安徽省A10联盟2024—2025学年高二下学期期中考试生物试卷（解析版）

这是一份安徽省A10联盟2024—2025学年高二下学期期中考试生物试卷（解析版），共21页。试卷主要包含了选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
1. 下列关于细胞工程的说法正确的是（ ）
A. 植物组织培养与动物体细胞核移植技术的原理都是细胞的全能性
B. PEG既可以用于动物细胞融合，也能够用于植物体细胞杂交
C. 悬浮培养的动物细胞会因接触抑制而分裂受阻
D. 抗体—药物偶联物主要利用其中的抗体杀死肿瘤细胞
【答案】B
【分析】（1）植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体．植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
（2）植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株．植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
（3）体细胞核移植：又称体细胞克隆，作为动物细胞工程技术的常用技术手段，即把体细胞移入去核卵母细胞中，使其重组并能发育为新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物个体．用核移植方法获得的动物称为克隆动物。
【详解】A、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物体细胞核移植技术的原理是动物细胞核的全能性，A错误；
B、PEG既可以用于动物细胞融合，也能够用于植物体细胞杂交过程中原生质体的融合，B正确；
C、悬浮培养的动物细胞会因密度过大、有害代谢物积累而分裂受阻，贴壁细胞会发生接触抑制现象，C错误；
D、抗体一药物偶联物主要利用其上的抗体结构来识别肿瘤细胞，起杀伤作用的是其上偶联的药物，D错误。
故选B。
2. 毛状根是植物感染发根农杆菌（其T﹣DNA含有生长素合成基因）后产生的病理结构，在生产某些次生代谢物方面具有独特的优势。如图为利用植物组织或细胞培养技术进行次生代谢物生产的流程，下列叙述错误的是（ ）
A. 诱导愈伤组织时，在酒精灯火焰旁将外植体的1/3-1/2插入培养基
B. 培养体系1制备过程中导入外源基因可采用PEG介导法或花粉管通道法
C. 与培养体系1和2不同，培养体系3的获得不需要添加外源植物激素
D. 培养体系1和3的制备都利用了基因重组原理，且可产生相同代谢产物
【答案】B
【分析】植物组织培养过程中，整个过程应严格无菌无毒，外植体需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2-3次。这样既考虑了药剂的消毒效果，又考虑了植物的耐受能力。
【详解】A、诱导愈伤组织时，在酒精灯火焰旁将外植体的1/3-1/2插入培养基，这样的操作可以为外植体提供合适的生长环境，使其更好地脱分化形成愈伤组织，A正确；
B、培养体系1是转基因细胞系，制备过程中导入外源基因可采用农杆菌转化法、基因枪法等，而PEG介导法常用于原生质体的融合，不用于转基因。花粉管通道法是将目的基因导入植株中的受体细胞，但在该情境下，没有完整植株，所以不采用这种方法，B错误；
C、发根农杆菌的T-DNA含有生长素合成基因，被其诱导产生的毛状根自身可以合成生长素，所以与培养体系1和2不同，培养体系3（毛状根培养体系）的获得不需要添加外源植物激素，C正确；
D、培养体系1是通过转基因技术获得转基因细胞系，原理是基因重组。培养体系3是利用发根农杆菌诱导产生毛状根，农杆菌的T-DNA会整个到受体染色体上，利用了基因重组原理。并且培养体系1和3都可用于生产某些次生代谢物，有可能产生相同代谢产物，D正确。
故选B。
3. 谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，发酵工程中通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述错误的是（ ）

A. 利用谷氨酸棒状杆菌进行发酵，其中心环节是发酵罐内发酵
B. 发酵初期控制pH为7.0，后调为5.6，有利于提高L-谷氨酰胺产量
C. 提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酸合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺产量
D. 发酵结束后，采用适当的提取、分离和纯化措施可获得L-谷氨酰胺
【答案】C
【分析】（1）发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。发酵过程：菌种选育→菌种的扩大培养→培养基的配制→灭菌和接种→发酵条件的控制→分离和提纯。
（2）发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。
（2）产品不同，分离提纯的方法一般不同。
如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来。
如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
（4）发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
（5）发酵过程般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、利用谷氨酸棒状杆菌进行发酵，其中心环节是发酵罐内发酵，A正确；
B、谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，谷氨酰胺合成酶最适pH为5.6，因此发酵初期控制pH为7.0，有利于增加谷氨酸棒状杆菌的数量，后调为5.6，有利于提高谷氨酰胺合成酶的活性，进而提高L-谷氨酰胺产量，B正确；
C、由图可知，提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酰胺合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺产量，但谷氨酸合成酶会使L-谷氨酰胺再转化为L-谷氨酸，反而降低L-谷氨酰胺产量，C错误；
D、L-谷氨酰胺是细胞代谢产物，对细胞代谢产物可通过提取、分离和纯化措施来获得产品，D正确。
故选C。
4. 下列有关发酵工程及其应用的说法错误的是（ ）
A. 选育菌种是发酵工程的前提条件，该环节很大程度上决定生产发酵的成败
B. 只有发酵工程中心环节结束时才需要检测培养液中的微生物数量、产品浓度
C. 通过发酵工程获得的单细胞蛋白可作为食品添加剂，也可制成微生物饲料
D. 微生物肥料利用了微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力，改良土壤结构
【答案】B
【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌、接种、发酵和产品的分离、提纯等方面。
【详解】A、选育优良菌种是发酵工程的关键步骤，菌种的优劣很大程度上决定了发酵生产的成败，A正确；
B、在发酵工程的各个环节，包括菌种选育、发酵过程控制等，都需要检测培养液中的微生物数量、产品浓度等参数，以确保发酵过程的顺利进行和产品质量，B错误；
C、发酵工程获得的单细胞蛋白富含蛋白质等营养物质，可作为食品添加剂，也可制成微生物饲料，C正确；
D、微生物肥料通过微生物的代谢活动产生有机酸、生物活性物质等，能够增进土壤肥力，改良土壤结构，对农业生产有重要作用，D正确。
故选B。
5. 下图表示取水稻的花药进行离体培养得到愈伤组织，再在一定条件下诱导形成试管苗的过程。下列相关叙述不正确的是（ ）

A. 愈伤组织在形成过程中，须从培养基中获得水、无机盐、小分子有机物等营养物质
B. 愈伤组织是花粉细胞通过脱分化形成的不定形的薄壁组织团块
C. 该过程为单倍体育种，极大的缩短了育种的年限
D. b试管中所含组织的全能性高于a试管和c试管
【答案】C
【分析】单倍体育种原理：染色体变异，方法与优点：花药离体培养获得单倍体植株，再人工诱导染色体数目加倍，所获得的植株一般是纯合子，优点是可以明显缩短育种年限。
【详解】A、愈伤组织在形成过程中，须从培养基中获得水、无机盐、小分子有机物等营养物质，该过程为植物组织培养过程中的脱分化过程，A正确；
B、花粉细胞通过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织是不定形的薄壁组织团块，B正确；
C、该过程为植物组织培养技术，获得的是单倍体幼苗，没有经过秋水仙素处理，因而不是单倍体育种过程，C错误；
D、b试管中所含组织是愈伤组织，是未分化的细胞，c试管中所含组织的全能性低于b试管的愈伤组织，a试管中花药是分化之后的，全能性较愈伤组织低，D正确。
故选C。
6. 我国科学家成功培育了体细胞克隆猴。在处理重构胚时，将组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA、组蛋白去甲基化酶KDM4D的mRNA 注入了重构胚，促进囊胚的发育，提高代孕母猴的妊娠率。下列叙述错误的是（ ）
A. 除显微操作去核外，还可采用梯度离心、紫外线照射、化学物质处理法在没有穿透卵母细胞透明带的情况下使其中的DNA 变性
B. TSA 能够抑制组蛋白脱乙酰酶的作用从而降低组蛋白的乙酰化水平
C. 组蛋白去甲基化酶KDM4D能够降低组蛋白的甲基化水平
D. 培育克隆猴对研究人类疾病致病机制和研发新药有重要意义
【答案】B
【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。
【详解】A、在核移植过程中，去除卵母细胞的细胞核时，除显微操作去核外，还可采用梯度离心、紫外线照射、化学物质处理等方法，这些方法可以在不穿透卵母细胞透明带的情况下使其中的DNA 变性，A正确；
B、组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA可抑制组蛋白脱乙酰酶的活性，从而抑制组蛋白脱乙酰作用，提高组蛋白的乙酰化水平，B错误；
C、组蛋白去甲基化酶KDM4D可促进组蛋白去甲基化，从而能够降低组蛋白的甲基化水平，C正确；
D、猴属于灵长类动物，与人更接近，培育遗传背景相同的克隆猴对人类疾病致病机制的研究、新药研发等具有更重要的意义，D正确。
故选B。
7. 用限制酶EcRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14kb（1kb即1000个碱基对）的长链，而同时用限制酶EcRⅤ、MbⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，见下图（其中*表示EcRⅤ限制酶切割后的一个黏性末端）。
若用MbⅠ限制酶单独切割该普通质粒，则产生DNA片段的长度为（ ）
A. 2.5和11.5B. 14
C 5.5和8.5D. 6和8
【答案】D
【分析】用限制酶EcRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14kb(1kb即1000个碱基对)的长链，，说明质粒中含有1个EcRⅤ切点；同时用限制酶EcRⅤ、MbⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，说明质粒中含有2个MbⅠ切点。
【详解】用限制酶EcRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14kb(1kb即1000个碱基对)的长链，说明质粒中含有1个EcRⅤ切点；同时用限制酶EcRⅤ、MbⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，说明质粒中含有2个MbⅠ切点。质粒中含有1个EcRⅤ切点，2个MbⅠ切点。若用MbⅠ限制酶单独切割该普通质粒，则产生的DNA片段为2种，总长度为14 kb，结合EcRⅤ的酶切位点可知，ABC不符合题意，D符合题意。
故选D。
8. 基因在不同生物间转移的研究，推动了遗传学的发展。下列叙述错误的是（ ）
A. 肺炎链球菌的转化实验，可证明DNA在同种生物不同个体之间转移
B. 质粒作为基因工程的载体可将外源基因导入受体细胞，实现物种间基因交流
C. 我国转基因抗虫棉的成功培育，实现了基因由植物向微生物的定向转移
D. 噬菌体侵染细菌实现了基因转移，实现了外源基因在原核细胞中的表达
【答案】C
【分析】肺炎链球菌转化实验包括格里菲思体内转化实验和艾弗里体外转化实验，其中格里菲思体内转化实验证明S型菌中存在某种转化因子，能将S型菌转化为R型菌；艾弗里体外转化实验证明DNA是遗传物质
【详解】A、在格里菲斯的肺炎链球菌转化实验中，已经加热杀死的S型细菌中，必然含有某种“转化因子”，使R型细菌转化为S型细菌，这确实证明了DNA在同种生物不同个体之间的转移，A正确；
B、质粒经常被用作基因工程的载体，它可以将外源基因导入到不同的受体细胞中，从而实现物种间的基因交流，B正确；
C、转基因抗虫棉的培育实际上是将某些具有抗虫特性的基因（如Bt基因）从微生物（如苏云金芽孢杆菌）转移到植物（如棉花）中，而不是由植物向微生物转移，C错误；
D、噬菌体是一种可以侵染细菌的病毒，它可以将自己的基因组（包含外源基因）注入到细菌细胞内，从而实现外源基因在原核细胞（如细菌）中的表达，D正确。
故选C。
9. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述正确的是（ ）
A. 该项替换研究中，目前可行的直接操作对象是蛋白质
B. 该项替换研究中，改造前后水蛭素的空间结构未发生改变
C. 该项替换研究的思路与按照中心法则合成蛋白质的思路一致
D. 改造的水蛭素基因导入微生物后可利用发酵工程生产水蛭素
【答案】D
【分析】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。
【详解】A、蛋白质工程的直接操作对象是基因而非蛋白质,通过修改基因序列来改变氨基酸组成，而非直接对蛋白质进行操作，A错误；
B、根据题意信息可知，将天冬酰胺（极性氨基酸）替换为赖氨酸（带正电荷的碱性氨基酸），两者的理化性质差异显著，可能导致局部电荷分布和空间结构改变，从而影响蛋白质功能，B错误；
C、中心法则是从DNA到RNA再到蛋白质的正向流程，而蛋白质工程的思路是逆向的：先设计所需蛋白质结构，再反向推导并修改基因序列。因此，两者的研究思路并不一致，C错误；
D、改造后的水蛭素基因导入微生物（如大肠杆菌或酵母菌）后，可通过发酵工程大规模生产水蛭素，D正确。
故选D。
10. 如图为科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的简要过程，下列相关说法正确的是（ ）

A. 过程①中的两个卵裂球只能取自桑葚胚
B. 过程③操作前需对代孕母鼠进行同期发情处理
C. 可用分割针分割内细胞团做DNA 分析，鉴定性别
D. 嵌合鼠的培育依据的原理是基因重组和细胞全能性
【答案】B
【分析】题图分析，图中为科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的简要过程，其中①是获取早期胚胎的过程，②是将白鼠和黑鼠的早期胚胎嵌合的过程，③是胚胎移植过程。
【详解】A、过程①中的两个卵裂球可以取自于桑葚胚，也可以取自卵裂期，A错误；
B、过程③是胚胎移植过程，在进行操作前，需要对代孕母鼠进行同期发情处理，以保证受体与供体的生理变化是相同的，B正确；
C、内细胞团将会发育为个体的各种组织，若可用分割针分割内细胞团会影响到胚胎发育，应用分割针割取滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别，C错误；
D、嵌合鼠能够分化成完整个体，形成的根本依据是早期胚胎细胞的全能性，该过程不涉及基因重组，D错误。
故选B。
11. 随着转基因技术的发展，其安全性问题引发了极大的关注，下列叙述正确的是（ ）
A. 转基因农产品可能会引发过敏反应
B. 转基因农作物都含有会危害健康的毒性蛋白
C. 转基因农作物可通过花粉将转入的基因扩散到所有作物
D. 对转基因安全性的争议源于对基因工程操作过程了解有限
【答案】A
【分析】转基因生物的安全性问题包括：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响），抗虫棉的种植，减少了农药的使用，有利于保护农田的土壤环境。
【详解】A、转基因农产品导入了新的基因，这些新基因表达出的蛋白质等物质有可能成为过敏原，从而引发过敏反应，A正确；
B、并非所有的转基因农作物都含有会危害健康的毒性蛋白，不能一概而论。许多转基因农作物是经过严格的安全性评估的，其目的是获得优良性状，如抗虫、抗病等，并不是为了产生毒性蛋白危害健康，B错误；
C、转基因农作物可通过花粉将转入的基因扩散到与之亲缘关系较近的物种，而不是所有作物。因为不同物种之间存在生殖隔离，基因难以随意在不同物种间转移，C错误；
D、对转基因安全性的争议主要源于转基因生物可能带来的多方面影响，如对生态环境、人体健康等方面潜在的未知风险，而不是仅仅因为对基因工程操作过程了解有限，D错误。
故选A。
12. 利用传统发酵技术制作食品，是我国传统饮食文化的重要组成部分。下列有关说法正确的是（ ）
A. 果酒发酵时，发酵液中酒精浓度达到一定值后，会反馈抑制酵母菌自身相关酶的活性
B. 果酒发酵完成后进行果醋发酵时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛再将乙醛变为乙酸，同时释放CO2
C. 制作腐乳时，利用单一菌种毛霉分泌的脂肪酶和蛋白酶催化豆腐中蛋白质水解成氨基酸
D. 制作传统泡菜是利用植物体内天然的乳酸菌来进行发酵，控制好条件就不会生成亚硝酸盐
【答案】A
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。
腐乳制作的菌种主要是毛霉，代谢类型是需氧型真菌，属于真核细胞，条件是15-18℃，一定湿度。
泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、在果酒发酵过程中，随着发酵液中酒精浓度升高，当达到一定值后，酒精会对酵母菌细胞内参与酒精发酵的酶的活性产生抑制作用，这属于典型的反馈调节机制，A正确；
B、果酒发酵完成后进行果醋发酵时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸，该过程不会释放CO₂，B错误；
C、制作腐乳时有多种菌的参与 ，其中以毛霉为主，毛霉分泌的蛋白酶催化豆腐中蛋白质水解成小分子肽和氨基酸，C错误；
D、制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵，控制好条件也会生成亚硝酸盐，D错误。
故选A。
13. 某科研团队在实验室进行珍稀丝状真菌发酵产酶实验。在无菌操作和培养基处理过程中，出现了以下几种情况，其中处理方式不合理的是（ ）
A. 将培养皿洗净晾干后，装入金属容器中进行灭菌，灭菌结束后待温度降至 50℃左右时取出
B. 配制好的培养基用不完可放在4℃冰箱中保存，下次用时取出加热融化后倒入培养皿中直接使用
C. 接种时先将接种环灼烧灭菌，冷却后挑取丝状真菌的孢子，整个接种过程始终在酒精灯火焰旁
D. 实验结束后对含有真菌的培养基进行湿热灭菌处理，然后将废弃物按生物安全要求分类丢弃
【答案】B
【分析】获得纯净微生物的关键是防止外来杂菌的污染。无菌操作主要包括：
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基进行灭菌。
③为避免周围环境中的微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
【详解】A、玻璃培养皿采用干热灭菌，装入金属容器防止灭菌过程中损坏，待温度降至 50℃左右取出可避免因温度骤变导致玻璃器皿破裂，A正确；
B、配制好的培养基用不完可放在 4℃冰箱中保存，使用前需先检查有无污染，加热融化后还需再次调节 pH 等参数，然后灭菌，不能直接加热融化后就倒入培养皿直接使用，B错误；
C、接种环灼烧灭菌冷却后挑取孢子，靠近酒精灯火焰操作可减少杂菌污染，C正确；
D、对含有真菌的培养基湿热灭菌处理后按生物安全要求丢弃，可防止微生物扩散造成污染，D正确。
故选B。
14. 某城市自来水厂的水质检测实验室，定期对出厂水样中的大肠杆菌数量进行定量测定，以确定水质，一般采用稀释涂布平板法进行计数。在整个操作及后续分析过程中，下列做法正确的是（ ）
A. 若想一次获取稀释倍数为10³的水样，则可将1mL 水样加入到99mL 无菌水中制取
B. 梯度稀释后每个稀释度包括原水样均涂布 3 个平板，并预留一个空白平板，以减小实验误差
C. 应配制选择培养基进行涂布，在完成涂布操作后，须立即将各组平板放入恒温培养箱中培养
D. 培养时待菌落数稳定时选取菌落数最多的平板进行计数，也可用血细胞计数板显微观察计数
【答案】B
【分析】平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面；稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，通常可用于对微生物进行统计和计数。计数时如菌体位于大方格的双线上，计数时则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。即位于本格上线和左线上的细胞计入本格，本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中。
【详解】A、稀释倍数为 103时，应将1mL 水样加入到999mL 无菌水中，A错误；
B、梯度稀释后每个稀释度包括原水样均涂布3个平板，并预留一个空白平板，以减小实验误差，自来水中大肠杆菌数量可能较少，原水样也需要涂布培养，B正确；
C、应配制鉴别培养基进行涂布，涂布后需等待菌液被培养基吸收，再放入培养箱，否则菌液会在平板表面流动，影响菌落分布和计数，C错误；
D、应选取菌落数在 30~300 之间的平板进行计数，取平均值，细菌可用细菌计数板进行直接计数，但是自来水中可能有多种细菌显微镜观察难以区分，D错误。
故选B
15. 依据《中华人民共和国生物安全法》，生物安全是指国家有效防范和应对危险生物因子及相关因素威胁，生物技术能够稳定健康发展，人民生命健康和生态系统相对处于没有危险和不受威胁的状态，生物领域具备维护国家安全和持续发展的能力。下列叙述正确的是（ ）
A. 只要有证据表明某种转基因产品有害，就应该全面禁止转基因技术的应用
B. 可通过基因编辑技术对基因进行敲除、插入等，来设计完美试管婴儿
C. 从外来入侵害虫的原产地引入天敌进行治理，不会对入侵地造成生态影响
D. 高致病性微生物必须在高等级生物安全实验室中开展实验活动
【答案】D
【分析】《中华人民共和国生物安全法》是为维护国家安全，防范和应对生物 安全风险，保障人民生命健康，保护生物资源和生态环境，促进生物技术健康发展，推动构建人类命运共同体，实现人与自然和谐共生，制定的法律。
【详解】A、转基因技术中，只要有证据表明产品有害，就应该禁止该产品的使用，而不是禁止转基因技术的应用，A错误；
B、利用基因编辑技术设计试管婴儿，设计完美试管婴儿，已经涉及到新生命的诞生，会造成生物技术安全与伦理问题，B错误；
C、从外来入侵害虫的原产地引入天敌进行治理，由于短期内天敌没有资源和空间等的限制，可能会对入侵地造成生态影响，C错误；
D、高致病性微生物须在高等级生物安全实验室中开展实验活动，防止造成致病性微生物外泄，造成污染，危害生物健康，D正确。
故选D。
二、非选择题 （本大题共 5 小题，共55 分）
16. 番茄青枯病是由青枯雷尔氏菌引起的，具有较强的侵染力和破坏力。番茄青枯病可通过以根际促生菌作为拮抗微生物抵御青枯雷尔氏菌进行生物防治。因此，发掘新的高效能拮抗青枯病病原菌的促生微生物具有重要意义。回答下列问题：
（1）进行样本采集及拮抗细菌菌株分离纯化时，应采集某地番茄青枯病发病果园中_______（填“健康”或“患病”）植株根际土壤。先称取1g土壤添加到盛有_________的三角瓶中均匀振荡后，置于恒温水浴15min。经分离培养后，挑取单菌落进行划线纯化。在第二次及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，目的是_______。
（2）进行拮抗细菌的分离筛选时，为比较不同根系微生物纯化菌液对青枯病病原菌的拮抗作用效果，科研人员配制了含有青枯病病原菌的平板，在含青枯病病原菌平板上滴加________，在相同且适宜的条件下培养一段时间，观察并比较抑菌圈的大小，拮抗作用越强则________。
（3）通过对拮抗细菌产酶活性进行测定，筛选出4株菌株，随后进行青枯病预防实验。现有番茄幼苗、4种菌液、青枯菌菌液、无菌水等。设计实验比较菌株的预防效果：将生长状况相同且良好的幼苗平均分为5份，标注1~5组。_________（补充实验思路）。
【答案】（1）①. 健康 ②. 无菌水 ③. 使 细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落
（2）①. 等量不同根系微生物菌液 ②. 抑菌圈越大
（3）1组喷洒无菌水和青枯菌菌液，2~5组分别喷洒等量的四种菌液，再喷洒青枯菌菌液，培养一段时间观察比对生长及患病情况
【分析】微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【解析】（1）拮抗细菌可通过拮抗青枯雷尔氏菌防止番茄青枯病的发生，在发病果园中存在青枯雷尔氏菌，其中健康的植株则是由于拮抗细菌的存在而使其保持健康，为了获取拮抗菌株，应选取健康植株的土壤；称取土壤后进行稀释，使用无菌水进行稀释，避免外来微生物对纯化的影响，因此先称取1 g土壤添加到盛有无菌水的三角瓶中均匀振荡后，置于恒温水浴15min；经分离培养后，挑取单菌落进行划线纯化，所用方法是平板划线法，通常使用的划线工具是接种环；在第二次及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，目的是使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
（2）为比较不同根系微生物纯化菌液对青枯病病原菌的拮抗作用效果，科研人员配制了含有青枯病病原菌的平板，含青枯病病原菌平板中滴加等量的不同根系微生物纯化菌液，在相同且适宜的条件下培养一段时间，观察其抑菌圈的大小；根系微生物对青枯病病原菌有拮抗作用，会抑制其生存，滴加了根系微生物纯化菌液的地方不会生长青枯病病原菌，其周围生长了青枯病病原菌，形成抑菌圈，所以拮抗作用越强则抑制菌圈越大。
（3）实验目的是进行青枯病预防实验比较菌株的预防效果，故实验自变量为菌株的种类，在实验设计过程中，要遵循单一变量的原则，因此实验思路为：将生长状况相同且良好幼苗平均分为 5 等分，标注1-5 组，每组设三个平行组， 1 组喷洒无菌水（作为对照组）和青桔菌液，2-5组分别喷洒四种菌液，后喷洒青枯菌菌液，培养一段时间观察比对生长及患病情况。
17. 动物细胞工程和胚胎工程在多领域展现出了巨大的发展潜力。回答下列问题：
（1）动物细胞培养是动物细胞工程的基础。培养时首先要对新鲜取材的动物组织进行处理，可用机械的方法或用________等处理一段时间将其分散成单个细胞。贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，会发生______现象，这时就需要分瓶培养细胞。
（2）动物细胞融合技术在单克隆抗体的制备过程中起了关键性作用。与普通抗体相比，单克隆抗体具有_______（答出2点）等优点。请根据图1描述ADC 杀伤乳腺癌细胞的具体过程：_______。
（3）转基因试管牛可生产重组人乳铁传递蛋白（rhLF），为生物制药等领域提供关键原料，流程如图2所示。过程①需要给母牛注射外源激素，其目的是_______。过程④中进行胚胎移植的优势是_______。
【答案】（1）①. 胰蛋白酶（胶原蛋白酶）②. 接触抑制
（2）①. 准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合；可大量制备 ②. ADC 识别乳腺癌细胞并与之结合，通过胞吞进入细胞后被溶酶体降解，释放出的药物进入细胞质基质，最终进入并作用于细胞核，导致乳腺癌细胞凋亡
（3）①. 促使母牛超数排卵 ②. 充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
【分析】动物细胞培养是指从动物体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
【解析】（1）在进行动物细胞培养过程中，首先要对新鲜取材的动物组织进行处理，可用机械的方法或用胶原蛋白酶（或胰蛋白酶）等处理一段时间将其分散成单个细胞。贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，会发生接触抑制现象，这时就需要分瓶培养细胞，此后的培养叫做传代培养。
（2）单克隆抗体，与普通抗体相比较，具有如下优点：①能准确地识别抗原的细微差异，并与特定抗原发生特异性结合；②可大量制备。ADC杀伤乳腺癌细胞的具体过程为：①ADC识别乳腺癌细胞并与乳腺癌细胞结合；②乳腺癌细胞通过胞吞作用，使ADC进入细胞，并被细胞内的溶酶体所降解；③ADC被降解后，释放出药物进入细胞质基质，并最终进入、作用于细胞核，④细胞核启动凋亡程序导致细胞凋亡。
（3）过程①需要给母牛注射外源促性腺激素，使母牛超数排卵，以便获得更多的胚胎。过程④是将胚胎移植到同期发情的代孕母牛体内，进行胚胎移植的优势主要在于可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。
18. CRISPR-Cas9技术在基因编辑中运用较多。该技术是以Cas9基因和能转录出与目标DNA互补的向导RNA的基因作为目的基因，通过载体将其导入受体细胞中。表达出来的Cas9蛋白和向导RNA会形成复合物，向导RNA识别并结合目标DNA，Cas9蛋白切断双链DNA形成两个末端。这两个末端通过“断裂修复”重新连接，实现对目标DNA进行特定基因的敲除或插入，从而修复或改良机体功能，其过程如图1。
（1）基因工程中可用PCR技术获取目的基因，PCR过程除了需要模板和引物外还需要的条件有______（答出2点即可）。若将一个Cas9蛋白基因经PCR扩增8轮，获得的DNA片段中仅含有1种引物的DNA片段有______个。
（2）利用CRISPR-Cas9技术在Gata基因序列的一端插入绿色荧光蛋白（GFP）基因，Cas9蛋白和向导RNA复合物相当于限制酶，会破坏Gata基因序列上的______键，插入GFP基因后，构建了图2中的重组质粒，其中终止子的作用是______。为了检测GFP基因是否准确插入图2中的位置，最好选择引物______（填序号）进行PCR扩增，然后利用电泳技术进行检测。
（3）实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。对小鼠体细胞DNA进行PCR和电泳分析，得到如图3的1～3种条带结果，其中第______种条带的结果为Gata3-GFP基因纯合子的小鼠，理论上子代中Gata3-GFP基因纯合子的比例为______。
【答案】（1）①. 4种游离的脱氧核苷酸（dNTP）、耐高温的DNA聚合酶、含Mg2+缓冲液 ②. 2
（2）①. 磷酸二酯 ②. 基因转录停止的区域 ③. ①③（②④）
（3）①. 1 ②. 1/4
【分析】PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。
【解析】（1）PCR过程除了需要模板和引物外，还需要的条件有4种游离的脱氧核苷酸（dNTP）、耐高温的DNA聚合酶、含Mg2+缓冲液；无论PCR扩增多少次，只有最初的两条模板链上不带有引物，其他子代DNA均携带2个引物，因此PCR扩增8轮，获得的DNA片段中仅含有1种引物的DNA片段有2个。
（2）Cas9蛋白和向导RNA复合物相当于限制酶，会破坏Gata基因序列上的磷酸二酯键；终止子的作用是基因转录停止的区域；为了检测GFP基因是否准确插入图2中的位置，最好选择引物①③（②④），这样可以检测GFP基因恰好插入在Gata3的下游。
（3）实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，小鼠基因型相当于Aa，杂交后代的基因型及比例为AA∶Aa∶aa=1∶2∶1。其中Gata3-GFP基因由于插入了GFP基因，因此片段更长（可以看做A），在电泳中距离点样孔更近，因此片段1代表A基因，片段2代表a基因，据此可以判断第1种电泳结果的基因型相当于AA，第2种电泳结果相当于Aa，第3种电泳结果相当于aa，第1种条带的结果为Gata3-GFP基因纯合子的小鼠；理论上子代中Gata3-GFP基因纯合子（即AA）的比例为1/4。
19. 二化螟的幼虫主要危害水稻的叶和茎，转Bt基因水稻能一定程度抵抗二化螟的侵害。科研人员构建了GAL4/UAS基因调控系统的转基因水稻，过程如图1所示：GAL4/UAS系统调控基因表达的机理如图2所示：UAS序列可抑制靶基因表达，GAL4蛋白是一种转录活性因子，可特异性地识别并结合UAS序列，激活UAS下游基因的转录。

（1）图1中①②操作过程涉及到的酶有______。③④过程除了要进行目的基因的检测和鉴定外，还需要进行______才能将细胞培养成转基因个体。
（2）现已获得crylC基因、Bt基因和绿色荧光蛋白GFP基因，crylC基因能促进Bt基因的表达。若要以GFP基因为标记基因筛选受体细胞，在构建UAS-靶基因表达载体时，应将crylC、Bt、GFP三个基因插入到图3（Ti质粒的T-DNA片段示意图）中的位置分别是______（用序号①②③作答）。

（3）将GAL4转基因个体与UAS-Bt转基因个体杂交得，中出现了抗虫植株，其表现抗虫性状的原因是______。利用中抗虫个体自交得，若中表型及其比例为______，则GAL4基因和Bt基因插入同一对同源染色体上；若中表型及其比例为______，则GAL4基因和Bt基因插入两对同源染色体上（假设插入的基因均有效，个体的存活率相等）。
（4）采用在水稻叶片和茎鞘中特异性表达的GAL4基因的启动子，构建表达载体，得到转基因抗虫水稻，在食品安全方面的意义是______。
【答案】（1）①. 限制酶、DNA连接酶 ②. 植物组织培养
（2）②③① （3）①. F1同时含有GAL4基因和 UAS-Bt基因，GAL4基因表达产生的GAL4蛋白与UAS结合激活Bt基因的表达 ②. 抗虫：不抗虫=1：1 ③. 抗虫：不抗虫=9：7
（4）利用GAL/UAS调控系统，使目的基因只在特定部位表达，而在人食用的部位不表达
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。
（4）目的基因的检测与鉴定。
【解析】（1） 图1中①②操作过程为将目的基因导入受体细胞，该过程涉及的酶有限制酶和DNA连接酶（用于切割和连接目的基因与载体，构建基因表达载体）。③④过程除了要进行目的基因的检测和鉴定外还需要进行植物组织培养（原理为植物细胞的全能性）才能将细胞培养成转基因个体。
（2）结合题干，若要以GFP基因为标记基因筛选受体细胞，通过特异性启动子-GALA调控UAS-靶基因的表达，且crylC基因能促进Bt基因的表达，结合图3，①处应该插入标记基因（GFP基因），②③处插入cry1C、Bt基因，即应将cry1C、Bt、GFP三个基因插入到图3所示T-DNA中的位置分别是②③①。
（3） 结合题干“转Bt基因水稻能一定程度抵抗二化螟的侵害，cryIC基因能促进Bt基因的表达”，推知将GAL4转基因个体与UAS-Bt转基因个体杂交得F1，F1全表现为抗虫，F1自交得F2，F1植株表现抗虫性状的原因是F1同时含有GAL4基因和 UAS-Bt基因，GAL4基因表达产生的GAL4蛋白与UAS结合激活Bt基因的表达。若GAL4基因（表示为G）和Bt基因（表示为B）插入一对同源染色体上，遵循基因的分离定律，F1为GB，F1自交得到1GG（不抗虫）、2GB（抗虫）、1BB（不抗虫），即F2中表型及其比例为抗虫：不抗虫=1：1；若GAL4基因（表示为G）和Bt基因（表示为B）插入两对同源染色体上，遵循基因的自由组合定律，F1基因型为GOBO，F1自交得到9G_B_ ，其余7份要么只含有G或B或均不含，都表现为不抗虫，即F2中表型及其比例为抗虫：不抗虫=9：7。
（4）结合题干信息，启动子具有特异性，构建GAL4基因表达载体时采用叶片和茎鞘中特异性表达基因的启动子，可使靶基因只在植株叶片和茎鞘中表达，故该技术在提高食品安全方面可能存在一定的意义，具体表现为利用GAL/UAS调控系统，使目的基因只在特定部位表达，而在人食用的部位不表达。
20. 某科研团队想从土壤中分离乳酸菌进行纯培养及相关特性研究。请回答下列问题：
（1）配置用于乳酸菌纯培养的培养基时，除了提供乳酸菌生长所需的碳源、氮源、水和无机盐等基本营养物质外，还需调整培养基的pH，应使用_______（填 “酸性物质” 或 “碱性物质”）进行调节，因为乳酸菌适宜在此pH值环境下生长。
（2）在无菌操作过程中，对玻璃器皿进行灭菌可采用______法。对试管口、瓶口等容易被污染的部位，可采用_____法进行灭菌。
（3）利用稀释涂布平板法进行乳酸菌计数。将乳酸菌培养液进行梯度稀释，取10-4、10-5、10-6 三个稀释度的稀释液各0.1mL分别涂布到多个平板上。在适宜条件下培养后，10⁻⁴稀释度平板上菌落数过多，无法计数；105稀释度平板上平均菌落数为256个；10-6稀释度平板上平均菌落数为23个。则每毫升乳酸菌培养液中的活菌数约为______个。其中一个10-4稀释度平板上的菌落分布不均匀，部分区域菌落密集，部分区域菌落稀疏，可能的原因是_______。
（4）在进行平板划线法分离乳酸菌时，平板上出现了多种形态的菌落，原因可能是_______。五次划线接种结束时，仍需要灼烧接种环目的是________。
【答案】（1）酸性物质
（2）①. 干热灭菌 ②. （火焰）灼烧
（3）①. 2.56×108 ②. 涂布操作不规范未涂布均匀；涂布器灼烧后未充分冷却，导致部分微生物被烫死
（4）①. 土壤样品中存在多种微生物（无菌操作不规范，混入杂菌等）②. 避免接种环上残留的微生物污染实验室和环境，避免接种环上残留的微生物感染实验人员
【分析】稀释涂布法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
【解析】（1）配置用于乳酸菌纯培养的培养基时，除了提供乳酸菌生长所需的碳源、氮源、水和无机盐等基本营养物质外，还需调整培养基的pH，应使用 “酸性物质”进行调节，因为乳酸菌适宜在此pH值环境下生长，即酸性环境中乳酸菌会成为优势种。
（2）在无菌操作过程中，对玻璃器皿的需要保持干燥的器皿在进行灭菌时可采用干热灭菌法。对试管口、瓶口等容易被污染的部位，可采用（火焰）灼烧法进行灭菌，避免杂菌污染。
（3）利用稀释涂布平板法进行乳酸菌计数。将乳酸菌培养液进行梯度稀释，取104、105、106 三个稀释度的稀释液各0.1mL分别涂布到多个平板上。在适宜条件下培养后，104稀释度平板上菌落数过多，无法计数；105稀释度平板上平均菌落数为256个；106稀释度平板上平均菌落数为23个。由于用于统计的平板中菌落数在30~300之间的平板可以用于统计，因此，每毫升乳酸菌培养液中的活菌数约为256÷0.1×105=2.56×108个。其中一个10-4稀释度平板上的菌落分布不均匀，部分区域菌落密集，部分区域菌落稀疏，这可能是涂布操作不规范未涂布均匀；涂布器灼烧后未充分冷却，导致部分微生物被烫死。
（4）在进行平板划线法分离乳酸菌时，平板上出现了多种形态的菌落，因为菌落具有种的特异性，因此该实验结果说明土壤样品中存在多种微生物，另外无菌操作不规范，混入杂菌等也会出现上述现象。五次划线接种结束时，仍需要灼烧接种环，这样操作的目的是避免接种环上残留的微生物污染实验室和环境，避免接种环上残留的微生物感染实验人员。