河南平顶山市普通高中2025-2026学年(下)高二年级期中考试 生物(A卷)（含解析）下学期期中

这是一份河南平顶山市普通高中2025-2026学年(下)高二年级期中考试 生物(A卷)（含解析）下学期期中，共28页。试卷主要包含了 啤酒生产的工艺流程如图所示等内容，欢迎下载使用。
1.答卷前，考生务必将自己的姓名、班级、考场号、座位号、考生号填写在答题卡上。
2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。
1. 河南杞县酱菜、周口槐山酸奶是河南传统食品，均通过乳酸发酵技术生产。下列叙述错误的是（ ）
A. 乳酸发酵过程中需严格控制无氧环境
B. 酱菜和酸奶制作过程中，微生物繁殖越快发酵产物产量一定越高
C. 发酵时pH下降会抑制杂菌生长，过酸的环境也会抑制乳酸菌自身的酶活性
D. 使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一
【答案】B
【解析】
【详解】A、乳酸菌属于厌氧型微生物，只有在无氧环境下才能通过无氧呼吸产生乳酸，因此乳酸发酵过程中需严格控制无氧环境，A正确；
B、微生物繁殖速度过快时，会加剧种内竞争，快速消耗发酵原料，同时大量代谢废物积累，反而会抑制发酵产物的生成，因此微生物繁殖越快发酵产物产量不一定越高，B错误；
C、发酵过程中乳酸菌产生乳酸使pH下降，不耐酸的杂菌生长会被抑制；酶的活性受pH影响，过酸的环境会破坏乳酸菌自身酶的空间结构，抑制其酶活性，C正确；
D、天然混合菌种的种类、数量比例不稳定，不同发酵批次的菌种组成、发酵条件存在差异，往往会造成传统发酵食品的品质不一，D正确。
2. 某科研小组欲从农田土壤中分离筛选能高效降解纤维素的菌株，配制了含纤维素的选择培养基，该培养基中不应加入的物质是（ ）
A. 琼脂B. 刚果红C. 葡萄糖D. 无机盐
【答案】C
【解析】
【详解】A、琼脂是固体培养基的凝固剂，筛选菌株需要制备固体培养基以获得单菌落，因此可加入琼脂，A不符合题意；
B、刚果红可与纤维素形成红色复合物，纤维素被降解后菌落周围会出现透明圈，能够用于鉴别纤维素分解菌，可加入该培养基，B不符合题意；
C、若加入葡萄糖，葡萄糖作为易利用的碳源，会导致不能降解纤维素的微生物也能生长，无法起到筛选纤维素降解菌的选择作用，因此不应加入，C符合题意；
D、无机盐是微生物生长必需的营养成分，培养基中需要添加，D不符合题意。
3. 草莓通过匍匐茎无性繁殖时，病毒易逐代累积，导致植株矮化、糖度与风味下降，培育脱毒苗可解决病毒积累问题。下列叙述正确的是（ ）
A. 可取草莓的茎尖作为外植体
B. 实验操作过程中应利用紫外灯对超净工作台进行灭菌
C. 在相同的培养基上诱导生芽和生根
D. 需对脱毒苗进行抗病毒能力检测
【答案】A
【解析】
【详解】A、草莓茎尖属于分生区，细胞分裂旺盛，病毒极少甚至无病毒，因此可作为培育脱毒苗的外植体，A正确；
B、紫外灯照射只能对超净工作台进行消毒，无法达到杀灭全部微生物的灭菌效果，且实验操作过程中需要关闭紫外灯避免损伤实验人员，B错误；
C、诱导生芽需要细胞分裂素/生长素的比值更高，诱导生根需要生长素/细胞分裂素的比值更高，二者所需培养基的激素配比不同，不能使用相同培养基，C错误；
D、脱毒苗是指几乎不携带积累的病毒的植株，本身不具备抗病毒能力，因此不需要检测抗病毒能力，仅需检测是否携带目标病毒即可，D错误。
4. 我国科学家取优质耐寒高产犏牛体细胞的细胞核，移入黄牛去核卵母细胞中，成功获得了克隆犏牛。克隆犏牛的培养过程不涉及（ ）
A. 电融合法促使细胞融合
B. 激活重构胚
C. 胚胎移植
D. 体外受精
【答案】D
【解析】
【详解】A、将供体体细胞与去核卵母细胞融合时，电融合法是常用的诱导融合手段，可促使供体细胞核进入卵母细胞形成重构胚，该过程涉及，A不符合题意；
B、形成重构胚后，需要通过物理或化学方法对其进行激活，使其启动细胞分裂和发育进程，该过程涉及，B不符合题意；
C、重构胚经早期胚胎培养到适宜阶段后，需移植到代孕母牛的子宫中才能继续发育为完整个体，该过程涉及胚胎移植技术，C不符合题意；
D、体外受精是精子和卵细胞在体外完成受精作用的技术，属于有性生殖的技术环节，克隆犏牛为无性生殖产物，不经过精卵结合的受精过程，因此不涉及体外受精，D符合题意。
5. 某食品加工厂开展传统发酵食品的工业化生产，为保障产品品质、避免杂菌污染，生产过程需严格执行无菌操作。下列叙述错误的是（ ）
A. 新鲜牛奶原料—煮沸消毒法
B. 酵母菌培养基—高压蒸汽灭菌法
C. 操作人员的双手—酒精消毒法
D. 发酵车间内部空气—紫外线消毒法
【答案】A
【解析】
【详解】
A、新鲜牛奶若使用煮沸消毒法，100℃的高温会破坏牛奶中的营养成分（如蛋白质、维生素）、改变产品风味，工业生产中新鲜牛奶通常采用巴氏消毒法，既可以杀灭绝大多数有害微生物，又能保留牛奶的营养和风味，A错误；
B、酵母菌培养基需要彻底杀灭所有微生物（包括芽孢和孢子），高压蒸汽灭菌法是培养基灭菌的标准方法，可达到彻底灭菌的效果，B正确；
C、操作人员的双手不能进行灭菌处理，使用体积分数75%的酒精擦拭消毒，可杀灭手部绝大多数微生物，避免带入杂菌，C正确；
D、紫外线可破坏微生物的核酸结构，能有效杀灭空气中的微生物，发酵车间内部空气常采用紫外线照射消毒，D正确。
6. 科研人员从粘质沙雷氏菌中分离获得了限制酶SmaⅠ，其识别并切割的DNA序列为5´-CCC↓GGG-3´。下列叙述正确的是（ ）
A. 限制酶的活性不受外界温度影响
B. 该限制酶可破坏磷酸二酯键和氢键
C. 该限制酶切割DNA分子后形成平末端
D. 沙雷氏菌中的SmaⅠ可破坏自身DNA分子
【答案】C
【解析】
【详解】A、限制酶的化学本质是蛋白质，酶的活性受温度、pH等外界环境因素的影响，A错误；
B、限制酶的作用是切割DNA分子中的磷酸二酯键，不破坏碱基对之间的氢键，B错误；
C、该限制酶的切割位点位于识别序列的中轴线处，切割后DNA两条链的末端没有单链突出，形成平末端，C正确；
D、沙雷氏菌自身的DNA分子中该限制酶的识别序列会经过甲基化等修饰，不会被自身的SmaⅠ切割破坏，D错误。
7. 啤酒生产的工艺流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 焙烤的目的是加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活
B. 糖化阶段淀粉酶可催化淀粉分解
C. 主发酵结束后应将发酵液置于低温密闭环境中储存
D. 后发酵阶段完成大部分糖的分解和代谢物的生成
【答案】D
【解析】
【详解】A、大麦发芽后焙烤，目的是杀死种子胚，防止其继续生长消耗淀粉，同时控制温度不使淀粉酶失活，保证后续糖化过程能顺利进行，A正确；
B、糖化阶段，发芽过程中产生的淀粉酶可催化淀粉分解为麦芽糖等，为酵母菌发酵提供底物，B正确；
C、主发酵结束后，将发酵液置于低温密闭环境中储存，可抑制杂菌生长，同时让啤酒风味物质进一步成熟、澄清，C正确；
D、啤酒生产中，主发酵阶段才是完成大部分糖的分解和主要代谢物（酒精、CO2等）生成的阶段；后发酵阶段主要是让剩余的糖分继续缓慢发酵、风味物质成熟、澄清和排杂，D错误。
8. 下列有关家兔肝脏组织DNA粗提取与鉴定实验的叙述正确的是（ ）
A. 肝脏组织的DNA可溶于冷酒精，大多数蛋白质不溶于冷酒精
B. DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同
C. 玻璃棒沿不同方向快速搅拌，可促进DNA丝状物缠绕在玻璃棒上
D. 鉴定时，向DNA溶液中加入二苯胺试剂后即可观察到蓝色
【答案】B
【解析】
【详解】A、DNA不溶于冷酒精，而大多数蛋白质可溶于冷酒精，利用该原理可实现DNA和蛋白质的初步分离，A错误；
B、DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，在0.14ml/L的NaCl溶液中溶解度最低，浓度高于或低于该值时DNA溶解度均会升高，B正确；
C、玻璃棒需沿同一方向缓慢搅拌，若沿不同方向快速搅拌会打碎DNA丝状物，不利于丝状物缠绕在玻璃棒上，C错误；
D、鉴定DNA时，加入二苯胺试剂后需要经过沸水浴加热，才能观察到蓝色反应，常温下不会显色，D错误。
9. 2026年1月，我国首个转基因耐旱玉米转化体NAZ—4正式获得农业转基因生物安全证书。该品种通过转入耐旱关键基因BADH，可显著提升玉米在干旱胁迫下的水分利用效率。下列叙述错误的是（ ）
A. 构建基因表达载体时需要限制酶和DNA连接酶
B. 可通过农杆菌转化法将BADH基因转入玉米细胞
C. 利用抗原—抗体杂交技术可判断BADH基因是否转录
D. BADH基因可能因插入位置不同影响玉米自身基因的表达
【答案】C
【解析】
【详解】A、构建基因表达载体是基因工程的核心步骤，需要用限制酶切割目的基因和运载体以获得匹配的末端，再用DNA连接酶将二者拼接为重组DNA分子，A正确；
B、农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的常用方法，可用于将BADH基因转入玉米细胞，B正确；
C、抗原—抗体杂交技术的检测对象是蛋白质，用于判断BADH基因是否完成翻译过程，若要判断该基因是否转录，应采用DNA-RNA分子杂交技术，C错误；
D、BADH基因插入玉米基因组的位置是随机的，若插入位点位于玉米自身基因的编码区或调控区域，就可能影响玉米自身基因的表达，D正确。
10. 治疗性克隆可解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应这两大难题，部分流程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 胚胎干细胞取自囊胚中①处的细胞
B. 进行胚胎分割时应将结构②均等分割
C. 该囊胚是由体外受精获得的受精卵发育形成的
D. 治疗性克隆过程体现了动物体细胞核的全能性
【答案】B
【解析】
【详解】A、胚胎干细胞取自囊胚中②内细胞团处的细胞，A错误；
B、进行胚胎分割时，应将②内细胞团均等分割，否则会影响胚胎发育，B正确；
C、治疗性克隆的囊胚，是由体细胞核移植获得的重构胚发育形成的，C错误；
D、治疗性克隆最终获得的是组织、器官，并没有获得完整有机体或其他各种细胞，所以没有体现细胞核的全能性，D错误。
11. SCB蛋白可调控蔗糖在韧皮部的装载与运输，显著提升作物的光合产物分配效率与产量。为培育韧皮部特异性高表达SCB的转基因棉花，研究人员构建了如图所示的重组DNA片段，并用PCR技术对其进行扩增。下列叙述错误的是（ ）
A. SCB基因转录的模板链是a链
B. 应选择的引物组合是②和③
C. 可在引物的5′端添加限制酶识别序列
D. 需加入适量的Mg2+激活TaqDNA聚合酶
【答案】B
【解析】
【详解】
A、转录的方向是从子链的5’端到3’端，从基因的启动子开始，子链的5’端对应于模板链的3’羟基端，即SCB基因转录的模板链为a链，A 正确；
B、PCR扩增时，引物与目的基因的3'端碱基互补配对，所以应选择的引物为引物①和引物④，B错误；
C、DNA聚合酶只能从引物的3′端延伸DNA链，因此在引物的5′端添加限制酶识别序列不会影响引物与模板的配对及链的延伸，C正确；
D、在PCR反应缓冲液中加入Mg2+能激活耐高温的DNA聚合酶，D正确。
12. 抗体—药物偶联物（ADC）是新一代“生物导弹”，由单克隆抗体、接头和细胞毒性药物三部分组成。下列叙述错误的是（ ）
A. ADC的优点是能减少抗癌药物对正常细胞的损伤
B. ADC通过主动运输的方式进入肿瘤细胞，该过程需要消耗ATP
C. 制备单克隆抗体时，通常从小鼠的脾中获取免疫后的B淋巴细胞
D. 同位素标记的单克隆抗体可通过放射性成像定位肿瘤病灶
【答案】B
【解析】
【详解】A、ADC中的单克隆抗体可特异性识别肿瘤细胞表面的特有抗原，将细胞毒性药物定向运输至肿瘤部位发挥作用，能有效减少抗癌药物对正常细胞的损伤，A正确；
B、ADC是由抗体和药物结合形成的大分子复合物，大分子进入细胞的方式为胞吞，该过程消耗ATP但不属于主动运输，主动运输是小分子或离子逆浓度梯度跨膜运输的方式，需要载体蛋白协助，B错误；
C、制备单克隆抗体时，首先用特定抗原免疫小鼠，能分泌特异性抗体的免疫后B淋巴细胞主要分布在小鼠脾脏中，因此通常从脾中获取该类细胞，C正确；
D、同位素标记的单克隆抗体可与肿瘤细胞表面的特异性抗原结合，通过检测放射性的分布位置，即可通过放射性成像定位肿瘤病灶，D正确。
13. 我国科研人员通过在培养基中模拟高盐胁迫环境，利用植物组织培养技术定向筛选根系发达、固土抑盐能力强的突变体，培育出耐盐碱作物新品种。下列叙述正确的是（ ）
A. 植物组织培养体现了植物细胞的全能性
B. 外植体应依次用次氯酸钠和酒精进行消毒处理
C. 模拟高盐环境的目的是诱导植株发生定向突变
D. 可用射线直接处理外植体以获得大量突变体
【答案】A
【解析】
【详解】A、植物组织培养可将离体的植物组织或细胞培育为完整植株，其原理是植物细胞的全能性，该过程体现了植物细胞的全能性，A正确；
B、外植体消毒的正确顺序是先使用酒精处理，再用无菌水冲洗，然后用次氯酸钠处理，再用无菌水冲洗，B错误；
C、基因突变具有不定向性，模拟高盐环境的作用是定向筛选出耐盐的突变体，而非诱导植株发生定向突变，C错误；
D、愈伤组织分裂能力强，容易发生变异，所以用射线直接处理愈伤组织以获得大量突变体，D错误。
14. 谷氨酸棒状杆菌是发酵工程生产谷氨酸的核心菌种，发酵过程中需分次加入氨水调控碳氮比与pH。下列叙述错误的是（ ）
A. 可通过诱变育种、基因工程育种等方式获得优良菌种
B. 发酵过程中应控制pH为中性或弱碱性以获得谷氨酸
C. 氨水可为菌种提供氮源用于合成蛋白质、核酸、淀粉等物质
D. 可采取适当的提取、分离和纯化措施获得谷氨酸
【答案】C
【解析】
【详解】A、诱变育种可通过诱导基因突变获得新性状，基因工程可定向改造菌种性状，二者均可用于选育谷氨酸棒状杆菌的优良菌种，A正确；
B、谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，中性或弱碱性环境有利于谷氨酸积累，若pH呈酸性会生成谷氨酰胺等副产物，因此发酵过程需控制pH为中性或弱碱性，B正确；
C、氨水含氮元素可作为氮源，用于合成蛋白质、核酸等含氮物质，但淀粉的元素组成仅为C、H、O，不含氮元素，合成淀粉不需要氮源，C错误；
D、发酵生成的谷氨酸是微生物代谢产物，需要经过提取、分离、纯化等措施才能得到合格的谷氨酸产品，D正确。
15. 位于角膜缘的角膜缘干细胞，是维持角膜透明、负责眼表上皮终身修复与再生的“源头细胞”。培养角膜缘干细胞可用于角膜修复，其过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 角膜缘干细胞培养液中应适当加入动物血清
B. 传代培养前需用胃蛋白酶使细胞相互分散开
C. 接触抑制是限制原代培养时细胞增殖的唯一因素
D. 正常细胞可通过传代培养持续获得细胞或细胞产物
【答案】A
【解析】
【详解】A、动物细胞培养液中通常需要加入动物血清，因为血清中含有细胞生长所必需的多种生长因子、激素、营养物质等，是天然的营养补充剂。角膜缘干细胞的培养液中也应适当加入动物血清，A正确；
B、传代培养前，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理贴壁细胞，使细胞相互分散开，B错误；
C、限制原代培养时细胞增殖的因素不只有接触抑制，还包括营养物质消耗、代谢废物积累、pH 变化、空间限制等多种因素，接触抑制不是唯一因素，C错误；
D、正常细胞的传代次数是有限的（一般为50代左右），超过一定代数后细胞会衰老死亡或发生突变，无法通过传代培养持续获得细胞或细胞产物；只有癌细胞等无限传代细胞系才能持续培养，D错误。
16. 实验小组筛选出一种淀粉降解菌，并在适宜温度下测定了该种降解菌在不同pH条件下降解淀粉产生的透明圈的大小，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 透明圈直径与菌落直径的比值越大，菌株分解淀粉能力越强
B. 制备该种降解菌的琼脂培养基时，应加入适量的淀粉和碘液
C. 实验结果说明该降解菌产生的淀粉酶具有一定的耐酸性
D. 提高实验温度，两种pH下的透明圈大小均会增大
【答案】D
【解析】
【详解】A、透明圈是降解菌分解淀粉后形成的，透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明菌株分解淀粉的能力越强，A正确；
B、因为该降解菌能降解淀粉，所以制备其琼脂培养基时，应加入适量的淀粉作为底物，同时加入碘液，用于检测淀粉是否被分解，B正确；
C、从实验结果来看，在pH=4时，透明圈直径与菌落直径的比值较大，这表明该降解菌在酸性条件下仍能较好地分解淀粉，说明其产生的淀粉酶具有一定的耐酸性，C正确；
D、题干中明确说明是在适宜温度下进行的测定，若提高实验温度，可能会超过该淀粉酶的最适温度，导致酶活性降低，那么两种pH下的透明圈大小均会减小，而不是增大，D错误。
二、非选择题：本题共5小题，共52分。
17. 科研人员在我国西北某盐碱化草原生态修复过程中发现当地种植的耐盐碱芦竹虽能耐受3.2%的土壤含盐量，但固氮能力较差，需大量施用氮肥，这会导致土壤次生污染；而原生固氮苜蓿能通过根瘤菌固定空气中的氮素，却无法在含盐量超过0.8%的土壤中存活。科研人员欲利用植物体细胞杂交技术培育出“耐盐碱高固氮”
双功能生态修复植物，相关过程如图所示。已知亲本耐盐碱芦竹细胞为色氨酸缺陷型（无法自主合成色氨酸而不能存活），固氮苜蓿细胞为苏氨酸缺陷型（无法自主合成苏氨酸而不能存活）。回答下列问题：
（1）①需要用________处理；②应在________（填“清水”或“与细胞等渗的溶液”）中进行，原因是________。
（2）④和⑤中需要提供光照的过程是________，该阶段提供光照的目的是________。
（3）若只考虑两两融合的细胞和未融合的细胞，经过程②后，体系中会出现________种细胞类型，根据亲本植株对营养物质的需求，应设置不含________的选择培养基，以筛选融合的杂种细胞。耐盐碱芦竹细胞的染色体数为2n=72，固氮苜蓿细胞的染色体数为4n=32，融合形成的杂种细胞含有________个染色体组。
（4）和传统杂交育种相比，应用植物体细胞杂交技术育种的最大优势是________。
【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 与细胞等渗的溶液 ③. 防止原生质体吸水胀破，维持原生质体的正常形态
（2） ①. ⑤（再分化） ②. 促进叶绿素合成，满足再分化过程中光合作用的需求
（3） ①. 5 ②. 色氨酸和苏氨酸 ③. 6
（4）克服了远缘杂交不亲和的障碍，打破了不同物种间的生殖隔离
【解析】
【小问1详解】
过程①是去除植物细胞壁获得原生质体，植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，因此用纤维素酶和果胶酶处理。原生质体没有细胞壁保护，在清水中会吸水胀破，因此原生质体融合（过程②）需要在与细胞等渗的溶液中进行，目的是维持原生质体正常形态，防止原生质体吸水胀破。
【小问2详解】
图中过程④是脱分化形成愈伤组织，过程⑤是愈伤组织再分化形成完整植株。脱分化阶段一般不需要光照，再分化（⑤）需要光照，光照可以促进叶绿素合成，为植株光合作用提供条件，满足生长需求。
【小问3详解】
若只考虑未融合细胞和两两融合细胞，共存在5种细胞：未融合的芦竹原生质体、未融合的苜蓿原生质体、芦竹-芦竹融合细胞、苜蓿-苜蓿融合细胞、芦竹-苜蓿杂种细胞。 已知芦竹无法自主合成色氨酸，苜蓿无法自主合成苏氨酸，只有杂种细胞同时含有两种亲本的遗传物质，可自主合成色氨酸和苏氨酸，因此选择培养基需不含色氨酸和苏氨酸，即可筛选出杂种细胞。 芦竹是二倍体（2n）含2个染色体组，苜蓿是四倍体（4n）含4个染色体组，融合杂种细胞的染色体组数2+4=6个。
【小问4详解】
传统杂交育种只能在同一物种间进行，植物体细胞杂交育种最大优势是克服了远缘杂交不亲和的障碍，打破了不同物种间的生殖隔离。
18. 作物连作过程中产生的自毒物质——香豆素（一种含碳有机物）会抑制作物的生长。为缓解农作物连作障碍，科研人员通过选择培养基从土壤中筛选得到能高效降解香豆素的菌株，同时具备固氮及分泌ACC脱氨酶（可分解植物乙烯前体ACC，降低乙烯浓度）的能力。香豆素高效降解菌的筛选过程如图所示。回答下列问题：
（1）筛选香豆素降解菌株应当从________的土壤环境中取样。将土样接种到以________为唯一碳源的液体培养基中进行富集培养，富集培养的目的是________。
（2）图中所示的接种方法用到的接种工具是。为了判断培养基在培养过程中是否被杂菌污染，应设置________的培养基作为对照组共同培养。
（3）实验小组将该菌株接种到土壤中发现该菌株能促进作物幼苗生长，其作用机制可能是________（答出3点）。
【答案】（1） ①. 连作 ②. 香豆素 ③. 增加能降解香豆素的菌株的浓度，确保能够从样品中分离得到所需菌株
（2） ①. 涂布器 ②. 未接种的培养基
（3）1.降解香豆素，解除其对作物生长的抑制作用：该菌株可分解土壤中的自毒物质香豆素，消除其对作物生长的抑制效应。 2.具有固氮能力，为作物提供氮素营养：菌株的固氮作用可增加土壤氮含量，促进作物生长。 3.分泌ACC 脱氨酶，降低乙烯浓度，缓解乙烯对幼苗生长的抑制： 4.ACC 脱氨酶可分解乙烯前体 ACC，减少乙烯合成，避免乙烯浓度过高对幼苗生长的抑制作用。 改善土壤微环境，促进有益微生物活动，间接促进作物生长。(答出任意一点即可)
【解析】
【小问1详解】
① 香豆素是作物连作产生的自毒物质，在连作土壤中含量高，因此高效降解香豆素的菌株更易在此类土壤中富集。 ② 选择培养基的原理是只允许特定微生物生长，抑制其他微生物。因此要筛选能降解香豆素的菌株，需将香豆素作为唯一碳源，只有能利用香豆素的菌株才能生长繁殖。 ③ 增加能降解香豆素的菌株的浓度，确保能够从样品中分离得到所需菌株 ,富集培养通过多次传代，让目标菌株在营养选择压力下成为优势菌群，提高后续筛选的成功率。
【小问2详解】
①图中为稀释涂布平板法，用涂布器接种 ②对照组设置：未接种（空白）的培养基 ，设置未接种的空白培养基，在相同条件下培养，若空白培养基上无菌落生长，说明培养基未被杂菌污染；若出现菌落，则说明培养基灭菌不彻底或操作过程引入了杂菌。
【小问3详解】
1.降解香豆素，解除其对作物生长的抑制作用：该菌株可分解土壤中的自毒物质香豆素，消除其对作物生长的抑制效应。
2.具有固氮能力，为作物提供氮素营养：菌株的固氮作用可增加土壤氮含量，促进作物生长。
3.分泌ACC 脱氨酶，降低乙烯浓度，缓解乙烯对幼苗生长的抑制：
4.ACC 脱氨酶可分解乙烯前体 ACC，减少乙烯合成，避免乙烯浓度过高对幼苗生长的抑制作用。 改善土壤微环境，促进有益微生物活动，间接促进作物生长。(答出任意一点即可)
19. MELAS综合征是一种严重的线粒体遗传病，常出现肌肉无力、癫痫、脑卒中反复发作等症状，其致病突变基因位于线粒体DNA.利用“三亲婴儿”技术可避免携带致病突变基因的母亲将缺陷基因遗传给后代，相关流程如图所示。回答下列问题：
（1）进行动物体细胞核移植时，卵母细胞应培育到________期才能进行去核处理。
（2）受精前精子需进行________处理，受精过程中防止多精入卵的两道屏障分别为________、________。受精卵在体外一般需培养至________阶段才能进行胚胎移植。植入受体的胚胎能正常存活的生理学基础是________。
（3）某同学认为培育“三亲婴儿”时需要对捐献者染色体上的致病基因进行严格筛查，你认为该同学的说法________（填“正确”或“不正确”），理由是________。
【答案】（1）减数分裂Ⅱ中/MⅡ中
（2） ①. 获能 ②. 透明带反应 ③. 卵细胞膜反应 ④. 桑椹胚或囊胚 ⑤. 受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应
（3） ①. 不正确 ②. 在“三亲婴儿”的培育过程中，捐献者提供的是卵母细胞的细胞质（包括线粒体DNA），而非细胞核，捐献者的染色体（细胞核DNA）并不参与“三亲婴儿”的遗传组成，因此不需要对捐献者染色体上的致病基因进行严格筛查，而需要对捐献者线粒体上的致病基因进行筛查。
【解析】
【小问1详解】
进行动物体细胞核移植时，受体应该选择减数分裂Ⅱ中期的卵母细胞，卵母细胞体积大，易操作，含有促进细胞核全能性表达的物质。
【小问2详解】
受精前，精子也需要进行获能处理，才具备与卵细胞结合的能力。受精时防止多精入卵的两道屏障分别是透明带反应和卵细胞膜反应。生产上常用桑椹胚和囊胚期的胚胎进行胚胎移植，由于在胚胎移植过程中需要对受体进行同期发情处理，故移植的胚胎在受体绵羊体内存活的生理基础是受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应。
【小问3详解】
在“三亲婴儿”的培育过程中，捐献者提供的是卵母细胞的细胞质（包括线粒体DNA），而非细胞核，捐献者的染色体（细胞核DNA）并不参与“三亲婴儿”的遗传组成，因此不需要对捐献者染色体上的致病基因进行严格筛查，而需要对捐献者线粒体上的致病基因进行筛查。
20. CTLA-4是存在于T细胞表面的一种受体蛋白，这种蛋白会传递“刹车”指令，抑制T细胞对癌细胞的杀伤作用。通过抗CTLA-4单克隆抗体阻断这一通路，可恢复T细胞活性，增强对肿瘤的杀伤效果。科研人员制备抗CTLA-4的单克隆抗体，相关流程如图所示。回答下列问题：
（1）制备抗CTLA-4的单克隆抗体时，需先给小鼠反复、多次注射抗原，注射的抗原物质为________，图中的细胞X是________，其具有________的特点。
（2）与植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是________，第二次筛选需进行________，经第二次筛选获得的杂交瘤细胞具有________的特点。
（3）培养杂交瘤细胞时，需要将培养液放置在95%空气和5%CO2的培养箱中培养，其中CO2的主要作用是________，获得的单克隆抗体具有________的优点。
【答案】（1） ①. CTLA-4 蛋白 ②. 骨髓瘤细胞 ③. 无限增殖
（2） ①. 灭活的病毒诱导 ②. 克隆化培养和抗体检测 ③. 无限增殖并分泌特异性抗体
（3） ①. 维持培养液的pH ②. 特异性强、灵敏度高、可大量制备
【解析】
【小问1详解】
制备抗CTLA-4的单克隆抗体时，需先给小鼠反复、多次注射抗原，注射的抗原是CTLA-4蛋白，图中融合的两种细胞是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞，所以细胞X是骨髓瘤细胞，其特点是能够无限增殖。
【小问2详解】
诱导植物原生质体融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇），而诱导动物细胞融合所特有的方法是灭活的病毒诱导。在制备单克隆抗体时，需经两次筛选，但目的不同，第一次筛选的目的是筛选出B淋巴细胞与骨髓瘤细胞相融合的杂种细胞；第二次筛选的目的是筛选出能产生特异性抗体的细胞群，运用的是克隆化培养和抗体检测的方法。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是能无限增殖并分泌特异性抗体。
【小问3详解】
最终筛选出来的杂交瘤细胞，可以将其注射到小鼠腹腔内进行体内培养，也可以在体外培养液中进行大规模培养。在体外培养液中进行大规模培养则需要将培养液放置在95%的空气和5%的CO2培养箱中培养，其中CO2的作用是维持培养液的pH。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的特点。
21. 抗冻蛋白afp可作为植物抗寒制剂，提升粮食与经济作物在极端天气下的存活率。图1pET质粒中的Plac为诱导型启动子，可被IPTG诱导启动转录，LacZ基因编码产生的β—半乳糖苷酶可分解X—gal产生蓝色物质，使菌落呈蓝色，否则菌落呈白色。图2为含afp基因的DNA片段。图中EcRⅠ、PstⅠ、BamHⅠ、HindⅢ为限制酶识别位点。回答下列问题：
（1）结合图1、图2可知，构建基因表达载体时应选择________两种不同的限制酶分别切割质粒和含afp基因的DNA片段，用不同的限制酶切割目的基因和载体的两端的目的是________（答出2点）。基因表达载体上卡那霉素抗性基因的作用是________。
（2）Plac为诱导型启动子，启动子的作用是________。将重组质粒导入大肠杆菌前要用Ca2+处理大肠杆菌，使大肠杆菌处于________。
（3）为了筛选含有重组质粒的大肠杆菌可采用不同方法。方法一：将大肠杆菌菌株涂布到含有________的培养基上，再加入IPTG诱导启动转录。成功导入重组质粒的大肠杆菌菌落在该培养基上呈________色。方法二：随机提取两株大肠杆菌菌株的DNA进行PCR扩增，对其产物酶切后进行电泳，结果如图3所示：
两种菌株中不能在方法一使用的选择培养基上形成菌落的是________，不能形成菌落的原因是________。
【答案】（1） ①. EcRⅠ和PstⅠ ②. 防止目的基因和载体自身环化； 防止目的基因与载体反向连接，保证目的基因正确插入表达载体 ③. 作为标记基因，用于筛选含有重组质粒（或目的基因）的大肠杆菌
（2） ①. RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动LacZ基因的转录 ②. 能吸收周围环境中DNA分子的生理状态
（3） ①. 卡那霉素、X-gal ②. 白 ③. 菌株B ④. 菌株B未导入重组质粒，无卡那霉素抗性基因，无法在含卡那霉素的选择培养基上存活，不能形成菌落
【解析】
【小问1详解】
结合图1中pET质粒的酶切位点和图2中afp基因的酶切位点，BamHⅠ会破坏质粒的LacZ基因和目的基因；HindⅢ在目的基因上无位点。因此选择EcRⅠ和PstⅠ两种限制酶。双酶切的目的：防止目的基因和载体自身环化；防止目的基因与载体反向连接，保证目的基因正确插入表达载体。卡那霉素抗性基因的作用：作为标记基因，用于筛选含有重组质粒（或目的基因）的大肠杆菌。
【小问2详解】
启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动LacZ基因的转录。用Ca²⁺处理大肠杆菌，可使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（感受态），便于重组质粒导入。
【小问3详解】
pET质粒携带卡那霉素抗性基因，因此培养基需加入卡那霉素，用于筛选成功导入质粒的大肠杆菌；同时需加入X-gal，用于后续通过颜色筛选重组质粒，LacZ基因完整时可分解X-gal使菌落呈蓝色，重组质粒中，afp基因插入LacZ基因的酶切位点之间，破坏了LacZ基因，无法编码有活性的β-半乳糖苷酶，因此不能分解X-gal产生蓝色物质，菌落呈白色。电泳图中，菌株A出现4800bp和786bp两个条带，说明菌株A成功导入了重组质粒，携带卡那霉素抗性基因，可在选择培养基上形成菌落；菌株B无任何条带，说明菌株B未导入重组质粒，无卡那霉素抗性基因，无法在含卡那霉素的选择培养基上存活，不能形成菌落。