衡水中学 高中生物考点强记④

模块4  生物技术实践

91、微生物的分离和培养

（1）简述微生物的概念，列举微生物的类群

（2）列举微生物的同化作用类型（自养型或异养型）

（3）列举微生物的异化作用类型（需氧型或厌氧型）

（4）简述培养基的概念

（5）对培养基进行分类归纳

（6）分析培养基的成分及其作用（含琼脂及其作用）

（7）简述牛肉膏蛋白胨固体培养基制备的基本步骤

（8）简述倒平板操作

（9）简述检验培养基制作是否合格的方法

（10）简述培养基丢弃前的处理方法

（11）比较消毒和灭菌的含义

（12）列举实验室常用的灭菌方法

（13）列举实验室常用的消毒方法

（14）简述平板划线法的操作和用途

（15）简述稀释涂布平板法的操作和用途

（16）简述微生物的接种技术

（17）学会对纯化大肠杆菌结果的分析与评价

（18）简述微生物临时保藏的方法与甘油管藏法

（19）简述筛选微生物的原理

（20）举例说明选择培养基

92、某种微生物数量的测定

（1）比较微生物的计数方法（稀释涂布平板法、显微镜直接计数法、滤膜法）

（2）学会统计菌落数目的方法

93、培养基对微生物的选择作用

（1）简述脲酶及其作用

（2）简述从土壤中分离出分解尿素的细菌的方法

（3）简述尿素分解菌的鉴别方法

（4）简述分解纤维素的细菌分解纤维素的原理

（5）简述选择培养的作用

（6）简述纤维素分解菌的选择培养基配方

（7）简述鉴别纤维素分解菌的培养基配方

（8）简述刚果红染色的方法

（9）简述根据透明圈筛选目的菌株的方法

94、利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用

95、运用发酵加工食品的基本方法

（1）简述果酒制作的原理（含酵母菌的结构、代谢情况）

（2）简述果醋制作的原理（含醋酸杆菌的结构、代谢情况）

（3）分析果酒和果醋的发酵装置示意图

（4）比较影响果酒和果醋发酵的环境因素的差异

（5）分析果酒和果醋制作的效果（包括放出气体、放热、颜色变化、酒精的检测等）

（6）制作腐乳的微生物（毛霉的结构、代谢情况）

（7）简述蛋白酶和脂肪酶的作用

（8）说明腐乳制作的实验流程及各步骤的原理，包括豆腐的选择、盐的作用及用量、酒的含量及作用、

香辛料的作用、温度及发酵时间的控制等

（9）简述乳酸菌及其发酵的原理

（10）分析不同阶段乳酸菌、乳酸及亚硝酸盐含量的变化

（11）简述制作泡菜的操作流程及各步骤的原理

（12）分析泡菜坛内的白膜产生的原因

96、测定食品加工中可能产生的有害物质

简述亚硝酸盐含量的测定原理

97、从生物材料中提取某些特定的成分

（1）列举植物芳香油的提取方法

（2）简述玫瑰精油的性质与提取方法的选择

（3）简述水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油的原理

（4）分析提取玫瑰精油的装置示意图 

（5）绘制提取玫瑰精油的实验流程图，理解 NaCl 和无水 Na2SO4的作用

（6）分析影响玫瑰精油品质的因素

（7）简述提取橘皮精油方法选择及其原因

（8）简述橘皮的处理方法

（9）简述橘皮的压榨方法

（10）简述压榨液的处理方法

（11）写出出油率的计算公式

（12）简述胡萝卜素的性质及用途

（13）简述胡萝卜素的方法选择及其原因

（14）简述萃取剂的选择

（15）绘制提取胡萝卜素的实验流程图

（16）分析提取胡萝卜素的装置

（17）简述对胡萝卜素粗品的鉴定（纸层析法）

98、蛋白质的提取和分离

（1）简述凝胶色谱法分离蛋白质的原理

（2）简述缓冲液的作用

（3）简述电泳的原理和常用的方法

（4）简述红细胞洗涤的目的和方法

（5）简述释放血红蛋白的方法

（6）简述血红蛋白粗分离的方法(离心、透析)

（7）简述蛋白质纯化的流程

（8）简述纯度鉴定的方法

99、酶活力测定的一般原理和方法

(1)简述酶活性的概念及测定指标

（2）列举影响酶活性的因素

100、酶在食品制造和洗涤方面的应用

（1）简述果胶酶的作用

（2）设计实验探究温度和 pH对果胶酶活性的影响

（3）设计实验探究果胶酶的最适用量

（4）简述加酶洗衣粉中酶制剂的种类和作用原理

（5）简述影响加酶洗衣粉中酶活性的因素

（6）设计实验比较普通洗衣粉和加酶洗衣粉的洗涤效果

（7）设计实验探究加酶洗衣粉的最适温度

（8）设计实验比较不同种类加酶洗衣粉的洗涤效果

101、 制备和应用固定化酶

(1)高果糖浆的生产原理，了解固定化酶的应用实例

(2)列举固定化酶和固定化细胞技术方法

(3)概述制备固定化酵母细胞的操作步步骤

考点38  微生物的利用

1.培养基有液体培养基、固体培养基（含凝固剂）和半固体培养基三种类型。

2.培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分。在配制培养基时，除满足营养需求外，还应考虑pH、氧气及特殊营养物质的需求。

3.无菌技术包括消毒和灭菌。消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括牙孢和孢子），常用的方法有：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法。灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括牙孢和孢子。常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。

4.制备固体培养基的流程是：计算→称量→溶化→调pH→灭菌（成败最关键的一步）→倒平板。倒置平板的目的是防止培养皿盖上的水珠落入培养基，避免培养基中的水分过快地挥发。

5.纯化微生物的方法有：平板划线法和稀释涂布平板法。都是为了将菌液充分地稀释形成单菌落。灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。划线时最后一区不要与第一区相连。划线时用力大小要适当，这是为了防止用力过大将培养基划破。

6.测定微生物的数量常用稀释涂布平板法（活菌）和显微镜直接计数法。微生物的计数要求制作多个平板,且每个平板上能长出 30～300 个菌落的方可作为计数依据。用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低 ，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，培养后平板上观察到的只是一个菌落。

7.尿素分解菌和纤维素分解菌的分离都运用了选择培养基,前者所用的培养基中尿素是唯一的氮源,后者所用的培养基中纤维素是唯一的碳源。

8.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则可以初步鉴定该种细菌能够分解尿素。                   

9.纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。前两种酶将纤维素分解为纤维二糖，第三种酶再分解为葡萄糖。可以用刚果红染色法鉴别纤维素分解菌。

考点39  生物技术在食品加工及其他方面的应用

1.果酒制作需要的微生物是酵母菌,它是一种兼性厌氧型微生物,通过有氧呼吸可以大量增殖,通过无氧呼吸可以产生酒精。在果酒自然发酵中，起主要作用的是葡萄皮上的野生型酵母菌，不需人工添加酵母菌种。

2.在葡萄酒制作中，选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄冲洗，并除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。冲洗以洗去灰尘为目的，且不要太干净，以防洗去野生型酵母菌。

3.果酒制作时，排气是排出发酵产生的CO2。

4.在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，其他微生物无法适应。 

5.随着酒精度的提高，红葡萄皮的色素进入发酵液，使葡萄酒呈现深红色。              

6.变酸的酒的表面的菌膜是醋酸菌大量繁殖形成的。

7.果醋制作需要的微生物是醋酸菌,它是一种好氧菌,所以果醋制作需要一直通入氧气。醋酸菌在氧气和糖源都很充足时，可将糖分解为醋酸；在氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为乙酸。

8.果酒和果醋制作需要的温度分别是18～25 ℃和30～35 ℃。

9.腐乳的制作需要多种微生物参与,但主要是毛霉的作用。原理是利用蛋白酶将蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

10.加酒既能抑制微生物的生长，又能使腐乳有独特的风味，含量宜控制在12%左右。香辛料能调味，也能防腐杀菌。盐有析出豆腐中的水分，抑制微生物生长，调味的作用。

11.泡菜制作利用乳酸菌在无氧的条件下将葡萄糖分解成乳酸。在泡菜的发酵过程中,亚硝酸盐的含量先增加后减少。

12.在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与Ｎ－1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

13. 植物芳香油具有很强的挥发性，主要包括萜类化合物及其衍生物。植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等，玫瑰精油的提取一般用水蒸气蒸馏法。由于水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分的水解，因此，橘皮精油的提取一般用压榨法。操作流程是石灰水浸泡→漂洗→压榨→ 过滤→静置→再次过滤→橘皮油。

14.胡萝卜素不溶于水,易溶于石油醚等有机溶剂,可用萃取法提取。萃取胡萝卜的有机溶剂，应该具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶，故石油醚较适合作为萃取剂。提取胡萝卜素的流程:胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素

15.萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取温度、时间等的影响，一般来说原料颗粒小、萃取温度高、时间长、需要提取的物质就能够充分溶解、萃取效果就好。

16.对提取的胡萝卜素可通过纸层析法鉴定。

17.根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来分离不同种类的蛋白质。常用的方法有凝胶色谱法和电泳。

18.凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质，行程长，移动速度慢，后洗脱出来；相对分子质量较大的蛋白质，行程短，移动速度快，先洗脱出来。

19.电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现各种分子的分离。

考点40   酶的应用

1.果胶酶作用：分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，提高水果的出汁率，并使果汁变得澄清。

2.果胶酶并不特指某一种酶，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。

3.酶的活性可用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。

4.加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶 、脂肪酶 、淀粉酶 、纤维素酶。其中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

5.加酶洗衣粉的作用原理：碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹容易从衣物上脱落。同样道理，脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质。

6.固定化技术包括：包埋法、化学结合法和物理吸附法。一般来说，酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化，而细胞多采用包埋法固定化。因为细胞个大，而酶分子很小；个大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。

7.固定化酵母细胞时，酵母细胞的活化用蒸馏水；配制海藻酸钠溶液时，加热要用小火，或者间断加热；要将海藻酸钠溶液冷却至室温，再加入活化的酵母细胞。CaCl2溶液能使海藻酸钠聚沉形成凝胶珠。

8.海藻酸钠的浓度涉及固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。