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2023届人教版高考生物一轮复习生物技术与工程单元测试（山东版）含答案
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这是一份2023届人教版高考生物一轮复习生物技术与工程单元测试（山东版）含答案，共11页。试卷主要包含了单项选择题，不定项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
单元清通关卷（十） 生物技术与工程
（满分：100分 时间：75分钟）
一、单项选择题（每小题2分，共30分）
1.[经典高考]下列关于细菌的叙述，正确的是（ ）
A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源
B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落
C.细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期
D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选
2.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（ ）
①大肠杆菌 ②霉菌
③放线菌 ④固氮细菌
A.④②③ B．①②③
C.①③④ D．只有③④
3.[2021·山东淄博市三模]微生物实验需要严格的无菌操作以防止污染，下列说法错误的是（ ）
A.紫外线用于实验室空气及实验台表面的消毒
B.无菌技术可有效地避免实验操作者自身被微生物感染
C.为防止DNA污染，PCR用水应来自加热煮沸的自来水
D.使用后的培养基在丢弃前需要灭菌处理
4.[2022·湖北黄冈市模拟]牛奶消毒及细菌检测实验的过程如下图所示，下列相关叙述不正确的是（ ）
A.步骤①为巴氏消毒法，步骤②为系列梯度稀释，步骤③中的牛肉膏蛋白胨均可提供碳源、氮源
B.实验中对试管、培养皿的灭菌是干热灭菌，这种方法适用的是能耐高温且需要保持干燥的物品
C.实验中的培养基适宜的灭菌方法是高压蒸汽灭菌
D.实验中采用平板划线法计数，最可能导致实验结果偏低
5.[2022·天津和平区二模]如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图，有关叙述正确的是（ ）
A.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落
B.在配制步骤②、③的培养基时，高压蒸汽灭菌后还需调pH
C.步骤③中需要配制含酚红的选择性培养基进行筛选
D.步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
6.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列说法正确的是（ ）
A．重组 DNA 技术所用的工具酶是限制酶、DNA 连接酶和载体
B．只有用同种限制酶切割DNA产生的黏性末端才能互补
C．用图中质粒和外源基因DNA构建重组质粒，可使用 SmaⅠ切割
D．使用 EcoRⅠ同时处理质粒和外源DNA，可能会发生质粒或者目的基因的自身环化
7.ChlL基因是蓝细菌拟核DNA上控制叶绿素合成的基因。为了研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建缺失ChlL基因的蓝细菌细胞。构建的过程如下图。相关叙述中，正确的是（ ）
A．②过程共形成2个磷酸二酯键
B．①②过程都需要使用限制性内切核酸酶和DNA连接酶
C．该项技术操作成功的标志是目的基因的表达
D.红霉素抗性基因是标记基因，用于筛选含有ChlL基因的受体细胞
8.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术或方法与原理不相符的是（ ）
A．植物组织培养和单克隆抗体——细胞的全能性
B．纤维素酶、果胶酶处理植物细胞壁——酶的专一性
C．原生质体融合和动物细胞融合——细胞膜的流动性
D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖
9.2019年1月24日，我国科学家宣布世界首批疾病克隆猴在中国诞生，这标志着中国体细胞克隆技术走向成熟，实验用疾病模型猴批量克隆“照进现实”，全球实验动物使用数量有望大幅降低，药物研发驶入“快车道”。下列相关叙述正确的是（ ）
A．体细胞核移植技术的原理是动物细胞的全能性
B.5只克隆猕猴细胞核基因型与核供体细胞一致
C.用于核移植的受体细胞通常选择处于减数分裂Ⅰ时期的卵母细胞
D．动物细胞培养时，将其置于含95% O2的培养箱中培养以满足细胞代谢
10.治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义，简要流程如图。下列有关叙述正确的是（ ）
A．过程①、②分别应用了核移植技术和胚胎移植技术
B．细胞培养中需提供5%CO2，目的是调节细胞外液的渗透压
C.胚胎干细胞可来源于囊胚中的内细胞团，具有发育的全能性
D．将图中获得的组织器官移植给个体A，不会发生免疫排斥反应
11.将人细胞与小鼠细胞融合得到的人－鼠杂种细胞进行长期培养，杂种细胞随机丢失一部分人的染色体后，染色体数目会保持稳定。选取三种杂种细胞，对编码人的芳烃羟化酶（AHH）和磷酸甘油酸激酶（PGK）的基因进行染色体定位研究，结果如表（“＋”表示有，“－”表示无）。
杂种细胞
人的染色体
AHH
PGK
2号
11号
17号
X
甲
－
＋
－
＋
－
＋
乙
＋
＋
－
－
＋
－
丙
－
＋
＋
＋
－
＋
下列有关叙述错误的是（ ）
A．人细胞与小鼠细胞融合体现了细胞膜具有流动性
B．基因在染色体上的位置称为基因座位
C．人细胞中11号染色体小于17号染色体
D．编码AHH和PGK的基因分别在2号染色体和X染色体上
12.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①②③分别表示其对应的结果，请据图回答，下面说法正确的是（ ）
A．若a是胚胎分割技术，则产生的①中，所有个体的基因型和表型一定相同
B．若b是体外受精技术，则形成②的过程属于克隆
C．若c是核移植技术，则形成③的过程体现了动物体细胞也具有全能性
D．①②③生产过程中的代孕母畜必须与供体母畜同期发情
13.目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。如图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法正确的是（ ）
A．获取外源基因通常用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶
B．导入外源基因的精子与卵细胞结合后即可完成转化过程
C．②采用体外受精技术，受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体
D．④过程是胚胎移植，移植的早期胚胎通常是原肠胚
14.下列关于治疗性克隆和生殖性克隆的说法，错误的是（ ）
A．使用病人自己的细胞产生胰岛细胞以治疗糖尿病属于治疗性克隆
B．将一个克隆的胚胎植入一个女性子宫发育出婴儿的过程属于生殖性克隆
C．治疗性克隆属于无性生殖，生殖性克隆属于有性生殖
D．治疗性克隆和生殖性克隆技术均需要应用动物细胞培养和核移植技术
15.某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构和功能很相似，只是热稳定性较差，进入人体后容易失效。现要将此酶开发成一种片剂，临床治疗食物的消化不良，最佳方案是（ ）
A．对此酶中的少数氨基酸替换，以改善其功能
B.将此酶与人蛋白酶进行拼接，形成新的蛋白酶
C．重新设计与创造一种全新的蛋白酶
D．减少此酶在片剂中的含量
二、不定项选择题（每题4分，共20分）
16.[2021·山东淄博市高三三模]以苹果汁为原料，经酒精发酵、醋酸发酵可制得果醋。下列说法错误的是（ ）
A．酒精发酵阶段和醋酸发酵阶段的适宜温度相同
B．酒精发酵阶段和醋酸发酵阶段均有大量气体产生
C．在醋酸发酵阶段醋酸杆菌将酒精转化为醋酸
D．在醋酸发酵阶段接种乳酸菌可提高醋酸的酸度
17.科研人员利用诱变方式选育高产β－胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，未突变的三孢布拉霉负菌不能在含有β－紫罗酮的培养基上生长。随着β－胡萝卜素含量的增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色。图甲为选育菌种及获得β－胡萝卜素的流程示意图，下列相关叙述正确的是（ ）
A．要得到乙培养基中的菌落，可用稀释涂布平板法进行②操作，然后培养
B．经①过程紫外线照射的三孢布拉霉负菌都能在含β－紫罗酮的培养基上生长
C．进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养
D．能在添加了β－紫罗酮的乙培养基上长成菌落的细菌，其遗传物质都发生了改变
18.荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是：在PCR反应体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。相关叙述正确的是（ ）
A．引物与荧光探针都具特异性，与模板结合时都遵循碱基互补配对原则
B．Taq酶可以催化子链沿着5′→3′方向延伸，需反应体系中ATP供能
C．若扩增n次，则共有2n－1个荧光分子生成
D.若用上述技术检测某基因的转录水平，则需要用到逆转录酶
19.关于现代生物工程技术应用的安全性，下列说法正确的是（ ）
A．对待生物武器的态度应明确而坚定，即坚决禁止生物武器
B．对转基因植物的外源DNA要认真选择，避免产生对人体有害或过敏的蛋白质
C．我国不反对治疗性克隆，允许有限制地进行克隆人实验
D．一旦发现转基因生物出现了安全性问题，要马上停止实验，并销毁重组生物
20.小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如下图所示，下列叙述错误的是（ ）
A．取细胞b，仅仅进行DNA分析不能鉴定动物性别
B．细胞a和细胞b内含有的核基因相同，但全能性高低不同
C．使用分割针分割囊胚期胚胎时，内细胞团要尽可能地均等分割
D．为了获得更多的囊胚，可注射激素促进雄鼠产生更多生殖细胞
三、非选择题（共50分）
21.（10分）某研究小组以紫葡萄为原料制作葡萄酒的基本流程和装置示意图如下。
请回答：
（1）制作葡萄浆前，对葡萄进行清洗和用 色的高锰酸钾溶液浸泡。制作酵母悬液时，在干酵母中加入少量温水和极少量蔗糖，待酵母悬液中出现 即可。
（2）装瓶后开始一段时间，发酵瓶中溶解氧的含量变化是 。发酵过程中，发酵瓶中酒精的含量变化是________________________________________________。
（3）下列关于装置中有水弯管作用的叙述，错误的是 。
A．隔绝气体出入
B．使发酵瓶内外的压强基本平衡
C．减少杂菌污染
D．有利于发酵瓶内形成缺氧环境
（4）实验中，判断发酵完毕的依据是 。
A.发酵瓶中pH开始下降
B．发酵瓶中停止出现气泡
C．发酵瓶中酒精浓度达到30%
D．发酵瓶中酵母菌数量急剧减少
（5）欲利用葡萄酒制作果醋，发酵瓶中应加入的菌种是 ，该菌种在 条件下能将乙醇氧化为醋酸。
22.（10分）鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。如图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是 。科研人员还在两种引物的一端分别加上了 和 序列，以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是 。
A．Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
B．目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
C．酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同
D．酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有 ，步骤③中需先用 处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先获得cDNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是________________________________
________________________________________________________________________。
23.（10分）犬细小病毒（CPV）感染幼犬后会引发出血性肠炎或心肌炎，VP2蛋白是其主要的抗原。如图是利用小鼠制备抗CPV单克隆抗体的基本流程示意图。回答下列问题：
（1）单克隆抗体技术的基础是 。抗体是由已免疫的B淋巴细胞分泌的，生产单克隆抗体时，一般不直接培养B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，原因是 。
（2）过程①是给实验小鼠注射 ，目的是获得_________________________。
（3）过程②采用的技术是 ，得到的是多种类型的细胞，原因是 。对获得的杂种细胞选择培养后，还需要在体外进行 ，并经过多次筛选才能获得数量足够多的能分泌抗体的杂交瘤细胞。
24.（10分）随着生物技术的发展，现代的试管婴儿技术不仅能解决部分人的生育问题，还能用于部分肿瘤疾病、遗传性疾病的治疗等，实现优生优育。回答下列问题：
（1）培育试管婴儿时，为了提高受孕率，需培植多个胚胎，因此需要用 处理，促进女性排出更多的卵子。
（2）从受精卵到原肠胚需依次经历哪些时期？卵裂→ 。
（3）一对夫妻，妻子是血友病患者，而丈夫正常。为了生育一个健康的孩子，进行胚胎移植前需要进行 ，目前最有效最准确的方法是SRY－PCR法，操作的基本程序是：从被检测的囊胚中取出几个 （填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，若未出现杂交链，胚胎性别为 ，而基因工程中 也会用到DNA探针。
（4）如图是治疗性克隆获取病人胚胎干细胞的两种方法，其中方法一中③的获得用到了 技术；方法二中获得④运用的原理是 。
25.（10分）α1－抗胰蛋白缺乏症是一种在北美较为常见的单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。对于该致病患者常可采用注射人α1－抗胰蛋白酶来缓解症状。据此回答：
（1）图1表示获取人α1－抗胰蛋白酶基因的两种方法，请回答下列问题：
①a过程是在酶的作用下完成的，该酶的作用特点是 。
②c过程需要的原料是____________________________________________________。
③要确定获得的基因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用 技术检测该基因的碱基序列。
（2）利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1－抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2所示。
①获得目的基因后，常利用PCR技术在体外将其大量扩增，其过程是高温变性后解链低温复性后 ，然后中温延伸在Taq酶的作用下从 进行互补链的合成。
②载体上绿色荧光蛋白（GEP）基因的作用是便于_____________________________。
基因表达载体d，除图中的标示部分外，还必须含有 。
（3）人类遗传病一般很难用药物治疗，基因治疗是指把 导入病人体内进行治疗。目前基因治疗分为 两种方法。
（4）在基因工程的基础上发展起了蛋白质工程，蛋白质工程目标是_____________
________________________________________________________________________。
（5）目前对转基因生物的安全性问题，人们存在争论主要从转基因生物可能存在 安全问题三个方面。
单元清通关卷(十) 生物技术与工程
1．D 自养型细菌(如硝化细菌)可直接利用空气中的CO2作碳源，异养型细菌(如大肠杆菌)只能利用培养基中现成的有机碳源(如葡萄糖)，A错误；常利用固体培养基分离获得细菌单菌落，B错误；细菌的生长曲线包括调整期、对数期、稳定期、衰亡期四个阶段，芽孢形成于细菌生长的稳定期，C错误；金黄色葡萄球菌能在含有高浓度NaCl的培养基中正常生长、繁殖，其他微生物则不能，故可用含高浓度NaCl的选择培养基来筛选金黄色葡萄球菌，D正确。
2．A 缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基中加青霉素可以抑制细菌和放线菌等原核生物细胞壁的合成，而霉菌属于真核生物，故能生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，对放线菌的生长无影响。
3．C 紫外线能破坏DNA的结构，故紫外线可用于实验室空气及实验台表面的消毒，A正确；无菌技术可以避免实验材料被感染，也可以避免操作者自身被微生物感染，B正确；为防止DNA污染，PCR用水应为高压的双蒸水，加热煮沸的自来水也仍存在细菌等微生物，C错误；使用后的培养基在丢弃前需要高压蒸汽灭菌处理，以免污染环境，D正确。
4．D 步骤①为巴氏消毒法，这种消毒法的特点是既能杀死牛奶中的微生物，又不破坏牛奶中的营养成分，步骤②采用无菌水进行梯度稀释，步骤③中的牛肉膏蛋白胨都能为微生物的生长提供碳源和氮源，A正确；实验中对试管、培养皿的灭菌可采用的方法是干热灭菌，这种方法适用的是能耐高温且需要保持干燥的物品，B正确；培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法，C正确；平板划线法不能对微生物进行计数，应该用稀释涂布平板法，D错误。
5．A 步骤③是利用稀释涂布平板法将聚集的细菌分散成单个，从而获得单细胞菌落，A正确；制备培养基时，需要先调节pH，后进行高压蒸汽灭菌，B错误；步骤③中含有酚红指示剂的培养基是鉴别培养基，C错误；由于实验目的是筛选高效分解尿素细菌，所以应该以尿素作为唯一的氮源，而不应该加入牛肉膏和蛋白胨，D错误，
6．D 重组DNA技术中常用的工具酶有限制酶和DNA连接酶，载体不属于工具酶，A错误；可用同种限制酶切割DNA产生互补的黏性末端，也可用双酶切法切割DNA产生互补的黏性末端，B错误；若使用SmaⅠ切割质粒和外源基因DNA会导致质粒中抗生素抗性基因(标记基因)和目的基因被破坏，C错误；使用 EcoRⅠ同时处理质粒和外源DNA，可能会发生质粒与质粒的结合、目的基因与目的基因的结合即自身环化，D正确。
7．B ②过程共形成4个磷酸二酯键，A错误；①过程和②过程都需要限制酶切割和DNA连接酶连接，形成重组质粒，B正确；因最终得到的是无ChlL基因的蓝细菌，故操作成功的标志并不是目的基因的表达，C错误；插入红霉素抗性基因后ChlL基因被破坏，因此不可能是筛选含有ChlL基因的受体细胞，D错误。
8．A 植物组织培养技术利用了细胞的全能性，单克隆抗体的制备利用了细胞膜的流动性和细胞增殖的原理，A错误；细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，利用酶的专一性，纤维素酶和果胶酶能够去细胞壁，B正确；原生质体融合和动物细胞融合的过程中，都利用了细胞膜的流动性，C正确；紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养都利用了细胞增殖的原理，从而获得相应的细胞产物，D正确。
9．B 体细胞核移植技术的原理是动物细胞核的全能性，A错误；5只克隆猕猴细胞核基因型与核供体细胞一致，B正确；用于核移植的受体细胞通常选择处于减数分裂Ⅱ期的卵母细胞，C错误；动物细胞培养时，将其置于95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养以满足细胞代谢，D错误。
10．C 过程①是核移植技术，过程②是早期胚胎培养，A错误；细胞培养中需提供5%CO2，目的是维持培养液的pH值，B错误；胚胎干细胞来源于囊胚的内细胞团或原始性腺，具有发育的全能性，C正确；图中的重组细胞的细胞核来自个体B，因此将图中获得的组织器官移植给A个体，会发生免疫排斥，D错误。
11．C 人细胞与小鼠细胞融合体现了细胞膜具有流动性，A正确；基因在染色体上的位置称为基因座位，B正确；此实验无法证明人细胞中11号染色体小于17号染色体，C错误；根据图表分析可判断，编码AHH的基因在2号染色体上，编码PGK的基因在X染色体上，D正确。
12．D 利用胚胎分割技术得到的个体是由同一个受精卵分裂发育的，所有个体的基因型相同，但表型由基因型和环境共同决定，故表型不一定相同，A错误；体外受精属于有性生殖，而克隆属于无性生殖，B错误；核移植技术体现动物细胞核具有全能性，C错误；①②③生产过程均需进行胚胎移植，代孕母畜必须与供体母畜同期发情，以确保生殖器官的生理环境相同，D正确。
13．C 获取外源基因通常用到的工具酶是限制酶，A错误；导入外源基因的精子与卵细胞结合后且外源基因能进行复制并完成了表达，才说明完成了转化过程，B错误；②采用体外受精技术，受精的标志是观察到两个极体，C正确；④过程是胚胎移植，移植的早期胚胎通常是桑葚胚或囊胚，D错误。
14．C 要把病人的胚胎干细胞在一定的条件下，通过离体培养和诱导分化形成胰岛细胞以治疗糖尿病，属于治疗性克隆；生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆，即用生殖技术将一个克隆的胚胎植入一个女性子宫发育出婴儿的过程；治疗性克隆和生殖性克隆都属于无性生殖；治疗性克隆和生殖性克隆技术均需要应用动物细胞培养和核移植技术。
15．A 因某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶结构和功能很相似，可见要想使蛋白酶热稳定性有所提高，就要改变蛋白质的结构，此类问题一般是对蛋白质中的个别氨基酸进行替换。
16．ABD 酒精发酵阶段适宜温度为18～30℃，醋酸发酵阶段的适宜温度为30～35℃，A错误；醋酸发酵阶段产生醋酸，无气体产生，B错误；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，C正确；在醋酸发酵阶段接种醋酸菌可提高醋酸的酸度，乳酸菌无氧呼吸产物是乳酸，不是醋酸，D错误。
17．ACD 根据分析可知要得到乙培养基中的分布均匀的菌落，可用稀释涂布平板法接种，A正确；使用紫外线照射进行诱变育种，其原理是基因突变，由于基因突变的低频性和不定向性，经①过程紫外线照射的三孢布拉霉负菌不可能都能在含β－紫罗酮的培养基上生长，B错误；根据题干可知未突变的三孢布拉霉负菌不能在含有β－紫罗酮的培养基上生长。随着β－胡萝卜素含量的增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色，进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养，C正确、D正确。
18．ACD 引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则，A正确；根据图示中引物延伸的方向可以确定，Taq酶只能从引物的3′端延伸子链，催化子链沿着5′→3′方向延伸，需dNTP作为原料，不需要反应体系中ATP供能，B错误；据题意可知，扩增1次，子代中有1个荧光分子，扩增2次，子代中有3个荧光分子，若扩增n次，则共有2n－1个荧光分子生成，C正确；荧光探针为DNA序列，基因转录的产物是mRNA，若用上述技术检测某基因的转录水平，则需要先形成cDNA再进行PCR扩增，因此用到逆转录酶，D正确。
19．ABD 对待生物武器的态度应明确而坚定，即坚决禁止生物武器，A正确；对转基因植物的外源DNA要进行认真选择，避免产生对人体有害或过敏的蛋白质，B正确；中国对于克隆人的态度是不反对治疗性克隆，禁止进行克隆人的实验，C错误；一旦发现转基因生物出现了安全性问题，要马上停止实验，并销毁重组生物，D正确。
20．AD 细胞b是滋养层细胞，通过DNA分析可以鉴定动物性别，A错误；细胞a是内细胞团，细胞b是滋养层细胞，两者来源相同，细胞内核基因相同，但是滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，内细胞团发育成胎儿的各种组织，所以全能性高低不同，B正确；进行胚胎分割时，要尽可能的将内细胞团均等分割，C正确；为了获得更多的囊胚，可注射激素促进雌鼠产生更多生殖细胞，D错误。
21．答案：(1)红(紫) 气泡 (2)减少 增加 (3)A (4)B (5)醋酸菌 有氧
解析：(1)制作葡萄浆前，将成熟的葡萄用水清洗干净，再用红(紫)色的高锰酸钾溶液浸泡约5 min。为了使酵母菌迅速发生作用，制作酵母悬液时，在干酵母中应加入少量温水和极少量蔗糖，待酵母悬液中出现气泡即可。(2)装瓶后开始一段时间，酵母菌即进行需氧呼吸，快速繁殖，消耗发酵瓶内的氧气，瓶内溶解氧的含量减少。氧气耗尽后，酵母菌进行厌氧呼吸，生成酒精和二氧化碳，酒精含量逐渐增多。(3)装置中有水弯管可使发酵瓶内外的压强基本平衡，并减少杂菌污染，有利于发酵瓶内形成缺氧环境。(4)当发酵瓶中停止出现气泡时，即表示发酵完毕。(5)制作果醋需用醋酸菌作为菌种，该菌种在有氧条件下能将乙醇氧化为醋酸。
22．答案：(1)鸡干扰素基因两端的部分核苷酸序列 GAATTC GGATCC AC (2)复制原点 Ca2＋ (3)鸡干扰素基因未能导入烟草愈伤组织细胞或导入烟草愈伤组织细胞的鸡干扰素基因未能转录
解析：分析图解，图中过程①表示获取目的基因，过程②表示基因表达载体的构建，过程③表示将重组质粒导入农杆菌，过程④表示目的基因的检测和鉴定。
(1)利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列；由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割目的基因和质粒，因此科研人员还在两种引物的一端分别加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点，A正确；目的基因编码蛋白质的序列中，不能有限制酶的切割位点，B错误；酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同，否则会自身环化，C正确；酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列应该不同，否则会自身环化，D错误。故选AC。
(2)基因表达载体必须具备的有目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点，图中还缺复制原点；微生物细胞作为受体细胞时，需要钙离子处理使其变为感受态细胞，因此过程③中需先用Ca2＋(或CaCl2)处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)提取的愈伤组织细胞的RNA通过逆转录过程得到DNA；最终未能检测出干扰素基因，可能是因为鸡干扰素基因未能导入烟草愈伤组织细胞或导入烟草愈伤组织细胞的鸡干扰素基因未能转录。
23．答案：(1)动物细胞培养 B淋巴细胞不能无限增殖，骨髓瘤细胞不能分泌抗体 (2)VP2蛋白(或灭活的CPV) 诱导小鼠产生能分泌抗VP2蛋白抗体的B淋巴细胞 (3)动物细胞融合 细胞融合是随机的，且不能百分之百成功融合 克隆化培养和抗体检测
解析：(1)单克隆抗体技术的基础是动物细胞培养。B淋巴细胞不能无限增殖，骨髓瘤细胞不能分泌抗体，但二者融合的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能分泌抗体。
(2)过程①是给实验小鼠注射VP2蛋白(或灭活的CPV)，目的是诱导小鼠产生能分泌抗VP2蛋白抗体的B淋巴细胞。
(3)过程②采用的技术是动物细胞融合，由于细胞随机融合，且不能百分之百成功融合，因此获得的是多种类型的细胞，包括未融合的细胞、同种融合的细胞和杂种细胞。对获得的杂种细胞选择培养后，还需要再进行体外克隆化培养和抗体检测，并经过多次筛选才能获得目的细胞。
24．答案：(1)促性腺激素 (2)桑葚胚→囊胚 (3)性别鉴定 滋养层 女性 目的基因的检测和鉴定 (4)显微注射 细胞膜具有流动性
解析：(1)促性腺激素能促进超数排卵。(2)受精卵发育至原肠胚需要依次经历的时期为卵裂→桑葚胚→囊胚。(3)血友病属于伴X染色体隐性遗传病(相关基因用B、b表示)。一对夫妻，妻子是血友病患者(XbXb)，而丈夫正常(XBY)，则他们所生儿子均患病，女儿均正常，因此为了生育一个健康的孩子，进行胚胎移植前需要进行性别鉴定。目前最有效最准确的方法是SRY－PCR法，操作的基本程序是：从被检测的囊胚中取出几个滋养层细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因(即SRY基因)制成的探针进行检测，若未出现杂交链，说明不含Y染色体，则胚胎性别为女性。基因工程中目的基因的检测和鉴定也会用到DNA探针。(4)方法一中③的获得用到了显微注射技术；方法二中获得④的方法是细胞融合，而细胞融合的原理是细胞膜具有流动性。
25．答案：(1)①识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子 ②4种游离的脱氧核苷酸 ③DNA分子杂交 (2)①引物结合到互补DNA链上 引物 ②筛选含有目的基因的受体细胞 启动子、终止子 (3)正常基因 体内基因治疗、体外基因治疗 (4)根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质结构进行分子设计 (5)生物、食品、环境
解析：(1)①a过程是在限制酶的作用下完成的，该酶的作用特点是识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。②c过程表示逆转录，需要的原料是4种游离的脱氧核苷酸。③要确定获得的基因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用DNA分子杂交技术检测该基因的碱基序列。(2)利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1－抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2所示。①获得目的基因后，常利用PCR技术在体外将其大量扩增，其过程是高温变性后解链，低温复性后引物结合到互补DNA链上，然后中温延伸在Taq酶的作用下从引物进行互补链的合成。②载体上绿色荧光蛋白(GEP)基因的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞。基因表达载体d，除图中的标示部分外，还必须含有启动子、终止子。(3)人类遗传病一般很难用药物治疗，基因治疗是指把正常基因导入病人体内进行治疗。目前基因治疗分为体内基因治疗、体外基因治疗两种方法。(4)在基因工程的基础上发展起了蛋白质工程，蛋白质工程目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质结构进行分子设计。(5)目前对转基因生物的安全性问题，人们存在争论主要从转基因生物可能存在生物、食品、环境安全问题三个方面。
单元清通关卷（十） 生物技术与工程
（满分：100分 时间：75分钟）
一、单项选择题（每小题2分，共30分）
1.[经典高考]下列关于细菌的叙述，正确的是（ ）
A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源
B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落
C.细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期
D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选
2.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（ ）
①大肠杆菌 ②霉菌
③放线菌 ④固氮细菌
A.④②③ B．①②③
C.①③④ D．只有③④
3.[2021·山东淄博市三模]微生物实验需要严格的无菌操作以防止污染，下列说法错误的是（ ）
A.紫外线用于实验室空气及实验台表面的消毒
B.无菌技术可有效地避免实验操作者自身被微生物感染
C.为防止DNA污染，PCR用水应来自加热煮沸的自来水
D.使用后的培养基在丢弃前需要灭菌处理
4.[2022·湖北黄冈市模拟]牛奶消毒及细菌检测实验的过程如下图所示，下列相关叙述不正确的是（ ）
A.步骤①为巴氏消毒法，步骤②为系列梯度稀释，步骤③中的牛肉膏蛋白胨均可提供碳源、氮源
B.实验中对试管、培养皿的灭菌是干热灭菌，这种方法适用的是能耐高温且需要保持干燥的物品
C.实验中的培养基适宜的灭菌方法是高压蒸汽灭菌
D.实验中采用平板划线法计数，最可能导致实验结果偏低
5.[2022·天津和平区二模]如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图，有关叙述正确的是（ ）
A.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落
B.在配制步骤②、③的培养基时，高压蒸汽灭菌后还需调pH
C.步骤③中需要配制含酚红的选择性培养基进行筛选
D.步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
6.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列说法正确的是（ ）
A．重组 DNA 技术所用的工具酶是限制酶、DNA 连接酶和载体
B．只有用同种限制酶切割DNA产生的黏性末端才能互补
C．用图中质粒和外源基因DNA构建重组质粒，可使用 SmaⅠ切割
D．使用 EcoRⅠ同时处理质粒和外源DNA，可能会发生质粒或者目的基因的自身环化
7.ChlL基因是蓝细菌拟核DNA上控制叶绿素合成的基因。为了研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建缺失ChlL基因的蓝细菌细胞。构建的过程如下图。相关叙述中，正确的是（ ）
A．②过程共形成2个磷酸二酯键
B．①②过程都需要使用限制性内切核酸酶和DNA连接酶
C．该项技术操作成功的标志是目的基因的表达
D.红霉素抗性基因是标记基因，用于筛选含有ChlL基因的受体细胞
8.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术或方法与原理不相符的是（ ）
A．植物组织培养和单克隆抗体——细胞的全能性
B．纤维素酶、果胶酶处理植物细胞壁——酶的专一性
C．原生质体融合和动物细胞融合——细胞膜的流动性
D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖
9.2019年1月24日，我国科学家宣布世界首批疾病克隆猴在中国诞生，这标志着中国体细胞克隆技术走向成熟，实验用疾病模型猴批量克隆“照进现实”，全球实验动物使用数量有望大幅降低，药物研发驶入“快车道”。下列相关叙述正确的是（ ）
A．体细胞核移植技术的原理是动物细胞的全能性
B.5只克隆猕猴细胞核基因型与核供体细胞一致
C.用于核移植的受体细胞通常选择处于减数分裂Ⅰ时期的卵母细胞
D．动物细胞培养时，将其置于含95% O2的培养箱中培养以满足细胞代谢
10.治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义，简要流程如图。下列有关叙述正确的是（ ）
A．过程①、②分别应用了核移植技术和胚胎移植技术
B．细胞培养中需提供5%CO2，目的是调节细胞外液的渗透压
C.胚胎干细胞可来源于囊胚中的内细胞团，具有发育的全能性
D．将图中获得的组织器官移植给个体A，不会发生免疫排斥反应
11.将人细胞与小鼠细胞融合得到的人－鼠杂种细胞进行长期培养，杂种细胞随机丢失一部分人的染色体后，染色体数目会保持稳定。选取三种杂种细胞，对编码人的芳烃羟化酶（AHH）和磷酸甘油酸激酶（PGK）的基因进行染色体定位研究，结果如表（“＋”表示有，“－”表示无）。
杂种细胞
人的染色体
AHH
PGK
2号
11号
17号
X
甲
－
＋
－
＋
－
＋
乙
＋
＋
－
－
＋
－
丙
－
＋
＋
＋
－
＋
下列有关叙述错误的是（ ）
A．人细胞与小鼠细胞融合体现了细胞膜具有流动性
B．基因在染色体上的位置称为基因座位
C．人细胞中11号染色体小于17号染色体
D．编码AHH和PGK的基因分别在2号染色体和X染色体上
12.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①②③分别表示其对应的结果，请据图回答，下面说法正确的是（ ）
A．若a是胚胎分割技术，则产生的①中，所有个体的基因型和表型一定相同
B．若b是体外受精技术，则形成②的过程属于克隆
C．若c是核移植技术，则形成③的过程体现了动物体细胞也具有全能性
D．①②③生产过程中的代孕母畜必须与供体母畜同期发情
13.目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。如图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法正确的是（ ）
A．获取外源基因通常用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶
B．导入外源基因的精子与卵细胞结合后即可完成转化过程
C．②采用体外受精技术，受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体
D．④过程是胚胎移植，移植的早期胚胎通常是原肠胚
14.下列关于治疗性克隆和生殖性克隆的说法，错误的是（ ）
A．使用病人自己的细胞产生胰岛细胞以治疗糖尿病属于治疗性克隆
B．将一个克隆的胚胎植入一个女性子宫发育出婴儿的过程属于生殖性克隆
C．治疗性克隆属于无性生殖，生殖性克隆属于有性生殖
D．治疗性克隆和生殖性克隆技术均需要应用动物细胞培养和核移植技术
15.某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构和功能很相似，只是热稳定性较差，进入人体后容易失效。现要将此酶开发成一种片剂，临床治疗食物的消化不良，最佳方案是（ ）
A．对此酶中的少数氨基酸替换，以改善其功能
B.将此酶与人蛋白酶进行拼接，形成新的蛋白酶
C．重新设计与创造一种全新的蛋白酶
D．减少此酶在片剂中的含量
二、不定项选择题（每题4分，共20分）
16.[2021·山东淄博市高三三模]以苹果汁为原料，经酒精发酵、醋酸发酵可制得果醋。下列说法错误的是（ ）
A．酒精发酵阶段和醋酸发酵阶段的适宜温度相同
B．酒精发酵阶段和醋酸发酵阶段均有大量气体产生
C．在醋酸发酵阶段醋酸杆菌将酒精转化为醋酸
D．在醋酸发酵阶段接种乳酸菌可提高醋酸的酸度
17.科研人员利用诱变方式选育高产β－胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，未突变的三孢布拉霉负菌不能在含有β－紫罗酮的培养基上生长。随着β－胡萝卜素含量的增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色。图甲为选育菌种及获得β－胡萝卜素的流程示意图，下列相关叙述正确的是（ ）
A．要得到乙培养基中的菌落，可用稀释涂布平板法进行②操作，然后培养
B．经①过程紫外线照射的三孢布拉霉负菌都能在含β－紫罗酮的培养基上生长
C．进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养
D．能在添加了β－紫罗酮的乙培养基上长成菌落的细菌，其遗传物质都发生了改变
18.荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是：在PCR反应体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。相关叙述正确的是（ ）
A．引物与荧光探针都具特异性，与模板结合时都遵循碱基互补配对原则
B．Taq酶可以催化子链沿着5′→3′方向延伸，需反应体系中ATP供能
C．若扩增n次，则共有2n－1个荧光分子生成
D.若用上述技术检测某基因的转录水平，则需要用到逆转录酶
19.关于现代生物工程技术应用的安全性，下列说法正确的是（ ）
A．对待生物武器的态度应明确而坚定，即坚决禁止生物武器
B．对转基因植物的外源DNA要认真选择，避免产生对人体有害或过敏的蛋白质
C．我国不反对治疗性克隆，允许有限制地进行克隆人实验
D．一旦发现转基因生物出现了安全性问题，要马上停止实验，并销毁重组生物
20.小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如下图所示，下列叙述错误的是（ ）
A．取细胞b，仅仅进行DNA分析不能鉴定动物性别
B．细胞a和细胞b内含有的核基因相同，但全能性高低不同
C．使用分割针分割囊胚期胚胎时，内细胞团要尽可能地均等分割
D．为了获得更多的囊胚，可注射激素促进雄鼠产生更多生殖细胞
三、非选择题（共50分）
21.（10分）某研究小组以紫葡萄为原料制作葡萄酒的基本流程和装置示意图如下。
请回答：
（1）制作葡萄浆前，对葡萄进行清洗和用 色的高锰酸钾溶液浸泡。制作酵母悬液时，在干酵母中加入少量温水和极少量蔗糖，待酵母悬液中出现 即可。
（2）装瓶后开始一段时间，发酵瓶中溶解氧的含量变化是 。发酵过程中，发酵瓶中酒精的含量变化是________________________________________________。
（3）下列关于装置中有水弯管作用的叙述，错误的是 。
A．隔绝气体出入
B．使发酵瓶内外的压强基本平衡
C．减少杂菌污染
D．有利于发酵瓶内形成缺氧环境
（4）实验中，判断发酵完毕的依据是 。
A.发酵瓶中pH开始下降
B．发酵瓶中停止出现气泡
C．发酵瓶中酒精浓度达到30%
D．发酵瓶中酵母菌数量急剧减少
（5）欲利用葡萄酒制作果醋，发酵瓶中应加入的菌种是 ，该菌种在 条件下能将乙醇氧化为醋酸。
22.（10分）鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。如图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是 。科研人员还在两种引物的一端分别加上了 和 序列，以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是 。
A．Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
B．目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
C．酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同
D．酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有 ，步骤③中需先用 处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先获得cDNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是________________________________
________________________________________________________________________。
23.（10分）犬细小病毒（CPV）感染幼犬后会引发出血性肠炎或心肌炎，VP2蛋白是其主要的抗原。如图是利用小鼠制备抗CPV单克隆抗体的基本流程示意图。回答下列问题：
（1）单克隆抗体技术的基础是 。抗体是由已免疫的B淋巴细胞分泌的，生产单克隆抗体时，一般不直接培养B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，原因是 。
（2）过程①是给实验小鼠注射 ，目的是获得_________________________。
（3）过程②采用的技术是 ，得到的是多种类型的细胞，原因是 。对获得的杂种细胞选择培养后，还需要在体外进行 ，并经过多次筛选才能获得数量足够多的能分泌抗体的杂交瘤细胞。
24.（10分）随着生物技术的发展，现代的试管婴儿技术不仅能解决部分人的生育问题，还能用于部分肿瘤疾病、遗传性疾病的治疗等，实现优生优育。回答下列问题：
（1）培育试管婴儿时，为了提高受孕率，需培植多个胚胎，因此需要用 处理，促进女性排出更多的卵子。
（2）从受精卵到原肠胚需依次经历哪些时期？卵裂→ 。
（3）一对夫妻，妻子是血友病患者，而丈夫正常。为了生育一个健康的孩子，进行胚胎移植前需要进行 ，目前最有效最准确的方法是SRY－PCR法，操作的基本程序是：从被检测的囊胚中取出几个 （填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，若未出现杂交链，胚胎性别为 ，而基因工程中 也会用到DNA探针。
（4）如图是治疗性克隆获取病人胚胎干细胞的两种方法，其中方法一中③的获得用到了 技术；方法二中获得④运用的原理是 。
25.（10分）α1－抗胰蛋白缺乏症是一种在北美较为常见的单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。对于该致病患者常可采用注射人α1－抗胰蛋白酶来缓解症状。据此回答：
（1）图1表示获取人α1－抗胰蛋白酶基因的两种方法，请回答下列问题：
①a过程是在酶的作用下完成的，该酶的作用特点是 。
②c过程需要的原料是____________________________________________________。
③要确定获得的基因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用 技术检测该基因的碱基序列。
（2）利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1－抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2所示。
①获得目的基因后，常利用PCR技术在体外将其大量扩增，其过程是高温变性后解链低温复性后 ，然后中温延伸在Taq酶的作用下从 进行互补链的合成。
②载体上绿色荧光蛋白（GEP）基因的作用是便于_____________________________。
基因表达载体d，除图中的标示部分外，还必须含有 。
（3）人类遗传病一般很难用药物治疗，基因治疗是指把 导入病人体内进行治疗。目前基因治疗分为 两种方法。
（4）在基因工程的基础上发展起了蛋白质工程，蛋白质工程目标是_____________
________________________________________________________________________。
（5）目前对转基因生物的安全性问题，人们存在争论主要从转基因生物可能存在 安全问题三个方面。
单元清通关卷(十) 生物技术与工程
1．D 自养型细菌(如硝化细菌)可直接利用空气中的CO2作碳源，异养型细菌(如大肠杆菌)只能利用培养基中现成的有机碳源(如葡萄糖)，A错误；常利用固体培养基分离获得细菌单菌落，B错误；细菌的生长曲线包括调整期、对数期、稳定期、衰亡期四个阶段，芽孢形成于细菌生长的稳定期，C错误；金黄色葡萄球菌能在含有高浓度NaCl的培养基中正常生长、繁殖，其他微生物则不能，故可用含高浓度NaCl的选择培养基来筛选金黄色葡萄球菌，D正确。
2．A 缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基中加青霉素可以抑制细菌和放线菌等原核生物细胞壁的合成，而霉菌属于真核生物，故能生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，对放线菌的生长无影响。
3．C 紫外线能破坏DNA的结构，故紫外线可用于实验室空气及实验台表面的消毒，A正确；无菌技术可以避免实验材料被感染，也可以避免操作者自身被微生物感染，B正确；为防止DNA污染，PCR用水应为高压的双蒸水，加热煮沸的自来水也仍存在细菌等微生物，C错误；使用后的培养基在丢弃前需要高压蒸汽灭菌处理，以免污染环境，D正确。
4．D 步骤①为巴氏消毒法，这种消毒法的特点是既能杀死牛奶中的微生物，又不破坏牛奶中的营养成分，步骤②采用无菌水进行梯度稀释，步骤③中的牛肉膏蛋白胨都能为微生物的生长提供碳源和氮源，A正确；实验中对试管、培养皿的灭菌可采用的方法是干热灭菌，这种方法适用的是能耐高温且需要保持干燥的物品，B正确；培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法，C正确；平板划线法不能对微生物进行计数，应该用稀释涂布平板法，D错误。
5．A 步骤③是利用稀释涂布平板法将聚集的细菌分散成单个，从而获得单细胞菌落，A正确；制备培养基时，需要先调节pH，后进行高压蒸汽灭菌，B错误；步骤③中含有酚红指示剂的培养基是鉴别培养基，C错误；由于实验目的是筛选高效分解尿素细菌，所以应该以尿素作为唯一的氮源，而不应该加入牛肉膏和蛋白胨，D错误，
6．D 重组DNA技术中常用的工具酶有限制酶和DNA连接酶，载体不属于工具酶，A错误；可用同种限制酶切割DNA产生互补的黏性末端，也可用双酶切法切割DNA产生互补的黏性末端，B错误；若使用SmaⅠ切割质粒和外源基因DNA会导致质粒中抗生素抗性基因(标记基因)和目的基因被破坏，C错误；使用 EcoRⅠ同时处理质粒和外源DNA，可能会发生质粒与质粒的结合、目的基因与目的基因的结合即自身环化，D正确。
7．B ②过程共形成4个磷酸二酯键，A错误；①过程和②过程都需要限制酶切割和DNA连接酶连接，形成重组质粒，B正确；因最终得到的是无ChlL基因的蓝细菌，故操作成功的标志并不是目的基因的表达，C错误；插入红霉素抗性基因后ChlL基因被破坏，因此不可能是筛选含有ChlL基因的受体细胞，D错误。
8．A 植物组织培养技术利用了细胞的全能性，单克隆抗体的制备利用了细胞膜的流动性和细胞增殖的原理，A错误；细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，利用酶的专一性，纤维素酶和果胶酶能够去细胞壁，B正确；原生质体融合和动物细胞融合的过程中，都利用了细胞膜的流动性，C正确；紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养都利用了细胞增殖的原理，从而获得相应的细胞产物，D正确。
9．B 体细胞核移植技术的原理是动物细胞核的全能性，A错误；5只克隆猕猴细胞核基因型与核供体细胞一致，B正确；用于核移植的受体细胞通常选择处于减数分裂Ⅱ期的卵母细胞，C错误；动物细胞培养时，将其置于95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养以满足细胞代谢，D错误。
10．C 过程①是核移植技术，过程②是早期胚胎培养，A错误；细胞培养中需提供5%CO2，目的是维持培养液的pH值，B错误；胚胎干细胞来源于囊胚的内细胞团或原始性腺，具有发育的全能性，C正确；图中的重组细胞的细胞核来自个体B，因此将图中获得的组织器官移植给A个体，会发生免疫排斥，D错误。
11．C 人细胞与小鼠细胞融合体现了细胞膜具有流动性，A正确；基因在染色体上的位置称为基因座位，B正确；此实验无法证明人细胞中11号染色体小于17号染色体，C错误；根据图表分析可判断，编码AHH的基因在2号染色体上，编码PGK的基因在X染色体上，D正确。
12．D 利用胚胎分割技术得到的个体是由同一个受精卵分裂发育的，所有个体的基因型相同，但表型由基因型和环境共同决定，故表型不一定相同，A错误；体外受精属于有性生殖，而克隆属于无性生殖，B错误；核移植技术体现动物细胞核具有全能性，C错误；①②③生产过程均需进行胚胎移植，代孕母畜必须与供体母畜同期发情，以确保生殖器官的生理环境相同，D正确。
13．C 获取外源基因通常用到的工具酶是限制酶，A错误；导入外源基因的精子与卵细胞结合后且外源基因能进行复制并完成了表达，才说明完成了转化过程，B错误；②采用体外受精技术，受精的标志是观察到两个极体，C正确；④过程是胚胎移植，移植的早期胚胎通常是桑葚胚或囊胚，D错误。
14．C 要把病人的胚胎干细胞在一定的条件下，通过离体培养和诱导分化形成胰岛细胞以治疗糖尿病，属于治疗性克隆；生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆，即用生殖技术将一个克隆的胚胎植入一个女性子宫发育出婴儿的过程；治疗性克隆和生殖性克隆都属于无性生殖；治疗性克隆和生殖性克隆技术均需要应用动物细胞培养和核移植技术。
15．A 因某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶结构和功能很相似，可见要想使蛋白酶热稳定性有所提高，就要改变蛋白质的结构，此类问题一般是对蛋白质中的个别氨基酸进行替换。
16．ABD 酒精发酵阶段适宜温度为18～30℃，醋酸发酵阶段的适宜温度为30～35℃，A错误；醋酸发酵阶段产生醋酸，无气体产生，B错误；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，C正确；在醋酸发酵阶段接种醋酸菌可提高醋酸的酸度，乳酸菌无氧呼吸产物是乳酸，不是醋酸，D错误。
17．ACD 根据分析可知要得到乙培养基中的分布均匀的菌落，可用稀释涂布平板法接种，A正确；使用紫外线照射进行诱变育种，其原理是基因突变，由于基因突变的低频性和不定向性，经①过程紫外线照射的三孢布拉霉负菌不可能都能在含β－紫罗酮的培养基上生长，B错误；根据题干可知未突变的三孢布拉霉负菌不能在含有β－紫罗酮的培养基上生长。随着β－胡萝卜素含量的增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色，进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养，C正确、D正确。
18．ACD 引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则，A正确；根据图示中引物延伸的方向可以确定，Taq酶只能从引物的3′端延伸子链，催化子链沿着5′→3′方向延伸，需dNTP作为原料，不需要反应体系中ATP供能，B错误；据题意可知，扩增1次，子代中有1个荧光分子，扩增2次，子代中有3个荧光分子，若扩增n次，则共有2n－1个荧光分子生成，C正确；荧光探针为DNA序列，基因转录的产物是mRNA，若用上述技术检测某基因的转录水平，则需要先形成cDNA再进行PCR扩增，因此用到逆转录酶，D正确。
19．ABD 对待生物武器的态度应明确而坚定，即坚决禁止生物武器，A正确；对转基因植物的外源DNA要进行认真选择，避免产生对人体有害或过敏的蛋白质，B正确；中国对于克隆人的态度是不反对治疗性克隆，禁止进行克隆人的实验，C错误；一旦发现转基因生物出现了安全性问题，要马上停止实验，并销毁重组生物，D正确。
20．AD 细胞b是滋养层细胞，通过DNA分析可以鉴定动物性别，A错误；细胞a是内细胞团，细胞b是滋养层细胞，两者来源相同，细胞内核基因相同，但是滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，内细胞团发育成胎儿的各种组织，所以全能性高低不同，B正确；进行胚胎分割时，要尽可能的将内细胞团均等分割，C正确；为了获得更多的囊胚，可注射激素促进雌鼠产生更多生殖细胞，D错误。
21．答案：(1)红(紫) 气泡 (2)减少 增加 (3)A (4)B (5)醋酸菌 有氧
解析：(1)制作葡萄浆前，将成熟的葡萄用水清洗干净，再用红(紫)色的高锰酸钾溶液浸泡约5 min。为了使酵母菌迅速发生作用，制作酵母悬液时，在干酵母中应加入少量温水和极少量蔗糖，待酵母悬液中出现气泡即可。(2)装瓶后开始一段时间，酵母菌即进行需氧呼吸，快速繁殖，消耗发酵瓶内的氧气，瓶内溶解氧的含量减少。氧气耗尽后，酵母菌进行厌氧呼吸，生成酒精和二氧化碳，酒精含量逐渐增多。(3)装置中有水弯管可使发酵瓶内外的压强基本平衡，并减少杂菌污染，有利于发酵瓶内形成缺氧环境。(4)当发酵瓶中停止出现气泡时，即表示发酵完毕。(5)制作果醋需用醋酸菌作为菌种，该菌种在有氧条件下能将乙醇氧化为醋酸。
22．答案：(1)鸡干扰素基因两端的部分核苷酸序列 GAATTC GGATCC AC (2)复制原点 Ca2＋ (3)鸡干扰素基因未能导入烟草愈伤组织细胞或导入烟草愈伤组织细胞的鸡干扰素基因未能转录
解析：分析图解，图中过程①表示获取目的基因，过程②表示基因表达载体的构建，过程③表示将重组质粒导入农杆菌，过程④表示目的基因的检测和鉴定。
(1)利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列；由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割目的基因和质粒，因此科研人员还在两种引物的一端分别加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点，A正确；目的基因编码蛋白质的序列中，不能有限制酶的切割位点，B错误；酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同，否则会自身环化，C正确；酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列应该不同，否则会自身环化，D错误。故选AC。
(2)基因表达载体必须具备的有目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点，图中还缺复制原点；微生物细胞作为受体细胞时，需要钙离子处理使其变为感受态细胞，因此过程③中需先用Ca2＋(或CaCl2)处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)提取的愈伤组织细胞的RNA通过逆转录过程得到DNA；最终未能检测出干扰素基因，可能是因为鸡干扰素基因未能导入烟草愈伤组织细胞或导入烟草愈伤组织细胞的鸡干扰素基因未能转录。
23．答案：(1)动物细胞培养 B淋巴细胞不能无限增殖，骨髓瘤细胞不能分泌抗体 (2)VP2蛋白(或灭活的CPV) 诱导小鼠产生能分泌抗VP2蛋白抗体的B淋巴细胞 (3)动物细胞融合 细胞融合是随机的，且不能百分之百成功融合 克隆化培养和抗体检测
解析：(1)单克隆抗体技术的基础是动物细胞培养。B淋巴细胞不能无限增殖，骨髓瘤细胞不能分泌抗体，但二者融合的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能分泌抗体。
(2)过程①是给实验小鼠注射VP2蛋白(或灭活的CPV)，目的是诱导小鼠产生能分泌抗VP2蛋白抗体的B淋巴细胞。
(3)过程②采用的技术是动物细胞融合，由于细胞随机融合，且不能百分之百成功融合，因此获得的是多种类型的细胞，包括未融合的细胞、同种融合的细胞和杂种细胞。对获得的杂种细胞选择培养后，还需要再进行体外克隆化培养和抗体检测，并经过多次筛选才能获得目的细胞。
24．答案：(1)促性腺激素 (2)桑葚胚→囊胚 (3)性别鉴定 滋养层 女性 目的基因的检测和鉴定 (4)显微注射 细胞膜具有流动性
解析：(1)促性腺激素能促进超数排卵。(2)受精卵发育至原肠胚需要依次经历的时期为卵裂→桑葚胚→囊胚。(3)血友病属于伴X染色体隐性遗传病(相关基因用B、b表示)。一对夫妻，妻子是血友病患者(XbXb)，而丈夫正常(XBY)，则他们所生儿子均患病，女儿均正常，因此为了生育一个健康的孩子，进行胚胎移植前需要进行性别鉴定。目前最有效最准确的方法是SRY－PCR法，操作的基本程序是：从被检测的囊胚中取出几个滋养层细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因(即SRY基因)制成的探针进行检测，若未出现杂交链，说明不含Y染色体，则胚胎性别为女性。基因工程中目的基因的检测和鉴定也会用到DNA探针。(4)方法一中③的获得用到了显微注射技术；方法二中获得④的方法是细胞融合，而细胞融合的原理是细胞膜具有流动性。
25．答案：(1)①识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子 ②4种游离的脱氧核苷酸 ③DNA分子杂交 (2)①引物结合到互补DNA链上 引物 ②筛选含有目的基因的受体细胞 启动子、终止子 (3)正常基因 体内基因治疗、体外基因治疗 (4)根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质结构进行分子设计 (5)生物、食品、环境
解析：(1)①a过程是在限制酶的作用下完成的，该酶的作用特点是识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。②c过程表示逆转录，需要的原料是4种游离的脱氧核苷酸。③要确定获得的基因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用DNA分子杂交技术检测该基因的碱基序列。(2)利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1－抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2所示。①获得目的基因后，常利用PCR技术在体外将其大量扩增，其过程是高温变性后解链，低温复性后引物结合到互补DNA链上，然后中温延伸在Taq酶的作用下从引物进行互补链的合成。②载体上绿色荧光蛋白(GEP)基因的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞。基因表达载体d，除图中的标示部分外，还必须含有启动子、终止子。(3)人类遗传病一般很难用药物治疗，基因治疗是指把正常基因导入病人体内进行治疗。目前基因治疗分为体内基因治疗、体外基因治疗两种方法。(4)在基因工程的基础上发展起了蛋白质工程，蛋白质工程目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质结构进行分子设计。(5)目前对转基因生物的安全性问题，人们存在争论主要从转基因生物可能存在生物、食品、环境安全问题三个方面。
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