2021-2022学年江苏省无锡市太湖高级中学高二下学期期中生物试题含解析

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 2021-2022学年度第二学期期中考试
高二生物试卷
一、单项选择题
1. 我国制作泡菜历史悠久。《中馈录》中记载：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水；坛口覆一盖，浸于水中，……则所泡之菜不得坏矣。泡菜之水， 用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。……。如有霉花，加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换， 勿令其干。”下列说法不正确的是（ ）
A. “坛口覆一盖，浸于水中”有利于保持坛内的无氧环境
B. “泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的之一是消毒杀菌
C. “霉花”主要由酵母菌增殖形成，酵母菌往往来自蔬菜
D. “坛沿外水须隔日一换，勿令其干”以保证坛内适宜湿度
【答案】D
【解析】
【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
2、泡菜的制作过程：按照清水与盐的质量比为4：1的比例配制盐水，将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。
【详解】A、“坛口覆一盖，浸于水中”目的是阻止空气进入坛内，有利于保持坛内的无氧环境，A正确；
B、泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的包括提升泡菜味道、减少水中的溶氧量和消毒杀菌防止杂菌污染，B正确；
C、“霉花”指的是泡菜坛内表面的白膜，主要由酵母菌繁殖形成，而酵母菌往往来自蔬菜，C正确；
D、“坛沿外水须隔日一换，勿令其干”以保证坛内的无氧环境，D错误。
故选D。
【点睛】
2. 稀释涂布平板法是分离菌种常用的方法，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 固体培养基灭菌后，应冷却至50℃左右时倒平板
B. 倒好的平板需立即使用，以免表面干燥，影响菌的生长
C. 涂布时可以转动培养皿，使涂布均匀
D. 稀释涂布平板法也可用于微生物的计数
【答案】B
【解析】
【分析】稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。
【详解】A、固体培养基灭菌后，应冷却至50℃左右时倒平板，固体培养基中含有琼脂，50℃左右不烫手且琼脂未凝固，A正确；
B、倒好平板需要冷却后使用，且不宜久存，以免表面干燥，影响接种后微生物的生长，B错误；
C、涂布时是将菌液涂布到固体培养基上，可以转动培养皿，使涂布均匀，C正确；
D、结合分析可知，平板涂布法既可用于微生物的分离，也可用于微生物的计数，D正确。
故选B。
3. 养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸，这两种物质可由硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离和计数”实验中，下列说法正确的是（　　）
A. 需要配制添加一定浓度氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基，以筛选硝化细菌
B. 应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行
C. 采用平板划线法进行分离和计数时，还需与未接种的空白培养基同时培养
D. 若空白对照组上长出了菌落，需要在实验组数据的基础上减去空白对照组的菌落数
【答案】B
【解析】
【分析】1、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
2、培养过程应该先将空白培养基培养观察是否长出菌落，若可以长出菌落，则培养基被污染，该培养基不能使用。
【详解】A、要分离硝化细菌，应该用以铵盐为唯一氮源的培养基，培养基中不能加入牛肉膏蛋白胨，A错误；
B、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌污染，因此，应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在火焰旁进行，B正确；
C、对微生物进行计数时应该采用的接种方法是稀释涂布平板法，C错误；
D、若空白对照组长出了菌落，说明培养基受到污染，该培养基不能再使用，所得数据也应舍弃，D错误。
故选B。
4. 中国是世界上最早酿酒的国家之一。葡萄酒是以葡萄为原料，采用发酵酿制法制成的低度饮料酒。下图甲、乙为某同学设计的两种制作葡萄酒的装置，下列说法正确的是（　　）


A. 若甲中的X为澄清石灰水，则出现变浑浊现象
B. 酿制果酒时，选用甲装置比选用乙装置效果更好
C. 在酿酒过程中若装置密封性不好，发酵液会变酸
D. 该发酵过程需将温度严格控制在30~35℃的范围
【答案】ABC
【解析】
【分析】葡萄酒是利用酵母菌以葡萄糖为底物进行无氧呼吸产生酒精的过程，该过程同时会产生二氧化碳，葡萄酒酿制过程中，前期需要通气使酵母菌大量繁殖，后期无氧使酵母菌酒精发酵。
【详解】A、酵母菌无氧呼吸产生酒精过程也会产生二氧化碳，会使澄清石灰石变浑浊，A正确；
B、酿制果酒时，甲装置能及时将产生的二氧化碳排出，乙装置则不能，因此甲装置效果更好，B正确；
C、在酿酒过程中若装置密封性不好有氧气进入会使醋酸菌将酒精转变成醋酸导致发酵液会变酸，C正确；
D、酵母菌发酵的最适温度为18-25℃，D错误。
故选ABC。
5. 发酵技术现在已经在生产和生活中广泛应用，下列叙述正确的是（ ）
A. 腐乳制作中起主要作用的微生物代谢类型是异养需氧型，生殖方式是分裂生殖
B. 在果酒制作的后期，只需加入醋酸菌即可制作果醋
C. 在微生物的发酵过程中，所用原料中有机物的总量和种类都会减少
D. 在果酒、果醋的发酵制作过程中生物间的关系有种内竞争、种间竞争等
【答案】D
【解析】
【分析】制作果酒的主要菌种是酵母菌，为兼性厌氧型微生物；果醋发酵的菌种是醋酸菌，为异养需氧型；腐乳制作的主要微生物是毛霉，为异养需氧型。
【详解】A、腐乳制作过程中起主要作用的微生物是毛霉，其代谢类型是异养需氧型，生殖方式是孢子生殖，A错误；
B、醋酸菌发酵的适宜温度高于果酒发酵的温度，且醋酸菌为需氧菌，故在果酒制作后期，需要加入醋酸杆菌并打开发酵裝置的充气口和适当提高温度，才能进行果醋发酵，B错误；
C、微生物发酵过程中，所用的原料中有机物的总量在不断减少，但有机物的种类在增加，C错误；
D、在果酒果醋的发酵制作过程中生物间的关系有种内斗争（发酵菌种竞争营养物质）、种间竞争（发酵菌种与杂菌竞争）等，D正确。
故选D。
6. 巴氏杀菌乳是以生牛（羊）乳为原料，经巴氏杀菌等工序制得的液体产品，根据国家标准每毫升合格巴氏杀菌乳中细菌总数不得超过50000个。某兴趣小组进行了新鲜牛奶合适的消毒温度的探究，下列相关实验操作不合理的是（ ）
A. 配制牛肉膏蛋白胨培养基并在121℃、100kPa条件下处理15～30min
B. 将等量的新鲜牛奶分别置于60℃、70℃、80℃、90℃恒温水浴锅中处理15min
C. 对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在37℃下培养24h
D. 统计培养基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度作为最适消毒温度
【答案】D
【解析】
【分析】1、高压蒸汽灭菌的原理：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在100kPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
2、巴氏消毒指的是70-75℃煮30min或80℃煮15分钟；巴氏消毒既能杀死生牛（羊）乳中的微生物，还不会破坏牛（羊）乳中的营养成分。
【详解】A、配制的牛肉膏蛋白胨培养基需使用高压蒸汽灭菌法灭菌，即在121℃、100kPa条件下处理15~30min，将培养基彻底灭菌，以避免培养基上的微生物影响实验结果，A正确；
B、新鲜牛奶应使用巴氏消毒法消毒，为了探究新鲜牛奶合适的消毒温度，可将等量的新鲜牛奶分别置于60℃、70℃、80℃、90℃恒温水浴锅中处理15min，并检测不同温度处理下的牛奶中微生物的数量进行比较，B正确；
C、若要统计消毒后的牛奶中微生物的数量，可用稀释涂布平板法接种，所以可对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在37℃下培养24h，C正确；
D、由于温度过高会影响蛋白质的结构，进而破坏牛奶中的营养成分，所以菌落数最少的组对应的温度不一定是最适的消毒温度，最适的消毒温度应保证每毫升合格巴氏杀菌乳中细菌总数不得超过50000个，同时还应保证牛奶的营养价值不被破坏，D错误。
故选D。
7. 我国大陆首例由试管要儿分娩的“试管婴儿二代宝宝”在北京大学第三医院诞生，他的母亲是我国大陆首例试管婴儿。试管婴儿技术的不断进步，为许多不孕不育患者实现了做父母的心愿。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 试管婴儿技术所获得的胚胎必须通过胚胎移植给受体才能获得后代
B. 胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
C. 采集的卵母细胞和精子都要进行相应的处理才能完成体外受精过程
D. 精子接触透明带时，卵细胞会发生阻止多精子入卵的透明带反应
【答案】D
【解析】
【分析】
1、试管婴儿是指用人工的方法使精子与卵细胞在体外的试管中结合形成受精卵并进行早期胚胎发育，然后把胚胎移植进母体的子宫内，胚胎和胎儿的发育在子宫中进行，直至发育成熟，分娩产出。可见，“试管婴儿”的生命始于一个细胞--受精卵，受精的部位是试管，其胚胎发育的主要场所是子宫，试管只是初期发育的场所。
2、生殖细胞包括睾丸产生的精子和卵巢产生的卵细胞，含精子的精液进入阴道后，精子缓慢地通过子宫，在输卵管内与卵细胞相遇，有一个精子进入卵细胞，与卵细胞相融合，形成受精卵。
【详解】A、核移植、转基因或体外受精等技术获得的胚胎均需通过胚胎移植给受体才能获得后代，A正确；
B、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，B正确；
C、体外受精之前，要对精子进行获能处理，采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精，C正确；
D、在精子触及卵细胞膜的瞬间，会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，这个反应称作透明带反应，D错误。
故选D。
【点睛】
8. 中国科学家在世界上首次利用体细胞核移植技术成功实现了对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴—“中中”和“华华”。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 从卵巢中取出的卵母细胞可以直接作为核移植的受体细胞
B. 胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚阶段进行移植
C. 两只克隆猴体细胞的染色体数目及组成与核供体的完全一致
D. 该实例说明了已经高度分化的动物体细胞具有发育的全能性
【答案】C
【解析】
【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。
【详解】A、动物卵巢中采集的卵母细胞，一般要在体外培养到减数第二次分裂中期才能用于实验，A错误；
B、胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或桑葚胚阶段进行移植，B错误；
C、两只克隆猴体细胞的染色体数目及组成与核供体的完全一致，C正确；
D、该实例说明了已经高度分化的动物体细胞核具有发育的全能性，不能体现细胞的全能性，D错误。
故选C。
9. 离子束诱变育种是利用离子束处理植物的种子、细胞或其他器官等，诱发其产生遗传性改变，从而获得各种各样的变异类型，经人工选择培育新品种的方法。离子束处理具有生理损伤轻、突变频率高、突变范围广等优点。下列叙述正确的是（ ）
A. 离子束诱发基因突变只能发生在细胞分裂的间期
B. 没有外界因素的诱发，细胞内的基因不发生突变
C. 离子束能诱导基因发生定向突变，获得较多优良变异类型
D. 离子束诱变育种可以改变原有基因的结构而导致新品种出现
【答案】D
【解析】
【分析】诱变育种的原理是基因突变，基因突变是指基因中碱基对的增添、缺失或替换，这会导致基因结构的改变，进而产生新基因。
基因突变的特点：普遍性；随机性；低频性；多数有害性 ；不定向性。
【详解】A、基因突变主要发生在细胞分裂的间期，但也可以发生在其他时期，A错误；
B、基因可以自发突变，外界因素可以提高基因突变的概率，B错误；
C、基因突变是不定向的，C错误；
D、离子束诱变育种可以使植物发生基因突变，改变原有基因结构，产生新的基因，导致新品种的出现，D正确。
故选D。
10. 如图表示动物细胞培养的过程，下列有关该过程的说法，正确的是（ ）






A. 乙中进行动物细胞培养时应通入无菌空气，以保证培养液中的氧气供应
B. 宜用胰蛋白酶将甲中的动物组织块分散为单个的细胞
C. 甲中用于培养的动物细胞宜取自成年动物
D. 丙中细胞大量繁殖后，细胞之间相互接触能促进细胞的分裂
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】A、乙中进行动物细胞培养时应通入适量的CO2（95%的空气＋5%的CO2）以调节pH，A错误；
B、将甲中的动物组织块分散为单个的细胞可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，B正确；
C、甲中用于培养的动物细胞宜取自动物胚胎或幼龄动物的器官或组织，该类型的器官或组织分离能力强，C错误；
D、丙中细胞大量繁殖后，细胞之间相互接触能抑制细胞的分裂，D错误。
故选B。
11. 下列生物技术操作对遗传物质的改造，不能遗传给子代的是（　　）
A. 将含胰岛素基因表达载体转入大肠杆菌，筛选获得的基因工程菌
B. 通过植物体细胞杂交获得的番茄--马铃薯杂种植株
C. 将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，进行基因治疗
D. 将生长激素基因导入奶牛受精卵，培育出能分泌含生长激素乳汁的奶牛
【答案】C
【解析】
【分析】基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病，以达到治疗目的。其中也包括转基因等方面的技术应用，也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。从广义说，基因治疗还可包括从DNA水平采取的治疗某些疾病的措施和新技术。
【详解】A、将含胰岛素基因的表达载体转入大肠杆菌，筛选获得的基因工程菌可以通过二分裂的方式遗传给后代，A不符合题意；
B、通过植物体细胞杂交获得的番茄--马铃薯杂种植株，遗传物质发生改变，可以通过无性繁殖遗传给子代，B不符合题意；
C、将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞，只是淋巴细胞含有这个基因，其生殖细胞的该基因没有改变，因此不能遗传给子代，C符合题意；
D、将生长激素基因导入奶牛受精卵，受精卵含有生长素基因，受精卵培育成的奶牛含有该基因，因此可以遗传给后代，D不符合题意。
故选C。
12. 利用PCR技术扩增目的基因的过程中两种引物分别为A和B，其原理与细胞内DNA复制类似。下列叙述错误的是（　　）
A. 从理论上推测，第二轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/4
B. 在第二轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段
C. 引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因
D. 耐热的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3’端
【答案】B
【解析】
【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，因此PCR技术一般用于基因扩增。
【详解】A、基因扩增中引物通常是一小段DNA或RNA片段，每一次循环后DNA分子数量增加一倍，从理论上推测，第二轮中含引物A的比例为3/4，第三轮中占7/8，A正确；
B、引物A和引物B均不在该片段的端点，因此第一轮循环后，得到的两DNA片段中两条脱氧核苷酸链都不等长。通过绘图可推知，第二轮中也不会出现等长的引物，所以在第二轮循环产物中不会出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，B错误；
C、引物A和引物B必须与目的基因配对，如果引物之间或引物自身发生碱基互补配对，则不能扩增目的基因，C正确；
D、由于复制过程子链的合成方向是从子链的5’端向3’端延伸，所以耐热的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3’端，D正确。
故选B。
13. 下列有关现代生物技术的叙述，正确的是 （ ）
A. 用核移植生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行100%的复制
B. 农杆菌转化法能将Ti质粒上的全部基因转移到受体细胞染色体上
C. 利用“生物导弹”杀死癌细胞借助了单克隆抗体的导向作用
D. 胚胎移植技术中需要同时对供、受体母牛进行同期发情和超数排卵处理
【答案】C
【解析】
【分析】1、动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。
2、基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法：
（1）植物：常用农杆菌转化法，还有基因枪法和花粉管通道法。
（2）动物：常用显微注射法。
（3）微生物：感受态细胞法。
3、单克隆抗体的作用：
①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。
②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。
4、胚胎移植步骤：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）→②配种或人工授精→③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）→④对胚胎进行移植→⑤移植后的检查。
【详解】A、用核移植生产的克隆动物并不是对体细胞供体动物进行100%的复制，因为细胞质基因是由受体细胞提供，环境的影响等都会对克隆动物的性状造成影响，A错误；
B、农杆菌转化法能将Ti质粒上的T-DNA片段及携带的目的基因 转移到受体细胞染色体上，B错误；
C、单克隆抗体具有特异性，利用“生物导弹”杀死癌细胞借助了单克隆抗体的导向作用，C正确；
D、胚胎移植技术中需要同时对供、受体母牛进行同期发情和对供体进行超数排卵处理，以保证胚胎移植时具有相同的生理环境，D错误。
故选C。
14. 鞣质（单宁）是一种具有止血、杀菌等作用的中药成分，在植物中广泛分布。为探究鞣质对自然界中生存条件相同的甲、乙、丙三种细菌的杀伤能力，某科研小组将等量的甲、乙、丙三种细菌接种到含有适量鞣质的完全培养基和不含鞣质的完全培养基上，相同且适宜的条件下培养一段时间，观察菌落大小。结果如下图所示。下列相关说法错误的是（ ）


A. 实验中用的培养皿等玻璃器材进行灭菌，可以采用干热灭菌的方法
B. 由图中结果可知，对鞣质的抵抗能力最差的是甲细菌
C. 为排除杂菌污染，本实验还需设置未接种细菌的含鞣质的完全培养基作为空白对照
D. 接种前，可以用显微镜计数法判断三种细菌接种量是否相等
【答案】C
【解析】
【分析】分析结果图可知，鞣质对甲细菌的杀伤力强于丙，乙细菌对鞣质有较强的抵抗力。
【详解】A、实验中用的培养皿等玻璃器材，一般选用的灭菌方法为干热灭菌（采用该灭菌方法灭菌的一般是能耐高温的、需要保持干燥的物品），A正确；
B、与对照组相比，菌落甲的大小差异最大，故鞣质对甲细菌的杀伤能力最强，即对鞣质的抵抗能力最差的是甲细菌，B正确；
C、为排除杂菌污染，为排除杂菌污染，本实验还需设置未接种细菌的含鞣质的完全培养基和未接种细菌的不含鞣质的完全培养基作为空白对照，C错误；
D、显微镜计数法是在显微镜下直接计数的一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，故接种前，可以用显微镜计数法判断三种细菌接种量是否相等，D正确。
故选C。
15. 下列叙述中，不属于转基因生物可能存在安全性问题的原因的是（ ）
A. 对基因的结构和调控机制等的了解仍相当有限
B. 所转移的基因有不少来自异种生物
C. 外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的
D. DNA重组技术需要有精心设计的”分子工具”
【答案】D
【解析】
【分析】1.基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
2.转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。
【详解】A、由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因结构，基因间的相互作用以及基因的调控机制等了解得相当有限，与题意不符，A错误；
B、转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因，可能会带来安全隐患，与题意不符，B错误；
C、由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此转基因生物中，有时候会出现一些人们意想不到的后果，引发人们在食物安全，生物安全和环境安全等问题，与题意不符，C错误；
D、在DNA重组技术中使用的“分子工具”包括限制性内切酶、DNA连接酶和运载体，人们可以根据需要选择使用，不可能是争论的原因，与题意相符，D正确，
故选D。
二、多项选择题
16. EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为抗原分别注射到3组小鼠体内，引发小鼠机体的体液免疫，产生相应的抗体。多次免疫后，分别取上述3 组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）


A. EV71免疫的小鼠血清可以结合EV71、VP1和VP2多种抗原
B. 制备抗EV71单克隆抗体时，选用VP2免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳
C. 测定各组小鼠血清与非EV71蛋白结合强度，目的是排除抗体与其他蛋白的非特异性结合对实验结果的影响
D. 取小鼠的体细胞，用灭活的病毒诱导与骨髓瘤细胞融合
【答案】BD
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【详解】A据图可知，EV71免疫的小鼠血清与EV71、VP1和VP2三种抗原结合强度都有一定的相对值，说明EV71免疫的小鼠血清可以结合EV71、VP1和VP2多种抗原，A正确；
B、制备抗EV71单克隆抗体时，选用VP1免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳，依据是第2组血清抗体可以结合EV71病毒（和VP1蛋白），而第3组（VP2免疫）血清抗体无法特异性结合EV71病毒，仅能结合VP2，B错误；
C、血清中存在抗体，能与相应的抗原结合，测定各组小鼠血清与非EV71蛋白结合强度，目的是排除抗体与其他蛋白的非特异性结合对实验结果的影响，C正确；
D、取小鼠的脾脏中相应的B淋巴细胞，用灭活的病毒诱导与骨髓瘤细胞融合，能筛选获得杂交瘤细胞株，D错误。
故选BD。
17. 生物兴趣小组成员以西瓜5天龄幼苗子叶（子叶尚未完全展开且颜色为淡绿色）为外植体进行相关研究，得到如图所示实验结果。下列相关叙述正确的是（ ）

A. 实验开始前应对幼苗子叶和MS培养基进行灭菌处理
B. 与愈伤组织细胞相比，胚状体细胞已经分化
C. 暗处理时间长短对细胞脱分化率影响不大，但影响再分化率
D. 结果表明西瓜子叶诱导形成胚状体的最适暗处理时间是1～2周
【答案】BCD
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、该实验的外植体(幼苗子叶)需要消毒处理，而不是灭菌，灭菌会使得外植体死亡而无法培养出愈伤组织和胚状体，A错误；
B、愈伤组织是由已分化的细胞变为未分化的细胞，胚状体是由愈伤组织分化而来，因此愈伤组织属于未分化细胞组织，胚状体属于已分化细胞组织，B正确；
C、愈伤组织的变化属于脱分化，胚状体的变化属于再分化，从图中可以看出，随着时间的变化愈伤组织的诱导率虽然有一个突变，但随着时间的增加，后期变化较小，而胚状体的诱导率随着时间的增加，呈现先增加后逐渐减少且明显的趋势，C正确；
D、由胚状体诱导率的变化趋势来看，在1-2周，诱导率数据较大，因此西瓜子叶诱导形成胚状体的最适暗处理时间为1-2周说法正确，D正确。
故选BCD。
18. 下图是构建基因表达载体的过程示意图，请判断下列相关说法正确的是（ ）


A. 基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，是成功的关键
B. 构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中能稳定存在且遗传给下一代
C. 一个基因表达载体一般包括目的基因、标记基因、起始密码子和终止密码子等结构
D. 基因表达载体中启动子具有DNA聚合酶的结合部位，启动复制过程
【答案】AB
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，是成功的关键，A正确；
B、构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用，B正确；
C、基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分，起始密码子和终止密码子位于mRNA上，C错误；
D、基因表达载体中启动子具有RNA聚合酶的结合部位，启动转录过程，D错误。
故选AB。
19. 下图是利用生物工程技术培育转荧光蛋白基因克隆猪的过程。下列叙述正确的是（ ）




A. ①②过程分别属于细胞工程和基因工程的范畴
B. ③过程常用显微注射技术，注射前需先用Ca2＋处理重组细胞
C. ④过程胚胎须发育到囊胚或原肠胚阶段
D. ⑤过程为胚胎移植技术，可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
【答案】AD
【解析】
【分析】据图分析，图示为利用生物工程技术培育转荧光蛋白基因克隆猪的过程，其中①表示核移植技术，②表示基因表达载体的构建，③表示将目的基因（重组质粒）导入受体细胞，④表示早期胚胎培养，⑤表示胚胎移植。
【详解】A、①表示核移植技术，属于细胞工程的范畴，②表示基因表达载体的构建，属于基因工程，A正确；
B、③表示将目的基因（重组质粒）导入受体细胞（动物细胞），常用显微注射技术，但是注射前不需要用 Ca2+处理重组细胞（该方法为将目的基因导入微生物的方法），B错误；
C、④表示早期胚胎培养，在进行⑤胚胎移植前通常需要培养到桑椹（桑葚）胚或囊胚阶段，C错误；
D、⑤过程为胚胎移植技术，其优点是可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，D正确。
故选AD。
20. 为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞染色体丢失的问题，研究者在单克隆抗体的制备过程中增加了一个步骤，如图所示。除了抗原刺激之外，用EBV（一种病毒颗粒）感染动物 B淋巴细胞，并使之成为“染色体核型稳定”的细胞株。这样的细胞株能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感。下列相关分析合理的是（ ）

A. 杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降
B. B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等处
C. 骨髓瘤细胞应该无法在HAT选择培养基中存活
D. 杂交瘤细胞产生的抗体能针对特定抗原而不针对EBV
【答案】ABCD
【解析】
【分析】题图分析：图示为单克隆抗体制备过程，除了抗原刺激之外，还用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，该细胞株能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感。
【详解】A、杂交瘤细胞染色体丢失可能导致细胞发生变异，从而导致抗体产生能力下降，A正确；
B、B细胞分布在脾脏和淋巴结等免疫器官中，所以在单克隆抗体制备过程中，B细胞取自于抗原刺激后动物的淋巴结或脾脏等，B正确；
C、据图可知，骨髓瘤细胞在HAT选择培养基中死亡，C正确；
D、本实验中EBV的作用是使B细胞染色体核型更稳定，而不是刺激B细胞分化成浆细胞产生抗体，所以该杂交瘤细胞不能产生抗EBV的抗体，D正确。
故选ABCD。
三、非选择题
21. 农杆菌侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA插入植物基因组中，下图为获得抗除草剂转基因玉米的技术路线，请回答：


（1）构建表达载体选择限制酶时，要求Ti质粒内每种限制酶只有一个切割位点，同时要求酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同，这个过程需用______种限制酶，目的是防止酶切产物自身环化。除草剂抗性基因G和Ti质粒载体连接时，用______酶催化连接，新形成的化学键是____________。
（2）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带____________插入受体细胞的核DNA。常用______处理使农杆菌成为感受态细胞。
（3）获得抗除草剂转基因玉米涉及到多次筛选，其中筛选含重组质粒的农杆菌应使用含____________的选择培养基，使用含____________的选择培养基筛选出转化的愈伤组织，再诱导愈伤组织再生出抗除草剂转基因玉米。
【答案】 ①. 2 ②. DNA连接 ③. 磷酸二酯键 ④. 目的基因 ⑤. Ca2+ ⑥. 抗生素 ⑦. 除草剂
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：
分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。
个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】（1）在构建基因表达载体时，为了防止酶切产物自身环化，需要使用2种不同的限制酶对目的基因（除草剂抗性基因G）和质粒进行切割；除草剂抗性基因G和Ti质粒载体连接时，用DNA连接酶催化，形成的化学键是磷酸二酯键。
（2）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带目的基因（除草剂抗性基因G）插入受体细胞的核DNA；常用Ca2+处理使农杆菌成为感受态细胞。
（3）据图分析，图示质粒上的标记基因是抗生素抗性基因，因此筛选含重组质粒的农杆菌应使用含抗生素的选择培养基；应该使用含除草剂的选择培养基筛选出转化的愈伤组织，再诱导愈伤组织再生出抗除草剂转基因玉米。
【点睛】解答本题的关键是掌握基因工程的四个基本步骤和植物细胞组织培养技术等知识点，能够分析构建基因表达载体时利用两者限制酶的原因，并能够利用基因的分离定律的相关知识对后代纯合子的概率进行计算。
22. 斑马鱼是一种模式动物，体外受精发育，胚胎透明、便于观察，可用于水质监测、基因功能分析以及药物毒性与安全性评价等。
（1）由于人类活动产生的生活污水日益增多，大量未经处理的污水直接排入河流、湖泊会引起水体_____，导致藻类大量繁殖形成水华。取水样喂养斑马鱼，可用斑马鱼每周的体重和死亡率等指标监测水体污染程度。
（2）为了研究某基因在斑马鱼血管发育过程中的分子调控机制，用DNA连接酶将该基因连接到质粒载体形成_____，导入到大肠杆菌菌株DH5α中。为了能够连接上该目的基因、并有利于获得含该目的基因的 DH5α 阳性细胞克隆，质粒载体应含有_____、_____（答出2点即可）。提取质粒后，采用_____法，将该基因导入到斑马鱼受精卵细胞中，培养并观察转基因斑马鱼胚胎血管的发育情况。
（3）为了获取大量斑马鱼胚胎干细胞用于药物筛选，可用_____分散斑马鱼囊胚_____，取分散细胞进行的初次培养称为_____培养。
【答案】（1）富营养化
（2） ①. 重组DNA分子 ②. 限制性核酸内切酶的识别序列 ③. 抗生素抗性基因（标记基因） ④. 显微注射
（3） ①. #胰蛋白酶##胰酶# ②. 内细胞团
③. 原代
【解析】
【分析】1、基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。2、在动物细胞培养过程中，必须用胰蛋白酶处理内细胞团，使之分散成单个细胞；用于饲养层的细胞一般是胚胎成纤维细胞；在培养液中加入适量的抗生素，防止细胞培养过程中的细菌污染。
【小问1详解】
生活污水富含N、P未经处理就直接排入河流、湖泊，会导致水体富营养化，导致藻类大量繁殖形成水华。
【小问2详解】
具有相同粘性末端的目的基因和载体DNA （如质粒），经DNA连接酶处理后，会形成重组DNA分子；与目的基因相同的限制性核酸内切酶识别序列，可以确保限制性内切酶处理后与目的基因形成相同的粘性末端，以便于和目的基因的连接，标记基因（抗生素抗性基因）的存在，便于筛选含有目的基因的受体细胞，因此为了能够连接上该目的基因、并有利于获得含该目的基因的DH5α阳性细胞克隆，质粒载体应含有限制性核酸内切酶的识别序列、抗生素抗性基因；动物基因工程，通常采用显微注射法将重组DNA分子导入动物受精卵中，所以提取质粒后，采用显微注射法，将该基因导入到斑马鱼受精卵细胞中。
【小问3详解】
使用胰蛋白酶处理囊胚的内细胞团，借助酶的专一性， 可分解细胞间质的蛋白质，让细胞分散，便于培养，所以为了获取大量斑马鱼胚胎细胞用于药物筛选，可用胰蛋白酶分散斑马鱼囊胚的内细胞团；分散的细胞初次在卡氏瓶中培养，称之为原代培养。
【点睛】本题考查基因工程和动物细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程和细胞工程的具体的操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合题干信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查。
23. 巴氏芽孢杆菌是一类具有较高脲酶活性，能够分解尿素的细菌，广泛分布在土壤、堆肥及污水中。这种细菌能够将氮肥中的尿素分解成氨态氮被植物吸收，对土壤的肥力有着重要作用。研究人员拟从土壤样品中分离该类细菌，下图所示为操作流程，①～⑤表示操作步骤。请回答下列问题：




（1）配制培养基时：按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的_____，及时对培养基进行分装，并进行_____灭菌。
（2）步骤②富集培养所使用的培养基按用途来分应为_____培养基，步骤②的主要目的是_____。
（3）在步骤④的培养基中应加入_____，从而使培养基能形成菌落，便于观察和计数。若用该方法培养设置了3个培养基，菌落数分别为163个、158个、159个，则可以推测富集培养后的菌液中每毫升含细菌数为_____个，运用这种方法统计的结果往往较实际值偏_____，原因是_____。
（4）要进一步分离纯化巴氏芽孢杆菌采用步骤⑤_____法进行操作，在该操作过程中接种工具至少要灼烧_____次。
【答案】（1） ① pH ②. 高压蒸汽（湿热）
（2） ①. 选择 ②. 增加巴氏芽孢杆菌的浓度（数量）
（3） ①. 琼脂 ②. 1.6×106 ③. 低 ④. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（4） ①. 平板划线 ②. 5
【解析】
【分析】1、从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。筛选目的微生物应该使用选择培养基，配制培养基的一般操作是配制培养液、调整pH、分装、包扎、灭菌、搁置斜面。
2、据图可知，富集培养后的培养液稀释了1000倍，步骤④中涂布的稀释液体积为0.1ml，步骤⑤为平板划线。
【小问1详解】
配制培养基时，操作过程为计算、称量、溶化、配制培养液、调整pH、分装、包扎、灭菌、倒平板，培养基需要进行高压蒸汽灭菌法灭菌。
【小问2详解】
步骤②富集培养目的是增加培养液中巴氏芽孢杆菌的浓度，所使用的培养基应以尿素为唯一碳源，按用途来分应为选择培养基。
【小问3详解】
使培养基能形成菌落，便于观察和计数，需要选择固体培养基，所以应该在培养基中加入琼脂。
用该方法培养应选择菌落数在30-300的进行计数，三个培养皿菌落数分别为163个、158个、159个，则平均菌落数为（163+158+159）/3=160，则富集培养后的菌液中每毫升含细菌数为160÷0.1×1000=1.6×106个；用稀释涂布平板法进行计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的结果往往较实际值偏低。
【小问4详解】
图中⑤分离纯化巴氏芽孢杆菌采用的方法是平板划线法；在每次划线前和划线结束后都要灼烧，图中划线区域共4个，所以该操作过程中接种针至少要灼烧4+1=5次。
【点睛】本题主要考查微生物的筛选与分离，培养基的制作过程等知识，意在提高学生对相关知识点的识记与理解，明确相关信息并能结合题意分析作答是解题关键。
24. 根据所学知识完成下列问题：


（1）运用传统有性杂交（即用番茄、马铃薯杂交）自然状态下不能得到杂种植株，原因是_____。
（2）在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中，依据的原理是_____，其中过程②称为_____，体现了细胞膜的_____，常用的促进原生质体融合的融合剂为_____，植物体细胞融合完成的标志是_____。
（3）已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则“番茄马铃薯”属于_____倍体植株。
（4）已知柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，可用植物组织培养来实现柴油的工业化生产。若利用此技术，将柴油树细胞培养到_____（填字母编号）阶段即可。
（5）若培育抗虫棉，将抗虫基因通过适当的途径导入棉花受精卵，然后进行组织培养，该过程相当于_____（填数字编号）。
【答案】（1）不同植物存在生殖隔离
（2） ①. 植物细胞全能性 ②. 原生质体融合 ③. 流动性 ④. PEG##聚乙二醇 ⑤. 再生出新的细胞壁 （3）六 （4）e （5）④和⑤
【解析】
【分析】分析题图：图示为植物体细胞杂交过程示意图，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②表示人工诱导原生质体融合；③表示再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化过程；⑤表示再分化过程。
【小问1详解】
番茄和马铃薯属于两种植物，不同物种的植物存在生殖隔离，因此运用传统有性杂交自然状态下不能得到杂种植株。
【小问2详解】
在利用杂种细胞培育杂种植株的过程是植物组织培养的过程，依据的原理是细胞的全能性；其中过程②称为原生质体融合，体现了细胞膜的流动性；常用的促原生质体融合的融合剂为PEG（或聚乙二醇）；植物体细胞融合完成的标志是再生出新的细胞壁。
【小问3详解】
原生质体融合后细胞中的染色体组数目为两种细胞的和，故番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则“番茄马铃薯”属于六倍体。
【小问4详解】
用植物组织培养实现柴油的工业化生产，要获得植物细胞的代谢产物，只需将柴油树细胞培养到愈伤组织阶段即可，对应图中的e。
【小问5详解】
若培育抗虫棉，将抗虫基因通过适当的途径导入棉花受精卵，然后进行组织培养，包括脱分化和再分化两个阶段，即图中的④和⑤。
【点睛】本题主要考查植物体细胞杂交的相关知识，解题关键是识记植物体细胞杂交的原理、具体过程及意义，能准确判断图中各步骤的名称，再结合所学的知识准确答题。
25. 2020年诺贝尔生理学或医学奖的获奖成果为丙肝病毒（HCV）的发现过程。某研究小组欲探究 HCV入侵时间对肝细胞活力的影响，请根据提供的实验材料和仪器完成实验思路，并回答相关问题：
材料与用具：人体肝组织、新分离的HCV株（RNA病毒）、胎牛血清、动物细胞培养液、胰蛋白酶、培养瓶、相关检测仪器等。
（要求与说明：检测时间间隔12h，保证48h内悬浮培养的营养条件适宜，不出现接触抑制，实验仪器、试剂等操作不做要求，细胞活力的检测方法不做要求）
（1）实验思路：
①_____；
②将肝细胞悬液均等加入若干培养瓶中，_____；
③甲组用适量且等量新分离的HCV感染肝细胞，乙组不作处理；
④在适宜条件下培养，_____；统计分析数据。
（2）预测最可能的实验结果（用曲线图表示，坐标轴上标出初始值）。
_____
（3）分析与讨论：
①胰蛋白酶可以分散细胞获得单个细胞的悬浮液的原因是_____。
②HCV 感染可引起丙肝，丙肝可能进一步发展成肝癌，正常细胞癌变的根本原因是_____。
③HCV主要通过血液传播、性传播、母婴传播，特别是感染HIV的个体免疫功能减退，感染HCV的风险更高，原因是_____。
④若某地出现HCV感染疫情，请用相应的生物学知识提出可行的检测初期感染者的方法：_____（仅写出检测方法，具体操作不做要求；感染HCV后，丙肝抗体在血浆中检出的时间较晚，一般要8～12周）
【答案】（1） ①. 将人体肝细胞培养在添加了胎牛血清的动物细胞培养液中，当细胞处于快速增长期时，用胰蛋白酶将细胞分散并悬浮培养 ②. 将培养瓶均分为甲乙两组，检测细胞活力，并记录 ③. 分别在12小时，24小时，36小时，48小时检测细胞活力，记录
（2） （3） ①. 胰蛋白酶可消化组织中的胶原纤维和细胞外其他成分 ②. （原癌基因和抑癌基因）基因突变 ③. HIV 主要感染辅助性T细胞，导致个体的免疫功能严重衰退 ④. 检测 HCV 相关的核酸片段，或者逆转录后进行 PCR
【解析】
【分析】1、分析题意，本实验的实验目的是探究 HCV入侵时间对肝细胞活力的影响，自变量是HCV及其入侵时间，因变量是干细胞活力，实验设计应遵循对照与单一变量原则。
2、根据实验设计原则，将细胞悬浮培养液均分为两等分，加入培养瓶甲和乙，检测细胞活力，并记录。甲中用新分离的HCV感染肝细胞，乙组不作处理。在适宜条件下培养，分别在培养至12、24、36、48小时检测细胞活力，并记录，然后处理分析实验数据。
【小问1详解】
本实验的实验目的是探究HCV入侵时间对肝细胞活力的影响，自变量是HCV及其入侵时间。根据实验设计的对照原则和单一变量原则，实验思路为：
①将人体肝细胞培养在添加了胎牛血清的动物细胞培养液中，当细胞处于快速增长期时，用胰蛋白酶将细胞分散并悬浮培养；
②将肝细胞悬液均等加入若干培养瓶中，将培养瓶均分为甲乙两组，检测细胞活力，并记录（初始值）；
③甲组用适量且等量新分离的HCV感染肝细胞，乙组不作处理；
④根据题中的“要求与说明：检测时间间隔12小时，保证48小时内悬浮培养的营养条件适宜，不出现接触抑制”，在适宜条件下培养，分别在培养至12小时，24小时，36小时，48小时检测细胞活力，并记录，统计分析数据。
【小问2详解】
由于甲组用HCV处理，乙组不作处理，则预测甲组的细胞活力会低于乙组，且随处理时间延长，活性逐渐下降，可绘制图形如下：
。


【小问3详解】
①人体肝组织细胞间存在胶原纤维和细胞外其他成分，因此用胰蛋白酶可消化组织中的胶原纤维和细胞外其他成分，可以分散细胞获得单个细胞的悬浮液。
②正常细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因发生基因突变。
③由于HIV能够攻击人体的免疫系统，HIV主要感染辅助性T细胞，而辅助性T细胞在体液免疫和细胞免疫中均具有重要作用，被HIV感染的个体免疫功能严重衰退，最终由于免疫功能丧失，感染HCV的风险更高。
④若某地出现HCV感染疫情，要检测初期感染者，可用核酸检测的方法：检测 HCV 相关的核酸片段，或者逆转录后进行 PCR测定。
【点睛】本题主要考查动物细胞培养的有关知识，意在考查学生对所学知识的理解与掌握程度，培养了学生分析实验、获取信息、解决问题的综合应用的能力