高中生物人教版 (2019)选择性必修3一 微生物的基本培养技术精品随堂练习题

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一、单选题
利用平板划线法进行微生物的接种和培养实验时，下列叙述错误的是（ ）
A. 培养微生物的培养液和器具都需要进行灭菌处理
B. 接种后的培养皿要倒置，以防培养污染
C. 接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
D. 根据菌落的数目多少可以大致估算出菌种的数量
【答案】D
【解析】
A、培养微生物的培养液和器具都需要进行灭菌处理，A正确；
B、接种后的培养皿要倒置，以防皿盖上的水珠滴入培养基造成污染，B正确；
C、接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧，C正确；
D、利用平板划线接种时不能对微生物进行计数，利用稀释涂布平板法时才能对微生物进行计数，D错误。
关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是
A. 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解
B. 等培养基冷却50℃左右时进行倒平板
C. 待平板冷却凝固5～10 分钟后将平板倒过来放置
D. 培养基和培养皿都通过干热灭菌
【答案】D
【解析】
A.牛肉膏容易吸潮，可将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，当其溶化后，用玻璃棒取出称量纸，，A正确；
B.待培养基冷却至50℃左右时，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时进行倒平板，B正确；
C.平板冷却凝固约5～10min后还需将平板倒放，C正确；
D.高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌，干热灭菌适用于需要保持干燥的空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌，D错误。
关于配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（）
A. 操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板和灭菌
B. 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C. 待培养基冷却至 50℃左右时倒平板
D. 待平板冷却凝固约 5~10min 后，将平板倒过来放置
【答案】A
【解析】
A.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错误；
B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，B正确；
C.待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，C正确；
D.待平板冷却凝固约5～10min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，D正确。
下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是( )
A. 天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基
B. 接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理
C. 酵母菌的纯化培养过程包括培养基的配置和纯化酵母菌两个阶段
D. 分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源
【答案】C
【解析】
天然培养基是指用天然物质制成的培养基，但也需要加工，A错误；实验操作者的双手应消毒，不是灭菌，B错误；分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源，不是碳源，需加入不含氮元素的有机物(如葡萄糖)作为碳源，D错误。
下列关于微生物的实验室培养与分离的有关操作正确的是
A. 将待灭菌物品放在灭菌桶中（不要装得过满），盖好锅盖，按对称方法旋紧四周固定螺栓，关闭排气阀后，加热灭菌
B. 在倒平板过程中，如不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，应立即用无菌纸擦拭干净备用
C. 对于需要长期保存的菌种，可将1mL菌液转移到甘油瓶中，充分混匀后，放在－20℃的冷冻箱保存
D. 在标记培养皿时，应在培养皿盖上注明培养基种类、培养日期等信息，避免出错
【答案】C
【解析】
A.将待灭菌物品放在灭菌桶中（不要装得过满），盖好锅盖，按对称方法旋紧四周固定螺栓，加热灭菌锅，打开排气阀，待锅内的冷空气排尽后，关闭排气阀灭菌，A错误；
B.在倒平板过程中，如不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，此平板不能再用来培养微生物，B错误；
C.对于需要长期保存的菌种，可将1mL菌液转移到甘油瓶中，充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱保存，C正确；
D.在标记培养皿时，应在皿底注明培养基种类、培养日期等信息，避免出错，D错误。
下列有关微生物培养的叙述,正确的是（ ）
A. 纯化培养时,对培养皿皿盖做标记,培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养
B. 涂布接种时,需将涂布器沾酒精后在酒精灯外焰上引燃,冷却后再使用
C. 培养基采用高压蒸汽灭菌,高压灭菌加热结束后,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖
D. 可用平板划线操作对微生物进行分离和计数
【答案】B
【解析】
A.纯化培养时，对培养皿皿盖做好标记，将培养皿倒置在恒温箱内培养，不用摇床，因为这是固体培养基，用摇床的是液体培养基，A错误；
B.涂布平板时，需要先将涂布器沾酒精后在酒精灯外焰上燃烧进行燃烧灭菌，待冷却后再使用，B正确；
C.培养基采用高压蒸汽灭菌，高压灭菌加热结束后，不能打开放气阀，自然冷却使压力表指针回到零后，开启锅盖，C错误；
D.若要对微生物进行分离和计数，应使作稀释涂布平板法进行接种，D错误。
下列表述正确的是
A. 微生物的培养基中都必须加入碳源、氮源、无机盐、水及特殊营养物质
B. 无菌技术包括对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌
C. 微生物的生长除受营养因素影响外，还受pH、氧、渗透压的影响
D. 使用后的培养基丢弃前一定要进行消毒，以免污染环境
【答案】C
【解析】
A.培养自养型微生物的培养基中不需要加入碳源, 分离自生固氮菌的培养基中不需要加入氮源, A错误;
B无菌技术包括对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，B错误;
C.微生物的生长受到营养因素、温度、pH、氧、渗透压等因素的影响, C正确;
D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，D错误。
在酵母菌的培养与分离实验中，下列相关操作正确的是（）
A. 在LB固体培养基配制过程中，为防止杂菌污染，需要利用无菌水进行配制
B. 实验中所需的棉花应使用脱脂棉，因为脱脂棉不易吸水，可以防止杂菌污染
C. 灭菌后，通常将实验用具放入40~50℃烘箱中烘干，以除去灭菌时的水分
D. 倒平板应在无菌超净台进行，将培养基倒入培养皿后先置于水平桌面上，再晃动
【答案】D
【解析】
A.LB培养基配置完成后需要灭菌，因此在配置过程中无需用无菌水，A错误；
B.脱脂棉易吸水，容易引起杂菌污染，实验中所需棉花不应使用脱脂棉，B错误;
C.灭菌后，通常将实验用具放入60-80°C烘干箱中烘干，C错误;
D.倒平板应在无菌超净台进行，倒完平板应先置于水平桌面上，再晃动，D正确。
下列关于酵母菌的培养和分离实验的叙述中, 错误的是 ( )
A. 接种环灼烧灭菌时,应放在火焰上直到烧红
B. 在全营养培养基平板上进行酵母菌的分离
C. 利用稀释涂布平板法对细菌计数时,需借助显微镜
D. 在挑取菌种前和接种完毕后,均要将菌种试管口通过火焰
【答案】C
【解析】
A.接种环灼烧灭菌时，需要放在火焰上直到烧红达到彻底灭菌，A正确；
B.在全营养培养基（必需有水、无机盐、碳源和氮源等）平板上进行酵母菌的分离，B正确；
C.利用稀释涂布平板法对细菌计数时，是计数菌落，不需借助显微镜，C错误；
D.在挑取菌种前和接种完毕后，均要将菌种试管口通过火焰，防止杂菌进入，D正确。
获得纯净培养物的关键是( )
A. 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
B. 接种纯种细菌
C. 适宜环境条件下培养
D. 防止外来微生物的入侵
【答案】D
【解析】
A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌只是无菌技术的一个方面，不是无菌技术的全部，A错误；
B.接种纯种细菌是获得纯净培养物的前提，B错误；
C.接种方法和培养条件不能防止杂菌的污染，C错误；
D.防止外来杂菌的入侵是获得纯净培养物的关键，D正确。
养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸，这两种物质可被硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离与计数”实验中（ ）
A. 需要配制添加一定浓度铵盐的牛肉膏蛋白胨培养基，以筛选硝化细菌
B. 应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在火焰旁进行
C. 可以采用平板划线法进行接种，还需与未接种的空白培养基同时培养
D. 应将培养基置于30℃恒温下培养12 h后，统计培养基中全部菌落数
【答案】B
【解析】
A.硝化细菌吸收利用氨及亚硝酸，但牛肉膏蛋白胨培养基不能用来筛选硝化细菌，A错误；
B.应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在火焰旁进行，以防杂菌污染，B正确；
C.实验目的对养殖池底泥中硝化细菌的分离与计数，可以采用稀释涂布平板法进行接种，还需与未接种的空白培养基同时培养，C错误；
D.应将培养基置于30℃恒温下培养12h后，统计培养基中硝化细菌的菌落数，D错误。
某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，包括制备培养基、灭菌、接种培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关问题的叙述中正确的是（）
A. 实验用过的带菌培养基经过加热后才能倒掉
B. 利用平板划线法对细菌进行分离纯化并计数
C. 观察细菌培养的实验时，最好是在另一块平板上接种清水作为对照实验
D. 培养基中含有的淀粉、蛋白胨可以分别为细菌培养提供碳源和氮源
【答案】D
【解析】
A.实验用过的带菌培养基经过高压蒸汽灭菌后才能倒掉，A错误；
B.应利用稀释涂布平板划线法对细菌进行分离纯化并计数，B错误；
C.要使实验结果可靠，最好是在另一块平板上接种无菌水作为对照实验，C错误；
D.培养基中含有的淀粉、蛋白胨可以分别为细菌培养提供碳源和氮源，D正确。
图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程，其中LB培养基能使细菌数目成倍增长。以下说法正确的是（ ）
A. 需要对活性污泥作灭菌处理
B. ②中LB培养基应以甲醛为唯一碳源
C. 目的菌种异化作用类型为厌氧型
D. 经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养
【答案】D
【解析】
A.对活性污泥作灭菌处理会杀死其中所有的微生物，A错误；
B.②过程用完全培养基培养后，可以获得大量微生物，从而增加目的菌的菌群数量；③过程可以筛选出能分解甲醛的微生物，即培养出以甲醛为唯一碳源的细菌，B错误；
C.培养过程③中“振荡培养”，表明目的菌种异化作用是需氧型，C错误；
D.经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养，D正确。
下列与微生物培养有关的说法,不正确的是：
A. 高压蒸汽灭菌的原理是高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动
B. 培养基在50℃时搁置斜面以及将平板倒置放入培养箱中培养都与消毒灭菌无关
C. 在微生物培养过程中，除考虑营养条件外,还要考虑pH、温度和渗透压等条件
D. 每个菌落由大量的各种细菌组成，菌落的特征可以作为菌种鉴定的重要依据
【答案】B
下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是：
A. 操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B. 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C. 待培养基冷却至50℃左右（刚刚烫手）时进行倒平板
D. 待平板冷却凝固约5〜lOmin后将平板倒过来放置
【答案】A
某同学用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行酵母菌纯化培养。下列说法正确的是
A. 牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后调节pH
B. 蛋白胨可为酵母菌生长提供氮源、碳源和维生素
C. 倒平板操作中，平板未凝固时迅速将平板倒过来放置
D. 用显微镜直接计数的菌落数往往比活菌实际数目低
【答案】B
【解析】
A.牛肉膏蛋白胨培养基应先调pH再经高压蒸汽灭菌，A错误；
B.牛肉膏与蛋白胨培养基是一种应用十分广泛的天然培养基，其中的牛肉膏为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素；蛋白胨主要提供碳源、氮源和维生素，还可以提供生长因子，B正确；
C.倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，防止水蒸气倒流，C错误；
D.由于显微镜直接计数无法区分死菌和活菌，故采用显微镜直接计数统计的结果比实际活菌数多，D错误。
为了分离以尿素为氮源的微生物，配制某培养基的成分如下：葡萄糖、氯化钠、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水和尿素溶液。下列叙述错误的是（ ）
A. 该培养基既有选择功能，又有鉴别功能
B. 配制该培养基时，要用无菌水，不能用蒸馏水
C. 除尿素外，其余成分配制好后经500g/cm2高压蒸汽灭菌
D. 尿素溶液要用经高压蒸汽灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤除菌
【答案】B
【解析】
A.该培养基以尿素作为唯一的氮源，可以起着选择作用，同时加入了酚红指示剂，所以可以起鉴别作用，所以该培养基既有选择功能，又有鉴别功能，A正确；
B.配置培养基用蒸馏水，配置好后需要灭菌，B错误；
CD.该培养基含有葡萄糖，为防止葡萄糖碳化，需要经500g/cm2高压蒸汽灭菌，尿素加热会分解，所以只能用G6玻璃砂漏斗过滤除菌，CD正确。
某同学运用划线法纯化酵母菌。下列叙述正确的是
A. 灭菌时，高压蒸汽灭菌锅压力达到l kg/cm2后，需持续15 min
B. 制平板时，需将培养基均匀地倒在培养皿的整个底部
C. 接种时，每次划线前，接种环均需蘸一次菌液
D. 培养时，需将培养皿倒置于4 ℃的冰箱中
【答案】A
【解析】
A.灭菌时，高压蒸汽灭菌锅压力达到1kg/cm2后，需持续15min，A正确；
B.制平板时，将培养基倒在培养皿中，并轻轻摇匀即可，B错误；
C.接种时，每次划线前，接种环均需灼烧灭菌，C错误；
D.培养时，需将培养皿倒置于恒温培养箱中，D错误。
二、识图作答题
淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。某研究人员对所取土样进行产淀粉酶的细菌的分离操作（A组）和计数操作（B组），过程如图Ⅰ。图Ⅱ是一种接种方法示意图。请回答下列问题：
（1）步骤③、④所用培养基的成分，最大的区别是 种类不同。
（2）步骤④、⑤所用培养基的成分，最大的区别是固体培养基中添加了 。步骤⑤、⑧接种时需设置未接种培养基做对照，目的是 。
（3）步骤⑦中，将1mL菌液分别稀释10倍和100倍，每种稀释度经过步骤⑧各在3个平板上接种（每个平板的接种量为0.1mL），经适当培养后，2组平板上的菌落数分别为59、57、58和2、7、5。据此可得出每升菌液中的活菌数为 个，据此可推测适宜的土壤稀释倍数为 倍。
（ 4）图Ⅱ所用的接种方法 （填“能”或“不能”）对活菌进行计数；甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环要进行 次灼烧灭菌，其中灭菌目的相同的是第 次。
【答案】
（1）碳源
（2）琼脂；检测培养基是否被污染
（3）5.8×106；10
（4）不能；4；第二、三次
【解析】
（1）步骤④所用的培养基是选择培养基，淀粉是唯一碳源，所以步骤③、④所用培养基的成分，最大的区别是碳源种类不同。
（2）步骤④、⑤所用培养基的成分，最大的区别是固体培养基中添加了琼脂。步骤⑤、⑧接种时需设置未接种培养基做对照，目的是检测培养基是否被污染。
（3）步骤⑦的稀释液为10倍时形成的菌落平均数为58 ，在30~300之间，适于进行分离、计数。据此可得出每升菌液中的活菌数为59+57+58÷0.1×10×1000=5.6×106个。据此可推测适宜的土壤溶液稀释倍数为10倍。
（4）图Ⅱ所用的接种方法不能对活菌进行计数；甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环要进行4次灼烧灭菌，其中灭菌目的相同的是第二、三次。
某兴趣小组为了检测某品牌酸奶中乳酸杆菌数量，进行了如图所示实验操作。回答下列问题。

（1）培养基的碳源是指_________________________。对培养基进行灭菌的常用方法是_______________________。
（2）图中①过程，10 g酸奶样品被稀释了_________倍。
（3）图中③过程进行接种培养时，为了检验培养基灭菌是否合格，需设置___________作为对照组。若培养基灭菌合格且图中A、B、C三个培养皿中由乳酸菌形成的菌落数依次为45、48、42，则该品牌酸奶中每10克样品中的乳酸杆菌数约为_______________________个。
（4）接种过程需在酒精灯火焰旁进行，目的是________________________。培养阶段，培养皿需置于无氧环境中培养，原因是________________________________。
【答案】
（1）糖类、蛋白质；高压蒸汽灭菌法
（2）105
（3）空白培养基；4.5×107
（4）防止杂菌污染；乳酸杆菌是厌氧型细菌
【解析】
（1）由题意知，培养基的碳源是指酸奶中的糖类、蛋白质。对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌法。
（2）图中①过程，10 g酸奶样品被稀释了105倍。
（3）图中③过程进行接种培养时，为了检验培养基灭菌是否合格，需设置空白培养基作为对照组。若培养基灭菌合格且图中A、B、C三个培养皿中由乳酸菌形成的菌落数依次为45、48、42，则0.1mL待测液中的菌落数为（45+48+42）/3=45个，则该品牌酸奶中每10克样品中的乳酸杆菌数约为45×106=4.5×107个。
（4）接种过程需在酒精灯火焰旁进行，目的是防止杂菌污染。培养阶段，培养皿需置于无氧环境中培养，因为乳酸杆菌是厌氧型细菌。