







高中生物人教版 (2019)选择性必修3重组DNA技术的基本工具集体备课课件ppt
展开 这是一份高中生物人教版 (2019)选择性必修3重组DNA技术的基本工具集体备课课件ppt,共56页。PPT课件主要包含了第3章第1节,EcoRⅠ,SmaⅠ等内容,欢迎下载使用。
什么是基因工程?基因工程有什么用?
是指按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫作重组DNA技术。
转基因抗虫水稻(绿色植株)与对照(被害虫侵害的黄色植株)
转生长激素基因的鲤鱼(下)与非转基因鲤鱼(上)
我国自主研发的抗虫棉(左)与普通棉花(右)比较
转基因抗虫棉为什么能抗虫?
怎么实现这一操作过程?
首先要在体外对含有所需要基因的DNA分子进行“切割”、改造和“拼接”;然后,将重组DNA分子导入番木瓜体细胞内,并使其在细胞中表达。
苏云金杆菌DNA片段中的部分基因
棉花细胞DNA片段中的部分基因
你觉得要把Bt基因导入棉花细胞应该怎么操作?
实际操作和这一样都在体外进行吗?
棉花细胞的DNA不进行切割
实现这一精确的操作过程至少需要三种“分子工具”,即准确切割DNA分子的“分子手术刀”、将DNA片段再连接起来的“分子缝合针”和将体外重组好的DNA分子导入受体细胞的“分子运输车”。
限制性内切核酸酶 — “分子手术刀”
(迄今分离的限制酶有数千种,许多已经被商业化生产)。
主要是从原核生物(细菌等)中分离纯化出来的
大肠杆菌的R型菌株分离来的
R型菌株中分离出来的第一种限制酶
粘质沙雷氏菌中分离出来的第一种限制酶
粘质沙雷氏菌 又称灵杆菌
能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,
并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。
脱氧核糖和磷酸交替连接构成的基本骨架是一样的
例如,EcRⅠ限制酶的识别序列为
从5’→3’方向的识别序列均为GAATTC,并切断G和A之间的磷酸二酯键
当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA分子的两条链分别切开时,产生的是黏性末端;
注意:限制酶切割磷酸二酯键后氢键会自动断裂!
例如,SmaⅠ限制酶的识别序列为
从5’→3’方向的识别序列均为CCCGGG,并切断C和G之间的磷酸二酯键
当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时,产生的是平末端。
大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成。例如,EcRⅠ、SmaⅠ限制酶的识别序列均为6个核苷酸,也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。
一些常用的限制酶识别序列与切割产生的末端类型(拓展)
可以用EcRⅠ限制酶将Bt基因从DNA片段中切割下来!
DNA连接酶 — “分子缝合针”
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