吉林省四平市第一高级中学2023-2024学年高二下学期第一次月考生物试题

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本试卷满分100分，共8页。考试时间为75分钟。考试结束后，只交答题卡。
一.单项选择题（每小题1.5分，共20题，共30分）
1．我们的祖先通过自然发酵等方法生产各种发酵产品，丰富了中华民族特有的饮食文化。下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（ ）
A．酿制葡萄酒时对葡萄的处理是先清洗葡萄再去除枝梗
B．变酸的酒表面有白膜出现，是醋酸菌有丝分裂形成的
C．腐乳制作过程利用的是毛霉产生的淀粉酶和脂肪酶
D．制作果醋、泡菜、果酒的过程中发酵液pH不变
2．下列对四种微生物相关的叙述，错误的是（ ）
A．CO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自NH3的氧化
B．CO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需的能源来自太阳能
C．糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解
D．葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但CO2一定不是酵母菌的碳源
3．以鲜山楂为主要原料酿制的山楂酒，将山楂的营养成分充分释放，更易被人体吸收，具有防治疾病的功效和较高的保健价值。如图所示是进行山楂酒发酵的装置。下列叙述正确的是（ ）
A．传统发酵制作山楂酒时，为减少杂菌污染，应将山楂反复清洗
B．传统发酵制作山楂酒为纯种发酵且利用厌氧条件抑制杂菌污染
C．发酵产酒时，搅拌可增加溶解氧和使培养液与酵母菌充分接触
D．扩大培养时，进气口要通入无菌空气使酵母菌大量繁殖
4.科研人员为了获得具有高效降低COD能力的菌株，先从某污水处理系统中分离出多种细菌，经图示流程获得目的菌。下列相关叙述正确的是（ ）
注：COD是衡量污水中有机污染物含量的重要指标
A．图示平板上单菌落只有17个，所以菌液的稀释倍数不符合要求
B．图示固体培养基上可获得纯净培养物，液体培养基可用于扩大培养
C．实验过程中，只挑取1次单菌落，目的菌可以从后续培养液中获得
D．锥形瓶中的污水和培养基都应采用湿热灭菌，而接种工具应采用干热灭菌
5.微生物的培养需要适宜的条件。下列相关叙述正确的是（ ）
A．培养基中必须添加水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等
B．培养基制备过程中需要将pH调至中性，然后灭菌
C．发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
D．为便于接种，培养基中都要添加琼脂或其他的凝固剂
6.利用工业废甲醇作为碳源可培养特定种类的酵母，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程。有关叙述正确的是（ ）
A．若需要调节培养基的pH，则应在培养基灭菌后进行
B．玻璃器皿、金属用具和培养基等选择干热灭菌法
C．步骤③、④过程中使用的培养基均以甲醇作为唯一的碳源
D．步骤③中将温度下降至30℃左右的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后再倒置培养
7.有关发酵工程的基本环节的叙述正确的是（ ）
A．优良菌种是通过诱变育种和基因工程获得
B．扩大培养是用液体培养基，目的是增加菌种数量
C．通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白
D．发酵中要随时检测培养液中微生物数量和产物浓度，不用再添加营养组分
8.植物组织培养技术可以实现优良品种的快速繁殖，下列有关叙述不正确的是（ ）
A．用药剂对外植体消毒时，要兼顾消毒效果和植物的耐受性
B．以同一植株不同部位细胞为材料培育出的植株基因型相同
C．植物组织培养时使用的培养基中一般需要添加植物激素
D．利用组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒的新品种
9.为了培育菊花新品种，科学家利用二倍体野生夏菊和六倍体栽培秋菊进行杂交，培育过程如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．d植株含有夏菊和秋菊的遗传物质
B．与②过程有关的细胞器只有高尔基体
C．①过程常选择酶解法去壁，一般在低渗溶液中进行
D．野生夏菊和栽培秋菊自然杂交后是四倍体，属于同一物种
10.随着植物花药培养以及植物体细胞杂交技术等得以确立和发展，标志着植物细胞工程技术进入了高速发展的阶段。花粉原生质体具备单倍体的优点，可直接与体细胞原生质体融合，实现配子与体细胞杂交。下列叙述错误的是（ ）
A．花粉可培育成单倍体植株，是细胞全能性的体现
B．花药离体培养和花粉离体培养得到的都是单倍体植株
C．利用植物组织培养技术将融合细胞培育成完整植株
D．配子与体细胞杂交能缩短三倍体无子果实培育年限
11.下图为烟草植物组织培养过程的示意图。下列有关叙述正确的是（ ）
A．①、②、③过程均可发生基因突变和基因重组
B．过程②应使用适宜的培养基，在有光环境中进行
C．过程③发生脱分化，其实质是基因的选择性表达
D．从根组织块到幼苗形成的过程说明植物根细胞具有全能性
12.小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角，且黏附在培养瓶内壁上；而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列叙述正确的是（ ）
A．培养液需要定期更换的主要目的是防止培养过程中细胞被杂菌污染
B．细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸
C．该淋巴细胞可能会因为细胞密度过大等因素而分裂受阻
D．对该上皮细胞传代培养时，可直接用离心法收集
13.下列关于动物细胞工程的说法，不正确的有几项（ ）
①通过PEG融合法、电融合法等方法可以诱导两个动物细胞相互识别而融合为一个细胞
②动物细胞和癌细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象
③灭活的病毒可增加细胞膜的流动性，因而可用于诱导动物细胞融合
④现阶段，体细胞核移植技术成功率非常低，而且绝大多数动物存在健康问题
⑤小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40条，其B淋巴细胞的染色体数为40条，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为80个
⑥聚乙二醇是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合
⑦动植物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养
⑧动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞具有更高的全能性
A．4项B．5项C．6项D．7项
14.一种杂交瘤细胞只能产生一种抗体，抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链构成。科研人员通过动物细胞融合技术将两种不同的杂交瘤细胞（A和B）融合形成双杂交瘤细胞AB，双杂交瘤细胞能够悬浮在液体培养基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．杂交瘤细胞A、B混合培养过程中会出现贴壁生长现象
B．用抗原α和β处理杂交瘤细胞A、B后再诱导二者融合
C．用腺病毒诱导杂交瘤细胞A、B融合后再用选择培养基筛选出双杂交瘤细胞
D．对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，无需使用胰蛋白酶处理
15.中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列叙述错误的是（ ）
A．胚胎细胞核移植的难度低于体细胞核移植
B．兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质
C．重组胚胎需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程
D．卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法
16.如图为科学家制备诱导多能干细胞（iPS细胞）的操作流程图。下列叙述错误的是（ ）
A．该项技术将来有可能用于再生医学、药物安全性与有效性检测等领域
B．借助载体将特定基因导入细胞中可以制备iPS细胞
C．成纤维细胞可以转化为iPS细胞，已分化的B细胞、T细胞也可以转化为iPS细胞
D．诱导多能干细胞应用前景不如胚胎干细胞
17.在哺乳动物的受精过程中，下列生理反应发生的顺序是（ ）
①精子穿过放射冠、透明带，卵细胞膜与精子细胞质膜融合
②精子的核变成雄原核
③精子释放多种酶
④卵母细胞完成减数第二次分裂
⑤透明带及卵细胞膜发生一系列的反应，阻止其他精子进入
⑥卵细胞的核成为雌原核
A．③①⑤②④⑥B．①③②④⑥⑤C．②⑥④①⑤③D．③⑤①②⑥④
18.采用机械方法将早期胚胎切割后移植，可以获得同卵双胎或多胎，下列说法正确的是（ ）
A．胚胎分割时，应选取发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚
B．利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎
C．胚胎分割时，需将囊胚的滋养层进行均等分割
D．胚胎移植充分发挥雌性优良受体的繁殖潜能
19.据报道，2022年6月10日，世界首例克隆北极狼在北京诞生，这是在野生濒危动物保护和繁育方面新的尝试和突破。为克隆北极狼提供细胞核的供体细胞来自哈尔滨极地公园引进的一只名为“玛雅”的野生雌性北极狼的皮肤样本，而去核的卵母细胞来自一只发情期比格犬，代孕母体则是另一只比格犬。这样，该克隆北极狼就有了分工明确的三位“妈妈”。下列相关叙述正确的是（ ）
A．该技术体现了动物细胞的全能性
B．对卵母细胞去核是为了使克隆北极狼的遗传物质全部来自于供体细胞
C．用电刺激、Ca2+载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
D．胚胎培养到囊胚或原肠胚阶段后，移植到代孕母体内
20.HER-2（一种跨膜糖蛋白）高表达通常只出现于胎儿期，正常人体组织中其表达量极低，在乳腺细胞中高表达可加速细胞分裂，使其增殖、分化过程失衡，最终转变为乳腺癌。抗体-药物偶联物T-DMI由曲妥珠单抗和药物DMI连接而成，对HER-2有很强的靶向性。下列相关分析错误的是（ ）
A.胎儿期HER-2高表达可能与胚胎发育有关，成人HER-2含量高可为乳腺癌诊断提供参考
B.因为获取的B淋巴细胞可能有多种，所以曲妥珠单抗的制备过程需进行专一抗体阳性检测
C.DMI与HER-2特异性结合是T-DMI对癌细胞进行选择性杀伤的关键
D.利用同位素标记的曲妥珠单抗在乳腺组织中成像的技术可定位诊断肿瘤的位置
二.不定项选择题（每小题3分，共5题，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得得3分，选对但不全得1分，有选错得得0分。）
21.限量补充培养法可用于检测营养缺陷型菌株（如图）。将诱变后的菌株接种在基本培养基上，野生型菌株迅速形成较大菌落，营养缺陷型菌株生长、繁殖缓慢，不出现菌落或形成微小菌落。基本培养基中补充精氨酸后，营养缺陷型菌株快速繁殖。下列叙述正确的是（ ）
A．用紫外线照射可诱导野生型菌株发生不定向突变
B．精氨酸缺陷型菌株缺乏合成精氨酸的能力
C．③步骤加入精氨酸后抑制了野生型菌株的生长
D．选择图乙中菌落B分离精氨酸营养缺陷型菌株
22.微生物在食品和饮料生产中发挥了重要作用。下表中相关叙述不正确的是（ ）
23.图为玉米组织培养的相关研究，亲本植物的基因型为Aa，A、B、C、D表示以亲本植物为材料进行的四种人工繁殖过程，图中融合细胞只考虑两两融合。下列叙述正确的是（ ）
A．图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，再用次氯酸钠处理30min后，最后用无菌水清洗2～3次
B．图中①表示脱分化过程，B过程得到的子代植株基因型为Aa
C．2，4-D常用于玉米组织培养，与形成薄壁细胞不同，在配制分化芽培养基时需降低2，4-D的浓度
D．若让D过程获得的植株和亲本植株杂交，其后代中基因纯合的类型所占比例为1/3
24.如图表示用二倍体小鼠所做的实验，下列有关叙述不正确的是（ ）
A．滋养层细胞将来发育成的胎膜和胎盘
B．胚胎移植前应对代孕母体进行免疫检查，避免受体的免疫排斥反应
C．嵌合体幼鼠体细胞的染色体组数与黑鼠-白鼠体细胞融合的杂种细胞相同
D．图中囊胚细胞基因型相同，嵌合体幼鼠皮毛颜色不同是基因选择性表达的结果
25.下表细胞工程技术应用中各组所选择的实验材料及材料特点与实验目的匹配错误的是（ ）
A．1B．2C．3D．4
三、非选择题（本题共4小题，共55分。除标识外，每空1分。）
26.（11分）牛奶是适合微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要用巴氏消毒法消毒，以杀死有害微生物。某小组为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行了如图所示操作。请据图回答下列问题：
（1）图1所示方法为________，若取最终的牛奶稀释液0.1mL在培养基上进行涂布，应选择的工具是图2中的________。
（2）理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65、63、64，则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为________。运用这种方法统计的结果往往较实际值________（填“大”或“小”），其原因是________。
（3）接种操作完成后，需将平板倒置放入培养箱中培养，倒置的目的是不仅能防止水分过快挥发，而且可
以________。如果培养基上出现形状、大小、颜色不同的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
（4）要进一步分离纯化菌种，应采用图3中________（填字母）所示的划线分离操作，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧________次。
（5）某同学在学习了传统发酵技术的应用后，进行了酸奶制作的实践，制作步骤如下：
①将瓶子（连同盖子）、勺子放在电饭锅中加热煮沸10分钟。
②瓶子稍冷却后，向瓶子中倒入牛奶，再放入电饭锅中沸水浴加热10分钟。
③待牛奶冷却至40℃左右（不烫手）时倒入牛奶量1/5的酸奶作“引子”，用勺子搅拌均匀，拧紧瓶盖。
④将电饭锅温度调至40℃，继续保温7～8h。
酸奶中（作“引子”）的有益菌主要是________，待牛奶冷却后才能倒入酸奶的原因是________，将瓶盖拧紧的目的是________。
27.（16分）同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜胀病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜胀病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗胀病的新型苜蓿。（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同）
（1）据图可知，本研究主要利用的生物技术的原理是________。在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是_______________（2分）。
（2）步骤①可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有________法等。
原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________。
融合后的原生质体经过________再生形成杂种细胞，进而经过②脱分化形成愈伤组织。
（3）步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入两类植物激素，其中起主要作用的是________。长出芽后，再将其转接到诱导生根培养基上，最终得到杂种植株。请判断：得到的杂种植株，理论上是否可育？________并简要阐述理由：________________（2分）。
（4）在②过程中，会在培养基中加入蔗糖，蔗糖的作用是________（3分）。与其他植株育种方法相比，植物体细胞杂交的突出优点是________。再生植株并未获得预期遗传性状，根本原因是________（2分）。
28.（16分）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图，回答下列问题：
（1）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于________，一般需要HCG多次免疫小鼠，这样做的目的是________（2分）。
（2）步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行________（2分）和________（2分），该过程一般在多孔细胞培养板上进行。先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到________的目的。
（3）在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据此原理，向经诱导后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基喋呤，________（填“能”或“不能”）筛选出杂交瘤细胞。原因是B淋巴细胞不能________、骨髓瘤细胞因________（2分）而不能增殖、杂交瘤细胞可通过________（2分）途径合成DNA，能够增殖。
（4）用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以做出诊断，而且检测的准确率在90%以上，主要是因为该抗体具有________和________的优点。
29.（12分）随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图回答下列问题：
（1）应用1中，细胞B的获取需对供体2注射________以便获得更多的卵母细胞，使用核移植技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛，该技术的原理是________。
（2）应用2中，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫________，为使受体牛生理状况更适合完成该技术操作，要对受体牛进行________处理，以提高成功率。
（3）在应用2、3、4中，将收集的精子放在一定浓度溶液中进行培养，使其获得受精能力，这一生理现象称为________。从母体内获得的卵母细胞需要培养到________（填时期）才能与精子结合。受精过程中防止多精入卵的生理反应包括________反应和________反应。
（4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：通过________技术获得二分胚①和②，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将________均等分割。
（5）应用4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养过程中，由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入________等一些天然成分。培养过程中除需要适宜的温度、pH和渗透压、无菌、无毒等环境条件以外，在进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有________的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
四平市第一高级中学2023-2024学年度下学期第一次月考
高二生物答案
一.单项选择题（每小题1.5分，共20题，共30分）
二.不定项选择题（每小题3分，共5题，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。）
三、非选择题（本题共4小题，共55分。除标识外，每空1分。）
26.（11分）
【答案】
（1）稀释涂布平板法 B
（2）6.4×107 小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（3）防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染
（4）B 5/五
（5）乳酸菌 防止温度过高而将菌种杀死 乳酸菌是厌氧型细菌，在无氧条件下才能进行发酵
27.（16分）
【答案】
（1）细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况（2分）
（2）高Ca2+-高pH融合 保持原生质体完整性 细胞壁
（3）细胞分裂素 可育 杂种植株细胞中含有成对的同源染色体（2分）
（4）提供碳源、能源（或提供营养）和维持渗透压（3分） 打破生殖隔离，实现远缘杂交
生物体基因表达是相互调控、相互影响的（1分），杂种植株虽具备两个物种遗传物质，但它们的表达相互干扰（1分）
28.（16分）
【答案】
（1）抗原 刺激小鼠产生相应的免疫过的B淋巴细胞（2分）
（2）克隆化培养（2分） 抗体检测（2分） 单克隆（培养）
（3）能 无限增殖
DNA合成途径被阻断不能增殖（2分） 辅助（2分）
（4）特异性强 灵敏度高
29.（12分）
【答案】
（1）促性腺激素 动物细胞核的全能性
（2）胚胎移植 同期发情
（3）精子获能 减数第二次分裂中期（MII中期） 透明带 卵细胞膜
（4）胚胎分割 内细胞团
（5）动物血清（或血清/血浆） 95%空气和5%CO2
选项释义:
1．【答案】A
【详解】A、榨汁前对葡萄的处理是先清洗葡萄再去除枝梗，这样能够防止去除枝梗时露出的果肉不被杂菌污染，A正确；
B、变酸的酒表面出现的白膜是醋酸菌产生的，但醋酸菌是原核生物，不进行有丝分裂，B错误；
C、腐乳制作主要利用毛霉等微生物产生的蛋白酶和脂肪酶将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质，C错误；
D、制作果醋、泡菜、果酒的过程中发酵液pH都下降，D错误。
2.【答案】C
【详解】A、硝化细菌是化能自养需氧型微生物，CO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自NH3的氧化，A正确；
B、褐藻是自养生物，能进行光合作用，CO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需的能源来自太阳能，B正确；
C、乳酸菌是异养厌氧型微生物，糖类和蛋白质类有机物是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自糖类的氧化分解，C错误；
D、酵母菌是异养生物葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，酵母菌不能直接利用二氧化碳，D正确。
3.【答案】D
【详解】A、制作山楂酒时，若反复清洗，会洗掉山楂表面的酵母菌，A错误；
B、传统发酵制作山楂酒为自然发酵，酵母菌为山楂自带的多种微生物，利用无氧条件抑制其他微生物的生长，保证酵母菌为优势菌，B错误；
C、发酵山楂酒利用酵母菌无氧呼吸产生酒精的原理，不需要增加溶解氧，C错误；
D、扩大培养时，进气口要通入无菌空气使酵母菌得以大量繁殖，为发酵阶段提供更多的菌种，D正确。
4.【答案】B
【详解】A、该实验的目的不是进行微生物计数，而是获得具有高效降低COD能力的菌株，图示平板上有17个单菌落，可能获得具有高效降低COD能力的菌株，A错误；
B、图示固体培养基上可获得纯净培养物，液体培养基可用于扩大培养，B正确；
C、实验过程中，平板上有17个单菌落，挑取单菌落时，应挑取17次，每次挑取都进行后续培养，并检测菌种降低COD的能力，然后比较，最终选取降低COD能力最强的菌种，C错误；
D、接种工具应采用灼烧灭菌，D错误。
5.【答案】C
【详解】A、培养基中不一定都要添加水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等，比如培养能利用CO2的自养型微生物，培养基中可以不添加碳源，A错误；
B、培养基制备过程中需要调节pH然后灭菌，但要依据微生物的生长需求调节，不一定调至中性，B错误；
C、发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，C正确；
D、需要将菌种接种到固体培养基时才要在培养基中添加琼脂或其他的凝固剂，D错误。
6.【答案】C
【详解】A、调节培养基的pH需在培养基灭菌前进行，A错误；
B、培养基需要采用高压蒸汽灭菌，B错误；
C、步骤③、④过程是分离纯化能利用甲醇的酵母，因此应使用均以甲醇作为唯一的碳源的培养基，C正确；
D、在步骤③中将培养基温度冷却到50℃倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养，若温度下降至30℃左右培养基已经凝固，无法倒出，D错误。
7.【答案】B
【详解】A、基因工程育种、诱变育种均能获得优良性状的菌种，性状优良的菌种也可以从自然界中筛选出来，A错误；
B、扩大培养是用液体培养基，目的是增加菌种数量，B正确；
C、产品不同，分离提纯的方法一般不同。如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取，C错误；
D、为了解发酵过程，要随时取样，检测培养液的微生物数量、产物浓度等，并根据实际情况添加营养组分，D错误。
8.【答案】D
【详解】A、通常使用酒精和次氯酸钠溶液对外植体进行消毒处理，要兼顾消毒效果和植物的耐受性，避免过度消毒对外植体造成损伤，A正确；
B、同一植株不同部位细胞的基因型一般是相同的（配子除外），以此为材料培育出的植株基因型相同，B正确；
C、植物组织培养时使用的培养基中常需要添加生长素和细胞分裂素，C正确；
D、利用植物的幼嫩的芽或茎进行植物组织培养技术可以培育脱毒苗，但不能获得抗病毒的新品种，D错误。
9.【答案】A
【详解】A、形成d植株的过程采用了植物体细胞杂交，属于无性生殖，d植株含有夏菊和秋菊的遗传物质，A正确；
B、过程②融合原生质体再生细胞壁的过程，与②过程有关的细胞器有高尔基体、线粒体等，B错误；
C、过程①是通过酶解法去除细胞壁获得原生质体a和b，为了防止原生质体变形，一般在等渗溶液中进行，C错误；
D、野生夏菊是二倍体，栽培秋菊是六倍体，两者通过自然杂交得到的是四倍体植株，其中一个染色体组来自野生夏菊，三个染色体组来自栽培秋菊，杂交子代不育，二倍体野生夏菊和六倍体栽培秋菊不属于同一物种，D错误。
10.【答案】B
【详解】A、花粉可培育成单倍体植株，说明生殖细胞具有全能性，是细胞全能性的体现，A正确；
B、用高渗溶液或等渗溶液配制纤维素酶和果胶酶溶液制备原生质体，这样可以避免原生质体吸水涨破，B错误；
C、通过植物组织培养技术将融合细胞培育成完整植株，利用了植物细胞具有全能性的原理，克服了远缘杂交不亲和的障碍，C正确；
D、配子与体细胞杂交通过植物组织培养技术获得三倍体能缩短三倍体无子果实培育年限，利用了植物细胞全能性的原理，D正确。
11.【答案】D
【详解】A、植物组织培养过程进行的是有丝分裂，不会进行减数分裂，故①、②、③过程均不能发生基因重组，会发生基因突变，A错误；
B、过程②为脱分化，需要避光，而再分化过程需要光照，B错误；
C、过程③表示再分化，C错误；
D、由植物细胞培养成完整个体体现植物细胞具有全能性，因此从根组织块到幼苗形成的过程说明植物根细胞具有全能性，D正确。
12.【答案】C
【详解】A、培养液需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，A错误；
B、细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液pH，B错误；
C、当细胞密度过大，有害代谢物积累，培养液中物质缺乏会导致其分裂受阻，C正确；
D、对该上皮细胞传代培养时，需要先用胰蛋白酶等处理，再用离心法收集，D错误
13.【答案】D
【详解】①通过PEG融合法、电融合法等方法可以诱导两个动物细胞融合为一个细胞，但没有涉及相互识别，①错误；
②动物的癌细胞不会发生接触抑制现象，②错误；
③灭活病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，使细胞发生融合，③错误；
④现阶段，体细胞核移植技术成功率非常低，而且绝大多数动物存在健康问题，④正确；
⑤小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40条，其B淋巴细胞的染色体数为40条，融合后形成的杂交瘤细胞的核DNA分子数为80个，此外在细胞质中还有少量的DNA分子，⑤错误；
⑥聚乙二醇是促细胞融合剂，先用酶解法去除细胞壁，再用聚乙二醇诱导植物的原生质体融合，⑥错误；
⑦动物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养，植物组织培养时不需要用酶处理，⑦错误；
⑧动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞的分裂能力旺盛，⑧错误。
14.【答案】D
【详解】A、杂交瘤细胞能无限繁殖，不会出现贴壁生长现象，A错误；
B、抗原α、β分别注射到小鼠体内，分别获得已免疫的B细胞A、B，然后将已免疫的B细胞A、B和骨髓瘤细胞融合，分别获得杂交瘤细胞A、B，再诱导杂交瘤细胞A、B进行融合，B错误；
C、单克隆抗体制备过程中，杂交瘤细胞需要进行两次筛选，第一次利用选择培养基筛选出能在特定培养基生长且能无限增殖的杂交瘤细胞，第二次筛选可用抗原-抗体杂交的方法筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞本身就是由两个杂交瘤细胞融合而成，利用选择培养基无法筛选出双杂交瘤细胞AB，C错误；
D、杂交瘤细胞能无限繁殖，不会出现接触抑制，若要传代培养，细胞培养液直接离心，去除上清液培养基，加入新鲜培养基即可，不用胰蛋白酶处理，D正确。
15.【答案】D
【详解】A、胚胎细胞分化程度低，胚胎细胞核移植的难度低于体细胞核移植，A正确；
B、兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质，故用去核后的兔子卵母细胞作为受体细胞，B正确；
C、融合后的重组胚胎，需要用物理或化学的方法进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确；
D、卵母细胞去核的方法是显微操作法，还可以用紫外光短时间照射等方法，D错误。
16.【答案】D
【详解】A、诱导多能干细胞（iPS细胞）是类似胚胎干细胞的一种细胞，该项技术将来有可能用于再生医学、药物安全性与有效性检测等领域，A正确；
B、借助载体将特定基因导入细胞中可以制备iPS细胞，也可以直接将特定蛋白导入细胞或用小分子化合物诱导形成iPS细胞，B正确；
C、成纤维细胞可以转化为iPS细胞，已分化的B细胞、T细胞也可以转化为iPS细胞，C正确；
D、诱导多能干细胞无需破坏胚胎，理论上可以避免免疫排斥反应，科学家普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞，D错误。
17.【答案】A
【详解】在哺乳动物的受精过程中，体内发生的过程顺序为：③精子释放顶体酶→①精子穿过放射冠、透明带，卵母细胞质膜与精子细胞质膜融合→⑤透明带及卵母细胞质膜发生一系列的反应，阻止其他精子进入→②精子的核变成雄原核→④卵母细胞完成减数第二次分裂→⑥卵细胞的核成为雌原核。
18.【答案】B
【详解】A、胚胎分割时，应选取发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，A错误；
B、来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎，B正确；
C、胚胎分割时需将囊胚阶段的内细胞团进行均等分割，C错误；
D、胚胎移植充分发挥雌性优良供体的繁殖潜能，产生更多的优良后代，D错误。
19.【答案】C
【详解】A、该技术体现了动物细胞核的全能性，A错误；
B、对卵母细胞去核是为了使克隆北极狼的细胞核的遗传物质全部来自于供体细胞，B错误；
C、在体细胞核移植过程中，用物理方法或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白质合成酶抑制剂等）激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确；
D、胚胎培养到桑葚胚或囊胚阶段后，移植到同期发情处理后的代孕母体内，D错误。
20.【答案】C
【详解】A、HER-2（一种跨膜糖蛋白）高表达通常只出现于胎儿期，可能与胚胎发育有关，正常人体组织中其表达量极低，在乳腺细胞中高表达可加速细胞分裂，使其增殖、分化过程失衡，最终转变为乳腺癌，所以成人HER-2含量高可为乳腺癌诊断提供参考，A正确；
B、机体生活的环境存在多种抗原，所以获取的B淋巴细胞可能有多种，故曲妥珠单抗的制备过程需进行专一抗体阳性检测，以保证能与HER-2特异性结合，B正确；
C、DMI是药物，不能与HER-2特异性结合，能与HER-2特异性结合的是曲妥珠单抗，C错误；
D、曲妥珠单抗能与HER-2特异性结合，故利用同位素标记的曲妥珠单抗在乳腺组织中成像的技术可定位诊断肿瘤的位置，D正确。
21.【答案】ABD
【详解】A、用紫外线照射诱导野生型菌株发生的变异是基因突变，是不定向的，A正确；
B、精氨酸缺陷型菌株缺乏将其他物质转化为精氨酸的能力，B正确；
C、图中A表示野生型菌株形成的菌落，将图乙与图甲对比可知，③步骤加入精氨酸后促进了野生型菌株的生长，C错误；
D、结合图甲和图乙可知，③步骤加入精氨酸后B快速繁殖，说明菌落B是精氨酸营养缺陷型菌株，所以可以选择菌落B分离精氨酸营养缺陷型菌株，D正确。
22.【答案】AC
【详解】A、谷氨酸棒状杆菌在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-
乙酰谷氨酰胺，得到谷氨酸后，再经过一系列处理后可制成味精，A错误；
B、酱油由霉菌（黑曲霉）将原料中的蛋白质分解成多肽和氨基酸，经淋洗调制而成，B正确；
C、醋酸菌在缺少糖源和氧气充足时，可以直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸，C错误；
D、乳酸菌是厌氧细菌，在无氧条件下能将葡萄糖分解成乳酸，用于乳制品的发酵、泡菜的腌制等，D正确。
23.【答案】C
【详解】A、植物组织培养需要用体积分数为70%的酒精消毒30s后，用无菌水清洗2～3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2～3次，A错误；
B、图中①是部分叶片形成胚状体的过程，需要经过脱分化和再分化，B植株是由亲本植株的叶片经过组织培养形成的，基因型为Aa，B错误；
C、为促进愈伤组织（由薄壁细胞组成）再分化，在配制分化培养基时需降低2，4-D的浓度，C正确；
D、D植株是经过亲本细胞Aa经过体细胞杂交形成的，细胞中含有同源染色体，且同源染色体可以联会，所以是可育的，其基因型是AAaa，产生的配子AA∶Aa∶aa=1∶4∶1，当其与亲本Aa（产生的配子为A∶a=1∶1）
杂交时，后代纯合子AAA和aaa所占的比例为1/6×1/2+1/6×1/2=1/6，D错误。
24.【答案】BCD
【详解】A、由滋养层细胞发育成的胎盘会向母体释放信号，强行控制母体补充胎儿所需要的物质，A正确；
B、受体对外来胚胎不发生免疫排斥反应，因此进行胚胎移植前，不需要对供体和受体进行免疫检查，B错误；
C、嵌合体小鼠由二倍体小鼠的8细胞胚合并而来，并无发生细胞融合，幼鼠细胞为仍为二倍体，含有2个染色体组，融合细胞中含有4个染色体组，C错误；
D、白鼠和黑鼠的8细胞胚胎合并，形成新的16细胞的胚胎，在进行胚胎培养成囊胚，因此囊胚细胞基因型不同，D错误。
25.【答案】BC
【详解】克隆动物用次级卵母细胞作为受体细胞，因为卵细胞大，营养丰富，且细胞质物质能有效调控核发育，1组正确；培育脱毒草莓时，应选用根尖或茎尖的材料，选材的原因是茎尖含病毒很少，甚至不含毒，但诱发突变
不是选材的原因，2组错误；培育番茄—马铃薯超级杂种植株，应选用两种植物的体细胞，不能选用花粉粒，3组错误；烧伤患者的皮肤移植，可以选用自己的生发层细胞，分裂能力强，不会发生排斥反应，4组正确。
26.【答案】（1）稀释涂布平板法 B
（2）6.4×107 小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（3）防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染
（4）B 5/五
（5）乳酸菌 防止温度过高而将菌种杀死 乳酸菌是厌氧型细菌，在无氧条件下才能进行发酵
【分析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。
【详解】（1）稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。图1所示方法为稀释涂布平板法；A为接种环，划线分离时用，B为涂布器，稀释涂布的时候用于将菌液涂布均匀，C为滴管，D为接种针，划线分离时用，故选B。
（2）个培养皿中菌落数分别为65、63、64，因此培养皿中菌落数平均为64个，即0.1mL中含有细菌64个，而这0.1mL是稀释了105后的，因此1mL酸奶中所含细菌数为64×106个，即6.4×107个；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此运用这种方法统计的结果往往较实际值小。
（3）培养基倒入培养皿时还有一定的温度，冷却凝固后形成培养基，为了防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，需将平板倒置放入培养箱中培养。
（4）A、连续划线不易获得单菌落，A错误；
B、从上一次末端开始划线，将菌液不断稀释，可以获得单菌落，进一步分离纯化菌种，B正确；
C、划线时没有从上次划线的地方开始，不利于对菌液进行稀释，C错误；
D、划线时没有从上次划线的地方开始，不利于对菌液进行稀释，D错误。
故选B。
接种前灼烧一次接种环，以使其灭菌，划一次后再进行灼烧一次，一共划了四次，最后将接种环进行灼烧灭菌。故一共五次灼烧。
（5）乳酸菌能产生乳酸，制作酸奶，故酸奶中（作“引子”）的有益菌主要是乳酸菌；要等牛奶冷却后才能倒入酸奶，是为了防止温度过高将酸奶里的菌种杀死。乳酸菌是厌氧型细菌，在无氧条件下才能进行发酵，因此将瓶盖拧紧。
27.【答案】（1）细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G
或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况
（2）高Ca2+-高pH融合 保持原生质体完整性 细胞壁
（3）细胞分裂素 可育，杂种植株细胞中含有成对的同源染色体
（4）提供碳源、能源（或提供营养）和维持渗透压 打破生殖隔离，实现远缘杂交
生物体基因表达是相互调控、相互影响的，杂种植株虽具备两个物种遗传物质，但它们的表达相互干扰
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【详解】（1）由图可知，新型苜蓿的培育过程采用的是植物体细胞杂交技术，该生物技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性；在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，由于需要获得具体的浓度，因此需要将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况，根据再生情况获得各自的临界值。
（2）步骤①可采用化学法进行诱导，其中化学方法除了聚乙二醇（PEG）融合法，还有高Ca2+—高pH融合
法等。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，保持原生质体完整性，防止原生质体吸水涨破。融合后的原生质体再生出新的细胞壁说明形成杂种细胞，即杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁，进而经过②脱分化形成愈伤组织。
（3）步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入两类植物激素，分别是生长素和细胞分裂素，其中起主要作用的是细胞分裂素。长出芽后，再将其转接到诱导生根培养基上，最终得到杂种植株。紫花苜蓿是同源四倍体，体细胞含有4个染色体组，百脉根是二倍体，体细胞含有2个染色体组，融合后得到的杂种细胞含有4+2=6个染色体组，可见，杂种植株细胞中含有成对的同源染色体，因而能进行正常的减数分裂过程，因而表现为可育。
（4）过程②为脱分化；蔗糖的作用是提供碳源、能源（或提供营养）和维持渗透压。植物体细胞杂交获得杂种植株，打破了生殖隔离，实现了远缘杂交。杂种植株并未获得预期遗传性状，根本原因是生物体基因表达是相互调控、相互影响的，杂种植株虽具备两个物种遗传物质，但它们的表达相互干扰。
28.【答案】（1）抗原 刺激小鼠产生相应的免疫过的B淋巴细胞
（2）克隆化培养 抗体检测 单克隆培养
（3）能 无限增殖
DNA合成途径被阻断不能增殖 辅助途径合成DNA
（4）特异性强 灵敏度高
【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞，最后获取单克隆抗体。
【详解】（1）单克隆抗体制备过程中，给小鼠注射的HCG相当于抗原，需先将抗原物质注入小鼠体内，引发免疫反应，使小鼠产生经免疫过的B淋巴细胞。
（2）由图可知，步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞在多孔细胞培养板上进行克隆化培养及抗体检测，经过多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞；为了使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的，需先稀释细胞悬液，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液。
（3）结合题图可知，氨基蝶呤可以阻断细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA的途径，又因为骨髓瘤细胞的DNA合成没有辅助途径，故若向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基蝶呤能筛选杂交瘤细胞，因为浆细胞高度分化，不能增殖，骨髓瘤细胞中的DNA合成途径被阻断不能增殖，而杂交瘤细胞可通过辅助途径合成DNA，能够增殖，故根据此原理，向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基喋呤，能筛选出杂交瘤细胞。
（4）单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，故用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，检测的时间早，且准确率在90%以上。
29.【答案】（1）促性腺激素 动物细胞核的全能性
（2）胚胎移植 同期发情
（3）精子获能 减数第二次分裂中期（MII中期） 透明带 卵细胞膜
（4）胚胎分割 内细胞团
（5）动物血清（或血清/血浆） 95%空气和5%CO2
【分析】分析题图:
应用l中:供体1提供细胞核，供体2提供细胞质，经过核移植技术形成重组细胞，并发育形成早期胚，再将胚胎移植到受体子宫发育成小牛，为克隆牛；
应用2中:优良公牛和供体l配种形成受精卵，并发育成早期胚胎，再将胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属于有性生殖；
应用3中:采用了胚胎分割移植技术；
应用4中:从早期胚胎和原始性腺中获取胚胎干细胞，并进行体外干细胞培养。
【详解】（1）应用1中供体2提供细胞质，为获取更多的细胞（卵母细胞），需对供体2注射促性腺激素以促进排卵，通过超数排卵处理以便获得更多的卵母细胞。使用核移植技术获得重组细胞，最终获得的小牛为克隆牛；该技术是体细胞核移植技术，所依据的原理是动物细胞核的全能性。
（2）应用2属于有性生殖，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫胚胎移植；移植前对受体牛进行同期发情处理可以使供体和受体处于相同的生理状态，提高成功率。
（3）在应用2、3、4中，将收集的精子放在一定浓度溶液中进行培养，使其获得受精能力，这一生理现象称为精子获能。从母体内获得的卵母细胞不能立即用于受精，要在体外经人工培养至减数第二次分裂中期才具备受精能力，才能与精子结合。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜封闭作用。
（4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题:通过胚胎分割技术可获得二分胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
（5）动物细胞培养液中，通常需要加入血清等天然的成分。动物细胞培养所需气体主要为95%空气和5%CO2，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。
选项
应用
主要菌种
发酵说明
A
味精
谷氨酸棒状杆菌
在酸性条件下会积累谷氨酸，一系列处理后可制成味精
B
酱油
黑曲霉
将原料中的蛋白质分解成多肽和氨基酸，经淋洗调制而成
C
醋
醋酸菌
O2和糖源都充足时分解糖类产生乙酸，缺少O2时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸，
D
酸奶
乳酸菌
厌氧细菌，在无氧条件下将葡萄糖分解成乳酸
组别
实验目的
实验材料
材料特点
1
克隆高产奶牛
次级卵母细胞与体细胞
次级卵母细胞去核留质
2
培育脱毒草莓
茎尖
分裂能力强，易诱发突变
3
培育西红柿-马铃薯超级杂种
花粉粒
易于获取，易于组织培养
4
烧伤患者皮肤细胞移植
自体皮肤生发层细胞
分裂能力强，且不会引起免疫排斥
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
A
C
D
B
C
C
B
D
A
B
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
D
C
D
D
D
D
A
B
C
C
21
22
23
24
25
ABD
AC
C
BCD
BC