【生物】吉林省延边第二中学2018-2019学年高二下学期第一次月考试卷 （解析版）

吉林省延边第二中学2018-2019学年高二下学期
第一次月考试卷
注意事项：
1．答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试题卷和答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。
2．选择题的作答：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
3．非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
4．考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。
第I卷（选择题）
一、单选题
1．某高校采用如图所示的发酵罐进行葡萄酒主发酵过程的研究，下列叙述错误的是（ ）

A．夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理
B．乙醇为挥发性物质，故发酵过程中空气的进气量不宜太大
C．正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压
D．可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
2．下列相关叙述,正确的是
A．在果酒的制作过程中,应先去除葡葡的枝梗，再进行多次反复冲洗,这样才可以洗得彻底
B．果酒发酵装置中,充气口的作用是在发酵时连接充气泵进行充气,排气口的作用是在酒精发酵时排出二氧化碳
C．豆腐上长了毛霉后,需加盐腌制8天左右,这样可以抑制微生物的生长,避免豆腐变质,又能使豆腐析出水分,使豆腐块变硬
D．制作泡菜时要选火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子,需要加水密封,目的是隔绝空气,抑制细菌繁殖
3．下列关于传统发酵技术的应用实验中，叙述正确的是
A．腐乳发酵过程中加盐和加酒主要是为了灭菌，
B．分两阶段发酵果醋时，第一阶段比第二阶段的发酵温度要高一些
C．变酸的酒表面的菌膜含大量酵母菌，腐乳的“皮”为毛霉菌丝
D．传统发酵技术制作的腐乳可能因操作不当，其中含有害的微生物
4．二锅头作为京酒的代表，已有八百多年的历史。以下关于酿造二锅头的叙述中，正确的是
A．酵母菌能发酵产生酒精含量为52%的产品
B．可用划线法测定发酵接种所用菌液的浓度
C．酿酒时的环境温度不会影响酿酒进程
D．选用菌种的种类和比例会影响酒的品质
5．总状毛霉和米根霉是常见的霉菌。研究人员将总状毛霉和米根霉的孢子悬液分别接种到两组豆腐切块上，完成前期发酵后，分别测定两组霉菌产生的蛋白酶的活力，结果如下图。据图分析，下列有关叙述正确的是

A．总状毛霉与米根霉都能利用蛋白酶将分解产生的肽和氨基酸分泌到细胞外
B．总状毛霉与米根霉接种量与蛋白酶活力呈正相关
C．相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉使豆腐块中的蛋白质减少更多
D．接种量为5CFU/mL时发酵制作的腐乳品质最好
6．（题文）关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是
①将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解
②等培养基冷却40℃左右时进行倒平板
③待平板冷却凝固5〜10分钟后将平板倒过来放置
④操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
⑤牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素
A．①④⑤ B．②③④ C．①②③ D．②④⑤
7．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（   ）
A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖
B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
8．利用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇，从而减少了对石油资源的依赖，下图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析错误的一项是

A．要得到微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样
B．图中②过程常用的微生物B是酵母菌
C．微生物A和微生物B可利用的碳源相同
D．可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用
9．下列有关微生物筛选的说法正确的是
A．分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降低
B．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素
C．纤维素酶只包括三种组分：C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶
D．刚果红染色法只能在培养微生物的时候加入刚果红
10．日前微博传言手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多，为辨别真伪，两电视台利用微生物培养技术进行实验，过程及结果如下。下列叙述错误的是

A．本实验采用稀释涂布平板法接种
B．本实验不需要设置对照组实验
C．本实验使用的培养基应含有水、碳源、氮源和无机盐
D．两个报道结果不同，可能是因为取样环境不同
11．下列有关说法，正确的是
A．对于频繁使用的菌种，可采用甘油管藏法保藏
B．甘油管藏法保存菌种时用固体体培养基
C．甘油管藏法一般保存温度为-20℃
D．甘油管藏法每3～6个月将菌种从旧的培养基转移到新鲜培养基上
12．用来判断选择培养基是否起到了选择作用和培养基是否被污染需要设置的对照分别是
①未接种的该选择培养基
②接种了的该选择培养基
③接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
④未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
A．②① B．④② C．③① D．③②
13．南洋东华公司研发了两种石油降解产品BDB-n生物降解菌（厌氧型）和BDB-a生物降解菌（好氧型），降解菌是通过产生酶对石油进行分解的。如图为不同条件下，某种降解菌对某湖泊污泥中石油分解能力的测定结果。下列有关分析错误的是

A．该实验的自变量为pH和污泥含水量
B．该实验的检测指标是2天后污泥中的石油含量
C．该实验中使用的降解菌最可能是BDB-a生物降解菌
D．在不同污泥含水量条件下，降解菌体内酶的最适pH相同
14．培养基、培养皿、接种环、葡萄酒所采用的灭菌、消毒方法依次是（ ）
①灼烧灭菌 ②高压蒸汽灭菌 ③巴氏消毒法 ④干热灭菌
A．④②①③ B．②④①③ C．②④③① D．①③④②
15．在培养基配制和微生物接种的过程中，确保无杂菌污染被称为无菌操作。图中符合无菌操作要求的有
①火焰烧瓶口并在 ②菌种试管口在 ③接种前灼烧 ④ 接种前培养皿 ⑤ 靠近火焰接种火焰旁将培养基倒

A．①②③④ B．①②③⑤ C．①③④⑤ D．②③④⑤
16．下列有关无菌技术的说法，其中正确的有几项
①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物
②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子
③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存
④高压蒸汽灭菌时若不将锅内冷空气排出则达不到预期的灭菌效果
⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌
⑥无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌
A．2项 B．3项 C．4项 D．5项
17．关于统计微生物数目，说法错误的是
A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离
B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同
C．只有得到了3个或3个以上菌落数目在30〜300的平板，才说明系列稀释操作成功
D．每次统计菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果
18．下列关于刚果红染色法的说法中，正确的是
A．先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，立即出现有透明圈的菌落
B．倒平板时加入刚果红，可在培养皿中先加入lmlCR溶液后加入100ml培养基
C．菌落的大小、颜色、有无荚膜、隆起程度等特征都可作为菌种肉眼鉴定的依据
D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌
19．下列有关颜色反应的叙述，错误的是
A．在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现蓝绿色
B．在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与 N-1-萘基乙二胺盐 酸盐结合形成玫瑰红色染料
C．细菌分解尿素后，会使培养基的碱性增强，使得加入的酚红指示剂变红
D．刚果红可以与像纤维素这样的多糖形成红色复合物
20．下列有关酶的叙述,错误的是（ ）
A．果胶酶是一类酶的总称,探究果胶酶的最适温度时,需将底物和酶分别在同等温度下处理后再混合
B．低温和高温对酶活性的影响是相同的,而过酸、过碱对酶活性的影响是不同的
C．探究果胶酶的最适温度和最适pH实验中应严格控制酶作用时间
D．在果胶酶溶液中加入双缩脲试剂可发生紫色反应
21．某工厂新制了50L苹果泥，准备生产果汁，但不知酶的最适用量。为了节约成本，进行了如下探究实验：取8只试管编号1～8，分别加入30mL苹果泥，保温一段时间，然后向各试管加入不同体积的果胶酶溶液，反应一段时间后过滤并记录果汁体积，实验数据如下表所示。下列分析错误的是
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
果胶酶溶液体积（mL）
1
2
3
4
5
6
7
8
果汁体积（mL）
20.6
21.2
21.8
22.4
23
23.4
23.4
23.4
注解：果汁体积均不包含酶溶液体积
A．8只试管均需要调节至相同且适宜的温度、pH，且反应时间充足
B．本实验的测量指标还可以是苹果泥反应完全时所需要的时间
C．在果汁生产中一般还应加入纤维素酶来充分瓦解细胞壁
D．为得到更准确的最适用量，可以设置5～6 mL范围内不同果胶酶用量梯度实验来探究
22．关于加酶洗衣粉的叙述，正确的是
A．加少量白醋能增强加酶洗衣粉中酶的活性
B．洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用
C．高温易使酶失活，因此冷水洗涤去污效果应该比温水好
D．使用加酶洗衣粉时，浸泡时间不足会影响洗涤效果
23．下列有关加酶洗衣粉中酶叙述中正确的是
A．洗衣粉中的纤维素酶和人体小肠中的纤维素酶最适pH相同
B．洗衣粉中的蛋白酶和人体胃蛋白酶的最适温度均为37℃左右
C．洗衣粉中的脂肪酶和人体胰脂肪酶都能催化脂肪水解
D．洗衣粉中的蛋白酶能分解洗衣粉中其他蛋白质类的酶
24．下图是围绕加酶洗衣粉洗涤效果进行的研究结果，下列有关叙述中，错误的是

A．本研究的自变量有温度和洗衣粉是否加酶
B．本研究的因变量可能是污渍残留量
C．两类洗衣粉的最佳使用温度都为t1
D．温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活
25．下列关于加酶洗衣粉的叙述，不正确的是
A．洗衣粉中添加的酶通常是由微生物发酵生产而来
B．洗衣粉中的蛋白酶通常会将蛋白质水解成水溶性氨基酸或小分子的肽
C．在50 ℃热水中用加酶洗衣粉洗衣时，其中的酶会迅速失活
D．加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，会影响其中酶的活性
第II卷（非选择题）
二、非选择题
26．请回答下列有关问题。
（1）豆腐乳前期发酵是在严格的无菌条件下温度应控制在___________，并保持一定的湿度，然后向长满毛霉的豆腐块加盐，之后要加入配置好的卤汤，其中卤汤中加酒的作用一是可以抑制微生物的生长，二是________________________。
（2）制作吉香居泡菜时，起主要作用的微生物是____________。泡菜制作中盐和水的比例是_____。泡菜中的亚硝酸盐过多会对人体产生危害，通常用________法检测亚硝酸盐含量。
（3）我国酿醋的历史悠久，其主要生产工艺流程如图。

在果酒制作时，酒精发酵阶段，参与反应的酵母菌菌种来自于_________。当氧气和糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌经过__________________（反应式）得到醋酸。
27．硝基苯酚是工业污水中重要污染物，某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题：
（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择_______(硝基苯酚，硝基苯酚+牛肉膏，硝基苯酚十葡萄糖）作为碳源，不采用其他两组的原因是_________________
（2）纯化菌株时划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是________________（答一点即可）。
（3）进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入盛有9mL的无菌水中；常用稀释涂布平板法进行活菌计数，其原理是_____________________，但统计的菌落数往往___________（填“多于”或“少于”)稀释液中的活菌数，原因是__________________________。
28．测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基(EMB 培养基)上培养→统计菌落数目。据图回答问题：

(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是___________。与过滤有关的操作都要在_______________旁进行。
(2)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的_________操作。从物理状态角度分析，EMB 培养基属于___________培养基。
(3)某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将 10ml 待测水样加入到 90ml 无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得 EMB 培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为________个。
(4)该同学进一步思考，利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，另一份来自明德中学屈子湖，若要通过测量蓝藻的数目来研究水华，应更换上述过滤装置中的滤膜，为了减少细菌的干扰，应选择孔径________(填 “更小”或“不变”或“更大”)的滤膜。
29．工业生产果汁时，常常利用果胶酶破除果肉细胞的细胞壁以提高出汁率。为研究温度对果胶酶活性的影响，某学生设计了如下图所示的实验：

①将果胶酶与苹果泥分装于不同的试管，在10℃水浴中恒温处理10min（如图中A）。
②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合，再次在10℃水浴中恒温处理10min（如图中B）。
③将步骤②处理后的混合物过滤，收集滤液，测量果汁量（如图中C）。
在不同温度条件下重复以上实验步骤，并记录果汁量，结果如下表：

根据上述实验，请分析并回答下列问题：
（1）果胶酶能破除细胞壁，是因为果胶酶可以将细胞壁中的果胶分解成_______。
（2）实验结果表明，在上述8组实验中，当温度为_________时果汁量最多，当温度再升高时，果汁量降低，说明_______________。
（3）实验步骤①的目的是__________________。
（4）根据果胶酶在果汁生产中的作用的系列实验结果回答下列问题：
①下列图中可以表示温度对果胶酶活性影响的曲线是______。
②在原材料有限的情况下，能正确表示相同时间内果胶酶的用量对果汁产量影响的曲线是______。


参考答案
1．B
【解析】【分析】葡萄酒发酵的原理是酵母菌的无氧呼吸，即葡萄糖在无氧条件下分解产生二氧化碳和酒精并释放少量的能量，发酵的温度在18℃-25℃。
【详解】根据以上分析已知，果酒发酵的适宜温度为18℃-25℃，因此夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理，A正确；乙醇是酵母菌无氧呼吸的产物，因此分解过程中不需要通入空气，B错误；无氧呼吸产生了二氧化碳，但是没有消耗氧气，因此发酵罐中的气压不会低于大气压，C正确；葡萄酒发酵的原料是糖类，因此可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵，D正确。
【点睛】解答本题的关键是了解与掌握果酒发酵的原理，明确无氧呼吸没有消耗氧气，但是产生了二氧化碳，因此发酵罐中的气压可能升高。
2．C
【解析】
【分析】
酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活，在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时可以进行发酵；利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气，在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵，试验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒，制作果酒时应该关闭充气口；腐乳制作过程中，加盐能给腐乳必要的咸味，能析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，还能抑制杂菌的生长，避免豆腐腐败变质；制作泡菜时，泡菜坛的选择标准是火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好，否则容易引起蔬菜腐烂。
【详解】
A. 在果酒的制作过程中，应先冲洗葡萄，后去除葡萄的枝梗，以防止杂菌的污染，A错误；
B. 果酒发酵装置中，充气口应关闭，B错误；
C. 豆腐上长了毛霉后，需加盐腌制8天左右，这样可以抑制微生物的生长，避免豆腐变质，又能使豆腐析出水分，使豆腐块变硬，C正确；
D. 制作泡菜时要选火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子，加水密封，有利于乳酸菌繁殖，D错误；
3．D
【解析】
【分析】
腐乳制作过程中，盐的浓度过高，影响口味，浓度过低，不足以抑制微生物生长，腐乳易腐败变质；配制制作腐乳所需的卤汤要加适量的酒（12%左右），其目的是抑制微生物生长，酒精过少达不到目的，过多会抑制酶的活性，影响腐乳的成熟，同时影响腐乳的风味。果酒的发酵温度范围是18～25℃，果醋的发酵温度范围是30～35℃，腐乳的发酵温度范围是15～18℃；醋酸菌在氧气充足的条件下，能将乙醇转化成醋酸，变酸的酒表面的一层菌膜，主要与醋酸菌有关。
【详解】
A. 腐乳发酵过程中加盐主要是为了抑制微生物生长，防止腐败变质，加酒主要是为了使腐乳具有独特的香味，A错误；
B. 分两阶段发酵果醋时，第一阶段即果酒的制作，所控制的温度范围是18～25℃，第二阶段的发酵即果醋的制作，所控制的温度范围是30～35℃，第一阶段比第二阶段的发酵温度要低一些，B错误；
C. 变酸的酒表面的菌膜含大量醋酸菌，腐乳的“皮”为毛霉菌丝，C错误；
D. 传统发酵技术制作的腐乳可能因操作不当，导致其中含有害的微生物，D正确。
4．D
【解析】
【分析】
酵母菌发酵时，当酒精含量达到12%～16%时，会毒害酵母菌，当酒精含量超过16%酵母就会死亡；稀释涂布平板法可用于统计样品中活菌的数目；酵母发酵的适宜温度是18～25℃，过高过低都会影响发酵进程；此外，菌种的种类和比例也会影响发酵产物的品质。
【详解】
A. 发酵时当酒精含量超过16% 时，酵母菌就会死亡，A错误；
B. 测定发酵接种所用菌液的浓度应用稀释涂布平板法，B错误；
C. 酵母菌酒精发酵的适宜温度是18～25℃，环境温度会影响酿酒进程，C错误；
D. 发酵时选用菌种的种类和比例会影响酒的品质，D正确。
【点睛】
本题考查果酒的制作，要求考生识记和掌握果酒制作的原理及条件，能理论联系实际，运用所学的知识合理解释生活中的生物学问题，属于考纲理解层次的考查。
5．C
【解析】状毛霉与米根霉都能将蛋白酶分泌到细胞外，进而将豆腐块中的蛋白质分解产生肽和氨基酸，A错误；据图分析，随着接种量的增加，总状毛霉与米根霉产生的蛋白酶的活性都是先增加后减弱，并不是一直呈现正相关，B错误；相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉的蛋白酶活性更高，因此使豆腐块中的蛋白质减少更多，C正确；图示只能证明接种量为5CFU/mL时，蛋白酶的活性最好，但是不能说明发酵制作的腐乳品质最好，D错误。
6．D
【解析】将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，①正确；待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，②错误；待平板冷却凝固约5～10min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿低在上，③正确；制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，④错误；蛋白胨只能提供碳源、氮源、维生素，⑤错误。
故选：D。
【点睛】本题考查微生物的分离和培养，重点考查制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程，要求学生掌握培养基的制备步骤及相关的操作，此类试题需要学生具有扎实的基础知识，学会构建知识网络结构。
7．D
【解析】高压灭菌加热结束时，当压力表的压力降到零时，打开排气阀，打开盖子，如果提前打开排气阀，锅内压力突然下降，灭菌容器内液体会冲出容器，造成污染，A错误；倒平板时，培养皿盖打开一缝隙，不能放到一边，B错误；接种时，接种环经火焰灭菌冷却后挑取菌落，不能趁热挑取，以免杀死微生物，C错误；由于平板倒过来放置，则用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上，D正确。
8．C
【解析】
试题分析：根据图解可知，微生物A的碳源是纤维素，故要想获得微生物A最好选择富含纤维素的土壤采集，A项正确；图中②过程表示生产乙醇的过程，常用微生物是酵母菌，B项正确；微生物A所用碳源为纤维素，微生物B所用碳源为纤维素降解物，C项错误；微生物A之所以能利用纤维质原料是因为其含有纤维素酶，故可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用，D项正确。
考点：本题考查生产乙醇的过程中的原料，微生物的种类等知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断的能力。
9．B
【解析】
尿素分解菌将尿素转化为氨，氨呈碱基，则培养基的酸碱度升高，A错误；尿素须经脲酶催化才能分解形成氨，说明只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，B正确；纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，C错误；常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红，D错误。
10．B
【解析】
【分析】
稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。设计对照组实验，既可排除无关变量对实验结果的影响，又可增加实验结果的可信度和说服力。微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。取样环境不同、取样时间不同、取样量的差异都可能影响最终的实验结果。
【详解】
A、该实验的接种方法为稀释涂布平板法，该方法用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等，正确；
B、需要设立空白对照，因为不能排除实验操作、培养过程中、灭菌中等环节是否产生污染。而设置空白对照则可以体现是否存在污染和污染程度，以确保实验过程的可靠，错误；
C、微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐，正确；
D、不同的菌落形态、大小不同，图示两个电视台调查的手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌落，即存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，可能是因为手机的取样和马桶的取样都不相同，正确。
故选B。
11．C
【解析】对于频繁使用的菌种,可采用临时保存法保藏，A错误；甘油管藏法保存菌种是一种长期保存菌种的方法，需要用液体培养基保存，B错误；临时保存法的温度一般设置为4℃，甘油管藏法一般保存温度为-20℃，C正确；临时保存法需要每3～6个月将菌种从旧的培养基转移到新鲜培养基上，甘油管藏法没有这样的要求，D错误。
12．C
【解析】判断选择培养基是否起到了选择作用时，将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此牛肉膏蛋白胨培养基是对照组；用来判断选择培养基是否被污染时，需要一个未接种的该选择培养基做对照，如果未接种的培养基也生长出菌落，说明培养基被污染，反之，如果未接种的培养基没有长出菌落，说明选择培养基未被污染。
故选：C。
【点睛】本题主要考查实验过程中遵循的对照原则、单一变量意在等内容，意在加强学生的实验遵循的原则的理解与运用。
13．C
【解析】分析图解可知，该实验的自变量是pH和污泥含水量，因变量是2天后石油含量，AB正确；根据图中的实验数据分析可知，当污泥含水量60‑80%、pH=7时，石油含量最少，说明石油降解酶分解能力最强的条件为污泥含水量60‑80%、pH=7，则该实验用的应该是厌氧菌，即BDB-n生物降解菌，C错误；根据三条曲线的最低点可以判断，在不同污泥含水量条件下，降解菌体内酶的最适pH相同，D正确。
【点睛】解答本题的关键是分析曲线图，找出实验的自变量和因变量，判断最适宜的pH和污泥含水量，进而判断出分解菌的类型。
14．B
【解析】
【分析】
使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌（主要适用于金属接种工具）、干热灭菌（主要适用于需要保持干燥的玻璃器具）和高压蒸汽灭菌（主要适用于培养基的灭菌）。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。
【详解】
培养基一般用②高压蒸汽灭菌、培养皿一般用④干热灭菌、接种环一般用①灼烧灭菌、葡萄酒所采用③巴氏消毒法，故灭菌、消毒方法依次是②④①③，故选B。
【点睛】
本题主要考查灭菌与消毒的区别于联系，关键是熟记各自的方法与适用范围。
15．B
【解析】
【分析】
无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min。
【详解】
①酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，应用火焰烧瓶口并在火焰旁将培养基倒入灭菌培养皿中，①正确；
②菌种试管口可在火焰上灼烧，达到杀灭杂菌的目的，②正确；
③接种环要在接种前在火焰上灼烧，待冷却后进行接种，③正确；
④培养皿可用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，不能直接放在火焰上灼烧，④错误；
⑤酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，⑤正确；故符合题意的有①②③⑤，B正确。
16．B
【解析】
无菌技术的关键是采用消毒或灭菌的方法消灭微生物，防止杂菌污染，并非杀灭实验室中所有的微生物，①错误；煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和一部分芽孢、孢子，②错误；经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存，③正确；在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，由于空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压，所以若不将锅内冷空气排出则达不到预期的灭菌效果，④正确；酒精灯火焰的充分燃烧层温度高，将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，⑤正确；无菌技术中，若处理对象为液体，可消毒，也可灭菌，⑥错误。故选B。
17．C
【解析】土壤中各种微生物数量不同，细菌大约为70%～90%，其次是放线菌，真菌最少，故不同类型微生物，要按不同稀释倍数进行，A正确；根据选项A可知，土壤中各类微生物的数量不同，因此测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，需要选用的稀释范围不同，B正确；在同一稀释度下只要得到两个或两个以上的菌落数目在30～300的平板，就说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，C错误；每次统计菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果，D正确。
【点睛】本题主要考查筛选、分离微生物以及微生物的计数的相关知识，意在强化学生对所学知识的识记、理解与掌握。
18．D
【解析】
【分析】
刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理：刚果红能与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，这样就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。在以尿素为唯一氮源的培养基中，不能分解尿素获得氮源的细菌不能生长，而分解尿素的细菌能利用尿素作氮源，将尿素分解为氨，使pH升高，若培养基中加入酚红指示剂，指示剂将变红。
【详解】
A. 先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，此种方法需用氯化钠溶液洗去浮色，A错误；
B. 倒平板时就加入刚果红，可在培养皿中先加入10mg/mLCR溶液，灭菌后按照每200mL培养基加入1ml的比例加入CR溶液，B错误；
C. 菌落有无荚膜不能作为菌种肉眼鉴定的依据，C错误；
D. 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若存在尿素分解菌，则可将尿素分解成氨，指示剂变红，故可鉴定尿素分解菌，D正确。
19．A
【解析】
【分析】
橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与乙醇（酒精）发生化学反应，在酸性条件下，变成灰绿色；在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料；在以尿素为唯一氮源的培养基中，不能分解尿素获得氮源的细菌不能生长，而分解尿素的细菌能利用尿素作氮源，将尿素分解为氨，使pH升高，若培养基中加入酚红指示剂，指示剂将变红；刚果红能与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成。
【详解】
A. 在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，A错误；
B. 在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，B正确；
C. 细菌分解尿素后产生氨，会使培养基的碱性增强，使得加入的酚红指示剂变红，C正确；
D. 刚果红可以与纤维素形成红色复合物，D正确。
20．B
【解析】
【分析】
酶是活细胞产生的一类具有生物催化作用的有机物，绝大多数酶是蛋白质，少数酶是RNA；酶具有高效性、专一性，同时受温度、pH值的影，低温使酶的活性降低或暂时失去，但不破坏其结构；而高温、过酸和过碱对酶活性的影响是相同的，都是使酶的结构破坏，活性丧失。
【详解】
探究果胶酶的最适温度时，为使实验更准确，需将底物和酶分别在同等温度下处理后再混合，A正确；低温使酶的活性降低但不会破坏酶的结构，高温、过酸和过碱都会破坏酶的结构而使酶失活，B错误；探究果胶酶的最适温度和最适pH实验中，酶的作用时间属于无关变量，应该严格控制，C正确；果胶酶的化学本质是蛋白质，与双缩脲试剂可以产生紫色反应，D正确。
21．A
【解析】8只试管如果反应时间充足，则各组过滤的果汁体积应相同，与表格中的实验结果不符合，A错误；本实验中苹果泥反应完全时各试管过滤的果汁的体积相同，可以利用苹果泥反应完全所需时间的不同作为本实验的测量指标，B正确；植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以在果汁生产中还应加入纤维素酶来瓦解细胞壁，C正确；设置5～6 mL范围内不同果胶酶用量梯度实验来进行探究是为了得到更准确的最适用量，D正确。
22．D
【解析】
【分析】
加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。影响加酶洗衣粉活性的条件：温度、pH。影响加酶洗衣粉的效果的因素：水温、水量、水质、洗衣粉用量、衣服的质地、大小、浸泡和洗涤的时间。
【详解】
酶的活性受温度和酸碱度的影响，故洗衣时加少许白醋会降低加酶洗衣粉中酶的活性，A错误；大多数表面活性剂对蛋白酶都起到抑制作用而非促进作用，B错误；高温会使酶失活，但是冷水会抑制酶的活性，温水更靠近酶的最适温度，所以温水洗涤效果比冷水好，C错误；使用加酶洗衣粉时，浸泡时间不足会影响洗涤效果，D正确。
【点睛】
解答本题的关键是：温度、酸碱度和表面活性剂都会影响酶的活性，基因工程生产出的酶能耐酸、耐碱、忍受表面活性剂和较高温度。
23．C
【解析】
人体小肠中没有纤维素酶，A错误；胃蛋白酶的最适温度为37℃左右，加酶洗衣粉中的蛋白酶适宜温度范围为50℃左右，B错误；洗衣粉中的脂肪酶和人体胰脂肪酶都能催化脂肪水解为脂肪酸和甘油，C正确；加酶洗衣粉中添加的是酶制剂，蛋白酶与洗衣粉中的其他酶相隔离，蛋白酶对洗衣粉中的其他酶没有作用，D错误。
24．C
【解析】
试题分析：据图可知，本实验的自变量有温度和洗衣粉种类，A项正确；本实验是围绕加酶洗衣粉的洗涤效果进行的研究，所以因变量可能是污渍残留量，B项正确；从图示可知普通洗衣粉的最佳使用温度为t2，而加酶洗衣粉的最佳使用温度为t1，故C项错误；温度超过t2后，加酶洗衣粉的洗涤效果不再改变，说明温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活，D项正确。
考点：本题考查加酶洗衣粉的相关知识，意在考查考生能从课外材料中获取相关的生物学信息，并运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题的能力。
25．C
【解析】
【分析】
加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落，脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质，使洗衣粉具有更好的去污能力；加酶洗衣粉的洗涤效果受水温、洗衣粉浓度、洗涤方式、浸泡时间、水质等多种因素的影响，其中的酶多是微生物发酵产生的，其本质与生物体内的酶无明显差异。
【详解】
A. 加酶洗衣粉中加入的酶多是微生物发酵产生的，A正确；
B. 洗衣粉中的蛋白酶能将蛋白质水解成水溶性氨基酸或小分子的肽，B正确；
C. 加酶洗衣粉的pH值一般不大于10，在水温45～60℃时，能充分发挥洗涤作用，因此在50℃热水中用加酶洗衣粉洗衣时，其中的酶不会失活，C错误；
D. 加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，会导致其中酶的活性降低，D正确。
26．15～18℃ 使腐乳具有独特的香味 乳酸菌 1：4 比色 葡萄皮上的野生型酵母菌 C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量
【解析】
【分析】
传统腐乳制作中所需的毛霉来自空气中的毛霉孢子，而现代的腐乳生产是将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染，保证产品的质量。制作腐乳时温度应控制在15～18℃，并保持一定的湿度。腐乳制作过程中，加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质；酒含量要控制在12%左右，因为酒精含量过高，会使腐乳成熟的时间延长，酒精含量过低，不能抑制微生物的生长，造成杂菌污染。制作泡菜时，起主要作用的微生物是乳酸菌，泡菜盐水按清水和盐为4：1质量比配制煮沸冷却，在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液可增加乳酸菌含量，在发酵初期，酵母菌(或产膜酵母)可使泡菜水的表面形成白膜，开始制作后，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加，杂菌数量减少；制作泡菜的过程中亚硝酸盐的含量先上升后下降，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。果酒的制作离不开酵母菌，在自然发酵的过程中菌种的来源是葡萄皮上的野生型酵母菌，酒精发酵时的温度一般控制在18-25℃，前期需氧，后期不需氧。果醋制作的原理是醋酸菌是好氧性细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】
（1）豆腐乳前期发酵是在严格的无菌条件下温度应控制在15～18℃，并保持一定的湿度，然后向长满毛霉的豆腐块加盐，之后要加入配置好的卤汤，其中卤汤中加酒的作用，一是可以抑制微生物的生长，二是使腐乳具有独特的香味。
（2）制作吉香居泡菜时，起主要作用的微生物是乳酸菌，泡菜制作中盐和水的比例是1：4。泡菜中的亚硝酸盐过多会对人体产生危害，通常用比色法检测亚硝酸盐含量。
（3）在果酒制作时，酒精发酵阶段，参与反应的酵母菌菌种来自于葡萄皮上的野生型酵母菌。当氧气和糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌产生醋酸的反应式为:C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量。
【点睛】
本题考查果酒、泡菜和腐乳的制作，要求学生识记参与果酒、泡菜和腐乳制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒、泡菜和腐乳制作的原理，难度不大。
27．硝基苯酚 其他两组分别含有其他碳源，不能保证硝基苯酚是唯一碳源 接种环灼烧后未冷却划线（未从第一区域末端开始） 培养基表面的一个菌落来源于一个活菌 少于 有些活菌在培养过程中死亡（个别菌落可能是由2个或多个细菌形成）
【解析】
【分析】
微生物生长繁殖所必需的营养物质主要包括碳源、氮源、水和无机盐等，根据题意，欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌，则需配制以硝基苯酚为唯一碳源的培养基；接种时常用接种环，平板划线法要求灼热的接种环冷却后再划线，否则会灼伤菌株甚至导致死亡。划线时要从上一次划线的末端开始划线，这样接种环上才有菌株。
【详解】
（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择以硝基苯酚作为碳源，不采用其他两组，原因是硝基苯酚+牛肉膏的培养基和硝基苯酚十葡萄糖的培养基都含有其他碳源，不能保证硝基苯酚是唯一碳源。
（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环，采用灼烧方法对其进行灭菌，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，造成划线无菌落可能的原因是接种环灼烧后未冷却，或划线未从第一区域末端开始划线。
（3）稀释涂布平板法常用来进行微生物的计数，其原理是培养基表面的一个菌落来源于稀释液中的一个活菌，由于菌落可能是由两个或多个细胞形成，以及有些活菌在培养过程中死亡，所以统计的菌落数往往少于稀释液中的活菌数。
【点睛】
本题考查微生物的培养，要求学生识记微生物的接种方法，能结合实验目的，选择和制备适宜的培养基和接种方法进行分离，要求学生能识记和理解微生物的分离方法和原理，难度不大。
28．滤杯、滤膜和滤瓶 酒精灯火焰 接种 固体 3100 更大
【解析】
【分析】
滤膜法是检测水样中大肠细菌群的方法，将一定量水样注入已灭菌的微孔薄膜的滤器中，经过抽滤，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴于伊红美蓝培养基上，经培养后计数和鉴定滤膜上生长的大肠菌群菌落即可推测计算出水样中的大肠杆菌数；伊红为酸性染料，美蓝为碱性染料，大肠杆菌在伊红-美蓝培养基的菌落呈深紫色，并有金属光泽。
【详解】
（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的有滤杯、滤膜和滤瓶，与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌的污染。
（2）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的接种操作。从物理状态角度分析，EMB培养基属于固体培养基。
（3）某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将10ml 待测水样加入到90ml无菌水中，即稀释了10倍，稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，黑色菌落为大肠杆菌，则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为31×100=3100个。
（4）若要通过测量蓝藻的数目来研究水华，应更换上述过滤装置中的滤膜，由于单个蓝藻细胞的直径比细菌细胞的大，应选择孔径更大的滤膜。
【点睛】
本题以实验流程图为载体，考查了微生物的分离与计数的有关知识，要求学生掌握滤膜法的原理和步骤，识记大肠杆菌鉴定的方法等，结合题干信息准确答题。
29．半乳糖醛酸 40℃ 温度升高，降低了酶的活性 使果胶酶和苹果泥处于同一温度条件 乙 丙
【解析】
【分析】
果胶酶是分解果胶的酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶，植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，果胶酶能破坏细胞壁，有利于液泡中的果汁出汁，因此，果汁的出汁量能反应果胶酶的活性。根据温度对果胶酶活性的影响实验的表格数据，温度在10-40℃时，果汁的出汁量随温度的升高逐渐增加；在40-80℃时，随着温度的升高，出汁量下降。
【详解】
（1）果胶酶能破除细胞壁，因为果胶酶可以将细胞壁中的果胶分解成半乳糖醛酸。
（2）根据实验结果即表中数据分析得出：当温度为40℃时果汁量最多，此时果胶酶的活性最大，当温度再升高时，果汁量降低，说明温度升高，降低了酶的活性。
（3）实验步骤①的目的是使果胶酶和苹果泥处于同一温度条件。
（4）①酶有最适温度，低于或高于该温度时，酶的活性均降低，所以表示温度对果胶酶活性影响的曲线是乙。
②在原材料有限的情况下，起始的一段时间内，由于原料充足，因此增大果胶酶则果汁产量也增大；超过一定量后，增大酶的用量，由于原料的限制，此时果汁的产量不再随酶的用量的增大而增大，故能正确表示相同时间内果胶酶的用量对果汁产量影响的曲线是丙。
【点睛】
本题难度不大，考查了酶的功能以及影响酶活性的因素等知识点，意在考查学生对果胶酶的工作原理和影响酶活性因素的实践应用的掌握。