山东省菏泽市曹县第一中学2024-2025学年高二下学期第一次月考生物试题（原卷版+解析版）

这是一份山东省菏泽市曹县第一中学2024-2025学年高二下学期第一次月考生物试题（原卷版+解析版），共33页。试卷主要包含了选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
1. 米醋是一种营养价值较高的调味品，《醒园录》中有“赤米不用舂，洗净蒸饭，拌曲发香，用水或用酒泼皆可发，……俟月余可用。如有发霉，用铁火针烧极红淬之。”的记载。下列有关米醋酿制的说法正确的是（ ）
A. “不舂”保留稻壳的目的是为后续发酵提供菌种
B. 米饭“拌曲”后要密封，有利于产生酒精和醋酸
C. “用水或用酒泼皆可发”，说明利用糖和乙醇都可以酿醋
D. 为防止霉菌感染，米醋制作时温度应控制在30℃以下
2. 某同学研究乳酸菌不同接种量与泡菜制作过程中亚硝酸盐含量及乳酸含量的关系，得到下图结果。下列相关分析正确的是（ ）

A. 不接种乳酸菌的实验组也检测到乳酸，其乳酸来源于其他杂菌的无氧呼吸
B. 新腌制的泡菜不宜过早食用，泡菜中亚硝酸盐含量与发酵温度无关
C. 人工接种乳酸菌可加快泡菜发酵进程，快速增加乳酸含量，缩短发酵周期
D. 乳酸菌接种量越多，泡菜的亚硝酸含量减少越明显，泡菜产品品质越高
3. 下列关于发酵工程的说法，正确的是（ ）
A. 选育菌种是发酵工程的前提条件，该环节很大程度上决定了生产发酵产品的成败
B. 培养基和发酵设备都必须灭菌，因为发酵工程中所用的菌种均是单一菌种
C. 发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，生产青霉素过程必须关闭空气入口
D. 啤酒生产过程中，主发酵结束后即可过滤、调节、分装进行出售
4. 酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（ ）
A. X→Y→ZB. Z→Y→XC. Y→X→ZD. Z→X→Y
5. 有机物Y（不含N元素）是一种水体污染物。X菌是一种能够降解Y的异养厌氧型微生物。科研人员从污水中筛选出了X菌，主要步骤如图所示，设置甲培养基的目的是获得更多的X菌。下列说法错误的是（ ）

A. 通常采用干热灭菌的方法对培养皿等玻璃器皿进行灭菌
B. 筛选该种微生物时，培养基以有机物Y为唯一碳源
C. 摇瓶M中振荡培养的目的是使X菌与氧气充分接触
D. 从培养基的组分分析，甲、乙培养基的不同在于乙中含有琼脂
6. 乳糖不耐受人群体内缺乏乳糖酶，不能完全消化母乳或牛乳中的乳糖，从而引起腹痛、腹胀、腹泻等肠胃不适。为了去除牛乳中的乳糖，某科研团队从奶酪中分离纯化出了高产乳糖酶的酵母菌，过程如图所示。下列说法正确的是（ ）
注：X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。
A. 对培养基甲采用高压蒸汽灭菌，培养基乙采用干热灭菌
B. 培养基甲进行振荡培养时能更高效增大酵母菌的数量
C. 若培养基乙中菌落数超过300，说明接种菌液的稀释倍数过大
D. 以菌落为中心，透明圈最大的菌落乳糖酶产量最大或酶活性最高
7. 庆大霉素（GM）能抑制沙门氏菌的生长。研究人员为了探究LPC（用MRS培养植物乳杆菌后获得的上清液）对沙门氏菌生长的影响及作用机制，在接种沙门氏菌的平板上做了五组不同处理，实验结果如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 在酒精灯火焰旁倒平板后用湿热灭菌法对培养基进行灭菌
B. 需将含沙门氏菌的菌液稀释到适宜浓度后用平板划线法接种
C. MRS和GM均为对照组，分别为阴性对照和阳性对照
D. LPC抑制沙门氏菌的机制可能是因为LPC含有热稳定性高物质
8. 某研究小组为培育高产耐盐碱再生植株，利用甲植物细胞（细胞核基因具有耐盐碱效应）和乙植物细胞（细胞质基因具有高产效应）进行体细胞杂交，在原生质体融合前，对原生质体进行处理，分别使甲原生质体和乙原生质体的细胞质和细胞核失活，融合的原生质体分散固定在平板中，独立生长、分裂形成愈伤组织。下列各项中能说明这些愈伤组织只能来自杂种细胞的理由是（ ）
①甲、乙原生质体经处理后失活，无法正常生长、分裂
②同种融合的原生质体因甲或乙原生质体失活而不能生长、分裂
③培养基含有抑制物质，只有杂种细胞才能正常生长、分裂
④杂种细胞由于结构和功能完整可以生长、分裂
A. ①②③B. ①②④C. ①③④D. ②③④
9. 生物碱为铁皮石斛的次级代谢产物。下图是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎(简称PLBs, 类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程。下列说法正确的是（ ）
A. 生物碱是铁皮石斛生长所必需的物质
B. 图中过程①为脱分化形成PLBs, 过程②为再分化生产生物碱
C. 培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量值大的PLBs
D. 该过程运用了植物细胞培养技术，原理是植物细胞增殖
10. 二倍体菊花M（染色体数为18）是一种观赏植物，但容易遭受到甲、乙病毒侵害。研究者先分别获得抗甲转基因菊花植株、抗乙转基因菊花植株，再将二者进行体细胞杂交，培育出同时抗甲、乙植物新品种N。杂交细胞在培养过程中可能会发生染色体丢失的现象，只有含有M细胞中完整18条染色体且自交后代不发生性状分离的个体才符合育种目标。下列对培育新品种N过程的叙述，错误的是（ ）
A. 可以通过接种病原体对植物N进行抗虫性鉴定
B. 培育、、N的过程中都需要使用固体培养基
C. 调整培养基中植物激素比例是培育新品种N的重要环节
D. 如果符合要求的植株N的体细胞中有30条染色体，其中至少有12条来自
11. CLDN6 蛋白是一种跨膜蛋白，包括胞外区、跨膜区和胞内区，在正常组织细胞中低表达，而在多种癌细胞中特异性高表达，研究者选定其制备用于诊断癌症的单克隆抗体。下列说法错误的是（ ）
A. 可提取CLDN6 蛋白胞外区基因序列用于制备免疫小鼠所用的抗原
B. 单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异并与之特异性结合，且可大量制备
C. 灭活病毒表面的糖蛋白等能与细胞膜上的脂质分子作用，诱导细胞融合
D. 悬浮培养的杂交瘤细胞传代培养时，可用离心法直接收集
12. 图示多克隆抗体的制备流程。下列有关多克隆抗体与单克隆抗体的比较，错误的是（ ）
A. 多克隆抗体是从动物血清中获得的抗体混合物，单抗只有一种抗体
B. 多克隆抗体可以识别同一抗原的不同结合位点，单抗只识别抗原的一个结合位点
C. 多克隆抗体的获得无需筛选，单抗制备的过程中至少经历两次筛选
D. 与单抗药物的制备相比，制备多克隆抗体药物的生产周期短，生产成本低
13. 三维细胞培养技术（3D细胞培养）是通过人工模拟细胞间质微环境，允许动物细胞在三维空间中生长和相互作用的技术。与传统的细胞培养相比，3D细胞培养更接近体内细胞的实际生长环境。下列说法正确的是（ ）
A. 传统细胞培养时，细胞并不都需要贴附于某些基质表面才能生长增殖
B. 用胰蛋白酶处理传统培养的贴壁细胞，断裂其胞间连丝使之游离便于传代
C. 3D细胞培养前需要对动物组织进行灭菌处理，培养时需定期更换培养液
D. 利用3D细胞培养技术研究干细胞分化过程时，通常需要进行分瓶处理
14. 秦川牛是中国优良黄牛地方品种，其体格大、役力强、产肉性能良好，因产于八百里秦川的陕西省关中地区而得名。如图表示研究人员利用胚胎工程培育秦川奶牛的过程。下列相关叙述错误的是（ ）

A. ①为体外受精，该过程中卵细胞的呼吸速率和物质合成速率均变快
B. ②为体外胚胎培养，培养液和培养用具均需灭菌，并需定期更换培养液
C. ③→④中若要进行胚胎性别鉴定，需选择内细胞团细胞进行DNA分析
D. ⑤为胚胎移植，需将胚胎移植到同种的、生理状态与供体相同的其他雌牛体内
15. 近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（ ）
A. 胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
B. A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精
C. D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理
D. E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16. 为了筛选出能高效降解石油的细菌，某研究人员利用石油污染滩涂土壤进行了如下图所示的操作(①~⑤表示不同的菌落)。下列说法正确的是（ ）
A. 图中液体富集培养基和液体选择培养基的成分不同，后者以石油为唯一碳源
B. 甲过程采用的是稀释涂布平板法，该方法用于计数时往往使结果偏大
C. 菌落①可能是自养细菌，因不能分解石油而无降解圈产生
D. 乙过程选择菌落⑤接种到石油培养基，可根据石油剩余量进行降解能力评估
17. 多种发酵食品中含有生物胺（低分子量含氮有机化合物），人体摄入过量生物胺会引起不良反应。某些微生物可产生多铜氧化酶（MCO）降解生物胺，但降解过程中会产生过氧化氢，可能会导致MCO氧化损伤，进而使其降解生物胺效率下降。科研人员筛选产生MCO的微生物，并用于食品发酵。下列说法正确的是（ ）
A. 筛选产生MCO微生物的培养基中应加入生物胺作为唯一氮源，该培养基中生长的微生物都具有降解生物胺的能力
B. 发酵食品生产时为了维持MCO的活性，可能需要向发酵罐中加入适量的过氧化氢酶
C. 将MCO加入发酵罐，并进行加热处理，既可以减少过氧化氢对MCO的损伤，又一定能得到生物胺含量较低的发酵食品
D. 将控制过氧化氢酶与MCO合成的基因采用转基因技术转入大肠杆菌中，可能得到能同时产生两种酶的工程菌
18. 透明质酸（HA）又称玻尿酸，是一种可在外科整形手术中充当皮下填充物的多糖类物质，微生物发酵法是大规模生产HA的主要方法。实验室扩大培养微生物时，常需要将装有培养液的锥形瓶置于摇床上振荡培养。为提高HA的产量，科研人员以HA高产菌株ZV1为研究对象，分别探究了发酵过程中摇床转速（图1）、锥形瓶装液量（图2）等条件对瓶中HA总产量和ZV1菌体含量（通过离心收集培养液中的所有菌体来测定）的影响。下列说法正确的是（ ）

A. HA可能存在于某些微生物荚膜中
B. 装液量在60mL至120mL之间时，ZV1菌体含量和HA产量的变化趋势相同
C. 摇床转速和装液量都会对培养液中的氧气含量造成影响
D. 采用150r/min的摇床转速和120mL的装液量是提高HA产量的有效措施
19. 我国科学家经过多年努力，攻克了克隆非人灵长类动物这一世界性难题，成功培育出体细胞克隆猴。培育克隆猴的大致流程如下图。下列叙述正确的是（ ）
A. 从卵巢中采集的甲猴卵母细胞需体外培养至MⅡ中期
B. 过程①通过显微操作去除的核实际上是“纺锤体—染色体复合物”
C. 过程②得到的重构胚需Ca2+载体等激活，以完成细胞分裂和发育进程
D. 为获得更多的克隆猴，可在过程③前对桑葚胚的内细胞团进行均等分割
20. 单倍体亚麻是重要的纤维作物。二倍体罗布麻具有很强的耐干旱、高温等能力，也是优质纤维植物。研究人员将亚麻和罗布麻通过植物体细胞杂交技术，培育出具有双亲优势的麻类新种质，主要培育流程如图所示（只考虑细胞两两融合）。下列叙述错误的是（ ）
A. 过程①得到的原生质体A、B需置于等渗溶液以维持活性
B. 过程②中原生质体A、B融合完成的标志是再生出细胞壁
C. 过程③④为植物组织培养，正常情况下得到的E为异源四倍体
D. 上述植物体细胞杂交技术打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种
三、非选择题：本题共4小题，共55分。
21. 黄原胶是由野油菜黄单胞杆菌（好氧菌）以碳水化合物为主要原料，经发酵工程生产的一种作用广泛的微生物胞外多糖。黄原胶作为增调剂、悬浮剂、乳化剂、稳定剂，可广泛应用于食品、石油、医药等20多个行业，是目前世界上生产规模较大且用途极为广泛的微生物多糖。
（1）培养黄原胶的培养基中含有的营养物质有_______等，用______方法对培养基灭菌。
（2）实验室内测定野油菜黄单胞杆菌数量的方法有显微镜计数法和______后者统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少，原因是______________。
（3）黄原胶属于______代谢物，生产黄原胶的发酵罐内的pH需调至_________，并通入无菌空气。
（4）用发酵工程工业化生产黄原胶时，若要获得黄原胶可根据其性质采取适当的________措施来获得产品。
22. 研究发现，异种植物细胞融合时受体细胞会排出结构完整的供体细胞染色体。若在融合前用大剂量的X射线使供体细胞染色体发生断裂、易位、染色体消除等破坏后，与一个正常受体细胞原生质体融合，可得到含全部受体遗传物质及部分供体遗传物质植株。该技术称为不对称植物体细胞杂交技术。下图为利用不对称植物体细胞杂交技术培育抗青枯病马铃薯植株的过程示意图。

（1）过程①通常用______试剂对外植体进行消毒，然后用含有___________的培养液来处理细胞即可获得原生质体。
（2）过程②常用_______试剂对原生质体进行诱导融合，且该过程需要在培养液中加入一定量的渗透压缓冲物质，目的是_______。
（3）过程③选择________的细胞进行培养，形成的愈伤组织更容易获得抗青枯病的马铃薯植株。
（4）对过程④获得的15株抗病马铃薯植株检测，发现所有植株细胞内染色体数目与普通马铃薯一致，但有部分植株随机获得了供体茄子的其他性状，据此推测产生此现象的原因可能是_____。
23. CD47是一种免疫抑制蛋白，肿瘤细胞通过过量表达CD47抑制巨噬细胞的吞噬作用以实现免疫逃逸。抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，其制备流程如下图甲所示。

（1）制备过程中需要用CD47对小鼠进行多次处理，目的是______。为保证细胞培养环境无菌、无毒，需要进行的相关操作是______。
（2）下图乙表示核苷酸合成的两条途径，物质A可以阻断全合成途径，转化酶和激酶是补救合成途径所必需的两种酶。正常细胞中含有转化酶和激酶，骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。已知图甲的筛选1利用的是加入了H、A、T三种物质的“HAT培养基”，其筛选得到是______细胞，该细胞能在HAT培养基中存活并增殖的原因是______；经筛选2获得的细胞的特点是______。
（3）为验证抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，研究人员设计如下实验，实验组：将抗CD47的单克隆抗体加入巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养系中，检测巨噬细胞的吞噬指数（与被吞噬肿瘤细胞的比例呈正相关）；对照组为______，预期实验结果：______。
24. 图1是我国科学家利用胚胎干细胞建立体外胚胎和胚胎发育潜能研究流程。人胚胎干细胞存在两种不同状态，即原始态（naive）和始发态（primed）。naive 干细胞具有最高的发育潜能，primed干细胞全能性相对较低。图2是OGT、OGA以及细胞骨架蛋白在胚胎于细胞中表达情况的电泳图谱，OGT是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将糖基从蛋白质上去除的酶。
（1）猴子芽体相当于_______期的胚胎，过程③的起点细胞应取自芽体的________部位。
（2）过程④⑤形成的胚胎是______，由该胚胎表面细胞向内迁移形成________。过程⑥需对受体母猴进行的处理是________________。
（3）据图2推测，naive干细胞发育潜能更高的原因可能是______________；该实验设置细胞骨架蛋白表达量组别作为对照的作用是______________。
（4）过程①需在图2中的诱导培养基中完成，目的是_________。
高中二年级下学期第一次月考生物试题
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1. 米醋是一种营养价值较高的调味品，《醒园录》中有“赤米不用舂，洗净蒸饭，拌曲发香，用水或用酒泼皆可发，……俟月余可用。如有发霉，用铁火针烧极红淬之。”的记载。下列有关米醋酿制的说法正确的是（ ）
A. “不舂”保留稻壳的目的是为后续发酵提供菌种
B. 米饭“拌曲”后要密封，有利于产生酒精和醋酸
C. “用水或用酒泼皆可发”，说明利用糖和乙醇都可以酿醋
D. 为防止霉菌感染，米醋制作时温度应控制在30℃以下
【答案】C
【解析】
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精。
【详解】A、“不舂”保留稻壳，稻壳的保留并非为了提供菌种，而是为了保护米粒在蒸煮过程中不被破坏，A错误；
B、“拌曲”后密封，密封的目的是为了创造厌氧环境，促进酒精发酵，但醋酸发酵需要氧气，B错误；
C、“用水或用酒泼皆可发”，说明米醋的酿制可以利用糖（通过水泼）或乙醇（通过酒泼）作为原料，C正确；
D、米醋制作时温度是30-35℃，D错误。
故选C。
2. 某同学研究乳酸菌不同接种量与泡菜制作过程中亚硝酸盐含量及乳酸含量的关系，得到下图结果。下列相关分析正确的是（ ）

A. 不接种乳酸菌的实验组也检测到乳酸，其乳酸来源于其他杂菌的无氧呼吸
B. 新腌制的泡菜不宜过早食用，泡菜中亚硝酸盐含量与发酵温度无关
C. 人工接种乳酸菌可加快泡菜发酵进程，快速增加乳酸含量，缩短发酵周期
D. 乳酸菌接种量越多，泡菜的亚硝酸含量减少越明显，泡菜产品品质越高
【答案】C
【解析】
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、果蔬表面含有乳酸菌，不接种乳酸菌的实验组，乳酸来源于乳酸菌的无氧呼吸，A错误；
B、新腌制的泡菜亚硝酸盐含量高，不宜过早食用，泡菜亚硝酸盐含量与发酵温度、食盐的用量等因素有关，B错误；
C、根据实验结果，人工接种乳酸菌可以加快亚硝酸盐的降解和增加乳酸的含量，加快泡菜发酵进程，缩短发酵周期，C正确；
D、乳酸菌接种量增多，泡菜的亚硝酸含量在短时间内减少明显，结合乳酸含量的检测结果，接种量越多乳酸含量过高，使泡菜过酸影响口感，影响泡菜产品品质，泡菜的品质不一定提高，D错误。
故选C。
3. 下列关于发酵工程的说法，正确的是（ ）
A. 选育菌种是发酵工程的前提条件，该环节很大程度上决定了生产发酵产品的成败
B. 培养基和发酵设备都必须灭菌，因为发酵工程中所用的菌种均是单一菌种
C. 发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，生产青霉素过程必须关闭空气入口
D. 啤酒生产过程中，主发酵结束后即可过滤、调节、分装进行出售
【答案】A
【解析】
【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品。它涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。具体包括：菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等环节。
【详解】A、在发酵工程中，菌种的性能直接决定了最终产品的质量和产量，故选育菌种是发酵工程的前提条件，A正确；
B、发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种，为防止杂菌污染，培养基和发酵设备都必须经过严格灭菌，B错误；
C、青霉素是由霉菌产生的，而霉菌是需氧菌，其生长和代谢需要氧气。因此，在生产青霉素的过程中，应该保持发酵罐内的空气流通，而不是关闭空气入口，C错误；
D、在啤酒生产过程中，主发酵结束后、发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。因此，主发酵结束后并不能直接过滤、调节、分装出售，D错误。
故选A。
4. 酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（ ）
A. X→Y→ZB. Z→Y→XC. Y→X→ZD. Z→X→Y
【答案】A
【解析】
【分析】由图可知，接种时，相当于在培养基表面划了一个三角形的三条边。左边那条边线是用trpY突变型菌液划线接种的，右边那个边是用trpX突变型菌液接种的，最下面那个边是用trpZ突变型菌液划线接种的。最终结果是，trpY那条接种线左下方出现了又黑又粗的明显的菌落，trpX那条接种线两头出现了明显的菌落，而trpZ那条接种线，没有长出明显的菌落，。
【详解】ABCD、添加少量色氨酸，突变体菌株可以生长，色氨酸合成途径的中间产物积累后可排出胞外，进入培养基后，通过扩散，从而给其他突变型提供代谢原料，帮助其长出明显的菌落。trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体，据图可知，trpX不能为trpY和trpZ提供原料，trpY不能为trpZ提供原料，trpZ可以为trpX、trpY的生长提供原料，推测3种酶在该合成途径中的作用顺序为X→Y→Z。
故选A。
5. 有机物Y（不含N元素）是一种水体污染物。X菌是一种能够降解Y的异养厌氧型微生物。科研人员从污水中筛选出了X菌，主要步骤如图所示，设置甲培养基的目的是获得更多的X菌。下列说法错误的是（ ）

A. 通常采用干热灭菌的方法对培养皿等玻璃器皿进行灭菌
B. 筛选该种微生物时，培养基以有机物Y为唯一碳源
C. 摇瓶M中振荡培养的目的是使X菌与氧气充分接触
D. 从培养基的组分分析，甲、乙培养基的不同在于乙中含有琼脂
【答案】C
【解析】
【分析】实验室常用的灭菌方法：
（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。
（2）干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。
（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。
【详解】A、通常采用湿热灭菌（或高压蒸汽灭菌）的方法对培养基进行灭菌，采用干热灭菌的方法对培养皿等玻璃器皿进行灭菌，A正确；
B、培养基以有机物Y为唯一碳源，这种培养基从功能上划分属于选择培养基，从而筛选能够降解Y的X菌，B正确；
C、X菌是一种异养厌氧型微生物，摇瓶M中震荡培养的目的是使X菌与培养液中营养物质充分接触，C错误；
D、设置甲培养基的目的是富集培养，确保获得更多的X菌，属于液体培养基，乙为固体培养基，因此从培养基的组分分析，甲、乙培养基的不同在于乙中含有琼脂，D正确。
故选C。
6. 乳糖不耐受人群体内缺乏乳糖酶，不能完全消化母乳或牛乳中的乳糖，从而引起腹痛、腹胀、腹泻等肠胃不适。为了去除牛乳中的乳糖，某科研团队从奶酪中分离纯化出了高产乳糖酶的酵母菌，过程如图所示。下列说法正确的是（ ）
注：X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。
A. 对培养基甲采用高压蒸汽灭菌，培养基乙采用干热灭菌
B. 培养基甲进行振荡培养时能更高效增大酵母菌的数量
C. 若培养基乙中菌落数超过300，说明接种菌液的稀释倍数过大
D. 以菌落为中心，透明圈最大的菌落乳糖酶产量最大或酶活性最高
【答案】B
【解析】
【分析】1、分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物；
2、微生物常见的接种的方法：
（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；
（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落；
3、常用的灭菌方法有湿热灭菌（常用高压蒸汽灭菌）、干热灭菌和灼烧灭菌。
【详解】A、培养基甲和培养基乙均采用高压蒸汽灭菌，A错误；
B、酵母菌为兼性厌氧菌，振荡培养时能提高酵母菌与营养物质的接触及培养液中氧气含量，促进酵母菌增殖，B正确；
C、培养基乙中菌落数超过300，说明稀释倍数不够，需进一步稀释，C错误；
D、Xgal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色，所以，以菌落为中心，蓝色圈直径最大的菌落表明乳糖酶含量最大或者活性最高，D错误。
故选B。
7. 庆大霉素（GM）能抑制沙门氏菌的生长。研究人员为了探究LPC（用MRS培养植物乳杆菌后获得的上清液）对沙门氏菌生长的影响及作用机制，在接种沙门氏菌的平板上做了五组不同处理，实验结果如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 在酒精灯火焰旁倒平板后用湿热灭菌法对培养基进行灭菌
B. 需将含沙门氏菌的菌液稀释到适宜浓度后用平板划线法接种
C. MRS和GM均为对照组，分别为阴性对照和阳性对照
D. LPC抑制沙门氏菌的机制可能是因为LPC含有热稳定性高物质
【答案】C
【解析】
【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。
【详解】A、灭菌后倒平板，A错误；
B、实验需在培养基上形成均匀分布的沙门氏菌的菌落，用平板划线法接种无法达到目的，B错误；
C、本MRS和GM均为对照组，分别为阴性对照和阳性对照，C正确；
D、Heat-LPC与LPC组的抑菌圈基本相同，说明加热不影响LPC，进而说明其热稳定性强，但这并不是LPC抑制沙门氏菌的机制，比较LPC与NaOH-LPC组，说明LPC抑制沙门氏菌的机制是因为其含有酸性物质，D错误。
故选C。
8. 某研究小组为培育高产耐盐碱再生植株，利用甲植物细胞（细胞核基因具有耐盐碱效应）和乙植物细胞（细胞质基因具有高产效应）进行体细胞杂交，在原生质体融合前，对原生质体进行处理，分别使甲原生质体和乙原生质体的细胞质和细胞核失活，融合的原生质体分散固定在平板中，独立生长、分裂形成愈伤组织。下列各项中能说明这些愈伤组织只能来自杂种细胞的理由是（ ）
①甲、乙原生质体经处理后失活，无法正常生长、分裂
②同种融合的原生质体因甲或乙原生质体失活而不能生长、分裂
③培养基含有抑制物质，只有杂种细胞才能正常生长、分裂
④杂种细胞由于结构和功能完整可以生长、分裂
A. ①②③B. ①②④C. ①③④D. ②③④
【答案】B
【解析】
【分析】植物体细胞杂交技术：（1）植物体细胞杂交技术：是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。（2）过程：①诱导融合的方法：物理法；化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂；②细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成；③植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；④杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。（3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。
【详解】① 未融合的原生质体因为细胞质或细胞核的失活，无法正常生长、分裂，因此甲、乙原生质体经处理后失活，无法正常生长、分裂能说明这些愈伤组织只能来自杂种细胞，①正确；
②同种融合的原生质体也因为甲原生质体细胞质或乙原生质体细胞核失活而不能生长、分裂，因此同种融合的原生质体因甲或乙原生质体失活而不能生长、分裂能说明这些愈伤组织只能来自杂种细胞，②正确；
③培养基不含有抑制物质，③错误；
④只有杂种细胞才具备有活性的细胞质和细胞核，具备有完整的结构和功能，可以生长、分裂，因此杂种细胞由于结构和功能完整可以生长、分裂能说明这些愈伤组织只能来自杂种细胞，④正确。
综上所述，①②④正确。
故选B。
9. 生物碱为铁皮石斛的次级代谢产物。下图是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎(简称PLBs, 类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程。下列说法正确的是（ ）
A. 生物碱是铁皮石斛生长所必需的物质
B. 图中过程①为脱分化形成PLBs, 过程②为再分化生产生物碱
C. 培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量值大的PLBs
D. 该过程运用了植物细胞培养技术，原理是植物细胞增殖
【答案】D
【解析】
【分析】在一定的激素和营养等条件的诱导下，外植体可脱分化形成愈伤组织。在脱分化过程中，植物细胞的分化程度逐渐降低，全能性逐渐升高。脱分化形成的愈伤组织由一些排列疏松而无规则，高度液泡化、呈无定形状态的薄壁细胞组成。
【详解】A、生物碱是铁皮石斛的次生代谢物，不是细胞进行正常生命活动必需的物质，A错误；
B、题意显示PLBs类似愈伤组织，因此，图中过程①为脱分化形成PLBs，过程②为植物细胞培养过程，不属于再分化，B错误；
C、该实验目的是要生产生物碱，故需要选择生物碱产量/细胞数量的值大的PLBs作为高产细胞系，C错误；
D、该过程中的PLBs类似愈伤组织，运用了植物细胞培养技术，过程②为植物细胞培养过程，原理是植物细胞增殖，D正确。
故选D。
10. 二倍体菊花M（染色体数为18）是一种观赏植物，但容易遭受到甲、乙病毒侵害。研究者先分别获得抗甲转基因菊花植株、抗乙转基因菊花植株，再将二者进行体细胞杂交，培育出同时抗甲、乙的植物新品种N。杂交细胞在培养过程中可能会发生染色体丢失的现象，只有含有M细胞中完整18条染色体且自交后代不发生性状分离的个体才符合育种目标。下列对培育新品种N过程的叙述，错误的是（ ）
A. 可以通过接种病原体对植物N进行抗虫性鉴定
B. 培育、、N的过程中都需要使用固体培养基
C. 调整培养基中植物激素比例是培育新品种N的重要环节
D. 如果符合要求的植株N的体细胞中有30条染色体，其中至少有12条来自
【答案】A
【解析】
【分析】细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种生物的潜能，即细胞具有全能性。
植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的潜能。
【详解】A、可以通过接种病原体对植物N进行抗病性鉴定，而非抗虫性鉴定，A错误；
B、培育M1、M2、N的过程中需要利用固体培养基进行植物组织培养，B正确；
C、培养基中植物激素比例不同对愈伤组织再分化方向会产生影响，诱导发芽、诱导生根的培养基中植物激素比例不同，C正确；
D、只有含有M细胞中完整18条染色体且自交后代不发生性状分离的个体符合育种目标，那么符合要求的植株N的30条染色体中，最多有18条来自M2，即至少有12条来自M1，D正确。
故选A。
11. CLDN6 蛋白是一种跨膜蛋白，包括胞外区、跨膜区和胞内区，在正常组织细胞中低表达，而在多种癌细胞中特异性高表达，研究者选定其制备用于诊断癌症的单克隆抗体。下列说法错误的是（ ）
A. 可提取CLDN6 蛋白胞外区基因序列用于制备免疫小鼠所用的抗原
B. 单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异并与之特异性结合，且可大量制备
C. 灭活病毒表面的糖蛋白等能与细胞膜上的脂质分子作用，诱导细胞融合
D. 悬浮培养的杂交瘤细胞传代培养时，可用离心法直接收集
【答案】C
【解析】
【分析】单克隆抗体制备的基本步骤：对小鼠进行免疫→提取B淋巴细胞→将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合→通过筛选、克隆化培养和扩大化培养→最终注入小鼠体内或在体外培养→从腹腔腹水中或培养液中提取单克隆抗体。
【详解】A、CLDN6蛋白是一个跨膜蛋白，包括胞外区、跨膜区和胞内区，制备免疫小鼠所用抗原时，应提取胞外区基因序列用于设计抗原，因为抗体需要首先与胞外的区域进行特异性结合，并找到相应的靶细胞，A正确；
B、单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原 发生特异性结合，并且可以大量制备，B正确；
C、灭活 病毒诱导细胞融合的原理是：病 毒表面含有的糖蛋白和一些酶能 够与细胞膜上的糖蛋白发生作用， 使细胞互相凝聚，细胞膜上的 蛋白质分子和脂质分子重新排布， 细胞膜打开，细胞发生融合，C错误；
D、杂交瘤细胞没有接触抑制现象，悬浮培养的杂交瘤细胞传代培养时，可用离心法直接收集，D正确。
故选C。
12. 图示多克隆抗体的制备流程。下列有关多克隆抗体与单克隆抗体的比较，错误的是（ ）
A. 多克隆抗体是从动物血清中获得的抗体混合物，单抗只有一种抗体
B. 多克隆抗体可以识别同一抗原的不同结合位点，单抗只识别抗原的一个结合位点
C. 多克隆抗体的获得无需筛选，单抗制备的过程中至少经历两次筛选
D. 与单抗药物制备相比，制备多克隆抗体药物的生产周期短，生产成本低
【答案】C
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备：
（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞；
（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体；
（3）克隆化培养和抗体检测；
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【详解】AB、多克隆抗体是通过向动物体内注射特定抗原，然后从动物血清中收集得到的抗体混合物，其中包含多种针对该抗原不同结合位点的抗体；而单克隆抗体是由单个B淋巴细胞克隆形成的细胞群所产生的，只作用于某一特定抗原的一个结合位点，只有一种抗体，A、B均正确；
C、多克隆抗体的获得是直接从注射特定抗原后的动物血清中收集纯化得到，需要特定抗原筛选；单克隆抗体的制备过程中至少经历了两次筛选，一次是筛选出杂交瘤细胞，另一次是筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，C错误；
D、多克隆抗体药物的制备相对简单，生产周期短，生产成本低；而单克隆抗体药物的制备过程复杂，生产周期长，成本高，D正确。
故选C。
13. 三维细胞培养技术（3D细胞培养）是通过人工模拟细胞间质微环境，允许动物细胞在三维空间中生长和相互作用的技术。与传统的细胞培养相比，3D细胞培养更接近体内细胞的实际生长环境。下列说法正确的是（ ）
A. 传统细胞培养时，细胞并不都需要贴附于某些基质表面才能生长增殖
B. 用胰蛋白酶处理传统培养的贴壁细胞，断裂其胞间连丝使之游离便于传代
C. 3D细胞培养前需要对动物组织进行灭菌处理，培养时需定期更换培养液
D. 利用3D细胞培养技术研究干细胞分化过程时，通常需要进行分瓶处理
【答案】A
【解析】
【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。）
【详解】A、传统细胞培养时，体外培养的动物细胞可分为两大类：一类细胞能够 悬浮在培养液中生长增殖，另一类细胞需要贴附于某些基质表面生 长增殖，大多数细胞需要贴附于某些基质表面才能 生长增殖，A正确；
B、胞间连丝是植物细胞间的结构，动物细胞不存在胞间连丝，B错误；
C、细胞培养过程需要营造无菌无毒的环境，包括定期更换培养液等，但不能对动物组织进行灭菌处理，C错误；
D、分瓶处理通常是指在传统细胞培养中，当细胞密度过高时，将细胞分散到多个培养瓶中继续培养，而在3D细胞培养中，细胞是在三维结构中生长，而不是在单层贴壁生长，因此通常不需要进行分瓶处理，D错误。
故选A。
14. 秦川牛是中国优良的黄牛地方品种，其体格大、役力强、产肉性能良好，因产于八百里秦川的陕西省关中地区而得名。如图表示研究人员利用胚胎工程培育秦川奶牛的过程。下列相关叙述错误的是（ ）

A. ①为体外受精，该过程中卵细胞的呼吸速率和物质合成速率均变快
B. ②为体外胚胎培养，培养液和培养用具均需灭菌，并需定期更换培养液
C. ③→④中若要进行胚胎性别鉴定，需选择内细胞团细胞进行DNA分析
D. ⑤为胚胎移植，需将胚胎移植到同种的、生理状态与供体相同的其他雌牛体内
【答案】C
【解析】
【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，分析题图，①是体外受精过程，②是早期胚胎培养，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢复，⑤是胚胎移植。
【详解】A、①为体外受精，受精过程使卵细胞变得十分活跃，因此卵细胞的细胞呼吸和物质合成速率变快，A正确；
B、②为体外胚胎培养，培养液和培养用具均需灭菌，并需定期更换培养液，B正确；
C、③→④中若要进行胚胎性别鉴定，需选择滋养层细胞进行DNA分析，C错误；
D、⑤为胚胎移植，需将胚胎移植到同种的、生理状态与供体相同的其他雌性牛体内，D正确。
故选C。
15. 近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（ ）
A. 胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
B. A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精
C. D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理
D. E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎移植的基本程序：①对供、受体的选择和处理（用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
【详解】A、胚胎工程一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵，A错误；
B、A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才具有受精能力，C的精子获能后才能发生受精，B正确；
C、D受体雌性接受来自动物园亚洲黑熊♀A体内的胚胎，所以必须和动物园亚洲黑熊♀A同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率，而野生亚洲黑熊♀B只需要提供体细胞，所以不需要同期发情处理，C错误；
D、E后代遗传物质来源于A和C，但遗传性状与A或C不一定一致，F后代遗传物质状主要来源于B，遗传性状与B基本一致，D错误。
故选B。
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16. 为了筛选出能高效降解石油的细菌，某研究人员利用石油污染滩涂土壤进行了如下图所示的操作(①~⑤表示不同的菌落)。下列说法正确的是（ ）
A. 图中液体富集培养基和液体选择培养基的成分不同，后者以石油为唯一碳源
B. 甲过程采用的是稀释涂布平板法，该方法用于计数时往往使结果偏大
C. 菌落①可能是自养细菌，因不能分解石油而无降解圈产生
D. 乙过程选择菌落⑤接种到石油培养基，可根据石油剩余量进行降解能力评估
【答案】ACD
【解析】
【分析】稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。
【详解】A、液体富集培养基通常含有多种碳源、氮源、无机盐以及水等营养物质，旨在提供丰富的营养环境，促进目标微生物的快速增殖。‌主要用于增加目标微生物的数量，为后续的分离纯化等操作提供足够的菌体量；液体选择培养基‌是以‌石油‌为‌唯一碳源‌，同时包含必要的氮源、无机盐和水等，通过限制碳源的种类，只允许能够利用石油作为碳源的微生物生长，从而筛选出具有特定代谢能力的菌株，A正确；
B、甲过程采用的是稀释涂布平板法，但这种方法在用于计数时，由于可能存在两个或多个细菌聚在一起形成一个菌落的情况，往往会导致结果偏小，B错误；
C、①处菌落的周围没有降解圈，可能该微生物不能分解石油而是利用空气中的二氧化碳作为碳源，是自养型的细菌，C正确；
D、乙过程选择菌落⑤接种到石油培养基上，通过观察石油的剩余量来评估该菌落的降解能力。如果石油剩余量较少，说明该菌落的降解能力较强；反之，则降解能力较弱，D正确。
故选ACD。
17. 多种发酵食品中含有生物胺（低分子量含氮有机化合物），人体摄入过量生物胺会引起不良反应。某些微生物可产生多铜氧化酶（MCO）降解生物胺，但降解过程中会产生过氧化氢，可能会导致MCO氧化损伤，进而使其降解生物胺的效率下降。科研人员筛选产生MCO的微生物，并用于食品发酵。下列说法正确的是（ ）
A. 筛选产生MCO微生物的培养基中应加入生物胺作为唯一氮源，该培养基中生长的微生物都具有降解生物胺的能力
B. 发酵食品生产时为了维持MCO的活性，可能需要向发酵罐中加入适量的过氧化氢酶
C. 将MCO加入发酵罐，并进行加热处理，既可以减少过氧化氢对MCO的损伤，又一定能得到生物胺含量较低的发酵食品
D. 将控制过氧化氢酶与MCO合成的基因采用转基因技术转入大肠杆菌中，可能得到能同时产生两种酶的工程菌
【答案】BD
【解析】
【分析】基因工程的操作步骤：（1）目的基因的获取；方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞；根据受体细胞不同，导入的方法也不一样；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测；个体水平上的鉴定。
【详解】A、该培养基中生长的微生物不一定都具有降解生物胺的能力，如生物胺分解后可能被某些微生物利用，该类微生物不能分解生物胺，A错误；
B、加入过氧化氢酶可降低过氧化氢含量，降低MCO氧化损伤，B正确；
C、加热处理可能使MCO空间结构改变从而失去作用，C错误；
D、通过构建同时含有过氧化氢酶基因和重组MCO基因的表达载体导入受体细胞后，有可能得到能同时产生两种酶的工程菌，D正确。
故选BD。
18. 透明质酸（HA）又称玻尿酸，是一种可在外科整形手术中充当皮下填充物的多糖类物质，微生物发酵法是大规模生产HA的主要方法。实验室扩大培养微生物时，常需要将装有培养液的锥形瓶置于摇床上振荡培养。为提高HA的产量，科研人员以HA高产菌株ZV1为研究对象，分别探究了发酵过程中摇床转速（图1）、锥形瓶装液量（图2）等条件对瓶中HA总产量和ZV1菌体含量（通过离心收集培养液中的所有菌体来测定）的影响。下列说法正确的是（ ）

A. HA可能存在于某些微生物的荚膜中
B. 装液量在60mL至120mL之间时，ZV1菌体含量和HA产量的变化趋势相同
C. 摇床转速和装液量都会对培养液中的氧气含量造成影响
D. 采用150r/min的摇床转速和120mL的装液量是提高HA产量的有效措施
【答案】ACD
【解析】
【分析】题意分析，本实验的目的是探究发酵过程中摇床转速、锥形瓶装液量等条件对瓶中HA总产量和ZV1菌体含量的影响，结合实验结果可知，在调查范围内摇床转速与菌体含量呈正相关，但对HA含量表现在转速为150（r/min)有最大值，锥形瓶装载量过高会导致菌体含量下降，但HA的含量在调查范围内表现为上升稳定。
【详解】A、HA是一种多糖，荚膜中又含有多糖，因此HA可能参与构成了某些微生物的荚膜，A正确；
B、图2显示，装液量在60～120mL范围内，HA总产量持续上升，而菌体含量先上升后下降，二者趋势不同，B错误；
C、过多的装液量会导致培养液与空气接触面积过小，不利于氧气充分溶解，造成培养液中氧气不足，加快摇床转数显然可以加快氧气溶解。二者都影响培养液中的氧气含量，C正确；
D、结合实验结果可知，图1中150r/min的转速下HA总产量最高，图2中装液量为120mL时HA总产量最高，D正确。
故选ACD。
19. 我国科学家经过多年努力，攻克了克隆非人灵长类动物这一世界性难题，成功培育出体细胞克隆猴。培育克隆猴的大致流程如下图。下列叙述正确的是（ ）
A. 从卵巢中采集的甲猴卵母细胞需体外培养至MⅡ中期
B. 过程①通过显微操作去除的核实际上是“纺锤体—染色体复合物”
C. 过程②得到的重构胚需Ca2+载体等激活，以完成细胞分裂和发育进程
D. 为获得更多的克隆猴，可在过程③前对桑葚胚的内细胞团进行均等分割
【答案】ABC
【解析】
【分析】据图分析，①为卵母细胞去核获得细胞质过程；②为核移植获得重构胚的过程；③为胚胎移植过程。
【详解】A、核移植的受体细胞一般需要将卵母细胞体外培养至MⅡ中期，A正确；
B、过程①通过显微操作去除的核实际上是“纺锤体—染色体复合物”，而不是真正的细胞核，B正确；
C、核移植获得的重构胚需Ca2+载体等激活，以完成细胞分裂和发育进程，C正确；
D、为获得更多的克隆猴，可在过程③前对囊胚的内细胞团进行均等分割，D错误。
故选ABC。
20. 单倍体亚麻是重要的纤维作物。二倍体罗布麻具有很强的耐干旱、高温等能力，也是优质纤维植物。研究人员将亚麻和罗布麻通过植物体细胞杂交技术，培育出具有双亲优势的麻类新种质，主要培育流程如图所示（只考虑细胞两两融合）。下列叙述错误的是（ ）
A. 过程①得到的原生质体A、B需置于等渗溶液以维持活性
B. 过程②中原生质体A、B融合完成的标志是再生出细胞壁
C. 过程③④为植物组织培养，正常情况下得到的E为异源四倍体
D. 上述植物体细胞杂交技术打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种
【答案】C
【解析】
【分析】人工诱导原生质体融合的方法基本可以分为两大类——物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等。植物细胞去除细胞壁常采用纤维素酶和果胶酶处理。植物体细胞杂交技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍、在培育作物新品种方面取得重大突破。
【详解】A、据图可知，过程①要去掉细胞壁，获得原生质体。原生质体失去细胞壁的保护，在低渗溶液中易吸水涨破，在高渗溶液中会失水影响细胞活性。因此，过程①得到的原生质体A、B需置于等渗溶液以维持活性，A正确；
B、据图可知，过程②为原生质体融合过程，该过程完成的标志是再生出细胞壁，B正确；
C、依题意，亚麻是单倍体，罗布麻是二倍体，若只考虑细胞两两融合，两种植物的细胞融合而成的杂种细胞含有的染色体组数无法确定，故无法确定正常情况下得到的E属于几倍体生物，C错误；
D、植物体细胞杂交技术克服了不同生物远缘杂交的障碍，打破了不同物种间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种，D正确。
故选C。
三、非选择题：本题共4小题，共55分。
21. 黄原胶是由野油菜黄单胞杆菌（好氧菌）以碳水化合物为主要原料，经发酵工程生产的一种作用广泛的微生物胞外多糖。黄原胶作为增调剂、悬浮剂、乳化剂、稳定剂，可广泛应用于食品、石油、医药等20多个行业，是目前世界上生产规模较大且用途极为广泛的微生物多糖。
（1）培养黄原胶的培养基中含有的营养物质有_______等，用______方法对培养基灭菌。
（2）实验室内测定野油菜黄单胞杆菌数量的方法有显微镜计数法和______后者统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少，原因是______________。
（3）黄原胶属于______代谢物，生产黄原胶的发酵罐内的pH需调至_________，并通入无菌空气。
（4）用发酵工程工业化生产黄原胶时，若要获得黄原胶可根据其性质采取适当________措施来获得产品。
【答案】（1） ①. 水、碳源、氮源和无机盐 ②. 湿热灭菌（或高压蒸汽灭菌)
（2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（3） ①. 次生 ②. 中性或弱碱性
（4）提取、分离和纯化
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐，故培养黄原胶的培养基中含有的营养物质有水、碳源、氮源和无机盐等；对培养基进行灭菌的方法是湿热灭菌（或高压蒸汽灭菌）。
【小问2详解】
实验室内测定野油菜黄单胞杆菌数量的方法有显微镜计数法和稀释涂布平板法；用稀释涂布平板法计数时，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少。
【小问3详解】
黄原胶不是植物生长必须的，属于次生代谢物；生产黄原胶的微生物是细菌，生产黄原胶的发酵罐内的pH需调至中性或弱碱性。
【小问4详解】
用发酵工程工业化生产黄原胶时，若要获得黄原胶可根据其性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
22. 研究发现，异种植物细胞融合时受体细胞会排出结构完整的供体细胞染色体。若在融合前用大剂量的X射线使供体细胞染色体发生断裂、易位、染色体消除等破坏后，与一个正常受体细胞原生质体融合，可得到含全部受体遗传物质及部分供体遗传物质植株。该技术称为不对称植物体细胞杂交技术。下图为利用不对称植物体细胞杂交技术培育抗青枯病马铃薯植株的过程示意图。

（1）过程①通常用______试剂对外植体进行消毒，然后用含有___________的培养液来处理细胞即可获得原生质体。
（2）过程②常用_______试剂对原生质体进行诱导融合，且该过程需要在培养液中加入一定量的渗透压缓冲物质，目的是_______。
（3）过程③选择________的细胞进行培养，形成的愈伤组织更容易获得抗青枯病的马铃薯植株。
（4）对过程④获得的15株抗病马铃薯植株检测，发现所有植株细胞内染色体数目与普通马铃薯一致，但有部分植株随机获得了供体茄子的其他性状，据此推测产生此现象的原因可能是_____。
【答案】（1） ①. 70%酒精和5%左右的次氯酸钠 ②. 纤维素酶和果胶酶
（2） ①. 聚乙二醇（PEG） ②. 维持培养液适宜的渗透压，防止原生质体因吸水涨破或失水皱缩而死亡
（3）呈绿色且能发出荧光
（4）大剂量X射线处理后的茄子叶肉细胞染色体随机断裂、易位后，携带有抗青枯病基因和部分茄子其他性状基因的染色体片段整合到马铃薯染色体中并成功表达
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。
2、植物细胞具有细胞壁，会妨碍植物细胞融合，需经纤维素酶和果胶酶处理后获得原生质体。再经诱导获得融合细胞，融合细胞通过脱分化和再分化过程最终获得再生植株。
【小问1详解】
植物细胞工程中，常用70%酒精和5%左右的次氯酸钠对外植体进行消毒，既达到消毒目的，又不破坏细胞活性；植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，酶具有专一性，利用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，能去除细胞壁，获得原生质体。
【小问2详解】
植物体细胞杂交技术中，常用聚乙二醇（PEG）对原生质体进行诱导融合；原生质体没有细胞壁的支持保护，若处于低渗溶液中，可能会使原生质体吸水涨破，因此该过程需要在培养液中加入一定量的渗透压缓冲物质，目的是维持培养液适宜的渗透压，防止原生质体因吸水涨破或失水皱缩而死亡。
【小问3详解】
进一步培养的应为抗青枯病茄子的叶肉细胞和马铃薯跟细胞融合形成的杂种细胞，叶肉细胞中含有叶绿体呈绿色，马铃薯跟细胞中因加入FAD而发出荧光，因此二者融合后的杂种细胞应既具有呈绿色又能发出荧光的特点，可具体特点进行筛选。
【小问4详解】
获得抗病植株的植物体细胞杂交过程中，用大剂量X射线对茄子叶肉细胞进行处理，可能导致处理后的茄子叶肉细胞染色体随机断裂、易位后，携带有抗青枯病基因和部分茄子其他性状基因的染色体片段整合到马铃薯染色体中并成功表达，因而出现所有植株细胞内染色体数目与普通马铃薯一致，但有部分植株随机获得了供体茄子的其他性状的现象。
23. CD47是一种免疫抑制蛋白，肿瘤细胞通过过量表达CD47抑制巨噬细胞的吞噬作用以实现免疫逃逸。抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，其制备流程如下图甲所示。

（1）制备过程中需要用CD47对小鼠进行多次处理，目的是______。为保证细胞培养环境无菌、无毒，需要进行的相关操作是______。
（2）下图乙表示核苷酸合成的两条途径，物质A可以阻断全合成途径，转化酶和激酶是补救合成途径所必需的两种酶。正常细胞中含有转化酶和激酶，骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。已知图甲的筛选1利用的是加入了H、A、T三种物质的“HAT培养基”，其筛选得到是______细胞，该细胞能在HAT培养基中存活并增殖的原因是______；经筛选2获得的细胞的特点是______。
（3）为验证抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，研究人员设计如下实验，实验组：将抗CD47的单克隆抗体加入巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养系中，检测巨噬细胞的吞噬指数（与被吞噬肿瘤细胞的比例呈正相关）；对照组为______，预期实验结果：______。
【答案】（1） ①. 获得较多的已免疫（对CD47产生免疫）的B淋巴细胞 ②. 对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；保证在无菌环境下进行操作；定期更换培养液
（2） ①. 杂交瘤 ②. HAT培养基中的物质A阻断了全合成途径，杂交瘤细胞含有从B细胞获得的转化酶和激酶，可以通过补救合成途径来合成核苷酸，同时又具备骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，因此能在HAT培养基中存活和增殖 ③. 既能大量增殖又能产生抗CD47的抗体
（3） ①. 不加单克隆抗体的巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养系 ②. 对照组巨噬细胞的吞噬指数显著低于实验组
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
用CD47（抗原）对小鼠进行多次处理，可以获得较多的已免疫（对CD47产生免疫）的B淋巴细胞；对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；保证在无菌环境下进行操作；定期更换培养液，可以保证细胞培养环境无菌、无毒。
【小问2详解】
在HAT培养基上能生长的为杂交瘤细胞；HAT培养基中的物质A阻断了全合成途径，杂交瘤细胞含有从B细胞获得的转化酶和激酶，可以通过补救合成途径来合成核苷酸，同时又具备骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，因此能在HAT培养基中存活和增殖；筛选2是为了得到既能大量增殖又能产生抗CD47的抗体的细胞。
【小问3详解】
为验证抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，实验组为将抗CD47的单克隆抗体加入巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养系中，对照组为不加单克隆抗体的巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养系；由于抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，因此对照组巨噬细胞的吞噬指数显著低于实验组。
24. 图1是我国科学家利用胚胎干细胞建立体外胚胎和胚胎发育潜能研究的流程。人胚胎干细胞存在两种不同状态，即原始态（naive）和始发态（primed）。naive 干细胞具有最高的发育潜能，primed干细胞全能性相对较低。图2是OGT、OGA以及细胞骨架蛋白在胚胎于细胞中表达情况的电泳图谱，OGT是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将糖基从蛋白质上去除的酶。
（1）猴子芽体相当于_______期的胚胎，过程③的起点细胞应取自芽体的________部位。
（2）过程④⑤形成的胚胎是______，由该胚胎表面细胞向内迁移形成________。过程⑥需对受体母猴进行的处理是________________。
（3）据图2推测，naive干细胞发育潜能更高的原因可能是______________；该实验设置细胞骨架蛋白表达量组别作为对照的作用是______________。
（4）过程①需在图2中的诱导培养基中完成，目的是_________。
【答案】（1） ①. 囊胚 ②. 内细胞团
（2） ①. 原肠胚 ②. 内胚层 ③. 同期发情处理
（3） ①. 细胞中蛋白质糖基化程度低 ②. 排除细胞本身蛋白表达受阻的情况（或保证细胞都具有正常表达蛋白质的功能)
（4）primed干细胞中表达更多的OGA,从而转化为naive干细胞
【解析】
【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
【小问1详解】
从图1流程来看，猴子芽体后续能进一步发育形成胚胎，在胚胎发育过程中，囊胚期的胚胎开始出现细胞分化，具有内细胞团等结构，可进一步发育成个体，所以猴子芽体相当于囊胚期的胚胎。囊胚期的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，所以过程③的起点细胞应取自芽体的内细胞团部位。
【小问2详解】
过程④⑤是从囊胚进一步发育，形成的胚胎是原肠胚，原肠胚发育过程中，由该胚胎表面细胞向内迁移形成内胚层。过程⑥是胚胎移植，需对受体母猴进行同期发情处理，使供受体生殖器官的生理变化相同，为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境。
【小问3详解】
据题干信息和图2分析可知，naive干细胞中OGT相对含量高，OGA相对含量低，OGT是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将糖基从蛋白质上去除的酶，naive干细胞发育潜能更高的原因可能是naive干细胞中的蛋白质糖基化程度低。该实验设置细胞骨架蛋白表达量组别作为对照，是因为其表达量相对稳定，不受实验处理的影响，可以作为内参基因用于校正其他蛋白的表达水平，排除细胞本身蛋白表达受阻的情况（或保证细胞都具有正常表达蛋白质的功能）。
【小问4详解】
过程①是将primed干细胞诱导形成naive干细胞，需在图2中的诱导培养基中完成，目的是primed干细胞中表达更多的OGA，从而转化为naive干细胞。