还剩31页未读，
继续阅读
2022-2023学年山西省太原市高二下学期期中生物试题含解析
展开
这是一份2022-2023学年山西省太原市高二下学期期中生物试题含解析，共34页。试卷主要包含了单项选择题，多项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
2022～2023学年第二学期高二年级期中质量监测
生物学试卷
一、单项选择题
1. 制作传统发酵食品利用的主要微生物相关信息如下表所示，其中错误的是（ ）
产品名称
腐乳
酸奶
果酒
果醋
异化作用类型
①需氧型
②厌氧型
③兼性厌氧型
需氧型
是否有成形细胞核
是
②是
是
④否
A. ① B. ② C. ③ D. ④
【答案】B
【解析】
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；果醋制作所需的菌种主要是醋酸菌，在有氧条件下将糖类或乙醇发酵为乙酸。
【详解】A、制作腐乳时利用的微生物主要是毛霉，为真核生物，有成形的细胞核，其异化作用类型为需氧型，A正确；
B、制作酸奶主要利用乳酸菌，为原核生物，无成形的细胞核，异化作用类型为厌氧型，B错误；
C、果酒制作所需的微生物主要是酵母菌，属于真核生物，有成形的细胞核，其异化作用类型为兼性厌氧型，C正确；
D、果醋制作所需的菌种主要是醋酸菌，属于原核生物，无成形的细胞核，其异化作用类型为需氧型，D正确。
故选B。
2. 泡菜古称葅，北魏《齐民要术》有关于泡菜制作的记载：“作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内（纳）瓮中。其洗菜盐水，澄取清者，泻著瓮中，令没菜把即止”。下列有关叙述错误的是（ ）
A. “作盐水，令极咸”，说明盐水浓度越高，泡菜制作效果越好
B. “令没菜把即止”主要为泡菜制作中乳酸发酵创设无氧条件
C. 不同地区制作的泡菜风味不同，可能与其中辅料的差异有关
D. “其洗菜盐水，澄取清者，泻著瓮中”，此过程可为发酵提供菌种
【答案】A
【解析】
【分析】泡菜的制作原理：在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。在泡菜制作的过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐用量。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。
【详解】A、制作泡菜时，清水和食盐的百分比为5%~20%为宜，并不是盐水浓度越高越好，A错误；
B、“令没菜把即止”的意思是将盐水加到淹没蔬菜为止，这是因为乳酸菌是厌氧微生物，这样操作的主要目的是为乳酸菌的发酵提供无氧条件，让乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，B正确；
C、不同地区制作的泡菜风味不同，可能与其中辅料的差异有关，C正确；
D、由于蔬菜上原本就有可能附着有乳酸菌，用盐水清洗泡菜时，可以将原来附着在蔬菜上的乳酸菌一并洗到盐水中，故再倒入菜坛中的“洗菜盐水”也可能含有泡菜发酵的乳酸菌，D正确。
故选A。
3. 获得纯净微生物培养的关键是防止外来杂菌的入侵。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 灭菌可杀死物体内外的所有芽孢和孢子
B. 超净工作台在使用前可用紫外线照射进行消毒
C. 涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌
D. 家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌处理
【答案】D
【解析】
【分析】1、消毒是杀灭或清除传播媒介上的微生物，达到无害化处理，但不一定能杀死芽孢和孢子。消毒的方法包括煮沸消毒、紫外线消毒、化学药剂消毒等。
2、灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物(包括芽孢和孢子)。常用方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
【详解】A、灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物，包括芽孢和孢子，A正确；
B、接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射进行消毒，使用过程中不能用紫外线照射，B正确；
C、接种时为防止杂菌污染，接种前将涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌，C正确；
D、家庭制作葡萄酒时要将容器进行灭菌处理，但不能对葡萄进行灭菌，否则会杀灭葡萄表面的酵母菌，使发酵无法进行，D错误。
故选D。
4. 参与黄豆酱发酵的主要微生物有霉菌、酵母等。下面是传统黄豆酱的制作过程，相关叙述错误的是（ ）
①黄豆蒸煮沥干，裹上面粉→②均匀铺摊，用茅草等覆盖后置于不通风、阴凉处，7d 后长满酱黄→③将酱黄爆晒后加盐水浸透→④晒酱，后发酵成熟
A. 过程①中黄豆表面包裹的面粉，可为微生物生长提供碳源和能源
B. 过程②中将黄豆置于不通风环境中， 目的是获得菌种并利于其生长
C. 过程③中加入的盐水具有灭菌作用，因此加入的盐水不必煮开
D. 过程④中耐盐酵母产生酒精等物质， 有利于形成特定风味和香气
【答案】C
【解析】
【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。
2、腐乳制作的菌种主要是毛霉，代谢类型是需氧型真菌。毛霉生长的最佳温度是在15℃～18℃，保持一定湿度。
【详解】A、面粉中含有淀粉等物质，可为微生物生长提供碳源和能源，A正确；
B、微生物进行发酵需要适宜的条件，过程②中将黄豆置于不通风环境中， 目的是获得菌种并利于其生长，B正确；
C、为防止杂菌的污染，加入的盐水应先煮沸再冷却，C错误；
D、过程④是后发酵成熟，其中耐盐酵母产生酒精等物质， 有利于形成特定风味和香气，利于黄豆酱的风味形成，D正确。
故选C。
5. 下列有关微生物培养基制备的叙述错误的是（ ）
A. 培养乳酸杆菌时需添加维生素
B. 配制培养基时应先调pH后灭菌
C. 琼脂的主要作用是为微生物提供能量
D. K2HPO4、Na2HPO4可用于维持培养基的pH
【答案】C
【解析】
【分析】培养基的概念及营养构成
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质；
（2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求；例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】A、培养乳酸杆菌时需添加维生素，从而促进乳酸杆菌的生长，A正确；
B、配制培养基时应先调pH后灭菌，这样可以避免调节pH过程中引起培养基被污染，B正确；
C、琼脂的主要作用是作为凝固剂，获得固体培养基，C错误；
D、K2HPO4、Na2HPO4作为缓冲物质，可用于维持培养基的pH，D正确。
故选C。
6. 下列有关微生物纯培养实验的叙述错误的是（ ）
A. 培养过程中培养基的pH可能发生改变
B. 实验使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理
C. 实验包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤
D. 接种后立即将平板倒置培养，可避免冷凝水造成的污染
【答案】D
【解析】
【分析】无菌技术的主要内容:
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的器皿接种用具和培养基等器具进行灭菌。
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
【详解】A、培养过程中培养基的pH可能发生改变，如随着培养液中酵母菌密度增大，呼吸作用强，产生的二氧化碳增多，pH下降，A正确；
B、为了防止环境污染或感染操作者，使用过的培养基在丢弃之前要进行灭菌处理，B正确；
C、微生物的纯化培养的步骤包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤，其目的是获得纯培养物，C正确；
D、倒好平板应待其冷却凝固后，再倒置，防止冷凝水落在培养基上造成污染，D错误。
故选D。
7. 将某细菌接种在固体培养基上，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 最后一次划线不能与其它划线区相连
B. 操作中灼烧接种环的主要目的是防止实验人员被感染
C. 为了分离得到纯培养物，应从图中Ⅲ区挑取单菌落
D. 上图图示方法通过在培养基表面连续划线将菌种分散
【答案】B
【解析】
【分析】平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
【详解】A、最后一次划线可能形成单个菌落，不能与其它菌体密集的划线区相连，A正确；
B、操作中灼烧接种环的主要目的是保证划线的菌种来自上一次划线的末端，这样随着连续划线操作可得到单菌落，B错误；
C、为了分离得到纯培养物，应从图中Ⅲ区挑取单菌落，因为该区域能够获得单个细胞长成的菌落，C正确；
D、上图图示方法通过在培养基表面连续划线将菌种分散，最终获得单菌落，该接种方法叫做平板划线法，D正确。
故选B。
8. 已知固体培养基会因碳酸钙存在而呈乳白色，且乳酸菌能分解培养基中的碳酸钙。某同学以新鲜的泡菜滤液为材料进行了分离纯化乳酸菌的实验。下列叙述错误的是（ ）
A. 分离纯化所用的培养基都要进行严格的灭菌处理
B. 分离纯化乳酸菌时，应挑选出具有透明圈菌落作为候选菌
C. 分离纯化乳酸菌时，需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释
D. 加入碳酸钙培养基属于选择培养基，且碳酸钙作为唯一碳源
【答案】D
【解析】
【分析】培养基的概念及营养构成
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质；
（2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】A、微生物实验中使用的培养基必须要经过灭菌处理，以防止杂菌污染，确保实验能够顺利进行，分离纯化所用的培养基也要进行严格的灭菌处理，A正确；
B、由题意可知，乳酸能分解培养基中碳酸钙形成透明圈，故分离纯化乳酸菌时，应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌，B正确；
C、分离纯化乳酸菌时，为了获得单个菌落，需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，将稀释液均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，C正确；
D、题意显示，乳酸能分解培养基中碳酸钙，故分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸，形成透明圈，有利于乳酸菌的鉴别，该培养基属于鉴别培养基，且乳酸菌不能利用碳酸钙作为碳源，D错误。
故选D。
9. 为了检验抗生素A与抗生素B的杀菌效果，设置如下图所示实验方案。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 接种时，需将测试菌液均匀地涂布在平板上
B. 只有细菌区作为对照组，使实验结果更有说服力
C. 在只有细菌的区域中不存在对抗生素A、B都敏感的细菌
D. 若抗生素A区菌落数多于B区，则抗生素B的抑菌作用较强
【答案】C
【解析】
【分析】为了检验抗生素A与抗生素B的杀菌效果，则实验的自变量为抗生素的种类。
【详解】A、涂布时应用移液器取样至培养基上，然后用涂布器涂布均匀，A正确；
B、为了检验抗生素A与抗生素B的杀菌效果，设计只有细菌区作为对照组，使实验结果更有说服力，B正确；
C、在只有细菌的区域中存在对抗生素A、B都敏感的细菌，也存在只对对抗生素A敏感的细菌，也存在只对对抗生素B敏感的细菌，也存在对对抗生素A、B都不敏感的细菌，C错误；
D、若抗生素A区菌落数多于B区，则可说明抗生素B的抑菌作用较强，D正确。
故选C。
10. 生活污水中的微生物分解含硫蛋白，产生的硫化氢，可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究甲、乙菌是否产生硫化氢及运动能力，分别将两种菌穿刺接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，结果如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 乙菌的运动能力比甲菌强
B. 为不影响菌的运动需选用液体培养基
C. 该实验能计算出两种菌产生硫化氢的量
D. 甲、乙菌在培养基内部生长，一定属于厌氧菌
【答案】A
【解析】
【分析】题图分析，图中显示是穿刺接种的方法，根据题干中的信息“硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀”，所以可根据黑色沉淀的多少，来比较两种菌产生硫化氢的能力。
【详解】A、从图中可以看出甲菌在试管中分布范围小于乙菌，说明了乙菌的运动能力比甲菌强，A正确；
B、为不影响菌的运动需选用半固体培养基，B错误；
C、该实验可以根据黑色沉淀的多少初步比较细菌产生硫化氢的能力，但不能测定产生硫化氢的量，C错误；
D、甲、乙菌在培养基内部生长，未必一定属于厌氧菌，还可能是兼性厌氧微生物，D错误。
故选A。
11. 除草剂丙草胺能抑制土壤微生物的生长。为获得能分解丙草胺的微生物，研究人员从某地土壤中取样，将1mL土壤样液稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57和58。下列叙述错误的是（ ）
A. 一般选择菌落数为30～300的平板进行计数
B. 计算得出土壤样液中活菌大约为5.7×107个/L
C. 此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低
D. 显微镜直接计数法统计的是稀释液中的活菌数
【答案】D
【解析】
【分析】统计菌落数目的方法：
（1）显微镜直接计数法：
原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；
方法：用计数板计数；
缺点： 不能区分死菌与活菌。
（2）间接计数法 (活菌计数法)：
原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
注意事项：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
c、计算公式：每克样品中的菌株数= (c/V) ×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积 (mL)，M代表稀释倍数。
【详解】A、一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，A正确；
B、将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57，据此可得出每升样品中的活菌数为(56+58+57)/3=0.1×1000×100=5.7×107个，B正确；
C、由于两个或多个细菌形成一个菌落，所以统计的菌落数往往比实际的活菌数目低，C正确；
D、显微镜直接计数法统计的都是稀释液中所有个体的数目，包括死菌，D错误。
故选D。
12. 下列关于菊花组织培养的叙述错误的是（ ）
A. 外植体多选择幼嫩的茎段等分裂旺盛的部位
B. 为避免环境中微生物的污染，要对外植体进行灭菌处理
C. 试管苗移栽前要先打开封口膜或瓶盖，在培养箱中生长几日
D. 愈伤组织的形成一般不需要光照，后续过程需要给予适当光照
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体．植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、菊花的组织培养需要经过细胞的脱分化和再分化过程，外植体多选择幼嫩的茎段等分裂旺盛的部位，这样能提高组织培养的成功率，A正确；
B、植物组织培养时需要对外植体消毒，既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害，不能对其进行灭菌处理，B错误；
C、试管苗移栽前要先打开封口膜或瓶盖，在培养箱中生长几日，以锻炼试管苗适应外界环境的能力，C正确；
D、愈伤组织的形成一般不需要光照，后续再分化过程需要给予适当光照，有利于促进叶绿素的产生，D正确。
故选B。
13. 紫杉醇是存在于红豆杉体内的一种次生代谢物，具有高抗癌活性，下图是利用植物细胞工程技术获得紫杉醇的工厂化途径。下列相关叙述错误的是（ ）
A. ①、③过程所用培养基的物理性质一般不同
B. ②过程需要用胰蛋白酶处理而获得单个细胞
C. 紫杉醇不是红豆杉生长和生存所必需的代谢产物
D. 这种方法获得紫杉醇利于对濒危植物红豆杉的保护
【答案】B
【解析】
【分析】初生代谢物是维持细胞生命活动所必需基本代谢物，如糖类、脂质、蛋白质及核酸等。次生代谢产物是由次生代谢产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物。
【详解】A、①过程获得愈伤组织所用的是固体培养基，③获得高产细胞群所用培养基为液体培养基，所用培养基的物理性质一般不同，A正确；
B、分离动物组织细胞可以用胰蛋白酶，植物愈伤组织的细胞培养不需要分散为单个细胞的过程，②过程为将愈伤组织换到液体悬浮培养液中继代培养，B错误；
C、初生代谢产物是植物生长和生存所必需的，次生代谢产物不是植物生长所必需的，由题干可知，紫杉醇属于次生代谢产物，不是红豆杉生长发育所必需的物质，C正确；
D、紫杉醇被称为抗癌药王，获得紫杉醇的传统方法是从红豆杉属植物的树皮中提取，但产量有限，也不利于对濒危红豆杉的保护，图示为利用植物细胞工程技术获得紫杉醇的工厂化途径，短时间内可以获得大量的紫杉醇，利于对濒危植物红豆杉的保护，D正确。
故选B。
14. 下列有关传统植物杂交与植物体细胞杂交的比较错误的是
A. 两者都涉及有丝分裂、减数分裂和细胞分化等过程
B. 两者涉及的原理依次是基因重组、染色体变异
C. 两者都能使两个亲本的一些性状组合于新个体
D. 植物体细胞杂交获得的新个体与亲代之间存在生殖隔离
【答案】A
【解析】
【分析】1、有性杂交是两个体的配子结合，形成受精卵，由受精卵发育成个体。
2、植物体细胞杂交是两个不同物种的体细胞，在一定的条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。
3、植物体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍，能够打破物种生殖隔离的限制。
详解】A、传统植物杂交涉及有丝分裂、减数分裂和细胞分化；而植物体细胞杂交不涉及减数分裂，A错误；
B、传统植物杂交为有性杂交，涉及的变异类型是基因重组，植物体细胞杂交涉及的变异类型是染色体变异，B正确；
C、传统植物杂交与植物体细胞杂交都能使两个亲本的一些性状组合于新个体，C正确；
D、有性杂交一般发生在同种生物之间，而植物体细胞杂交打破了生殖隔离，能克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确。
故选A。
15. 下列有关植物细胞工程应用叙述错误的是（ ）
A. 诱变处理愈伤组织为了获得基因重组的新品种
B. 植物花粉粒可作为培养单倍体植株的理想材料
C. 利用植物的茎尖进行组织培养可培育出脱毒苗
D. 植物体细胞杂交技术可用于多倍体植株的培育
【答案】A
【解析】
【分析】植物细胞工程技术的应用：
1、植物繁殖的新途径：
(1)微型繁殖； (2) 作物脱毒； (2) 神奇的人工种子；
2、作物新品种的培育：
(1)单倍体育种；
(2)突变体的利用；
3、细胞产物的工厂化生产 (利用的技术: 植物组织培养技术)。
【详解】A、愈伤组织细胞分裂旺盛，经诱变处理，有利于获得突变个体，但不能获得基因重组的新品中，A错误；
B、植物花粉粒经离体培养可获得单倍体植株，故植物花粉粒可作为培养单倍体植株的理想材料，B正确；
C、长期进行无性繁殖的作物，病毒在体内逐年积累，就会导致作物产量下降，品质变差，则利用茎尖进行组织培养，可以获得脱毒苗，C正确；
D、植物体细胞杂交技术培育出的植物两个细胞融合后获得多倍体细胞，再经组织培养后可获得多倍体植株，D正确。
故选A。
16. Vero细胞系来源于非洲绿猴肾上皮细胞，将新型冠状病毒接种到Vero细胞后，经Vero细胞培养、新型冠状病毒灭活及提纯，可制成新型冠状病毒灭活疫苗。下列叙述错误的是（ ）
A. Vero细胞可作为新型冠状病毒大量繁殖的“培养基”
B. 培养Vero细胞时需定期更换培养液
C. 每传代一次，培养瓶中的Vero细胞就分裂一次
D. 分瓶前需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的Vero细胞
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】A、分析题干可知，Vero细胞可作为新型冠状病毒大量繁殖的“培养基”，A正确；
B、培养Vero细胞时，培养液需要定期更换，及时清除代谢产物，以保证细胞培养的无毒的环境，B正确;
C、每传代一次，培养瓶中的Vero细胞可能分裂多次，C错误；
D、分瓶前需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的Vero细胞，这样可获得单细胞悬液以便可以进行后续的传代培养，D正确。
故选C。
17. 关于ES细胞和iPS细胞及其应用的说法，正确的是（ ）
A. ES细胞能分化成各种细胞，但不能形成完整个体
B. ES细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组织
C. iPS细胞只能从胚胎中获取用于治疗人类的各种疾病
D. iPS细胞应用于治疗人类疾病可降低免疫排斥的风险
【答案】D
【解析】
【分析】在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造，iPS（诱导性多能干细胞）指通过导入特定的转录因子将终末分化的体细胞重编程为多能性干细胞细胞，分化成多种组织细胞，说明基因选择性表达，它与其他细胞含有相同的基因。
【详解】A、ES细胞来源于早期胚胎细胞，在功能上，具有发育的全能性，能形成各种功能的细胞，在特定环境下能形成生物个体，A错误；
B、ES细胞存在于早期胚胎或原始性腺，不存在于成体组织内，B错误；
C、iPS细胞是人工诱导的多能干细胞，动物本身不具有，C错误；
D、iPS细胞是人工诱导产生的，能分化成多种组织细胞，因而应用于治疗人类疾病可降低免疫排斥的风险，D正确。
故选D。
18. 如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ）
A. 双抗可同时与2种抗原结合
B. 利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C. 筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原
D. 同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞
【答案】D
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2种抗原结合，A正确；
B、 根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物发挥相应的作用，B正确；
C、在两种不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成两种抗体，因此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原-抗体检测，从而实现对双抗的筛选，C正确；
D、 同时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，D错误。
故选D。
19. 下列关于动物细胞工程和胚胎工程的相关叙述正确的是（ ）
A. 动物细胞培养时需提供95%的O2和5%的CO2的气体环境
B. 将人的成纤维细胞诱导为肝细胞表明，已分化的细胞其分化后的状态是可以改变的
C. 高等哺乳动物受精卵早期分裂发生在输卵管，卵裂期细胞数量增多，胚胎体积增大
D. “克隆羊”、“试管羊”在培育过程中，都用到了核移植技术和胚胎移植技术
【答案】B
【解析】
【分析】动物培养条件：
（1）无菌、无毒的环境:①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。
（2）营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。
（3）温度和PH。
（4）气体环境:95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。
【详解】A、动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，A错误；
B、将人的成纤维细胞诱导为肝细胞表明，说明分化了的细胞其分化后的状态是可以改变的，B正确;
C、受精作用和卵裂过程发生于输卵管，卵裂期细胞数量不断增多，但胚胎体积不变，甚至略微减小，C错误;
D、“克隆羊”、“试管羊”在培育过程中，都用到了动物细胞培养技术和胚胎移植技术，但只有“克隆羊”应用了核移植，D错误。
故选B。
20. 图中甲、乙、丙表示生物个体或结构，①～③表示相应过程。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 若甲为成熟哺乳动物个体，乙为配子，丙为受精卵，则基因重组发生在②过程中
B. 若甲为成年母羊，乙为植入甲细胞核的卵母细胞，丙为重组细胞，则③是胚胎移植
C. 若甲为外植体，乙为愈伤组织，丙为胚状体，①②过程的培养基成分相同
D. 若甲为二倍体植株，乙为花粉粒，丙为单倍体，则③过程可用秋水仙素处理萌发的种子使染色体数目加倍
【答案】B
【解析】
【分析】1、单倍体育种过程：植物通过减数分裂产生配子，配子通过花药离体培养形成单倍体，再经过人工诱导染色体数目加倍成为可育的纯合体。
2、植物组织培养过程：外植体通过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化形成胚状体，胚状体继续发育形成新植物体。
【详解】A、若甲为成熟哺乳动物个体，乙为配子，丙为受精卵，则①为减数分裂过程，②为受精过程，基因重组发生在①减数分裂过程中，A错误；
B、若甲为成年母羊，乙为植入甲细胞核的卵母细胞，丙为重组细胞，则①为去核过程，②为核注入融合，③表示胚胎移植，B正确；
C、若甲为外植体，乙为愈伤组织，丙为胚状体，则①为脱分化，②为再分化，则植物组织培养过程的脱分化和再分化过程中培养基成分不相同，C错误；
D、若甲为二倍体植株，乙通常为花粉粒，丙为单倍体，丙一般高度不育，无法形成种子， 因此只能用秋水仙素处理幼苗，而不是萌发的种子，D错误。
故选B。
二、多项选择题
21. 青霉菌通常在缺乏葡萄糖时分泌青霉素杀死细菌，以保证生存所需的能量供应。下列关于发酵工程生产青霉素的叙述正确的是（ ）
A. 发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖
B. 选育出的高产菌株发酵前还需要进行扩大培养
C. 青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌
D. 发酵过程中，需随时检测青霉菌的数量和产物浓度等
【答案】ABD
【解析】
【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。
【详解】A、该发酵过程要生产青霉素，青霉菌通常在缺乏葡萄糖时分泌青霉素，但发酵液中的葡萄糖浓度太低时，酵母菌自身生存所需的能量减少，不利于青霉菌的增殖，因此发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖，A正确；
B、工业用高产青霉菌株是通过诱变育种选育，经扩大培养纯化后，才可接种到发酵罐中进行工业化生产，B正确；
C、为了防止细菌等微生物的污染，获得纯净的青霉素，发酵罐仍需严格灭菌，C错误；
D、发酵过程中必须严格控制好温度、pH、溶解氧、罐压、营养物质等发酵条件，随时检测青霉菌的数量和产物浓度等，使发酵全过程处于最佳状态，D正确。
故选ABD。
22. 下列关于利用发酵工程生产单细胞蛋白，制备微生物饲料的说法正确的（ ）
A. 单细胞蛋白可提高奶牛的产奶率、家禽的产蛋率
B. 可采用过滤、沉淀等方法将单细胞蛋白与发酵液分离
C. 微生物饲料主要利用微生物大量繁殖产生蛋白类代谢物制成
D. 单细胞蛋白不仅含有丰富的蛋白质，还含有糖类、脂质等物质
【答案】ABD
【解析】
【分析】微生物含有丰富的蛋白质，以淀粉或纤维素的水解液，制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得了大量的微生物菌体，即单细胞蛋白，用单细胞蛋白制成的微生物饲料，能使家禽、家畜增重快，产奶或产蛋量显著提高。
【详解】A、用单细胞蛋白制成的微生物饲料，能使家畜、家禽增重加快，产奶或产蛋量显著提高，A正确；
B、分离、提纯酵母菌发酵生产的单细胞蛋白，指的就是单细胞菌体，可采用过滤、沉淀等方法从培养液中分离，B正确；
C、微生物饲料主要是利用微生物大量繁殖产生的高蛋白菌体来生产饲料的，能使家畜、家禽增重快，产奶或产蛋量显著提高，C错误；
D、微生物蛋白是微生物菌体，不仅含有丰富的蛋白质，还含有糖类、脂质等物质，D正确。
故选ABD。
23. 下列育种过程能体现细胞或细胞核全能性的是（ ）
A. 将悬铃木无菌苗叶片细胞制成原生质体，培养得到再生植株
B. 将经流感病毒外壳蛋白免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得流感抗体
C. 将非洲爪蟾的蝌蚪的肠上皮细胞的核移植到去核卵母细胞中获得新个体
D. 将中华猕猴桃叶肉细胞与狗枣猕猴桃叶肉细胞融合，获得耐寒性提高的新品种
【答案】ACD
【解析】
【分析】全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成各种组织或完整个体的潜能。动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体没有形成各种组织或个体，不能体现细胞的全能性。
【详解】A、将悬铃木无菌苗叶片细胞制成原生质体，培养得到再生植株，利用了植物组织培养技术，体现了细胞具有全能性，A符合题意；
B、将经流病毒外壳蛋白免疫的小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合，培养获得抗流感抗体，但没有形成完整的个体，不能体现细胞的全能性，B不符合题意；
C、将非洲爪蟾的蝌蚪的肠上皮细胞的核移植到去核卵细胞中获得新个体，体现了细胞核的全能性，C符合题意；
D、将中华猕猴桃叶肉细胞与狗枣猕猴桃叶肉细胞融合获得耐寒性提高的新品种，利用了植物体细胞杂交技术，体现了细胞具有全能性，D符合题意。
故选ACD。
24. 试管婴儿包括体外受精、体外胚胎培养和胚胎移植三个阶段。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 体外胚胎培养后，需要检查才能移植进入母体子宫
B. 精子接触透明带时，卵细胞会发生阻止多精入卵的生理反应
C. 从父亲体内取出的精子需要经过获能处理才能用于体外受精
D. 胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
【答案】ACD
【解析】
【分析】试管婴儿是指用人工的方法使精子与卵细胞在体外的试管中结合形成受精卵并进行早期胚胎发育，然后把胚胎移植进母体的子宫内，胚胎和胎儿的发育在子宫中进行，直至发育成熟，分娩产出。可见，“试管婴儿”的生命始于一个细胞--受精卵，受精的部位是试管，其胚胎发育的主要场所是子宫，试管只是初期发育的场所。
【详解】A、体外胚胎培养后，通过筛选出发育完好的胚胎移植进入母体子宫，即需要检查才能移植进入母体子宫，A正确；
B、在精子触及卵细胞膜的瞬间，会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，这个反应称作透明带反应，B错误；
C、体外受精之前，要对精子进行获能处理，采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精，C正确；
D、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，该技术的理论基础是受体子宫对移入的胚胎不发生免疫排斥，D正确。
故选ACD。
25. “筛选”是生物工程中常用的技术手段。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 利用以尿素为唯一氮源的培养基可以筛选出尿素分解菌
B. 在小鼠胚胎细胞原代培养过程中，一定能筛选出能无限增殖的细胞
C. 植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选
D. 单克隆抗体制备过程中，第一次筛选出的细胞既能无限增殖又能产生所需抗体
【答案】AC
【解析】
【分析】微生物筛选的关键是选择培养基的使用，通过选择培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他微生物在选择培养基上是不能生存或生存受到抑制。
【详解】A、以尿素为唯一氮源的培养基上，其他微生物因为缺少氮源而不能生存，故可以筛选出尿素分解菌，A正确；
B、在小鼠胚胎细胞原代培养过程中，细胞分裂能保持正常的二倍体核型，故不一定能筛选出能无限增殖的细胞，B错误；
C、植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞有多种融合类型，故需要进行筛选，C正确；
D、单克隆抗体制备过程中，第一次筛选出细胞既能无限增殖又能产生特定抗体，但不一定是所需抗体，D错误。
故选AC。
三、非选择题
26. 太原宁化府老陈醋传承至今超过640年，是山西陈醋酿造工艺的代表。其采取纯高粱双固曲法酿制，生产流程如下图所示。请回答下列问题：
（1）从自然界分离的菌种往往达不到工业生产要求，从改变微生物遗传特性的角度考虑，选育出工业发酵生产醋酸的优良菌种的方法有___________；优质菌种不光要产酸量高，还要有耐___________的特点。
（2）工业发酵前需要对菌种用___________（填“固体”或“液体”）培养基进行扩大培养，扩大培养的目的是______________________。
（3）“双固曲法”酿制陈醋时，高粱粉碎蒸料后需要冷却才能加入大曲，原因是______________________。生产过程先进行酒精发酵，请写出醋酸菌以酒精为底物进行发酵的反应简式______________________。
（4）在发酵过程中，还要严格控制发酵条件如___________等（至少答出两点）。与家庭作坊酿制技术相比，现代工业酿醋的优点为______________________（至少答出两点）。
【答案】（1） ①. 诱变育种（或基因工程育种） ②. 酸（或酒精）
（2） ①. 液体 ②. 增加菌种的数量
（3） ①. 防止高温杀死菌种 ②. C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量
（4） ①. 温度、pH、溶解氧等 ②. 生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉、产物专一、品质稳定、缩短发酵时间
【解析】
【分析】发酵工程的基本环节:
(1)菌种的选育：性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。
(2)扩大培养：在发酵之前还需要对菌种进行扩大培养。
(3)培养基的配制：在菌种确定之后，要选择原料制备培养基。在生产实践中，培养基的配方要经过反复试验才能确定。
(4)灭菌：培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。
(5)接种：将菌种接种到发酵罐培养液中。
(6)发酵：这是发酵工程的中心环节。①在发酵过程中，要随时检测培养波中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。②要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。
(7)产品的分离、提纯：①如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后采用过滤沉淀等方法将菌体分离和干燥，即得到产品。②如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
【小问1详解】
在微生物的菌种培育上，改变微生物遗传特性的优良菌种的育种方法主要有诱变育种、基因工程育种、细胞工程育种等。优质菌种不光要产酸量高，还要有耐酸（或酒精）的特点。
【小问2详解】
扩大培养时，使用的培养基是液体培养基，这种培养基有助于所选择的菌种的生长，从用途来看是选择培养基。扩大培养的目的是增大菌种浓度。
【小问3详解】
为了防止高温杀死菌种，高粱粉碎蒸料后需要冷却才能加入大曲；醋酸菌以酒精为底物进行发酵的反应简式C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O+能量。
【小问4详解】
温度、pH、溶解氧等因素都会影响发酵进行，故在发酵过程中，还要严格控制发酵条件如温度、pH、溶解氧等。与家庭作坊酿制技术相比，现代工业酿醋的优点为生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉、产物专一、品质稳定、缩短发酵时间。
27. 深海是由高压、低温、缺氧等组成的极端环境，我国科学家在南海科考过程中，采集了某海域深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。据图回答下列问题：
（1）研究人员先制备不同的培养基，然后采用___________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，培养一段时间后获得了含拟杆菌的混合培养物，为了获得纯培养物，除了平板划线法，还可采用___________法。据图分析，拟杆菌新菌株在以___________为碳源时生长状况最好。
（2）研究发现，将采集的样品置于不同碳源的培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因可能是______________________。（答一点即可）
（3）藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是______________________。
（4）深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，还可能有___________特性。
【答案】（1） ①. 湿热灭菌（高压蒸汽灭菌） ②. 稀释涂布平板 ③. 纤维素
（2）某些微生物只能利用深海冷泉中的特有物质才能生存（或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活）
（3）拟杆菌作为分解者，可将碎屑中的有机物分解为无机物，加快碳循环
（4）耐低温（或耐高压）
【解析】
【分析】1.进行微生物纯培养时，人们需要按照微生物对营养物质的不同需求配制培养基，满足微生物对水、无机盐、碳源、氮源以及pH、O2、特殊营养物质（如维生素）的需求。
2.微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。操作方法各不相同，但是核心都是要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。
【小问1详解】
培养基配制后通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。接种时，可以采用稀释涂布平板法或平板划线法，将菌种分散在固体培养基上，经过培养得到单菌落，从而获得纯净培养物。分析图中曲线可知，在以纤维素为碳源的培养基中，细胞数量最多，可推知拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好。
【小问2详解】
根据题意可知，深海冷泉中存在的某些微生物，只有利用冷泉中的特有物质才能生存，或着只能在深海冷泉的特定环境中才能存活，故在缺少深海冷泉特有物质或缺少特定环境的情况下，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍可能有很多微生物不能被分离筛选出来。
【小问3详解】
藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。而这些碎屑中含有机物，而这些物质进入海底能作为其中的微生物的营养，据此可推测，从生态系统组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用是作为分解者，可将碎屑中的有机物分解为无机物，实现碳元素向无机环境的返回。
【小问4详解】
深海冷泉环境特殊，该环境中温度低，压力高，据此可推测此环境下生存的拟杆菌分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性（高效性、专一性）外，还可能有耐低温（或耐高压）特性。
28. 育种工作者利用不同的方法进行了如下实验。请据图回答下列问题：
（1）植物组织培养常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和有机物，在配制好的培养基中，常常需要添加___________，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种培养2天后发现外植体边缘局部污染，原因可能是______________________。
（2）图I过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗A的过程要经过___________、再分化形成幼苗，该过程依据的原理是______________________。
（3）已知番茄红果（Y）对黄果（y）为显性，少室（M）对多室（m）为显性，控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。用红果多室（Yymm）番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验，则Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是___________。Ⅲ过程中植物体C的基因型为______________________。
（4）Ⅳ过程需对番茄和马铃薯的韧皮部细胞去除细胞壁后使用___________等物理法诱导融合形成具有活力的___________。获得杂种细胞B的技术是___________，这种技术在育种工作中具有广泛的应用价值，其优点是______________________。
【答案】（1） ①. 植物激素 ②. 外植体消毒不彻底
（2） ①. 脱分化 ②. 植物细胞具有全能性
（3） ①. 有丝分裂 ②. YYmm##Yymm##yymm
（4） ①. 电融合法##离心法 ②. 原生质体##杂种细胞 ③. 植物体细胞杂交 ④. 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培养植物新品种
【解析】
【分析】分析题图：Ⅰ表示将番茄果皮细胞进行植物组织培养形成植株A的过程；Ⅱ表示先花药离体培养形成单倍体（幼苗B），再用秋水仙素处理得到纯合体植株B的过程，属于单倍体育种；Ⅲ表示花粉细胞融合形成细胞A，再采用植物组织培养得到植株C的过程；Ⅳ表示采用植物体细胞杂交技术得到杂种植株D的过程。
【小问1详解】
植物组织培养常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和有机物，在配制好的培养基中，常常需要添加植物激素（细胞分裂素和生长素），而且要注意添加的比例， 生长素用量比细胞分裂素用量， 比例适中时，促进愈伤组织的生长 。若接种后2-5天，发现外植体边缘局部污染，原因可能是外植体消毒不彻底。
【小问2详解】
图Ⅰ过程由番茄韧皮部细胞经组织培养形成植物体A的过程，形成幼苗A的过程要经过脱分化形成愈伤组织，该阶段不需要光照，再经过再分化形成幼苗，该过程依据的原理是植物细胞具有全能性。
【小问3详解】
Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗B采用的是花药离体培养技术，该过程中细胞通过有丝分裂方式进行增殖。培育植物体B的方法（Ⅱ）称为单倍体育种．红果多室（Yymm）番茄植株的花粉有两种基因型，即Ym、ym，而植物体C是由花粉细胞两两融合形成的细胞A（基因型为YYmm或Yymm或yymm）再经过植物组织培养形成的，所以其基因型为YYmm或Yymm或yymm，共3种。
【小问4详解】
诱导植物细胞融合的方法有：物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂，因此Ⅳ过程需对番茄和马铃薯的韧皮部细胞去除细胞壁后使用电融合法（或离心法）等物理法诱导融合形成具有活力的原生质体（或杂种细胞）。植物体细胞杂交技术就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术，杂种细胞B是由番茄韧皮部细胞和马铃薯韧皮部细胞融合形成的，因此获得杂种细胞B的技术是植物体细胞杂交，该技术优点是打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培养植物新品种。
29. 据《细胞报告》报道，我国科学家成功将小鼠的颗粒细胞（卵泡中卵母细胞周围的细胞）转化为GV卵母细胞（尚未完全恢复减数分裂），进而恢复减数分裂能力并顺利培育出健康后代（如下图）。据图回答下列问题：
（1）图中过程②为___________，X细胞需要培养到___________（时期）才具备与精子受精的能力。
（2）图示过程③运用了胚胎工程中的___________和___________两大技术，该健康幼鼠是通过___________（填“无性”或“有性”）生殖方式获得的。为了保证移植的成功率，需要对供体母鼠和受体母鼠进行___________处理。
（3）胚胎移植成功原因之一是外来胚胎与受体母鼠的子宫可建立正常的生理和组织联系，一般情况下供体胚胎遗传特性在孕育过程中___________（填“受”或“不受”）受体母鼠影响。若想获得一卵双胎或多胎，应结合___________技术，一般处理___________（时期）的胚胎，该技术的要点在于将内细胞团___________。
（4）科学家将该项技术应用于保护濒危动物，其意义是______________________。
【答案】（1） ①. 减数分裂 ②. MⅡ
（2） ①. 体外受精 ②. 胚胎移植（顺序可反） ③. 有性 ④. 同期发情
（3） ①. 不受 ②. 胚胎分割 ③. 桑葚胚或囊胚 ④. 均等分割
（4）解决因卵细胞不足导致后代数量有限的问题
【解析】
【分析】分析题图：①表示卵泡中的颗粒细胞经诱导成为多能干细胞，②表示GV卵母细胞减数分裂产生卵细胞过程，X应该为卵细胞；③涉及体外受精、早期胚胎培养及胚胎移植等技术。
【小问1详解】
图中X细胞能与精子结合形成受精卵，则X应该为卵细胞，GV卵母细胞需要经过减数分裂才能形成卵细胞，因此过程②表示GV卵母细胞减数分裂产生卵细胞过程。卵细胞培养到减数第二次分裂中期时，才具有与精子受精的能力，因此X细胞需要培养到MⅡ才具备与精子受精的能力。
【小问2详解】
图中过程③涉及到卵细胞和精子结合形成受精卵，受精卵发育形成早期胚胎，胚胎移植到受体子宫，最后生出健康的幼鼠，此过程运用了胚胎工程中的体外受精、胚胎移植两大技术。该健康幼鼠形成过程中经过两性生殖细胞的融合（卵细胞和精子结合），此生殖方式属于有性生殖。动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的，这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境，据此可知，胚胎移植时需要对供体母鼠和受体母鼠进行同期发情处理，为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境，保证了移植的成功率。
【小问3详解】
外来胚胎与受体母鼠的子宫可建立正常的生理和组织联系，一般情况下供体胚胎遗传特性在孕育过程中不受体母鼠影响。由于来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此要获得同卵双胎或多胎的个体，应采用胚胎分割技术，进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
【小问4详解】
该技术利用小鼠的颗粒细胞（卵泡中卵母细胞周围的细胞）转化为GV卵母细胞（尚未完全恢复减数分裂），进而恢复减数分裂能力，形成卵细胞，最终顺利培育出健康后代，应用于保护濒危动物上，可解决因卵细胞不足导致后代数量有限的问题。
30. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交—杂交瘤细胞技术来制备。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术生产能同时识别癌胚抗原和长春碱（从长春花中提取的一种具有良好的抗肿瘤作用的物质）的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题：
（1）与植物体细胞杂交相比，图1中过程②特有的诱导融合的方法是___________，过程②选用的骨髓瘤细胞___________（填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行___________和___________，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
（3）图1方框内至少需要经过___________次筛选才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为___________需进行传代培养。
（4）据图2分析，与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是______________________。
【答案】（1） ①. 灭活的病毒 ②. 不能
（2） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测
（3） ①. 2 ②. 接触抑制##细胞密度过大##有害代谢物的积累##培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻
（4）双特异性单克隆抗体能将长春碱等抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞
【解析】
【分析】根据题图分析，双特导性抗体制备流程为先给小鼠注射特定癌胚抗原引发免疫反应，然后获取已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再把单克隆杂交瘤细胞与经注射长春碱后从小鼠中获的免疫的B淋巴细胞再杂交，得到单克隆杂交一杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特导性单克隆抗体。
【小问1详解】
诱导动物细胞融合的方法有：物理法(离心、振动)，化学法(聚乙二醇)，生物法（灭活的病毒），与植物体细胞杂交相比，特有的方法是灭活的病毒。小鼠B淋巴细胞在HAT培养基上可正常存活，但不能繁殖，骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长，骨髓瘤细胞与B淋巴细胞之间形成的融合细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖。
【小问2详解】
为选出能产生专一抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有一个细胞，克隆化培养然后筛选出专一抗体检测呈阳性的细胞。单克隆抗体具有持异性强，灵敏度高的特点，并且可大量制备。
【小问3详解】
图1方框内需要经过2次筛选，先筛选得到对长春碱免疫的B淋巴细胞，后筛选出杂交一杂交瘤细胞，体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为细胞密度过大、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
【小问4详解】
双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，这是利用单克抗体治疗疾病对人体的副作用更小的原因。
31. 单克隆抗体在防治H7N9型禽流感上具有显著疗效。
（1）在制备H7N9病毒的单克隆抗体X的过程中，经多次筛选获得能产生单抗X的杂交瘤细胞，并进行体外培养，培养过程中需要定期更换培养液，其目的是_________________________________。
（2）制备的单抗X与常规的血清抗体相比，其优点是______________________（至少答出两点）。
（3）为了进一步研究单抗X的效果及作用机制，科学家开展了如下实验：
实验一：在体外将单抗X、已知的H7N9抗体Y分别与HA蛋白（H7N9病毒表面的一种蛋白）混合，检测它们对HA蛋白的亲和力。实验结果如下表所示：（注：KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高）
抗体种类
单抗X
抗体Y
KD
5.32×10-9M
1.95×10-9M
实验二：以一定浓度的H7N9病毒感染小鼠，之后分别检测单抗X和抗体Y的治疗效果，发现单抗X的体内治疗效果优于抗体Y。
①实验一结果表明：对HTN9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是___________。
②分析实验一和实验二的结果差异，研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过结合巨噬细胞表面受体，增强其吞噬能力，进而清除被病毒感染的靶细胞，单抗X的增强效果比较明显。
请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，设计实验验证上述假说。简要写出实验思路：___________________________________。
【答案】（1）清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
（2）特异性强、灵敏度高、可大量制备
（3） ①. 抗体Y ②. 将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。
【解析】
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。
【小问1详解】
在制备H7N9病毒的单克隆抗体X的过程中，经多次筛选获得能产生单抗X的杂交瘤细胞，并进行体外培养，培养过程中需要定期更换培养液，其目的是一方面保证细胞培养过程中营养物质的供应，另一方面清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
【小问2详解】
制备的单抗X与常规的血清抗体相比，单克隆抗体是由单个杂交瘤细胞经过分裂代谢产生的，因而其优点表现为特异性强、灵敏度高、可大量制备。
【小问3详解】
①结合题意可知，KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高，因而实验一结果表明：抗体Y对HTN9病毒HA蛋白的亲和力更高。
②实验二的结果显示，单抗X的体内治疗效果优于抗体Y。为此研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过结合巨噬细胞表面受体，增强其吞噬能力，进而清除被病毒感染的靶细胞，单抗X的增强效果比较明显。请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，本实验的目的是验证抗体X除了中和病毒活性之外，还可以通过结合巨噬细胞表面受体，增强其吞噬能力，进而清除被病毒感染的靶细胞，因此该实验的自变量是抗体的种类，因变量是肺上皮细胞裂解的百分比，实验思路可描述如下：将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比，实验结果应该表现为加热抗体X的B组肺上皮细胞裂解百分比更高。
2022～2023学年第二学期高二年级期中质量监测
生物学试卷
一、单项选择题
1. 制作传统发酵食品利用的主要微生物相关信息如下表所示，其中错误的是（ ）
产品名称
腐乳
酸奶
果酒
果醋
异化作用类型
①需氧型
②厌氧型
③兼性厌氧型
需氧型
是否有成形细胞核
是
②是
是
④否
A. ① B. ② C. ③ D. ④
【答案】B
【解析】
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；果醋制作所需的菌种主要是醋酸菌，在有氧条件下将糖类或乙醇发酵为乙酸。
【详解】A、制作腐乳时利用的微生物主要是毛霉，为真核生物，有成形的细胞核，其异化作用类型为需氧型，A正确；
B、制作酸奶主要利用乳酸菌，为原核生物，无成形的细胞核，异化作用类型为厌氧型，B错误；
C、果酒制作所需的微生物主要是酵母菌，属于真核生物，有成形的细胞核，其异化作用类型为兼性厌氧型，C正确；
D、果醋制作所需的菌种主要是醋酸菌，属于原核生物，无成形的细胞核，其异化作用类型为需氧型，D正确。
故选B。
2. 泡菜古称葅，北魏《齐民要术》有关于泡菜制作的记载：“作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内（纳）瓮中。其洗菜盐水，澄取清者，泻著瓮中，令没菜把即止”。下列有关叙述错误的是（ ）
A. “作盐水，令极咸”，说明盐水浓度越高，泡菜制作效果越好
B. “令没菜把即止”主要为泡菜制作中乳酸发酵创设无氧条件
C. 不同地区制作的泡菜风味不同，可能与其中辅料的差异有关
D. “其洗菜盐水，澄取清者，泻著瓮中”，此过程可为发酵提供菌种
【答案】A
【解析】
【分析】泡菜的制作原理：在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。在泡菜制作的过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐用量。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。
【详解】A、制作泡菜时，清水和食盐的百分比为5%~20%为宜，并不是盐水浓度越高越好，A错误；
B、“令没菜把即止”的意思是将盐水加到淹没蔬菜为止，这是因为乳酸菌是厌氧微生物，这样操作的主要目的是为乳酸菌的发酵提供无氧条件，让乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，B正确；
C、不同地区制作的泡菜风味不同，可能与其中辅料的差异有关，C正确；
D、由于蔬菜上原本就有可能附着有乳酸菌，用盐水清洗泡菜时，可以将原来附着在蔬菜上的乳酸菌一并洗到盐水中，故再倒入菜坛中的“洗菜盐水”也可能含有泡菜发酵的乳酸菌，D正确。
故选A。
3. 获得纯净微生物培养的关键是防止外来杂菌的入侵。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 灭菌可杀死物体内外的所有芽孢和孢子
B. 超净工作台在使用前可用紫外线照射进行消毒
C. 涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌
D. 家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌处理
【答案】D
【解析】
【分析】1、消毒是杀灭或清除传播媒介上的微生物，达到无害化处理，但不一定能杀死芽孢和孢子。消毒的方法包括煮沸消毒、紫外线消毒、化学药剂消毒等。
2、灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物(包括芽孢和孢子)。常用方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
【详解】A、灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物，包括芽孢和孢子，A正确；
B、接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射进行消毒，使用过程中不能用紫外线照射，B正确；
C、接种时为防止杂菌污染，接种前将涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌，C正确；
D、家庭制作葡萄酒时要将容器进行灭菌处理，但不能对葡萄进行灭菌，否则会杀灭葡萄表面的酵母菌，使发酵无法进行，D错误。
故选D。
4. 参与黄豆酱发酵的主要微生物有霉菌、酵母等。下面是传统黄豆酱的制作过程，相关叙述错误的是（ ）
①黄豆蒸煮沥干，裹上面粉→②均匀铺摊，用茅草等覆盖后置于不通风、阴凉处，7d 后长满酱黄→③将酱黄爆晒后加盐水浸透→④晒酱，后发酵成熟
A. 过程①中黄豆表面包裹的面粉，可为微生物生长提供碳源和能源
B. 过程②中将黄豆置于不通风环境中， 目的是获得菌种并利于其生长
C. 过程③中加入的盐水具有灭菌作用，因此加入的盐水不必煮开
D. 过程④中耐盐酵母产生酒精等物质， 有利于形成特定风味和香气
【答案】C
【解析】
【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。
2、腐乳制作的菌种主要是毛霉，代谢类型是需氧型真菌。毛霉生长的最佳温度是在15℃～18℃，保持一定湿度。
【详解】A、面粉中含有淀粉等物质，可为微生物生长提供碳源和能源，A正确；
B、微生物进行发酵需要适宜的条件，过程②中将黄豆置于不通风环境中， 目的是获得菌种并利于其生长，B正确；
C、为防止杂菌的污染，加入的盐水应先煮沸再冷却，C错误；
D、过程④是后发酵成熟，其中耐盐酵母产生酒精等物质， 有利于形成特定风味和香气，利于黄豆酱的风味形成，D正确。
故选C。
5. 下列有关微生物培养基制备的叙述错误的是（ ）
A. 培养乳酸杆菌时需添加维生素
B. 配制培养基时应先调pH后灭菌
C. 琼脂的主要作用是为微生物提供能量
D. K2HPO4、Na2HPO4可用于维持培养基的pH
【答案】C
【解析】
【分析】培养基的概念及营养构成
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质；
（2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求；例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】A、培养乳酸杆菌时需添加维生素，从而促进乳酸杆菌的生长，A正确；
B、配制培养基时应先调pH后灭菌，这样可以避免调节pH过程中引起培养基被污染，B正确；
C、琼脂的主要作用是作为凝固剂，获得固体培养基，C错误；
D、K2HPO4、Na2HPO4作为缓冲物质，可用于维持培养基的pH，D正确。
故选C。
6. 下列有关微生物纯培养实验的叙述错误的是（ ）
A. 培养过程中培养基的pH可能发生改变
B. 实验使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理
C. 实验包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤
D. 接种后立即将平板倒置培养，可避免冷凝水造成的污染
【答案】D
【解析】
【分析】无菌技术的主要内容:
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的器皿接种用具和培养基等器具进行灭菌。
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
【详解】A、培养过程中培养基的pH可能发生改变，如随着培养液中酵母菌密度增大，呼吸作用强，产生的二氧化碳增多，pH下降，A正确；
B、为了防止环境污染或感染操作者，使用过的培养基在丢弃之前要进行灭菌处理，B正确；
C、微生物的纯化培养的步骤包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤，其目的是获得纯培养物，C正确；
D、倒好平板应待其冷却凝固后，再倒置，防止冷凝水落在培养基上造成污染，D错误。
故选D。
7. 将某细菌接种在固体培养基上，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 最后一次划线不能与其它划线区相连
B. 操作中灼烧接种环的主要目的是防止实验人员被感染
C. 为了分离得到纯培养物，应从图中Ⅲ区挑取单菌落
D. 上图图示方法通过在培养基表面连续划线将菌种分散
【答案】B
【解析】
【分析】平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
【详解】A、最后一次划线可能形成单个菌落，不能与其它菌体密集的划线区相连，A正确；
B、操作中灼烧接种环的主要目的是保证划线的菌种来自上一次划线的末端，这样随着连续划线操作可得到单菌落，B错误；
C、为了分离得到纯培养物，应从图中Ⅲ区挑取单菌落，因为该区域能够获得单个细胞长成的菌落，C正确；
D、上图图示方法通过在培养基表面连续划线将菌种分散，最终获得单菌落，该接种方法叫做平板划线法，D正确。
故选B。
8. 已知固体培养基会因碳酸钙存在而呈乳白色，且乳酸菌能分解培养基中的碳酸钙。某同学以新鲜的泡菜滤液为材料进行了分离纯化乳酸菌的实验。下列叙述错误的是（ ）
A. 分离纯化所用的培养基都要进行严格的灭菌处理
B. 分离纯化乳酸菌时，应挑选出具有透明圈菌落作为候选菌
C. 分离纯化乳酸菌时，需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释
D. 加入碳酸钙培养基属于选择培养基，且碳酸钙作为唯一碳源
【答案】D
【解析】
【分析】培养基的概念及营养构成
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质；
（2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】A、微生物实验中使用的培养基必须要经过灭菌处理，以防止杂菌污染，确保实验能够顺利进行，分离纯化所用的培养基也要进行严格的灭菌处理，A正确；
B、由题意可知，乳酸能分解培养基中碳酸钙形成透明圈，故分离纯化乳酸菌时，应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌，B正确；
C、分离纯化乳酸菌时，为了获得单个菌落，需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，将稀释液均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，C正确；
D、题意显示，乳酸能分解培养基中碳酸钙，故分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸，形成透明圈，有利于乳酸菌的鉴别，该培养基属于鉴别培养基，且乳酸菌不能利用碳酸钙作为碳源，D错误。
故选D。
9. 为了检验抗生素A与抗生素B的杀菌效果，设置如下图所示实验方案。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 接种时，需将测试菌液均匀地涂布在平板上
B. 只有细菌区作为对照组，使实验结果更有说服力
C. 在只有细菌的区域中不存在对抗生素A、B都敏感的细菌
D. 若抗生素A区菌落数多于B区，则抗生素B的抑菌作用较强
【答案】C
【解析】
【分析】为了检验抗生素A与抗生素B的杀菌效果，则实验的自变量为抗生素的种类。
【详解】A、涂布时应用移液器取样至培养基上，然后用涂布器涂布均匀，A正确；
B、为了检验抗生素A与抗生素B的杀菌效果，设计只有细菌区作为对照组，使实验结果更有说服力，B正确；
C、在只有细菌的区域中存在对抗生素A、B都敏感的细菌，也存在只对对抗生素A敏感的细菌，也存在只对对抗生素B敏感的细菌，也存在对对抗生素A、B都不敏感的细菌，C错误；
D、若抗生素A区菌落数多于B区，则可说明抗生素B的抑菌作用较强，D正确。
故选C。
10. 生活污水中的微生物分解含硫蛋白，产生的硫化氢，可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究甲、乙菌是否产生硫化氢及运动能力，分别将两种菌穿刺接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，结果如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 乙菌的运动能力比甲菌强
B. 为不影响菌的运动需选用液体培养基
C. 该实验能计算出两种菌产生硫化氢的量
D. 甲、乙菌在培养基内部生长，一定属于厌氧菌
【答案】A
【解析】
【分析】题图分析，图中显示是穿刺接种的方法，根据题干中的信息“硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀”，所以可根据黑色沉淀的多少，来比较两种菌产生硫化氢的能力。
【详解】A、从图中可以看出甲菌在试管中分布范围小于乙菌，说明了乙菌的运动能力比甲菌强，A正确；
B、为不影响菌的运动需选用半固体培养基，B错误；
C、该实验可以根据黑色沉淀的多少初步比较细菌产生硫化氢的能力，但不能测定产生硫化氢的量，C错误；
D、甲、乙菌在培养基内部生长，未必一定属于厌氧菌，还可能是兼性厌氧微生物，D错误。
故选A。
11. 除草剂丙草胺能抑制土壤微生物的生长。为获得能分解丙草胺的微生物，研究人员从某地土壤中取样，将1mL土壤样液稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57和58。下列叙述错误的是（ ）
A. 一般选择菌落数为30～300的平板进行计数
B. 计算得出土壤样液中活菌大约为5.7×107个/L
C. 此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低
D. 显微镜直接计数法统计的是稀释液中的活菌数
【答案】D
【解析】
【分析】统计菌落数目的方法：
（1）显微镜直接计数法：
原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；
方法：用计数板计数；
缺点： 不能区分死菌与活菌。
（2）间接计数法 (活菌计数法)：
原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
注意事项：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
c、计算公式：每克样品中的菌株数= (c/V) ×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积 (mL)，M代表稀释倍数。
【详解】A、一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，A正确；
B、将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57，据此可得出每升样品中的活菌数为(56+58+57)/3=0.1×1000×100=5.7×107个，B正确；
C、由于两个或多个细菌形成一个菌落，所以统计的菌落数往往比实际的活菌数目低，C正确；
D、显微镜直接计数法统计的都是稀释液中所有个体的数目，包括死菌，D错误。
故选D。
12. 下列关于菊花组织培养的叙述错误的是（ ）
A. 外植体多选择幼嫩的茎段等分裂旺盛的部位
B. 为避免环境中微生物的污染，要对外植体进行灭菌处理
C. 试管苗移栽前要先打开封口膜或瓶盖，在培养箱中生长几日
D. 愈伤组织的形成一般不需要光照，后续过程需要给予适当光照
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体．植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、菊花的组织培养需要经过细胞的脱分化和再分化过程，外植体多选择幼嫩的茎段等分裂旺盛的部位，这样能提高组织培养的成功率，A正确；
B、植物组织培养时需要对外植体消毒，既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害，不能对其进行灭菌处理，B错误；
C、试管苗移栽前要先打开封口膜或瓶盖，在培养箱中生长几日，以锻炼试管苗适应外界环境的能力，C正确；
D、愈伤组织的形成一般不需要光照，后续再分化过程需要给予适当光照，有利于促进叶绿素的产生，D正确。
故选B。
13. 紫杉醇是存在于红豆杉体内的一种次生代谢物，具有高抗癌活性，下图是利用植物细胞工程技术获得紫杉醇的工厂化途径。下列相关叙述错误的是（ ）
A. ①、③过程所用培养基的物理性质一般不同
B. ②过程需要用胰蛋白酶处理而获得单个细胞
C. 紫杉醇不是红豆杉生长和生存所必需的代谢产物
D. 这种方法获得紫杉醇利于对濒危植物红豆杉的保护
【答案】B
【解析】
【分析】初生代谢物是维持细胞生命活动所必需基本代谢物，如糖类、脂质、蛋白质及核酸等。次生代谢产物是由次生代谢产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物。
【详解】A、①过程获得愈伤组织所用的是固体培养基，③获得高产细胞群所用培养基为液体培养基，所用培养基的物理性质一般不同，A正确；
B、分离动物组织细胞可以用胰蛋白酶，植物愈伤组织的细胞培养不需要分散为单个细胞的过程，②过程为将愈伤组织换到液体悬浮培养液中继代培养，B错误；
C、初生代谢产物是植物生长和生存所必需的，次生代谢产物不是植物生长所必需的，由题干可知，紫杉醇属于次生代谢产物，不是红豆杉生长发育所必需的物质，C正确；
D、紫杉醇被称为抗癌药王，获得紫杉醇的传统方法是从红豆杉属植物的树皮中提取，但产量有限，也不利于对濒危红豆杉的保护，图示为利用植物细胞工程技术获得紫杉醇的工厂化途径，短时间内可以获得大量的紫杉醇，利于对濒危植物红豆杉的保护，D正确。
故选B。
14. 下列有关传统植物杂交与植物体细胞杂交的比较错误的是
A. 两者都涉及有丝分裂、减数分裂和细胞分化等过程
B. 两者涉及的原理依次是基因重组、染色体变异
C. 两者都能使两个亲本的一些性状组合于新个体
D. 植物体细胞杂交获得的新个体与亲代之间存在生殖隔离
【答案】A
【解析】
【分析】1、有性杂交是两个体的配子结合，形成受精卵，由受精卵发育成个体。
2、植物体细胞杂交是两个不同物种的体细胞，在一定的条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。
3、植物体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍，能够打破物种生殖隔离的限制。
详解】A、传统植物杂交涉及有丝分裂、减数分裂和细胞分化；而植物体细胞杂交不涉及减数分裂，A错误；
B、传统植物杂交为有性杂交，涉及的变异类型是基因重组，植物体细胞杂交涉及的变异类型是染色体变异，B正确；
C、传统植物杂交与植物体细胞杂交都能使两个亲本的一些性状组合于新个体，C正确；
D、有性杂交一般发生在同种生物之间，而植物体细胞杂交打破了生殖隔离，能克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确。
故选A。
15. 下列有关植物细胞工程应用叙述错误的是（ ）
A. 诱变处理愈伤组织为了获得基因重组的新品种
B. 植物花粉粒可作为培养单倍体植株的理想材料
C. 利用植物的茎尖进行组织培养可培育出脱毒苗
D. 植物体细胞杂交技术可用于多倍体植株的培育
【答案】A
【解析】
【分析】植物细胞工程技术的应用：
1、植物繁殖的新途径：
(1)微型繁殖； (2) 作物脱毒； (2) 神奇的人工种子；
2、作物新品种的培育：
(1)单倍体育种；
(2)突变体的利用；
3、细胞产物的工厂化生产 (利用的技术: 植物组织培养技术)。
【详解】A、愈伤组织细胞分裂旺盛，经诱变处理，有利于获得突变个体，但不能获得基因重组的新品中，A错误；
B、植物花粉粒经离体培养可获得单倍体植株，故植物花粉粒可作为培养单倍体植株的理想材料，B正确；
C、长期进行无性繁殖的作物，病毒在体内逐年积累，就会导致作物产量下降，品质变差，则利用茎尖进行组织培养，可以获得脱毒苗，C正确；
D、植物体细胞杂交技术培育出的植物两个细胞融合后获得多倍体细胞，再经组织培养后可获得多倍体植株，D正确。
故选A。
16. Vero细胞系来源于非洲绿猴肾上皮细胞，将新型冠状病毒接种到Vero细胞后，经Vero细胞培养、新型冠状病毒灭活及提纯，可制成新型冠状病毒灭活疫苗。下列叙述错误的是（ ）
A. Vero细胞可作为新型冠状病毒大量繁殖的“培养基”
B. 培养Vero细胞时需定期更换培养液
C. 每传代一次，培养瓶中的Vero细胞就分裂一次
D. 分瓶前需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的Vero细胞
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】A、分析题干可知，Vero细胞可作为新型冠状病毒大量繁殖的“培养基”，A正确；
B、培养Vero细胞时，培养液需要定期更换，及时清除代谢产物，以保证细胞培养的无毒的环境，B正确;
C、每传代一次，培养瓶中的Vero细胞可能分裂多次，C错误；
D、分瓶前需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的Vero细胞，这样可获得单细胞悬液以便可以进行后续的传代培养，D正确。
故选C。
17. 关于ES细胞和iPS细胞及其应用的说法，正确的是（ ）
A. ES细胞能分化成各种细胞，但不能形成完整个体
B. ES细胞存在于成体组织和器官内，能分化成特定的组织
C. iPS细胞只能从胚胎中获取用于治疗人类的各种疾病
D. iPS细胞应用于治疗人类疾病可降低免疫排斥的风险
【答案】D
【解析】
【分析】在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造，iPS（诱导性多能干细胞）指通过导入特定的转录因子将终末分化的体细胞重编程为多能性干细胞细胞，分化成多种组织细胞，说明基因选择性表达，它与其他细胞含有相同的基因。
【详解】A、ES细胞来源于早期胚胎细胞，在功能上，具有发育的全能性，能形成各种功能的细胞，在特定环境下能形成生物个体，A错误；
B、ES细胞存在于早期胚胎或原始性腺，不存在于成体组织内，B错误；
C、iPS细胞是人工诱导的多能干细胞，动物本身不具有，C错误；
D、iPS细胞是人工诱导产生的，能分化成多种组织细胞，因而应用于治疗人类疾病可降低免疫排斥的风险，D正确。
故选D。
18. 如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ）
A. 双抗可同时与2种抗原结合
B. 利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C. 筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原
D. 同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞
【答案】D
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2种抗原结合，A正确；
B、 根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物发挥相应的作用，B正确；
C、在两种不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成两种抗体，因此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原-抗体检测，从而实现对双抗的筛选，C正确；
D、 同时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，D错误。
故选D。
19. 下列关于动物细胞工程和胚胎工程的相关叙述正确的是（ ）
A. 动物细胞培养时需提供95%的O2和5%的CO2的气体环境
B. 将人的成纤维细胞诱导为肝细胞表明，已分化的细胞其分化后的状态是可以改变的
C. 高等哺乳动物受精卵早期分裂发生在输卵管，卵裂期细胞数量增多，胚胎体积增大
D. “克隆羊”、“试管羊”在培育过程中，都用到了核移植技术和胚胎移植技术
【答案】B
【解析】
【分析】动物培养条件：
（1）无菌、无毒的环境:①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。
（2）营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。
（3）温度和PH。
（4）气体环境:95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。
【详解】A、动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，A错误；
B、将人的成纤维细胞诱导为肝细胞表明，说明分化了的细胞其分化后的状态是可以改变的，B正确;
C、受精作用和卵裂过程发生于输卵管，卵裂期细胞数量不断增多，但胚胎体积不变，甚至略微减小，C错误;
D、“克隆羊”、“试管羊”在培育过程中，都用到了动物细胞培养技术和胚胎移植技术，但只有“克隆羊”应用了核移植，D错误。
故选B。
20. 图中甲、乙、丙表示生物个体或结构，①～③表示相应过程。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 若甲为成熟哺乳动物个体，乙为配子，丙为受精卵，则基因重组发生在②过程中
B. 若甲为成年母羊，乙为植入甲细胞核的卵母细胞，丙为重组细胞，则③是胚胎移植
C. 若甲为外植体，乙为愈伤组织，丙为胚状体，①②过程的培养基成分相同
D. 若甲为二倍体植株，乙为花粉粒，丙为单倍体，则③过程可用秋水仙素处理萌发的种子使染色体数目加倍
【答案】B
【解析】
【分析】1、单倍体育种过程：植物通过减数分裂产生配子，配子通过花药离体培养形成单倍体，再经过人工诱导染色体数目加倍成为可育的纯合体。
2、植物组织培养过程：外植体通过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化形成胚状体，胚状体继续发育形成新植物体。
【详解】A、若甲为成熟哺乳动物个体，乙为配子，丙为受精卵，则①为减数分裂过程，②为受精过程，基因重组发生在①减数分裂过程中，A错误；
B、若甲为成年母羊，乙为植入甲细胞核的卵母细胞，丙为重组细胞，则①为去核过程，②为核注入融合，③表示胚胎移植，B正确；
C、若甲为外植体，乙为愈伤组织，丙为胚状体，则①为脱分化，②为再分化，则植物组织培养过程的脱分化和再分化过程中培养基成分不相同，C错误；
D、若甲为二倍体植株，乙通常为花粉粒，丙为单倍体，丙一般高度不育，无法形成种子， 因此只能用秋水仙素处理幼苗，而不是萌发的种子，D错误。
故选B。
二、多项选择题
21. 青霉菌通常在缺乏葡萄糖时分泌青霉素杀死细菌，以保证生存所需的能量供应。下列关于发酵工程生产青霉素的叙述正确的是（ ）
A. 发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖
B. 选育出的高产菌株发酵前还需要进行扩大培养
C. 青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌
D. 发酵过程中，需随时检测青霉菌的数量和产物浓度等
【答案】ABD
【解析】
【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。
【详解】A、该发酵过程要生产青霉素，青霉菌通常在缺乏葡萄糖时分泌青霉素，但发酵液中的葡萄糖浓度太低时，酵母菌自身生存所需的能量减少，不利于青霉菌的增殖，因此发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖，A正确；
B、工业用高产青霉菌株是通过诱变育种选育，经扩大培养纯化后，才可接种到发酵罐中进行工业化生产，B正确；
C、为了防止细菌等微生物的污染，获得纯净的青霉素，发酵罐仍需严格灭菌，C错误；
D、发酵过程中必须严格控制好温度、pH、溶解氧、罐压、营养物质等发酵条件，随时检测青霉菌的数量和产物浓度等，使发酵全过程处于最佳状态，D正确。
故选ABD。
22. 下列关于利用发酵工程生产单细胞蛋白，制备微生物饲料的说法正确的（ ）
A. 单细胞蛋白可提高奶牛的产奶率、家禽的产蛋率
B. 可采用过滤、沉淀等方法将单细胞蛋白与发酵液分离
C. 微生物饲料主要利用微生物大量繁殖产生蛋白类代谢物制成
D. 单细胞蛋白不仅含有丰富的蛋白质，还含有糖类、脂质等物质
【答案】ABD
【解析】
【分析】微生物含有丰富的蛋白质，以淀粉或纤维素的水解液，制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得了大量的微生物菌体，即单细胞蛋白，用单细胞蛋白制成的微生物饲料，能使家禽、家畜增重快，产奶或产蛋量显著提高。
【详解】A、用单细胞蛋白制成的微生物饲料，能使家畜、家禽增重加快，产奶或产蛋量显著提高，A正确；
B、分离、提纯酵母菌发酵生产的单细胞蛋白，指的就是单细胞菌体，可采用过滤、沉淀等方法从培养液中分离，B正确；
C、微生物饲料主要是利用微生物大量繁殖产生的高蛋白菌体来生产饲料的，能使家畜、家禽增重快，产奶或产蛋量显著提高，C错误；
D、微生物蛋白是微生物菌体，不仅含有丰富的蛋白质，还含有糖类、脂质等物质，D正确。
故选ABD。
23. 下列育种过程能体现细胞或细胞核全能性的是（ ）
A. 将悬铃木无菌苗叶片细胞制成原生质体，培养得到再生植株
B. 将经流感病毒外壳蛋白免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得流感抗体
C. 将非洲爪蟾的蝌蚪的肠上皮细胞的核移植到去核卵母细胞中获得新个体
D. 将中华猕猴桃叶肉细胞与狗枣猕猴桃叶肉细胞融合，获得耐寒性提高的新品种
【答案】ACD
【解析】
【分析】全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成各种组织或完整个体的潜能。动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体没有形成各种组织或个体，不能体现细胞的全能性。
【详解】A、将悬铃木无菌苗叶片细胞制成原生质体，培养得到再生植株，利用了植物组织培养技术，体现了细胞具有全能性，A符合题意；
B、将经流病毒外壳蛋白免疫的小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合，培养获得抗流感抗体，但没有形成完整的个体，不能体现细胞的全能性，B不符合题意；
C、将非洲爪蟾的蝌蚪的肠上皮细胞的核移植到去核卵细胞中获得新个体，体现了细胞核的全能性，C符合题意；
D、将中华猕猴桃叶肉细胞与狗枣猕猴桃叶肉细胞融合获得耐寒性提高的新品种，利用了植物体细胞杂交技术，体现了细胞具有全能性，D符合题意。
故选ACD。
24. 试管婴儿包括体外受精、体外胚胎培养和胚胎移植三个阶段。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 体外胚胎培养后，需要检查才能移植进入母体子宫
B. 精子接触透明带时，卵细胞会发生阻止多精入卵的生理反应
C. 从父亲体内取出的精子需要经过获能处理才能用于体外受精
D. 胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
【答案】ACD
【解析】
【分析】试管婴儿是指用人工的方法使精子与卵细胞在体外的试管中结合形成受精卵并进行早期胚胎发育，然后把胚胎移植进母体的子宫内，胚胎和胎儿的发育在子宫中进行，直至发育成熟，分娩产出。可见，“试管婴儿”的生命始于一个细胞--受精卵，受精的部位是试管，其胚胎发育的主要场所是子宫，试管只是初期发育的场所。
【详解】A、体外胚胎培养后，通过筛选出发育完好的胚胎移植进入母体子宫，即需要检查才能移植进入母体子宫，A正确；
B、在精子触及卵细胞膜的瞬间，会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，这个反应称作透明带反应，B错误；
C、体外受精之前，要对精子进行获能处理，采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精，C正确；
D、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，该技术的理论基础是受体子宫对移入的胚胎不发生免疫排斥，D正确。
故选ACD。
25. “筛选”是生物工程中常用的技术手段。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 利用以尿素为唯一氮源的培养基可以筛选出尿素分解菌
B. 在小鼠胚胎细胞原代培养过程中，一定能筛选出能无限增殖的细胞
C. 植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选
D. 单克隆抗体制备过程中，第一次筛选出的细胞既能无限增殖又能产生所需抗体
【答案】AC
【解析】
【分析】微生物筛选的关键是选择培养基的使用，通过选择培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他微生物在选择培养基上是不能生存或生存受到抑制。
【详解】A、以尿素为唯一氮源的培养基上，其他微生物因为缺少氮源而不能生存，故可以筛选出尿素分解菌，A正确；
B、在小鼠胚胎细胞原代培养过程中，细胞分裂能保持正常的二倍体核型，故不一定能筛选出能无限增殖的细胞，B错误；
C、植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞有多种融合类型，故需要进行筛选，C正确；
D、单克隆抗体制备过程中，第一次筛选出细胞既能无限增殖又能产生特定抗体，但不一定是所需抗体，D错误。
故选AC。
三、非选择题
26. 太原宁化府老陈醋传承至今超过640年，是山西陈醋酿造工艺的代表。其采取纯高粱双固曲法酿制，生产流程如下图所示。请回答下列问题：
（1）从自然界分离的菌种往往达不到工业生产要求，从改变微生物遗传特性的角度考虑，选育出工业发酵生产醋酸的优良菌种的方法有___________；优质菌种不光要产酸量高，还要有耐___________的特点。
（2）工业发酵前需要对菌种用___________（填“固体”或“液体”）培养基进行扩大培养，扩大培养的目的是______________________。
（3）“双固曲法”酿制陈醋时，高粱粉碎蒸料后需要冷却才能加入大曲，原因是______________________。生产过程先进行酒精发酵，请写出醋酸菌以酒精为底物进行发酵的反应简式______________________。
（4）在发酵过程中，还要严格控制发酵条件如___________等（至少答出两点）。与家庭作坊酿制技术相比，现代工业酿醋的优点为______________________（至少答出两点）。
【答案】（1） ①. 诱变育种（或基因工程育种） ②. 酸（或酒精）
（2） ①. 液体 ②. 增加菌种的数量
（3） ①. 防止高温杀死菌种 ②. C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量
（4） ①. 温度、pH、溶解氧等 ②. 生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉、产物专一、品质稳定、缩短发酵时间
【解析】
【分析】发酵工程的基本环节:
(1)菌种的选育：性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。
(2)扩大培养：在发酵之前还需要对菌种进行扩大培养。
(3)培养基的配制：在菌种确定之后，要选择原料制备培养基。在生产实践中，培养基的配方要经过反复试验才能确定。
(4)灭菌：培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。
(5)接种：将菌种接种到发酵罐培养液中。
(6)发酵：这是发酵工程的中心环节。①在发酵过程中，要随时检测培养波中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。②要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。
(7)产品的分离、提纯：①如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后采用过滤沉淀等方法将菌体分离和干燥，即得到产品。②如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
【小问1详解】
在微生物的菌种培育上，改变微生物遗传特性的优良菌种的育种方法主要有诱变育种、基因工程育种、细胞工程育种等。优质菌种不光要产酸量高，还要有耐酸（或酒精）的特点。
【小问2详解】
扩大培养时，使用的培养基是液体培养基，这种培养基有助于所选择的菌种的生长，从用途来看是选择培养基。扩大培养的目的是增大菌种浓度。
【小问3详解】
为了防止高温杀死菌种，高粱粉碎蒸料后需要冷却才能加入大曲；醋酸菌以酒精为底物进行发酵的反应简式C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O+能量。
【小问4详解】
温度、pH、溶解氧等因素都会影响发酵进行，故在发酵过程中，还要严格控制发酵条件如温度、pH、溶解氧等。与家庭作坊酿制技术相比，现代工业酿醋的优点为生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉、产物专一、品质稳定、缩短发酵时间。
27. 深海是由高压、低温、缺氧等组成的极端环境，我国科学家在南海科考过程中，采集了某海域深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。据图回答下列问题：
（1）研究人员先制备不同的培养基，然后采用___________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，培养一段时间后获得了含拟杆菌的混合培养物，为了获得纯培养物，除了平板划线法，还可采用___________法。据图分析，拟杆菌新菌株在以___________为碳源时生长状况最好。
（2）研究发现，将采集的样品置于不同碳源的培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因可能是______________________。（答一点即可）
（3）藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是______________________。
（4）深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，还可能有___________特性。
【答案】（1） ①. 湿热灭菌（高压蒸汽灭菌） ②. 稀释涂布平板 ③. 纤维素
（2）某些微生物只能利用深海冷泉中的特有物质才能生存（或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活）
（3）拟杆菌作为分解者，可将碎屑中的有机物分解为无机物，加快碳循环
（4）耐低温（或耐高压）
【解析】
【分析】1.进行微生物纯培养时，人们需要按照微生物对营养物质的不同需求配制培养基，满足微生物对水、无机盐、碳源、氮源以及pH、O2、特殊营养物质（如维生素）的需求。
2.微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。操作方法各不相同，但是核心都是要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。
【小问1详解】
培养基配制后通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。接种时，可以采用稀释涂布平板法或平板划线法，将菌种分散在固体培养基上，经过培养得到单菌落，从而获得纯净培养物。分析图中曲线可知，在以纤维素为碳源的培养基中，细胞数量最多，可推知拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好。
【小问2详解】
根据题意可知，深海冷泉中存在的某些微生物，只有利用冷泉中的特有物质才能生存，或着只能在深海冷泉的特定环境中才能存活，故在缺少深海冷泉特有物质或缺少特定环境的情况下，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍可能有很多微生物不能被分离筛选出来。
【小问3详解】
藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。而这些碎屑中含有机物，而这些物质进入海底能作为其中的微生物的营养，据此可推测，从生态系统组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用是作为分解者，可将碎屑中的有机物分解为无机物，实现碳元素向无机环境的返回。
【小问4详解】
深海冷泉环境特殊，该环境中温度低，压力高，据此可推测此环境下生存的拟杆菌分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性（高效性、专一性）外，还可能有耐低温（或耐高压）特性。
28. 育种工作者利用不同的方法进行了如下实验。请据图回答下列问题：
（1）植物组织培养常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和有机物，在配制好的培养基中，常常需要添加___________，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种培养2天后发现外植体边缘局部污染，原因可能是______________________。
（2）图I过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗A的过程要经过___________、再分化形成幼苗，该过程依据的原理是______________________。
（3）已知番茄红果（Y）对黄果（y）为显性，少室（M）对多室（m）为显性，控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。用红果多室（Yymm）番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验，则Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是___________。Ⅲ过程中植物体C的基因型为______________________。
（4）Ⅳ过程需对番茄和马铃薯的韧皮部细胞去除细胞壁后使用___________等物理法诱导融合形成具有活力的___________。获得杂种细胞B的技术是___________，这种技术在育种工作中具有广泛的应用价值，其优点是______________________。
【答案】（1） ①. 植物激素 ②. 外植体消毒不彻底
（2） ①. 脱分化 ②. 植物细胞具有全能性
（3） ①. 有丝分裂 ②. YYmm##Yymm##yymm
（4） ①. 电融合法##离心法 ②. 原生质体##杂种细胞 ③. 植物体细胞杂交 ④. 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培养植物新品种
【解析】
【分析】分析题图：Ⅰ表示将番茄果皮细胞进行植物组织培养形成植株A的过程；Ⅱ表示先花药离体培养形成单倍体（幼苗B），再用秋水仙素处理得到纯合体植株B的过程，属于单倍体育种；Ⅲ表示花粉细胞融合形成细胞A，再采用植物组织培养得到植株C的过程；Ⅳ表示采用植物体细胞杂交技术得到杂种植株D的过程。
【小问1详解】
植物组织培养常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和有机物，在配制好的培养基中，常常需要添加植物激素（细胞分裂素和生长素），而且要注意添加的比例， 生长素用量比细胞分裂素用量， 比例适中时，促进愈伤组织的生长 。若接种后2-5天，发现外植体边缘局部污染，原因可能是外植体消毒不彻底。
【小问2详解】
图Ⅰ过程由番茄韧皮部细胞经组织培养形成植物体A的过程，形成幼苗A的过程要经过脱分化形成愈伤组织，该阶段不需要光照，再经过再分化形成幼苗，该过程依据的原理是植物细胞具有全能性。
【小问3详解】
Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗B采用的是花药离体培养技术，该过程中细胞通过有丝分裂方式进行增殖。培育植物体B的方法（Ⅱ）称为单倍体育种．红果多室（Yymm）番茄植株的花粉有两种基因型，即Ym、ym，而植物体C是由花粉细胞两两融合形成的细胞A（基因型为YYmm或Yymm或yymm）再经过植物组织培养形成的，所以其基因型为YYmm或Yymm或yymm，共3种。
【小问4详解】
诱导植物细胞融合的方法有：物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂，因此Ⅳ过程需对番茄和马铃薯的韧皮部细胞去除细胞壁后使用电融合法（或离心法）等物理法诱导融合形成具有活力的原生质体（或杂种细胞）。植物体细胞杂交技术就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术，杂种细胞B是由番茄韧皮部细胞和马铃薯韧皮部细胞融合形成的，因此获得杂种细胞B的技术是植物体细胞杂交，该技术优点是打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培养植物新品种。
29. 据《细胞报告》报道，我国科学家成功将小鼠的颗粒细胞（卵泡中卵母细胞周围的细胞）转化为GV卵母细胞（尚未完全恢复减数分裂），进而恢复减数分裂能力并顺利培育出健康后代（如下图）。据图回答下列问题：
（1）图中过程②为___________，X细胞需要培养到___________（时期）才具备与精子受精的能力。
（2）图示过程③运用了胚胎工程中的___________和___________两大技术，该健康幼鼠是通过___________（填“无性”或“有性”）生殖方式获得的。为了保证移植的成功率，需要对供体母鼠和受体母鼠进行___________处理。
（3）胚胎移植成功原因之一是外来胚胎与受体母鼠的子宫可建立正常的生理和组织联系，一般情况下供体胚胎遗传特性在孕育过程中___________（填“受”或“不受”）受体母鼠影响。若想获得一卵双胎或多胎，应结合___________技术，一般处理___________（时期）的胚胎，该技术的要点在于将内细胞团___________。
（4）科学家将该项技术应用于保护濒危动物，其意义是______________________。
【答案】（1） ①. 减数分裂 ②. MⅡ
（2） ①. 体外受精 ②. 胚胎移植（顺序可反） ③. 有性 ④. 同期发情
（3） ①. 不受 ②. 胚胎分割 ③. 桑葚胚或囊胚 ④. 均等分割
（4）解决因卵细胞不足导致后代数量有限的问题
【解析】
【分析】分析题图：①表示卵泡中的颗粒细胞经诱导成为多能干细胞，②表示GV卵母细胞减数分裂产生卵细胞过程，X应该为卵细胞；③涉及体外受精、早期胚胎培养及胚胎移植等技术。
【小问1详解】
图中X细胞能与精子结合形成受精卵，则X应该为卵细胞，GV卵母细胞需要经过减数分裂才能形成卵细胞，因此过程②表示GV卵母细胞减数分裂产生卵细胞过程。卵细胞培养到减数第二次分裂中期时，才具有与精子受精的能力，因此X细胞需要培养到MⅡ才具备与精子受精的能力。
【小问2详解】
图中过程③涉及到卵细胞和精子结合形成受精卵，受精卵发育形成早期胚胎，胚胎移植到受体子宫，最后生出健康的幼鼠，此过程运用了胚胎工程中的体外受精、胚胎移植两大技术。该健康幼鼠形成过程中经过两性生殖细胞的融合（卵细胞和精子结合），此生殖方式属于有性生殖。动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的，这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境，据此可知，胚胎移植时需要对供体母鼠和受体母鼠进行同期发情处理，为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境，保证了移植的成功率。
【小问3详解】
外来胚胎与受体母鼠的子宫可建立正常的生理和组织联系，一般情况下供体胚胎遗传特性在孕育过程中不受体母鼠影响。由于来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此要获得同卵双胎或多胎的个体，应采用胚胎分割技术，进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
【小问4详解】
该技术利用小鼠的颗粒细胞（卵泡中卵母细胞周围的细胞）转化为GV卵母细胞（尚未完全恢复减数分裂），进而恢复减数分裂能力，形成卵细胞，最终顺利培育出健康后代，应用于保护濒危动物上，可解决因卵细胞不足导致后代数量有限的问题。
30. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交—杂交瘤细胞技术来制备。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术生产能同时识别癌胚抗原和长春碱（从长春花中提取的一种具有良好的抗肿瘤作用的物质）的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题：
（1）与植物体细胞杂交相比，图1中过程②特有的诱导融合的方法是___________，过程②选用的骨髓瘤细胞___________（填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行___________和___________，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
（3）图1方框内至少需要经过___________次筛选才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为___________需进行传代培养。
（4）据图2分析，与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是______________________。
【答案】（1） ①. 灭活的病毒 ②. 不能
（2） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测
（3） ①. 2 ②. 接触抑制##细胞密度过大##有害代谢物的积累##培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻
（4）双特异性单克隆抗体能将长春碱等抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞
【解析】
【分析】根据题图分析，双特导性抗体制备流程为先给小鼠注射特定癌胚抗原引发免疫反应，然后获取已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再把单克隆杂交瘤细胞与经注射长春碱后从小鼠中获的免疫的B淋巴细胞再杂交，得到单克隆杂交一杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特导性单克隆抗体。
【小问1详解】
诱导动物细胞融合的方法有：物理法(离心、振动)，化学法(聚乙二醇)，生物法（灭活的病毒），与植物体细胞杂交相比，特有的方法是灭活的病毒。小鼠B淋巴细胞在HAT培养基上可正常存活，但不能繁殖，骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长，骨髓瘤细胞与B淋巴细胞之间形成的融合细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖。
【小问2详解】
为选出能产生专一抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有一个细胞，克隆化培养然后筛选出专一抗体检测呈阳性的细胞。单克隆抗体具有持异性强，灵敏度高的特点，并且可大量制备。
【小问3详解】
图1方框内需要经过2次筛选，先筛选得到对长春碱免疫的B淋巴细胞，后筛选出杂交一杂交瘤细胞，体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为细胞密度过大、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
【小问4详解】
双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，这是利用单克抗体治疗疾病对人体的副作用更小的原因。
31. 单克隆抗体在防治H7N9型禽流感上具有显著疗效。
（1）在制备H7N9病毒的单克隆抗体X的过程中，经多次筛选获得能产生单抗X的杂交瘤细胞，并进行体外培养，培养过程中需要定期更换培养液，其目的是_________________________________。
（2）制备的单抗X与常规的血清抗体相比，其优点是______________________（至少答出两点）。
（3）为了进一步研究单抗X的效果及作用机制，科学家开展了如下实验：
实验一：在体外将单抗X、已知的H7N9抗体Y分别与HA蛋白（H7N9病毒表面的一种蛋白）混合，检测它们对HA蛋白的亲和力。实验结果如下表所示：（注：KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高）
抗体种类
单抗X
抗体Y
KD
5.32×10-9M
1.95×10-9M
实验二：以一定浓度的H7N9病毒感染小鼠，之后分别检测单抗X和抗体Y的治疗效果，发现单抗X的体内治疗效果优于抗体Y。
①实验一结果表明：对HTN9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是___________。
②分析实验一和实验二的结果差异，研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过结合巨噬细胞表面受体，增强其吞噬能力，进而清除被病毒感染的靶细胞，单抗X的增强效果比较明显。
请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，设计实验验证上述假说。简要写出实验思路：___________________________________。
【答案】（1）清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
（2）特异性强、灵敏度高、可大量制备
（3） ①. 抗体Y ②. 将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。
【解析】
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。
【小问1详解】
在制备H7N9病毒的单克隆抗体X的过程中，经多次筛选获得能产生单抗X的杂交瘤细胞，并进行体外培养，培养过程中需要定期更换培养液，其目的是一方面保证细胞培养过程中营养物质的供应，另一方面清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
【小问2详解】
制备的单抗X与常规的血清抗体相比，单克隆抗体是由单个杂交瘤细胞经过分裂代谢产生的，因而其优点表现为特异性强、灵敏度高、可大量制备。
【小问3详解】
①结合题意可知，KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高，因而实验一结果表明：抗体Y对HTN9病毒HA蛋白的亲和力更高。
②实验二的结果显示，单抗X的体内治疗效果优于抗体Y。为此研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过结合巨噬细胞表面受体，增强其吞噬能力，进而清除被病毒感染的靶细胞，单抗X的增强效果比较明显。请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，本实验的目的是验证抗体X除了中和病毒活性之外，还可以通过结合巨噬细胞表面受体，增强其吞噬能力，进而清除被病毒感染的靶细胞，因此该实验的自变量是抗体的种类，因变量是肺上皮细胞裂解的百分比，实验思路可描述如下：将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比，实验结果应该表现为加热抗体X的B组肺上皮细胞裂解百分比更高。
相关试卷
山西省太原市2022-2023学年高一生物下学期期中试题（Word版附解析）： 这是一份山西省太原市2022-2023学年高一生物下学期期中试题（Word版附解析），共24页。试卷主要包含了选择题，多项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
山西省太原市2022-2023学年高二生物下学期期中试题（Word版附解析）： 这是一份山西省太原市2022-2023学年高二生物下学期期中试题（Word版附解析），共27页。试卷主要包含了单项选择题，多项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
山西省太原市2022-2023学年高二上学期期中生物试题： 这是一份山西省太原市2022-2023学年高二上学期期中生物试题，共8页。试卷主要包含了单项选择题，多项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
