2025版高考生物一轮总复习教案选择性必修3第十单元生物技术与工程第七讲基因工程的基本操作程序和应用及蛋白质工程考点二DNA片段的扩增及电泳鉴定

这是一份2025版高考生物一轮总复习教案选择性必修3第十单元生物技术与工程第七讲基因工程的基本操作程序和应用及蛋白质工程考点二DNA片段的扩增及电泳鉴定，共4页。

知|识|巩|固
1．实验基础

2．PCR实验操作步骤

3．DNA的电泳鉴定
延|伸|探|究
1．DNA的电泳鉴定实验中，影响DNA分子迁移速率的因素有哪些？
提示：凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等。
2．若操作者进行电泳鉴定的结果不止一条条带，请分析产生这个结果的可能原因。
提示：不止一条条带的原因：操作过程中混入限制酶将DNA片段切割成片段或含有其他DNA片段，以此为模板，进行了扩增。
剖析难点·考点突破
精|准|命|题
考向 围绕DNA片段的扩增及电泳鉴定，考查科学探究能力
》例 某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带(引物与模板完全配对)外，还有2条非特异条带(引物和模板不完全配对)。为了减少反应非特异条带的产生，以下措施中有效的是( D )
A．增加模板DNA的量
B．延长热变性的时间
C．延长延伸的时间
D．提高复性的温度
解析：增加模板DNA的量可以提高反应速度，但不能有效减少反应非特异性条带，A错误；延长热变性的时间和延长延伸的时间会影响变性、延伸过程，但对于延伸中的配对影响不大，故不能有效减少反应非特异性条带，B、C错误；非特异性产物增加的原因可能是复性温度过低会造成引物与模板的结合位点增加，故可通过提高复性的温度来减少反应非特异性条带的产生，D正确。
〔变式训练1〕 用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱，其中1号为DNA标准样液(Marker)，2～10号为PCR产物；其中2号的模板为野生型植株DNA,3～9号的模板为转基因植株的DNA,10号使用蒸馏水代替模板DNA。PCR时加入的模板DNA如下图所示。据此作出的分析，不合理的是( B )
A．PCR产物的分子大小在250至500 bp之间
B．3号样品植株导入的目的基因一定能成功表达
C．9号样品对应植株不是所需的转基因植株
D．10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰
解析：PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段。3～9号是转基因植株，理论上应包含目的基因，结合2号野生型植株和10号蒸馏水组的结果，推测包含目的基因的片段大小应为250～500 bp，A合理；3号PCR结果包含250～500 bp片段，包含目的基因，但导入的目的基因不一定能成功表达，B不合理；9号PCR结果不包含250～500 bp片段，所以不是所需转基因植株，C合理；10号使用蒸馏水代替模板DNA，可排除反应体系等对实验结果的干扰，D合理。
〔变式训练2〕 (2024·江苏扬州高三模拟)20世纪70年代，Fred sanger发明了双脱氧终止法对DNA进行测序。其原理如图，在4个试管中分别加入4种脱氧核苷三磷酸(dNTP)和1种双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)；ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸。在4个试管中DNA链将会分别在A、C、G及T位置中止，并形成不同长度的DNA片段。这些片段随后可被电泳分开并显示出来。下列说法中正确的是( B )
A．这种测序方法需要引物和耐高温的DNA连接酶
B．电泳图谱中的箭头所指的DNA片段以鸟嘌呤结尾
C．测得未知DNA的序列为5′－GATTCGAGCTGA－3′
D．ddNTP与dNTP竞争的延长位点是核苷酸链的5′末端
解析：PCR测序需要引物和耐高温的DNA聚合酶，A错误；电泳图谱中的箭头所指的DNA片段以鸟嘌呤结尾，B正确；由图可知，测得未知DNA的序列为5′－TCAGCTCGAATC－3′，C错误；ddNTP与dNTP竞争的延长位点是核苷酸链的3′末端，D错误。