生物选修1《生物技术实践》课题1 DNA的粗提取与鉴定练习

这是一份生物选修1《生物技术实践》课题1 DNA的粗提取与鉴定练习




一、选择题


1．凝胶色谱法是根据( )分离蛋白质的有效方法。


A．分子的大小 B．相对分子质量的大小


C．带电荷的多少 D．溶解度


[答案] B


[解析] 凝胶色谱法分离蛋白质依据的是蛋白质相对分子质量的大小。


2．缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持( )基本不变


A．温度 B．pH


C．渗透压 D．氧气浓度


[答案] B


[解析] 缓冲液可维持溶液在一定范围内的pH稳定。


3．电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷( )的电极移动


A．相同 B．相反


C．相对 D．相向


[答案] B


[解析] 电泳时，离子移动的方向应与其所带电荷相反。


4．在蛋白质的提取和分离中，关于对样品处理过程中，分析无误的是


A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐


B．洗涤时离心速度过低，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的效果


C．洗涤过程选用0.1%的生理盐水


D．透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质


[答案] D


[解析] 在蛋白质的提取和分离中，透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质。


5．下列操作正确的是


A．分离红细胞时采用低速长时间离心


B．红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水即可


C．加样之前不需要调整缓冲液的液面


D．透析时要用20mml/L的磷酸缓冲液，透析12h


[答案] D


二、非选择题


6．红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：


(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：________、________、________和________。


(2)实验前取新鲜的血液，切记要在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。


①加入柠檬酸钠的目的是___________________________________________________


________________________________________________________________________。


②以上所述的过程即是样品处理，它包括________、________、收集血红蛋白溶液。


③收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。


①透析的目的是____________________________________________________


________________________________________________________________________。


②透析的原理是____________________________________________________


________________________________________________________________________。


(4)纯度鉴定时最常用的方法是SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳。


①样品纯化的目的是______________________________________________________


________________________________________________________________________。


②血红蛋白有什么特点____________________________。这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？___________________________________________________


________________________________________________________________________。


[答案] (1)样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定


(2)①防止血液的凝固 ②红细胞的洗涤 血红蛋白的释放


(3)①除去相对分子质量较小的杂质 ②透析袋能使小分子物质自由进出，而大分子物质被保留在袋内


(4)①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去 ②血红蛋白呈现红色 在用凝胶色谱法分离时可以通过观察颜色来判断什么时期应该收集洗脱液；同时通过观察颜色使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作


[解析] 本题主要考查蛋白质提取和分离的相关知识，具体分析如下：








一、选择题


1．为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入下列哪一种抗凝血剂


A．NaCl B．甲苯


C．蒸馏水 D．柠檬酸钠


[答案] D


[解析] 柠檬酸钠是血液常用的凝固剂。


2．将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是


A．无色透明的甲苯层


B．脂溶性物质的沉淀层


C．血红蛋白的水溶液


D．其他杂质的暗红色沉淀物


[答案] C


[解析] 混合液离心后的第3层为血红蛋白的水溶液。


3．红细胞的洗涤过程错误的是


A．低速短时间离心，如500r/min离心2min


B．离心后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆


C．将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入五倍体积的蒸馏水


D．直至上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净


[答案] C


4．在装填凝胶柱时，不得有气泡存在的原因是


A．气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果


B．气泡阻碍蛋白质的运动


C．气泡能与蛋白质发生化学反应


D．气泡会在装填凝胶的时候，使凝胶不紧密


[答案] A


[解析] 装填凝胶柱时，若有气泡存在，则气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。


二、非选择题


5．如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请据图回答下列问题。





(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，它在红细胞中的作用体现了蛋白质具有________功能。


(2)甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是________；乙装置中，C溶液的作用是________________________________________________________________________。


(3)甲装置用于________，目的是____________________________________________。用乙装置分离蛋白质的方法叫________。


(4)用乙装置分离血红蛋白时，待________时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。


[答案] (1)运输


(2)磷酸缓冲溶液 洗脱血红蛋白


(3)透析(粗分离) 去除样品中相对分子质量较小的杂质 凝胶色谱法


(4)红色的蛋白质接近色谱柱的底端


[解析] 用透析法(如图甲)对血红蛋白进行粗分离，将血红蛋白溶液装入透析袋中，可以除去样品中分子较小的杂质。血红蛋白的纯化采用凝胶色谱法(如图乙)，血红蛋白相对分子质量较大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路径较短，移动速度较快，可以收集到红色的蛋白质。