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2022-2023学年辽宁省沈阳市重点高中联合体高二（下）期中生物试卷（含解析）
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这是一份2022-2023学年辽宁省沈阳市重点高中联合体高二（下）期中生物试卷（含解析），共28页。试卷主要包含了单选题，多选题，实验题，探究题等内容，欢迎下载使用。
2022-2023学年辽宁省沈阳市重点高中联合体高二（下）期中生物试卷
一、单选题（本大题共15小题，共15.0分）
1. 生态廊道指适应生物迁移或栖息的通道，可将保护区之间或与之隔离的其他生境（指物种或物种群体赖以生存的生态环境）相连。相关叙述错误的是（ ）
A. 生态廊道建设有利于保护生物多样性
B. 生态廊道建设是生物多样性保护中的就地保护措施
C. 生态廊道联系碎片化生境，可增加不同物种间的基因交流
D. 生态廊道建设可恢复珍稀物种生物数量，提高生态系统抵抗力稳定性
2. 为研究五台山生态旅游的可持续发展，研究人员对其进行了生态评估，结果如图。下列叙述错误的是（ ）
A. 游客所需的生态足迹越大，对生态环境的影响越大
B. 五台山风景名胜区生态承载力小于生态足迹，有利于可持续发展
C. 碳足迹生态赤字较大，可能是景区以燃油汽车交通为主造成的
D. 合理规划旅游活动，提倡错峰出游有利于改善生态旅游环境
3. 生态浮岛是利用生态工程原理，以水生植物为主体，以高分子材料等为载体，运用无土栽培技术降解富营养化水体中氮、磷含量的生态修复技术。如图是生态浮岛示意图，有关叙述错误的是（ ）
A. 生态浮岛最好选用净化污染物能力强的植物
B. 一座生态浮岛可以看作一个小型生态系统
C. 设计生态浮岛主要遵循生态工程的循环原理
D. 生态浮岛能吸收水体中氮、磷等，遮蔽阳光，减少藻类繁殖
4. 微生物分离和微生物计数技术广泛应用于人们的生产生活中，下列有关微生物分离和计数的叙述，正确的是（ ）
A. 分离土壤中的微生物时，需要先对土壤灭菌，再进行培养
B. 从土壤中分离特定细菌的纯培养物不需借助选择培养基
C. 使用血细胞计数板可以对冰激凌中的大肠杆菌进行观察和计数
D. 统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落
5. 某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，具体操作流程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 纯化培养阶段使用选择培养基，应以尿素为唯一氮源
B. 振荡的目的是增加尿素分解菌的浓度
C. 中间试管涂布的3个平板的菌落平均数大于160
D. 由图中数据可知10g土样中的菌株数约为1.6×108个
6. 在生产生活和科学实践中，经常通过消毒和灭菌来避免细菌的污染。下列说法错误的是（ ）
A. 灭菌是指杀死物体内外的一切微生物，包括芽孢和孢子
B. 水厂供应的自来水通常经过氯气消毒
C. 在实验室操作中，接种环在使用前应该灼烧灭菌
D. 牛奶的消毒常采用巴氏消毒法，该法可以杀死牛奶中的所有微生物
7. 由于发酵工程生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉等，在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用，下列有关发酵工程在食品工业上应用的描述，错误的是（ ）
A. 酱油是以大豆为主要原料，利用霉菌制作而成的
B. 啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，其中，酵母菌的繁殖在主发酵阶段完成，大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段完成
C. 味精是谷氨酸棒状杆菌发酵产生的谷氨酸经过一系列处理而获得的
D. 由于酶制剂催化效率高、专一性强、作用条件温和，因此在使用时要考虑酶制剂的使用量、底物的种类以及适宜的温度和pH
8. 植物细胞工程在农业、医药等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 取草莓茎尖进行植物组织培养可获得脱毒苗
B. 玉米花粉粒经花药离体培养得到的植株能稳定遗传
C. 红豆杉细胞经植物细胞培养技术可工厂化生产紫杉醇
D. 可采用诱变处理烟草愈伤组织的方法来获得烟草抗盐碱突变体
9. 制备新型冠状病毒单克隆抗体的简要过程如下：给小鼠注射N蛋白（新型冠状病毒重要的标志蛋白）→从脾脏中获取细胞①→诱导细胞①与小鼠的细胞②融合→筛选出细胞③→克隆化培养和抗体检测，获得细胞④。上述过程的细胞①～细胞④中，可能不具有增殖能力的是（ ）
A. 细胞① B. 细胞② C. 细胞③ D. 细胞④
10. 下列生物工程中所用物质与其发挥的作用，对应不正确的是（ ）
A. 蛋白酶合成抑制剂——激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育
B. 重组质粒——携带外源基因进入受体细胞
C. 琼脂——为微生物生长提供碳源
D. DNA聚合酶——催化合成新的DNA子链
11. 某科研小组把人的诱导多能干细胞注入猪的早期胚胎中，成功培育出人猪嵌合体胚胎，并在猪体内孕育了3-4周后才终止妊娠。下关说法错误的是（ ）
A. 实验过程需要利用体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术
B. 诱导多能干细胞可以由成体的成纤维细胞转化而来
C. 若成功培育出“人猪嵌合体”将面临巨大的伦理道德挑战
D. 该研究为在动物内培育出可供移植的人类器官提供了可能
12. 大肠杆菌中的EcoRⅠ酶能够专一性识别CAATTC序列，并在C与A之间将这段序列剪开。该酶属于（ ）
A. DNA连接酶 B. RNA聚合酶 C. 限制性核酸内切酶 D. DNA聚合酶
13. 采用基因工程技术培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成人凝血因子且只存在于乳汁中。下列有关叙述不正确的是（ ）
A. 该过程中将目的基因导入受体细胞常用的方法是显微注射法
B. 将含有人凝血因子基因的表达载体导入羊乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器
C. 该转基因羊产生的生殖细胞中可能会含有人凝血因子基因
D. 与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别等限制，受体来源更广泛
14. 科学家为提高玉米中赖氨酸的含量, 计划将天冬氨酸激酶中第352位的苏氨酸变为异亮氨酸, 将二氢吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺变为异亮氨酸, 下列说法中, 正确的是( )
A. 蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异
B. 对天冬氨酸激酶的改造需要以基因工程为基础
C. 蛋白质工程操作过程中, 不需要酶和载体作为工具
D. 经改造后的玉米赖氨酸含量提高这一性状不可遗传
15. 以哺乳动物为研究对象的生物技术已获得了长足的进步。对生物技术应用于人类，在安全与伦理方面有不同的观点，下列叙述正确的是（ ）
A. 试管婴儿技术应全面禁止
B. 治疗性克隆不需要监控和审查
C. 生殖性克隆不存在伦理道德方面的风险
D. 我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
二、多选题（本大题共5小题，共10.0分）
16. 图甲为果酒和果醋的制作装置，图乙表示制作过程中的物质变化，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 过程①②都只能发生在缺氧的条件下
B. 制作果酒时应关闭阀b,适时打开阀a排气
C. 制作果醋时需打开阀b通气，打开阀a排气
D. 过程①～④所需的最适温度基本相同
17. 获取植物或动物体的组织，进行表面消毒处理后，用相关酶处理并分散成单个细胞，置于人工培养基中培养，可获得植物愈伤组织或大量动物细胞，用于生产。这两种细胞培养的共同点是（ ）
A. 人工培养基成分相同 B. 都需要定期更换培养液
C. 培养的原理完全相同 D. 培养过程均需无菌技术
18. 在基因工程操作中，科研人员利用识别两种不同序列的限制酶（R1和R2）处理基因表达载体，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，结果如图所示。以下相关叙述正确的是（ ）
A. 该载体最可能为环状DNA分子
B. 两种限制酶在载体上各有一个酶切位点
C. 限制酶R1与R2的酶切位点最短相距约200bp
D. 电泳过程中DNA的迁移速度与其在缓冲液中的溶解度有关
19. 如图为蛋白质工程操作的基本思路，下列叙述正确的是（ ）
A. 代表蛋白质工程操作思路过程的正确顺序是④⑤①②③
B. 蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作
C. ①代表转录，②代表翻译，③代表折叠，④代表推测，⑤代表改造或合成
D. 蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计，通过基因合成或改造而实现
20. 下列有关生物技术的叙述，正确的是（ ）
A. 转基因植物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原属于转基因食物潜在的安全隐患
B. 转基因生物有可能被用于制造生物武器
C. 生殖性克隆人可以丰富人类基因的多样性
D. 为了国家安全，可以进行必要的、小范围的生物武器研究
三、实验题（本大题共2小题，共30.0分）
21. 某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动，具体步骤如下：
材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g,剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24h。
DNA粗提取：
第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨，用两层纱布过滤，取滤液备用；
第二步：先向6只小烧杯中分别注入10C滤液，再加入20mL体积分数为95%的酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上；
第三步：取6支试管，分别加入等量的质量浓度为2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物。
DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。
材料保存温度
花菜
辣椒
蒜黄
20℃
++
+
+++
-20℃
+++
++
++++
（“+”越多表示颜色越深）
分析上述实验过程，回答下列问题：
（1）该探究性实验的课题名称是： ______ 。
（2）DNA粗提取第二步中所用的酒精必须经过 ______ 才能使用。
（3）表中的颜色为 ______ ，颜色的深浅代表了 ______ 。
（4）DNA检测时沸水浴加热的目的是 ______ ，同时说明DNA对高温有较强的 ______ 。
（5）根据实验结果，得出结论并分析。
①结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存时，DNA的提取量较多。
②结论2：等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下， ______ 。
（6）氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是： ______ ，然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。
22. 科研小组利用基因工程技术将抗虫基因转入棉花细胞成功培育出抗虫棉，该技术所用的含抗虫基因的DNA与质粒上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示（不同限制酶的识别序列和酶切位点：BamHⅠ5′-G↓GATCC-3′，BclⅠ5′-T↓GATCA-3′，Sau3AⅠ5′-↓GATC-3′，HindⅢ5′-A↓AGCTT-3′）。请分析并回答下列问题：
（1）将抗虫基因转入棉花细胞前，可以通过PCR扩增获得大量抗虫基因，PCR扩增前应根据 ______ 设计引物。培育转基因棉花的核心工作是 ______ 。由图1和图2分析可知，研究人员应选择 ______ 两种限制酶切割含抗虫基因的DNA片段，在处理质粒的时候应选择 ______ 两种限制酶。
（2）蛋白酶抑制剂基因也是一种抗虫基因，某研究团队将胰蛋白酶抑制剂（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制剂（StPinlA）的基因单独或共同转化，获得转基因植株。
①将抗虫基因转入植物体内时，除了采用我国科学家独创的花粉管通道法，还经常采用 ______ 法，使用该方法时，应将抗虫基因插入到质粒的 ______ 区域。
②标记基因可用于检测目的基因是否导入，由图2可知，应选含有 ______ 的培养基筛选含有重组质粒的细胞。为了检测目的基因在受体细胞中是否稳定表达，在分子水平上的检测方法为 ______ 。
③图3为将胰蛋白酶抑制剂（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制剂（StPinlA）的基因单独或共同遗传操作的转基因棉花抗虫实验结果，据结果分析， ______ （填“NaPI”“StPinlA”或“NaPI+StPinlA”）转基因棉花的抗虫效果最佳，得出该结论的原因是 ______ 。
四、探究题（本大题共3小题，共45.0分）
23. 为证明青霉素在某种细菌产生抗药性过程中所起的作用是选择而非诱变，有如下实验方案。其中，平板影印指用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上进行接种；酚红可以用来检测尿素是否分解，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红。请回答下列问题：
（1）图中原始菌株的①扩大培养的过程中应选用 ______ （填“固体”或“液体”）培养基。利用涂布分离法可获得A1培养皿上的菌落，涂布操作结束时需要灼烧涂布器，此时灼烧的目的是： ______ 。
（2）B组培养基中还添加了适宜浓度的青霉素，结果如图所示。欲证明青霉素所起的作用是选择，则应选取 ______ （填“a1”“b1”“或b2或b3”或“任意一个”）菌落继续培养在空白的A2培养皿中，待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。要证明青霉素所起的作用是选择而非诱变，预测结果应为：上述A2和C培养皿中菌落的生长情况 ______ （填“相同”或“不同”）。
（3）图中②过程所用培养基的配方如表：
成分
无机盐
蔗糖
葡萄糖
尿素
牛肉膏
水
琼脂
酚红
培养基
+
-
+
+
-
+
+
-
注：“+”表示有，“-”表示无。
某同学据此得出结论：该种细菌以尿素为氮源。你是否同意该结论？ ______ （填“同意”或“不同意”），理由是： ______ 。
（4）下列关于微生物培养的叙述，正确的是 ______ 。
A.实验过程中所有器皿和培养基都必须用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
B.实验操作过程中必须打开超净工作台上的紫外灯
C.使用涂布分离法，单菌落更易分开，且操作比划线分离法更简单
D.平板接种细菌后，放入恒温培养箱中倒置培养
24. 如图所示为科学家利用番茄叶肉细胞和马铃薯叶肉细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程。请据图回答下列问题：
（1）①②过程使用了 ______ 酶去除细胞壁，以获得植物原生质体；此处使用的溶液浓度比番茄和马铃薯叶肉细胞的细胞液浓度略微较 ______ （填“高”或“低”），使细胞失水，以保证植物的细胞会发生质壁分离，从而保持原生质体不被破坏。而在动物细胞培养技术中用来使细胞分离开来的酶是 ______ 。
（2）过程③在化学药剂 ______ 的作用下会发生植物原生质体的融合；动物细胞融合的常用方法与植物细胞融合不相同的是动物细胞融合可以使用 ______ 法。
（3）过程⑤⑥⑦表示的细胞工程技术是 ______ 。过程 ______ （填标号）属于脱分化，过程 ______ （填标号）属于再分化。在培养过程中应注意控制好培养基中 ______ 这两种关键激素的浓度和比例。
（4）植物体细胞杂交技术打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种，该技术依据的生物学原理有 ______ （答一点即可）。
25. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛。请据图回答下列问题：
（1）应用1中，细胞B的获取需对供体2进行 ______ 处理以便获得更多的卵母细胞，然后使用 ______ 技术获得重组细胞，最终获得良种小牛，该技术的原理是 ______ 。
（2）应用2中，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫 ______ ，为使受体牛生理状况更适合完成该技术操作，要对受体牛进行 ______ 处理，以提高成功率。
（3）在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行 ______ 处理，使其具备受精的能力，得到的卵母细胞需要发育至 ______ 时期才能受精。
（4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：通过 ______ 技术获得二分胚①和②，对囊胚阶段的胚胎进行操作时要注意将 ______ 均等分割。若想对胚胎做性别鉴定，可以取囊胚的 ______ 进行DNA分析。
（5）应用4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养过程中除需要适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外，营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸，还要加入 ______ 等一些天然成分。
答案和解析
1.【答案】C
【解析】解：A、生态廊道建设属于保护生物多样性的措施，其重要保护的是生态系统多样性层次，A正确；
B、生态廊道建设是生物多样性保护中的就地保护措施，就地保护是保护生物多样性的最有效的措施，B正确；
C、生态廊道联系碎片化生境，可增加不同种群间的基因交流，而不是不同物种间的基因交流，C错误；
D、生态廊道建设可恢复珍稀物种生物数量，增加生态系统中生物的数量，使营养结构变得更加复杂，进而可提高生态系统抵抗力稳定性，D正确。
故选：C。
生物多样性包括3个层次：遗传多样性（所有生物拥有的全部基因）、物种多样性（指生物圈内所有的动物、植物、微生物）、生态系统多样性。
本题考查生物多样性的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
2.【答案】B
【解析】解：A、生态足迹是指在现有技术条件下，维持某一人口单位（一个人、一个城市、一个国家或全人类）生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积，生态足迹的值越大，代表人类所需的资源越多，人类对生态和环境的影响越大，A正确；
B、生态足迹的值越大，代表人类所需的资源越多，五台山风景名胜区生态承载力小于生态足迹，不利于可持续发展，B错误；
C、碳足迹表示扣除海洋对碳的吸收量之后，吸收化石燃料燃烧排放的二氧化碳所需的森林面积，碳足迹生态赤字较大，可能是景区以燃油汽车交通为主造成的，C正确；
D、合理规划旅游活动，提倡错峰出游，分散人类活动对环境的压力，有利于改善生态旅游环境，D正确。
故选：B。
生态足迹又叫生态占用，是指在现有技术条件下，维持某一人口单位（一个人、一个城市、一个国家或全人类）生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积。
本题主要考查生态足迹的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
3.【答案】C
【解析】解：A、生态浮岛是运用无土栽培技术降解富营养化水体中氮、磷含量，则最好选用净化污染物能力强的植物，A正确；
B、生态系统就是在一定的地域内，生物与环境构成的统一的整体，一座生态浮岛符合生态系统的定义，B正确；
C、设计生态浮岛时需要遵循的生态工程原理是自生原理，把很多单个生产系统通过优化组合，有机地整合在一起，成为一个新的高效生态系统，C错误；
D、水体中N、P营养物过多，会导致藻类的大量繁殖，生态浮岛能吸收水体中氮、磷等，抑制藻类的光合作用，D正确。
故选：C。
1、人工湿地是一个综合的生态系统，它应用生态系统中物种共生、物质循环再生原理，结构与功能协调原则，在促进废水中污染物质良性循环的前提下，充分发挥资源的生产潜力，防止环境的再污染，获得污水处理与资源化的最佳效益。人工湿地的植物还能够为水体输送氧气，增加水体的活性。湿地植物在控制水质污染，降解有害物质上也起到了重要的作用。湿地系统中的微生物是降解水体中污染物的主力军。
2、循环原理：通过系统设计实现不断循环，使前一个环节产生的废物尽可能地被后一个环节利用，减少整个生产环节“废物”的产生。自生原理：把很多单个生产系统通过优化组合，有机地整合在一起，成为一个新的高效生态系统。整体原理：充分考虑生态、经济和社会问题。
本题考查生态工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
4.【答案】D
【解析】解：A、分离土壤中的微生物时，由于目的菌落在土壤中，不能对土壤灭菌，A错误；
B、选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物生长的培养基，从土壤中分离特定细菌的纯培养物需借助选择培养基，B错误；
C、细菌计数板和血细胞计数板的计数原理相同，但血细胞计数板常用于相对较大的酵母菌细胞等的计数，对于大肠杆菌等较小的细胞需要用细菌计数板进行观察和计数，C错误；
D、统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，D正确。
故选：D。
稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。稀释涂布平板计数法的原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。统计平板上的菌落数，就能推测样品中大约含有多少活菌。其计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M（C代表某一稀释度下平板生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积，M代表稀释倍数）。
本题主要考查微生物的选择培养，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
5.【答案】B
【解析】解：A、结合分析可知，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，该实验的目的是对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数，故应选用尿素为唯一氮源的选择培养基，A正确；
B、振荡的目的是提高培养液中溶解氧的含量，使营养物质充分接触，提高营养物质的利用率，其目的并不是增加尿素分解菌的浓度，B错误；
C、由图观察可知，用于计数的试管稀释倍数大于中间试管的稀释倍数，据此推测，中间试管涂布的3个平板的菌落平均数大于160，C正确；
D、平均菌落数为160个，该过程中稀释的倍数为10×10×10×10，为104，最后取了0.1mL进行涂布稀释，因此由图示菌落计数结果可知10克土样中的菌株数约为160×104÷0.1×10=1.6×108个，D正确。
故选：B。
1、用培养基选择分解尿素微生物的原理：只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，故选择应以尿素作为唯一氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
2、分解尿素的细菌的鉴定：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。
本题考查微生物的分离、培养和计数，要求考生识记接种微生物常用的方法及计数微生物常用的方法，能结合图中信息准确答题，能结合所学的知识完成选项的分析判断。
6.【答案】D
【解析】解：A、灭菌是采用强烈的理化因素，杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正确；
B、水厂供应的自来水通常经过氯气消毒，以达到消毒的目的，B正确；
C、灼烧灭菌法适用于接种工具，在实验室，接种环在使用前应该灼烧灭菌，C正确；
D、牛奶的消毒常采用巴氏消毒法，这是因为巴氏消毒法既能将牛奶中大部分微生物杀死，又能最大程度地保证牛奶中的营养物质不被破坏，D错误。
故选：D。
无菌操作技术包括消毒和灭菌，消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒和紫外线消毒等；灭菌包括灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。
灭菌是采用强烈的理化因素，杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，灼烧灭菌法适用于接种工具，干热灭菌法适用于玻璃器皿、金属工具，高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器。
本题主要考查消毒和灭菌的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
7.【答案】B
【解析】解：A、酱油是以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶的霉菌（如黑曲霉），将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制而成的，A正确；
B、啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，主发酵结束后在低温、密闭环境下储存一段时间属于后发酵，B错误；
C、谷氨酸棒状杆菌在有氧条件下发酵产生谷氨酸，谷氨酸经过一系列处理而获得味精，C正确；
D、由于酶制剂催化效率高、专一性强、作用条件温和，因此在使用时要考虑酶制剂的使用量、底物的种类以及适宜的温度和pH，D正确。
故选：B。
大麦常用于酿酒，而制作酱油常用大豆。谷氨酸棒状杆菌为需氧菌。酶的催化受温度、PH等条件的影响。
本题主要考查发酵工程的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
8.【答案】B
【解析】解：A、植物茎尖等分生区不含或很少含病毒，因此取草莓茎尖进行植物组织培养可获得脱毒苗，A正确；
B、玉米是二倍体，玉米花粉粒经花药离体培养得到的植株为单倍体，该单倍体不育，不能遗传，B错误；
C、红豆杉细胞经植物细胞培养获得大量细胞，可工厂化生产紫杉醇，C正确；
D、愈伤组织细胞分裂旺盛，DNA复制时易产生基因突变，所以将愈伤组织细胞进行诱变处理并筛选可得到抗盐碱的烟草新品种，D正确。
故选：B。
植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的条件及过程，掌握植物组织培养技术的应用及实例，能结合所学的知识准确答题。
9.【答案】A
【解析】解：A、细胞①是经免疫处理后获得的B细胞，其中包括能产生抗体的浆细胞，浆细胞不具有增殖能力，A正确；
B、细胞②是骨髓瘤细胞，在体外培养时，适宜条件下具有无限增殖能力，B错误；
C、细胞③是杂交瘤细胞，既能无限增殖，也能产生特异性抗体，C错误；
D、细胞④是所需的杂交瘤细胞，既能无限增殖，也能产生所需抗体，D错误。
故选：A。
单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
本题考查单克隆抗体制备的有关知识，要求考生能够掌握单克隆抗体制备的过程；明确其中存在两个重要的筛选步骤；识记动物细胞融合的手段等。
10.【答案】C
【解析】解：A、蛋白酶合成抑制剂能激活重构胚，使重组细胞完成分裂和发育，A正确；
B、重组质粒能携带外源基因进入受体细胞，使之稳定存在并表达，B正确；
C、琼脂不能为微生物生长提供碳源，可以作为培养基中的凝固剂，C错误；
D、DNA聚合酶催化脱氧核苷酸间的磷酸二酯键的形成，从而形成新的DNA子链，D正确。
故选：C。
生物工程中酶的作用：
1、DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用，在基因工程中起作用。
2、DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起做用。
3、限制性核酸内切酶：从DNA链的内部进行切割，分为限制性内切酶和非限制性内切酶。质粒载体应用于基因工程，即在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒DNA序列中插入外源的目的基因，以质粒为载体，将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞，进行重组、筛选、扩增的过程。
本题主要考查基因工程、胚胎工程的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
11.【答案】A
【解析】解：A、本研究主要涉及早期胚胎培养、胚胎移植等现代生物技术，没有体外受精技术，A错误；
B、诱导多能干细胞原理是细胞的增殖，所以可以利用成体的成纤维细胞、B细胞诱导多能干细胞，B正确；
C、若成功培育出“人猪嵌合体”将面临巨大的伦理道德挑战，C正确；
D、人猪嵌合胚胎研究为解决移植器官来源不足和免疫排斥问题带来光明前景，D正确。
故选：A。
胚胎干细胞的主要用途是：①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段；③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合征、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；④培育各种组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。
本题考查体外受精和胚胎移植的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题是解答本题的关键。
12.【答案】C
【解析】解：限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，故大肠杆菌中的EcoRⅠ酶能够专一性识别CAATTC序列，并在C与A之间将这段序列剪开，该酶属于限制性核酸内切酶。
故选：C。
基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
本题主要考查限制性内切核酸酶的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
13.【答案】B
【解析】解：A、基因工程中，将目的基因导入受体细胞常用的方法是显微注射法，A正确；
B、转基因动物的受体细胞是受精卵，B错误；
C、用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，所形成的转基因羊中，人凝血因子基因存在于所有的体细胞中，在减数分裂形成生殖细胞时，同源染色体分离，故该转基因羊产生的生殖细胞中可能会含有人凝血因子基因，C正确；
D、与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别等限制，受体来源更广泛，D正确。
故选：B。
基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
本题主要考查基因工程的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
14.【答案】B
【解析】解：A、蛋白质工程和基因工程的操作对象都是基因，A错误；
B、基因指导蛋白质的合成，蛋白质工程以基因工程为基础，即对天冬氨酸激酶（本质是蛋白质）的改造需要以基因工程为基础，B正确；
C、蛋白质工程的操作对象是基因，故需要酶和载体作为工具，C错误；
D、由题意可知，对天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶进行了基因改造，其遗传物质发生改变，故经改造后的玉米赖氨酸含量提高这一性状是可以遗传的，D错误。
故选：B。
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。也就是说，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，是包含多学科的综合科技工程领域。
本题蛋白质工程，要求考生识记蛋白质工程、基因工程的相关知识，意在考查考生对知识的掌握和灵活运用基础知识的能力。
15.【答案】D
【解析】解：A、试管婴儿技术必须获得政府部门的相关批准证书，以防该技术的滥用，但不是全面禁止，A错误；
B、治疗性克隆需在有效监控和严格审查下实施，B错误；
C、生殖性克隆人冲击了现有的一些有关婚姻、家庭和两性关系的伦理道德观念，存在伦理道德方面的风险，C错误；
D、我国政府对生殖性克隆的态度是：不赞成、不允许、不支持、不接受，D正确。
故选：D。
1、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。
2、治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。
本题考查生物技术引发的伦理问题，比较基础，只要考生识记我国政府对相关技术的态度即可正确答题，属于考纲识记层次的考查。
16.【答案】BC
【解析】解：A、过程①为葡萄糖酵解形成丙酮酸的阶段，发生的场所是细胞质基质，有氧和无氧条件下都会发生，A错误；
B、甲装置中，阀门b控制进气，阀门a控制排气，制作果酒时应关闭阀门b以创造缺氧环境，适时打开阀门a几秒钟以排出产生的 气体，B正确；
C、醋酸菌是嗜氧菌，因此醋酸发酵过程中需要持续通氧，a是排气口，b是进气口，故应打开阀门a 排气，打开阀门b通气，C正确；
D、过程①～③所需的最适温度基本相同，为18-30℃，而过程④所需的最适温度为30-35℃，D错误。
故选：BC。
分析题图：甲是发酵装置，乙是果酒、果醋制作的实验原理，其中①是葡萄糖酵解形成丙酮酸的阶段，发生的场所是细胞质基质；②是酵母菌无氧呼吸的第二阶段，发生的场所是细胞质基质；③是有氧呼吸的第二、第三阶段，发生的场所是线粒体；④是醋酸菌发酵形成醋酸的过程。
本题结合图解，考查果酒和果醋的制作，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒和果醋制作的原理及条件，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。
17.【答案】BD
【解析】解：A、动物细胞培养基与植物细胞培养基的成分不同：动物细胞培养的培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和维生素等，另外还有动物血清等天然成分；植物细胞培养所需要的培养基包含植物生长和发育的全部营养成分，如矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和有机添加物，A错误；
B、两种技术都需要定期更换培养液，及时提供营养，同时避免代谢产物对培养物的毒害作用，B正确；
C、动物细胞培养的原理是细胞增殖，植物细胞培养的原理是植物细胞具有全能性，两者的原理不相同，C错误；
D、动物细胞培养和植物细胞培养过程均需无菌技术，D正确。
故选：BD。
植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。
本题组员考查植物的组织培养的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
18.【答案】ABC
【解析】解：A、当仅用一种限制酶切割载体时，仅产生一种长度的DNA片段，因此该载体最有可能为环状DNA分子，A正确；
B、当仅用一种限制酶切割载体时，两种限制酶切割产生的DNA片段等长，而两种限制酶同时切割时则产生两种不同长度的DNA片段，所以两种限制酶在载体上各有一个酶切位点，识别的序列不相同，B正确；
C、DNA片段总长度为800bp,两种限制酶同时切割时产生600bp和200bp两种长度的DNA片段，所以两种限制酶的酶切位点至少相距200bp,C正确；
D、电泳过程中DNA 的迁移速度与其分子大小有关，与其在缓冲液中的溶解度无关，D错误。
故选：ABC。
切割DNA的工具是限制酶，它们能够识别双链DNA分子的某种特定脱氧核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
本题结合图形，主要考查限制酶作用机理及作用结果，需要考生明确聚丙烯酰胺凝胶电泳结果及限制酶作用机理，再结合所学知识准确判断各选项。
19.【答案】ABC
【解析】解：A、蛋白质工程操作思路是以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，即思路过程顺序是④⑤①②③，A正确；
B、蛋白质工程是依据蛋白质的结构来设计氨基酸序列，因此蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作，B正确；
C、据图可知，①代表转录形成mRNA，②代表翻译合成多肽链，③代表肽链折叠形成一定的空间结构的蛋白质，④代表推测，⑤代表对现有的多肽链进行改造或合成，C正确；
D、蛋白质工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计，通过基因合成或基因改造实现，D错误。
故选：ABC。
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。
本题考查蛋白质工程的相关知识，要求考生识记蛋白质工程的概念、原理、基本途径，明确蛋白质工程的直接操作对象是基因，再结合所学的知识准确判断各选项。
20.【答案】AB
【解析】解：A、转基因食物潜在的安全隐患有转基因植物合成的某些新的蛋白质有可能成为新的过敏原、产生毒性物质、营养成分改变等，A正确；
B、转基因生物有可能被用于制造生物武器，如经过基因重组的致病病菌等，B正确；
C、生殖性克隆人属于无性繁殖，不能丰富人类基因的多样性，C错误；
D、为了国家安全，应在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，D错误。
故选：AB。
转基因生物的安全性问题：
（1）有关食物安全问题，反对者的观点是：不能对转基因食物安全性掉以轻心。他们的理由是：①反对“实质性等同“；②担心出现滞后效应；③担心出现新的过敏源；④担心营养成分改变；⑤担心会侵犯宗教信仰者或素食者的权益。
（2）有关生物安全问题，反对者的观点是：转基因植物可能会对生物多样性构成潜在的风险和威胁。他们的理由：①转基因植物扩散到种植区外变成野生种或杂草；②转基因植物竞争能力强，可能成为“入侵的外来物种“；③转基因植物的外源基因与细菌或病毒杂交，重组出有害的病原体；④可能使杂草成为有抗除草剂基因的“超级杂草“。
（3）有关环境安全问题，反对者的观点是：转基因生物会对生态系统稳定性和人类生活环境造成破坏。他们的理由：①转基因植物打破自然物种的原有界限，可能破坏生态系统稳定性；②重组微生物产生的中间产物可能造成二次污染；③重组DNA与微生物杂交是否会产生有害病原微生物；④转基因植物花粉中的有毒蛋白可能通过食物链进入生物。
本题主要考查转基因食品、生物武器的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
21.【答案】探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响 （充分）预冷 蓝色 DNA含量的多少 加速颜色反应 耐受性 DNA的提取量不同（或从蒜黄提取的DNA量最多、从辣椒提取的DNA量最少等） 将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间后，吸取上清液
【解析】解：（1）由表格可知该实验的变量是不同材料和不同保存温度，因此该探究性实验课题名称是探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。
（2）酒精预冷更有利于DNA的析出，第二步中所用酒精必须经过充分预冷才能使用。
（3）在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此，表中的颜色应该为蓝色，颜色的深浅代表DNA含量的多少。
（4）DNA检测时沸水浴加热的目的是加速颜色反应，同时说明DNA对高温有较强的耐受性。
（5）①因为低温抑制了相关酶的活性，使DNA降解速度减慢，所以与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多。②根据实验结果可知：等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，DNA的提取量不同（或从蒜黄提取的DNA量最多、从辣椒提取的DNA量最少，合理即可）。
（6）氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小，所以为了进一步提高DNA纯度，可将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间后，吸取上清液，然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。
故答案为：
（1）探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响
（2）（充分）预冷
（3）蓝色 DNA含量的多少
（4）加速颜色反应 耐受性
（5）DNA的提取量不同（或从蒜黄提取的DNA量最多、从辣椒提取的DNA量最少等）
（6）将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间后，吸取上清液
实验原理：提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
本题主要考查DNA的粗提取与鉴定的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
22.【答案】目的基因两侧的脱氧核苷酸序列 构建基因表达载体 HindⅢ和Sat3AⅠ HindⅢ和BamHⅠ 农杆菌转化 T-DNA X抗生素 抗原抗体杂交 NaPI 饲喂NaPI转基因的虫体质量较对照组轻，且每株棉铃虫数较对照组少
【解析】解：（1）要根据抗虫基因的一段核苷酸序列设计引物，引物的作用是使DNA聚合酶（Taq酶）从引物的 3'端开始连接脱氧核苷酸。如果直接将目的基因转入受体细胞不会表达，所以为了保证目的基因在受体细胞中稳定存在并且遗传给下一代并表达和发挥作用，需要构建基因表达载体，所以培育转基因抗虫棉的核心工作是构建基因表达载体。在构建基因表达载体时，目的基因需要插入到启动子和终止子之间，需要用HindⅢ和BAmHⅠ两种限制酶切割含抗虫基因的DNA片段，BamHⅠ5′-G↓GATCC-3′，Sau3AⅠ5′-↓GATC-3′，二者的粘性末端相同，在处理质粒的时候应选择HindⅢ和BamHⅠ两种限制酶，可以避免自身环化和反向连接，保证目的基因正向插入质粒中，同时防止质粒BclⅠ位点被切断。
（2）①将抗虫基因转入植物体内时，除了采用花粉管通道法，还可以采用农杆菌转化法。农杆菌转化法的原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA 可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。
②由图可知，构建基因表达载体时，目的基因的插入破坏了Y抗生素抗性基因，但有X抗生素抗性基因，因此导入重组质粒的细菌能在含有X抗生素的培养基上生存，但不能在含有Y抗生素的培养基上生存；若将细菌先接种在含有X抗生素的培养基上能生长，说明该细菌中已经导入外源质粒；为了检测目的基因在受体细胞中是否稳定表达，可采用抗原抗体杂交技术。
③由图可知，NaPI转基因棉花的抗虫效果最佳，因为饲喂NaPI转基因的虫体质量较对照组轻，且每株棉铃数较对照组少。
故答案为：
（1）目的基因两侧的脱氧核苷酸序列；构建基因表达载体；HindⅢ和Sat3AⅠ；HindⅢ和BamHⅠ
（2）①农杆菌转化；T-DNA
②X抗生素；抗原抗体杂交
③NaPI；饲喂NaPI转基因的虫体质量较对照组轻，且每株棉铃虫数较对照组少
基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定：
（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；
②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原抗体杂交技术。
（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作步骤，能根据图中限制酶的位置及题干要求选择正确的限制酶，属于考纲中识记和理解层次的考查。
23.【答案】液体 杀死涂布器上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者 a1 相同 不能 该细菌可能利用氮气作为氮源（或培养基中无酚红，无法证明该细菌分解了尿素） D
【解析】解：（1）液体培养基具有进行通气培养、振荡培养的优点，在通气或在振荡的条件下，有利于营养物质的摄入以及增加供氧量，所以有利于细胞生长，提高微生物数量。故图中扩大培养的过程中应选用液体培养基，涂布操作结束时仍需要灼烧涂布器的目的是杀死涂布器上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者。
（2）根据题意和图示可知，证明青霉素所起的作用是选择，则应选取菌落培养在空白的培养皿中，即a1，待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的培养皿中，观察两组实验菌落的生长情况。如果和培养皿中菌落的生长情况相同，即A2 和 C 培养皿中菌落的生长情况相同，则证明变异是在接触青霉素之前就已经产生了，青霉素所起的作用是选择。
（3）由表格内容可知，葡萄糖是碳源，尿素是氮源，但微生物也可能利用空气中的氮气作为氮源，故不能得出该细菌可利用尿素作为氮源的结论；并且培养基中未加入酚红指示剂，不能对菌种作进一步的鉴定。
（4）A、培养基用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，器皿可以使用高压蒸汽灭菌或干热灭菌，A错误；
B、实验操作过程前必须打开超净工作台上的紫外灯，而紫外线对人有伤害，实验过程中不能打开，B错误；
C、常用接种方法中的稀释涂布平板法，一般多用于筛选菌株，可以计数，可以观察菌落特征，但由于需要多次稀释，操作不如划线分离法简单，C错误；
D、平板接种细菌后，放入恒温培养箱中倒置培养，可防止培养基中的水蒸气蒸发，也避免培养皿盖的水滴落下造成污染，D正确。
故选：D。
故答案为：
（1）液体杀死涂布器上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者
（2）a1 相同
（3）不能 该细菌可能利用氮气作为氮源（或培养基中无酚红，无法证明该细菌分解了尿素）
（4）D
微生物培养中的易混点：1．无菌技术中对相关的器皿、接种用具和培养基等用不同的灭菌方法；2．常用接种方法：平板划线法一般多用于菌种的纯化，可以观察菌落特征；稀释涂布平板法一般多用于筛选菌株，可以计数，可以观察菌落特征；3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
本题考查微生物的培养和分离的知识点，意在强化学生的识记和理解能力，把握知识间内在联系的能力。
24.【答案】纤维素酶和果胶 高 胰蛋白酶、胶原蛋白酶 聚乙二醇 灭活病毒诱导 植物组织培养 ⑤ ⑥ 生长素和细胞分裂素 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性、染色体变异
【解析】解：（1）图中①②为去壁过程，可以使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁以便获得植物原生质体。此处使用的溶液浓度比番茄和马铃薯叶肉细胞的细胞液浓度略微较高，使细胞失水，保证植物细胞会发生质壁分离，以保持原生质体的正常形态不被破坏。在动物细胞培养中，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎的动物组织，使细胞相互分离。
（2）③是诱导原生质体融合的过程，该过程可采用化学试剂聚乙二醇（或PEG）诱导融合。动物细胞融合的方法与植物细胞融合不相同的是动物细胞融合可以使用灭活病毒诱导法诱导融合。
（3）形成杂种细胞后还需要采用植物组织培养技术将其培育成杂种植株，因此图中过程⑤⑥⑦为植物组织培养过程。图中过程⑤表示在一定的激素和营养等条件的诱导下，失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，这个过程属于脱分化。过程⑥表示愈伤组织重新分化成芽、根等器官，这个过程属于再分化。在培养过程中应注意控制好培养基中生长素和细胞分裂素这两种关键激素的浓度和比例，通常细胞分裂素和生长素的比例高时，有利于芽的分化，比例低时有利于根的分化，比例适中时利于形成愈伤组织。
（4）植物体细胞杂交融合了两种细胞的染色体，细胞融合过程利用了细胞膜具有流动性的特点，植物组织培养过程利用了植物细胞的全能性，因此植物体细胞杂交技术依据的生物学原理包括细胞膜的流动性、植物细胞的全能性及染色体变异。
故答案为：
（1）纤维素酶和果胶；高；胰蛋白酶、胶原蛋白酶
（2）聚乙二醇；灭活病毒诱导
（3）植物组织培养；⑤；⑥；生长素和细胞分裂素
（4）细胞膜的流动性、植物细胞的全能性、染色体变异
图中①②为去壁过程，③为细胞融合，④为细胞壁的再生，⑤为脱分化形成愈伤组织，⑥为再分化形成试管苗，⑦为练苗移栽。
本题主要考查植物组织培养的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力，能够运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中。
25.【答案】超数排卵 核移植 动物细胞核的全能性 胚胎移植 同期发情 获能 减数分裂Ⅱ 胚胎分割 内细胞团 滋养层（细胞） 血清或血浆
【解析】解：（1）应用1中供体2提供细胞质，为获取更多的细胞（卵母细胞），需对供体2注射促性腺激素以促进排卵，通过超数排卵处理以便获得更多的卵母细胞。使用核移植技术获得重组细胞，最终获得的小牛为克隆牛；该技术是体细胞核移植技术，所依据的原理是动物细胞核的全能性。
（2）应用2属于有性生殖，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫胚胎移植；移植前对受体牛进行同期发情处理，可以使供体和受体处于相同的生理状态，提高成功率。
（3）体外受精时，精子受精前需要进行（体外）获能处理，使其具备受精的能力；卵母细胞要发育到减数分裂Ⅱ（或MⅡ）才具备与精子受精的能力。
（4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：通过胚胎分割技术可获得二分胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。囊胚的滋养层细胞是在胚胎发育成桑葚胚后，桑葚胚进一步发育，开始出现分化，沿透明带内壁扩展和排列的一种个体较小的细胞；通常取少量滋养层细胞诊断是否患有遗传病或做性别鉴定，这样不会影响胚胎发育。
（5）动物细胞培养时，营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸，还需要加入动物血清或血浆等天然成分。
故答案为：
（1）超数排卵 核移植 动物细胞核的全能性
（2）胚胎移植 同期发情
（3）获能 减数分裂Ⅱ
（4）胚胎分割 内细胞团 滋养层（细胞）
（5）血清或血浆
分析题图：应用1中：供体Ⅰ提供细胞核，供体2提供细胞质，经过核移植技术形成重组细胞，并发育形成早期胚，再将胚胎移植到受体子宫发育成小牛，为克隆牛；应用2中：优良公牛和供体1配种形成受精卵，并发育成早期胚胎，再将胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属于有性生殖；应用3中：采用了胚胎分割移植技术；应用4中：从早期胚胎和原始性腺中获取胚胎干细胞，并进行体外干细胞培养。
本题主要考查胚胎工程的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
2022-2023学年辽宁省沈阳市重点高中联合体高二（下）期中生物试卷
一、单选题（本大题共15小题，共15.0分）
1. 生态廊道指适应生物迁移或栖息的通道，可将保护区之间或与之隔离的其他生境（指物种或物种群体赖以生存的生态环境）相连。相关叙述错误的是（ ）
A. 生态廊道建设有利于保护生物多样性
B. 生态廊道建设是生物多样性保护中的就地保护措施
C. 生态廊道联系碎片化生境，可增加不同物种间的基因交流
D. 生态廊道建设可恢复珍稀物种生物数量，提高生态系统抵抗力稳定性
2. 为研究五台山生态旅游的可持续发展，研究人员对其进行了生态评估，结果如图。下列叙述错误的是（ ）
A. 游客所需的生态足迹越大，对生态环境的影响越大
B. 五台山风景名胜区生态承载力小于生态足迹，有利于可持续发展
C. 碳足迹生态赤字较大，可能是景区以燃油汽车交通为主造成的
D. 合理规划旅游活动，提倡错峰出游有利于改善生态旅游环境
3. 生态浮岛是利用生态工程原理，以水生植物为主体，以高分子材料等为载体，运用无土栽培技术降解富营养化水体中氮、磷含量的生态修复技术。如图是生态浮岛示意图，有关叙述错误的是（ ）
A. 生态浮岛最好选用净化污染物能力强的植物
B. 一座生态浮岛可以看作一个小型生态系统
C. 设计生态浮岛主要遵循生态工程的循环原理
D. 生态浮岛能吸收水体中氮、磷等，遮蔽阳光，减少藻类繁殖
4. 微生物分离和微生物计数技术广泛应用于人们的生产生活中，下列有关微生物分离和计数的叙述，正确的是（ ）
A. 分离土壤中的微生物时，需要先对土壤灭菌，再进行培养
B. 从土壤中分离特定细菌的纯培养物不需借助选择培养基
C. 使用血细胞计数板可以对冰激凌中的大肠杆菌进行观察和计数
D. 统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落
5. 某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，具体操作流程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 纯化培养阶段使用选择培养基，应以尿素为唯一氮源
B. 振荡的目的是增加尿素分解菌的浓度
C. 中间试管涂布的3个平板的菌落平均数大于160
D. 由图中数据可知10g土样中的菌株数约为1.6×108个
6. 在生产生活和科学实践中，经常通过消毒和灭菌来避免细菌的污染。下列说法错误的是（ ）
A. 灭菌是指杀死物体内外的一切微生物，包括芽孢和孢子
B. 水厂供应的自来水通常经过氯气消毒
C. 在实验室操作中，接种环在使用前应该灼烧灭菌
D. 牛奶的消毒常采用巴氏消毒法，该法可以杀死牛奶中的所有微生物
7. 由于发酵工程生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉等，在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用，下列有关发酵工程在食品工业上应用的描述，错误的是（ ）
A. 酱油是以大豆为主要原料，利用霉菌制作而成的
B. 啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，其中，酵母菌的繁殖在主发酵阶段完成，大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段完成
C. 味精是谷氨酸棒状杆菌发酵产生的谷氨酸经过一系列处理而获得的
D. 由于酶制剂催化效率高、专一性强、作用条件温和，因此在使用时要考虑酶制剂的使用量、底物的种类以及适宜的温度和pH
8. 植物细胞工程在农业、医药等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 取草莓茎尖进行植物组织培养可获得脱毒苗
B. 玉米花粉粒经花药离体培养得到的植株能稳定遗传
C. 红豆杉细胞经植物细胞培养技术可工厂化生产紫杉醇
D. 可采用诱变处理烟草愈伤组织的方法来获得烟草抗盐碱突变体
9. 制备新型冠状病毒单克隆抗体的简要过程如下：给小鼠注射N蛋白（新型冠状病毒重要的标志蛋白）→从脾脏中获取细胞①→诱导细胞①与小鼠的细胞②融合→筛选出细胞③→克隆化培养和抗体检测，获得细胞④。上述过程的细胞①～细胞④中，可能不具有增殖能力的是（ ）
A. 细胞① B. 细胞② C. 细胞③ D. 细胞④
10. 下列生物工程中所用物质与其发挥的作用，对应不正确的是（ ）
A. 蛋白酶合成抑制剂——激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育
B. 重组质粒——携带外源基因进入受体细胞
C. 琼脂——为微生物生长提供碳源
D. DNA聚合酶——催化合成新的DNA子链
11. 某科研小组把人的诱导多能干细胞注入猪的早期胚胎中，成功培育出人猪嵌合体胚胎，并在猪体内孕育了3-4周后才终止妊娠。下关说法错误的是（ ）
A. 实验过程需要利用体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术
B. 诱导多能干细胞可以由成体的成纤维细胞转化而来
C. 若成功培育出“人猪嵌合体”将面临巨大的伦理道德挑战
D. 该研究为在动物内培育出可供移植的人类器官提供了可能
12. 大肠杆菌中的EcoRⅠ酶能够专一性识别CAATTC序列，并在C与A之间将这段序列剪开。该酶属于（ ）
A. DNA连接酶 B. RNA聚合酶 C. 限制性核酸内切酶 D. DNA聚合酶
13. 采用基因工程技术培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成人凝血因子且只存在于乳汁中。下列有关叙述不正确的是（ ）
A. 该过程中将目的基因导入受体细胞常用的方法是显微注射法
B. 将含有人凝血因子基因的表达载体导入羊乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器
C. 该转基因羊产生的生殖细胞中可能会含有人凝血因子基因
D. 与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别等限制，受体来源更广泛
14. 科学家为提高玉米中赖氨酸的含量, 计划将天冬氨酸激酶中第352位的苏氨酸变为异亮氨酸, 将二氢吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺变为异亮氨酸, 下列说法中, 正确的是( )
A. 蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异
B. 对天冬氨酸激酶的改造需要以基因工程为基础
C. 蛋白质工程操作过程中, 不需要酶和载体作为工具
D. 经改造后的玉米赖氨酸含量提高这一性状不可遗传
15. 以哺乳动物为研究对象的生物技术已获得了长足的进步。对生物技术应用于人类，在安全与伦理方面有不同的观点，下列叙述正确的是（ ）
A. 试管婴儿技术应全面禁止
B. 治疗性克隆不需要监控和审查
C. 生殖性克隆不存在伦理道德方面的风险
D. 我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
二、多选题（本大题共5小题，共10.0分）
16. 图甲为果酒和果醋的制作装置，图乙表示制作过程中的物质变化，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 过程①②都只能发生在缺氧的条件下
B. 制作果酒时应关闭阀b,适时打开阀a排气
C. 制作果醋时需打开阀b通气，打开阀a排气
D. 过程①～④所需的最适温度基本相同
17. 获取植物或动物体的组织，进行表面消毒处理后，用相关酶处理并分散成单个细胞，置于人工培养基中培养，可获得植物愈伤组织或大量动物细胞，用于生产。这两种细胞培养的共同点是（ ）
A. 人工培养基成分相同 B. 都需要定期更换培养液
C. 培养的原理完全相同 D. 培养过程均需无菌技术
18. 在基因工程操作中，科研人员利用识别两种不同序列的限制酶（R1和R2）处理基因表达载体，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，结果如图所示。以下相关叙述正确的是（ ）
A. 该载体最可能为环状DNA分子
B. 两种限制酶在载体上各有一个酶切位点
C. 限制酶R1与R2的酶切位点最短相距约200bp
D. 电泳过程中DNA的迁移速度与其在缓冲液中的溶解度有关
19. 如图为蛋白质工程操作的基本思路，下列叙述正确的是（ ）
A. 代表蛋白质工程操作思路过程的正确顺序是④⑤①②③
B. 蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作
C. ①代表转录，②代表翻译，③代表折叠，④代表推测，⑤代表改造或合成
D. 蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计，通过基因合成或改造而实现
20. 下列有关生物技术的叙述，正确的是（ ）
A. 转基因植物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原属于转基因食物潜在的安全隐患
B. 转基因生物有可能被用于制造生物武器
C. 生殖性克隆人可以丰富人类基因的多样性
D. 为了国家安全，可以进行必要的、小范围的生物武器研究
三、实验题（本大题共2小题，共30.0分）
21. 某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动，具体步骤如下：
材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g,剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24h。
DNA粗提取：
第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨，用两层纱布过滤，取滤液备用；
第二步：先向6只小烧杯中分别注入10C滤液，再加入20mL体积分数为95%的酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上；
第三步：取6支试管，分别加入等量的质量浓度为2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物。
DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。
材料保存温度
花菜
辣椒
蒜黄
20℃
++
+
+++
-20℃
+++
++
++++
（“+”越多表示颜色越深）
分析上述实验过程，回答下列问题：
（1）该探究性实验的课题名称是： ______ 。
（2）DNA粗提取第二步中所用的酒精必须经过 ______ 才能使用。
（3）表中的颜色为 ______ ，颜色的深浅代表了 ______ 。
（4）DNA检测时沸水浴加热的目的是 ______ ，同时说明DNA对高温有较强的 ______ 。
（5）根据实验结果，得出结论并分析。
①结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存时，DNA的提取量较多。
②结论2：等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下， ______ 。
（6）氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是： ______ ，然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。
22. 科研小组利用基因工程技术将抗虫基因转入棉花细胞成功培育出抗虫棉，该技术所用的含抗虫基因的DNA与质粒上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示（不同限制酶的识别序列和酶切位点：BamHⅠ5′-G↓GATCC-3′，BclⅠ5′-T↓GATCA-3′，Sau3AⅠ5′-↓GATC-3′，HindⅢ5′-A↓AGCTT-3′）。请分析并回答下列问题：
（1）将抗虫基因转入棉花细胞前，可以通过PCR扩增获得大量抗虫基因，PCR扩增前应根据 ______ 设计引物。培育转基因棉花的核心工作是 ______ 。由图1和图2分析可知，研究人员应选择 ______ 两种限制酶切割含抗虫基因的DNA片段，在处理质粒的时候应选择 ______ 两种限制酶。
（2）蛋白酶抑制剂基因也是一种抗虫基因，某研究团队将胰蛋白酶抑制剂（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制剂（StPinlA）的基因单独或共同转化，获得转基因植株。
①将抗虫基因转入植物体内时，除了采用我国科学家独创的花粉管通道法，还经常采用 ______ 法，使用该方法时，应将抗虫基因插入到质粒的 ______ 区域。
②标记基因可用于检测目的基因是否导入，由图2可知，应选含有 ______ 的培养基筛选含有重组质粒的细胞。为了检测目的基因在受体细胞中是否稳定表达，在分子水平上的检测方法为 ______ 。
③图3为将胰蛋白酶抑制剂（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制剂（StPinlA）的基因单独或共同遗传操作的转基因棉花抗虫实验结果，据结果分析， ______ （填“NaPI”“StPinlA”或“NaPI+StPinlA”）转基因棉花的抗虫效果最佳，得出该结论的原因是 ______ 。
四、探究题（本大题共3小题，共45.0分）
23. 为证明青霉素在某种细菌产生抗药性过程中所起的作用是选择而非诱变，有如下实验方案。其中，平板影印指用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上进行接种；酚红可以用来检测尿素是否分解，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红。请回答下列问题：
（1）图中原始菌株的①扩大培养的过程中应选用 ______ （填“固体”或“液体”）培养基。利用涂布分离法可获得A1培养皿上的菌落，涂布操作结束时需要灼烧涂布器，此时灼烧的目的是： ______ 。
（2）B组培养基中还添加了适宜浓度的青霉素，结果如图所示。欲证明青霉素所起的作用是选择，则应选取 ______ （填“a1”“b1”“或b2或b3”或“任意一个”）菌落继续培养在空白的A2培养皿中，待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。要证明青霉素所起的作用是选择而非诱变，预测结果应为：上述A2和C培养皿中菌落的生长情况 ______ （填“相同”或“不同”）。
（3）图中②过程所用培养基的配方如表：
成分
无机盐
蔗糖
葡萄糖
尿素
牛肉膏
水
琼脂
酚红
培养基
+
-
+
+
-
+
+
-
注：“+”表示有，“-”表示无。
某同学据此得出结论：该种细菌以尿素为氮源。你是否同意该结论？ ______ （填“同意”或“不同意”），理由是： ______ 。
（4）下列关于微生物培养的叙述，正确的是 ______ 。
A.实验过程中所有器皿和培养基都必须用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
B.实验操作过程中必须打开超净工作台上的紫外灯
C.使用涂布分离法，单菌落更易分开，且操作比划线分离法更简单
D.平板接种细菌后，放入恒温培养箱中倒置培养
24. 如图所示为科学家利用番茄叶肉细胞和马铃薯叶肉细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程。请据图回答下列问题：
（1）①②过程使用了 ______ 酶去除细胞壁，以获得植物原生质体；此处使用的溶液浓度比番茄和马铃薯叶肉细胞的细胞液浓度略微较 ______ （填“高”或“低”），使细胞失水，以保证植物的细胞会发生质壁分离，从而保持原生质体不被破坏。而在动物细胞培养技术中用来使细胞分离开来的酶是 ______ 。
（2）过程③在化学药剂 ______ 的作用下会发生植物原生质体的融合；动物细胞融合的常用方法与植物细胞融合不相同的是动物细胞融合可以使用 ______ 法。
（3）过程⑤⑥⑦表示的细胞工程技术是 ______ 。过程 ______ （填标号）属于脱分化，过程 ______ （填标号）属于再分化。在培养过程中应注意控制好培养基中 ______ 这两种关键激素的浓度和比例。
（4）植物体细胞杂交技术打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种，该技术依据的生物学原理有 ______ （答一点即可）。
25. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛。请据图回答下列问题：
（1）应用1中，细胞B的获取需对供体2进行 ______ 处理以便获得更多的卵母细胞，然后使用 ______ 技术获得重组细胞，最终获得良种小牛，该技术的原理是 ______ 。
（2）应用2中，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫 ______ ，为使受体牛生理状况更适合完成该技术操作，要对受体牛进行 ______ 处理，以提高成功率。
（3）在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行 ______ 处理，使其具备受精的能力，得到的卵母细胞需要发育至 ______ 时期才能受精。
（4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：通过 ______ 技术获得二分胚①和②，对囊胚阶段的胚胎进行操作时要注意将 ______ 均等分割。若想对胚胎做性别鉴定，可以取囊胚的 ______ 进行DNA分析。
（5）应用4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养过程中除需要适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外，营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸，还要加入 ______ 等一些天然成分。
答案和解析
1.【答案】C
【解析】解：A、生态廊道建设属于保护生物多样性的措施，其重要保护的是生态系统多样性层次，A正确；
B、生态廊道建设是生物多样性保护中的就地保护措施，就地保护是保护生物多样性的最有效的措施，B正确；
C、生态廊道联系碎片化生境，可增加不同种群间的基因交流，而不是不同物种间的基因交流，C错误；
D、生态廊道建设可恢复珍稀物种生物数量，增加生态系统中生物的数量，使营养结构变得更加复杂，进而可提高生态系统抵抗力稳定性，D正确。
故选：C。
生物多样性包括3个层次：遗传多样性（所有生物拥有的全部基因）、物种多样性（指生物圈内所有的动物、植物、微生物）、生态系统多样性。
本题考查生物多样性的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
2.【答案】B
【解析】解：A、生态足迹是指在现有技术条件下，维持某一人口单位（一个人、一个城市、一个国家或全人类）生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积，生态足迹的值越大，代表人类所需的资源越多，人类对生态和环境的影响越大，A正确；
B、生态足迹的值越大，代表人类所需的资源越多，五台山风景名胜区生态承载力小于生态足迹，不利于可持续发展，B错误；
C、碳足迹表示扣除海洋对碳的吸收量之后，吸收化石燃料燃烧排放的二氧化碳所需的森林面积，碳足迹生态赤字较大，可能是景区以燃油汽车交通为主造成的，C正确；
D、合理规划旅游活动，提倡错峰出游，分散人类活动对环境的压力，有利于改善生态旅游环境，D正确。
故选：B。
生态足迹又叫生态占用，是指在现有技术条件下，维持某一人口单位（一个人、一个城市、一个国家或全人类）生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积。
本题主要考查生态足迹的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
3.【答案】C
【解析】解：A、生态浮岛是运用无土栽培技术降解富营养化水体中氮、磷含量，则最好选用净化污染物能力强的植物，A正确；
B、生态系统就是在一定的地域内，生物与环境构成的统一的整体，一座生态浮岛符合生态系统的定义，B正确；
C、设计生态浮岛时需要遵循的生态工程原理是自生原理，把很多单个生产系统通过优化组合，有机地整合在一起，成为一个新的高效生态系统，C错误；
D、水体中N、P营养物过多，会导致藻类的大量繁殖，生态浮岛能吸收水体中氮、磷等，抑制藻类的光合作用，D正确。
故选：C。
1、人工湿地是一个综合的生态系统，它应用生态系统中物种共生、物质循环再生原理，结构与功能协调原则，在促进废水中污染物质良性循环的前提下，充分发挥资源的生产潜力，防止环境的再污染，获得污水处理与资源化的最佳效益。人工湿地的植物还能够为水体输送氧气，增加水体的活性。湿地植物在控制水质污染，降解有害物质上也起到了重要的作用。湿地系统中的微生物是降解水体中污染物的主力军。
2、循环原理：通过系统设计实现不断循环，使前一个环节产生的废物尽可能地被后一个环节利用，减少整个生产环节“废物”的产生。自生原理：把很多单个生产系统通过优化组合，有机地整合在一起，成为一个新的高效生态系统。整体原理：充分考虑生态、经济和社会问题。
本题考查生态工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
4.【答案】D
【解析】解：A、分离土壤中的微生物时，由于目的菌落在土壤中，不能对土壤灭菌，A错误；
B、选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物生长的培养基，从土壤中分离特定细菌的纯培养物需借助选择培养基，B错误；
C、细菌计数板和血细胞计数板的计数原理相同，但血细胞计数板常用于相对较大的酵母菌细胞等的计数，对于大肠杆菌等较小的细胞需要用细菌计数板进行观察和计数，C错误；
D、统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，D正确。
故选：D。
稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。稀释涂布平板计数法的原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。统计平板上的菌落数，就能推测样品中大约含有多少活菌。其计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M（C代表某一稀释度下平板生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积，M代表稀释倍数）。
本题主要考查微生物的选择培养，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
5.【答案】B
【解析】解：A、结合分析可知，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，该实验的目的是对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数，故应选用尿素为唯一氮源的选择培养基，A正确；
B、振荡的目的是提高培养液中溶解氧的含量，使营养物质充分接触，提高营养物质的利用率，其目的并不是增加尿素分解菌的浓度，B错误；
C、由图观察可知，用于计数的试管稀释倍数大于中间试管的稀释倍数，据此推测，中间试管涂布的3个平板的菌落平均数大于160，C正确；
D、平均菌落数为160个，该过程中稀释的倍数为10×10×10×10，为104，最后取了0.1mL进行涂布稀释，因此由图示菌落计数结果可知10克土样中的菌株数约为160×104÷0.1×10=1.6×108个，D正确。
故选：B。
1、用培养基选择分解尿素微生物的原理：只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，故选择应以尿素作为唯一氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
2、分解尿素的细菌的鉴定：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。
本题考查微生物的分离、培养和计数，要求考生识记接种微生物常用的方法及计数微生物常用的方法，能结合图中信息准确答题，能结合所学的知识完成选项的分析判断。
6.【答案】D
【解析】解：A、灭菌是采用强烈的理化因素，杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正确；
B、水厂供应的自来水通常经过氯气消毒，以达到消毒的目的，B正确；
C、灼烧灭菌法适用于接种工具，在实验室，接种环在使用前应该灼烧灭菌，C正确；
D、牛奶的消毒常采用巴氏消毒法，这是因为巴氏消毒法既能将牛奶中大部分微生物杀死，又能最大程度地保证牛奶中的营养物质不被破坏，D错误。
故选：D。
无菌操作技术包括消毒和灭菌，消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒和紫外线消毒等；灭菌包括灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。
灭菌是采用强烈的理化因素，杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，灼烧灭菌法适用于接种工具，干热灭菌法适用于玻璃器皿、金属工具，高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器。
本题主要考查消毒和灭菌的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
7.【答案】B
【解析】解：A、酱油是以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶的霉菌（如黑曲霉），将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制而成的，A正确；
B、啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，主发酵结束后在低温、密闭环境下储存一段时间属于后发酵，B错误；
C、谷氨酸棒状杆菌在有氧条件下发酵产生谷氨酸，谷氨酸经过一系列处理而获得味精，C正确；
D、由于酶制剂催化效率高、专一性强、作用条件温和，因此在使用时要考虑酶制剂的使用量、底物的种类以及适宜的温度和pH，D正确。
故选：B。
大麦常用于酿酒，而制作酱油常用大豆。谷氨酸棒状杆菌为需氧菌。酶的催化受温度、PH等条件的影响。
本题主要考查发酵工程的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
8.【答案】B
【解析】解：A、植物茎尖等分生区不含或很少含病毒，因此取草莓茎尖进行植物组织培养可获得脱毒苗，A正确；
B、玉米是二倍体，玉米花粉粒经花药离体培养得到的植株为单倍体，该单倍体不育，不能遗传，B错误；
C、红豆杉细胞经植物细胞培养获得大量细胞，可工厂化生产紫杉醇，C正确；
D、愈伤组织细胞分裂旺盛，DNA复制时易产生基因突变，所以将愈伤组织细胞进行诱变处理并筛选可得到抗盐碱的烟草新品种，D正确。
故选：B。
植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的条件及过程，掌握植物组织培养技术的应用及实例，能结合所学的知识准确答题。
9.【答案】A
【解析】解：A、细胞①是经免疫处理后获得的B细胞，其中包括能产生抗体的浆细胞，浆细胞不具有增殖能力，A正确；
B、细胞②是骨髓瘤细胞，在体外培养时，适宜条件下具有无限增殖能力，B错误；
C、细胞③是杂交瘤细胞，既能无限增殖，也能产生特异性抗体，C错误；
D、细胞④是所需的杂交瘤细胞，既能无限增殖，也能产生所需抗体，D错误。
故选：A。
单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
本题考查单克隆抗体制备的有关知识，要求考生能够掌握单克隆抗体制备的过程；明确其中存在两个重要的筛选步骤；识记动物细胞融合的手段等。
10.【答案】C
【解析】解：A、蛋白酶合成抑制剂能激活重构胚，使重组细胞完成分裂和发育，A正确；
B、重组质粒能携带外源基因进入受体细胞，使之稳定存在并表达，B正确；
C、琼脂不能为微生物生长提供碳源，可以作为培养基中的凝固剂，C错误；
D、DNA聚合酶催化脱氧核苷酸间的磷酸二酯键的形成，从而形成新的DNA子链，D正确。
故选：C。
生物工程中酶的作用：
1、DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用，在基因工程中起作用。
2、DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起做用。
3、限制性核酸内切酶：从DNA链的内部进行切割，分为限制性内切酶和非限制性内切酶。质粒载体应用于基因工程，即在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒DNA序列中插入外源的目的基因，以质粒为载体，将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞，进行重组、筛选、扩增的过程。
本题主要考查基因工程、胚胎工程的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
11.【答案】A
【解析】解：A、本研究主要涉及早期胚胎培养、胚胎移植等现代生物技术，没有体外受精技术，A错误；
B、诱导多能干细胞原理是细胞的增殖，所以可以利用成体的成纤维细胞、B细胞诱导多能干细胞，B正确；
C、若成功培育出“人猪嵌合体”将面临巨大的伦理道德挑战，C正确；
D、人猪嵌合胚胎研究为解决移植器官来源不足和免疫排斥问题带来光明前景，D正确。
故选：A。
胚胎干细胞的主要用途是：①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段；③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合征、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；④培育各种组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。
本题考查体外受精和胚胎移植的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题是解答本题的关键。
12.【答案】C
【解析】解：限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，故大肠杆菌中的EcoRⅠ酶能够专一性识别CAATTC序列，并在C与A之间将这段序列剪开，该酶属于限制性核酸内切酶。
故选：C。
基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
本题主要考查限制性内切核酸酶的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
13.【答案】B
【解析】解：A、基因工程中，将目的基因导入受体细胞常用的方法是显微注射法，A正确；
B、转基因动物的受体细胞是受精卵，B错误；
C、用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，所形成的转基因羊中，人凝血因子基因存在于所有的体细胞中，在减数分裂形成生殖细胞时，同源染色体分离，故该转基因羊产生的生殖细胞中可能会含有人凝血因子基因，C正确；
D、与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别等限制，受体来源更广泛，D正确。
故选：B。
基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
本题主要考查基因工程的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
14.【答案】B
【解析】解：A、蛋白质工程和基因工程的操作对象都是基因，A错误；
B、基因指导蛋白质的合成，蛋白质工程以基因工程为基础，即对天冬氨酸激酶（本质是蛋白质）的改造需要以基因工程为基础，B正确；
C、蛋白质工程的操作对象是基因，故需要酶和载体作为工具，C错误；
D、由题意可知，对天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶进行了基因改造，其遗传物质发生改变，故经改造后的玉米赖氨酸含量提高这一性状是可以遗传的，D错误。
故选：B。
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。也就是说，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，是包含多学科的综合科技工程领域。
本题蛋白质工程，要求考生识记蛋白质工程、基因工程的相关知识，意在考查考生对知识的掌握和灵活运用基础知识的能力。
15.【答案】D
【解析】解：A、试管婴儿技术必须获得政府部门的相关批准证书，以防该技术的滥用，但不是全面禁止，A错误；
B、治疗性克隆需在有效监控和严格审查下实施，B错误；
C、生殖性克隆人冲击了现有的一些有关婚姻、家庭和两性关系的伦理道德观念，存在伦理道德方面的风险，C错误；
D、我国政府对生殖性克隆的态度是：不赞成、不允许、不支持、不接受，D正确。
故选：D。
1、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。
2、治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。
本题考查生物技术引发的伦理问题，比较基础，只要考生识记我国政府对相关技术的态度即可正确答题，属于考纲识记层次的考查。
16.【答案】BC
【解析】解：A、过程①为葡萄糖酵解形成丙酮酸的阶段，发生的场所是细胞质基质，有氧和无氧条件下都会发生，A错误；
B、甲装置中，阀门b控制进气，阀门a控制排气，制作果酒时应关闭阀门b以创造缺氧环境，适时打开阀门a几秒钟以排出产生的 气体，B正确；
C、醋酸菌是嗜氧菌，因此醋酸发酵过程中需要持续通氧，a是排气口，b是进气口，故应打开阀门a 排气，打开阀门b通气，C正确；
D、过程①～③所需的最适温度基本相同，为18-30℃，而过程④所需的最适温度为30-35℃，D错误。
故选：BC。
分析题图：甲是发酵装置，乙是果酒、果醋制作的实验原理，其中①是葡萄糖酵解形成丙酮酸的阶段，发生的场所是细胞质基质；②是酵母菌无氧呼吸的第二阶段，发生的场所是细胞质基质；③是有氧呼吸的第二、第三阶段，发生的场所是线粒体；④是醋酸菌发酵形成醋酸的过程。
本题结合图解，考查果酒和果醋的制作，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒和果醋制作的原理及条件，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。
17.【答案】BD
【解析】解：A、动物细胞培养基与植物细胞培养基的成分不同：动物细胞培养的培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和维生素等，另外还有动物血清等天然成分；植物细胞培养所需要的培养基包含植物生长和发育的全部营养成分，如矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和有机添加物，A错误；
B、两种技术都需要定期更换培养液，及时提供营养，同时避免代谢产物对培养物的毒害作用，B正确；
C、动物细胞培养的原理是细胞增殖，植物细胞培养的原理是植物细胞具有全能性，两者的原理不相同，C错误；
D、动物细胞培养和植物细胞培养过程均需无菌技术，D正确。
故选：BD。
植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。
本题组员考查植物的组织培养的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
18.【答案】ABC
【解析】解：A、当仅用一种限制酶切割载体时，仅产生一种长度的DNA片段，因此该载体最有可能为环状DNA分子，A正确；
B、当仅用一种限制酶切割载体时，两种限制酶切割产生的DNA片段等长，而两种限制酶同时切割时则产生两种不同长度的DNA片段，所以两种限制酶在载体上各有一个酶切位点，识别的序列不相同，B正确；
C、DNA片段总长度为800bp,两种限制酶同时切割时产生600bp和200bp两种长度的DNA片段，所以两种限制酶的酶切位点至少相距200bp,C正确；
D、电泳过程中DNA 的迁移速度与其分子大小有关，与其在缓冲液中的溶解度无关，D错误。
故选：ABC。
切割DNA的工具是限制酶，它们能够识别双链DNA分子的某种特定脱氧核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
本题结合图形，主要考查限制酶作用机理及作用结果，需要考生明确聚丙烯酰胺凝胶电泳结果及限制酶作用机理，再结合所学知识准确判断各选项。
19.【答案】ABC
【解析】解：A、蛋白质工程操作思路是以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，即思路过程顺序是④⑤①②③，A正确；
B、蛋白质工程是依据蛋白质的结构来设计氨基酸序列，因此蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作，B正确；
C、据图可知，①代表转录形成mRNA，②代表翻译合成多肽链，③代表肽链折叠形成一定的空间结构的蛋白质，④代表推测，⑤代表对现有的多肽链进行改造或合成，C正确；
D、蛋白质工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计，通过基因合成或基因改造实现，D错误。
故选：ABC。
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。
本题考查蛋白质工程的相关知识，要求考生识记蛋白质工程的概念、原理、基本途径，明确蛋白质工程的直接操作对象是基因，再结合所学的知识准确判断各选项。
20.【答案】AB
【解析】解：A、转基因食物潜在的安全隐患有转基因植物合成的某些新的蛋白质有可能成为新的过敏原、产生毒性物质、营养成分改变等，A正确；
B、转基因生物有可能被用于制造生物武器，如经过基因重组的致病病菌等，B正确；
C、生殖性克隆人属于无性繁殖，不能丰富人类基因的多样性，C错误；
D、为了国家安全，应在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，D错误。
故选：AB。
转基因生物的安全性问题：
（1）有关食物安全问题，反对者的观点是：不能对转基因食物安全性掉以轻心。他们的理由是：①反对“实质性等同“；②担心出现滞后效应；③担心出现新的过敏源；④担心营养成分改变；⑤担心会侵犯宗教信仰者或素食者的权益。
（2）有关生物安全问题，反对者的观点是：转基因植物可能会对生物多样性构成潜在的风险和威胁。他们的理由：①转基因植物扩散到种植区外变成野生种或杂草；②转基因植物竞争能力强，可能成为“入侵的外来物种“；③转基因植物的外源基因与细菌或病毒杂交，重组出有害的病原体；④可能使杂草成为有抗除草剂基因的“超级杂草“。
（3）有关环境安全问题，反对者的观点是：转基因生物会对生态系统稳定性和人类生活环境造成破坏。他们的理由：①转基因植物打破自然物种的原有界限，可能破坏生态系统稳定性；②重组微生物产生的中间产物可能造成二次污染；③重组DNA与微生物杂交是否会产生有害病原微生物；④转基因植物花粉中的有毒蛋白可能通过食物链进入生物。
本题主要考查转基因食品、生物武器的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
21.【答案】探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响 （充分）预冷 蓝色 DNA含量的多少 加速颜色反应 耐受性 DNA的提取量不同（或从蒜黄提取的DNA量最多、从辣椒提取的DNA量最少等） 将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间后，吸取上清液
【解析】解：（1）由表格可知该实验的变量是不同材料和不同保存温度，因此该探究性实验课题名称是探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。
（2）酒精预冷更有利于DNA的析出，第二步中所用酒精必须经过充分预冷才能使用。
（3）在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此，表中的颜色应该为蓝色，颜色的深浅代表DNA含量的多少。
（4）DNA检测时沸水浴加热的目的是加速颜色反应，同时说明DNA对高温有较强的耐受性。
（5）①因为低温抑制了相关酶的活性，使DNA降解速度减慢，所以与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多。②根据实验结果可知：等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，DNA的提取量不同（或从蒜黄提取的DNA量最多、从辣椒提取的DNA量最少，合理即可）。
（6）氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小，所以为了进一步提高DNA纯度，可将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间后，吸取上清液，然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。
故答案为：
（1）探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响
（2）（充分）预冷
（3）蓝色 DNA含量的多少
（4）加速颜色反应 耐受性
（5）DNA的提取量不同（或从蒜黄提取的DNA量最多、从辣椒提取的DNA量最少等）
（6）将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间后，吸取上清液
实验原理：提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
本题主要考查DNA的粗提取与鉴定的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
22.【答案】目的基因两侧的脱氧核苷酸序列 构建基因表达载体 HindⅢ和Sat3AⅠ HindⅢ和BamHⅠ 农杆菌转化 T-DNA X抗生素 抗原抗体杂交 NaPI 饲喂NaPI转基因的虫体质量较对照组轻，且每株棉铃虫数较对照组少
【解析】解：（1）要根据抗虫基因的一段核苷酸序列设计引物，引物的作用是使DNA聚合酶（Taq酶）从引物的 3'端开始连接脱氧核苷酸。如果直接将目的基因转入受体细胞不会表达，所以为了保证目的基因在受体细胞中稳定存在并且遗传给下一代并表达和发挥作用，需要构建基因表达载体，所以培育转基因抗虫棉的核心工作是构建基因表达载体。在构建基因表达载体时，目的基因需要插入到启动子和终止子之间，需要用HindⅢ和BAmHⅠ两种限制酶切割含抗虫基因的DNA片段，BamHⅠ5′-G↓GATCC-3′，Sau3AⅠ5′-↓GATC-3′，二者的粘性末端相同，在处理质粒的时候应选择HindⅢ和BamHⅠ两种限制酶，可以避免自身环化和反向连接，保证目的基因正向插入质粒中，同时防止质粒BclⅠ位点被切断。
（2）①将抗虫基因转入植物体内时，除了采用花粉管通道法，还可以采用农杆菌转化法。农杆菌转化法的原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA 可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。
②由图可知，构建基因表达载体时，目的基因的插入破坏了Y抗生素抗性基因，但有X抗生素抗性基因，因此导入重组质粒的细菌能在含有X抗生素的培养基上生存，但不能在含有Y抗生素的培养基上生存；若将细菌先接种在含有X抗生素的培养基上能生长，说明该细菌中已经导入外源质粒；为了检测目的基因在受体细胞中是否稳定表达，可采用抗原抗体杂交技术。
③由图可知，NaPI转基因棉花的抗虫效果最佳，因为饲喂NaPI转基因的虫体质量较对照组轻，且每株棉铃数较对照组少。
故答案为：
（1）目的基因两侧的脱氧核苷酸序列；构建基因表达载体；HindⅢ和Sat3AⅠ；HindⅢ和BamHⅠ
（2）①农杆菌转化；T-DNA
②X抗生素；抗原抗体杂交
③NaPI；饲喂NaPI转基因的虫体质量较对照组轻，且每株棉铃虫数较对照组少
基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定：
（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；
②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原抗体杂交技术。
（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作步骤，能根据图中限制酶的位置及题干要求选择正确的限制酶，属于考纲中识记和理解层次的考查。
23.【答案】液体 杀死涂布器上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者 a1 相同 不能 该细菌可能利用氮气作为氮源（或培养基中无酚红，无法证明该细菌分解了尿素） D
【解析】解：（1）液体培养基具有进行通气培养、振荡培养的优点，在通气或在振荡的条件下，有利于营养物质的摄入以及增加供氧量，所以有利于细胞生长，提高微生物数量。故图中扩大培养的过程中应选用液体培养基，涂布操作结束时仍需要灼烧涂布器的目的是杀死涂布器上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者。
（2）根据题意和图示可知，证明青霉素所起的作用是选择，则应选取菌落培养在空白的培养皿中，即a1，待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的培养皿中，观察两组实验菌落的生长情况。如果和培养皿中菌落的生长情况相同，即A2 和 C 培养皿中菌落的生长情况相同，则证明变异是在接触青霉素之前就已经产生了，青霉素所起的作用是选择。
（3）由表格内容可知，葡萄糖是碳源，尿素是氮源，但微生物也可能利用空气中的氮气作为氮源，故不能得出该细菌可利用尿素作为氮源的结论；并且培养基中未加入酚红指示剂，不能对菌种作进一步的鉴定。
（4）A、培养基用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，器皿可以使用高压蒸汽灭菌或干热灭菌，A错误；
B、实验操作过程前必须打开超净工作台上的紫外灯，而紫外线对人有伤害，实验过程中不能打开，B错误；
C、常用接种方法中的稀释涂布平板法，一般多用于筛选菌株，可以计数，可以观察菌落特征，但由于需要多次稀释，操作不如划线分离法简单，C错误；
D、平板接种细菌后，放入恒温培养箱中倒置培养，可防止培养基中的水蒸气蒸发，也避免培养皿盖的水滴落下造成污染，D正确。
故选：D。
故答案为：
（1）液体杀死涂布器上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者
（2）a1 相同
（3）不能 该细菌可能利用氮气作为氮源（或培养基中无酚红，无法证明该细菌分解了尿素）
（4）D
微生物培养中的易混点：1．无菌技术中对相关的器皿、接种用具和培养基等用不同的灭菌方法；2．常用接种方法：平板划线法一般多用于菌种的纯化，可以观察菌落特征；稀释涂布平板法一般多用于筛选菌株，可以计数，可以观察菌落特征；3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
本题考查微生物的培养和分离的知识点，意在强化学生的识记和理解能力，把握知识间内在联系的能力。
24.【答案】纤维素酶和果胶 高 胰蛋白酶、胶原蛋白酶 聚乙二醇 灭活病毒诱导 植物组织培养 ⑤ ⑥ 生长素和细胞分裂素 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性、染色体变异
【解析】解：（1）图中①②为去壁过程，可以使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁以便获得植物原生质体。此处使用的溶液浓度比番茄和马铃薯叶肉细胞的细胞液浓度略微较高，使细胞失水，保证植物细胞会发生质壁分离，以保持原生质体的正常形态不被破坏。在动物细胞培养中，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎的动物组织，使细胞相互分离。
（2）③是诱导原生质体融合的过程，该过程可采用化学试剂聚乙二醇（或PEG）诱导融合。动物细胞融合的方法与植物细胞融合不相同的是动物细胞融合可以使用灭活病毒诱导法诱导融合。
（3）形成杂种细胞后还需要采用植物组织培养技术将其培育成杂种植株，因此图中过程⑤⑥⑦为植物组织培养过程。图中过程⑤表示在一定的激素和营养等条件的诱导下，失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，这个过程属于脱分化。过程⑥表示愈伤组织重新分化成芽、根等器官，这个过程属于再分化。在培养过程中应注意控制好培养基中生长素和细胞分裂素这两种关键激素的浓度和比例，通常细胞分裂素和生长素的比例高时，有利于芽的分化，比例低时有利于根的分化，比例适中时利于形成愈伤组织。
（4）植物体细胞杂交融合了两种细胞的染色体，细胞融合过程利用了细胞膜具有流动性的特点，植物组织培养过程利用了植物细胞的全能性，因此植物体细胞杂交技术依据的生物学原理包括细胞膜的流动性、植物细胞的全能性及染色体变异。
故答案为：
（1）纤维素酶和果胶；高；胰蛋白酶、胶原蛋白酶
（2）聚乙二醇；灭活病毒诱导
（3）植物组织培养；⑤；⑥；生长素和细胞分裂素
（4）细胞膜的流动性、植物细胞的全能性、染色体变异
图中①②为去壁过程，③为细胞融合，④为细胞壁的再生，⑤为脱分化形成愈伤组织，⑥为再分化形成试管苗，⑦为练苗移栽。
本题主要考查植物组织培养的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力，能够运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中。
25.【答案】超数排卵 核移植 动物细胞核的全能性 胚胎移植 同期发情 获能 减数分裂Ⅱ 胚胎分割 内细胞团 滋养层（细胞） 血清或血浆
【解析】解：（1）应用1中供体2提供细胞质，为获取更多的细胞（卵母细胞），需对供体2注射促性腺激素以促进排卵，通过超数排卵处理以便获得更多的卵母细胞。使用核移植技术获得重组细胞，最终获得的小牛为克隆牛；该技术是体细胞核移植技术，所依据的原理是动物细胞核的全能性。
（2）应用2属于有性生殖，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫胚胎移植；移植前对受体牛进行同期发情处理，可以使供体和受体处于相同的生理状态，提高成功率。
（3）体外受精时，精子受精前需要进行（体外）获能处理，使其具备受精的能力；卵母细胞要发育到减数分裂Ⅱ（或MⅡ）才具备与精子受精的能力。
（4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：通过胚胎分割技术可获得二分胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。囊胚的滋养层细胞是在胚胎发育成桑葚胚后，桑葚胚进一步发育，开始出现分化，沿透明带内壁扩展和排列的一种个体较小的细胞；通常取少量滋养层细胞诊断是否患有遗传病或做性别鉴定，这样不会影响胚胎发育。
（5）动物细胞培养时，营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸，还需要加入动物血清或血浆等天然成分。
故答案为：
（1）超数排卵 核移植 动物细胞核的全能性
（2）胚胎移植 同期发情
（3）获能 减数分裂Ⅱ
（4）胚胎分割 内细胞团 滋养层（细胞）
（5）血清或血浆
分析题图：应用1中：供体Ⅰ提供细胞核，供体2提供细胞质，经过核移植技术形成重组细胞，并发育形成早期胚，再将胚胎移植到受体子宫发育成小牛，为克隆牛；应用2中：优良公牛和供体1配种形成受精卵，并发育成早期胚胎，再将胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属于有性生殖；应用3中：采用了胚胎分割移植技术；应用4中：从早期胚胎和原始性腺中获取胚胎干细胞，并进行体外干细胞培养。
本题主要考查胚胎工程的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力，能够结合题干信息和所学知识进行分析应用。
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