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【配套新教材】2023届高考生物学二轮复习 专项练(8)现代生物科技专题
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1.培育转基因抗虫棉的过程中需要使用多种酶,下列相关叙述错误的是( )
A.限制酶能识别特定的碱基序列,并使特定位点的磷酸二酯键断开
B.E·cliDNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来
C.RNA聚合酶识别并结合到启动子上才能驱动基因转录出mRNA
D.TaqDNA聚合酶在PCR过程中只能沿引物的5'端延伸DNA子链
2.用噬菌体抗体库技术获得人的单克隆抗体的方法是将人抗体基因插入噬菌体载体,然后让该噬菌 体感染大肠杆菌,表达的抗体可能和病毒蛋白以融合蛋白的形式附着在噬菌体表面,也可能通过大肠杆菌分泌出去。下列叙述错误的是( )
A.可从人的浆细胞中获取总RNA,通过逆转录PCR技术扩增出抗体基因
B.为防止抗体被降解,在实验中应选用蛋白酶缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞
C.构建噬菌体抗体库过程中,需用Ca2+处理大肠杆菌
D.附着在噬菌体表面的抗体蛋白可保持相对独立的空间结构和生物活性
3.土壤农杆菌含有一个大型的Ti 质粒,在侵染植物细胞的过程中,其中的T-DNA 片段转入植物的基因组。若想用基因工程手段获取抗旱植株,以下操作不正确的是( )
A. 若用Ti 质粒作为抗旱基因的载体,目的基因的插入位置应该在T-DNA 片段内
B. 将重组Ti 质粒导入土壤农杆菌中时,可以用钙离子处理细菌
C. 用含有重组Ti 质粒的土壤农杆菌感染植物细胞后,培养再生成有抗旱基因的植物
D. 若能在植物细胞中检测到抗旱基因,则说明该基因工程项目获得成功
4.如图为蛋白质工程操作的基本思路,下列叙述不正确的是( )
A.代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤
B.代表中心法则内容的是①②
C.①代表转录,②代表翻译,④代表分子设计,⑤代表 DNA合成
D.蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计,通过基因合成或改造实现
5.将乳酸菌的乳酸脱氢酶基因导入酿酒酵母,获得能产生乳酸的转基因酵母菌。下列相关叙述正确的是( )
A.使用限制酶BamHⅠ处理将乳酸脱氢酶基因插入质粒
B.在含有尿嘧啶的培养基上筛选含有重组质粒的酵母菌
C.用LB固体平面培养基培养酵母菌,培养时需倒置
D.一定的发酵条件下,加入离子交换树脂可使乳酸及时脱离发酵液
6.植物细胞工程包括植物组织培养、植物体细胞杂交等技术,在快速繁殖、作物育种及提高作物产量等方面有广泛应用。下列叙述错误的是( )
A.植物组织培养技术可以实现人参皂苷、紫杉醇等细胞产物的工厂化生产
B.利用植物组织培养技术培育脱毒苗,获得抗病的新品种
C.杂种细胞再生细胞壁时,需在与细胞液浓度相当的缓冲液中进行
D.植物体细胞杂交技术克服生物远缘杂交不亲和的障碍
7.科学家发现, 一种叫“熊虫”的动物,能耐受零下271℃的冰冻数小时,此时,它的体内会大量产生一种叫海藻糖的二糖。现设计实验验证“海藻糖可使该动物细胞免受到低温造成的损伤”。下列相关实验步骤错误的是( )
A.取适量熊虫细胞,等分成甲、乙两组,于动物细胞营养液中
B.向甲组细胞中加入一定量海藻糖溶液,向乙组细胞加入等量生理盐水
C.将甲组置于零下271℃的条件下,乙组置于常温下培养数小时
D.观察并记录两组细胞的生活状况
8.人乳头瘤病毒(HPV)感染是诱发宫颈癌的重要因素。HPV 具有多种类型,其中的HPV16 和 HPV18 属于高危型,可引起宫颈癌及宫颈上皮内高度病变。现对某就诊者的取样细胞进行培养,来进行确诊。下列说法不正确的是( )
A.分散取样的细胞时可采用胰蛋白酶、胶原蛋白酶、 胃蛋白酶等处理
B.培养取样细胞时,需要为这些细胞提供充足的营养条件、稳定的外部环境等
C.让取样细胞进行贴壁生长,若产生了接触抑制现象,则不属于 HPV 高危型
D.无论是原代培养还是传代培养,都需将培养瓶放在 CO2 培养箱中培养
9.CD47是一种跨膜糖蛋白,它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合,从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6-5倍,导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测,抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用,为此他们按照如下流程进行了实验。下列说法不正确的是( )
A.多次进行步骤①的目的是获取更多能产生抗CD47的抗体的B细胞
B.对照组应设置为:巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体
C.利用该单克隆抗体可以诊断包括肺癌、结肠癌在内的多种癌症
D.实验组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于对照组可验证上述推测
10.科研人员利用核移植技术获得的患者自体胚胎干细胞可用于治疗某些疾病,部分过程如下图所示。下列分析错误的是( )
A. 将体细胞注入去核卵母细胞即可得到重组细胞
B. 选择MⅡ期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复
C. 重组细胞形成囊胚的过程进行了有丝分裂和细胞分化
D. 用该方法获得的胚胎干细胞治疗疾病可避免发生免疫排斥反应
11.我国科学家利用基因编辑技术,获得一只生物节律核心基因BMAL1敲除的琳猴。用高精度工具去除该猴卵母细胞的细胞核,再与成纤维细胞融合,将发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴,获得5 只克隆猴,用于研究节律机制。以下叙述错误的是( )
A.借助高精度工具可直接将成纤维细胞“注入”刚去核的卵母细胞实现融合
B.胚胎体外培养过程中不需要利用相关技术去除早期胚胎外的透明带
C.多只代孕猴应提前做好同期发情处理,避免移植胚胎发生免疫排斥
D.植入代孕雌猴之前可以用分割针平均分割处理,植入后可以得到多个胚胎
12.试管婴儿(test-tube baby)是指采用人工方法让卵细胞和精子在体外受精,并进行早期胚胎发育,然后移植到母体子宫内发育诞生的婴儿。自1988年3月,我国内地首例试管婴儿在北京诞生以来,该技术在我国也越来越普及。下列相关叙述正确的是( )
A.从亲体取出的精子需要经过获能处理,而卵细胞无需经过处理即可完成受精
B.判断培养液中卵子是否受精通常以观察到两个极体或雌、雄原核作为标志
C.体外受精获得的早期胚胎在培养液中培养到桑葚胚或原肠胚才可进行移植
D.试管婴儿属于生殖性克隆技术,为不孕不育患者孕育新生命提供了可能
13.美国和日本的两个研究小组分别宣布,其研究人员成功地将人体皮肤细胞改造成 了几乎可以和胚胎干细胞相媲美的多功能干细胞——“iPS细胞”,人类"iPS细胞”可以形成神经元等人体多种组织细胞。以下有关“iPS 细胞”的说法正确的是( )
A. “iPS细胞”分化为人体多种组织细胞的过程体现了细胞的全能性
B. “iPS细胞”既可分化形成神经元,也可用于制造心肌细胞,说明“iPS细胞”在分裂时很容易发生突变
C. “iPS细胞”有细胞周期,它分化形成的神经细胞没有细胞周期
D. “iPS细胞”只能分化成人体多种组织细胞,是因为它具有人体部分细胞的遗传物质
14.转基因技术的研究正以惊人的速度发展,越来越多地影响人类的生产和生活。科学家在转基因研究工作中会采取很多方法确保转基因产品的安全性,各个国家也都制定了相关法规和政策规范转基因技术的应用。下列有关说法错误的是( )
A.我国对农业转基因生物实行标识制度,如转基因动植物要直接标注“转基因××”
B.用农业转基因生物加工制成的产品一定含有转基因成分
C.我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
D.利用转基因技术制造的新型致病菌可能导致大批受感染者突然发病而又无药可医
15.科学家通过下面的主要步骤培养获得iPS-NKT细胞(NKT为“自然杀伤性T细胞”的简称),并已用于治疗肺癌和复发性头颈癌的临床试验。相关叙述错误的是取健康成年人血液中NKT细胞、培养→利用转基因技术将NKT细胞转化为iPS细胞(诱导多能干细胞)→细胞培养、诱导分化,获得具NKT细胞特性的iPS-NKT细胞( )
A.NKT细胞通过与癌细胞的接触,诱导其凋亡过程属于细胞免疫
B.可在动物细胞培养液中加入适量抗生素,阻止病毒感染细胞
C.将NKT细胞诱导成iPS细胞,有助于通过体外培养获得大量NKT细胞
D.若这一技术能够应用成功,则可为癌症的免疫治疗提供新途径
16.2015年2月3日,英国议会下院通过一项历史性法案,允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析,下列叙述正确的是( )
A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代
B.捐献者携带的红绿色盲基因可能遗传给三亲婴儿
C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核
D.三亲婴儿的培育过程涉及核移植技术,属于无性生殖
17.下图是植物细胞杂交过程示意图,请据图回答:
(1)植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。目前此步骤最常用的方法是酶解法,也就是在温和的条件下用_____和_____分解植物的细胞壁。
(2)②过程的发生,必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合常用的化学方法是用_____试剂作为诱导剂诱导融合。
(3)与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为_____。
(4)④⑤过程分别称为_____ 和 _____。若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物---紫杉醇,培养将进行到_____(填字母编号)即可。
(5)植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值,其突出的优点是可以_____。
(6)在④⑤培养过程中,除了提供水分、无机盐、糖类、维生素及氨基酸外,还需要在培养基中加_____。同时,在培养过程中,除必需的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证_____。
18.HPV45属于高危型人类乳头瘤病毒(HPV),与寓颈癌的发生密切相关。Ll蛋白是组成HPV病毒衣壳的主要结构蛋白。请据下图回答下列问题:
(1)制备HPV45的单克隆抗体时需首先提取病毒的L1蛋白:间隔多次注射到小鼠体内。一段时间后获取小鼠的_____(填细胞名称),并诱导其与骨髓瘤细胞融合。
(2)核苷酸合成有两个途径,如上图所示。已知物质A可以阻断其中的全合成途径。骨髓瘤细胞中缺乏转化酶、激酶,而正常细胞(非骨髓瘤细胞)都含有补救合成途径中所必需的转化酶和激酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选未融合细胞,或两两融合后的细胞时,其中_____(填细胞名称)会因无法进行图中两个途径而在HAT培养基上不能增殖。杂交瘤细胞在“HAT培养基”上可以通过_____途径合成核酸。
(3)能在HAT培养基上大量增殖的细胞其所产生的抗体_____(填“一定”或“不一定”)能抗HPV,其原因是:_____。
(4) HPV疫苗是预防宫颈癌的主要手段。为构建重组疫苗,科研人员将衣壳蛋白L1的基因用_____酶切割后,构建重组质粒(所用基因及质粒如下图所示)。含有此重组质粒的大肠杆菌能在_____的选择性培养基中存活,从而能被准确的筛选出来。
(5)大肠杆菌表达产物衣壳蛋白L1经纯化,可被免疫系统识别,发挥免疫作用。与传统灭活
疫苗相比,这样的重组疫苗更安全又有效,其主要原因是_____。
答案以及解析
1.答案:D
解析:A、限制酶能识别特定的碱基序列,并使特定位点的磷酸二酯键断开,A正确;B、根据酶的来源不同分为E·cliDNA连接酶、T4DNA连接酶,E.cliDNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来,而T4DNA连接酶还可以连接平末端,B正确;C、转录时需要RNA聚合酶的催化,RNA聚合酶识别并结合到启动子上才能驱动基因转录出mRNA,C正确;D、TaqDNA聚合酶在PCR过程中只能沿引物的3′端延伸DNA子链,D错误。故选D。
2.答案:C
解析:A、由于只有浆细胞能合成抗体,因此可从人的浆细胞中获取总RNA,又PCR技术只能扩增DNA,因此提取到的RNA再通过逆转录PCR技术扩增得到抗体基因,A正确; B、由于抗体的化学本质是蛋白质,因此为防止抗体被降解,在实验中应选用蛋白酶缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞,B正确; C、由于噬菌体可以侵染大肠杆菌,将重组DNA分子注入大肠杆菌,因此构建噬菌体抗体库过程中,不需用Ca2+处理大肠杆菌,C错误; D、附着在噬菌体表面的抗体蛋白可能和病毒蛋白以融合蛋白的形式附着在噬菌体表面,这样可保持相对独立的空间结构和生物活性,D正确。
故选:C。
3.答案:D
解析:A、土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒,在侵染植物细胞的过程中,其中的T-DNA片段转入植物的基因组,所以若用Ti质粒作为抗旱基因的载体时,目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内,且要保证复制起始点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏,A正确;
B、将目的基因导入细菌时,需要用Ca2+处理细菌,使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态,B正确;
C、用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞,使其具有抗旱基因,然后再通过植物组织培养技术将受体细胞培养成具有抗旱基因的植物,C正确;
D、能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因,只能说明目的基因导入成功,不能说明该基因成功表达,即不能说明该基因工程项目获得成功,D错误。
故选D。
4.答案:D
解析:A、代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤,A正确;
B、代表中心法则内容的是①②,B正确;
C、①代表转录,②代表翻译,④代表分子设计,⑤代表 DNA合成,C正确;
D、蛋白质工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计,通过基因合成或修饰实现,D错误.
故选:D.
5.答案:D
解析:A、根据图示,不能使用限制酶BamHⅠ处理,因为其位点不在启动子与终止子之间,A错误; B、质粒上具有尿嘧啶合成酶基因,应在不含尿嘧啶的培养基上筛选含有重组质粒的酵母菌,B错误; C、培养酵母菌不用LB固体平面培养基,培养时需倒置,以防止杂菌污染,C错误; D、一定的发酵条件下,加入离子交换树脂可使乳酸及时脱离发酵液,D正确。
故选:D。
6.答案:B
解析:A、利用植物组织培养技术可以实现细胞产物的工厂化生产,这是植物组织培养技术的应用之一,A正确; B、利用植物组织培养技术培养脱毒苗,不能获得抗病毒的新品种,通过基因工程才能获得抗病毒的新品种,B错误; C、杂种细胞再生细胞壁时,需在与细胞液浓度相当的缓冲液中进行,以免细胞过度吸水会失水,C正确; D、植物体细胞杂交技术最大的优点就是克服生物远缘杂交不亲和的障碍,D正确。
故选:B。
7.答案:C
解析:A、取适量哺乳动物细胞,等分成甲、乙两组(以甲组为实验组、乙组为对照组),置于动物细胞营养液中(无关变量一致),A正确; B、向甲组细胞中添加含海藻糖的细胞培养液,向乙组细胞中添加等量的不加海藻糖的细胞培养液(单一变量),B正确; C、将甲、乙两组细胞均控制在零下271℃的条件下冰冻数小时(本步骤应遵循无关变量一致,故温度环境应一致),C错误; D、观察并记录两组细胞的生活状况,D正确。故选:C。
8.答案:A
解析:A、分散取样的细胞能剪碎,并采用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理,A错误; B、培养取样细胞时,需要为这些细胞提供充足的营养条件、稳定的内环境(温度、pH、渗透压)等,B正确; C、动物细胞培养存在细胞贴壁和接触性抑制,HPV高危型不存在接触性抑制,C正确; D、论是原代培养还是传代培养,都需将培养瓶放在CO2培养箱中培养,目的是维持培养液的pH稳定,D正确。
故选:A。
9.答案:B
解析:A、步骤①是向免疫小鼠体内注射特定的抗原,多次进行步骤①可获得更多符合要求的浆细胞(产生抗CD47的抗体的B细胞),A正确B、根据单一变量原则可知,对照组的设置应为不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞的共培养体系,B错误; C、结合题意可知,单克隆抗体特异性强、灵敏度高,利用该单克隆抗体可以诊断包括肺癌、结肠癌在内的多种癌症,C正确; D、实验组中加入了单克隆抗体,抗体与肿瘤细胞表面的CD47发生特异性结合,从而解除CD47对巨噬细胞的抑制作用,而对照组中没有加入单克隆抗体,不能与肿瘤细胞表面的CD47结合,因而无法解除CD47对巨噬细胞的抑制作用,因此,实验组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于对照组可验证上述推测,D正确。故选:B。
10.答案:A
解析:A、看图可知:将体细胞的核注入去核卵母细胞即可得到重组细胞,A错误; B、得到的重组细胞,需用物理或化学方法激活才能完成后续发育,B正确; C、重组细胞形成囊胚的过程发生了细胞的分化,即有基因的选择性表达,C正确; D、用该方法获得的自体胚胎干细胞治疗疾病可避免发生免疫排斥反应,D正确。
故选:A。
11.答案:C
解析:A.在吸取卵母细胞核之后,可以通过工具直接格体细胞注入去核卵母细胞中实现融合,故A项正确;B.制作嵌合胚胎时需要去除早期胚胎外的透明带,体外培养胚胎不需要这种操作,故B项正确; C.胚胎移植操作前需对多只代孕母鼠进行同期发情处理,以保证受体和供体生理状态相同,对移植的胚胎不发生免疫排斥,故C项错误;D.通过胚胎分割技术可以得到多个胚胎,其关键操作是在体外用分割针对胚胎进行平均分割,故D项正确。
12.答案:B
解析:精子需要经过获能处理,卵细胞需要经过培养才可完成受精,A错误;实际胚胎工程操作中,常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志,B正确;进行胚胎移植的胚胎一般需要发育到桑葚胚或囊胚,C错误;克隆是指无性繁殖,而试管婴儿进行了体外受精,属于有性生殖,D错误。
13.答案:C
解析:A、“iPS细胞”分化为人体多种组织细胞的过程不能表现细胞的全能性,因为该过程中没有形成完整个体,A错误;
B、“iPS细胞”既可分化形成神经元,也可用于制造心肌细胞,而细胞分化的实质是基因的选择性表达,不是突变,B错误;
C、“iPS细胞”具有较强的分裂和分化能力,因此该细胞有细胞周期,它分化形成的神经细胞已经高度分化,不再分裂,因此没有细胞周期,C正确;
D、“iPS细胞”是人体细胞改造形成的,其所含基因与人体体细胞相同,D错误.
故选:C.
14.答案:B
解析:我国对农业转基因生物实行了标识制度,如直接标注“转基因××”“加工原料为转基因××”“本产品为转基因××加工制成,但本产品中已不再含有转基因成分”等字样,A正确、B错误;我国政府一再重申四不原则:不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验,C正确;利用转基因技术制造的新型致病菌,人类从来没有接触过,可能导致大批受感染者突然发病而又无药可医,D正确。
15.答案:B
解析:在动物细胞培养液中加入抗生素,其目的是抑制细菌繁殖,抗生素对病毒增殖不起作用。
16.答案:A
解析:A、该技术中,母亲只提供了细胞核,因此可以避免遗传母亲的线粒体遗传病基因传递给后代,A正确;
B、红绿色盲基因位于细胞核内的X染色体上,捐卵者的卵母细胞核已经去除,其携带的红绿色盲基因不可能遗传给三亲婴儿,B错误;
C、图中三亲婴儿是经过核移植和体外受精产生的,其染色体一半来自母亲提供的细胞核,一半来自精子,C错误;
D、由图可知,三亲婴儿的培育需要采用体外受精技术,属于有性生殖,D错误。
故选:A。
17.答案:(1)纤维素酶; 果胶酶
(2)PEG
(3)高尔基体
(4)脱分化; 再分化; e
(5)克服远缘杂交不亲和的障碍
(6)植物激素;无菌
解析:(1)去除植物细胞壁时常用酶解法,根据酶的专一性,且植物细胞壁的成分是纤维素和果胶,据此可知酶解法所用的酶为纤维素酶和果胶酶处理,即在温和的条件下用纤维素酶、果胶酶分解植物的细胞壁获得原生质体。
(2)②过程的发生,必须进行人工诱导,常用的聚乙二醇,即PEG试剂作为诱导剂诱导融合。
(3)③表示再生出新细胞壁的过程,这是植物体细胞融合成功的标志,而植物细胞壁的形成与高尔基体有关,高尔基体为单层膜结构的细胞器。
(4)图中④是从杂种细胞形成愈伤组织的过程,⑤是愈伤组织分化出根、芽的过程,故两个过程分别称为脱分化、再分化过程;若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物——紫杉醇,培养将进行到e阶段即可,因为该药物是从植物细胞中获得的,因此培养到愈伤组织e,然后让愈伤组织大量繁殖即可。
(5)植物体细胞杂交育种的典型优点是克服远缘杂交不亲和的障碍,以便获得远缘杂交种。
(6)在④⑤培养过程中,除了提供水分、无机盐、糖类、维生素及氨基酸外,往往还需要在培养基中加植物激素(生长素和细胞分裂素),从而对诱导方向做出调节,如诱导生根过程中可使培养基中生长素的比例增加;同时,在培养过程中,除必需的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证无菌、无毒的环境,因为培养基中有有机物的存在,且环境条件适合细菌、真菌的繁殖。
18.答案:(1)B淋巴细胞(或已免疫的B淋巴细胞)
(2)骨髓瘤细胞和融合的骨髓瘤细胞;补救合成
(3)不一定;免疫小鼠体内存在多种B淋巴细胞,但每种B淋巴细胞只产生一种特定抗体
(4)BamHⅠ和HindⅢ;有氨苄青霉素,但没有卡那霉素(或填有氨苄青霉素素)
(5)衣壳蛋白L1无核酸成分无侵染能力(或繁殖能力),但有抗原特性可刺激机体产生相应的抗体和记忆细胞
解析:(1)制备单克隆抗体时需要将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合。
(2)已知物质A可以阻断其中的全合成途径。骨髓瘤细胞中缺乏转化酶、激酶不能进行补救合成途径,所以在培养基中添加H、A、T三种物质时,只有骨髓瘤细胞和仅自身发生融合的骨髓瘤细胞两种途径都无法进行所以无法合成核苷酸,从而无法进行有丝分裂增殖。杂交瘤细胞(由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合)的全合成途径虽然被物质A阻止,但由于其中的B淋巴细胞保留了能利用H、T物质合成核苷酸的补救合成途径,故可以继续增殖。
(3)能在HAT培养基上存活的都是杂交瘤细胞,但由于获取的小鼠B淋巴细胞是混合了很多种B淋巴细胞细胞群,所以产生的杂交瘤细胞也是多种多样的,不是每一种都能产生针对HPV病毒的抗体。
(4)L1基因能表达出HPV病毒衣壳蛋白,BdⅠ酶会破坏质粒上的氨苄青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因,所以不能使用BdⅠ酶切割目的基因,L1基因两侧和质粒上都含有BamHⅠ酶和HindⅢ酶的切割位点,但质粒上不含有Sau3AⅠ酶的切割位,点,故为构建重组疫苗,需要用BamHⅠ酶和HindⅢ酶同时切割L1基因与质粒,然后将HPV病毒衣壳蛋白L1基因与质粒构建重组质粒,导入大肠杆菌。BamHⅠ酶和HimdⅢ酶会破坏质粒上的卡那霉素抗性基因,但氨苄青霉素抗性基因没有破坏。重组质粒具有抗氨苄青霉素基因,可以用添加氨苄青霉素的培养基筛选含有重组质粒的大肠杆菌。
(5)重组疫苗只含有衣壳蛋白L1,无核酸,故无侵染能力(无法繁殖),但同时具有抗原特性,可刺激机体产生抗体和记忆细胞,因此与传统灭活疫苗相比,这样的重组疫苗更安全又有效。
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