组织培养的外植体就是指离体培养的植物器官或组织，外植体应选择分裂旺盛的部分，如根尖、茎尖等，A正确；
B、脱分化是由外植体形成愈伤组织的过程，该过程的实质是通过基因的选择性表达改变细胞的结构和功能，B正确；
C、培养基中添加蔗糖的目的是提供营养，同时调节渗透压，维持细胞正常形态，C错误；
D、植物组织培养时，常常需要添加植物激素，但是菊花茎段的组织培养比较容易，可以不必添加植物激素，D正确。
故选C。
9. 如图为哺乳动物早期胚胎发育的过程，下列有关叙述错误的是（ ）
A. Ⅰ时期为原肠胚，该时期的细胞具有发育的全能性
B. 过程a和b比卵裂期胚胎中有机物的含量减少
C. 胚胎移植选择处于Ⅰ或Ⅱ时期的胚胎最易成功
D. 细胞分化从Ⅱ时期开始贯穿于动物的整个生命历程
【答案】A
【解析】
【分析】I表示桑椹（桑葚）胚，含有的所有细胞都是全能细胞，II表示囊胚，含有的内细胞团细胞为全能细胞。
【详解】A、Ⅰ时期为桑椹（桑葚）胚，该时期的细胞具有发育的全能性，A错误；
B、过程a表示卵裂形成桑椹（桑葚）胚，过程b表示由桑椹胚形成囊胚，这两个过程细胞均需要消耗有机物释放能量，故胚胎中有机物的含量均减少，B正确；
C、胚胎移植选择处于Ⅰ桑椹（桑葚）胚或Ⅱ囊胚时期的胚胎最易成功，C正确；
D、细胞分化从Ⅱ囊胚时期开始贯穿于动物的整个生命历程，D正确。
故选A。
10. 我国科学家将外源生长激素基因导入鲤鱼的受精卵并整合到染色体DNA上，培育出转基因鲤鱼。与普通鲤鱼相比，转基因鲤鱼的生长速率加快。下列叙述正确的是（ ）
A. 转基因鲤鱼的外源生长激素基因的表达都在细胞核进行
B. 外源生长激素基因导入鲤鱼受精卵后没有定向改变性状
C. 外源生长激素基因的氢键断裂后利于该基因复制或转录
D. 转基因鲤鱼的外源生长激素基因遗传时不遵循遗传定律
【答案】C
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，该步骤需要限制酶和DNA连接酶。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
【详解】A、基因的表达包括转录和翻译，转录发生在细胞核中，翻译发生在细胞质基质中的核糖体上，A错误；
B、将外源生长激素基因导入鲤鱼受精卵后发现与普通鲤鱼相比，转基因鲤鱼的生长速率加快，说明鲤鱼有定向改变性状，B错误；
C、外源生长激素基因的复制或转录均需要解旋断开氢键，因此外源生长激素基因的氢键断裂后利于该基因复制或转录，C正确；
D、由于转基因鲤鱼的外源生长激素基因整合到染色体DNA上，因此遵循遗传定律，D错误。
故选C。
11. 科技工作者常运用不同的方法获得优良作物品种或种苗，不会引起遗传变异的方法是（ ）
A. 通过嫁接技术得到优质荔枝苗
B. 用γ射线处理大豆种子培育新品种
C. 用二倍体番茄培育四倍体番茄
D. 用杂交技术培育水稻新品种
【答案】A
【解析】
【分析】生物的育种方法有杂交育种、诱变育种、单倍体育种、多倍体育种、基因工程育种和细胞工程育种，这些育种方法均改变了生物的原有性状，其目的是获得符合人类需求的新品种，它们的原理依次为基因重组、基因突变、染色体变异、染色体变异、基因重组和染色体变异；只有无性繁殖技术能保持亲本的优良性状。
【详解】A、通过嫁接技术得到优质荔枝苗的方法是无性繁殖技术，该技术的优势是能保持亲本的优良性状，一般不会引起遗传变异，符合题意，A正确；
B、用γ射线处理大豆种子培育新品种的方法中利用的原理是基因突变，为诱变育种，育种的目的就是要获得符合人类要求的大豆突变，不符合题意，B错误；
C、用二倍体番茄培育四倍体番茄其原理是染色体数目变异，为多倍体育种的方法，不符合题意，C错误；
D、用杂交技术培育水稻新品种其原理是基因重组，为杂交育种的方法，该方法的操作是通过杂交、自交的方法，通过筛选活动符合要求的品种，不符合题意，D错误。
故选A。
12. 下面是植物组织培养过程示意图，相关说法正确的是（ ）
A. 上述植物组织培养的过程依据的生物学原理是植物细胞具有全能性
B. 需要对外植体进行严格的灭菌处理，以防止杂菌污染
C. 外植体若是月季的花药，则图中的①过程需要光照
D. 外植体若是菊花的根尖组织，因细胞中没有叶绿体，故培养成的新植株叶片无色
【答案】A
【解析】
【分析】
1、据图分析，①是脱分化，②③表示再分化，④表示移栽过程。
2、植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株。
【详解】A、植物组织培养依据的生物学原理为细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能，A正确；
B、外植体一般只消毒处理，不灭菌处理，以保持外植体的活性，B错误；
C、外植体若是月季的花药，则图中的①过程是脱分化，不需要光照，C错误；
D、外植体若是菊花的根尖组织，其细胞中虽然没有叶绿体，但其细胞中含有叶绿体形成的相关基因，故培养成的新植株叶片有叶绿体，因此有色，D错误。
故选A。
13. 单个B细胞抗体技术可用于制备高亲和力、高特异性的单抗，其技术流程如下：①康复者单个B淋巴细胞的分离和筛选；②利用RT-PCR获取和扩增抗体基因；③构建基因表达载体；④将抗体基因导入动物细胞；⑤单抗的筛选和鉴定。下列叙述错误的是（ ）
A. 操作①选用单个B淋巴细胞以保证最终获得纯度较高的单抗
B. 操作②使用的PCR反应体系常添加Mg2+以激活DNA聚合酶
C. 操作③常用两种限制酶切割抗体基因和载体以防止其自身环化
D. 操作④前可用Ca2+处理受体细胞促使其主动吸收DNA分子
【答案】D
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、不同的效应B细胞分泌的抗体不同，操作①选用单个B淋巴细胞可以保证最终获得纯度较高的单抗，A正确；
B、PCR反应体系中，常加入Mg2+以激活DNA聚合酶，促进PCR延伸中子链的合成，B正确；
C、为了防止目的基因和载体自身环化或反向连接，常用两种不同的限制酶去同时切割目的基因和载体，C正确；
D、用Ca2+处理细胞，该受体细胞是微生物，需要用Ca2+处理微生物细胞，使其处于感受态，D错误。
故选D。
14. 由C基因编码的C蛋白和V基因编码的V蛋白均能特异性杀死玉米害虫，这两种蛋白的结构和作用原理不同。现利用C—V融合基因和如图所示载体，获得具高抗虫性的转基因玉米。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 构建含有C—V融合基因的载体需要限制酶和DNA连接酶
B. 载体中的目的基因可以通过农杆菌的转化进入玉米细胞
C. 在玉米细胞染色体DNA上检出C—V基因就说明培育成功
D. 以单转C基因玉米为食比以该玉米为食的害虫更易产生抗性
【答案】C
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
(1) 目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法，将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法，将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、基因表达载体的构建方法是先用同种限制酶切割载体和含目的基因的DNA分子，再用DNA连接酶进行连接，因此构建含有C—V融合基因的载体需要限制酶和DNA连接酶，A正确；
B、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。载体中的目的基因可以通过农杆菌的转化进入玉米细胞，B正确；
C、在玉米细胞染色体DNA上检出C—V基因不能说明培育成功，因为融合基因可能不能正常表达，C错误；
D、该玉米具有C-V融合基因具有高抗虫性，与单转C基因玉米相比，此玉米可延缓害虫抗性基因频率增加，即以单转C基因玉米为食比以该玉米为食的害虫更易产生抗性，D正确。
故选C。
15. DNA 是绝大多数生物的遗传物质，在生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成中具有极其重要的作用。下列有关 DNA 的叙述，正确的是（ ）
A. 体内 DNA 复制过程需要限制酶和DNA 连接酶
B. DNA 分子中碱基特定的排列顺序构成了每个 DNA 分子的特异性
C. DNA 分子复制过程中，DNA 聚合酶既能断开氢键也能连接磷酸二酯键
D. 生物体内的DNA 数和基因数不同，构成基因的碱基总数大于构成 DNA 的碱基总数
【答案】B
【解析】
【分析】DNA的双螺旋结构：①DNA分子是由两条反向平行的脱氧核苷酸长链盘旋而成的。②DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接排列在外侧，构成基本骨架，碱基在内侧。③两条链上的碱基通过氢键连接起来，形成碱基对且遵循碱基互补配对原则。
【详解】A、限制酶和DNA连接酶是基因工程中常用的酶，体内DNA复制所需的酶是解旋酶和DNA聚合酶，A错误；
B、不同DNA分子碱基对的排列顺序不同，每个DNA分子的碱基对的排列顺序是特定的，DNA分子中碱基特定的排列顺序构成了每个DNA分子的特异性，B正确；
C、DNA分子复制过程中，DNA聚合酶能连接磷酸二酯键但不能断开氢键，C错误；
D、遗传物质是DNA的生物中，基因是有遗传效应的DNA片段，故生物体内的DNA数和基因数不同，构成基因的碱基总数小于构成DNA的碱基总数，D错误。
故选B。
16. 热环境主要包括陆地热泉和深海热液喷口，高温是限制生命存在的主要因素之一，该环境中同时生存着好氧菌和厌氧菌。下列关于分离高温环境中微生物的操作过程的叙述，正确的是（ ）
A. 为增加热泉样品中耐热微生物的数量可在振荡条件下进行培养
B. 宜利用琼脂固体培养基分离耐热微生物，分离过程中逐渐提高分离温度
C. 热泉样品经过低温保存后，生物多样性可能下降，分离的类群可能减少
D. 利用单一培养基和单一培养条件即可分离出热泉样品中的所有菌群
【答案】C
【解析】
【分析】微生物的分离的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，因为两种方法都能使菌体分散到培养基的表面，但是平板划线法不能确定接种量。
【详解】A、在热泉生活的微生物有好氧菌和厌氧菌两种类型，为增加热泉样品中耐热微生物的数量，可在不同的环境条件下进行培养，以使好氧菌和厌氧菌的数量均有所增加，A错误；
B、琼脂在一定温度下会融化为液体，所以不宜利用琼脂固体培养基分离耐热微生物，B错误；
C、热泉中的微生物具有耐热的特性，某些微生物可能不适应低温的环境条件，样品经过低温保存后，可能会导致部分微生物死亡，从而使生物多样性下降，分离的类群减少，C正确；
D、热泉中的菌群生活条件不一，因此必须用不同的条件进行微生物的分离，利用单一的培养基和培养条件不能分离出热泉样品中的所有菌群，D错误。
故选C。
17. 下列关于质粒的叙述，正确的是（ ）
A. 质粒和真核细胞DNA的基本组成单位不同
B. 质粒的复制过程是在受体细胞外独立进行的
C. 质粒是存在于所有细胞中蛋白质合成的场所
D. 质粒是细胞质中能够自我复制的环状DNA分子
【答案】D
【解析】
【分析】1、常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。）
2、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来；
3、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。
【详解】A、质粒是独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子，组成单位与真核细胞的DNA完全相同，都是脱氧核苷酸，A错误；
B、质粒作为基因工程的载体，可以进入受体细胞进行自我复制，B错误；
C、细胞中蛋白质合成的场所是核糖体，C错误；
D、质粒是细胞质中能够自我复制的环状DNA分子，主要存在于原核细胞中，D正确。
故选D。
18. 限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，以下说法正确的是（ ）
A. 大多数限制酶识别的核苷酸序列由6个核糖核苷酸组成
B. 不同来源的限制酶可能识别相同的序列，甚至有相同的切点
C. DNA连接酶能将单个核苷酸连接到已有的核苷酸片段上
D. E·cliDNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端
【答案】B
【解析】
【分析】基因工程最基本的工具：①基因的“剪刀”---限制酶；基因的“针线”---DNA连接酶；③基因的运载体---质粒、噬菌体、动植物病毒等。
【详解】A、大多数限制酶识别的核苷酸序列由6个脱氧核糖核苷酸组成的，A错误；
B、不同来源的限制酶可能是同一种限制酶，可以识别相同的识别序列，甚至有相同的切点，B正确；
C、DNA连接酶可以连接两个DNA片段，而DNA聚合酶能将单个核苷酸连接到已有的核苷酸片段上，C错误；
D、E·cliDNA连接酶只能连接黏性末端，不能连接平末端，D错误。
故选B。
19. 某同学制作果酒果醋的步骤如下：①将发酵瓶等清洗干净后用酒精消毒；②清洗葡萄并榨汁装入发酵瓶；③将温度控制在18~30℃发酵12d；④打开瓶盖，盖上一层纱布再发酵8d。下列说法错误的是（ ）
A. ①可杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
B. ②葡萄需先用清水冲洗后去枝梗，避免杂菌污染
C. ③每隔一段时间拧松瓶盖一次，及时放气
D. ④需要调高温度至30~35℃，该过程几乎不产生气体
【答案】A
【解析】
【分析】1、果酒和果醋制作过程中的相关实验操作：
（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。
（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。
（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。
（4）发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约13的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18°C～30°C，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行。及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30°C～35°C，时间控制在前7～8d左右，并注意适时通过充气口充气。
【详解】A、①过程将发酵瓶等清洗干净后用酒精消毒，防止污染，但不能杀死物体内外所有的微生物，A错误；
B、材料处理时选用新鲜葡萄先用清水冲洗1-2次，再除去枝梗和腐烂的籽粒，避免杂菌污染，B正确；
C、将温度控制在18°C～30°C进行果酒发酵，并需适时拧松瓶盖放气，C正确；
D、果醋发酵菌种是醋酸菌，为好氧型细菌，最适温度为30~35℃，④需要调高温度至30~35℃，该过程几乎不产生气体，D正确。
故选A。
20. 如图为体细胞克隆猴“中中”和“华华”培育的流程，相关叙述错误的是（ ）
A. 图中的卵子实际上是发育到MⅡ期的卵母细胞
B. ①过程可以通过电融合法使供体细胞与去核的卵母细胞融合，形成重构胚
C. 可用灭活病毒诱导法激活重构胚
D. 中中、华华的性别由成纤维细胞的遗传物质决定
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞核移植技术是将动物的细胞核移入一个去核卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。分析图示可知，①为将纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，②为对重组细胞进行体外培养，发育成新胚胎，再进行③胚胎移植过程，最终获得克隆猴。
【详解】A、图中的卵子实际上是处于减数第二次分裂时期的次级卵母细胞，A正确；
B、①为将纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，去核的卵母细胞与供体细胞通过电融合法融合，供体核进入受体卵母细胞，形成重构胚，B正确；
C、激活重构胚可用电刺激、乙醇、蛋白酶合成抑制剂、Ca2+载体的方法，使其完成细胞分裂和发育过程，C错误；
D、中中、华华是由重组细胞发育而来，其细胞核内的遗传物质来自纤维细胞，因此性别由纤维细胞的遗传物质决定，D正确。
故选C。
21. CD20抗原是一种B细胞分化抗原，可位于前B细胞和成熟B细胞上。CD20抗原基因在95%以上的B细胞性淋巴瘤中表达，而在造血干细胞、浆细胞和其他正常组织细胞中不表达。利妥昔单抗是针对CD20抗原的一种单克隆抗体，其与肿瘤细胞上的CD20抗原特异性结合后可以诱导肿瘤细胞凋亡。分析以上材料，下列叙述错误的是（ ）
A. 利妥昔单抗能特异性识别CD20抗原并发挥作用
B. 利妥昔单抗为肿瘤细胞提供了诱导细胞凋亡的信息
C. 造血干细胞分化为成熟B细胞的过程中，CD20抗原基因进行表达
D. 当受到病原体和相应辅助T细胞表面发生变化的特定分子刺激时B细胞即可活化
【答案】D
【解析】
【分析】单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高、可大量制备。
【详解】A、利妥昔单抗是针对CD20抗原的一种单克隆抗体，抗体具有特异性，所以利妥昔单抗能特异性识别CD20抗原并发挥作用，A正确；
B、利妥昔单抗与肿瘤细胞上的CD20抗原特异性结合后可以诱导肿瘤细胞凋亡，说明利妥昔单抗为肿瘤细胞提供了诱导细胞凋亡的信息，B正确；
C、CD20抗原基因在95%以上的B细胞性淋巴瘤中表达，则造血干细胞分化为成熟B细胞的过程中，CD20抗原基因进行表达，C正确；
D、当受到病原体刺激、相应辅助T细胞表面发生变化的特定分子刺激，以及辅助T细胞分泌的细胞因子的作用下，B细胞活化，D错误。
故选D。
22. 海拉细胞是一种人工培养的具有无限增殖能力的细胞，广泛应用于科学研究，极大程度地推动了医学发展。如图是海拉细胞培养部分过程，下列说法正确的是（ ）
A. 丙和丁的过程不一定会出现细胞接触抑制的现象
B. 甲→乙过程需要用胃蛋白酶或胶原蛋白酶等处理
C. 丙、丁过程中通常会通入O2和CO2的混合气体刺激细胞呼吸
D. 为避免培养过程中的杂菌污染，丙、丁过程中培养瓶盖必须旋紧不漏气
【答案】A
【解析】
【分析】1、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入 培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液 →转入培养液(传代培养) →放入二氧化碳培养箱培养。
2、图示为肾脏上皮细胞培养过程示意图，图中甲表示剪碎肾脏组织块，乙表示制成细胞悬液，丙表示原代培养，丁表示传代培养。
【详解】A、丙表示原代培养，丁表示传代培养，海拉细胞是一种具有无限增殖能力的细胞，其在原代培养和传代培养的过程中不会出现细胞接触抑制的现象，A正确；
B、在动物细胞培养过程中，需要用胶原蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是在多数动物细胞培养液适宜的pH范围内，胃蛋白酶已失去活性，B错误；
C、丙、丁过程中通常会通入95%空气和5%的 CO₂ 的混合气体，前者（O2的主要作用是）维持细胞进行有氧呼吸，后者（CO2的主要作用是）维持培养液适宜的pH，C错误；
D、为避免培养过程中的杂菌污染，保证其气体需要，丙、丁过程中需松动培养瓶盖，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养，D错误。
故选A。
23. 灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（ ）
A. 家庭制作果酒、腐乳必须在无菌条件下进行
B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C. 为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D. 可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
【答案】D
【解析】
【分析】使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。
【详解】A、家庭制作果酒、腐乳不需要在无菌条件下进行，A错误；
B、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物培养基中一般不能加入抗生素，B错误；
C、一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，以防止杂菌污染，C错误；
D、可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌，以防止杂菌污染，D正确。
故选D。
24. 下列关于细胞工程的叙述正确的是（ ）
A. 动物细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质
B. 动物细胞核移植时去核是指去掉卵母细胞中被核膜包被起来的细胞核
C. 植物组织培养脱分化和再分化过程中，前后共需要进行两次接种
D. 植物体细胞杂交过程中常用灭活病毒对植物的原生质体进行诱导融合
【答案】A
【解析】
【分析】（1）由于人们对动物细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分；
（2）减数分裂Ⅱ中期卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物，去核是指去除该复合物；
（3）诱导植物细胞融合的方法有两大类，物理法包括电融合法、离心法等，化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高PH融合法等；诱导动物融合常用的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
【详解】A、由于人们对动物细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，A正确；
B、减数分裂Ⅱ中期卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物，去核是指去除该复合物，B错误；
C、植物组织培养过程中接种3次， 一次诱导愈伤组织， 一次生根， 一次发芽，C错误；
D、诱导植物细胞融合的方法有两大类，物理法包括电融合法、离心法等，化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高PH融合法等，灭活病毒融合法通常用于诱导动物细胞融合，D错误。
故选A。
25. 关于“克隆羊”的叙述合理的是（ ）
A. “克隆羊”的培育过程用到了体外受精、胚胎移植等技术
B. “克隆羊”的遗传物质只来自于一个亲本
C. “克隆羊”的培育过程属于有性生殖
D. “克隆羊”的培育需要用到减数第二次分裂中期的卵母细胞
【答案】D
【解析】
【分析】克隆羊是通过核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等技术形成的，属于无性生殖，其核基因来自供核亲本，而细胞质基因来自受体卵母细胞。
【详解】A、“克隆羊”的培育过程用到了核移植技术，而没有用到体外受精技术，A错误；
B、“克隆羊”的核基因来自供核亲本，而细胞质基因来自受体卵母细胞，B错误；
C、“克隆羊”的培育过程属于无性生殖，C错误；
D、“克隆羊”的培育用到的受体细胞为减数第二次分裂中期的卵母细胞，D正确。
故选D。
26. 玉米（2N=20）的传统育种方式是杂交育种。现代农业中，单倍体育种、诱变育种、 基因工程育种都是玉米育种的重要技术。下列叙述错误的是（ ）
A. 单倍体育种一般需要经过脱分化和再分化过程
B. 诱变育种形成的新性状有可能稳定遗传
C. 基因工程育种能定向改变玉米性状
D. 杂交育种较诱变育种操作简便，一定能快速得到所需新品种
【答案】D
【解析】
【分析】1、杂交育种原理：基因重组（通过基因分离、自由组合或连锁交换，分离出优良性状或使各种优良性状集中在一起）。2、诱变育种原理：基因突变，方法：用物理因素（如X射线、γ射线、紫外线、激光等）或化学因素（如亚硝酸、硫酸二乙脂等）来处理生物，使其在细胞分裂间期DNA复制时发生差错，从而引起基因突变，举例：太空育种、青霉素高产菌株的获得。3、单倍体育种原理：染色体变异，方法与优点：花药离体培养获得单倍体植株，再人工诱导染色体数目加倍，优点 明显缩短育种年限，原因是纯合体自交后代不发生性状分离。4、多倍体育种：原理：染色体变异，方法：最常用的是利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。秋水仙素能抑制有丝分裂时纺缍丝的形成，能得到染色体数目加倍的细胞。如八倍体小黑麦的获得和无籽西瓜的培育成功都是多倍体育种取得的成就。
【详解】A、单倍体育种常用的技术手段是花药离体培养，花药离体培养会经过脱分化、再分化过程，A正确；
B、诱变育种的原理是基因突变，遗传物质发生改变，形成的新性状有可能稳定遗传，B正确；
C、基因工程育种即转基因育种，能定向改变玉米性状，C正确；
D、杂交育种较诱变育种操作简便，但耗时较长，如果是隐性个体可能在F2中能筛选到，若是其它类型可能要耗时更长，因此不能快速得到所需新品种，D错误。
故选D。
27. 通过基因工程技术，可以将抗草甘膦基因导入大豆，培育出抗除草剂作物。下列相关叙述，错误的是（ ）
A. 构建基因表达载体时要用到耐高温的DNA聚合酶和DNA连接酶
B. 可以用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞
C. 培育过程需要借助植物组织培养技术
D. 需要在个体水平上对目的基因进行检测和鉴定
【答案】A
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、构建基因表达载体不需要耐高温的DNA聚合酶，需要的是限制性内切核酸酶和DNA连接酶，A错误；
B、可以用农杆菌转化法将目的基因导入受体植物细胞，B正确；
C、培育出抗除草剂作物培育过程需要借助植物组织培养技术，C正确；
D、在培育过程中需要在个体水平上对目的基因进行检测和鉴定，D正确。
故选A。
28. 下列技术中，英国克隆羊“多利”的产生、“抗虫棉”的培育、“番茄一马铃薯”的创造、单克隆抗体的制备、泡菜的生产，依次是下列哪一项生物技术取得的成果（ ）
①基因工程 ②细胞工程 ③发酵工程
A. ①②②③③B. ②①②②③C. ①②①③③D. ②②①③②
【答案】B
【解析】
【分析】细胞工程包括动物细胞工程和植物细胞工程，动物细胞工程的技术有动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植；植物细胞工程的技术包括植物组织培养技术和植物体细胞融合技术。
【详解】克隆羊“多利”的产生是运用了核移植技术，属于动物细胞工程②；“抗虫棉”是通过转基因技术培育成的，属于基因工程①；“番茄-马铃薯”是通过植物体细胞杂交技术培育出的，属于植物细胞工程②；单克隆抗体的制备是动物细胞融合技术的应用，属于动物细胞工程②；泡菜的生产属于发酵工程③；综上所述顺序为②①②②③，即B正确，ACD错误。
故选B。
29. 实验小组从甲醛含量丰富的工厂活性污泥中筛选出了能快速降解甲醛的菌株W，用于甲醛降解的生物处理，并探究了甲醛浓度对甲醛降解率的影响，实验结果如图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 筛选培养基中的甲醛能为菌株W的生长提供碳源
B. 在350mg·L-1和600 mg·L-1时，菌株W的降解甲醛的量相同
C. 浓度超过750 mg·L-1后，高浓度的甲醛可能会抑制菌株的活性
D. 筛选后培养基在丢弃前可用高压蒸汽锅进行灭菌处理
【答案】B
【解析】
【分析】选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。
【详解】A、甲醛中含有碳元素，可以为菌株W提供碳源，A正确；
B、在甲醛浓度为350mg·L-1和600mg·L-1时，菌株W对甲醛的降解率基本相同，但是降解量未知，B错误；
C、浓度超过750 mg·L-1后，培养基中高浓度的甲醛可能会导致菌株失水，从而影响菌株的活性，C正确；
D、筛选后的培养基在丢弃前可用高压蒸汽锅进行灭菌处理，以免污染环境或感染操作正确，D正确。
故选B。
30. 人们可以利用可遗传变异来改良农作物的性状或对生物进化机制进行科学解释。中国科学院近代物理研究所的科研人员利用重离子辐射诱变育种技术，选育了多种粮食作物的优良突变体。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 人工设置诱变条件可让农作物朝人们需要的方向进行突变
B. 诱变育种过程可能会导致处理材料细胞中发生染色体变异
C. 经诱变育种获得的优良突变体对自然环境的适应能力更强
D. 人为耕种管理的某种农作物种群的基因频率不会发生改变
【答案】B
【解析】
【分析】诱变育种是指在人为的条件下，利用物理、化学等因素，诱发生物体产生突变，从中选择，培育成动植物和微生物的新品种的方法；通常用射线，激光、化学药物处理诱发突变，其典型的优缺点：加速育种，改良性状，但有利个体不多，需大量处理。
【详解】A、诱变育种的原理是突变，突变是不定向的，不能保证让农作物朝人们需要的方向进行突变，A错误；
B、诱变育种过程利用重离子辐射，可能会导致处理材料细胞中发生染色体变异，如可能发生易位或缺失等，B正确；
C、变异是不定向的，经诱变育种获得的优良突变体对自然环境的适应能力不一定更强，C错误；
D、人为耕种管理的某种农作物会选择并保存有利于人类的类型，会使农作物种群的基因频率发生改变，D错误。
故选B。
31. 如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法正确的是（ ）
A. 培育植株①的过程为单倍体育种，获得的植株为纯合子
B. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，未体现细胞的全能性
C. 需要通过植物组织培养技术获得的植株只有①③④
D. 植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0（不考虑基因突变）
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图可知：对植株A的花粉经过离体培养得到的植株①单倍体植株，而后对该单倍体幼苗经秋水仙素处理得到的植物②是纯合二倍体，该过程属于单倍体育种。植株③的获得采用了植物组织培养技术，该植株的获得利用了诱变育种方法。植株④采用了植物组织培养技术，属于细胞工程育种；植株⑤的培育采用了植物体细胞杂交技术。
【详解】A、对植株A（杂合子Aa）的花粉（A或a）经过离体培养得到的植株①单倍体植株（A或a），秋水仙素处理单倍体植株①，获得的植株②（AA或aa）为纯合子，A错误；
B、选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，通过组织培养技术获得植株③，体现了细胞的全能性，B错误；
C、图中需要通过植物组织培养技术获得的植株是①③④⑤，该过程中利用了细胞的全能性，植株②是秋水仙素处理植株①的幼苗得到，没有用到植物组织培养技术，C错误；
D、植株①是通过花药离体培养获得的单倍体植株（A或a），秋水仙素处理得到植株②（AA或aa）；植株③④是通过植物组织培养获得的，其基因型为Aa；植株⑤是通过植物体细胞杂交的方法获得的，其遗传物质是由植株A和植株B组成的，与植株A的基因型不同，因此植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0，D正确。
故选D。
32. 英国首批体内含有三人DNA信息的三亲婴儿已经诞生。三亲婴儿的培育技术过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 给捐献者卵母细胞去除细胞核可以采用显微操作去核技术
B. 培育三亲婴儿是为了避免母亲的线粒体遗传病遗传给孩子
C. 父亲携带的白化病基因的遗传不受三亲婴儿培养技术的影响
D. 三亲婴儿的培育利用了核移植技术，属于无性生殖
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞核移植：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。动物细胞核移植技术的原理是动物细胞核具有全能性。
【详解】A、给捐献者卵母细胞去除细胞核可以采用显微操作去核技术，此时的卵母细胞通常需要培养到减数第二次分裂中期，A正确；
B、培育三亲婴儿是为了避免母亲的线粒体遗传病遗传给孩子，因此只采用了母亲的卵细胞的细胞核，B正确；
C、父亲提供精子，三亲婴儿的培养过程中对精子没有特殊操作，因此父亲携带的白化病基因的遗传不受三亲婴儿培养技术的影响，C正确；
D、三亲婴儿的培育利用了核移植技术，但是经过了精子和卵细胞的融合，子代的遗传物质来自双亲和捐献者，属于有性生殖，D错误。
故选D。
33. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA的菌种，流程图如下。下列叙述正确的是（ ）
A. 步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上
B. 步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐菌的生长越有利
C. 扩大培养所用的培养基应加入琼脂，放置摇床上培养，以便于挑取菌落获得纯化菌株
D. 挑取菌落时，应取多个菌落并分别测定嗜盐菌的PHA含量
【答案】D
【解析】
【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。微生物培养基需要为微生物繁殖提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，此外还要满足微生物对特殊营养物质、pH和O2的需求。培养基按照其物理状态可以分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。液体培养基常应用于工业或生活生产。
【详解】A、PHA是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，要筛选嗜盐细菌，步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误；
B、步骤③培养基浓度过高，会导致菌体失水死亡，不利于嗜盐细菌的生长，B错误；
C、扩大培养应选用液体培养基，液体培养基中无需加入琼脂，C错误；
D、要挑选高产聚羟基脂肪酸酯（PHA）的嗜盐菌，挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，进行比较，D正确。
故选D。
34. 下列关于发酵工程的叙述，错误的是（ ）
A. 培养基和发酵设备都必须经过严格灭菌，发酵过程中适时补充灭菌的培养液和空气
B. 发酵过程中的环境条件既会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物代谢物的形成
C. 通过酵母菌发酵，获得大量菌体，从中提取单细胞蛋白作为动物饲料或食品添加剂
D. 发酵产品包括微生物菌体本身或代谢物，可通过过滤、离心、蒸馏等方法纯化
【答案】C
【解析】
【分析】发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身；产品不同，分离提纯的方法一般不同：①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
【详解】A、培养基和发酵设备都必须经过严格灭菌，以防止杂菌污染导致产量大大下降；发酵过程中适时补充灭菌的培养液和空气，以满足发酵菌种的代谢需求，A正确；
B、发酵过程需要适宜的温度和pH，环境条件既会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物代谢产物的形成，B正确；
C、单细胞蛋白是微生物菌体，所以不需要从获得的菌体中提取，C错误；
D、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身，可通过过滤、离心、蒸馏等方法纯化，D正确。
故选C。
35. CHO细胞是从仓鼠卵巢细胞中分离出来的能无限增殖的细胞。研究发现缺乏二氢叶酸还原酶（dhfr）的CHO细胞在培养基上不能生长，将含目的基因的质粒和含dhfr基因的质粒同时导人缺乏dhfr的CHO细胞，得到能在培养基上生长的CHO细胞（简称M）。dhfr可被氨甲喋呤抑制，dhfr基因能在受体细胞中大量扩增以抵消氨甲喋呤的抑制，若导入受体细胞的dhfr基因与目的基因连在一起，则目的基因也会大量扩增，使CHO细胞高水平表达目标蛋白，且CHO细胞抵消氨甲喋呤的抑制效应越强，目标蛋白的表达水平越高。下列叙述正确的是（ ）
A. 构建重组质粒时常用的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体
B. M中一定发生了目的基因和dhfr基因的重组
C. 通过不断提高培养基中氨甲喋呤的浓度，可筛选出高效表达目标蛋白的细胞
D. 培养目标细胞时，需将其置于含95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中
【答案】C
【解析】
【分析】构建重组质粒时常用工具酶有限制酶（切割目的基因和载体）、DNA连接酶（连接目的基因和载体）和载体。
由题意可知，dhfr可被氨甲喋呤抑制，若氨甲喋呤的浓度过高，可能导致不能dhfr不能表达，进而导致CHO细胞在培养基上不能生长。
【详解】A、构建重组质粒时常用的工具酶有限制酶（切割目的基因和载体）、DNA连接酶（连接目的基因和载体），但载体不属于工具酶，A错误；
B、M中不一定发生目的基因和dhfr基因的重组，可能二者单独表达发挥作用，B错误；
C、由题意可知，dhfr可被氨甲喋呤抑制，dhfr基因能在受体细胞中大量扩增以抵消氨甲喋呤的抑制，则随着培养基中氨甲喋呤的浓度的提高，可筛选出高效表达目标蛋白的细胞，C正确；
D、培养目标细胞时，需将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中，D错误。
故选C。
36. 由于某目的基因酶切后的末端为平末端， 载体E只有产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P 将目的基因接入载体E。据图分析， 下列叙述正确的是（ ）
A. 通过 PCR 扩增获取目的基因是基因工程的核心工作
B. 为了便于该目的基因接入载体E，可用限制酶 EcRV 或SmaI切割载体P
C. 载体P不能作为基因表达载体，是因为其没有表达该目的基因的启动子与终止子
D. 若受体细胞表现出抗性基因的相应性状，表明重组载体成功导入受体细胞
【答案】C
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，不是通过PCR扩增获取目的基因，A错误；
B、由于载体E只有产生黏性末端的酶切位点，要使中间载体P接入载体E，同时防止载体E自身环化，需要用两种限制酶分别切割载体E和中间载体P，据图可知，中间载体P和载体E均含有XhI和PstI酶识别序列，故可选用XhI和PstI酶进行酶切，载体P的这两种酶识别序列中含有EcRV识别位点，并且其切割的为平末端，可以用于连接目的基因，SmaI酶虽然也能切割得到平末端，但是其识别位点没有位于XhI和PstI酶识别位点之间，故不能选择其对中间载体P进行切割，B错误；
C、由图可知，载体P是中间质粒，不含有有表达MT基因的启动子和终止子，C正确；
D、受体细胞表现出抗性基因的相应性状，可能是导入了重组质粒，也可能只导入了空质粒（不含目的基因的质粒），D错误。
故选C。
37. 近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（ ）
A. 胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
B. A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精
C. D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理
D. E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎移植的基本程序：①对供、受体的选择和处理（用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
【详解】A、胚胎工程一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵，A错误；
B、A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才具有受精能力，C的精子获能后才能发生受精，B正确；
C、D受体雌性接受来自动物园亚洲黑熊♀A体内的胚胎，所以必须和动物园亚洲黑熊♀A同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率，而野生亚洲黑熊♀B只需要提供体细胞，所以不需要同期发情处理，C错误；
D、E后代遗传物质来源于A和C，F后代遗传物质状来源于A和B，D错误。
故选B。
二、多选题（每小题3分，少选得1.5分，多选错选不得分，共6分）
38. 如图所示为植物体细胞杂交的流程，两种植物细胞都为二倍体，它们的基因型分别为AABB、ddee。下列叙述正确的是（ ）
A. ①过程常采用的物理法有离心法、电融合法、PEG融合法
B. 过程③应避光培养，防止愈伤组织分化成筛管、维管等
C. 从过程③到过程④需要更换新的培养基主要是因为有害代谢产物积累
D. 杂种植株的基因型为AABBddee
【答案】BD
【解析】
【分析】据图分析，①是诱导原生质体融合的过程；②是再生出新的细胞壁的过程；③是脱分化；④是再分化。
【详解】A、①过程常采用的物理法有离心、振动、电激等，用聚乙二醇作为诱导剂来诱导细胞融合是化学法，A错误；
B、③过程是脱分化的过程，应该避光培养，防止愈伤组织分化成筛管、维管等，B正确；
C、从过程③到过程④是从愈伤组织形成完整植株，需要调整培养基中植物激素的种类和比例，所以更换培养基的目的不是有害代谢产物积累，C错误；
D、杂种植株是由AABB和ddee融合形成的，所以基因型为AABBddee，D正确。
故选BD。
39. 角膜缘干细胞缺乏症（LSCD）会造成患者严重视力障碍甚至失明。某研究团队将来自捐献者的皮肤细胞编辑为iPS细胞，诱导其分化为所需的角膜细胞并制成细胞薄膜。把细胞薄膜移植给LSCD患者后，细胞薄膜持续不断地生成角膜细胞，患者视力得到恢复且没有出现排斥反应。下列分析错误的是（ ）
A. iPS细胞的分裂、分化潜能比角膜上皮干细胞低
B. iPS细胞与角膜细胞的基因组成和细胞功能没有区别
C. iPS细胞诱导生成角膜细胞的过程体现了细胞的全能性
D. 若移植的新角膜产生其他类型的细胞可导致移植失败
【答案】ABC
【解析】
【分析】iPS细胞是人工诱导产生的多能干细胞，其具有分裂和分化的能力，可以诱导分化成多种组织细胞。
【详解】A、iPS细胞属于多能干细胞，而角膜上皮干细胞属于专能干细胞，所以iPS细胞的分裂、分化潜能比角膜上皮干细胞高，A错误；
B、iPS细胞与角膜细胞的基因组成相同，都来源于同一个受精卵的分裂和分化，但由于基因的选择性表达，使得它们在功能上出现差异，B错误；
C、细胞的全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整生物体的潜能，iPS细胞诱导生成角膜细胞的过程并未体现了细胞的全能性，C错误；
D、若移植的新角膜没有产生角膜细胞，而是产生其他类型的细胞，患者视力无法恢复，导致移植失败，D正确；
故选ABC。
三、非选择题（共50分）
40. 大熊猫是我国的国宝。尽管我国政府采取了许多保护措施，但由于大熊猫的繁殖能力低，幼仔成活率低，它的数量仍然很少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。回答下列问题：
（1）动物细胞工程常用的技术包括动物细胞核移植、____和____等，其中____是动物细胞工程的基础。
（2）哺乳动物核移植可以分为____和体细胞核移植，后者难度明显高于前者，原因是____。
（3）利用体细胞核移植技术培育克隆大熊猫，并不是对体细胞供体动物进行100％的复制，原因是____。
【答案】（1） ①. 动物细胞培养 ②. 动物细胞融合（动物细胞核移植等） ③. 动物细胞培养
（2） ①. 胚胎细胞核移植 ②. 动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难
（3）克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但其细胞核外的DNA同时来自核供体细胞和受体卵母细胞
【解析】
【分析】动物细胞核移植：是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成一个新的个体。用核移植方法得到的动物称为克隆动物。
【小问1详解】
动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
【小问2详解】
动物细胞核移植技术是将动物的一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术，哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，后者难度明显高于前者，原因是动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。
【小问3详解】
利用体细胞核移植技术培育克隆大熊猫，并不是对体细胞供体动物进行100％的复制，原因是克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但其细胞核外的DNA同时来自核供体细胞和受体卵母细胞。
41. 抗凝血酶Ⅲ是一种药用蛋白，对预防和治疗静脉血栓、心肌梗死、脑血管病变具有重要作用。为了提高抗凝血酶Ⅲ的产量，科研人员设计利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备抗凝血酶Ⅲ，并获得了成功。制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程如图1所示。回答下列问题：
（1）获取了抗凝血酶Ⅲ基因后，需要通过PCR技术对该基因进行扩增，扩增的原理是____，扩增抗凝血酶Ⅲ基因的过程中一般不需要使用解旋酶，原因是____。
（2）图1过程③在基因工程操作步骤中属于____，切割质粒DNA的工具酶是____，能将特定部位的两个核苷酸之间的____断开。操作工程中需要将抗凝血酶Ⅲ基因插入到启动子与____之间，其中启动子的作用是____。
（3）获取重组质粒后，将重组质粒导入受精卵。从崂山奶山羊A的卵巢中获取卵子和从崂山奶山羊B的睾丸中获取精子，其中精子要进行____处理才具备受精的能力。图1中步骤④常用的方法是____。
【答案】（1） ①. DNA双链复制 ②. PCR扩增过程中，当温度为90-95℃时，DNA变性解开双链
（2） ①. 基因表达载体的构建 ②. 限制酶 ③. 磷酸二酯键 ④. 终止子 ⑤. 作为RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动基因转录出mRNA
（3） ①. 获能 ②. 显微注射
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【小问1详解】
PCR是一项体外扩增DNA的技术，其原理是DNA的半保留复制；PCR扩增过程中，当温度为90＞95℃时，DNA解链，故一般不需要使用解旋酶。
【小问2详解】
过程③是将抗凝血酶Ⅲ基因与质粒连接到一起，在基因工程操作步骤中属于基因表达载体的构建，切割质粒DNA的工具酶是限制酶，能将特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。为了让目的基因正常表达，操作工程中需要将抗凝血酶Ⅲ基因插入到启动子与终止子之间，其中启动子的作用是作为RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动基因转录出mRNA 。
【小问3详解】
体外受精时，精子需要获能之后才能受精；图1中步骤④是将重组质粒导入到动物受精卵，常用的方法是显微注射技术。
42. 如图是科学家通过不同方法培育优良种牛的过程，其中①～⑤表示操作过程。请回答以下问题：
（1）哺乳动物体内受精的场所是____。图中①过程中防止多精入卵的两道屏障依次为____、____。
（2）③过程是____，胚胎发育到____阶段，可做胚胎移植。
（3）图中b、c分别代表囊胚的____、____，图中c将来发育成____。
（4）图中由一个囊胚经④过程得到的B、C牛，则④过程表示____，由一个囊胚经④过程得到的B、C牛性别相同的概率为____，可以取囊胚的滋养层细胞做____，鉴定性别。
【答案】（1） ①. 输卵管 ②. 透明带反应 ③. 卵细胞膜反应
（2） ①. 早期胚胎培养 ②. 桑葚胚或囊胚
（3） ①. 囊胚腔 ②. 内细胞团 ③. 胎儿的各种组织
（4） ①. 胚胎分割 ②. 100% ③. DNA分析
【解析】
【分析】分析题图：图示为培育优良种牛的过程图解，其中①表示体外受精过程；②表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞；③为早期胚胎发育过程，其中a为滋养层、b为囊胚腔、c为内细胞团；④表示胚胎分割移植；⑤表示胚胎移植过程。
【小问1详解】
哺乳动物体内受精作用发生的场所是输卵管。防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应。
【小问2详解】
③为早期胚胎发育过程，胚胎发育到桑葚胚或囊胚阶段时可将其移植到代孕动物的子宫内。
【小问3详解】
a为滋养层、b为囊胚腔、c为内细胞团，a滋养层将来发育成胎盘或胎膜，c内细胞团将来发育成胎儿的各种组织。
【小问4详解】
④表示胚胎分割移植，来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此由一个囊胚经④过程得到的B、C牛性别相同。在胚胎移植前可以取囊胚的滋养层细胞做DNA分析鉴定性别。
43. 为降低人类乳腺癌治疗药物副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），过程如下图所示。
（1）动物细胞培养时，可以用____处理动物组织，得到分散的组织细胞，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖的原因是____（至少回答两点）。
（2）为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，每隔2周用取自____的特定抗原注射小鼠1次，共注射3次。最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的生物诱导法是____。为了获得杂交瘤细胞，应将诱导融合后的细胞放在____培养基上进行培养。
（3）通过过程②得到的细胞还必须经过过程③克隆化培养和____才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是____。
（4）单克隆抗体的优点是____。单克隆抗体是ADC中的____（填“a”或“b”）部分。
【答案】（1） ①. 胰蛋白（或胶原蛋白）（或胰蛋白酶、胶原蛋白） ②. 细胞密度过大、培养液中营养物质缺乏、有害代谢产物积累
（2） ①. 人的乳腺癌细胞 ②. 灭活的病毒 ③. 特定的选择培养
（3） ①. 抗体检测 ②. 既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体
（4） ①. 能准确地识别抗原的细微差异，与特定的抗原发生特异性结合，并且可以大量制备（或特异性强、灵敏度高、可大量制备） ②. a
【解析】
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。
【小问1详解】
动物细胞培养时，可以用胰蛋白（或胶原蛋白）酶处理动物组织，得到分散的组织细胞，获得单细胞悬液，为了保证细胞正常生命活动，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖，其原因应该为细胞密度过大、培养液中营养物质缺乏、有害代谢产物积累，进而导致生长停止。
【小问2详解】
为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，每隔2周用取自人的乳腺癌细胞的特定抗原注射小鼠1次，共注射3次。最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的生物诱导剂是灭活的病毒，该方法是诱导动物细胞融合特有的方法。为了获得杂交瘤细胞，应将诱导融合后的细胞放在特定的选择培养基上进行培养，进而筛选出杂交瘤细胞。
【小问3详解】
通过过程②得到的细胞还必须经过过程③克隆化培养和抗体检测才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，此时获得的杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。
【小问4详解】
单克隆抗体由于纯度高，因而表现出的典型优点是特异性强、灵敏度高，由于杂交瘤细胞可以无限增殖，因此单克隆抗体具能准确地识别抗原的细微差异，与特定的抗原发生特异性结合，并且可以大量制备的优点；ADC药物是利用单克隆抗体的导向作用，起到定向作用到癌细胞的作用，其对应图中的a部分。
考试时间：100分钟
一、单选题（1—30题，每小题1分，31—37题，每小题2分，共44分）
1. 在利用香蕉进行DNA粗提取与鉴定实验中，相关叙述错误的是（ ）
A. 研磨前先用液氨冷冻处理香蕉，有利于DNA的释放
B. 香蕉研磨后离心取上清液，加入95%的冷酒精，有利于DNA析出
C. 将出现白色丝状物的溶液倒入离心管中离心，弃上清液取沉淀
D. 将DNA丝状物加入二苯胺试剂，沸水浴加热出现蓝色
【答案】D
【解析】
【分析】DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14ml/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
【详解】A、冷冻研磨可以从各种环境样本中获得高质量的 DNA，研磨前先用液氨冷冻处理香蕉，有利于DNA的释放，A正确；
B、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，香蕉研磨后离心取上清液，加入95%的冷酒精，有利于DNA析出，B正确；
C、将出现白色丝状物（粗提取得到的DNA）的溶液倒入离心管中离心，弃上清液取沉淀，C正确；
D、将DNA丝状物放入物质的量浓度为2ml/L的NaCl溶液中，使其溶解，再加入二苯胺试剂，沸水浴加热出现蓝色，D错误。
故选D。
2. 基因工程、细胞工程都可以克服远缘杂交不亲和的障碍，在农作物新品选育等方面具有广阔的前景和较高的应用价值。下列叙述错误的是（ ）
A. 实验室中将目的基因导入植物细胞采用最多、最有效的方法是显微注射法
B. 农杆菌转化法的原理是 Ti 质粒中的 T-DNA 具有转移到受体细胞并整合到受体细胞 DNA 上的特性
C. 植物体细胞杂交诱导原生质融合时常用聚乙二醇（PEG）做诱导剂
D. 含有目的基因的细胞或融合形成的杂种细胞能培育成植株的理论基础是细胞的全能性
【答案】A
【解析】
【分析】将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
【详解】A、显微注射法是实验室中将目的基因导入动物细胞采用最多、最有效的方法，A错误；
B、农杆菌的Ti质粒存在T-DNA片段，它具有可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上，B正确；
C、常用化学诱导法聚乙二醇（PEG）诱导植物原生质体的融合，C正确；
D、植物组织培养的原理是细胞的全能性，D正确。
故选A。
3. 将基因型为CcDd的水稻的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗甲，对试管苗甲用秋水仙素处理得到植株乙。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 愈伤组织是花粉细胞通过减数分裂后形成的不规则的细胞团
B. 在愈伤组织的形成过程中，必须从培养基中获得水、无机盐和动物血清等物质
C. 为促进花粉细胞分裂生长，需在培养基中加入一定浓度的植物激素
D. 植株乙可能出现的基因型有CD、Cd、cD、cd
【答案】C
【解析】
【分析】植物激素亦称植物天然激素或植物内源激素。是指植物体内产生的一些微量而能调节（促进、抑制）自身生理过程的有机化合物。已知植物体内产生的激素有六大类，即生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯和油菜素甾醇。它们都是些简单的小分子有机化合物，但它们的生理效应却非常复杂、多样。从影响细胞的分裂、伸长、分化到影响植物发芽、生根、开花、结实、性别决定、休眠和脱落等。所以，植物激素对植物的生长发育有重要的调控作用。生长素、赤霉素、细胞分裂素能促进植物生长和发育过程，而脱落酸和乙烯的作用则是抑制植物生长，促进成熟和衰老。
【详解】A、愈伤组织是花粉细胞通过脱分化、有丝分裂后形成的不规则的细胞团，A错误；
B、在愈伤组织的形成过程中，必须从培养基中获得水、无机盐和植物激素等物质，动物血清用于培养动物细胞，植物组织培养不需要血清，B错误；
C、植物组织培养过程，脱分化和再分化过程需要用生长素和细胞分裂素的诱导，所以为促进花粉细胞分裂生长，需在培养基中加入一定浓度的生长素等植物激素，C正确；
D、基因型为CcDd的水稻的花药离体培养形成试管苗甲基因型为CD、Cd、cD、cd，用秋水仙素处理后，染色体数目加倍，所以则植株乙的基因型为CCDD、CCdd、ccDD、ccdd，D错误。
故选C。
4. 中国科学家在广西获得了一块距今2.4万年的古大熊猫化石。将该化石中提取到的线粒体DNA 通过测序分析和比较，发现古大熊猫与现存大熊猫的相关 DNA 序列高度相似，且大熊猫与熊类有共同的远古祖先。下列叙述，不合理的是（ ）
A. 化石证据结合分子生物学分析，可为大熊猫进化提供更可靠的证据
B. 化石中提取的线粒体DNA 通过PCR 进行扩增，作为测序的材料
C. 该研究对获得大熊猫和熊类远古父系祖先的相关信息有直接帮助
D. 造成现存大熊猫与古大熊猫基因差异的根本原因是发生了突变
【答案】C
【解析】
【分析】生物有共同祖先的证据：
(1)化石证据:在研究生物进化的过程中，化石是最重要的、比较全面的证据，化石在地层中出现的先后顺序说明了生物是由简单到复杂、由低等到高等、由水生到陆生逐渐进化而来的。
(2)比较解剖学证据：具有同源器官的生物是由共同祖先演化而来。这些具有共同祖先的生物生活在不同环境中，向着不同的方向进化发展，其结构适应于不同的生活环境，因而产生形态上的差异。
(3)胚胎学证据：人和鱼的胚胎在发育早期都出现鳃裂和尾；人和其它脊椎动物在胚胎发育早期都有彼此相似的阶段。
(4)细胞水平的证据：细胞有许多共同特征，如有能进行代谢、生长和增殖的细胞；细胞有共同的物质基础和结构基础。
(5)分子水平的证据:不同生物的DNA和蛋白质等生物大分子，既有共同点，又存在差异性。
【详解】A、线粒体DNA的测序结果能为生物的进化提供分子水平的证据，不同生物的DNA和蛋白质等生物大分子，既有共同点，又存在差异性，化石证据结合分子生物学分析，可为大熊猫进化提供更可靠的证据，A正确；
A、PCR 技术能在体外对DNA分子进行大量扩增，因此化石中提取的线粒体DNA 通过PCR 进行扩增，能作为测序的材料，B正确；
C、子代线粒体DNA来源于母亲，故该研究对获得大熊猫和熊类远古父系祖先的相关信息没有直接帮助，C错误；
D、突变是生物变异的根本来源，造成现存大熊猫与古大熊猫基因差异的根本原因是发生了突变，D正确。
故选C。
5. 做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ）
A. 高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖
B. 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C. 用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
D. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应立即去挑取菌落
【答案】C
【解析】
【分析】高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板。操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基。
【详解】A、高压灭菌加热结束时，需要等到压力降到零后才能打开排气阀，A错误；
B、倒平板时，用左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（10～20mL）倒入培养皿，立即盖上培养皿的皿盖，而不能打开皿盖放到一边，防止皿盖被杂菌污染，B错误；
C、用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记皿底上，培养时平板需要倒置，C正确；
D、接种环经火焰灭菌后需要冷却后才能挑取菌落，防止高温杀死菌种，D错误。
故选C。
6. 人参皂苷是人参的次级代谢产物，具有增强免疫力、改善心血管功能、抗氧化、抗肿瘤等功能。如图为利用植物细胞培养技术工业化生产人参皂苷的流程。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 过程①不需要光照，细胞不发生基因的选择性表达
B. 可利用培养的动物癌细胞来检测人参皂苷的抗癌活性
C. 人参皂苷属于次级代谢产物，为人参生命活动所必需
D. 过程②利用了细胞分裂的原理，体现了细胞的全能性
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。
【详解】A、过程①为脱分化，不需要光照，细胞发生基因的选择性表达，A错误；
B、分析题意，人参皂苷具有抗肿瘤等功能，可利用培养的动物癌细胞来检测人参皂苷的抗癌活性，B正确；
C、人参皂苷属于次级代谢产物，但不是人参基本生命活动所必需，C错误；
D、细胞全能性是发育为完整植株或分化为其他各种细胞的能力，过程②利用细胞分裂的原理，但未体现细胞具有全能性，D错误。
故选B。
7. 萝卜和甘蓝是亲缘关系较近的两种植物，某研究人员利用植物体细胞杂交技术，以期获得萝卜和甘蓝体细胞杂交植株。下列叙述错误的是（ ）
A. 制备原生质体时常用纤维素酶和果胶酶进行处理
B. 可用离心、PEG、仙台病毒等方法诱导原生质体融合
C. 杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁
D. 杂种细胞经过脱分化、再分化后才能形成杂种植株
【答案】B
【解析】
【分析】进行植物体细胞杂交时先用酶解法去除植物细胞的细胞壁，进行植物原生质体的融合，形成杂种细胞，再通过植物的组织培养将杂种细胞培育成杂种植株。不同种的植物之间具有生殖隔离，该种方法打破了不同种植物间的生殖隔离，克服了远缘杂交不亲和的障碍。
【详解】A、细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，利用纤维素酶和果胶酶去壁后可分离得到原生质体，A正确；
B、诱导植物原生质体融合时，可以采用物理方法（电激、离心、振动等）和化学方法（聚乙二醇PEG），灭活的病毒是诱导动物细胞融合的方法，B错误；
C、细胞壁对于植物细胞具有保护和支持作用，杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁，C正确；
D、杂种细胞经过脱分化（形成愈伤组织）、再分化后才能形成杂种植株，D正确。
故选B。
8. 下列关于植物组织培养的叙述，错误的是（ ）
A. 用于植物组织培养的外植体就是指离体培养的植物器官、组织或细胞
B. 脱分化的实质是通过基因的选择性表达改变细胞的结构和功能
C. 培养基中添加蔗糖的目的只是提供营养物质
D. 进行植物组织培养时，常常需要添加植物激素，但是菊花茎段的组织培养比较容易，可以不必添加植物激素
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。植物组织培养包括脱分化和再分化两个重要的步骤，这两个步骤都需要植物激素诱导，但植物激素的比例不同。
【详解】A、用于植物组织培养的外植体就是指离体培养的植物器官或组织，外植体应选择分裂旺盛的部分，如根尖、茎尖等，A正确；
B、脱分化是由外植体形成愈伤组织的过程，该过程的实质是通过基因的选择性表达改变细胞的结构和功能，B正确；
C、培养基中添加蔗糖的目的是提供营养，同时调节渗透压，维持细胞正常形态，C错误；
D、植物组织培养时，常常需要添加植物激素，但是菊花茎段的组织培养比较容易，可以不必添加植物激素，D正确。
故选C。
9. 如图为哺乳动物早期胚胎发育的过程，下列有关叙述错误的是（ ）
A. Ⅰ时期为原肠胚，该时期的细胞具有发育的全能性
B. 过程a和b比卵裂期胚胎中有机物的含量减少
C. 胚胎移植选择处于Ⅰ或Ⅱ时期的胚胎最易成功
D. 细胞分化从Ⅱ时期开始贯穿于动物的整个生命历程
【答案】A
【解析】
【分析】I表示桑椹（桑葚）胚，含有的所有细胞都是全能细胞，II表示囊胚，含有的内细胞团细胞为全能细胞。
【详解】A、Ⅰ时期为桑椹（桑葚）胚，该时期的细胞具有发育的全能性，A错误；
B、过程a表示卵裂形成桑椹（桑葚）胚，过程b表示由桑椹胚形成囊胚，这两个过程细胞均需要消耗有机物释放能量，故胚胎中有机物的含量均减少，B正确；
C、胚胎移植选择处于Ⅰ桑椹（桑葚）胚或Ⅱ囊胚时期的胚胎最易成功，C正确；
D、细胞分化从Ⅱ囊胚时期开始贯穿于动物的整个生命历程，D正确。
故选A。
10. 我国科学家将外源生长激素基因导入鲤鱼的受精卵并整合到染色体DNA上，培育出转基因鲤鱼。与普通鲤鱼相比，转基因鲤鱼的生长速率加快。下列叙述正确的是（ ）
A. 转基因鲤鱼的外源生长激素基因的表达都在细胞核进行
B. 外源生长激素基因导入鲤鱼受精卵后没有定向改变性状
C. 外源生长激素基因的氢键断裂后利于该基因复制或转录
D. 转基因鲤鱼的外源生长激素基因遗传时不遵循遗传定律
【答案】C
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，该步骤需要限制酶和DNA连接酶。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
【详解】A、基因的表达包括转录和翻译，转录发生在细胞核中，翻译发生在细胞质基质中的核糖体上，A错误；
B、将外源生长激素基因导入鲤鱼受精卵后发现与普通鲤鱼相比，转基因鲤鱼的生长速率加快，说明鲤鱼有定向改变性状，B错误；
C、外源生长激素基因的复制或转录均需要解旋断开氢键，因此外源生长激素基因的氢键断裂后利于该基因复制或转录，C正确；
D、由于转基因鲤鱼的外源生长激素基因整合到染色体DNA上，因此遵循遗传定律，D错误。
故选C。
11. 科技工作者常运用不同的方法获得优良作物品种或种苗，不会引起遗传变异的方法是（ ）
A. 通过嫁接技术得到优质荔枝苗
B. 用γ射线处理大豆种子培育新品种
C. 用二倍体番茄培育四倍体番茄
D. 用杂交技术培育水稻新品种
【答案】A
【解析】
【分析】生物的育种方法有杂交育种、诱变育种、单倍体育种、多倍体育种、基因工程育种和细胞工程育种，这些育种方法均改变了生物的原有性状，其目的是获得符合人类需求的新品种，它们的原理依次为基因重组、基因突变、染色体变异、染色体变异、基因重组和染色体变异；只有无性繁殖技术能保持亲本的优良性状。
【详解】A、通过嫁接技术得到优质荔枝苗的方法是无性繁殖技术，该技术的优势是能保持亲本的优良性状，一般不会引起遗传变异，符合题意，A正确；
B、用γ射线处理大豆种子培育新品种的方法中利用的原理是基因突变，为诱变育种，育种的目的就是要获得符合人类要求的大豆突变，不符合题意，B错误；
C、用二倍体番茄培育四倍体番茄其原理是染色体数目变异，为多倍体育种的方法，不符合题意，C错误；
D、用杂交技术培育水稻新品种其原理是基因重组，为杂交育种的方法，该方法的操作是通过杂交、自交的方法，通过筛选活动符合要求的品种，不符合题意，D错误。
故选A。
12. 下面是植物组织培养过程示意图，相关说法正确的是（ ）
A. 上述植物组织培养的过程依据的生物学原理是植物细胞具有全能性
B. 需要对外植体进行严格的灭菌处理，以防止杂菌污染
C. 外植体若是月季的花药，则图中的①过程需要光照
D. 外植体若是菊花的根尖组织，因细胞中没有叶绿体，故培养成的新植株叶片无色
【答案】A
【解析】
【分析】
1、据图分析，①是脱分化，②③表示再分化，④表示移栽过程。
2、植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株。
【详解】A、植物组织培养依据的生物学原理为细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能，A正确；
B、外植体一般只消毒处理，不灭菌处理，以保持外植体的活性，B错误；
C、外植体若是月季的花药，则图中的①过程是脱分化，不需要光照，C错误；
D、外植体若是菊花的根尖组织，其细胞中虽然没有叶绿体，但其细胞中含有叶绿体形成的相关基因，故培养成的新植株叶片有叶绿体，因此有色，D错误。
故选A。
13. 单个B细胞抗体技术可用于制备高亲和力、高特异性的单抗，其技术流程如下：①康复者单个B淋巴细胞的分离和筛选；②利用RT-PCR获取和扩增抗体基因；③构建基因表达载体；④将抗体基因导入动物细胞；⑤单抗的筛选和鉴定。下列叙述错误的是（ ）
A. 操作①选用单个B淋巴细胞以保证最终获得纯度较高的单抗
B. 操作②使用的PCR反应体系常添加Mg2+以激活DNA聚合酶
C. 操作③常用两种限制酶切割抗体基因和载体以防止其自身环化
D. 操作④前可用Ca2+处理受体细胞促使其主动吸收DNA分子
【答案】D
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、不同的效应B细胞分泌的抗体不同，操作①选用单个B淋巴细胞可以保证最终获得纯度较高的单抗，A正确；
B、PCR反应体系中，常加入Mg2+以激活DNA聚合酶，促进PCR延伸中子链的合成，B正确；
C、为了防止目的基因和载体自身环化或反向连接，常用两种不同的限制酶去同时切割目的基因和载体，C正确；
D、用Ca2+处理细胞，该受体细胞是微生物，需要用Ca2+处理微生物细胞，使其处于感受态，D错误。
故选D。
14. 由C基因编码的C蛋白和V基因编码的V蛋白均能特异性杀死玉米害虫，这两种蛋白的结构和作用原理不同。现利用C—V融合基因和如图所示载体，获得具高抗虫性的转基因玉米。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 构建含有C—V融合基因的载体需要限制酶和DNA连接酶
B. 载体中的目的基因可以通过农杆菌的转化进入玉米细胞
C. 在玉米细胞染色体DNA上检出C—V基因就说明培育成功
D. 以单转C基因玉米为食比以该玉米为食的害虫更易产生抗性
【答案】C
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
(1) 目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法，将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法，将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、基因表达载体的构建方法是先用同种限制酶切割载体和含目的基因的DNA分子，再用DNA连接酶进行连接，因此构建含有C—V融合基因的载体需要限制酶和DNA连接酶，A正确；
B、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。载体中的目的基因可以通过农杆菌的转化进入玉米细胞，B正确；
C、在玉米细胞染色体DNA上检出C—V基因不能说明培育成功，因为融合基因可能不能正常表达，C错误；
D、该玉米具有C-V融合基因具有高抗虫性，与单转C基因玉米相比，此玉米可延缓害虫抗性基因频率增加，即以单转C基因玉米为食比以该玉米为食的害虫更易产生抗性，D正确。
故选C。
15. DNA 是绝大多数生物的遗传物质，在生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成中具有极其重要的作用。下列有关 DNA 的叙述，正确的是（ ）
A. 体内 DNA 复制过程需要限制酶和DNA 连接酶
B. DNA 分子中碱基特定的排列顺序构成了每个 DNA 分子的特异性
C. DNA 分子复制过程中，DNA 聚合酶既能断开氢键也能连接磷酸二酯键
D. 生物体内的DNA 数和基因数不同，构成基因的碱基总数大于构成 DNA 的碱基总数
【答案】B
【解析】
【分析】DNA的双螺旋结构：①DNA分子是由两条反向平行的脱氧核苷酸长链盘旋而成的。②DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接排列在外侧，构成基本骨架，碱基在内侧。③两条链上的碱基通过氢键连接起来，形成碱基对且遵循碱基互补配对原则。
【详解】A、限制酶和DNA连接酶是基因工程中常用的酶，体内DNA复制所需的酶是解旋酶和DNA聚合酶，A错误；
B、不同DNA分子碱基对的排列顺序不同，每个DNA分子的碱基对的排列顺序是特定的，DNA分子中碱基特定的排列顺序构成了每个DNA分子的特异性，B正确；
C、DNA分子复制过程中，DNA聚合酶能连接磷酸二酯键但不能断开氢键，C错误；
D、遗传物质是DNA的生物中，基因是有遗传效应的DNA片段，故生物体内的DNA数和基因数不同，构成基因的碱基总数小于构成DNA的碱基总数，D错误。
故选B。
16. 热环境主要包括陆地热泉和深海热液喷口，高温是限制生命存在的主要因素之一，该环境中同时生存着好氧菌和厌氧菌。下列关于分离高温环境中微生物的操作过程的叙述，正确的是（ ）
A. 为增加热泉样品中耐热微生物的数量可在振荡条件下进行培养
B. 宜利用琼脂固体培养基分离耐热微生物，分离过程中逐渐提高分离温度
C. 热泉样品经过低温保存后，生物多样性可能下降，分离的类群可能减少
D. 利用单一培养基和单一培养条件即可分离出热泉样品中的所有菌群
【答案】C
【解析】
【分析】微生物的分离的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，因为两种方法都能使菌体分散到培养基的表面，但是平板划线法不能确定接种量。
【详解】A、在热泉生活的微生物有好氧菌和厌氧菌两种类型，为增加热泉样品中耐热微生物的数量，可在不同的环境条件下进行培养，以使好氧菌和厌氧菌的数量均有所增加，A错误；
B、琼脂在一定温度下会融化为液体，所以不宜利用琼脂固体培养基分离耐热微生物，B错误；
C、热泉中的微生物具有耐热的特性，某些微生物可能不适应低温的环境条件，样品经过低温保存后，可能会导致部分微生物死亡，从而使生物多样性下降，分离的类群减少，C正确；
D、热泉中的菌群生活条件不一，因此必须用不同的条件进行微生物的分离，利用单一的培养基和培养条件不能分离出热泉样品中的所有菌群，D错误。
故选C。
17. 下列关于质粒的叙述，正确的是（ ）
A. 质粒和真核细胞DNA的基本组成单位不同
B. 质粒的复制过程是在受体细胞外独立进行的
C. 质粒是存在于所有细胞中蛋白质合成的场所
D. 质粒是细胞质中能够自我复制的环状DNA分子
【答案】D
【解析】
【分析】1、常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。）
2、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来；
3、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。
【详解】A、质粒是独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子，组成单位与真核细胞的DNA完全相同，都是脱氧核苷酸，A错误；
B、质粒作为基因工程的载体，可以进入受体细胞进行自我复制，B错误；
C、细胞中蛋白质合成的场所是核糖体，C错误；
D、质粒是细胞质中能够自我复制的环状DNA分子，主要存在于原核细胞中，D正确。
故选D。
18. 限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，以下说法正确的是（ ）
A. 大多数限制酶识别的核苷酸序列由6个核糖核苷酸组成
B. 不同来源的限制酶可能识别相同的序列，甚至有相同的切点
C. DNA连接酶能将单个核苷酸连接到已有的核苷酸片段上
D. E·cliDNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端
【答案】B
【解析】
【分析】基因工程最基本的工具：①基因的“剪刀”---限制酶；基因的“针线”---DNA连接酶；③基因的运载体---质粒、噬菌体、动植物病毒等。
【详解】A、大多数限制酶识别的核苷酸序列由6个脱氧核糖核苷酸组成的，A错误；
B、不同来源的限制酶可能是同一种限制酶，可以识别相同的识别序列，甚至有相同的切点，B正确；
C、DNA连接酶可以连接两个DNA片段，而DNA聚合酶能将单个核苷酸连接到已有的核苷酸片段上，C错误；
D、E·cliDNA连接酶只能连接黏性末端，不能连接平末端，D错误。
故选B。
19. 某同学制作果酒果醋的步骤如下：①将发酵瓶等清洗干净后用酒精消毒；②清洗葡萄并榨汁装入发酵瓶；③将温度控制在18~30℃发酵12d；④打开瓶盖，盖上一层纱布再发酵8d。下列说法错误的是（ ）
A. ①可杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
B. ②葡萄需先用清水冲洗后去枝梗，避免杂菌污染
C. ③每隔一段时间拧松瓶盖一次，及时放气
D. ④需要调高温度至30~35℃，该过程几乎不产生气体
【答案】A
【解析】
【分析】1、果酒和果醋制作过程中的相关实验操作：
（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。
（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。
（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。
（4）发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约13的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18°C～30°C，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行。及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30°C～35°C，时间控制在前7～8d左右，并注意适时通过充气口充气。
【详解】A、①过程将发酵瓶等清洗干净后用酒精消毒，防止污染，但不能杀死物体内外所有的微生物，A错误；
B、材料处理时选用新鲜葡萄先用清水冲洗1-2次，再除去枝梗和腐烂的籽粒，避免杂菌污染，B正确；
C、将温度控制在18°C～30°C进行果酒发酵，并需适时拧松瓶盖放气，C正确；
D、果醋发酵菌种是醋酸菌，为好氧型细菌，最适温度为30~35℃，④需要调高温度至30~35℃，该过程几乎不产生气体，D正确。
故选A。
20. 如图为体细胞克隆猴“中中”和“华华”培育的流程，相关叙述错误的是（ ）
A. 图中的卵子实际上是发育到MⅡ期的卵母细胞
B. ①过程可以通过电融合法使供体细胞与去核的卵母细胞融合，形成重构胚
C. 可用灭活病毒诱导法激活重构胚
D. 中中、华华的性别由成纤维细胞的遗传物质决定
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞核移植技术是将动物的细胞核移入一个去核卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。分析图示可知，①为将纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，②为对重组细胞进行体外培养，发育成新胚胎，再进行③胚胎移植过程，最终获得克隆猴。
【详解】A、图中的卵子实际上是处于减数第二次分裂时期的次级卵母细胞，A正确；
B、①为将纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，去核的卵母细胞与供体细胞通过电融合法融合，供体核进入受体卵母细胞，形成重构胚，B正确；
C、激活重构胚可用电刺激、乙醇、蛋白酶合成抑制剂、Ca2+载体的方法，使其完成细胞分裂和发育过程，C错误；
D、中中、华华是由重组细胞发育而来，其细胞核内的遗传物质来自纤维细胞，因此性别由纤维细胞的遗传物质决定，D正确。
故选C。
21. CD20抗原是一种B细胞分化抗原，可位于前B细胞和成熟B细胞上。CD20抗原基因在95%以上的B细胞性淋巴瘤中表达，而在造血干细胞、浆细胞和其他正常组织细胞中不表达。利妥昔单抗是针对CD20抗原的一种单克隆抗体，其与肿瘤细胞上的CD20抗原特异性结合后可以诱导肿瘤细胞凋亡。分析以上材料，下列叙述错误的是（ ）
A. 利妥昔单抗能特异性识别CD20抗原并发挥作用
B. 利妥昔单抗为肿瘤细胞提供了诱导细胞凋亡的信息
C. 造血干细胞分化为成熟B细胞的过程中，CD20抗原基因进行表达
D. 当受到病原体和相应辅助T细胞表面发生变化的特定分子刺激时B细胞即可活化
【答案】D
【解析】
【分析】单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高、可大量制备。
【详解】A、利妥昔单抗是针对CD20抗原的一种单克隆抗体，抗体具有特异性，所以利妥昔单抗能特异性识别CD20抗原并发挥作用，A正确；
B、利妥昔单抗与肿瘤细胞上的CD20抗原特异性结合后可以诱导肿瘤细胞凋亡，说明利妥昔单抗为肿瘤细胞提供了诱导细胞凋亡的信息，B正确；
C、CD20抗原基因在95%以上的B细胞性淋巴瘤中表达，则造血干细胞分化为成熟B细胞的过程中，CD20抗原基因进行表达，C正确；
D、当受到病原体刺激、相应辅助T细胞表面发生变化的特定分子刺激，以及辅助T细胞分泌的细胞因子的作用下，B细胞活化，D错误。
故选D。
22. 海拉细胞是一种人工培养的具有无限增殖能力的细胞，广泛应用于科学研究，极大程度地推动了医学发展。如图是海拉细胞培养部分过程，下列说法正确的是（ ）
A. 丙和丁的过程不一定会出现细胞接触抑制的现象
B. 甲→乙过程需要用胃蛋白酶或胶原蛋白酶等处理
C. 丙、丁过程中通常会通入O2和CO2的混合气体刺激细胞呼吸
D. 为避免培养过程中的杂菌污染，丙、丁过程中培养瓶盖必须旋紧不漏气
【答案】A
【解析】
【分析】1、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入 培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液 →转入培养液(传代培养) →放入二氧化碳培养箱培养。
2、图示为肾脏上皮细胞培养过程示意图，图中甲表示剪碎肾脏组织块，乙表示制成细胞悬液，丙表示原代培养，丁表示传代培养。
【详解】A、丙表示原代培养，丁表示传代培养，海拉细胞是一种具有无限增殖能力的细胞，其在原代培养和传代培养的过程中不会出现细胞接触抑制的现象，A正确；
B、在动物细胞培养过程中，需要用胶原蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是在多数动物细胞培养液适宜的pH范围内，胃蛋白酶已失去活性，B错误；
C、丙、丁过程中通常会通入95%空气和5%的 CO₂ 的混合气体，前者（O2的主要作用是）维持细胞进行有氧呼吸，后者（CO2的主要作用是）维持培养液适宜的pH，C错误；
D、为避免培养过程中的杂菌污染，保证其气体需要，丙、丁过程中需松动培养瓶盖，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养，D错误。
故选A。
23. 灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（ ）
A. 家庭制作果酒、腐乳必须在无菌条件下进行
B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C. 为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D. 可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
【答案】D
【解析】
【分析】使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。
【详解】A、家庭制作果酒、腐乳不需要在无菌条件下进行，A错误；
B、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物培养基中一般不能加入抗生素，B错误；
C、一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，以防止杂菌污染，C错误；
D、可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌，以防止杂菌污染，D正确。
故选D。
24. 下列关于细胞工程的叙述正确的是（ ）
A. 动物细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质
B. 动物细胞核移植时去核是指去掉卵母细胞中被核膜包被起来的细胞核
C. 植物组织培养脱分化和再分化过程中，前后共需要进行两次接种
D. 植物体细胞杂交过程中常用灭活病毒对植物的原生质体进行诱导融合
【答案】A
【解析】
【分析】（1）由于人们对动物细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分；
（2）减数分裂Ⅱ中期卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物，去核是指去除该复合物；
（3）诱导植物细胞融合的方法有两大类，物理法包括电融合法、离心法等，化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高PH融合法等；诱导动物融合常用的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
【详解】A、由于人们对动物细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，A正确；
B、减数分裂Ⅱ中期卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物，去核是指去除该复合物，B错误；
C、植物组织培养过程中接种3次， 一次诱导愈伤组织， 一次生根， 一次发芽，C错误；
D、诱导植物细胞融合的方法有两大类，物理法包括电融合法、离心法等，化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高PH融合法等，灭活病毒融合法通常用于诱导动物细胞融合，D错误。
故选A。
25. 关于“克隆羊”的叙述合理的是（ ）
A. “克隆羊”的培育过程用到了体外受精、胚胎移植等技术
B. “克隆羊”的遗传物质只来自于一个亲本
C. “克隆羊”的培育过程属于有性生殖
D. “克隆羊”的培育需要用到减数第二次分裂中期的卵母细胞
【答案】D
【解析】
【分析】克隆羊是通过核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等技术形成的，属于无性生殖，其核基因来自供核亲本，而细胞质基因来自受体卵母细胞。
【详解】A、“克隆羊”的培育过程用到了核移植技术，而没有用到体外受精技术，A错误；
B、“克隆羊”的核基因来自供核亲本，而细胞质基因来自受体卵母细胞，B错误；
C、“克隆羊”的培育过程属于无性生殖，C错误；
D、“克隆羊”的培育用到的受体细胞为减数第二次分裂中期的卵母细胞，D正确。
故选D。
26. 玉米（2N=20）的传统育种方式是杂交育种。现代农业中，单倍体育种、诱变育种、 基因工程育种都是玉米育种的重要技术。下列叙述错误的是（ ）
A. 单倍体育种一般需要经过脱分化和再分化过程
B. 诱变育种形成的新性状有可能稳定遗传
C. 基因工程育种能定向改变玉米性状
D. 杂交育种较诱变育种操作简便，一定能快速得到所需新品种
【答案】D
【解析】
【分析】1、杂交育种原理：基因重组（通过基因分离、自由组合或连锁交换，分离出优良性状或使各种优良性状集中在一起）。2、诱变育种原理：基因突变，方法：用物理因素（如X射线、γ射线、紫外线、激光等）或化学因素（如亚硝酸、硫酸二乙脂等）来处理生物，使其在细胞分裂间期DNA复制时发生差错，从而引起基因突变，举例：太空育种、青霉素高产菌株的获得。3、单倍体育种原理：染色体变异，方法与优点：花药离体培养获得单倍体植株，再人工诱导染色体数目加倍，优点 明显缩短育种年限，原因是纯合体自交后代不发生性状分离。4、多倍体育种：原理：染色体变异，方法：最常用的是利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。秋水仙素能抑制有丝分裂时纺缍丝的形成，能得到染色体数目加倍的细胞。如八倍体小黑麦的获得和无籽西瓜的培育成功都是多倍体育种取得的成就。
【详解】A、单倍体育种常用的技术手段是花药离体培养，花药离体培养会经过脱分化、再分化过程，A正确；
B、诱变育种的原理是基因突变，遗传物质发生改变，形成的新性状有可能稳定遗传，B正确；
C、基因工程育种即转基因育种，能定向改变玉米性状，C正确；
D、杂交育种较诱变育种操作简便，但耗时较长，如果是隐性个体可能在F2中能筛选到，若是其它类型可能要耗时更长，因此不能快速得到所需新品种，D错误。
故选D。
27. 通过基因工程技术，可以将抗草甘膦基因导入大豆，培育出抗除草剂作物。下列相关叙述，错误的是（ ）
A. 构建基因表达载体时要用到耐高温的DNA聚合酶和DNA连接酶
B. 可以用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞
C. 培育过程需要借助植物组织培养技术
D. 需要在个体水平上对目的基因进行检测和鉴定
【答案】A
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、构建基因表达载体不需要耐高温的DNA聚合酶，需要的是限制性内切核酸酶和DNA连接酶，A错误；
B、可以用农杆菌转化法将目的基因导入受体植物细胞，B正确；
C、培育出抗除草剂作物培育过程需要借助植物组织培养技术，C正确；
D、在培育过程中需要在个体水平上对目的基因进行检测和鉴定，D正确。
故选A。
28. 下列技术中，英国克隆羊“多利”的产生、“抗虫棉”的培育、“番茄一马铃薯”的创造、单克隆抗体的制备、泡菜的生产，依次是下列哪一项生物技术取得的成果（ ）
①基因工程 ②细胞工程 ③发酵工程
A. ①②②③③B. ②①②②③C. ①②①③③D. ②②①③②
【答案】B
【解析】
【分析】细胞工程包括动物细胞工程和植物细胞工程，动物细胞工程的技术有动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植；植物细胞工程的技术包括植物组织培养技术和植物体细胞融合技术。
【详解】克隆羊“多利”的产生是运用了核移植技术，属于动物细胞工程②；“抗虫棉”是通过转基因技术培育成的，属于基因工程①；“番茄-马铃薯”是通过植物体细胞杂交技术培育出的，属于植物细胞工程②；单克隆抗体的制备是动物细胞融合技术的应用，属于动物细胞工程②；泡菜的生产属于发酵工程③；综上所述顺序为②①②②③，即B正确，ACD错误。
故选B。
29. 实验小组从甲醛含量丰富的工厂活性污泥中筛选出了能快速降解甲醛的菌株W，用于甲醛降解的生物处理，并探究了甲醛浓度对甲醛降解率的影响，实验结果如图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 筛选培养基中的甲醛能为菌株W的生长提供碳源
B. 在350mg·L-1和600 mg·L-1时，菌株W的降解甲醛的量相同
C. 浓度超过750 mg·L-1后，高浓度的甲醛可能会抑制菌株的活性
D. 筛选后培养基在丢弃前可用高压蒸汽锅进行灭菌处理
【答案】B
【解析】
【分析】选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。
【详解】A、甲醛中含有碳元素，可以为菌株W提供碳源，A正确；
B、在甲醛浓度为350mg·L-1和600mg·L-1时，菌株W对甲醛的降解率基本相同，但是降解量未知，B错误；
C、浓度超过750 mg·L-1后，培养基中高浓度的甲醛可能会导致菌株失水，从而影响菌株的活性，C正确；
D、筛选后的培养基在丢弃前可用高压蒸汽锅进行灭菌处理，以免污染环境或感染操作正确，D正确。
故选B。
30. 人们可以利用可遗传变异来改良农作物的性状或对生物进化机制进行科学解释。中国科学院近代物理研究所的科研人员利用重离子辐射诱变育种技术，选育了多种粮食作物的优良突变体。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 人工设置诱变条件可让农作物朝人们需要的方向进行突变
B. 诱变育种过程可能会导致处理材料细胞中发生染色体变异
C. 经诱变育种获得的优良突变体对自然环境的适应能力更强
D. 人为耕种管理的某种农作物种群的基因频率不会发生改变
【答案】B
【解析】
【分析】诱变育种是指在人为的条件下，利用物理、化学等因素，诱发生物体产生突变，从中选择，培育成动植物和微生物的新品种的方法；通常用射线，激光、化学药物处理诱发突变，其典型的优缺点：加速育种，改良性状，但有利个体不多，需大量处理。
【详解】A、诱变育种的原理是突变，突变是不定向的，不能保证让农作物朝人们需要的方向进行突变，A错误；
B、诱变育种过程利用重离子辐射，可能会导致处理材料细胞中发生染色体变异，如可能发生易位或缺失等，B正确；
C、变异是不定向的，经诱变育种获得的优良突变体对自然环境的适应能力不一定更强，C错误；
D、人为耕种管理的某种农作物会选择并保存有利于人类的类型，会使农作物种群的基因频率发生改变，D错误。
故选B。
31. 如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法正确的是（ ）
A. 培育植株①的过程为单倍体育种，获得的植株为纯合子
B. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，未体现细胞的全能性
C. 需要通过植物组织培养技术获得的植株只有①③④
D. 植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0（不考虑基因突变）
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图可知：对植株A的花粉经过离体培养得到的植株①单倍体植株，而后对该单倍体幼苗经秋水仙素处理得到的植物②是纯合二倍体，该过程属于单倍体育种。植株③的获得采用了植物组织培养技术，该植株的获得利用了诱变育种方法。植株④采用了植物组织培养技术，属于细胞工程育种；植株⑤的培育采用了植物体细胞杂交技术。
【详解】A、对植株A（杂合子Aa）的花粉（A或a）经过离体培养得到的植株①单倍体植株（A或a），秋水仙素处理单倍体植株①，获得的植株②（AA或aa）为纯合子，A错误；
B、选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，通过组织培养技术获得植株③，体现了细胞的全能性，B错误；
C、图中需要通过植物组织培养技术获得的植株是①③④⑤，该过程中利用了细胞的全能性，植株②是秋水仙素处理植株①的幼苗得到，没有用到植物组织培养技术，C错误；
D、植株①是通过花药离体培养获得的单倍体植株（A或a），秋水仙素处理得到植株②（AA或aa）；植株③④是通过植物组织培养获得的，其基因型为Aa；植株⑤是通过植物体细胞杂交的方法获得的，其遗传物质是由植株A和植株B组成的，与植株A的基因型不同，因此植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0，D正确。
故选D。
32. 英国首批体内含有三人DNA信息的三亲婴儿已经诞生。三亲婴儿的培育技术过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 给捐献者卵母细胞去除细胞核可以采用显微操作去核技术
B. 培育三亲婴儿是为了避免母亲的线粒体遗传病遗传给孩子
C. 父亲携带的白化病基因的遗传不受三亲婴儿培养技术的影响
D. 三亲婴儿的培育利用了核移植技术，属于无性生殖
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞核移植：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。动物细胞核移植技术的原理是动物细胞核具有全能性。
【详解】A、给捐献者卵母细胞去除细胞核可以采用显微操作去核技术，此时的卵母细胞通常需要培养到减数第二次分裂中期，A正确；
B、培育三亲婴儿是为了避免母亲的线粒体遗传病遗传给孩子，因此只采用了母亲的卵细胞的细胞核，B正确；
C、父亲提供精子，三亲婴儿的培养过程中对精子没有特殊操作，因此父亲携带的白化病基因的遗传不受三亲婴儿培养技术的影响，C正确；
D、三亲婴儿的培育利用了核移植技术，但是经过了精子和卵细胞的融合，子代的遗传物质来自双亲和捐献者，属于有性生殖，D错误。
故选D。
33. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA的菌种，流程图如下。下列叙述正确的是（ ）
A. 步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上
B. 步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐菌的生长越有利
C. 扩大培养所用的培养基应加入琼脂，放置摇床上培养，以便于挑取菌落获得纯化菌株
D. 挑取菌落时，应取多个菌落并分别测定嗜盐菌的PHA含量
【答案】D
【解析】
【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。微生物培养基需要为微生物繁殖提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，此外还要满足微生物对特殊营养物质、pH和O2的需求。培养基按照其物理状态可以分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。液体培养基常应用于工业或生活生产。
【详解】A、PHA是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，要筛选嗜盐细菌，步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误；
B、步骤③培养基浓度过高，会导致菌体失水死亡，不利于嗜盐细菌的生长，B错误；
C、扩大培养应选用液体培养基，液体培养基中无需加入琼脂，C错误；
D、要挑选高产聚羟基脂肪酸酯（PHA）的嗜盐菌，挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，进行比较，D正确。
故选D。
34. 下列关于发酵工程的叙述，错误的是（ ）
A. 培养基和发酵设备都必须经过严格灭菌，发酵过程中适时补充灭菌的培养液和空气
B. 发酵过程中的环境条件既会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物代谢物的形成
C. 通过酵母菌发酵，获得大量菌体，从中提取单细胞蛋白作为动物饲料或食品添加剂
D. 发酵产品包括微生物菌体本身或代谢物，可通过过滤、离心、蒸馏等方法纯化
【答案】C
【解析】
【分析】发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身；产品不同，分离提纯的方法一般不同：①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
【详解】A、培养基和发酵设备都必须经过严格灭菌，以防止杂菌污染导致产量大大下降；发酵过程中适时补充灭菌的培养液和空气，以满足发酵菌种的代谢需求，A正确；
B、发酵过程需要适宜的温度和pH，环境条件既会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物代谢产物的形成，B正确；
C、单细胞蛋白是微生物菌体，所以不需要从获得的菌体中提取，C错误；
D、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身，可通过过滤、离心、蒸馏等方法纯化，D正确。
故选C。
35. CHO细胞是从仓鼠卵巢细胞中分离出来的能无限增殖的细胞。研究发现缺乏二氢叶酸还原酶（dhfr）的CHO细胞在培养基上不能生长，将含目的基因的质粒和含dhfr基因的质粒同时导人缺乏dhfr的CHO细胞，得到能在培养基上生长的CHO细胞（简称M）。dhfr可被氨甲喋呤抑制，dhfr基因能在受体细胞中大量扩增以抵消氨甲喋呤的抑制，若导入受体细胞的dhfr基因与目的基因连在一起，则目的基因也会大量扩增，使CHO细胞高水平表达目标蛋白，且CHO细胞抵消氨甲喋呤的抑制效应越强，目标蛋白的表达水平越高。下列叙述正确的是（ ）
A. 构建重组质粒时常用的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体
B. M中一定发生了目的基因和dhfr基因的重组
C. 通过不断提高培养基中氨甲喋呤的浓度，可筛选出高效表达目标蛋白的细胞
D. 培养目标细胞时，需将其置于含95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中
【答案】C
【解析】
【分析】构建重组质粒时常用工具酶有限制酶（切割目的基因和载体）、DNA连接酶（连接目的基因和载体）和载体。
由题意可知，dhfr可被氨甲喋呤抑制，若氨甲喋呤的浓度过高，可能导致不能dhfr不能表达，进而导致CHO细胞在培养基上不能生长。
【详解】A、构建重组质粒时常用的工具酶有限制酶（切割目的基因和载体）、DNA连接酶（连接目的基因和载体），但载体不属于工具酶，A错误；
B、M中不一定发生目的基因和dhfr基因的重组，可能二者单独表达发挥作用，B错误；
C、由题意可知，dhfr可被氨甲喋呤抑制，dhfr基因能在受体细胞中大量扩增以抵消氨甲喋呤的抑制，则随着培养基中氨甲喋呤的浓度的提高，可筛选出高效表达目标蛋白的细胞，C正确；
D、培养目标细胞时，需将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中，D错误。
故选C。
36. 由于某目的基因酶切后的末端为平末端， 载体E只有产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P 将目的基因接入载体E。据图分析， 下列叙述正确的是（ ）
A. 通过 PCR 扩增获取目的基因是基因工程的核心工作
B. 为了便于该目的基因接入载体E，可用限制酶 EcRV 或SmaI切割载体P
C. 载体P不能作为基因表达载体，是因为其没有表达该目的基因的启动子与终止子
D. 若受体细胞表现出抗性基因的相应性状，表明重组载体成功导入受体细胞
【答案】C
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，不是通过PCR扩增获取目的基因，A错误；
B、由于载体E只有产生黏性末端的酶切位点，要使中间载体P接入载体E，同时防止载体E自身环化，需要用两种限制酶分别切割载体E和中间载体P，据图可知，中间载体P和载体E均含有XhI和PstI酶识别序列，故可选用XhI和PstI酶进行酶切，载体P的这两种酶识别序列中含有EcRV识别位点，并且其切割的为平末端，可以用于连接目的基因，SmaI酶虽然也能切割得到平末端，但是其识别位点没有位于XhI和PstI酶识别位点之间，故不能选择其对中间载体P进行切割，B错误；
C、由图可知，载体P是中间质粒，不含有有表达MT基因的启动子和终止子，C正确；
D、受体细胞表现出抗性基因的相应性状，可能是导入了重组质粒，也可能只导入了空质粒（不含目的基因的质粒），D错误。
故选C。
37. 近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（ ）
A. 胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
B. A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精
C. D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理
D. E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎移植的基本程序：①对供、受体的选择和处理（用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
【详解】A、胚胎工程一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵，A错误；
B、A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才具有受精能力，C的精子获能后才能发生受精，B正确；
C、D受体雌性接受来自动物园亚洲黑熊♀A体内的胚胎，所以必须和动物园亚洲黑熊♀A同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率，而野生亚洲黑熊♀B只需要提供体细胞，所以不需要同期发情处理，C错误；
D、E后代遗传物质来源于A和C，F后代遗传物质状来源于A和B，D错误。
故选B。
二、多选题（每小题3分，少选得1.5分，多选错选不得分，共6分）
38. 如图所示为植物体细胞杂交的流程，两种植物细胞都为二倍体，它们的基因型分别为AABB、ddee。下列叙述正确的是（ ）
A. ①过程常采用的物理法有离心法、电融合法、PEG融合法
B. 过程③应避光培养，防止愈伤组织分化成筛管、维管等
C. 从过程③到过程④需要更换新的培养基主要是因为有害代谢产物积累
D. 杂种植株的基因型为AABBddee
【答案】BD
【解析】
【分析】据图分析，①是诱导原生质体融合的过程；②是再生出新的细胞壁的过程；③是脱分化；④是再分化。
【详解】A、①过程常采用的物理法有离心、振动、电激等，用聚乙二醇作为诱导剂来诱导细胞融合是化学法，A错误；
B、③过程是脱分化的过程，应该避光培养，防止愈伤组织分化成筛管、维管等，B正确；
C、从过程③到过程④是从愈伤组织形成完整植株，需要调整培养基中植物激素的种类和比例，所以更换培养基的目的不是有害代谢产物积累，C错误；
D、杂种植株是由AABB和ddee融合形成的，所以基因型为AABBddee，D正确。
故选BD。
39. 角膜缘干细胞缺乏症（LSCD）会造成患者严重视力障碍甚至失明。某研究团队将来自捐献者的皮肤细胞编辑为iPS细胞，诱导其分化为所需的角膜细胞并制成细胞薄膜。把细胞薄膜移植给LSCD患者后，细胞薄膜持续不断地生成角膜细胞，患者视力得到恢复且没有出现排斥反应。下列分析错误的是（ ）
A. iPS细胞的分裂、分化潜能比角膜上皮干细胞低
B. iPS细胞与角膜细胞的基因组成和细胞功能没有区别
C. iPS细胞诱导生成角膜细胞的过程体现了细胞的全能性
D. 若移植的新角膜产生其他类型的细胞可导致移植失败
【答案】ABC
【解析】
【分析】iPS细胞是人工诱导产生的多能干细胞，其具有分裂和分化的能力，可以诱导分化成多种组织细胞。
【详解】A、iPS细胞属于多能干细胞，而角膜上皮干细胞属于专能干细胞，所以iPS细胞的分裂、分化潜能比角膜上皮干细胞高，A错误；
B、iPS细胞与角膜细胞的基因组成相同，都来源于同一个受精卵的分裂和分化，但由于基因的选择性表达，使得它们在功能上出现差异，B错误；
C、细胞的全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整生物体的潜能，iPS细胞诱导生成角膜细胞的过程并未体现了细胞的全能性，C错误；
D、若移植的新角膜没有产生角膜细胞，而是产生其他类型的细胞，患者视力无法恢复，导致移植失败，D正确；
故选ABC。
三、非选择题（共50分）
40. 大熊猫是我国的国宝。尽管我国政府采取了许多保护措施，但由于大熊猫的繁殖能力低，幼仔成活率低，它的数量仍然很少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。回答下列问题：
（1）动物细胞工程常用的技术包括动物细胞核移植、____和____等，其中____是动物细胞工程的基础。
（2）哺乳动物核移植可以分为____和体细胞核移植，后者难度明显高于前者，原因是____。
（3）利用体细胞核移植技术培育克隆大熊猫，并不是对体细胞供体动物进行100％的复制，原因是____。
【答案】（1） ①. 动物细胞培养 ②. 动物细胞融合（动物细胞核移植等） ③. 动物细胞培养
（2） ①. 胚胎细胞核移植 ②. 动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难
（3）克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但其细胞核外的DNA同时来自核供体细胞和受体卵母细胞
【解析】
【分析】动物细胞核移植：是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成一个新的个体。用核移植方法得到的动物称为克隆动物。
【小问1详解】
动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
【小问2详解】
动物细胞核移植技术是将动物的一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术，哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，后者难度明显高于前者，原因是动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。
【小问3详解】
利用体细胞核移植技术培育克隆大熊猫，并不是对体细胞供体动物进行100％的复制，原因是克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但其细胞核外的DNA同时来自核供体细胞和受体卵母细胞。
41. 抗凝血酶Ⅲ是一种药用蛋白，对预防和治疗静脉血栓、心肌梗死、脑血管病变具有重要作用。为了提高抗凝血酶Ⅲ的产量，科研人员设计利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备抗凝血酶Ⅲ，并获得了成功。制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程如图1所示。回答下列问题：
（1）获取了抗凝血酶Ⅲ基因后，需要通过PCR技术对该基因进行扩增，扩增的原理是____，扩增抗凝血酶Ⅲ基因的过程中一般不需要使用解旋酶，原因是____。
（2）图1过程③在基因工程操作步骤中属于____，切割质粒DNA的工具酶是____，能将特定部位的两个核苷酸之间的____断开。操作工程中需要将抗凝血酶Ⅲ基因插入到启动子与____之间，其中启动子的作用是____。
（3）获取重组质粒后，将重组质粒导入受精卵。从崂山奶山羊A的卵巢中获取卵子和从崂山奶山羊B的睾丸中获取精子，其中精子要进行____处理才具备受精的能力。图1中步骤④常用的方法是____。
【答案】（1） ①. DNA双链复制 ②. PCR扩增过程中，当温度为90-95℃时，DNA变性解开双链
（2） ①. 基因表达载体的构建 ②. 限制酶 ③. 磷酸二酯键 ④. 终止子 ⑤. 作为RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动基因转录出mRNA
（3） ①. 获能 ②. 显微注射
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【小问1详解】
PCR是一项体外扩增DNA的技术，其原理是DNA的半保留复制；PCR扩增过程中，当温度为90＞95℃时，DNA解链，故一般不需要使用解旋酶。
【小问2详解】
过程③是将抗凝血酶Ⅲ基因与质粒连接到一起，在基因工程操作步骤中属于基因表达载体的构建，切割质粒DNA的工具酶是限制酶，能将特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。为了让目的基因正常表达，操作工程中需要将抗凝血酶Ⅲ基因插入到启动子与终止子之间，其中启动子的作用是作为RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动基因转录出mRNA 。
【小问3详解】
体外受精时，精子需要获能之后才能受精；图1中步骤④是将重组质粒导入到动物受精卵，常用的方法是显微注射技术。
42. 如图是科学家通过不同方法培育优良种牛的过程，其中①～⑤表示操作过程。请回答以下问题：
（1）哺乳动物体内受精的场所是____。图中①过程中防止多精入卵的两道屏障依次为____、____。
（2）③过程是____，胚胎发育到____阶段，可做胚胎移植。
（3）图中b、c分别代表囊胚的____、____，图中c将来发育成____。
（4）图中由一个囊胚经④过程得到的B、C牛，则④过程表示____，由一个囊胚经④过程得到的B、C牛性别相同的概率为____，可以取囊胚的滋养层细胞做____，鉴定性别。
【答案】（1） ①. 输卵管 ②. 透明带反应 ③. 卵细胞膜反应
（2） ①. 早期胚胎培养 ②. 桑葚胚或囊胚
（3） ①. 囊胚腔 ②. 内细胞团 ③. 胎儿的各种组织
（4） ①. 胚胎分割 ②. 100% ③. DNA分析
【解析】
【分析】分析题图：图示为培育优良种牛的过程图解，其中①表示体外受精过程；②表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞；③为早期胚胎发育过程，其中a为滋养层、b为囊胚腔、c为内细胞团；④表示胚胎分割移植；⑤表示胚胎移植过程。
【小问1详解】
哺乳动物体内受精作用发生的场所是输卵管。防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应。
【小问2详解】
③为早期胚胎发育过程，胚胎发育到桑葚胚或囊胚阶段时可将其移植到代孕动物的子宫内。
【小问3详解】
a为滋养层、b为囊胚腔、c为内细胞团，a滋养层将来发育成胎盘或胎膜，c内细胞团将来发育成胎儿的各种组织。
【小问4详解】
④表示胚胎分割移植，来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此由一个囊胚经④过程得到的B、C牛性别相同。在胚胎移植前可以取囊胚的滋养层细胞做DNA分析鉴定性别。
43. 为降低人类乳腺癌治疗药物副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），过程如下图所示。
（1）动物细胞培养时，可以用____处理动物组织，得到分散的组织细胞，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖的原因是____（至少回答两点）。
（2）为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，每隔2周用取自____的特定抗原注射小鼠1次，共注射3次。最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的生物诱导法是____。为了获得杂交瘤细胞，应将诱导融合后的细胞放在____培养基上进行培养。
（3）通过过程②得到的细胞还必须经过过程③克隆化培养和____才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是____。
（4）单克隆抗体的优点是____。单克隆抗体是ADC中的____（填“a”或“b”）部分。
【答案】（1） ①. 胰蛋白（或胶原蛋白）（或胰蛋白酶、胶原蛋白） ②. 细胞密度过大、培养液中营养物质缺乏、有害代谢产物积累
（2） ①. 人的乳腺癌细胞 ②. 灭活的病毒 ③. 特定的选择培养
（3） ①. 抗体检测 ②. 既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体
（4） ①. 能准确地识别抗原的细微差异，与特定的抗原发生特异性结合，并且可以大量制备（或特异性强、灵敏度高、可大量制备） ②. a
【解析】
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。
【小问1详解】
动物细胞培养时，可以用胰蛋白（或胶原蛋白）酶处理动物组织，得到分散的组织细胞，获得单细胞悬液，为了保证细胞正常生命活动，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖，其原因应该为细胞密度过大、培养液中营养物质缺乏、有害代谢产物积累，进而导致生长停止。
【小问2详解】
为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，每隔2周用取自人的乳腺癌细胞的特定抗原注射小鼠1次，共注射3次。最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的生物诱导剂是灭活的病毒，该方法是诱导动物细胞融合特有的方法。为了获得杂交瘤细胞，应将诱导融合后的细胞放在特定的选择培养基上进行培养，进而筛选出杂交瘤细胞。
【小问3详解】
通过过程②得到的细胞还必须经过过程③克隆化培养和抗体检测才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，此时获得的杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。
【小问4详解】
单克隆抗体由于纯度高，因而表现出的典型优点是特异性强、灵敏度高，由于杂交瘤细胞可以无限增殖，因此单克隆抗体具能准确地识别抗原的细微差异，与特定的抗原发生特异性结合，并且可以大量制备的优点；ADC药物是利用单克隆抗体的导向作用，起到定向作用到癌细胞的作用，其对应图中的a部分。
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