2021-2022学年江苏省苏州中学高二下学期期末生物试题含解析

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江苏省苏州中学2021-2022学年高二下学期期末生物试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________

一、单选题
1．下列关于生物大分子的叙述，错误的是（　　）
A．生物大分子都以碳链为基本骨架
B．生物大分子的单体都具有多样性
C．生物大分子在细胞中的合成都需要酶来催化
D．生物大分子发挥功能都与其结构息息相关
【答案】B
【分析】在构成细胞的化合物中，多糖、蛋白质、核酸都是生物大分子，生物大分子是由许多单体连接成的多聚体，每一个单体都以若干个相连的碳原子构成的碳链为基本骨架。
【详解】A、生物大分子的单体都以若干个相连的碳原子构成的碳链为基本骨架的，A正确；
B、组成生物大分子的单体不都具有多样性，如组成多糖的单体葡萄糖不具有多样性，B错误；
C、细胞代谢过程在酶的催化下才能在常温、常压下顺利实现，据此可推测，生物大分子在细胞中的合成都需要酶来催化，C正确；
D、根据结构与功能相适应的原来推测，生物大分子发挥功能都与其结构息息相关，D正确。
故选B。
2．广泛分布于水生生态系统的噬藻体是易感染蓝细菌的病毒，下列叙述正确的是（　　）
A．两者的遗传物质所含的核苷酸的种类相同
B．两者都可利用自身核糖体进行蛋白质合成
C．两者属于生命系统不同的结构层次
D．两者都是生态系统的分解者
【答案】A
【分析】根据题意分析，噬藻体是一种病毒，无细胞结构，必须寄生于活细胞才能生存。病毒只含一种核酸。蓝藻能进行光合作用，属于生态系统的生产者，噬藻体寄生于蓝藻，属于生态系统的消费者。
【详解】A、蓝细菌和噬菌体中遗传物质均为DNA，含脱氧核苷酸，A正确；
B、病毒没有细胞结构，不含核糖体，B错误；
C、病毒不属于生命系统的结构层次，C错误；
D、蓝藻能进行光合作用，属于生态系统的生产者，噬藻体寄生于蓝藻，属于生态系统的消费者，D错误。
故选A。
3．下列有关生物膜的叙述，正确的是（　　）
A．大肠杆菌的生物膜系统只有细胞膜
B．神经细胞膜上运入K+的载体蛋白和运出K+的通道蛋白都具有特异性
C．线粒体内膜向内折叠形成嵴，分布着大量分解丙酮酸的酶
D．根尖分生区细胞染色体形态的变化体现了生物膜的流动性
【答案】B
【分析】细胞的生物膜系统：
（1）概念：真核细胞中，高尔基体、线粒体、内质网等细胞器膜、细胞膜、核膜等共同形成的结构体系。
（2）结构特点（一定的流动性）：
①原因：构成生物膜的磷脂分子和大多数蛋白质分子是可以运动的。
②表现：小鼠细胞和人细胞融合实验、变形虫的变形运动、胞吞和胞吐等。
③意义：细胞膜的流动性对于细胞完成物质运输、生长、分裂、运动等功能都是非常重要的。
【详解】A、真核细胞中，高尔基体、线粒体、内质网等细胞器膜、细胞膜、核膜等共同形成的结构体系为生物膜系统，大肠杆菌为原核生物，无生物膜系统，A错误；
B、载体蛋白只容许与自身结合部位相适应的分子或离子通过；通道蛋白只容许与自身通道的直径和形状相适配、大小和电荷相适宜的分子或离子通过，所以运入K+的载体蛋白和运出K+的通道蛋白都具有特异性，B正确；
C、丙酮酸的分解分别发生在有氧呼吸第二阶段和无氧呼吸第二阶段，发生场所分别在线粒体基质和细胞质基质，所以可以分解丙酮酸的两种酶分别分布在线粒体基质和细胞质基质中，C错误；
D、根尖分生区细胞染色体形态变化，是为了经过复制之后，染色体上的遗传物质DNA，可以精确地平均分配到两个子细胞中，从而在细胞的亲代和子代之间保持了遗传的稳定性，并未体现了生物膜的流动性，D错误。
故选B。
4．下列关于细胞结构与功能相适应的叙述，错误的是（　　）
A．睾丸间质细胞中内质网较发达，有利于雄性激素的合成
B．根尖成熟区细胞有大液泡，有利于调节细胞的渗透压
C．癌细胞核膜上的核孔密度较高，有利于核基因的表达
D．神经细胞轴突末梢有大量分支，有利于接受更多神经递质
【答案】D
【分析】在成熟的植物细胞内含有中央液泡，液泡内含有水、无机盐、糖类、蛋白质以及花青素等物质，有利于调节植物细胞的渗透压，维持植物细胞坚挺的状态。
【详解】A、雄性计数的化学本质是小分子的脂质，是由睾丸细胞合成并分泌的，且脂质的合成部位是内质网，据此可推测，睾丸间质细胞中内质网较发达，有利于雄性激素的合成，A正确；
B、根尖成熟区细胞有大液泡，液泡与细胞的吸水和失水有关，因而有利于调节细胞的渗透压，B错误；
C、癌细胞代谢旺盛，其核膜上的核孔密度较高，有利于核基因的表达的顺利实现，C正确；
D、神经细胞轴突末梢有大量分支，有利于通过胞吐释放神经递质，通过神经递质与突触后膜上相应的受体发生特异性结合实现兴奋在细胞间的传递过程，D错误。
故选D。
5．《诗经》中有“中田有庐，疆场有瓜，是剥是范，献之皇祖”的诗句。“剥”和“范”是腌渍加工的意思。许慎《说文解字》解释“范菜者，酸菜也”。下列关于酸菜制作的叙述正确的是（　　）
A．为了降低杂菌污染的风险，发酵前需要对器具进行灭菌处理
B．保证泡菜坛内的无氧环境，腌制时应将泡菜坛装满
C．泡菜坛内液体表面可能出现一层由酵母菌繁殖形成的白膜
D．腌制过程中乳酸和亚硝酸盐的含量会先增加后减少再趋于稳定
【答案】C
【分析】制作泡菜时要用到乳酸菌，乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧的条件下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得菜呈现一种特殊的风味，还不改变菜的品质。因此泡菜制作的原理是需利用乳酸菌在无氧条件下发酵形成乳酸，然后制作成泡菜。
【详解】A、为了降低杂菌污染的风险，发酵前需要对器具进行消毒处理，A错误；
B、制作泡菜所需要的微生物为乳酸菌，为厌氧菌，为保证泡菜发酵过程中的无氧环境，在装坛发酵前后需要检泡菜坛有无裂纹和砂眼，并对泡菜坛进行用水密封坛口处理，B错误；
C、在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，其表面往往含有适量的氧气，适合酵母菌生长繁殖，酵母菌生长繁殖会在泡菜坛液面的形成一层白膜，C正确；
D、在泡菜腌制过程中亚硝酸盐的含量会先增加后减少再趋于稳定，乳酸菌的含量先增加，后由于营养物质缺乏，pH下降而减少；乳酸的含量会一直增加，后稳定，D错误。
故选C。
6．稀释涂布平板法是常用的微生物培养方法，下列相关叙述正确的是（　　）
A．倒好的平板应立即使用，以防止培养基的表面干燥
B．稀释涂布平板法不可用于微生物的分离，只可用于微生物的计数
C．用此法估测的数值往往偏小，应以菌落数最多的平板计数为准
D．使用过的微生物培养基应进行灭菌处理后再丢弃
【答案】D
【分析】稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。
【详解】A、倒好的平板不能立即使用，通常需要进行培养检测，判断培养基灭菌是否合格，A错误；
B、稀释涂布平板法既可用于微生物的分离，也可用于微生物的计数，B错误；
C、当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，但在进行菌落数统计时需要统计各个平板的数据，并求得平均值，C错误；
D、使用过的微生物培养基应进行灭菌处理后再丢弃，避免对环境和操作者造成影响，D正确。
故选D。
7．某研究性学习小组拟培育一种名贵花卉的脱毒苗，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→生芽、生根→移栽”。相关叙述错误的是（　　）
A．取材部位一般选择植物顶端分生区附近，因其含病毒少、甚至不含病毒
B．外植体接种前需进行流水冲洗、酒精消毒、次氯酸钠处理等消毒措施
C．为充分利用培养条件，每个锥形瓶可以接种6—8个外植体
D．将组培苗移栽后，需进行病毒接种实验来筛选出脱毒苗
【答案】D
【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育形成植株，该过程受基因选择性表达的调控。
【详解】A、制备脱毒苗一般选取茎尖、芽尖等分生区细胞，因为该部位细胞含病毒少，甚至不含病毒，因而可获得无毒苗，A正确；
B、消毒的原则是既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害，通常外植体接种前常进行流水冲洗、酒精处理、消毒液处理等消毒措施，最后为了避免消毒液的危害，需要用无菌水清洗三次，B正确；
C、为充分利用培养条件，每个锥形瓶可接种6～8个外植体，从而保证成功获得培养对象，C正确；
D、将组培苗移栽后，不需要进行病毒接种实验来筛选出脱毒苗，因为培养的不是抗毒苗，D错误。
故选D。
8．研究者应用原生质体融合技术，利用光合细菌与嗜热菌选育出了耐高温的光合细菌。下列有关叙述正确的是（    ）
A．用纤维素酶和果胶酶处理可获得两种原生质体
B．两种细菌细胞核的融合是完成细胞融合的标志
C．用高渗溶液处理可在培养液中有效分离原生质体和细菌
D．选育成功的细菌能在一定的高温环境中进行光合作用
【答案】D
【分析】1、光合细菌与嗜热菌都是原核生物，它们含有细胞壁，因此融合前要先去除细胞壁，去除细胞壁后，采用一定的方法诱导细胞融合，其原理细胞融合的原理是细胞膜的流动性，诱导细胞融合的方法包括物理方法（如电激、振荡、离心）和化学方法（如聚乙二醇）。
2、去壁的细菌缺失细胞壁，在低渗溶液中会吸水膨胀甚至胀破，而未去壁细菌有细胞壁的保护，在低渗溶液中不会吸水胀破。
【详解】A、光合细菌与嗜热菌都是原核生物，它们含有细胞壁，因此融合前要先去除细胞壁，但原核生物细胞壁的主要成分是肽聚糖，不能用纤维素酶和果胶酶去除，A错误；
B、植物细胞融合完成的标志是再生出新的细胞壁，而且光合细菌与嗜热菌都是原核生物，没有细胞核，B错误；
C、去壁的细菌缺失细胞壁，在低渗溶液中会吸水膨胀甚至胀破，而未去壁细菌有细胞壁的保护，在低渗溶液中不会吸水胀破，所以用低渗溶液处理可在培养液中有效分离原生质体和细菌，C错误；
D、 融合成功的细菌具有光合细菌与嗜热菌双方的特点：能在较高温度下进行光合作用，D正确。
故选D。
9．下列关于胚胎工程的叙述中正确的是（　　）
A．在饲料中添加促性腺激素，使供体超数排卵
B．选择囊胚进行胚胎分割时，应注意将内细胞团均等分割
C．为了避免发生免疫排斥反应，需要对受体注射免疫抑制剂
D．胚胎移植前需要检查胚胎质量，并在囊胚或原肠胚阶段移植
【答案】B
【分析】胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。理论基础：哺乳动物的体内受精和早期胚胎发育规律。
【详解】A、促性腺激素属于蛋白质类激素，只能注射不能饲喂，A错误；
B、选择囊胚进行胚胎分割时，应注意将内细胞团均等分割，否则会影响胚胎的发育和功能，B正确；
C、受体母牛对外来胚胎不发生免疫排斥反应，因此进行胚胎移植前，不需要对受体注射免疫抑制剂，C错误；
D、胚胎移植前需要检查胚胎质量，并在囊胚或桑葚胚阶段进行移植，此时的胚胎移植的成功率高，D错误。
故选B。
10．下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，正确的是（　　）
A．可以用菜花、洋葱、猪血、猪肝等实验材料粗提取DNA
B．在研磨液中加入等体积预冷的酒精以溶解DNA获取滤液
C．粗提得到的DNA白色丝状物可用玻棒沿一个方向搅拌卷起
D．使用二苯胺试剂能有效测定不同提取液中DNA的纯度差别
【答案】C
【分析】1.DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：
①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；
②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；
③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；
④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。
2.DNA粗提取与鉴定的实验中，不同操作步骤中加水的作用不同，破碎细胞获取含DNA的滤液时加蒸馏水的目的是使血细胞涨破；出去滤液中的杂质时，加蒸馏水的目的是降低NaCl溶液浓度使DNA析出。
【详解】A、理论上只要含有DNA的生物组织均可作为该实验的材料，因此菜花、洋葱、猪肝等均可作为提取DNA的材料，但猪血不能作为实验材料，因为其中成熟的红细胞没有细胞核和 细胞器，因而不含DNA，A错误；
B、在研磨液中加入等体积2mol/L的NaCl溶液可以溶解DNA获取滤液，DNA不溶于酒精，B错误；
C、粗提得到的DNA白色丝状物可用玻棒沿一个方向搅拌卷起，进而可获得较多的DNA，C正确；
D、使用二苯胺试剂鉴定DNA的存在，不能用于测定不同提取液中DNA的纯度差别，D错误
故选C。
11．现代生物工程的操作常常涉及到下面的流程，下列说法错误的是（　　）

A．若图为基因工程的操作过程，①表示目的基因，②表示载体
B．若图为核移植过程，供体细胞①与去核的MII中期卵母细胞②融合
C．若图为试管动物的培育过程，受精卵③经胚胎体外培养可获得新个体④
D．若图为植物体细胞杂交过程，成功的标志是杂交细胞④再生出细胞壁
【答案】C
【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。
【详解】A、如果此图表示基因工程的操作流程，若①为目的基因，则②为运载体，包括质粒，还可以是其他的运载体，如噬菌体或动植物病毒等，A正确；
B、MII中期卵母细胞含有大量的营养物质，并含有诱导（激发）体细胞核表现全能性的物质，因此若图为核移植过程，供体细胞①与去核的MII中期卵母细胞②融合，B正确；
C、若图为试管动物的培育过程，受精卵③经胚胎体外培养需要再移植到受体体内才可获得新个体，C错误；
D、若图为植物体细胞杂交过程，先要分解细胞的细胞壁形成原生质体，再进行细胞融合，故成功的标志是杂交细胞④杂种细胞再生出细胞壁，D正确。
故选C。
12．我国科研人员在实验室中通过构建多种酶催化体系的方法，首次实现了在细胞外从二氧化碳固定到合成淀粉的过程。下列有关叙述错误的是（    ）
A．可采用 PCR技术从不同物种的基因组中扩增得到多酶催化体系中的目标酶基因
B．在多酶催化体系中，可能会因为酶的最适反应条件不同而使反应中断
C．该方法可在分子水平上直接改变氨基酸的序列，实现对酶特性的改造和优化
D．若该科研成果成熟后推广应用有助于摆脱耕地和自然环境限制，解决粮食危机
【答案】C
【分析】1、PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，基本步骤是变性、退火（复性）、延伸。
2、蛋白质工程：是指以蛋白质分子的结构规律及与其生理功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
【详解】A、获得的目的基因可利用PCR技术在体外反应体系中扩增，A正确
B、酶的作用条件较温和，不同的酶其适宜的温度和pH不同，在多酶催化体系中，可能会因为酶的最适反应条件不同而使反应中断，B正确；
C、该方法在分子水平上，通过改变基因的碱基序列，间接改变氨基酸的序列，从而改变蛋白质的结构，实现对酶特性的改造和优化，C错误；
D、该科研实现了在细胞外从二氧化碳固定到合成淀粉的过程，若成熟后推广应用有助于摆脱耕地和自然环境限制，解决粮食危机，D正确。
故选C。
13．实验人员将一段外源DNA片段（包含约850个基因）与丝状支原体（一种原核生物）的DNA进行重组后，植入大肠杆菌，制造出一种“新的生命”。该生物能够正常生长、繁殖。下列有关该技术应用的叙述中，错误的是（　　）
A．该技术可以制造某些微生物，用于生产药品、制造染料、降解有毒物质等
B．由于存在生殖隔离，因此人造生命进入自然界并不会破坏生物多样性
C．人造生命扩散到自然界，有可能造成环境安全性问题
D．此项技术可能被用来制造生物武器，从而危及人类安全
【答案】B
【分析】根据题中“将一段外源DNA片段(包含约850个基因)与丝状支原体(一种原核生物)的DNA进行重组后，植入大肠杆菌”，属于基因工程，原理是基因重组。
【详解】A、通过导入不同的目的基因，可用于生产药品、制造染料、降解有毒物质，A正确；
B、“新的生命”是一个新的物种，由于其没有天敌，进入自然界后，会破坏生物的多样性，B错误；
C、人造生命扩散到自然界，竞争能力强，因此能成为“入侵的外来物种”，有可能造成环境安全性问题，C正确；
D、利用基因工程技术，在一些不致病的微生物体内插入制备基因，或在一些致病的细菌或者病毒中插入能对抗普通疫苗或药物的基因，就会培育出新的致病微生物或新的抗药性增强的致病微生物，这些微生物可制成生物武器，D正确。
故选B。
14．关于细胞中化合物鉴定实验，下列叙述正确的（　　）
A．蛋白质鉴定实验中，双缩脲试剂可以使变性的蛋白质呈紫色
B．还原糖鉴定实验中，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液
C．脂肪鉴定实验中，滴加苏丹III染液后立刻用50%酒精洗去浮色
D．细胞呼吸产物鉴定中，可用溴麝香草酚蓝水溶液来鉴定酒精
【答案】A
【分析】生物组织中化合物的鉴定：
（1）斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀）。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖（如淀粉）。
（2）蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应。
（3）脂肪可用苏丹Ⅲ染液鉴定，呈橘黄色。
【详解】A、蛋白质变性失活后，肽链中的肽键依然存在，因此能与双缩脲试剂发生紫色反应，A正确；
B、用斐林试剂鉴定还原性糖时，要将甲液和乙液混合后再使用，B错误；
C、在脂肪的鉴定实验中，需要用50%的酒精洗去浮色，原因是苏丹Ⅲ易溶于酒精，但不是在滴加苏丹III染液后立刻用50%酒精洗去浮色，这样会影响实验效果，C错误；
D、细胞呼吸产物鉴定中，可用溴麝香草酚蓝水溶液来鉴定二氧化碳，D错误。
故选A。

二、多选题
15．酵母菌可应用于多个领域，下列有关叙述正确的是（　　）
A．探究酵母菌细胞呼吸方式时，产生的场所是细胞质基质
B．提取酵母菌DNA时，可用石英砂辅助破碎细胞
C．对酵母菌进行计数时，使用血细胞计数板先加盖玻片再加菌液
D．家庭制作果酒时，一般需要接种酵母菌种
【答案】BC
【分析】1.酵母菌在有氧的条件下可进行有氧呼吸，在无氧的条件下可进行无氧呼吸，属于兼性厌氧型微生物。
2.在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。
【详解】A、酵母菌在有氧的条件下可进行有氧呼吸，在无氧的条件下可进行无氧呼吸，其在有氧条件和无氧条件下均能产生二氧化碳，而有氧条件下产生二氧化碳的场所是线粒体，在无氧条件下产生二氧化碳的场所是细胞质基质，A错误；
B、石英砂有助于研磨充分，因此酵母菌细胞放在石英砂中研磨，有利于提取DNA，B正确；
C、对酵母菌进行计数时，使用血细胞计数板先加盖玻片再加菌液，待酵母菌沉降到计数室底部后再进行计数，C正确；
D、家庭制作果酒时，一般不需要接种酵母菌种，通常使用的是果皮上有附着的野生酵母菌，D错误。
故选BC。
16．幽门螺杆菌（HP）是引发胃炎、胃溃疡的病原体之一，A、B、C、D四种抗生素均可治疗HP引起的胃炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素A、B、C、D的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于HP均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，图1为实验器材，图2为实验结果。下列说法正确的是（　　）

A．为获得长满测试菌的琼脂平板，需要使用图1中工具①③④
B．抗生素的浓度、扩散速度会对抑菌圈直径的大小造成影响
C．据图2推测，抗生素D治疗HP感染的效果优于抗生素A、B、C
D．图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是出现了能抗抗生素B的突变株
【答案】BD
【分析】微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、为获得长满测试菌的琼脂平板，需要采用的接种方法是稀释涂布平板法，该方法需要用到酒精灯、涂布器和平板，即使用图1中的工具①②③，A错误；
B、抗生素的抑菌效果与抗生素的浓度、扩散速度等都有关系，即二者均会对抑菌圈直径的大小造成影响，B正确；
C、据图2推测，抗生素A治疗HP感染的效果优于抗生素B、C、D，因为滤纸片a周围形成的抑菌圈最大，C错误；
D、图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是由于基因突变，出现了能抗抗生素B的突变株，D正确。
故选BD。
17．长江十年禁渔令颁布后，人们把目光投向了人工养殖。下图是一个生态环境改善型鱼塘物质循环流程图。下列有关分析错误的是（　　）

A．螺狮位于食物链的第三、四营养级，可以促进该生态系统的物质循环
B．增加沉水植物的种类有利于促进其对鱼、虾、蟹粪便中有机物的吸收
C．不同年龄段的某种草食性鱼分布在不同水层，说明群落具有垂直结构
D．对种养废弃物的饲料化、肥料化和能源化利用实现了能量的多途径利用
【答案】ABC
【分析】由流程图分析可知，沉水植物属于生产者，花津蟹、青虾和食草鱼类属于初级消费者，花津蟹还属于次级消费者，而螺狮属于分解者。
【详解】A、螺蛳在这个生态系统中可以分解青虾、鱼类等产生的有机废弃物，属于分解者，分解者不参与构成食物链，A错误；
B、植物无法直接吸收鱼、虾、蟹粪便中有机物，植物需要无机营养，B错误；
C、垂直结构属于群落中不同物种在垂直方向上的的空间分布，不同年龄段的同种鱼分布在不同水层属于种群的分布特征，C错误；
D、对种养废弃物的饲料化、肥料化和能源化利用实现了能量的多途径利用，从而提高了能量的利用率，D正确。
故选ABC。
18．下图是小鼠肝细胞培养过程示意图，下列叙述正确的是（　　）

A．甲过程需要用胰蛋白酶处理，将组织分散成单个细胞并制成细胞悬液
B．在培养瓶中细胞会出现细胞贴壁，还会发生接触抑制现象
C．放在培养箱中培养，的作用是刺激细胞呼吸
D．丙过程是传代培养，该过程体现了动物细胞的全能性
【答案】AB
【分析】1.动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
题图分析，图中甲表示剪碎肝脏组织块并制成细胞悬液，乙表示原代培养，丙表示传代培养。
【详解】A、甲过程表示将剪碎的肝脏组织块用胰蛋白酶处理并制成细胞悬液的过程，A正确；
B、动物细胞培养过程中会出现贴壁生长和接触抑制的现象，由于培养的是正常的细胞，因而在图中的培养瓶中细胞会出现贴壁生长，还会发生接触抑制现象，B正确；
C、放在 CO2 培养箱中培养， CO2 起到维持培养液pH的作用，C错误；
D、丙过程是传代培养，该过程体现了动物细胞的增殖过程，没有体现细胞的全能性，D错误。
故选AB。
19．下列有关PCR的叙述，错误的是（　　）
A．PCR的原理是DNA复制，解旋和复制是同时进行的
B．PCR的过程主要包括变性→延伸→复性，温度逐渐降低
C．PCR技术扩增时，一个DNA分子经过n轮复制共需引物2n-1对
D．每一循环都消耗引物和原料，需要在操作中及时补充
【答案】ABD
【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，该技术的原理是DNA复制，实现的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，其他的条件有模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
PCR过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】A、由分析可知，PCR的原理是DNA复制，该过程中解旋和复制不是同时进行的，A错误；
B、PCR的过程主要包括高温变性→低温复性→中温延伸，可见该过程中不是温度逐渐降低，B错误；
C、PCR技术扩增时，一个DNA分子经过n轮复制产生的子代DNA数目 为2n个，其中的单链数目为2（n+1）个，每个子链的延伸都需要引物，即除了两条最初的模板链中没有引物，因此该过程中共需引物2n-1对，C正确；
D、PCR过程中的引物和原料是一次性添加的，不需要补充，D错误。
故选ABD。

三、综合题
20．沙家浜湿地公园位于苏州阳澄湖畔，拥有河流、池塘、浅滩及沼泽等多种湿地类型。
(1)湿地生态系统由湿生、中生和水生植物、动物及微生物等生物因子以及与其紧密相关的______，通过物质循环和能量流动共同构成。其中______成分是生态系统的基石。
(2)在沙家湿地公园湿地植被配置时，总体上遵循湿生植物--沼生植物--挺水植物--浮水植物--沉水植物（由岸到水、由高到低）的规律进行（图1），这体现了湿地植物群落在空间上具有富于特色的______结构。在公园丰富的植物资源中，菖蒲、黄花鸢尾、香蒲等乡土植物品类被有针对性地增加，这有利于______，符合生态工程的______原理。

(3)沙家浜湿地公园坚持以“生态优先、科学修复、适度开放，合理利用”为原则，划定湿地保护保育区、水绿植被恢复区、拓展休闲游览区、宣教展示区、革命文化传承区等，分别实现以下功能，其中______（填序号）体现了湿地生物多样性的直接价值，______（填序号）体现了其间接价值。
①为各种动植物提供良好生存空间，成为鸟类的天堂；
②防洪排涝、调蓄雨洪并补充地下水；
③形成生态海绵，改善区域水体、水质及水生态环境；
④具有开阔水域景观和安全设施，满足游人近水心理；
⑤进行湿地生态展示、科普教育；
⑥兼具民俗文化和革命文化意义，带给游人回忆与品味；
(4)水体透明度是衡量水环境质量和水生态系统健康的重要指标，研究水体的透明度变化规律及其成因，有助于更好地制定水体生态系统恢复和管理策略。
①研究人员对沙家浜湿地公园水质指标进行了持续一年的监测，过程如下：
实验设计
操作方法
采样点布设
根据湿地中水体的面积，进水口和出水口以及水系交叉、人类活动干扰程度等情况设置7个采样点
采样时间
在每月的一个______（填“晴天”或“雨天”）采集水样
样品采集
每个采样日，在每个采样点，利用容积为2L的有机玻璃采水器，在水面下0.5m和1m处，分别采集水样后充分混合，并进行______取样，将水样______并冷藏，运回实验室。
测定方法
在采样现场，利用塞克盘，测量水体透明度；利用便携式溶解氧测量仪（YSI-550A），测量水体表层的水温。在实验室中，测定水样中的悬浮颗粒物、有机悬浮物、无机悬浮物、总有机碳、可溶性有机碳、叶绿素a、总氮和总磷含量。风速数据来源于周边气象站。

②研究人员采用结构方程模型方法研究水体透明度内部变化过程及其影响因素，先构建如图2初始模型。

③对模型进行违规估计检验、拟合优劣指标标检验和模型修订指标检验，筛选出有显著作用的因子和路径：然后，用卡方自由度比和近似均方根误差，评价观测数据对构想模型的支持情况。
④模型修正，得到样本的最适模型如图3，图中路径线系数的绝对值表示作用的相对大小、正负表示作用方向。
⑤结果分析显示，湿地中水体的透明度的主要直接影响因子为______；叶绿素a含量增加，对水体透明度的影响是______（填“提高”或“降低”）。
【答案】(1)     无机环境     生产者
(2)     空间     生态系统的稳定     协调
(3)     ①④⑤⑥     ②③
(4)     晴天     随机     过滤
     风速     提高

【分析】1.生态系统的结构包括生态系统的组成成分和营养结构，组成成分包括非生物的物质和能量、生产者、消费者和分解者，营养结构就是指食物链和食物网。
2.生态系统的功能包括能量流动、物质循环和信息传递，三者缺一不可；物质循环是生态系统的基础，能量流动是生态系统的动力，信息传递则决定着能量流动和物质循环的方向和状态；信息传递是双向的，能量流动是单向的，物质循环具有全球性。
（1）
湿地生态系统由湿生、中生和水生植物、动物及微生物等生物因子以及与其紧密相关的无机环境之间通过物质循环和能量流动共同构成的有机统一体。其中生产者是生态系统的基石，是生态系统的主要成分。
（2）
在沙家湿地公园湿地植被配置时，总体上遵循湿生植物--沼生植物--挺水植物--浮水植物--沉水植物（由岸到水、由高到低）的规律进行（图1），这体现了湿地植物群落在空间上具有富于特色的空间结构，从而能充分利用生态系统中的空间和资源。在公园丰富的植物资源中，菖蒲、黄花鸢尾、香蒲等乡土植物品类被有针对性地增加，由于当地物种适应性较强，进而有利于生态系统的稳定，符合生态工程的协调原理。
（3）
①为各种动植物提供良好生存空间，成为鸟类的天堂，体现了湿地生物多样性的直接价值；
②防洪排涝、调蓄雨洪并补充地下水，体现了湿地生物多样性的间接价值；
③形成生态海绵，改善区域水体、水质及水生态环境，体现了湿地生物多样性的间接价值；
④具有开阔水域景观和安全设施，满足游人近水心理，体现了湿地生物多样性的直接价值；
⑤进行湿地生态展示、科普教育，体现了湿地生物多样性的直接价值；
⑥兼具民俗文化和革命文化意义，带给游人回忆与品味，体现了湿地生物多样性的直接价值，即①④⑤⑥体现了生物多样性的直接价值，②③体现了生物多样性的间接价值。
（4）
①由于检测的是水体透明度，同时为了避免其他水源的干扰，采样时间应在每月的一个晴天采集水样，在每个采样点，利用容积为2L的有机玻璃采水器，在水面下0.5m和1m处，分别采集水样后充分混合，并进行随机取样，将水样过滤并冷藏，运回实验室，而后进行测定。
⑤根据图意可知，风速是湿地中水体的透明度的主要直接影响因子；根据图示可知，叶绿素a含量增加，会使水体中总有机碳量下降，总有机碳量增加会使水体透明度下降，因此，叶绿素a含量增加，会使水体中总有机碳量下降，进而会提高水体透明度。
21．生物修复技术已变成对生态环境进行保护过程中的一类最有价值的修复手段，下图为从某植物根际土壤中筛选出高效石油降解菌的部分流程示意图，请据图回答：

(1)用于培养石油降解菌的培养基在接种前需要通过______法进行灭菌。步骤I为低温石油降解菌的富集培养。称取1g土壤样品加入预先装有100mL以______为唯一碳源的培养基的三角瓶中，在15°C、160r/min的恒温振荡摇床中培养6d．在相同的培养条件下连续培养四个周期。摇床培养的目的是______。
(2)在操作II、III中，采用的接种方法分别是______、______。
(3)研究人员通常根据菌落的______特征来初步区分不同种的微生物，统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到______时。
(4)目前，已知有200多种微生物能降解石油，但多数微生物的降解速率都很低，现在分离筛选得到三株降解石油能力较强的菌株，请提出鉴定不同菌株降解石油能力大小的方法______。
(5)石油主要含有烷烃、环烷烃和芳香烃，科研人员已经筛选出分别降解三种烃类的细菌B、C、D（每种菌只含有一种相应的烃类降解酶）探究菌A高效降解石油的原因，凝胶电泳技术分离相关蛋白，结果如图：

①检测微管蛋白的目的是______。
②依据实验结果分析菌A降解石油的能力强于菌B、C、D原因是______。
【答案】(1)     高压蒸汽     石油     使细菌与培养液成分充分接触、增加培养液中的溶氧量
(2)     稀释涂布平板法；     平板划线法
(3)     形状、大小、隆起程度和颜色等；     各类菌落数目稳定
(4)在相同石油浓度相同体积的培养液中接种相同数量的不同菌株，一定时间后测定培养液中石油含量。
(5)     作为标准物质，以校准和消除由于细胞培养操作、细胞取样量和相关的检测方法等无关变量对实验结果的影响；     菌A中有两种降解烃类的酶，而细菌B、C、D中各只有一种，因此菌A降解石油的能力强。

【分析】1、实验室常用的灭菌方法：（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。（2）干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。（3）高压蒸汽灭菌：一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。
2、微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种、划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
（1）
培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。步骤I为低温石油降解菌的富集培养，实验目的是获取降解石油的微生物，所以称取1g土壤加入到100mL灭过菌的以石油为唯一碳源的培养基中培养。摇床培养的目的是使细菌与培养液成分充分接触、增加培养液中的溶氧量。
（2）
操作Ⅱ过程可以看到菌落在培养基中均匀分布，接种方法是稀释涂布平板法；操作Ⅲ为挑菌落进一步纯化，需要用接种环进一步稀释菌体，所以是平板划线法。
（3）
区分不同的微生物要根据菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面；统计菌落种类和数量时，要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，可以防止培养时间不足导致遗漏菌落的种类和数目
（4）
比较不同菌株降解石油能力大小的方法，是在相同石油浓度相同体积的培养液中接种相同数量的不同菌株，一定时间后测定培养液中石油含量。
（5）
由于细胞中微管蛋白的表达量相对稳定且丰富，在实验中可作为标准物质，以校准和消除由于细胞培养操作、细胞取样量和相关的检测方法等无关变量对实验结果的影响；依据实验结果可知菌A中有酶B和酶D两种，而细菌B、C、D各有一种降解烃类的酶，因此菌A降解石油的能力强。
22．如图为研发治疗乳腺癌的某种单克降抗体的实验流程。请分析回答：

(1)对A组鼠注射______，是为了可以分离获取细胞1______。
(2)过程①经______诱导融合，需用______培养基进行筛选获得细胞2______。
(3)细胞2还需要经过______和______，方可筛选出______的杂交癌细胞（细胞3）。
(4)物质甲可以通过对小鼠B腹腔注射来大量获得，也可以通过______获得。
(5)C组鼠为已注射乳腺癌肿块的实验模型鼠，用于检测物质甲的治疗效果。需将C组鼠随机分成两组，一组的处理如图，另一组的处理为______，才能检测疗效。
【答案】(1)     特定(乳腺癌细胞)的抗原蛋白     经过免疫的B淋巴细胞
(2)     PEG或灭活病毒      特定的选择(HAT)      杂交瘤细胞
(3)     克隆化培养      抗体检测      分泌所需抗体　
(4)动物细胞体外培养
(5)注射2 mL(等量)溶解物质甲的溶剂

【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
（1）
分析题意，本过程的目的是制备治疗乳腺癌的某种单克降抗体，根据抗原抗体特异性结合的原理可知，A组鼠应特定(乳腺癌细胞)的抗原蛋白，然后可以获得相应的经过免疫的B淋巴细胞。
（2）
由题图信息分析可知，过程①是细胞融合，该过程可用PEG或灭活病毒诱导处理；用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）
杂交瘤细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得具备既能分泌所需抗体，又能无限增殖特点的细胞。
（4）
物质甲可以通过对小鼠B腹腔注射（体内培养）来大量获得，也可以通过动物细胞体外培养，在培养液中获得。
（5）
若C组鼠为已注射乳腺癌肿块的实验模型鼠，用于检测物质甲的治疗效果。为了保证实验结果的可靠性，C组鼠应该切除胸腺，进行检测疗效的实验时，需将C组鼠随机分成两组，一组处理如图，另一组处理为注射2mL生理盐水。
23．根据新冠病毒致病机制及人体免疫反应特征研制新冠疫苗，广泛接种疫苗可以快速建立免疫屏障，阻击病毒扩大。图1为新冠病毒入侵细胞后的增殖示意图，图2是“新冠基因工程疫苗”的生产过程，质粒中lacZ基因表达的酶可以将无色化合物X—gal水解成蓝色产物。

(1)图1中新冠病毒先与人体细胞表面的ACE2受体结合，这体现细胞膜具有______的功能，再通过______方式进入细胞，在______（填细胞器）帮助病毒溶解囊膜和结构蛋白，释放出病毒的（+）RNA，在宿主细胞中经______合成病毒的RNA聚合酶。
(2)在RNA聚合酶的作用下，病毒利用宿主细胞中的原料，大量合成新的（+）RNA．再以这些RNA为模板，分别在______ 上大量合成病毒的N蛋白和S、M、E蛋白。
(3)用基因工程制备S蛋白疫苗的主要技术路线如下表所示，根据图2请完善下表：
实验目的
方法步骤要点
获取S蛋白基因的序列
通过PCR技术扩增S蛋白基因。
重组载体的构建
选择限制酶、______处理目的基因与质粒，为了使重组质粒中目的基因正常表达，还需要插入的序列有②______。
转化酵母细胞
将成功构建的载体通过______法导入到大肠杆菌细胞中，若需筛选出重组质粒，配制的固体培养基的成分中，除营养物质和琼的成分中，除营养物质和琼脂外还需含有______，经转化、扩增、涂布，含重组质粒的是______（“白色”或“蓝色”）菌落。
扩大培养
挑选所需菌落，放入液体培养基中获得大量目的菌


【答案】(1)     信息交流     胞吞     溶酶体     翻译
(2)核糖体
(3)     BamHⅠ     大肠杆菌基因的启动子序列     感受态细胞法     X—gal     白色

【分析】1.细胞膜的功能：①将细胞与外界环境分开；②控制物质进出细胞；③进行细胞间的物质交流。

2.病毒是非细胞生物，只能寄生在活细胞中进行生命活动。病毒依据宿主细胞的种类可分为植物病毒、动物病毒和噬菌体；根据遗传物质来分，分为DNA病毒和RNA病毒；病毒由核酸和蛋白质组成。
题图分析，新冠病毒通过S蛋白与细胞表面的ACE2受体结合，侵入细胞释放出病毒的（+）RNA，在宿主细胞中经翻译合成病毒的RNA聚合酶，参与宿主细胞内合成病毒的RNA。
（1）
图1中新冠病毒先与人体细胞表面的ACE2受体结合，这是细胞膜具有信息交流的功能，而后病毒通过胞吞方式进入细胞，在宿主细胞的溶酶体的帮助下溶解病毒的囊膜和结构蛋白，释放出病毒的（+）RNA，在宿主细胞中经翻译过程合成病毒的RNA聚合酶，此后进行病毒RNA的复制过程，进而合成病毒的遗传物质。
（2）
在RNA聚合酶的作用下，病毒利用宿主细胞中的原料，按照碱基互补配对原则合成（-）RNA；随后再通过复制合成大量新的（+）RNA，再以这些RNA为模板，分别在宿主细胞的核糖体上大量合成病毒的N蛋白和S、M、E蛋白。
（3）
用基因工程制备S蛋白疫苗的主要技术路线为获取S蛋白基因的序列，而后用PCR技术扩增S蛋白基因，此为获得目的基因的过程；第二步为重组载体的构建，限制酶BamHⅠ能切下目的基因，而其他两种限制酶会破坏目的基因或不能切下目的基因，因此选择限制酶BamHⅠ处理目的基因与质粒从而可获得相同的黏性末端，而后用DNA连接酶将质粒和目的基因连接起来获得重组载体，为了使重组质粒中目的基因正常表达，还需要插入的序列为大肠杆菌基因的启动子序列，保证导入的目的基因在大肠杆菌体内正常表达。
将成功构建的载体通过感受态细胞法导入到大肠杆菌细胞中，该方法通常需要CaCl2处理大肠杆菌使其成为感受态，从而提高转化的效率，若需筛选出重组质粒，配制的固体培养基的成分中，除营养物质和琼脂外，还需要加入无色化合物X—gal作为指示物，由于重组载体中的lacZ基因基因被破坏，因而无法表达出相应的酶类将无色的X—gal物质转化成蓝色的物质，因此，成功转化的大肠杆菌菌落应该表现为白色菌落。
24．拟南芥是植物遗传学研究上重要的模式生物。在研究与维管发育相关的基因时，研究人员筛选到一花发育明显变异的拟南芥突变体ET139。为了探明该表型变异是否由Ds转座突变（Ds为插入基因组的一段特定序列）所造成，需要对Ds插入的DNA序列进行分析。交错式热不对称PCR（TAlL—PCR）技术，可用于分离与已知序列邻近的未知DNA序列。研究人员利用该方法对拟南芥突变体ET139进行分析，方法步骤如下：
(1)获取模板：提取叶片的______，作为扩增未知侧翼序列的模板。
(2)引物设计：TAIL—PCR使用一套嵌套的序列特异引物（SP）和随机简并引物（AD）组合，进行“半特异性PCR反应”。本实验中，特异性引物根据______序列设计，在其______端设计多个嵌套的引物SP；而随机简并引物AD是较短的混合序列组合。
(3)PCR反应体系和反应条件：
反应
反应体系
步骤
循环设置
循环数
第1轮
水、缓冲液SP1、AD、______、______模板
1
2
3
4
94℃1min
94℃30s，62℃1min，72℃1min30s
94℃30s，25℃3min，0.3℃/s→72℃，72℃
2min30s，
94℃30s，68℃C1min，72℃2min30s，
94℃10s，68 ℃1min，72℃2min30s，
94℃30s，44℃1min，72℃2min30s
72℃5min，4℃保持
1
5
15
第2轮
第1轮产物为模板，sP2、AD、其余同上
1
2
94 ℃ 30s，64 ℃ lmin， 72℃ 2min30s，
94 ℃ 30s，64 ℃ 1min， 72 ℃ 2min30s
94℃30s，44℃1min，72℃2min30s
72℃5min，4℃保持
12
第3轮
第2轮产物为模板，sP3、AD、其余同上
1
2
94 C℃ 1 min，44 ℃ 1 min，72 ℃ 2 min 30 s
4℃保持
20

(4)产物的回收与测序：TAIL—PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测，对特异条带回收并测序。将测序结果序列经过数据库与拟南芥______（填“基因组”或“cDNA”）进行比对。
(5)结果和分析：TAIL—PCR是利用引物特异性和长短的差异，设计不对称的温度循环，通过分级反应来扩增特异引物，消除非目标产物。特异性引物SP退火温度比随机引物AD退火温度______（填“高”或“低”），退火在不同温度下进行，则二个引物或者其中一个______能够很好地起作用。TAIL—PCR理想的电泳结果应该是第3轮产物大于300bp且比第2轮产物略______（填“大”或“小”）：产物中可能会出现多条带，但一般仅有一条最亮。
本实验在阳性克隆测序后获得了大小不同的侧翼序列，其结果一致，检测出的侧翼序列为Atlg52910基因序列，正常表型的突变体与异常表型的突变体均插入同样的位点，并且没有发现其它插入位点。

(6)讨论：由以上TAIL—PCR对突变体ET139检测结果推测，突变纯合体出现花器官的变异表型，是否由Ds的插入而产生？______，原因是______。
【答案】(1)基因组DNA
(2)     Ds     5’和3’
(3)     dNTP     Taq酶
(4)基因组
(5)     高     SP     小
(6)     不是     因为正常表型的突变体与异常表型的突变体均有Ds插入同样的位点，且没有发现其它插入位点

【分析】PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；PCR的操作过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
（1）
若要分析DNA序列，需要制作模板探针，因此需提取叶片的基因组DNA，作为扩增未知侧翼序列的模板。
（2）
本实验需要检测是否含有Ds序列，因此特异性引物根据Ds序列设计，在其5’和3’端设计多个嵌套的引物SP，以便扩增该序列。
（3）
根据分析可知，PCR反应体系需要添加水、缓冲液SP1、AD（引物）、dNTP（原料）、Taq酶、模板。
（4）
cDNA属于部分基因文库，不一定含有所需序列的DNA，因此需将测序结果序列经过数据库与拟南芥基因组进行比对。
（5）
TAIL—PCR是利用引物特异性和长短的差异，设计不对称的温度循环，通过分级反应来扩增特异引物，消除非目标产物。退火温度与引物的长短以及引物中G和C碱基的数量有关，引物长短越短，需要的退火温度越低，因此，特异性引物SP退火温度比随机引物AD退火温度高，退火在不同温度下进行，则可保证二个引物或者其中一个SP能够很好地起作用。TAIL—PCR理想的电泳结果应该是第3轮产物大于300bp且比第2轮产物略“小”，这是因为只有在第三轮复制中才能出现引物之间的序列，因此产物较小：产物中可能会出现多条带，但一般仅有一条最亮。
（6）
题中显示正常表型的突变体与异常表型的突变体均有Ds插入同样的位点，且没有发现其它插入位点，据此可推测突变纯合体出现花器官的变异表型不是由Ds的插入引起的。