高中生物沪科版 (2019)选修3一、间接计数法测试题

【优编】一、间接计数法-2作业练习

一．单项选择

1．人们利用微生物完成一定的反应，必须要求某种微生物是没有被其他微生物污染的，因此，在培养微生物时必须进行无菌操作，以下操作错误的是（    ）

A．灼烧灭菌法可杀死微生物的营养体和芽孢

B．对无菌室．操净台和实验服可采用紫外线光灭菌法

C．培养基中需要加入尿素时，要配成溶液单独用G6玻璃砂漏斗过滤灭菌

D．当培养基内要加入碳酸氢钠时，需单独用500g/cm2压力（90℃以上）灭菌30min

2．从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种的方法不包括（    ）

A．根据微生物对碳源需求的差别，使用含不同碳源的培养基

B．根据微生物对特殊营养物质的需求，在培养基中增加不同的特殊营养物质

C．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加人不同的抗生素

D．根据微生物耐热性的不同，利用高温．高压消灭不需要的杂菌

3．下列有关菌种保藏的叙述，错误的是（    ）

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

B．需长期保存的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上

C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异，所以不能保存太久

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用-20℃低温保藏的方法

4．下列属于涂布分离法和划线分离法共同点的是（    ）

A．接种工具需保存在70%酒精中 B．接种前需对菌液进行不同浓度稀释

C．可用于单菌落的分离 D．可以对样液中的细菌进行计数

5．关于灭菌和消毒理解不正确的是（    ）

A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子

B．消毒和灭菌实质上是相同的

C．接种环用灼烧法灭菌

D．常用的灭菌和消毒方法有加热法．灼烧法．紫外线法．化学药品法

6．下列关于无菌操作技术的说法，正确的是（    ）

A．煮沸消毒法中100℃煮沸5～6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢．孢子

B．培养皿．培养基可用干热灭菌法灭菌

C．牛奶．熟啤．葡萄酒都可用巴氏消毒法消毒

D．高压蒸汽灭菌时间达到后立即排气降温

7．取9个洁净培养皿，均分为三组（Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ），各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均接种0.1mL相同稀释度的大肠杆菌菌液，37℃培养 24小时后，统计菌落数（见下表），下列相关叙述错误的是（    ）

A．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖

B．Ⅱ组和Ⅲ组说明大肠杆菌的正常生长需要葡萄糖

C．三组实验所使用的培养基均需100℃．30min灭菌

D．三组实验均采用稀释涂布平板法，以便菌落计数

8．关于平板划线法和稀释涂布平板法的叙述错误的是（　　）

A．只能用于固体培养基接种

B．都可以用于微生物的计数

C．接种培养后均可获得单菌落

D．接种用具都需进行严格灭菌

9．下列有关消毒和灭菌的说法正确的是（    ）

A．接种环．接种针．镊子等金属用具以及玻璃器皿只能用灼烧灭菌

B．干热灭菌法是利用高温使蛋白质等变性，从而使微生物丧失活性

C．针对某些实验器具．餐具．饮用水可以采用巴氏消毒法

D．用酒精擦拭双手．用氯气消毒水源属于物理消毒法

10．如图为实验室培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列说法正确的是（    ）

A．步骤②中打开含菌种的试管后需将试管口通过酒精灯火焰灭菌

B．步骤④中接种环共需 5 次灼烧处理

C．将接种后的图④平板放入培养箱中培养时无需倒置

D．①②③步骤操作时都不需要在酒精灯火焰旁进行

11．菌种保藏是一切微生物工作的基础，下列有关叙述不正确的是（    ）

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上，放入－4℃的冰箱中保藏

C．临时保藏菌种容易被污染或产生变异

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏，置于低温－20℃的冷冻箱中

12．发酵工程在现代生物工程中地位越来越重要。下列有关发酵过程叙述错误的是（    ）

A．首先要对发酵设备和培养基严格灭菌

B．要随时取样，检测培养液的细菌数目．产物浓度等，以了解发酵进程

C．在发酵过程中不需要向装置中再添加必需的营养组分

D．要严格控制温度．pH．溶解氧等环境因素

13．下表表示某培养基的配方，下列叙述正确的是(　　)

A.从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基

B．培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨

C．该培养基缺少生长因子

D．该培养基调节合适的pH后就可以接种

14．下列关于无菌操作技术的说法，正确的是（    ）

A．液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒

B．培养基．接种环可用干热灭菌法灭菌

C．消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子

D．高压蒸汽灭菌时间达到后立即打开排气阀排气降温

15．科研人员制备了一种富集沙门菌的培养基，其成分是在营养肉汤培养基的基础上添加了一定浓度的牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质。下表为在营养肉汤培养基中添加有关物质并接种培养后相关菌落的相对数量。下列有关说法错误的是（    ）

A．上述富集沙门菌的培养基是选择性培养基

B．为便于对活菌进行计数，接种时应采用稀释涂布平板法

C．培养基中的葡萄糖．氨基酸可作为碳源被沙门菌等细菌利用

D．在培养基中加入牛胆盐．亚碲酸钠的目的是维持培养基的pH

16．分离纯化大肠杆菌最常用的方法是平板划线法或稀释涂布平板法。下列有关这两种方法的叙述，错误的是

A．均将大肠杆菌接种在固体培养基的表面

B．获得的每一个菌落均是由一个细菌繁殖而来的子细胞群

C．都应在酒精灯火焰附近操作，以防止杂菌污染

D．稀释分散菌种的原理不同，但均能达到纯化大肠杆菌的目的

17．下面是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1．2．3．4．5。下列叙述正确的是（    ）

A．在五个区城中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌

B．划线操作接种环不应划破培养基表面，否则不能分离得到单菌落

C．划线操作时完全打开皿盖，将接种环伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖

D．第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数

18．果胶酶可从黑曲霉中提取，下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是

A．蛋白胨和酵母提取物培养基 B．尿素固体培养基

C．MS培养基 D．添加蔗糖的豆芽汁培养基

参考答案与试题解析

1．【答案】D

【解析】

试题分析：

灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子），微生物的培养过程中常用的灭菌方法有灼烧灭菌．干热灭菌．高压蒸汽灭菌等。

解答：

A．灼烧灭菌法不仅能杀死微生物的营养体，也能杀死芽孢等休眠体，A正确；
B．对无菌室．操净台和实验服可采用紫外线光灭菌法，B正确；
C．有些不能加热灭菌的化合物，如尿素（加热会分解）只能用G6玻璃砂漏斗过滤，然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中备用，C正确；
D．碳酸氢钠固体存在时加热会分解，应该先在培养基中加入碳酸氢钠，然后随同培养基一起灭菌，D错误。
故选D。

2．【答案】D

【解析】

根据微生物生长所必需的营养：碳源．氮源．无机盐．水和生长因子。因微生物不同，对碳源．氮源．无机盐．生长因子的需求也不相同，可以根据微生物的生长需求制备特殊的选择培养基，来获得单一纯种；也可以根据微生物对不同抗菌素的敏感性不同，加入不同的抗菌素来获得目的菌种。

解答：

A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基，例如培养自养型的菌，在培养基中不需加入碳源，A正确；

B．不同的微生物需要不同的生长因子，根据需要的菌可以在培养基中加入相应的生长因子进行分离，B正确；

C．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素，C正确；

D．高温高压会将所有细菌（包括需要的菌类）一起杀死，D错误。

故选D。

3．【答案】B

【解析】

试题分析：

对于频繁使用的菌种，可采用临时保藏的方法；首先，将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养；当菌落长出后，将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月，都要重新将菌种从旧的培养基转移到新鲜的培养基上，但是这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏的方法，将菌液与灭菌的甘油充分混匀后，放入﹣20℃的冷冻箱中保存。

解答：

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，A正确；

B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上，等到菌落长成后，放入冰箱低温保藏，长期保存的菌种用甘油管藏的方法，B错误；

C．临时保藏的菌种由于频繁转种，容易被污染或产生变异，C正确；

D．对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏的方法，放入-20 ℃低温保藏的方法，D正确；

故选B。

4．【答案】C

【解析】

试题分析：

微生物接种的方法包括划线分离法和涂布分离法：（1）划线分离法是通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，在数次划线后，可以分离到单个菌落；（2）涂布分离法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将其分别涂布到固体培养基表面，在适当的稀释度下，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。

解答：

A．涂布分离法中使用的接种工具为玻璃刮刀，需保存在70%酒精中，使用前在酒精灯火焰上引燃后冷却；划线分离法中使用接种环，接种环属于金属器具，直接用酒精灯火焰灼烧灭菌，不需用酒精，A错误；

B．涂布分离法接种前需对菌液进行梯度稀释，而划线分离法不用稀释菌液，B错误；

C．涂布分离法和划线分离法是分离菌种的常用方法，均可用于单菌落的分离，C正确；

D．利用涂布分离法可以对样液中的细菌进行计数，而划线分离法不能用于计数，D错误。

故选C。

5．【答案】B

【解析】

试题分析：

使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞．芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌．干热灭菌和高压蒸汽灭菌。

消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，常用的方法有煮沸消毒法．巴氏消毒法．紫外线或化学药物消毒法等。

解答：

A．灭菌是指采用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正确；

B．消毒是指消除或杀灭外环境中的病原体，使其无害化，灭菌则是要将所有的微生物和病毒全部杀灭，以达到无菌的目的，灭菌一定可以达到消毒的目的，但消毒不一定能达到灭菌的效果，B错误；

C．接种环等接种工具常用灼烧法灭菌，C正确；

D．常用的消毒方法有煮沸消毒法．巴氏消毒法．紫外线或化学药物消毒法等，灭菌可以采用高温蒸汽灭菌法．灼烧法，D正确。

故选B。

6．【答案】C

【解析】

试题分析：

7．【答案】C

【解析】

试题分析：

实验设计的原则：对照原则和单一变量原则；对比Ⅰ．Ⅱ两组，可以发现含有维生素的培养基上大肠杆菌菌落较多，缺少C6H12O6的培养基上大肠杆菌几乎不形成菌落。培养基的营养物质有碳源．氮源．水．无机盐。

解答：

A．由分析可知：Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长，A正确；

B．Ⅱ组和Ⅲ组对照，自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖，B正确；

C．三组实验所使用的培养基均需高压蒸汽灭菌，C错误；

D．该实验的因变量是菌落的数目，数目都采用了稀释涂布平板法，D正确。

故选C。

8．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

解答：

A．将微生物接种到固体培养基中的方法通常为平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；
B．稀释涂布平板法接种可以形成均匀分布的单菌落，所以常用来进行微生物的计数，平板划线法常用来筛选分离微生物，B错误；
C．两种接种方法在培养基中都能形成单个菌落，C正确；
D．为防止杂菌污染，接种用具都需进行严格灭菌，D正确。
故选B。

9．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌是常用的防止杂菌入侵的方法，消毒有煮沸消毒法．巴氏消毒法和化学药剂消毒法；灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具，干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具，高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。

解答：

A．接种环．接种针．镊子等金属用具常采用灼烧灭菌，但也可采用干热灭菌，玻璃器皿适用干热灭菌，A错误；

B．干热灭菌法是利用高温使微生物体内的蛋白质等变性，酶失去活性，达到灭菌的目的，B正确；

C．针对某些实验器具．餐具．饮用水可以采用煮沸消毒法，C错误；

D．用酒精擦拭双手．用氯气消毒水源属于化学消毒法，D错误。

故选B。

10．【答案】A

【解析】

试题分析：

根据题意和图示分析可知：①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算．称量．溶化．调pH．灭菌．倒平板。

解答：

A．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需再次通过火焰，塞上棉塞才可，A正确；

B．接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，B错误；

C．划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，C错误；

D．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，D错误。

故选A。

11．【答案】B

【解析】

试题分析：

菌种保存

解答：

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，A正确；
B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上，放入4℃的冰箱中保藏，B错误；
C．临时保藏菌种容易被污染或产生变异，C正确；
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏，置于低温-20℃的冷冻箱中，D正确。
故选B。

12．【答案】C

【解析】

试题分析：

发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育．培养基的配置．灭菌．种子扩大培养和接种．发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。

解答：

A．首先要对发酵设备和培养基严格灭菌，A正确；
B．要随时取样，检测培养液的细菌数目．产物浓度等，以了解发酵进程，B正确；
C．在发酵过程中需要向装置中再添加必需的营养组分，C错误；
D．要严格控制温度．pH．溶解氧等环境因素，D正确。
故选C。

13．【答案】B

【解析】：选B　从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基；微生物的营养物质主要包括氮源．碳源．水和无机盐等，培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨；生长因子主要包括维生素．氨基酸和碱基等，它们一般是酶和核酸的组成成分，蛋白胨可以提供生长因子；该培养基调节合适的pH后还需经灭菌后才可以接种使用。

14．【答案】A

【解析】

试题分析：

消毒和灭菌：

解答：

A．液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒，A正确；

B．培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，而接种环用灼烧灭菌，B错误；

C．消毒能杀死物体表面或内部的部分微生物，不包芽孢和孢子，C错误；

D．高压蒸汽灭菌时间达到后应等待冷却．降温，然后排气，D错误。

故选A。

15．【答案】D

【解析】

试题分析：

分析题干：富集沙门菌的培养基是在营养肉汤培养基的基础上添加了一定浓度的牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质，其能抑制金黄色葡萄球菌．大肠杆菌等微生物的生长，而沙门菌能正常生长，属于选择培养基。

解答：

AD．在营养肉汤培养基的基础上添加牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质，这是一种富集沙门菌的培养基。实验结果表明含有牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠的培养基能抑制金黄色葡萄球菌，含有甘露醇．亚碲酸钠的培养基能抑制大肠杆菌。因此，上述富集沙门菌的培养基是选择性培养基，A正确．D错误；

B．为便于对活菌进行计数，接种时应采用稀释涂布平板法，B正确；

C．培养基的成分通常包括碳源．氮源．水．无机盐等，上述培养基中的葡萄糖．氨基酸等有机物可作为碳源被细菌利用，C正确。

故选D。

16．【答案】B

【解析】

试题分析：

分离和纯培养微生物最常用的培养基是琼脂固体培养基，最常用的手段是平板分离微生物，平板分离法常用的两种方法是涂布平板法和稀释平板法，各种平板分离法的目的是要在培养基上得到目的微生物的单个菌落．

解答：

平板划线法和稀释涂布平板法所用的培养基均为固体培养基，故A正确；用稀释涂布平板法时，如果稀释度不够，获得的单个菌落就可能是由多个细菌细胞繁殖形成的，故B错误；平板划线法和稀释涂布平板法都应在火焰附近进行操作，以防止杂菌污染，故C正确；平板划线法和稀释涂布平板法稀释分散菌种的原理不同，但是能达到分离纯化大肠杆菌的目的，故D正确。

17．【答案】B

【解析】

试题分析：

平板划线的操作的基本步骤是：
（一）．右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。
（二）．左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。
（三）．烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
（四）．将平板倒置，放入培养箱中培养。

解答：

A．在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，但培养基只是在接种前进行灭菌即可，A错误；
B．划线操作接种环不应划破培养基表面，否则不能分离得到单菌落，B正确；

C．划线时皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面，C错误；
D．划线时注意不要将最后一区5的划线与第一区1相连，D错误。
故选B。

18．【答案】D

【解析】

试题分析：

黑曲霉属于真菌中的霉菌类微生物，霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可，如麦芽汁加琼脂，将发酵啤酒的原料（未加酒花），稀释加琼脂15克，溶化后分装，121℃灭菌30分钟。蔗糖豆芽汁培养基可以用来培养酵母菌和霉菌，使它们与细菌分离开来。

解答：

根据以上分析可知，黑曲霉属于真菌中的霉菌类微生物，霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。综上所述，D正确，A．B．C错误。

故选D。