2023届苏教版高考生物一轮复习生物技术与工程 单元测试含答案

这是一份2023届苏教版高考生物一轮复习生物技术与工程 单元测试含答案，共19页。试卷主要包含了单项选择题，多项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。

单元检测十　生物技术与工程
一、单项选择题(本题共14小题，每小题2分，共28分。每小题只有一个选项符合题目要求。)
1．钙果又名欧李，果实中含有多种对人体有益的矿物质元素，其钙元素的含量比一般的水果都高。钙果用途广泛，叶可做茶，花、仁、根能制作中药，果实可加工成果汁、果酒、果醋等产品。下列说法正确的是(　　)
A．利用酵母菌进行钙果果醋发酵过程中温度应控制在18～30 ℃
B．在钙果果酒发酵期间，为保持无氧条件，不能拧松发酵瓶的盖子
C．制作钙果果酒、果醋时，应将原料钙果果汁进行高压蒸汽灭菌
D．钙果果酒的颜色是钙果果皮和果肉中的色素进入发酵液形成的
答案　D
解析　果醋发酵利用的菌种是醋酸菌，发酵温度为30～35 ℃，果酒发酵的菌种是酵母菌，发酵温度为18～25 ℃，A错误；酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，在发酵过程中密闭，但需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放气，B错误；制作果酒时，原料钙果果汁不需要进行灭菌，否则会杀死附着在果皮上的野生型酵母菌，C错误。
2．(2022·南京期末)发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品。常用好氧细菌谷氨酸棒状杆菌利用图1的发酵罐来大量生产味精，发酵流程如图2所示。下列叙述正确的是(　　)


A．发酵中所使用的谷氨酸棒状杆菌菌种可从自然界筛选也可通过诱变育种、杂交育种或者基因工程育种获得
B．为了保证发酵产品的产量和品质，图中发酵配料及发酵罐需经过严格的灭菌
C．在发酵过程中，通过加料口取样，随时监测产物浓度和微生物数量
D．图中发酵过程需通入无菌空气，并通过搅拌使培养液与菌种充分接触后关闭通气口
答案　B
解析　谷氨酸棒状杆菌属于原核生物，不能进行有性生殖，无法通过杂交育种获得，A错误；严格灭菌可以杀死发酵配料及发酵罐中的所有微生物，防止杂菌污染，从而保证发酵产品的产量和品质，B正确；在发酵过程中，应通过放料口取样，随时监测产物浓度和微生物数量，C错误；谷氨酸棒状杆菌属于好氧细菌，在发酵过程中要不断地通入无菌空气，不能关闭通气口，D错误。
3．硝化细菌是化能自养菌，通过NH→NO→NO的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，在水产养殖中具有重要作用。下表是分离硝化细菌的培养基配方，下列说法错误的是(　　)
(NH4)2SO4
0.5 g
NaCl
0.3 g
FeSO4
0.03 g
MgSO4
0.03 g
K2HPO4
0.75 g
NaH2PO4
0.25 g
Na2CO3
1 g
琼脂
5%
定容
1 000 mL

A.(NH4)2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源
B．培养基中的Na2CO3是硝化细菌的主要碳源
C．K2HPO4和NaH2PO4能维持培养基的pH
D．硝化细菌能清除水体中的铵态氮及亚硝态氮
答案　B
解析　据题意分析，硝化细菌通过NH→NO→NO的氧化过程获取能量，故通过分析培养基成分可知(NH4)2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源，A正确；硝化细菌为自养型生物，能利用二氧化碳合成糖类，故硝化细菌的主要碳源是二氧化碳，B错误；分析培养基成分，其中K2HPO4和NaH2PO4可维持培养基的pH，C正确；硝化细菌能将NH氧化成NO，进而将NO氧化成NO，故可用硝化细菌清除水体中的铵态氮及亚硝态氮，D正确。
4．丙草胺(C17H26ClNO2)是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数(如图所示)，以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是(　　)

A．将培养基调至酸性时，有利于降解菌的生长繁殖
B．利用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小
C．以丙草胺为唯一氮源培养基进行培养可提高降解菌的浓度
D．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个
答案　A
解析　培养细菌时，应该将培养基的pH调至中性或弱碱性，A错误；该计数方法为稀释涂布平板法，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故计数结果比显微镜直接计数法偏小，B正确；若以丙草胺作为唯一氮源，则只有具有降解能力的降解菌能够存活，故可以提高降解菌的浓度，C正确；根据5号试管的数据可知，每克土壤中菌株数为(168＋175＋167)÷3÷0.1×106＝1.7×109个，D正确。
5．甘薯是无性繁殖作物，具有自交不育和杂交不亲和的特点，这使甘薯生产和育种过程中存在诸多常规方法难以解决的问题。下列相关叙述不合理的是(　　)
A．利用植物组织培养制作人工种子，解决种苗的问题
B．选择茎尖分生组织培养抗病毒幼苗
C．可以通过原生质体融合克服杂交不亲和的障碍
D．利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高突变频率
答案　B
解析　植物细胞工程的应用之一是以植物组织培养得到的胚状体等为材料，经人工薄膜包装制成人工种子，实现大规模生产，A正确；茎尖等分裂旺盛部位的病毒极少，甚至无病毒，所以可利用茎尖分生组织培养出无病毒且保持优良性状的幼苗；通过基因工程将抗病毒基因转移至受体细胞可培育出抗病毒的转基因植物，脱毒≠抗病毒，B错误；植物体细胞杂交可克服杂交不亲和的障碍，C正确；愈伤组织具有分裂旺盛的特点，容易受到培养条件和外界环境的影响而产生突变，是诱变育种的良好材料，因此，利用愈伤组织进行诱变处理，可以显著提高突变频率，D正确。
6．酸性土壤是pH小于7的土壤总称，包括红壤、黄壤、砖红壤、赤红壤等。酸性土壤在世界范围内分布广泛，在农业生产中占有重要地位。如图表示利用耐酸植物甲(4n)和高产植物乙(2n)培育高产耐酸杂种植物的过程，图中序号表示过程或处理手段，字母表示细胞、细胞结构或组织名称。下列叙述正确的是(　　)

A．①过程用到的酶是纤维素酶，a、b表示原生质层
B．②过程可以使用PEG或灭活的病毒诱导
C．③过程得到的杂种细胞含有3个染色体组
D．④⑤过程使用的培养基需加入生长素和细胞分裂素，但加入的比例不同
答案　D
解析　①过程是用酶解法去除植物细胞壁，用到的酶是纤维素酶和果胶酶，a、b表示原生质体，A错误；②过程可以使用化学方法(聚乙二醇)或物理方法诱导原生质体融合，但灭活的病毒是诱导动物细胞融合的方法之一，B错误；③过程得到的杂种细胞含有两种细胞的遗传物质，故有4＋2＝6个染色体组，C错误；决定植物④脱分化和⑤再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，但加入的比例不同，D正确。
7．(2022·无锡高三期末)CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。下列有关说法错误的是(　　)

A．多次进行步骤①的目的是获得更多分泌抗CD47抗体的浆细胞
B．步骤②后可筛选出既能产生抗CD47抗体又能大量增殖的细胞
C．实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱
D．对照组中巨噬细胞的吞噬指数显著高于实验组可验证上述推测
答案　D
解析　多次向免疫动物注射抗原(CD47)的目的是使刺激小鼠特异性免疫，使动物小鼠产生大量的浆细胞，A正确；经步骤②将脾脏中的B细胞和骨髓瘤细胞融合，经选择后可以获得既能产生抗CD47抗体又能大量增殖的细胞，B正确；动物细胞培养应放在二氧化碳培养箱，C正确；根据单一变量原则可知应设置不加单克隆抗体的巨噬细胞＋肿瘤细胞的共培养体系为对照，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，没有抗体抑制，CD47对巨噬细胞有抑制作用，对照组中巨噬细胞的吞噬指数显著低于实验组可验证上述推测，D错误。
8．第一只克隆猫“大蒜”的出生标志着我国在克隆领域的一大进步，下图为获得克隆猫的基本流程图，下列叙述错误的是(　　)

A．动物细胞培养过程中，需定期更换培养液以防止培养过程中的杂菌污染
B．a猫卵母细胞去核的目的是使克隆猫的遗传物质主要来自有价值的供体细胞细胞核
C．可用显微操作技术将卵母细胞的细胞核去除
D．对受体c猫进行同期发情处理以便接受外源胚胎
答案　A
解析　动物细胞培养过程中，需定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害，A错误；细胞核里有遗传物质，是细胞遗传和细胞代谢活动的控制中心，故a猫卵母细胞去核的目的是使克隆猫的遗传物质主要来自有价值的供体细胞细胞核，B正确；对受体c猫进行同期发情处理，使供、受体生殖器官的生理变化相同，提供了相同的生理环境，以便接受外源胚胎，D正确。
9．(2022·南通高三质检)我国大陆首例由试管婴儿分娩的“试管婴儿二代宝宝”在北京大学第三医院诞生，他的母亲是我国大陆首例试管婴儿。试管婴儿技术的不断进步，为许多不孕不育患者实现了做父母的心愿。下列相关叙述错误的是(　　)
A．试管婴儿技术所获得的胚胎必须通过胚胎移植给受体才能获得后代
B．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
C．采集的卵母细胞和精子都要进行相应的处理才能完成体外受精过程
D．精子接触生理时，卵细胞会发生阻止多精子入卵的生理反应
答案　D
解析　核移植、转基因或体外受精等技术获得的胚胎均需通过胚胎移植给受体才能获得后代，A正确；胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，B正确；体外受精之前，要对精子进行获能处理，采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精，C正确；在精子触及卵细胞质膜的瞬间，卵细胞质膜外的透明带会迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带，D错误。
10．通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是(　　)
A．对供体和受体母牛都要进行相同激素处理
B．利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎
C．对冲卵获得的胚胎可以取饲养层细胞进行性别鉴定
D．胚胎移植的动物都是有性生殖的产物
答案　B
解析　对供体和受体母牛进行同期发情处理，所用激素相同，但对供体母牛进行超数排卵要用促性腺激素，受体母牛则不需要，A错误；来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎，B正确；对冲卵获得的胚胎可以取滋养层细胞进行性别鉴定，C错误；克隆得到的早期胚胎，经胚胎移植后产生后代属于无性繁殖，D错误。
11．限制酶的发现为DNA的切割和功能基因的获得创造了条件。限制酶Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ的识别序列及切割位点分别为↓GATC、G↓AATTC、G↓GATCC。含某目的基因的DNA片段如图所示，若利用质粒A(含限制酶Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点各1个)构建基因表达载体，为克服目的基因和质粒A的自身环化以及目的基因与质粒的任意连接等，应该如何选择限制酶(　　)

A．用限制酶EcoRⅠ或BamHⅠ处理含某目的基因的DNA和质粒A
B．用限制酶Sau3AⅠ和BamHⅠ处理含某目的基因的DNA和质粒A
C．用限制酶Sau3AⅠ和EcoRⅠ处理含某目的基因的DNA和质粒A
D．用限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ处理含某目的基因的DNA和质粒A
答案　D
解析　限制酶Sau3AⅠ切割目的基因会破坏目的基因，质粒含有限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，获取目的基因也可以用限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ切割，但为了防止目的基因或质粒自身环化，需要使用不同种限制酶进行切割，则可以使用限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ去切割质粒，也用限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ去切割目的基因，则获得重组质粒会进行正常连接，D正确。
12．为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因(GNA)和尾穗苋凝集素基因(ACA)与载体(pBI 121)结合，然后导入棉花细胞。下列操作与实验目的不符的是(　　)

A．用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA－ACA融合基因
B．与只用KpnⅠ相比，KpnⅠ和XhoⅠ处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确
C．将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞
D．用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中
答案　C
解析　雪花莲凝集素基因(GNA)和尾穗苋凝集素基因(ACA)均有BsaBⅠ酶切位点，所以用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA－ACA融合基因，A不符合题意；图中质粒与ACA－GNA上都含有KpnⅠ和XhoⅠ的酶切位点，与只用KpnⅠ相比，KpnⅠ和XhoⅠ处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确，B不符合题意；由于重组质粒含有卡那霉素的抗性基因，故若将棉花细胞接种在含卡那霉素的培养基上可筛选出转基因细胞，C符合题意；根据GNA－ACA融合基因的两端序列设计合适的引物，可以利用PCR技术检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中，D不符合题意。
13．“RT—PCR”是将RNA的逆转录(RT)和cDNA的多聚酶链式反应(PCR)相结合的技术。下面是RT—PCR过程示意图，①和②为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析，下列说法错误的是(　　)

A．RT—PCR技术可检测细胞内基因的表达水平
B．RT—PCR可检测细胞内新冠病毒等RNA病毒含量
C．逆转录酶和DNA聚合酶结构相同，都能催化DNA的合成
D．可通过设计特定引物利用RT—PCR技术扩增特定基因片段
答案　C
解析　由图可知，RT—PCR技术最先是利用RNA为模板，所以可用来检测细胞内基因的表达水平，A正确；采用RNA病毒的RNA作为靶RNA进行RT—PCR扩增，可以检测病毒含量，B正确；逆转录酶以RNA为模板催化DNA合成，DNA聚合酶以DNA为模板催化DNA合成，二者结构不同，C错误。
14．(2022·徐州高三期中)下列有关蛋白质工程的叙述，错误的是(　　)
A．蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的
B．蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程
C．蛋白质工程的途径是从预期蛋白质结构开始，进行氨基酸的增减或替换
D．蛋白质工程的最终目的是改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，以满足人类的需求
答案　C
解析　蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，是通过基因修饰或基因合成来完成的，A、B正确；由蛋白质工程的基本途径可知，蛋白质工程的途径是从预期蛋白质功能开始的，C错误；基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程可以通过改造或合成基因，对现有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求，D正确。
二、多项选择题(本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有不止一个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。)
15．某种物质X(一种含有C、H、O、N的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解X。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和X，乙的组分为无机盐、水、X和Y。下列相关叙述中正确的是(　　)

A．甲、乙培养基均属于选择培养基，乙培养基组分中的Y物质是琼脂
B．若要筛选高效降解X的细菌菌株，甲、乙培养基中X是唯一的碳源
C．步骤⑤的筛选过程中，各培养瓶中的X溶液的浓度不同
D．步骤⑤的筛选过程中，若培养基中的X浓度过高，某菌株对X的降解量可能下降
答案　ABD
解析　甲、乙培养基均只含有机物X，属于选择培养基，乙培养基组分中除了X外，还加入了Y物质琼脂，获得固体培养基，从而分离出所需的菌种，A正确；若要筛选高效降解X的细菌菌株，需要甲、乙培养基中的X是唯一提供碳源的有机物，不能利用物质X的微生物不能在该培养基上生长，从而筛选出高效降解X的细菌菌株，B正确；步骤⑤中自变量是挑取的不同的菌落，各培养瓶中的X溶液的浓度应该是一致的，因为X溶液的浓度属于无关变量，需要保持相同，C错误；步骤⑤的筛选过程中，若培养基中的X浓度过高，可能会导致菌体失水而影响菌体的正常生长，使得菌株对X的降解量下降，D正确。
16．植物组织培养技术被广泛应用于育种、人工种子的培育及获得植物次生代谢产物等生产生活实践中。下列叙述错误的是(　　)
A．该过程所用的MS培养基可给外植体提供无机营养
B．若取菊花茎段进行组织培养，可不必添加植物激素
C．该技术生产的人工种子长成的植株都具有可育的能力
D．植物组织培养得到试管苗的过程中只需要更换一次培养基
答案　CD
解析　MS培养基是目前使用最普遍的植物组织培养基，MS培养基含有硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾等无机盐，故可给外植体提供无机营养，A正确；由于菊花茎段组织细胞的再生能力强，组织培养比较容易，故不必添加植物激素，B正确；若所选外植体为花药，则经花药离体培养获得的人工种子长成的植株为单倍体，一般不可育，C错误；在植物组织培养过程中需要在不同时期，根据培养对象的需求添加或减少一些物质，尤其是植物激素的比例，故植物组织培养得到试管苗的过程中不止一次更换培养基，D错误。17.2020年12月，青岛农业大学生命科学学院培育的克隆猫诞生，实验流程如图所示。下列叙述正确的是(　　)

A．过程①采用了细胞工程中的细胞核移植技术
B．过程②采用了胚胎工程中的早期胚胎培养技术
C．通常将重组细胞置于含95%O2和5%CO2的培养箱中进行培养
D．胚胎的受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应
答案　ABD
解析　动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术，过程①采用了细胞工程中的细胞核移植技术，A正确；通常将重组细胞置于含95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养，C错误；胚胎的受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内存活提供了可能，D正确。
18．杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示，下列相关叙述正确的是(　　)

A．为了获得更多的卵母细胞，需用雌激素对雌性杜泊羊进行处理，使其超数排卵
B．从输卵管冲取的卵母细胞需体外培养成熟，与获能的精子进行体外受精
C．将受精卵由受精溶液转入发育培养液培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力
D．受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥，为胚胎在受体内存活提供了可能
答案　CD
解析　为了获得更多的卵母细胞，需用促性腺激素对雌性杜泊羊进行处理，A错误；从卵巢中采集的卵母细胞需要体外培养到减数第二次分裂才可与获能的精子进行体外受精，B错误。
19．如图是培育表达出人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ箭头所示位置为三种限制酶的酶切位点。下列相关叙述正确的是(　　)

A．要将人乳铁蛋白基因插入载体，需用HindⅢ和BamHⅠ限制酶同时酶切载体和目的基因
B．图中能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是复制原点
C．为检测人乳铁蛋白基因是否成功表达，可采用核酸分子杂交技术
D．该过程中的早期胚胎一般需要培养至桑椹胚或囊胚阶段再进行胚胎移植
答案　AD
解析　将人乳铁蛋白基因插入载体，一方面不能破坏目的基因，另一方面酶切的载体和目的基因两端露出的黏性末端碱基序列应相同，结合前面的分析可知，应选用二者共有的限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割，A正确；能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是启动子、终止子等，B错误；为检测人乳铁蛋白基因是否成功表达，可釆用抗原—抗体杂交技术检测，C错误。
三、非选择题(本题共5小题，共57分。)
20．(12分)随着石油危机的出现，乙醇作为可再生资源中比较理想的液态燃料正受到人们越来越多的关注。自然界中可再生的木质纤维素资源极为丰富，其主要成分之一是半纤维素。半纤维素容易被酸或者酶水解，其水解产物中的85%～90%为木糖。因此利用木糖发酵生产乙醇具有重要的应用研究价值。酵母菌是传统的乙醇生产菌株，因其缺乏转化木糖的酶系而不能很好地利用木糖。自然界中某些酿酒酵母能利用木糖进行酒精发酵，某研究小组欲从土壤中分离这种酵母菌并对产酶活性进行测定，实验基本流程为取土样→制取土壤悬液→扩大培养→选择培养→菌种分离→酶活性鉴定。
请回答下列问题：
(1)扩大培养又称富集培养，可增加____________，以确保能够从样品中分离得到所需要的微生物。
(2)分离纯化微生物的原理是______________________________________________________
________________________________________________________________________。
该研究小组将扩大培养后的混合菌液适当稀释后接种于______________的选择培养基，倒置放入培养箱培养。常用的接种方法有________________________两种。若划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。第二划线区域的第一条线上无菌落的原因是_________________________
________________________________________________________________________。
(3)为进一步确定目的菌株的最佳产酶条件，该研究小组选取培养基初始pH、培养温度、摇床转速以及装液量4个因素实验。其中，培养基初始pH、培养温度会影响菌株产酶主要是因为________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案　(1)目的菌株数量　(2)逐渐将聚集的菌体分散，以得到由单个细胞增殖而形成的单个菌落　以木糖为唯一碳源　平板划线法和稀释涂布平板法　接种环灼烧灭菌后未冷却即进行划线操作、未从上次划线末端开始划线　(3)培养基初始pH、培养温度会影响酶活性21.(13分)甘草酸是中药甘草中的主要活性成分，为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如图1。图2是科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根培育抗鼓胀病的苜蓿新品种流程图(注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R－6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同)。请回答下列问题：


(1)图1中制备单克隆抗体首先需要对动物进行免疫处理，所用的抗原是________________________________________________________________________。
②过程常用____________作为诱导剂，该诱导剂不能用于植物细胞的融合。③和④过程为两次筛选过程，这两次筛选的目的分别是_______________、______________________。细胞丁的特性是________________________。
(2)图2中①过程可使用________________________作为诱导剂，也可使用________________
__________________等物理方法。图中③过程愈伤组织经过____________________形成再生植株，这一过程的原理是__________________________________________________________。推测在融合后只有异源融合产物能够存活的原因是_____________________________。
答案　(1)甘草酸—牛血清白蛋白结合抗原　灭活的病毒　筛选出杂交瘤细胞　筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞　既能产生特定抗体又能无限增殖　
(2)聚乙二醇(或PEG)　电融合法、离心法　再分化　植物细胞的全能性　异源融合产物因代谢互补可恢复生长并获得再生能力
解析　(1)由图可知，图1中所用抗原是甘草酸—牛血清白蛋白结合抗原，图中②过程为促进细胞融合的过程，常用灭活的病毒作用于细胞质膜上的糖蛋白，使细胞互相融合。因为动物细胞质膜有很强的细胞识别能力，而植物细胞不存在这种能力，所以该方法不适用于植物。细胞融合后要进行两次筛选，即图中的③和④过程，第一次筛选把杂交瘤细胞选出来，第二次筛选把能产生所需抗体的杂交瘤细胞选出来。骨髓瘤细胞可以无限增殖，而细胞甲，即B淋巴细胞无法增殖，所以需要两者结合，两者结合后经过筛选获得的细胞丁，既能产生特定抗体又能无限增殖。(2)图2中①过程诱导原生质体融合需要用聚乙二醇(或PEG)作为诱导剂，也可采用离心法、电融合法等物理方法诱导融合。图中③过程愈伤组织经过再分化形成再生植株，这一过程的原理是植物细胞的全能性。根据题意，IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R－6G可阻止线粒体的呼吸作用，由于异源融合产物因代谢互补可恢复生长并获得再生能力，因此在融合后只有异源融合产物能够存活。
22．(10分)曾培育出我国首例成体体细胞“克隆”东北民猪的东北农业大学教授刘忠华带领的课题组，2006年12月22日又成功培育出国内首例绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪，这是世界上继美国、韩国、日本之后第四例绿色荧光蛋白转基因猪，如图为该克隆猪的培育过程，其中字母代表结构或生物，数字代表过程。回答下列问题：

(1)图中①常用的方法是________________，该方法用到的仪器是________________。
(2)图中过程③在____________________中进行，该过程需要无机盐和有机盐类外，还需添加____________________(至少2种)等成分；图中④过程是____________________。
(3)图中G个体的遗传性状是否具有个体A的遗传性状？____________(填“是”或“否”)，理由是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(4)胚胎能在F体内存活的生理学基础是____________________________。
答案　(1)显微操作法　显微操作仪　(2)发育培养液　维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清　胚胎移植　(3)是　个体G是由细胞D发育而来，而细胞D的细胞质来自个体A的细胞，细胞质中有少量的遗传物质　(4)受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应
解析　(1)过程①是将目的基因导入动物细胞，常用的方法是显微操作法，该方法用到的仪器是显微操作仪。(2)将重组细胞培养到早期胚胎阶段，需要进行早期胚胎培养，早期胚胎培养过程中是在发育培养液中进行的，发育培养液中除无机盐、有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等成分。
23．(10分)(2022·扬州模拟预测)嵌合体是指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体，构建嵌合体动物可用来研究胚胎发育、制备模型动物和畜牧生产等。下图是构建嵌合体小鼠的流程图，回答下列问题：

(1)囊胚可以从小鼠母体获得，也能通过体外受精的途径获得。小鼠体外受精的主要步骤是________________________。体外受精后，应将受精卵转移至______________________中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。
(2)图中过程②获取的小鼠胚胎干细胞是囊胚中的____________________细胞，胚胎干细胞在形态上具有体积小、细胞核大、核仁明显的特点，在功能上具有__________________，从而能分化为小鼠的任何一种组织细胞。
(3)图中过程⑤是指____________________，为给供体胚胎移入受体提供相同的生理环境，需要对代孕母鼠和雌性黑鼠进行____________________处理。
答案　(1)卵母细胞的采集、精子的获取和受精
适当的培养液　(2)内细胞团　发育的全能性　(3)胚胎移植　同期发情24.(12分)(2022·宿迁高三模拟)中国甜柿的自然脱涩与乙醛代谢关键酶(PDC)基因密切相关，推测涩味程度可能与PDC基因的表达情况有关。为筛选PDC基因的调控蛋白，科研人员构建了质粒A和质粒G(如图1、图2所示)，利用酵母菌进行了相关实验探究。回答下列问题：

(1)启动子位于基因首端，是____________的位点，启动子区域还存在着许多调控蛋白的结合位点，可影响基因的转录水平。PDC基因的启动子序列未知，为获得大量该基因启动子所在片段，可利用限制酶将基因组DNA进行酶切，然后在____________的作用下将已知序列信息的接头片段连接在PDC基因的上游，根据接头片段和PDC基因编码序列设计引物进行____________。
(2)利用质粒A构建含有PDC基因启动子片段的重组质粒并导入代谢缺陷型酵母菌，用不含______________的培养基可筛选出成功转化的酵母菌Y1H。质粒G上的AD基因表达出的AD蛋白与启动子足够靠近时，能够激活后续基因转录，因此需获得待测蛋白与AD蛋白的融合蛋白用于后续筛选。科研人员从中国甜柿中提取RNA，将逆转录形成的各种______________与质粒G连接后导入酵母菌，此时应选择质粒G中的位点________________(填序号1～5)作为cDNA的插入位点，最终获得携带不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
(3)重组酵母Y187与Y1H能够进行接合生殖，形成的接合子含有两种酵母菌质粒上的所有基因。若接合子能在含有金担子素的培养基中生存，则推测待测蛋白是PDC基因的调控蛋白，请结合图3阐述作出该推测的理由。_________________________________________________
________________________________________________________________________。
(4)筛选出PDC基因的调控蛋白后，为满足生产上的需要对其进行改良，这种技术属于____________工程，该工程的起点是__________________。
答案　(1)RNA聚合酶识别和结合　DNA连接酶　PCR扩增　(2)尿嘧啶　cDNA　2　(3)接合子中待测蛋白与AD蛋白形成了融合蛋白，若待测蛋白是PDC基因的调控蛋白，就能与PDC基因启动子结合，AD蛋白也能靠近PDC基因启动子并激活金担子素抗性基因的表达，使酵母菌表现出金担子素抗性　(4)蛋白质　预期蛋白质的功能
解析　(1)启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，直接决定转录起始。该操作为目的基因和载体的酶切和连接，限制酶切割后需要在DNA连接酶的作用下连接；已知接头片段连接在PDC基因的上游，且已知序列信息，则可以按照PDC基因启动子上游的接头片段与PDC基因编码序列设计引物进行PCR扩增。(2)由质粒A的图谱可知，带有选择功能的基因片段有尿嘧啶合成基因、金担子素抗性基因两种，但是金担子素抗性基因无法启动，所以选择尿嘧啶合成基因作为选择依据，则在选择培养基配制时不加尿嘧啶。从中国甜柿中提取的RNA可以通过逆转录形成各种cDNA，将各种cDNA片段与质粒G连接后导入酵母菌，插入时不能破坏其他蛋白质基因的表达，而且需要插入到启动子和终止子之间才能保证表达，因此选择2作为cDNA的插入位点。(3)依据题干，重组酵母Y187与Y1H接合子应同时含有质粒A、质粒G，则接合子有质粒A为含有PDC基因、金担子素抗性基因的质粒；质粒G为可正常表达AD蛋白、待测蛋白的质粒，接合子中待测蛋白与AD蛋白形成了融合蛋白，若待测蛋白是PDC基因的调控蛋白，就能与PDC基因启动子结合，则AD蛋白携带的待测蛋白靠近PDC基因启动子，激活PDC基因的转录，并激活金担子素抗性基因的表达，使酵母菌表现出金担子素抗性。(4)筛选出PDC基因的调控蛋白后，为满足生产上的需要对其进行改良，这种技术属于蛋白质工程，蛋白质工程的设计流程为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需的蛋白质，所以起点是预期蛋白质的功能。