山东省滨州市部分校2022-2023学年高二下学期5月联考生物试卷（含答案）

这是一份山东省滨州市部分校2022-2023学年高二下学期5月联考生物试卷（含答案），共21页。试卷主要包含了单选题，多选题，读图填空题，填空题，实验题等内容，欢迎下载使用。

山东省滨州市部分校2022-2023学年高二下学期5月联考生物试卷
学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________

一、单选题
1、霍乱弧菌能合成、分泌霍乱毒素，霍乱毒素是由1个A酶亚基和5个B受体结合亚基组成的蛋白质，B受体结合亚基可以通过结合人体肠细胞细胞膜特定结构，引导霍乱毒素进入肠细胞，使人患上急性腹泻疾病。下列叙述错误的是( )
A.霍乱弧菌细胞内核酸、核苷酸、含氮碱基种类分别为2、8、5种
B.霍乱毒素的分泌过程需要内质网和高尔基体的加工
C.霍乱弧菌合成霍乱毒素需要核酸-蛋白质复合物参与
D.人体细胞膜上与B受体结合亚基结合的组分为糖蛋白或糖脂
2、脂筏模型被认为是对细胞膜流动镶嵌模型的重要补充，脂筏是动物细胞膜上富含胆固醇和鞘磷脂（磷脂的一种）的微结构域，脂筏就像一个蛋白质停泊的平台，该结构区域相对稳定、分子排列较紧密、流动性较低。下列叙述错误的是( )

A.脂筏区域的主要成分是脂质和蛋白质
B.脂筏区域与细胞的免疫、物质运输等功能有关
C.脂筏模型表明脂质分子在膜上的分布是均匀的
D.脂筏区域流动性较低可能与脂质的种类、蛋白质的种类和数量有关
3、核孔是一组蛋白质以特定的方式排布形成的结构，被称为核孔复合物（NPC），它是细胞核与细胞质之间进行物质交换的重要结构。下列有关叙述正确的是( )
A.人体成熟红细胞含有大量的血红蛋白，可推测其NPC的数量较多
B.核仁是合成rRNA和核糖体蛋白的场所
C.附着NPC的核膜为双层膜结构，可与内质网膜直接相连
D.蛋白质和DNA等大分子可以通过NPC进出细胞核
4、图甲是人的红细胞长时间处在不同浓度的NaCl溶液中，红细胞的体积（V）与初始体积（V0）之比的变化曲线；图乙是某植物细胞在一定浓度的KNO3溶液中原生质体相对体积的变化情况。下列分析正确的是( )

A.由图甲可知人体红细胞中NaCl的浓度约为150mmol·L-1
B.图乙中该植物细胞的细胞液浓度b点大于a点
C.水分子进入红细胞的过程需要载体蛋白的协助
D.将该植物细胞放入一定浓度的蔗糖溶液中，也可观察到图乙中的现象
5、细胞在受到物理或化学因素刺激后，胞吞形成多囊体。多囊体可以与溶酶体融合，其中内容物被水解酶降解，V-ATPase是溶酶体膜上的蛋白复合物，作为质子泵维持溶酶体正常的pH；多囊体也可与膜融合后释放到胞外，形成外泌体（如下图所示）。外泌体内部包含蛋白质、RNA片段等多种物质，可被其他细胞吸收。下列说法正确的是( )

A.多囊体的形成体现了细胞膜的功能特点
B.外泌体释放到细胞外的过程受温度的影响，与膜蛋白无关
C.抑制V-ATPase的功能，血浆中的外泌体将减少
D.外泌体可完成细胞间的物质传递、信息交流
6、分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的菌落。平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种方法，下列描述正确的是( )
A.两种方法的培养基制备中，均是定容后直接高压蒸汽灭菌
B.平板划线法中，经数次划线后培养，可以分离得到单菌落
C.两者不仅能分离和纯化微生物，也都能实现微生物的计数
D.两种方法都要将菌液进行一系列的梯度稀释
7、食品工业是微生物最早开发和应用的领域，一直以来，与发酵有关的食品工业的产量和产值都居于发酵工业的首位。下列相关叙述错误的是( )
A.利用乳酸菌在青贮饲料中乳酸发酵产生有机酸而实现饲料保鲜
B.利用酵母菌等菌种的发酵工程生产的单细胞蛋白，可作为食品添加剂
C.以大豆为主要原料，利用黑曲霉水解其中的蛋白质，经淋洗、调制成酱油
D.发酵是指在无氧的条件下，利用微生物代谢将原料转化为人类所需要的产物的过程
8、中国科学家构建了一株嗜盐单胞菌，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，发酵生产聚羟基脂肪酸酯（PHA）等新型高附加值可降解材料，以提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图。下列说法错误的是( )

A.为获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株，可将蔗糖作为液体培养基的唯一碳源
B.提高发酵液中盐的浓度，一定程度上可以避免杂菌污染
C.搅拌可以增加氧气供应，并使菌种与营养物质充分接触
D.可以用细菌计数板进行计数，随时检测培养液中活菌浓度
9、动物的某种退行性神经疾病由基因t突变为基因T导致。随着生物工程技术的发展和基因编辑（CRISPR/Cas9）技术的出现，为治疗该疾病提供了如下新思路。以下说法错误的是( )

A.①过程需采用MⅡ期卵母细胞
B.ES细胞能分化为动物体内任何一种组织细胞
C.过程④的培养基中需要添加诱导分化因子
D.移植的神经干细胞会成为抗原，引发免疫排斥反应
10、抗体—药物偶联物（ADC）通过细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。在设计一款ADC药物之前，得先确定靶点。HER2蛋白是人类细胞表皮生长因子受体，可做理想的肿瘤治疗靶标，下列说法错误的是( )
A.由题意可知，HER2蛋白在肿瘤细胞中表达水平比正常细胞高很多
B.将纯化的人HER2蛋白多次免疫小鼠以获得相应的B细胞
C.ADC进入肿瘤细胞时，依赖抗HER2的抗体
D.制备抗HER2抗体过程中，在选择培养基中筛选得到所需的杂交瘤细胞
11、紫花苜蓿（2n=32）是利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉（2n=12）的根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉的根为材料培育抗鼓胀病的苜蓿新品种。下列说法正确的是( )

A.可使用灭活病毒诱导两种细胞融合
B.②过程存在基因的选择性表达
C.培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值高时，有利于芽的分化
D.用纤维素酶和果胶酶处理实验材料获得的原生质体由细胞膜、液泡膜及两膜之间的细胞质组成
12、下列有关以洋葱为材料进行“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是( )
A.粗提取DNA的原理是DNA与蛋白质的分子量大小、空间构象、溶解度不同
B.过滤研磨液的目的是获取研磨液中的沉淀物
C.离心后上清液中加入95%冷酒精，析出的白色丝状物是DNA
D.鉴定DNA时将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水加热
13、构建基因表达载体过程中，为保证目的基因与质粒正确连接一般选用两种限制酶，下列说法错误的是( )
A.选择的原则是酶切后目的基因两端的黏性末端、质粒两端的黏性末端均不同
B.两种限制酶的识别序列不同也可能出现目的基因和质粒的反向连接
C.每个正确连接的基因表达载体的构建伴随两个磷酸二酯键的形成
D.为避免破坏目的基因等关键组件的结构，可能会用到三种或四种限制酶
14、CD3D严重联合免疫缺陷是由CD3D基因突变引起的，该突变阻止了T细胞生长发育所需的CD3D蛋白的合成。科研人员将CD3D基因和His标签基因连接起来构建融合基因，并构建重组基因表达载体，以研究其致病机制。下图为载体、CD3D基因的结构示意图，欲将标签基因连接在CD3D基因编码区的末端。下列说法错误的是( )

A.CD3D基因转录过程以α链为模板链
B.引物A的5'端应该添加限制酶MunⅠ的识别序列
C.引物B的5'端增加相应的His标签基因的编码序列和限制酶XhoⅠ识别序列
D.融合基因的插入方向影响表达蛋白质的结构
15、叶绿体基因组为闭合环状双链DNA分子，利用基因工程技术将抗虫基因插入叶绿体基因组的方法具有多种优点。下列叙述正确的是( )
A.叶绿体内的双链DNA分子与蛋白质结合后，形成结构紧密的染色体
B.叶绿体具有母系遗传的特点，可使插入的目的基因不会随着种子广泛传播
C.转抗虫基因的植物，会导致昆虫群体抗性基因频率增加
D.与线粒体相比，导入叶绿体基因组的外源基因将会在更多的植物细胞中表达
16、细胞自噬是真核生物细胞内普遍存在的一种自稳机制，基本过程如图1。Anicequol是从海洋真菌中分离得到的具有抗肿瘤作用的化合物。某科研团队开展了Anicequol抑制肝肿瘤细胞（HepG2）自噬的研究，实验结果如图2。同时科研人员在透射电子显微镜下观察到随着Anicequol浓度的增大，HepG2细胞中自噬性溶酶体减少，自噬体增多。下列相关说法错误的是( )

A.与溶酶体相比，自噬体在结构上的主要特征是具有双层膜
B.在细胞自噬中起主要作用的是溶酶体合成的多种水解酶
C.Anicequol的抗肿瘤效果受到浓度和作用时间的影响
D.Anicequol的作用可能是抑制自噬体和溶酶体的融合
二、多选题
17、内质网驻留蛋白是经核糖体合成、内质网折叠和组装后，留在内质网中的蛋白质。若该蛋白被错误地以COPⅡ膜泡形式输出到高尔基体，则会被高尔基体以COPⅠ膜泡形式送回内质网，该过程如图所示。高尔基体膜上的KDEL受体特异性识别并结合含有短肽序列KDEL的蛋白质是形成COPⅠ膜泡的关键，二者的亲和力随pH的升高会逐渐减弱。下列说法正确的是( )

A.内质网驻留蛋白的加工需要高尔基体参与
B.内质网腔蛋白“逃逸”到高尔基体后再运回内质网的过程消耗能量
C.消化酶和抗体中也可能含有KDEL序列
D.高尔基体内所在区域的低pH条件利于KDEL受体与KDEL序列的结合
18、可利嗜热产氢菌是一种严格厌氧菌，其最适生长温度为65℃，最适pH为7.0～7.4，可利用、尿素、葡萄糖、蔗糖和淀粉生长。青霉素G和链霉素可抑制其生长，但对氯霉素不敏感。下图为从工业酵母的生物制品中分离纯化可利嗜热产氢菌过程示意图，相关说法正确的是( )

A.图中使用的培养基可以尿素为氮源，淀粉为碳源
B.实验操作过程中，需先将样品灭菌处理
C.涂布培养时可通过在培养基中添加一定量的氯霉素以达到筛选目的
D.菌液涂布均匀后应将平板倒置放入65℃恒温无氧培养箱中培养
19、A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌（Sau）引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者分别将含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于Sau均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列叙述错误的是( )

A.实验中可通过抑菌圈的大小来判断抗生素的抑菌效果
B.配置培养基时应将培养基的pH值调至微酸性
C.滤纸片b周围出现的菌落，是抗生素B诱导Sau发生了基因突变的结果
D.在本实验条件下，Sau产生耐药性的突变对其自身而言是有利变异
20、IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免疫缺陷（SCID）患儿的IKKβ基因编码区第1183位碱基T突变为C。为研究该患儿发病机制，研究人员应用大引物PCR定点诱变技术获得突变基因，如图所示。下列说法正确的是( )

A.PCR1中使用的引物有引物A、引物C
B.PCR2中使用的引物有引物B、大引物a
C.PCR1过程需要扩增3轮才能获得目标产物
D.PCR2过程中，为减少错误DNA片段的产生可适当升高复性温度
三、读图填空题
21、蛋白质在游离的核糖体合成开始后，会分选与转运到特定的功能位点，其分选途径大致分为两条：一条为后翻译转运途径，蛋白质在游离核糖体上完成翻译后进行转运；另一条为共翻译转运途径，核糖体中合成一小段肽链后，在内质网定向信号序列的引导下边翻译边转入内质网腔。多肽链中是否有信号序列以及信号序列的种类将影响蛋白质的去向。具体过程如图所示。

（1）共翻译转运途径形成蛋白质过程中，肽链的盘曲折叠发生在细胞的___________上。
（2）胰岛素合成过程属于____________（填“后翻译”或“共翻译”）转运途径，通过该途径形成的蛋白质，除了分泌到细胞外，还可能运往细胞的____________等结构。
（3）核糖体合成的肽链含定向信号序列，而从内质网输出的蛋白质不含该信号序列，原因可能是_____________。
（4）内质网膜出芽形成的囊泡包裹着蛋白质通过__________（细胞结构）定向运输到高尔基体，高尔基体对蛋白质进行_____________，该过程所需的能量来自_____________（生理过程）。
（5）含有核靶向序列的蛋白质能进入细胞核发挥作用，请列举两种此类蛋白质_____________。
22、为改良猪肉品质，调整猪肉中不同脂肪酸的含量，研究者利用相关技术进行了下列研究。

I.摄入过多的饱和脂肪酸会增加患心血管疾病的风险，为降低猪肉中饱和脂肪酸的含量，研究者利用CRISPR-Cas9基因编辑技术，定向敲除影响饱和脂肪酸代谢的关键基因（机理如图1）。
（1）脂肪酸在人体组织细胞中通常以___________（填化合物名称）形式存在。
（2）CRISPR-Cas9系统能精准敲除靶基因，其作用机理是gRNA与靶基因进行___________；为提高敲除的效率，一般将CRISPR-Cas9系统的打靶区域设计为待敲除基因的___________（填“外显子”或“内含子”），提高敲除靶基因准确性的方案还有___________。
Ⅱ.多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸，猪肉是我国最主要的肉类消费品，提高其PUFAs含量对居民健康具有重要意义。为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1，培育转fal基因猪，操作过程如图2。

（1）利用PCR技术扩增fat1基因时，应在两种引物的一端分别加上限制酶____________别与切割的序列。
（2）图2中的连接产物需先导入大肠菌中的原因是___________。
（3）将重组表达载体转染猪成纤维细胞，另设一组空白对照。48小时后于荧光显微镜下观察到___________，说明转染成功。然后以转基因细胞为核供体构建克隆胚胎，最终获得转fat1基因猪。
（4）研究者提取转基因猪的基因组DNA，利用___________技术检测fat1基因是否成功整合在猪基因组DNA中。
四、填空题
23、气孔的张开与保卫细胞膜上的H+-ATPase有关。H+-ATPase利用ATP水解释放的能量将H+运到细胞外，同时将细胞外的K+运进保卫细胞，细胞吸水，气孔张开。科研人员将一种K+载体蛋白基因导入拟南芥，并使其在拟南芥保卫细胞中成功表达，该载体蛋白被蓝光诱导激活后会利用ATP水解释放的能量将K+运进保卫细胞，从而能调控气孔快速开启与关闭。回答下列问题：
（1）K+载体蛋白基因能在拟南芥保卫细胞中成功表达，与基因表达载体中_____________元件有关。
（2）拟南芥保卫细胞通过H+-ATPase吸收K+的方式是____________，判断依据是____________。
（3）在蓝光照射条件下，与野生型相比，转基因拟南芥气孔开启的速度快，其原因是____________。
（4）为验证K+载体蛋白可提高植物体气孔开合速率，请写出实验思路____________。
五、实验题
24、精喹禾灵在土壤中可被微生物分解，从土壤中筛选出能高效降解精喹禾灵的微生物，可应用于污染的土壤和水体的修复。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解精喹禾灵的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和精喹禾灵，乙的组分为无机盐、水、精喹禾灵和Y。

回答下列问题：
（1）乙培养基中的Y物质是___________。甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即___________。
（2）实验过程中，通常采用___________方法对培养基进行灭菌。图中甲培养基的作用是___________。
分离和纯化培养过程中必须使用固体培养基，理由是___________。
（3）若要测定淤泥中能降解精喹禾灵的细菌细胞数，可采用什么方法? ___________。
（4）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×10⁷个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证平板上长出的平均菌落数为200个，则应将摇瓶M中的菌液稀释___________倍。
（5）通过上述分离过程，乙培养基上获得10个菌落。如何从这些菌落中进一步筛选能高效降解精喹禾灵的菌种?请写出基本思路：___________。
25、供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAm6A修饰（即RNA某位点的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者进行系列实验。
（1）核移植过程采用___________法去除卵母细胞的细胞核，核移植后的重构胚发育至___________阶段可利用___________技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体。从囊胚的___________中分离获得的具有自我更新和分化潜能的胚胎干细胞可用于医学研究。
（2）科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了诱导多能干细胞（iPS细胞），该诱导过程类似于植物组织培养技术中的___________过程。iPS细胞应用前景优于胚胎干细胞，理由是___________。
（3）RNAm6A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如图1、2。

结果表明，核供体细胞的分化程度越高，___________越低。
（4）研究发现甲组细胞内甲基转移酶M的表达水平高于乙组，为进一步探究甲基转移酶M与核移植胚胎发育能力的关系，研究者进行如下实验：
组别
对核供体细胞的处理方法
核移植胚胎发育能力的检测结果
胚胎总数
胚胎卵裂率
囊胚率
对照组
导入空载体
187
59.4%
16.8%
实验组
导入M基因过表达载体
185
71.3%
27%
导入空载体是为了排除___________等对实验结果的干扰。请根据实验结果推测，甲基转移酶M影响核移植胚胎发育能力的机制是___________。
参考答案
1、答案：B
解析：A、霍乱弧菌细胞内有2种核酸（DNA和RNA），8种核苷酸（4种脱氧核苷酸和4种核糖核苷酸），5种含氮碱基（A、U、T、C、G），A正确；
B、霍乱弧菌是原核生物，细胞中没有内质网和高尔基体，B错误；
C、霍乱弧菌合成霍乱毒素（本质为蛋白质）需要核糖体（核酸-蛋白质复合物）参与，C正确；
D、细胞膜的表面除含有糖蛋白外，还含有糖类与脂质分子结合而成的糖脂，它们都与细胞识别和信息传递有关。因此，人体细胞膜上与B受体结合亚基结合的组分为糖蛋白或糖脂，D正确。
故选B。
2、答案：C
3、答案：C
解析：A、人体成熟红细胞含有大量的血红蛋白，人体成熟红细胞没有细胞核，则可推测其没有NPC,A错误；
B、核仁是与RNA和合成和核糖体形成有关，而合成核糖体蛋白的场所是核糖体，B错误；
C、核膜外连内质网，因此附着有NPC的核膜可与内质网膜直接相连，C正确；
D、蛋白质和RNA等大分子可以通过NPC进出细胞核，DNA不能通过NPC,D错误。
故选C。
4、答案：B
5、答案：D
解析：A、多囊体的形成体现了细胞膜具有一定的流动性，这是细胞膜的结构特点，A错误；B、外泌体释放到细胞外的过程为胞吐，不仅受温度的影响，也与膜蛋白有关，B错误；C、V-ATPase是溶酶体膜上的蛋白复合物，作为质子泵维持溶酶体正常的pH，多囊体可以与溶酶体融合，其中内容物被水解酶降解，多囊体也可与膜融合后释放到胞外，形成外泌体，当抑制V-ATPase的功能，多囊体与溶酶体融合减少，释放到细胞膜外的增多，外泌体将增多，C错误； D、外泌体是由细胞释放的，内含蛋白质、RNA等物质，其携带的物质可起到物质传递、信息交流的作用，D正确。
故选D。
6、答案：B
解析：A、两种方法的培养基制备中，均是定容后调节pH，然后高压蒸汽灭菌，A错误；
B、在培养基表面连续划线的操作需要接种环，每次划线都从上一区的末端开始，这样可以将聚集的菌种逐步稀释分散开，最终获得单菌落，B正确；
C、两者都能分离和纯化微生物，稀释涂布平板法可以计数，平板划线法不能计数，C错误；
D、平板划线法不需要梯度稀释，D错误。
故选B。
7、答案：D
解析：A、在青贮饲料中添加乳酸菌，通过乳酸菌的发酵，可以提高饲料品质，使饲料保鲜，同时提高动物免疫力，A正确；
B、用酵母菌等生产的单细胞蛋白可作为食品添加剂，甚至制成人造肉供人们直接食用，B正确；
C、酱油产品的生产，以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶的霉菌进行发酵，霉菌产生的蛋白酶和肽酶将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制成的酱油产品，C正确；
D、发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程，不一定是无氧呼吸，D错误。
故选D。
8、答案：D
解析：A、蔗糖作为液体培养基的唯一碳源，可获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株，A正确；
B、嗜盐单胞菌需要一定的盐浓度，其他微生物则不能在较高的盐浓度下生长，所以提高发酵液中盐的浓度，一定程度上可以避免杂菌污染，B正确； C、发酵系统中需要通入空气，说明嗜盐单胞菌是好氧菌，则搅拌可以增加氧气供应，并使菌种与营养物质充分接触，有利于发酵，C正确；
D、可以用细菌计数板进行计数，随时检测培养液中总菌（死细菌也会统计在内）浓度，D错误。
故选D。
9、答案：D
解析：A、MⅡ时期的卵母细胞体积大，易操作，细胞质中含有促使细胞核全能性表达的物质和营养条件，所以体细胞核移植技术要选择MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞，A正确；
B、ES细胞的细胞核大，核仁明显，具有发育的全能性，可以诱导分化成动物体内任何一种组织细胞，B正确；
C、在培养液中加入诱导分化因子，就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化，用于患者的组织器官移植，C正确；
D、由于移植的神经干细胞的遗传物质与患者相同，不会成为抗原，因而不会发生免疫排斥，可用于治疗该退行性神经疾病，D错误。
故选D。
10、答案：D
解析：A、HER2蛋白是人类细胞表皮生长因子受体，可做理想的肿瘤治疗靶标，则HER2蛋白在肿瘤细胞中表达水平比正常细胞高很多，A正确；
B、可用纯化蛋白多次免疫小鼠，使其发生特异性免疫，以获得更多产生抗体的B淋巴细胞，B正确：
C、抗体—药物偶联物（ADC）通过细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，故ADC进入肿瘤细胞需依赖抗HER2的抗体，C正确；
D、制备抗HER2抗体过程中，在选择培养基中筛选得到所需的杂交瘤细胞，进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体，D错误。
故选D。
11、答案：B
解析：A、过程①表示原生质体融合，常用物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG），灭活的病毒常适用动物细胞融合，一般不用于植物细胞融合，A错误；
B、②过程分别表示脱分化，脱分化的过程中，基因的表达是按照一定的时间和顺序开关（表达和关闭）的，有的基因要先启动，然后是其下游的基因，而有些基因之后会关闭，B正确；
C、在组织培养中，生长素和细胞分裂素的比例影响着植物器官分化，通常比例低时，有利于芽的分化；比例高时，有利于根的分化，C错误；
D、原生质层是由细胞膜、液泡膜及两膜之间的细胞质组成，原生质体是由植物细胞去除细胞壁后形成的，包括细胞核等结构，D错误。
故选B。
12、答案：C
解析：A、粗提取DNA的原理是DNA与蛋白质的溶解度不同，DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同，A错误；
B、DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，则过滤研磨液的目的是获取研磨液中的上清液，B错误；
C、DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精，因此在溶有DNA的滤液中加入体积分数为95%的冷酒精后，用玻璃棒轻缓搅拌，这样可以进一步纯化DNA,C正确；
D、鉴定DNA时将丝状物溶解以后加入到二苯胺试剂中进行沸水加热，D错误。
故选C。
13、答案：C
解析：A、目的基因两端的黏性末端不同，被切开的质粒两端的黏性末端也不同，可以避免目的基因与载体反向连接，还能减少目的基因与目的基因、载体与载体的连接，提高了重组质粒的比例，A正确；B、两种限制酶的识别序列不同，若是具有相同的黏性末端，也可能出现目的基因和质粒的反向连接，B正确；C、每个正确连接的基因表达载体的构建伴随四个磷酸二酯键的形成，C错误； D、构建基因表达载体时，要保证目的基因，启动子，终止子等关键组件结构的完整性，故获取目的基因和运载体时可能需要用到三种或者四种限制酶，D正确。
故选C。
14、答案：A
解析：A、基因的转录方向为从模板链的3'到5'，再结合图可知，CD3D基因转录过程以链为模板链，A错误；
B、目的基因要插入到启动子和终止子之间，故切割CD3D基因的两种限制酶为MunⅠ和XhoⅠ，结合转录的方向为从启动子到终止子，因此引物A的5'端应该添加限制酶MunⅠ的识别序列，引物B的5'端应该添加限制酶XhoⅠ的识别序列，B正确；
C、欲将标签基因连接在CD3D基因编码区的末端，也就是在右图中的右侧，再结合B选项的分析可知，引物B的5'端增加相应的His标签基因的编码序列和限制酶XhoⅠ识别序列，C正确；
D、融合基因的插入方向会影响氨基酸的排列顺序，从而影响表达蛋白质的结构，D正确。
故选A。
15、答案：C
解析：A、染色体由DNA分子与蛋白质结合形成，但叶绿体内基因组为闭合环状双链DNA分子，没有与蛋白质结合形成染色体，A错误；B、叶绿体具有母系遗传的特点，利用叶绿体基因组进行转基因操作可使插入的目的基因不会随着花粉广泛传播，有效防止转基因花粉的传播即防止基因污染，增加了转基因产品的生物安全性，但是会随着种子传播，B错误； C、转抗虫基因的植物，会对昆虫进行选择，导致昆虫群体抗性基因频率增加，C正确；D、植物细胞都有线粒体，不一定有叶绿体，则与线粒体相比，导入叶绿体基因组的外源基因将会在更少的植物细胞中表达，D错误。
故选C。
16、答案：B
17、答案：BD
解析：A、内质网驻留蛋白是指经核糖体合成、内质网折叠和组装后，留在内质网中的蛋白质，这说明内质网驻留蛋白的加工不需要高尔基体的加工，A错误； B、内质网腔蛋白逃逸到高尔基体后再运回内质网，依赖于COPⅠ膜泡，COPⅠ膜泡形成过程中涉及胞吐，故需要消耗能量，B正确；C、消化酶和抗体属于分泌蛋白，其合成和分泌过程经过的途径依次为核糖体、内质网、高尔基体和细胞膜，因此，可能不具有KDEL序列，否则会运送到内质网，C错误； D、内质网逃逸蛋白中的KDEL序列和高尔基体顺面膜囊上的KDEL受体识别及结合是COPⅠ膜泡形成的关键，二者的亲和力随pH的升高会逐渐减弱，据此可推测，图中高尔基体处于低即pH，低即pH能促进KDEL序列与其受体的结合，D正确。
故选BD。
18、答案：ACD
19、答案：BC
解析：A、实验中可通过抑菌圈的大小来判断抗生素的抑菌效果，含等剂量抗生素接种到培养基上，其中抗生素A的抑菌圈最大，治疗Sau感染引起的肺炎效果最好，A正确；B、培养细菌时需将印pH调至中性或微碱性，B错误； C、滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，可能是某些Sau发生了基因突变，具有耐药性，但抗生素B只起到了选择作用，不能诱导Sau发生耐药性突变，C错误；D、在本实验中，能够耐药的Sau生存下来，不能耐药的Sau不能生长繁殖，因此在抗生素的选择下，Sau产生耐药性的变异对Sau而言是有利变异，D正确。
故选BC。
20、答案：AD
21、答案：（1）内质网
（2）共翻译；溶酶体和细胞膜
（3）信号序列在内质网被切除
（4）细胞骨架；修饰加工（加工、分类和包装）；呼吸作用
（5）DNA聚合酶、RNA聚合酶、解旋酶、组蛋白
解析：（1）由图可知，核糖体中合成一小段肽链后，在信号序列的引导下边翻译边转运入内质网腔，蛋白质在内质网为盘曲折叠为共翻译转运途径。
（2）胰岛素是分泌蛋白需要内质网和高尔基体的加工，所以胰岛素的合成属于共翻译转运途径，除此以外，溶酶体和细胞膜上的蛋白质也经过共翻译途径。
（3）核糖体合成的肽链含定向信号序列，信号序列在内质网被切除，所以从内质网输出的蛋白质不含该信号序列。
（4）内质网膜出芽形成的囊泡包裹着蛋白质可通过细胞骨架定向运输到高尔基体，高尔基体对蛋白质进行修饰加工，该过程需要细胞呼吸提供能量。
（5）DNA聚合酶、RNA聚合酶、解旋酶、组蛋白发挥作用的场所是细胞核。
22、答案：Ⅰ.（1）磷脂、脂肪
（2）特定的碱基互补配对；外显子；适当延长gRNA的长度
Ⅱ.（1）EcoRI和BamHI（无先后顺序）
（2）连接产物为混合物，需先导入大肠杆菌筛选正确的重组表达载体，再导入猪成纤维细胞，以提高转基因的成功率
（3）转染重组表达载体的猪成纤维细胞有绿色荧光，而空白对照组无绿色荧光
（4）PCR扩增
23、答案：（1）启动子
（2）主动运输；需要消耗能量、需要载体蛋白的协助
（3）转基因拟南芥保卫细胞膜上存在两种运输K+的载体蛋白，吸收K+的速度快，渗透压升高快，吸水更快
（4）取相同数量的转基因植株与野生型植株，黑暗条件下培养一段时间后，同时给予相同强度的蓝光刺激，分别检测其气孔开合速率
解析：（1）启动子是RNA聚合酶识别与结合的位点，用于驱动基因转录，K+载体蛋白基因能在拟南芥保卫细胞中成功表达，与基因表达载体中启动子有关。
（2）分析题意可知，拟南芥保卫细胞通过H+-ATPase吸收K+需要消耗能量、需要载体蛋白的协助，其运输方式是主动运输。
（3）据题可知，气孔的张开与保卫细胞膜上的H+-ATPase有关，由于转基因拟南芥保卫细胞膜上存在两种运输K+的载体蛋白吸收K+的速度快，渗透压升高快，吸水更快，故在蓝光照射条件下，与野生型相比，转基因拟南芥气孔开启的速度快。
（4）实验目的是验证K+载体蛋白可提高植物体气孔开合速率，则实验的自变量是K+载体蛋白的存在情况，因变量是气孔开合速率，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故可设计实验如下：取相同数量的转基因植株与野生型植株，黑暗条件下培养一段时间后，同时给予相同强度的蓝光刺激，分别检测其气孔开合速率。
24、答案：（1）琼脂；水、碳源、氮源和无机盐
（2）高压蒸汽灭菌；选择和扩大培养降解精喹禾灵的菌种
固体培养基表面才能长出由单个微生物繁殖而成的菌落
（3）稀释涂布平板法或显微镜直接计数法
（4）104
（5）从乙培养基的10个菌落中挑取等量的菌种，分别接种到等量且浓度相同的含精喹禾灵的培养基上，其他条件适宜，培养一段时间，分别检测培养瓶中精喹禾灵的剩余量或浓度
解析：（1）微生物的分离和筛选一般使用选择培养基，而且是固体培养基。在固体培养基中要加凝固剂，所以物质Y是琼脂。甲乙两种培养基所含有的组分不同，但都含有水、无机盐、碳源、氨源。为细菌生长提供营养物质。
（2）对于培养基和容器，一般使用高压蒸汽灭菌。甲的组分为无机盐、水和精喹禾灵，为液体培养基，作用是选择和扩大培养降解精喹禾灵的菌种。分离和纯化培养过程中需要得到单菌落，而只有固体培养基表面才能长出由单个微生物繁殖而成的菌落，故需要用固体培养基。
（3）要测定淤泥中能降解精喹禾灵的细菌的细胞数，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，稀释涂布到乙培养基上，培养后进行计数，即采用稀释涂布平板法进行计数，还可以使用显微镜直接计数法。
（4）若要在每个平板上涂布0.1mL稀释液后的菌液，且每个平板上长出的菌落数不超过200个，则摇瓶M中的菌液稀释的倍数至少为2×107÷1000×100÷200=1×104倍。
（5）通过上述分离过程，乙培养基上获得10个菌落。从乙培养基的10个菌落中挑取等量的菌种，分别接种到等量且浓度相同的含精喹禾灵的培养基上，其他条件适宜，培养一段时间，分别检测培养瓶中精喹禾灵的剩余量或浓度，精喹禾灵的剩余量少的培养瓶中的菌种为能高效降解精喹禾灵的菌种。
25、答案：（1）显微操作；桑葚胚或囊胚；胚胎移植；内细胞团
（2）脱分化；iPS细胞诱导过程无须破坏胚胎，不涉及伦理问题
（3）RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率
（4）载体；甲基转移酶M提高RNAm6A甲基化水平，进而提高核移植胚胎的发育能力
解析：（1）核移植过程采用显微操作法去除卵母细胞的细胞核，胚胎移植的时期通常是桑甚胚或囊胚阶段可利用胚胎移植技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体。另外，从囊胚的内细胞团中分离获得的胚胎干细胞，由于具有自我更新和分化潜能，可用于医学研究，
（2）诱导多能干细胞（iPS细胞）的过程类似于植物组织培养技术中的脱分化过程。iPS细胞应用前景优于胚胎干细胞，理由是iPS细胞诱导过程无须破坏胚胎，不涉及伦理问题。
（3）由图1和图2分析可知，核供体细胞的分化程度越高，RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率越低。
（4）为了实验中为了排除载体对实验结果的影响，对照组应导入空载体。由表格数据可知，实验组导入M基因过表达载体胚胎卵裂率、囊胚率都有提高，说明M基因过表达产物甲基转移酶M，能提高核移植胚胎的发育能力，其作用机制可能是甲基转移酶M通过催化供体细胞核的RNAm6A修饰来提高核移植胚胎的发育能力。