高中生物北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第五节 发酵工程的应用习题

【精编】第五节发酵工程的应用-2作业练习

一．单项选择

1．进行“微生物的分离与培养”实验时，叙述正确的是(　　)

A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖

B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上

2．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（    ）

A．操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C．加热溶化琼脂时，应不断用玻璃棒对其搅拌

D．培养基灭菌后，立即在酒精灯火焰附近倒平板

3．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，如图为实验室的部分操作步骤，相关说法错误的是（    ）

A．本实验的培养基中应加入苯酚作为唯一碳源

B．步骤④中接种环需在每次划线前灼烧处理，接种后的平板需倒置培养

C．灭菌处理后的土壤样品经②③④步骤操作后可获得纯化的苯酚降解菌菌落

D．可以通过逐步提高培养基中苯酚的浓度，获得高效苯酚降解菌

4．苯甲酰肼是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯甲酰肼的微生物。为了降解苯甲酰肼，研究人员筛选获得了能降解利用苯甲酰肼的菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。下列相关叙述错误的是（    ）

A．使用平板划线法可以在⑥上获得纯化的目的菌

B．如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法

C．图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯甲酰肼作为碳源

D．微生物培养前，需对培养基和培养器皿进行消毒处理

5．菌种保藏是一切微生物工作的基础，下列有关叙述不正确的是（    ）

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上，放入－4℃的冰箱中保藏

C．临时保藏菌种容易被污染或产生变异

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏，置于低温－20℃的冷冻箱中

6．从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种的方法不包括（    ）

A．根据微生物对碳源需求的差别，使用含不同碳源的培养基

B．根据微生物对特殊营养物质的需求，在培养基中增加不同的特殊营养物质

C．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加人不同的抗生素

D．根据微生物耐热性的不同，利用高温．高压消灭不需要的杂菌

7．如图是微生物平板划线示意图，下列叙述正确的是（    ）

A．用酒精对接种环进行消毒即可

B．只有在5区才可能得到单菌落

C．每次划线前后都要对接种环灭菌

D．划线力度要大，保证划线清晰

8．下列有关利用含琼脂的培养基进行倒平板操作的叙述，正确的是（    ）

A．对培养皿进行灭菌一般使用高压蒸汽灭菌锅

B．培养基灭菌后要冷却到30℃时再倒入培养皿

C．倒平板操作需要在酒精灯火焰附近进行

D．倒平板操作时需要使用灭菌了的接种环

9．下列叙述错误的是（    ）

A．灭菌是以能杀死除芽孢和孢子外的所有活细胞为标准的

B．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数

C．统计菌落数目时，选取菌落数目稳定时的记录数据作为结果

D．测定亚硝酸盐含量时，用于比对的是标准亚硝酸钠显色液的颜色

10．下列有关消毒和灭菌的说法正确的是（    ）

A．接种环．接种针．镊子等金属用具以及玻璃器皿只能用灼烧灭菌

B．干热灭菌法是利用高温使蛋白质等变性，从而使微生物丧失活性

C．针对某些实验器具．餐具．饮用水可以采用巴氏消毒法

D．用酒精擦拭双手．用氯气消毒水源属于物理消毒法

11．下图是平板划线法接种微生物的示意图，下列叙述正确的是（    ）

A．该接种过程一般需灼烧接种环5次

B．在第5区域中才可以得到单个菌体形成的菌落

C．划线时，在火焰附近将皿盖打开一条缝隙

D．该接种方法也能计数培养液中微生物数量

12．下面是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1．2．3．4．5。下列叙述正确的是（    ）

A．在五个区城中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌

B．划线操作接种环不应划破培养基表面，否则不能分离得到单菌落

C．划线操作时完全打开皿盖，将接种环伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖

D．第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数

13．取9个洁净的培养皿，均分为三组(Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ)，每组分别加入等量的不同培养基，每个平板均用涂布法接种0.1 mL大肠杆菌菌液，37 ℃培养36 h后，统计菌落数如表统计，以下相关叙述正确的是(　　)

A.Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长

B．Ⅰ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质

C．三组实验均使用了液体培养基，以方便菌落计数

D．三组实验所使用的培养基均需62 ℃．30 min消毒

14．日前微博传言手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多，为辨别真伪，两电视台利用微生物培养技术进行实验，过程及结果如下。下列叙述错误的是（    ）

A．培养细菌时，需将培养基的pH调至酸性

B．为排除实验操作过程中产生的污染，需要设置对照组

C．本实验采用稀释涂布平板法接种

D．两个报道结果不同，可能是因为取样环境不同

15．下列关于无菌操作技术的说法，正确的是（    ）

A．煮沸消毒法中100℃煮沸5～6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢．孢子

B．培养皿．培养基可用干热灭菌法灭菌

C．牛奶．熟啤．葡萄酒都可用巴氏消毒法消毒

D．高压蒸汽灭菌时间达到后立即排气降温

16．关于平板划线法和稀释涂布平板法的叙述错误的是（　　）

A．只能用于固体培养基接种

B．都可以用于微生物的计数

C．接种培养后均可获得单菌落

D．接种用具都需进行严格灭菌

17．科研人员制备了一种富集沙门菌的培养基，其成分是在营养肉汤培养基的基础上添加了一定浓度的牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质。下表为在营养肉汤培养基中添加有关物质并接种培养后相关菌落的相对数量。下列有关说法错误的是（    ）

A．上述富集沙门菌的培养基是选择性培养基

B．为便于对活菌进行计数，接种时应采用稀释涂布平板法

C．培养基中的葡萄糖．氨基酸可作为碳源被沙门菌等细菌利用

D．在培养基中加入牛胆盐．亚碲酸钠的目的是维持培养基的pH

18．选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理．化学抗性而设计的培养基，用于分离所需要的微生物。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为（    ）

A．含青霉素的培养基．含氨的无机培养基

B．伊红美蓝培养基．含青霉素的培养基

C．含青霉素的培养基．伊红美蓝培养基

D．含氨的无机培养基．含青霉素的培养基

参考答案与试题解析

1．【答案】D

【解析】：选D　在高压灭菌的操作过程中，加热结束后应让灭菌锅内温度自然下降，待压力表的指针指到零时，打开放气阀，旋松螺栓，打开盖子；倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是完全取下放到一边；接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后，再用其挑取菌落；在微生物的培养中，一般将培养皿倒置，在皿底上用记号笔做标记。

2．【答案】D

【解析】

试题分析：

牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛的细菌培养基，制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板。

解答：

A．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，A正确；

B．溶化时，将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，B正确；

C．加热溶化琼脂时，应不断用玻璃棒对其搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂，C正确；

D．培养基灭菌后，待培养基冷却至50°C左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，D错误。

故选D。

3．【答案】C

【解析】

试题分析：

4．【答案】D

【解析】

试题分析：

从土壤中筛选获得了只能降解利用苯甲酰肼的细菌菌株，则培养微生物的培养液中只能提供苯甲酰肼作为唯一的碳源。依据图示可知，③是筛选，④⑤是纯化培养，⑥是获得单个菌落。

解答：

A．分析图示，可知经过纯化培养后，使用平板划线法可以在培养基上获得单个菌落，A正确；

B．如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法，B正确；

C．本次培养的目的就是筛选讲解利用苯甲酰肼的细菌菌株，图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯甲酰肼作为唯一碳源，C正确；

D．微生物培养前，需对培养基和培养器皿进行灭菌处理，D错误；

故选D。

5．【答案】B

【解析】

试题分析：

菌种保存

解答：

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，A正确；
B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上，放入4℃的冰箱中保藏，B错误；
C．临时保藏菌种容易被污染或产生变异，C正确；
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏，置于低温-20℃的冷冻箱中，D正确。
故选B。

6．【答案】D

【解析】

根据微生物生长所必需的营养：碳源．氮源．无机盐．水和生长因子。因微生物不同，对碳源．氮源．无机盐．生长因子的需求也不相同，可以根据微生物的生长需求制备特殊的选择培养基，来获得单一纯种；也可以根据微生物对不同抗菌素的敏感性不同，加入不同的抗菌素来获得目的菌种。

解答：

A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基，例如培养自养型的菌，在培养基中不需加入碳源，A正确；

B．不同的微生物需要不同的生长因子，根据需要的菌可以在培养基中加入相应的生长因子进行分离，B正确；

C．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素，C正确；

D．高温高压会将所有细菌（包括需要的菌类）一起杀死，D错误。

故选D。

7．【答案】C

【解析】

试题分析：

平板划线的操作的基本步骤是：

（一）．右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞；

（二）．左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面；

（三）．烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连；

（四）．将平板倒置，放入培养箱中培养。

解答：

A．接种环采用灼烧灭菌的方法进行灭菌，A错误；

B．由题图可知，5区域是最后一个区域，有可能在5区域获得所需要的菌落，在4区域也有可能得到所需要的菌落；B错误；

C．每次划线前后都要对接种环灭菌，C正确；

D．划线力度不能过大，避免将培养基划破，D错误。

故选C。

8．【答案】C

【解析】

试题分析：

获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，包括消毒和灭菌。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

解答：

A．对培养皿进行灭菌一般使用干热灭菌法，A错误；

B．培养基灭菌后要冷却到50℃时左右，再倒入培养皿制得平板，B错误；

C．为避免杂菌污染，倒平板操作需要在酒精灯火焰附近进行，C正确；

D．倒平板操作时不需要使用接种环，D错误。

故选C。

9．【答案】A

【解析】

试题分析：

灭菌是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。

计数：操作方法：培养到时间后，计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数，计算处原始样品中每克（或每ml）中的菌落数，计数时应选取菌落数在30~300之间的平板（SN标准要求为25~250个菌落）。

亚硝酸盐含量的测定原理：与显色剂(N-1-萘基乙二胺溶液和对氨基苯磺酸溶液等体积混合)反应生成有色化合物，通过比色可以粗略地检测亚硝酸盐的含量。

解答：

A．灭菌是杀死全部微生物，包括芽孢和孢子，A错误；

B．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数（SN标准要求为25~250个菌落），B正确；

C．统计菌落数目时，培养到时间后，计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，选取菌落数目稳定时的记录数据作为结果，C正确；

D．制作泡菜和测定亚硝酸盐含量时，与显色剂反应生成有色化合物，通过比色可以粗略地检测亚硝酸盐的含量，用于比对的是标准亚硝酸钠显色液的颜色，D正确；

故选A。

10．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌是常用的防止杂菌入侵的方法，消毒有煮沸消毒法．巴氏消毒法和化学药剂消毒法；灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具，干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具，高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。

解答：

A．接种环．接种针．镊子等金属用具常采用灼烧灭菌，但也可采用干热灭菌，玻璃器皿适用干热灭菌，A错误；

B．干热灭菌法是利用高温使微生物体内的蛋白质等变性，酶失去活性，达到灭菌的目的，B正确；

C．针对某些实验器具．餐具．饮用水可以采用煮沸消毒法，C错误；

D．用酒精擦拭双手．用氯气消毒水源属于化学消毒法，D错误。

故选B。

11．【答案】C

【解析】

试题分析：

平板划线法是分离细菌常用的方式，通过不断的划线使得原本聚集的细菌分散开，形成独立的菌株。

解答：

A．由图可知：该平板划了5次线，故需要灼烧接种环6次，A错误；
B．由题图可知，5区域是最后一个区域，有可能在5区域获得所需要的菌落，在4区域也有可能得到所需要的菌落，B错误；
C．划线时，为防止空气中微生物的污染，在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，划线后再通过酒精灯火焰，C正确；
D．该接种方法属于平板划线法，不能计数培养液中微生物数量，D错误。
故选C。

12．【答案】B

【解析】

试题分析：

平板划线的操作的基本步骤是：
（一）．右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。
（二）．左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。
（三）．烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
（四）．将平板倒置，放入培养箱中培养。

解答：

A．在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，但培养基只是在接种前进行灭菌即可，A错误；
B．划线操作接种环不应划破培养基表面，否则不能分离得到单菌落，B正确；

C．划线时皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面，C错误；
D．划线时注意不要将最后一区5的划线与第一区1相连，D错误。
故选B。

13．【答案】A

【解析】：选A　由表格分析可知，Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长；Ⅱ组和Ⅲ组作对照，自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖；由题意知，每个平板都含有琼脂，属于固体培养基；三组实验所使用的培养基均需高压蒸汽灭菌。

14．【答案】A

【解析】

试题分析：

稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面形成单个菌落。设计对照组实验，既可排除无关变量对实验结果的影响，又可增加实验结果的可信度和说服力。

解答：

A．培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，A错误；

B．需要设立对照组，因为不能排除实验操作．培养过程中．灭菌中等环节是否产生污染，而设置对照组则可以体现是否存在污染和污染程度，以确保实验过程的可靠，B正确；

C．由图可知，该实验的接种方法为稀释涂布平板法，C正确；

D．取样环境不同．取样时间不同．取样量的差异都可能影响最终的实验结果，D正确。

故选A。

15．【答案】C

【解析】

试题分析：

16．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

解答：

A．将微生物接种到固体培养基中的方法通常为平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；
B．稀释涂布平板法接种可以形成均匀分布的单菌落，所以常用来进行微生物的计数，平板划线法常用来筛选分离微生物，B错误；
C．两种接种方法在培养基中都能形成单个菌落，C正确；
D．为防止杂菌污染，接种用具都需进行严格灭菌，D正确。
故选B。

17．【答案】D

【解析】

试题分析：

分析题干：富集沙门菌的培养基是在营养肉汤培养基的基础上添加了一定浓度的牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质，其能抑制金黄色葡萄球菌．大肠杆菌等微生物的生长，而沙门菌能正常生长，属于选择培养基。

解答：

AD．在营养肉汤培养基的基础上添加牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质，这是一种富集沙门菌的培养基。实验结果表明含有牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠的培养基能抑制金黄色葡萄球菌，含有甘露醇．亚碲酸钠的培养基能抑制大肠杆菌。因此，上述富集沙门菌的培养基是选择性培养基，A正确．D错误；

B．为便于对活菌进行计数，接种时应采用稀释涂布平板法，B正确；

C．培养基的成分通常包括碳源．氮源．水．无机盐等，上述培养基中的葡萄糖．氨基酸等有机物可作为碳源被细菌利用，C正确。

故选D。

18．【答案】A

【解析】

试题分析：

选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理．化学抗性而设计的培养基．利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来．酵母菌属于异养兼性厌氧型真核生物，硝化细菌属于自养需氧型原核生物。

解答：

A．细菌对含青霉素培养基敏感，酵母菌则不敏感，可以筛选酵母菌，硝化细菌可以将环境中的氨氧化为硝酸根而利用其释放的能量合成有机物，故含氨的无机培养基可以筛选硝化细菌，A正确；

B．伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，B错误；

C．细菌对含青霉素培养基敏感，酵母菌则不敏感，可以筛选酵母菌，伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，C错误；

C．酵母菌是异养生物，不能用含氨的无机培养基筛选，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，D错误。

故选A。