四川省成都市成华区某校2024-2025学年高二下学期3月月考生物（解析版）

这是一份四川省成都市成华区某校2024-2025学年高二下学期3月月考生物（解析版），共43页。试卷主要包含了5分， 紫杉醇是一种高效抗癌的药物， 抗体-药物偶联物， 人乳头瘤病毒等内容，欢迎下载使用。
（注意：1-40题单选，每题1.5分。41-44题主观，每空1分）
一、选择题
1. 微生物培养最基本的要求是无菌操作，下列对培养基、培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法的正确顺序依次是（ ）
①化学药物消毒②高压蒸汽灭菌③干热灭菌④ 紫外线消毒⑤ 灼烧灭菌⑥ 巴氏消毒法
A. ⑤③⑤①④⑥B. ③②⑤④①⑥
C. ②③⑤①④⑥D. ②②⑤④①⑥
【答案】C
【分析】消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。消毒方法包括煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法；常用的灭菌方法包括干热灭菌法、灼烧灭菌法、湿热灭菌法（如高压蒸汽灭菌法）。
【详解】为了保持培养基中的水分不被烘干，常采用②高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌；培养皿等需要保持干燥的玻璃器皿可以采用③干热灭菌进行灭菌；接种过程中需要对接种环进行⑤灼烧灭菌；操作者双手可用酒精等化学药剂进行消毒，即①化学消毒法；为了杀死空气中微生物，常采用④紫外线消毒法；为防止牛奶中营养成分被破坏，常采用 ⑥巴氏消毒法处理牛奶，综上所述，对培养基、培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法的正确顺序依次是②③⑤①④⑥，ABD错误，C正确。
故选C。
2. “五一”期间，蚌埠市旅游业火爆，众多美食赢得了消费者的高度赞扬，油炸臭豆腐是我市众多风味小吃的一种，制作时需要将豆腐浸入含有乳酸菌、芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵。下列相关说法，错误的是（ ）
A. 乳酸菌和芽孢杆菌均属于原核生物
B. 卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌存在竞争关系
C. 经煮沸灭菌的卤汁需冷却后才能浸入豆腐
D. 乳酸菌在无氧条件下发酵产生了乳酸
【答案】C
【分析】腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型，适宜温度为15℃～18℃；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。
【详解】A、乳酸菌和芽孢杆菌均属于原核生物，两者均无以核膜为界限的细胞核，A正确；
B、乳酸菌和芽孢杆菌生活在同一环境下会竞争营养物质和空间等，故卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌存在竞争关系，B正确；
C、煮沸灭菌会杀灭菌种，导致发酵失败，C错误；
D、乳酸菌无氧呼吸的产物是乳酸，D正确。
故选C。
3. 下列关于传统发酵技术的叙述, 错误的是（ ）
A. 家庭自制酸奶、自酿米酒等过程通常都不是纯种发酵
B. 酿制米酒时, 将糯米蒸熟后立即加入酒曲, 有利于防止杂菌污染
C. 用白萝卜制作泡菜时, 添加已经腌制过的泡菜汁可缩短腌制时间
D. 自制腐乳时, 多种微生物参与了发酵过程, 其中毛霉起主要作用
【答案】B
【分析】一、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气，在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵。
二、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。
三、腐乳制作的菌种主要是毛霉，代谢类型是异养需氧型。毛霉生长的最佳温度是15～18℃，保持一定湿度。
【详解】A、家庭自制酸奶、自酿米酒等过程都没有进行严格的灭菌，因此通常都不是纯种发酵，A正确；
B、酿制米酒时，将糯米蒸熟冷却后再加入酒曲，这样不但有利于防止杂菌污染，还能避免高温杀死菌种，B错误；
C、泡菜汁中含有一定量的乳酸菌菌种，在腌制过程中，加入一些已经腌制过的泡菜汁可增加乳酸菌的含量，从而缩短腌制时间，C正确；
D、自制腐乳时，多种微生物参与了发酵过程，其中毛霉起主要作用，D正确。
故选B。
4. 在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行。下图甲是醋酸发酵装置，乙是培养液pH变化曲线图，下列叙述正确的是（ ）
A. 发酵初期不通气，溶液中没有气泡产生
B. 中期可以闻到酒香，说明进行了酒精发酵
C. 后期接种醋酸菌，适当通气并保持原有温度
D. 图乙中能正确表示pH变化的曲线是③
【答案】B
【分析】一、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
二、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、若发酵初期不通入气体，由于锥形瓶中含有少量空气，溶液中酵母菌也可通过有氧呼吸产生二氧化碳，即使没有空气，酵母菌也能通过无氧呼吸产生二氧化碳，因此有气泡产生，A错误；
B、中期可以闻到酒香，说明有酒精产生，即进行了酒精发酵，B正确；
C、由于醋酸菌是嗜氧菌，也是嗜温菌，因此后期接种醋酸菌，需通气并适当升高温度，C错误；
D、醋酸发酵过程中，发酵液的pH会进一步降低，因此图乙中能正确表示pH变化的曲线是②，D错误。
故选B。
5. 如图是摇瓶培养中酵母菌种群变化曲线。下列相关叙述正确的是（ ）

A. 培养初期，酵母菌因种内竞争强而生长缓慢
B. 转速150 r/min时，预测种群增长曲线呈“S”型
C. 该实验中酵母菌计数应采用稀释涂布平板法
D. 若增大接种量，其他条件不变，则酵母菌的K值会升高
【答案】B
【分析】分析题图：随着转速的增加，酵母菌种群密度升高。在一定范围内，酵母菌的种群数量都随培养时间而逐渐升高。
【详解】A、培养初期，酵母菌数量少，种内竞争弱，由于起始数量少，生长缓慢，A错误；
B、由于培养液中营养物质有限，转速150r/min时，可预测种群数量增大到一定程度后保持相对稳定，呈“S”型增长，B正确；
C、培养液中酵母菌的计数应采取血细胞计数法，C错误；
D、K值即环境容纳量，是一定条件下种群所能维持的最大数量，若增大接种量，其他条件不变，则酵母菌的K值不变，D错误。
故选B。
6. 人类利用微生物发酵制作食品已经有几千年的历史，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 酵母菌、毛霉、曲霉等多种微生物参与了腐乳的制作
B. 家庭制作果醋时，发酵液表面产生的菌膜由乳酸菌形成
C. 家庭制作酸奶时，加入少量抗生素可以避免杂菌污染
D. 制作果酒过程中，定时拧松瓶盖为酵母菌发酵提供O2
【答案】A
【分析】一、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
二、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
三、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
四、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，A正确；
B、家庭制作果醋时，发酵液表面产生的菌膜由醋酸菌在液面大量繁殖形成的，B错误；
C、乳酸菌（细菌）对抗生素敏感，所以家庭制作酸奶时，不能加入抗生素，C错误；
D、制作果酒过程中，定时拧松瓶盖是为了排出CO2，D错误。
故选A。
7. 营养缺陷型菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种生长因子的能力，只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿的培养基上，一段时间后将甲培养皿的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养皿的培养基中，进一步培养得到如下图所示结果。下列分析正确的是（ ）
A. 接种到甲培养皿采用的是平板划线法
B. 甲、丙两培养皿中的培养基是基本培养基
C. 甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少
D. 甲、乙、丙三个培养皿都可能存在营养缺陷型菌落
【答案】C
【分析】微生物常见的接种的方法：
（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种、划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、由甲平板观察可知，平板中菌落分布均匀，采用的是稀释涂布平板法，A错误；
B、由题图信息分析可知，甲、丙培养基菌落数目多，含有野生型酵母菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，而乙培养皿菌株是某种营养缺陷型酵母菌菌株，据此推测，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和丙是补充了相应的生长因子的基本培养基，B错误；
C、由于基因突变具有不定向性，因此接种到甲培养皿的酵母菌可能还有其他营养缺陷型，且有些菌落不一定由一个酵母菌形成，故甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少，C正确；
D、由题图分析可知，乙培养皿的培养基是基本培养基，故起乙培养皿中能够形成的菌落是野生型菌株，其中不存在营养缺陷型菌落，D错误。
故选C。
8. 紫杉醇是一种高效抗癌的药物。国内某团队研究光照条件对红豆杉愈伤组织生长和紫杉醇含量的影响，实验结果如下表：
下列叙述正确的是（ ）
A. 愈伤组织生长的原理是植物细胞具有全能性
B. 愈伤组织培养过程要在无菌条件下进行
C. 光照能促进愈伤组织的生长并提高紫杉醇含量
D. 培养基中的有机物仅能为愈伤组织提供能量
【答案】B
【分析】根据题干信息和表格信息分析，该实验研究光照条件对红豆杉愈伤组织生长和紫杉醇含量的影响，自变量是光照的有无，因变量是愈伤组织生长和紫杉醇含量，表格数据显示：黑暗条件下，愈伤组织干重增加较多，紫杉醇含量较高。
【详解】A、植物组织培养过程中，愈伤组织主要进行细胞生长和分裂，不能体现植物细胞的全能性，A错误；
B、愈伤组织培养过程要在无菌条件下进行，以避免微生物的污染，B正确；
C、由表格可知，两组接种干重相似，但光照条件下收获的愈伤组织干重和紫杉醇含量均低于黑暗条件，C错误；
D、植物组织培养过程中，有机物可以为植物细胞提供必需的营养物质和能量，此外还可以调节渗透压，D错误。
故选B。
9. 抗体-药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列表述正确的是（ ）
A. ADC可通过主动运输进入肿瘤细胞
B. 抗体进入细胞后激活溶酶体酶，导致细胞凋亡
C. 单克隆抗体携带细胞毒素与肿瘤细胞特异性结合
D. 肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，所以不会产生新蛋白质
【答案】C
【分析】识图分析可知，图中抗体-药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，利用抗体与抗原的特异性结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。图中ADC的作用机制为：携带药物的抗体与肿瘤细胞膜上的特异性受体结合，然后通过胞吞作用进入到细胞内，抗体被细胞内的溶酶体裂解，释放出药物作用于肿瘤细胞，使肿瘤细胞凋亡。
【详解】A.根据以上分析可知，ADC可通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，A错误；
B.识图分析可知，抗体进入细胞后被溶酶体裂解，释放的药物导致细胞凋亡，B错误；
C.根据以上分析可知，单克隆抗体携带细胞毒素与肿瘤细胞膜上的特异性受体结合，C正确；
D. 肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，细胞凋亡过程中基因进行选择性表达，因此会产生新蛋白质，D错误。
故选C。
10. 人乳头瘤病毒（HPV）是一种DNA病毒，可诱发细胞癌变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 在HAT培养基上存活的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体
B. 单克隆抗体的特点是灵敏度高、特异性强，可以大量制备
C. 可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞
D. 单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选择透过性
【答案】D
【分析】单克隆抗体的制备过程：对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；得到相应的B淋巴细胞；将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）；对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。
【详解】A、由于小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上生长，所以，在HAT培养基上存活的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体，A正确；
B、单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌，与血清抗体相比，其特点是灵敏度高、特异性强，可以大量制备，B正确；
C、抗原和抗体可特异性结合，故可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，C正确；
D、单克隆抗体的制备过程主要运用的细胞工程技术包括动物细胞培养和动物细胞融合，原理依次是细胞的增殖、细胞膜具有一定的流动性，D错误。
故选D。
11. 如图表示胚胎分割的过程，下列有关胚胎分割的说法，正确的是（ ）
A. 为了获得良种后代，可以取少量内细胞团细胞进行DNA分析
B. 细胞A不一定是受精卵
C. 为了获得更多的胚胎，分割胚胎时产生的份数越多越好
D. 对胚胎进行分割后得到的个体性别不同
【答案】B
【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术，属于无性繁殖。该过程的材料是发育良好，形态正常的桑椹胚（桑葚胚）或囊胚。
【详解】A、内细胞团将来发育为胎儿的各种组织，滋养层发育为胎儿的胎膜和胎盘，为了获得良种后代，可以取滋养层细胞进行DNA分析，A错误；
B、细胞A不一定受精卵，也可以是重组细胞，B正确；
C、分割胚胎时分割的份数越多，操作难度越大，成功率越低，C错误；
D、对胚胎进行分割属于无性生殖，得到后代个体性别相同，D错误。
故选B。
12. 下列关于生物实验的叙述正确的是（ ）
A. 施旺、施莱登运用不完全归纳法得出一切动植物都由细胞发育而来
B. 果酒发酵过程中，每隔12h左右打开瓶盖，释放酵母菌发酵产生的CO2
C. 拜尔的实验在黑暗中进行是为了排除光照对胚芽鞘尖端合成生长素的影响
D. 分别用含有35S和32P的两种培养基培养细菌，再用上述细菌分别培养病毒，检测子代病毒的放射性可区分是DNA病毒还是RNA病毒
【答案】A
【分析】一、噬菌体属于侵染细菌的病毒，它没有细胞结构，缺乏自主代谢机制，它的生命活动离不开宿主细胞。
二、病毒中含有DNA或RNA一种核酸，其遗传物质是DNA或RNA。
【详解】A、施旺、施莱登观察了部分动植物，运用不完全归纳法得出一切动植物都由细胞发育而来，A正确；
B、果酒发酵过程中，每隔一段时间左右拧松瓶盖，释放酵母菌发酵产生的CO2，B错误；
C、拜尔的实验在黑暗中进行是为了排除光照对胚芽鞘尖端生长素分布的影响，C错误；
D、分别用含有35S和32P的两种培养基培养细菌，再用上述细菌分别培养病毒，S是蛋白质的特征元素（DNA病毒和RNA病毒都含有蛋白质），P是核酸（DNA和RNA都含有）的特征元素，不能区分DNA病毒还是RNA病毒，D错误。
故选A。
13. 细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了如下实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到的结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行消毒处理
B. 对上、下层菌计数可以将滤膜菌体稀释后采用血球计数板计数
C. 由甲、乙，丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性
D. 野生型细菌X在与tcel—tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势
【答案】C
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、为避免杂菌的污染，实验中的滤膜、培养皿、固体培养基等均需灭菌处理，A错误；
B、对活菌进行计数的方法是稀释涂布平板法，具体方法是：先将菌体进行梯度稀释，再涂布到滤膜的表面，待菌落数稳定时进行计数，不能用显微镜直接计数的原因是显微镜直接计数不能区分死菌和活菌，B错误；
C、tcel蛋白是一种有毒性分泌蛋白，乙组中野生型可产生tce1蛋白作用于tcel-tcil双突变体，后者无法产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在竞争中占据优势；而在丙组中，野生型可产生tce1蛋白作用于tcel突变体，后者可以产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生长受到抑制，由此推测， tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性，C正确；
D、由甲组、乙组可知，野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体的竞争中均占优势，由甲组、丙组可知，野生型细菌X在与tcel突变体的竞争中不占优势，D错误。
故选C。
14. 如图所示为面包霉体内合成氨基酸的途径。若在发酵工程中利用面包霉来大量合成氨基酸A
应采取的最佳措施是（ ）
A. 改变面包霉的细胞膜通透性
B. 在高温高压下进行发酵
C. 对面包霉进行诱变处理，选育出不能合成酶③的菌种
D. 对面包霉进行诱变处理，选育出不能合成酶②的菌种
【答案】C
【分析】图中分析底物通过酶①和②的催化才能生产氨基酸A和B。但是氨基酸A和B过量时会抑制酶①的作用。
【详解】A、改变面包霉的细胞膜通透性，这样氨基酸A和B都可以及时排出，提高氨基酸A和B的产生量，不是最佳措施，A错误；
B、高温高压不利于面包霉的代谢活动，B错误；
C、面包霉被诱变成不能合成酶③的新菌种，这样中间产物只能通过酶②催化为氨基酸A，可以大量生产氨基酸A的量，C正确；
D、人工诱变，选育出不能合成酶②的面包霉，可以使中间产物不能生成氨基酸A，D错误。
故选C。
15. 将两种氨基酸营养缺陷型大肠杆菌（菌株a和b）进行如图所示实验。下列叙述正确的是（ ）
A. 实验中接种至基本培养基方法是平板划线法
B. 基本培养基上出现的少量菌落一定是单菌落
C. 基本培养基中包含菌株a和b的特殊营养物质
D. 菌株a和b需要的特殊营养物质有所不同
【答案】D
【分析】单独培养菌株a和b时，培养基中均无法生长菌落，而当a和b共同培养时，培养基中有少量菌落产生，a和b混合培养能生长，说明它们能够相互提供相应的特殊营养物质，因此它们生长所需要的特殊营养物质一定有所不同。
【详解】A、根据菌株a和菌株b混合后菌落的分布情况可知，接种至基本培养基时宜用稀释涂布平板法，A错误；
B、基本培养基出现的少量菌落不一定都为单菌落，也有可能是重叠的菌落，B错误；
C、单独培养菌株a和b时，培养基中均无法生长菌落，而当a和b共同培养时，培养基中有少量菌落产生，因此培养基中无法提供它们单独生长的特殊营养物质，C错误；
D、a单独培养和b单独培养均不能生长，a和b混合培养能生长，说明它们能够相互提供相应的特殊营养物质，而无法独立生长，因此它们所需要特殊营养物质有所不同，D正确。
故选D。
16. 某生物兴趣小组探究了泡菜制作过程中乳酸菌数量、pH以及亚硝酸盐含量的变化，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 乳酸菌数量先增加后减少，不能持续增加
B. 若泡菜坛有裂缝，则乳酸菌的数量会减少
C. 第3天的泡菜比第8天的更适于食用
D. 乳酸菌发酵产生的乳酸使pH逐渐降低
【答案】C
【分析】分析曲线图：制作泡菜过程中亚硝酸盐含量先升高后降低，过多的亚硝酸盐对人体有害，因此取食泡菜应该选取亚硝酸盐含量低时取食；pH值先下降后保持相对稳定；乳酸菌的数量先增多后降低。
【详解】A、分析题图可知，乳酸菌数量先增加后减少，不能持续增加，因为发酵后期，乳酸含量增加，PH下降，抑制乳酸菌的活动，导致乳酸菌数量减少，A正确；
B、乳酸菌发酵需要无氧环境，若泡菜坛有裂缝，则会导致乳酸菌的数量会减少，B正确；
C、由曲线图分析可知，第三天的亚硝酸盐含量最高，第八天时亚硝酸盐含量趋于稳定，含量较第三天明显减少，故与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用，C错误；
D、乳酸发酵产生乳酸，随着乳酸含量的增加，pH值逐渐降低，D正确。
故选C。
17. 图甲为果酒和果醋的制作装置，图乙表示制作过程中的物质变化，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 过程①②都只能发生在缺氧的条件下
B. 制作果酒时应关闭阀b，适时打开阀a排气
C. 制作果醋时需打开阀b通气，打开阀a排气
D. 过程①~④所需的最适温度基本相同
【答案】BC
【分析】根据题意和图示分析可知：甲是发酵装置，乙是果酒、果醋制作的实验原理，①是葡萄糖酵解形成丙酮酸的阶段，发生的场所是细胞质基质，②是酵母菌无氧呼吸的第二阶段，发生的场所是细胞质基质，③是有氧呼吸的第二、第三阶段，发生的场所是线粒体，④是醋酸菌发酵形成醋酸的过程。
【详解】A、过程①为葡萄糖酵解形成丙酮酸的阶段，发生的场所是细胞质基质，有氧和无氧条件下都会发生，A错误；
B、甲装置中，阀b控制进气，阀a控制排气，制作果酒时应关闭阀b以创造缺氧环境，适时打开阀a几秒钟以排出产生CO2，B正确；
C、醋酸菌是好氧性细菌，需要持续通氧，但a是排气口，b是进气口，故应打开阀b通气，打开阀a排气，C正确；
D、过程①～③所需的最适温度基本相同，为18-30℃，而过程④所需的最适温度为30-35℃，D错误。
故选BC。
18. 普洱茶分为生普和熟普，其中熟普是以云南大叶种晒青茶为原料，经后发酵（人为加水提温，加速茶叶熟化去除生茶苦涩以达到入口纯和汤色红浓之独特品性）加工形成的。熟普的汤色红浓明亮，香气独特陈香，滋味醇厚回甘，叶底红褐均匀。熟普的香味会随着陈化的时间而变得越来越柔顺、浓郁。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 人为加水提温可以促进微生物繁殖，进而缩短原料发酵的时间
B. 熟普发酵过程中环境条件变化会影响微生物的生长繁殖和代谢
C. 熟普发酵一段时间后要进行灭菌并密封，有利于茶的长期保存
D. 饮用熟普后回甘，可能是因为发酵后茶叶中单糖、二糖含量增加
【答案】C
【分析】人为加水提温，温度适当提高可以提高相应酶的活性进而可以促进微生物繁殖，进而缩短原料发酵的时间。
【详解】A、人为加水提温，温度适当提高可以提高相应酶的活性进而可以促进微生物繁殖，进而缩短原料发酵的时间，A正确；
B、发酵一般为微生物的无氧呼吸（部分为有氧呼吸），温度、pH、氧气含量等发酵条件，都会影响微生物的生长繁殖和代谢途径，B正确；
C、熟普的香味会随着陈化时间而变得越来越柔顺、浓郁，说明熟普保存过程中仍在发酵，因此新茶发酵完成后进行灭菌并密封不利于进一步发酵，C错误；
D、饮用熟普后回甘，可能是因为发酵后茶叶中单糖、二糖含量增加，D正确。
故选C。
19. 酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图Ⅰ所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，得到如图Ⅱ的结果。下列说法正确的是（ ）

A. 分离纯化酵母菌的常用方法有平板划线法和稀释涂布平板法
B. 用平板划线法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为6．8×106个/L，此数值往往比活菌的实际数目少
C. 对培养基进行灭菌的方法是干热灭菌法，菌种接种过程中的试管口、瓶口等容易被污染的部位均需再通过火焰灼烧灭菌
D. 由图Ⅱ结果可知，丙瓶出现的原因可能是培养瓶密封不严，丁组酵母菌产酒精能力比乙组强
【答案】AD
【分析】分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。
【详解】A、采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落，因此分离纯化酵母菌的常用方法有平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；
B、平板划线法可以用于微生物的分离，不能用于计数，B错误；
C、培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌，玻璃器皿、接种用具可采用干热灭菌，接种时的玻璃瓶口等都需在酒精灯火焰处进行灼烧灭菌，C错误；
D、乙、丙、丁挑取不同的菌落培养，丙瓶与乙、丁瓶相同条件培养，但培养液没有酒精产生，且瓶内活菌数量不低，丙瓶出现的原因可能是培养瓶密封不严，进行有氧呼吸；丁组的活菌数比乙组少，但是产生的酒精和乙组一样多，所以丁组产生酒精能力比乙强，D正确。
故选AD。
20. 精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，过程①将紫外线照射处理过的菌液接种在培养基甲上，培养至菌落不再增加时，平板上的菌落如图所示。过程②向培养基甲中添加某种物质，继续培养。下列相关叙述正确的是（ ）

A. 实验过程中用到的培养基和培养皿必须采用高压蒸汽灭菌法灭菌
B. 从培养基乙中挑选菌落，用平板划线法接种在培养基上可分离出单菌落
C. 培养基甲是一种选择培养基，过程②向培养基甲中添加鸟氨酸
D. 菌落A是诱变产生的精氨酸依赖型菌种，为鸟氨酸发酵的优良菌种
【答案】B
【分析】由图分析可知，图中①表示将紫外线照射处理的菌液接种在缺乏精氨酸的培养基上，因此甲中A表示野生型谷氨酸棒状杆菌，②表示向培养基中添加精氨酸后继续培养，其中A为野生型谷氨酸棒状杆菌，B为精氨酸依赖型菌株。
【详解】A、培养皿可以采用干热灭菌，A错误；
B、从培养基乙中挑选菌落，用平板划线法接种在固体培养基上可分离出单菌落，B正确；
C、精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，结合图分析可知，图甲平板上只有A菌落，过程②向培养基甲中添加精氨酸后出现B菌落，这说明培养基甲中缺少精氨酸是一种选择培养基，C错误；
D、菌落A是野生型菌种，菌落 B为精氨酸依赖型菌株，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种，D错误。
故选B。
21. 为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力，某研究小组设计的实验过程如下图。下列叙述正确的是（ ）
A. 过程①获得的原生质体应用10g/ml的蔗糖溶液培养
B. 过程②需提高生长素的比例以促进芽的分化
C. 过程③需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生
D. 原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性
【答案】D
【分析】由图可知，①表示用纤维素酶和果胶酶处理得到原生质体的过程；②③均表示再分化过程。
【详解】A、10g/ml的蔗糖溶液浓度高于细胞液浓度，原生质体在10g/ml的蔗糖溶液中会失水皱缩，不能在其中培养，A错误；
B、生长素与细胞分裂素比例适中时，有利于愈伤组织的形成；生长素/细胞分裂素比例升高，利于根的分化；生长素/细胞分裂素比例降低，利于芽的分化，②诱导芽分化时，需要提高细胞分裂素的比例，B错误；
C、③可以表示诱导根的分化形成幼苗，此时细胞壁已经形成，C错误；
D、原生质体无细胞壁，但由于含有一整套的遗传物质，故具有全能性，D正确。
故选D。
22. 关于早期胚胎发育，正确的是（ ）
A. 孵化前，细胞平均体积在不断减少，胚胎所含的有机物总量不断降低
B. 受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期阶段
C. 不同动物的胚胎移植的最佳时期均是桑椹胚及之前
D. 进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，因为此时细胞还未分化
【答案】A
【分析】胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加。（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]。（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]。（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔[细胞分化在胚胎期达到最大限度]。
【详解】A、孵化前，细胞进行分裂使细胞平均体积在不断减少，胚胎所含的有机物总量不断降低，A正确；
B、受精卵发育为囊胚的过程是在透明带内完成的，囊胚后期孵化后进入原肠胚阶段，B错误；
C、不同动物的胚胎移植的最佳时期不同，大部分动物的最佳时期是桑葚胚及之前，C错误；
D、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，囊胚时细胞已经发生分化，D错误。
故选A。
23. 如图为植物体细胞杂交过程示意图。下列说法不正确的是（ ）
A. ①过程要取得成功，可用酶解法去除细胞壁获得原生质体C和D
B. ②过程要取得成功，需借助一定的技术手段进行人工诱导获得E
C. 甲中愈伤组织的细胞是一种高度液泡化、呈无定形状态、排列疏松的薄壁细胞
D. 乙中的植株幼苗移栽到室外环境中，就会出现地上长番茄，地下结马铃薯现象
【答案】D
【分析】体细胞杂交是克服植物有性杂交不亲和性、打破物种之间的生殖隔离、扩大遗传重组范围的一种手段。操作过程包括： 原生质体制备、原生质体融合、杂种细胞筛选、杂种细胞培养、杂种植株再生以及杂种植株鉴定等步骤。
【详解】A、①过程利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得的是具有活性的原生质体C和D，A正确；
B、植物体细胞杂交过程中涉及两个关键环节，一个是去除细胞壁，另一个就是通过一定的人工诱导技术诱导原生质体间的融合，B正确；
C、愈伤组织细胞是一种高度液泡化、呈无定形状态、排列疏松的薄壁细胞，C正确；
D、目前，地上长番茄，地下结马铃薯的植株尚未取得成功，D错误。
故选D。
24. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A. 选用幼嫩的动物组织是因为其全能性高
B. 用胃蛋白酶处理动物组织以分散成单个细胞
C. 培养过程中加入抗生素可以防止杂菌污染
D. 培养过程中细胞内的遗传信息始终保持不变
【答案】C
【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、幼嫩动物的器官或组织细胞的分裂能力强，易于培养，因此动物细胞培养一般是选用该材料，A错误；
B、动物细胞培养的适宜pH=7.2～7.4，胃蛋白酶会失活，不能发挥作用，培养动物细胞时将动物组织分散成单个细胞时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，形成分散的单个细胞，B错误；
C、培养过程中加入抗生素可以防止杂菌污染，C正确；
D、动物细胞培养的原理是细胞增殖，因此在细胞培养过程中遗传信息先增加（间期复制）后减少（细胞分裂形成子细胞），细胞的遗传物质会发生改变，D错误。
故选C。
25. 关于牛体外受精胚胎的工厂化生产叙述，正确的是（ ）
A. 精子和卵子受精后即可移入母牛子宫
B. 采集的卵母细胞应立即与精子共同培养
C. 成熟卵子与收集来的精子相遇形成受精卵，需要培养到一定阶段才可移植
D. 体外受精胚胎的工厂化生产即胚胎发育和受精过程只需在体外进行
【答案】C
【分析】一、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
（1）卵母细胞的采集和培养①主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子。②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。
（2）精子的采集和获能①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法。②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。
（3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
二、胚胎移植的基本程序主要包括：
①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体；用激素进行同期发情处理；用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；
②配种或人工授精；
③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段）；
④对胚胎进行移植（桑椹胚或囊胚）；
⑤移植后的检查。
【详解】A、精子和卵子受精形成受精卵后还需要发育成早期胚胎才能移入母牛子宫，A错误；
B、采集的卵母细胞需要培养成熟才能与获能的精子受精，B错误；
C、成熟卵子与获能的精子相遇形成的受精卵，需培养到一定阶段（桑椹胚或囊胚）才可以移植，C正确；
D、体外受精胚胎的工厂化生产即受精过程和早期胚胎发育在体外进行，但移植后的胚胎发育过程在受体子宫进行，D错误。
故选C。
26. 《细胞—干细胞》杂志在线发表了中国科学院上海生命科学研究院诱导入成纤维细胞重编程为肝细胞（hihep细胞）的成果。hihep细胞具有肝细胞的许多功能，包括分泌血清白蛋白、积累糖原、代谢药物、药物转运等。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 人成纤维细胞与hihep细胞的DNA和RNA基本相同
B. 人成纤维细胞重编程为hihep细胞过程中遗传物质发生了改变
C. hihep细胞诱导成功彻底解决了人类重症肝病的治疗
D. 研究表明，分化的细胞其分化后的状态是可以改变的
【答案】D
【分析】细胞分化是指在个体发育中，相同细胞的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化过程遗传物质不变，只是基因选择性表达的结果。
【详解】A、人成纤维细胞与hihep细胞的DNA基本相同，由于基因的选择性表达，RNA不完全相同，A错误；
B、人成纤维细胞重编程为hihep细胞过程中遗传物质没有发生改变，B错误；
C、由题干信息可知：hihep细胞具有肝细胞的许多功能，但并未完全代替肝脏细胞，故hihep细胞诱导成功不能彻底解决人类重症肝病的治疗，C错误；
D、根据题干信息可知，人成纤维细胞重编程为肝细胞的实验成功，说明分化的细胞其分化后的状态是可以改变的，D正确。
故选D。
27. 若下图表示生物工程操作中某些过程的模式图，请判断以下说法错误的是（ ）
A. 如果A、B是白菜和甘蓝的原生质体，可用聚乙二醇（PEG）处理使其融合为C
B. 如果上图存在于单克隆抗体制备过程中，得到的杂交瘤细胞C还需要在选择培养基上做二次筛选
C. 如果植物细胞A、B融合为C细胞，长出细胞壁的C细胞经过植物组织培养后长成杂种植株
D. 如果A、B分别是优良奶牛的精子和来自卵巢的卵母细胞，则都需要处理后才能完成体外受精
【答案】B
【分析】图示为A和B细胞经过融合得到C细胞，此图可表示原生质体融合，也能表示单克隆抗体的制备或精卵结合。
【详解】A、如果A、B是白菜和甘蓝的原生质体，则诱导原生质体融合可用聚乙二醇（PEG）处理，使其融合为C，A正确；
B、如果上图存在于单克隆抗体制备过程中，得到的杂交瘤细胞C已经在选择培养基上筛选过，二次筛选应在多空培养板上进行，还需要经过专一抗体检验阳性和克隆化培养，B错误；
C、如果植物细胞A、B融合为C细胞，长出细胞壁的C细胞为杂种细胞，杂种细胞需要经过植物组织培养后长成杂种植株，C正确；
D、如果A、B分别是优良奶牛的精子和来自卵巢的卵母细胞，则在进行体外受精时，一般要把卵细胞培养到次级卵母细胞期，精细胞则要经过获能处理才能与次级卵母细胞接合为受精卵，D正确。
故选B。
28. 细胞直接共培养是指将2种或2种以上的细胞接种在同一孔中进行培养，以达到模拟体内不同种类的细胞直接接触来探究它们信息交流方式的目的，具体操作如图。下列分析错误的是（ ）
A. 成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养前需先将组织块分散成单个细胞
B. 细胞培养过程需要对培养液进行灭菌，对所有培养用具进行消毒，以保证无菌无毒的培养环境
C. 推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时停止分裂
D. 通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式
【答案】B
【分析】一、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
二、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（CO2的作用是维持培养液的PH）。
三、动物细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象。
【详解】Ａ、成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养前需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理将组织块成为单个细胞后才能进行培养，Ａ正确；
Ｂ、细胞培养过程需要对培养液、培养用具进行灭菌，细胞培养过程需要对培养液添加抗生素防止细菌污染，定期更换培养液以防止细胞代谢产物造成毒害，Ｂ错误；
Ｃ、动物细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象，由此推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时停止分裂，Ｃ正确；
Ｄ、细胞膜表面上可能存在接受邻近细胞信号的受体，以完成细胞间的信息交流，通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式，Ｄ正确。
故选Ｂ。
29. 某些哺乳动物的胚胎干细胞经定向诱导可获得多种组织细胞，制备流程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 为获得更多的囊胚，采用促性腺激素注射促进雄鼠产生更多的精子
B. 细胞a和细胞b内含有的核DNA不同，所以全能性高低不同
C. 用胰蛋白酶处理a，可获得分散的成体干细胞
D. 胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养
【答案】D
【分析】一、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。
二、ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。
【详解】A、为了获得更多的囊胚，可以采用促性腺激注射促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，A错误；
B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的，故核DNA相同，B错误；
C、运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞，首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；
D、动物细胞培养时需要在5% CO2的培养箱中进行培养，以维持培养液的pH，D正确。
故选D。
30. 图中a、b、c、d表示生物工程的相关技术，①②③分别表示应用a、b、c技术获得的生物个体。下列推测错误的是（ ）
A. 若a是核移植技术，则①的产生体现动物细胞核具有全能性
B. 若b是体外受精技术，则②的发育都在体外进行
C. 若c是胚胎分割技术，则③的产生方式属于无性繁殖
D. d技术实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
【答案】B
【分析】一、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。
二、胚胎分割：是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。
【详解】A、动物细胞通过核移植技术获得动物个体能证明动物细胞的细胞核具有全能性，A正确；
B、体外受精是将体外获得的胚胎移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体，所以不全是在体外进行，B错误；
C、胚胎分割技术是将一个囊胚或者桑椹胚分割成多分获得多个后代个体，属于无性繁殖系，C正确；
D、d是胚胎移植技术，实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。
故选B。
31. 科研人员在杂交瘤细胞的基础上获得了双杂交瘤细胞，能够产生双特异性抗体，该抗体可以同时结合两种抗原。抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b（a与b相同），如图1．因此双杂交瘤细胞产生的抗体种类较多，其中有一种抗体能同时与抗原α与β结合称为双特异性抗体，如图2．下列相关叙述错误的是（ ）
A. 科研人员将抗原α、β分别注射到小鼠体内引起体液免疫，浆细胞分泌相应抗体
B. 制备杂交瘤细胞时，需将小鼠的脾脏组织用胰蛋白酶处理获得单个细胞后再与小鼠的骨髓瘤细胞融合，多次筛选得到两种杂交瘤细胞
C. 诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等
D. 图2中若1是A2，则 2、3、4、5、6分别对应a、B2、b、α、β
【答案】D
【分析】图1中是抗原α、β分别注射到小鼠体内，小鼠分别产生的α、β的两种单克隆抗体；图2中是双杂交瘤细胞产生的双特异性抗体。图中抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b（a与b相同）。
【详解】A、抗原α、β分别注射到小鼠体内引起体液免疫，刺激B细胞增殖和分化出记忆细胞和浆细胞，浆细胞分泌相应抗体，A正确；
B、制备杂交瘤细胞时，需将上述小鼠的脾脏组织，用胰蛋白酶处理获得单细胞后，再与小鼠的骨髓瘤细胞融合，多次筛选得到两种杂交瘤细胞，获得的杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生特定抵抗抗原α或抗原β的抗体，B正确；
C、诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，C正确；
D、有一种抗体能同时与抗原α与β结合称为双特异性抗体，由于图2抗体是双杂交瘤细胞产生的双特异性抗体，可变区的重链1和2位置存在A2或B2，若1是A2，则2为B2，根据图1信息判断（a与A2在可变区并结合α，b与B2在可变区并结合β），图2中3与1（A2）在可变区并结合5，故3对应a，5对应α，同时4与2（B2）在可变区并结合6，故4对应b，6对应β，因此 2、3、4、5、6分别对应B2、a、b、α、β，D错误。
故选D。
32. 紫罗兰花色丰富、抗虫性强，其种子中富含亚麻酸。为了让油菜具有紫罗兰的诸多优良性状，科研人员进行了如图所示实验。下列叙述错误的是（ ）
A. 原生质体间的融合依赖于生物膜的流动性，为防止杂菌污染，融合原生质体需放在无菌水中
B. 原生质体融合后，可利用选择培养基从混合细胞群中筛选出所需杂种细胞
C. 将愈伤组织培养为杂种植株的过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照
D. 获得杂种植株后，可借助抗原—抗体杂交、病虫感染实验进行新性状表达的鉴定
【答案】A
【分析】图示为植物体细胞杂交过程，首先去壁获得原生质体，其次诱导原生质体融合形成杂种细胞，最后由植物组织培养技术将杂种细胞培育成杂种植株。
【详解】A、细胞融合依赖于生物膜的流动性，获得的融合原生质体没有细胞壁，若将其放在无菌水中，融合原生质体可能会吸水涨破，A错误；
B、原生质体融合后，两两融合的细胞有AA型、BB型、AB型，可以利用选择培养基从混合细胞群体中筛选出所需杂种细胞，B正确；
C、将愈伤组织培养为杂种植株的过程中，为了诱导叶绿素的形成，每日需要给予适当时间和适当强度的光照，C正确；
D、获得杂种植株后，可借助抗原—抗体杂交、病虫感染实验进行新性状表达的鉴定，其中前者属于分子水平的鉴定，后者属于个体生物学水平的鉴定，D正确。
故选A。
33. 甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，不考虑基因互作和其他变异，相关叙述错误的是（ ）
A. 可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得已免疫的B淋巴细胞
B. 在HAT 选择培养基上，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均无法长期存活
C. 用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时每一个孔尽量只接种一个细胞
D. 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞即具有持续产生甲型流感抗体的能力
【答案】D
【分析】在制备单克隆抗体时，首先要给小鼠免疫，产生相应的B细胞，然后将B细胞与骨髓瘤细胞融合，经过选择培养基两次筛选，最后获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。在单克隆抗体的制备过程中，使用了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术。
【详解】A、对动物进行间歇注射抗原处理，以刺激动物机体产生相应的B淋巴细胞，且脾脏是免疫器官，故B淋巴细胞可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得，A正确；
B、B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合后，再用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，B正确；
C、为确保产生特异性强的抗体，用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时，每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞，C正确；
D、杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，若丢失的染色体含有产生甲型流感抗体的基因，则利用抗体检测筛选的杂交瘤细胞不一定具有持续产生甲型流感抗体的能力，D错误。
故选D。
34. CD47是一种细胞膜表面的糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的功能。为验证抗CD47的单克隆抗体能减弱CD47对巨噬细胞的抑制作用，某科研小组进行了实验，实验过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. CD47与巨噬细胞结合后会抑制后者的抗原处理、呈递功能
B. 通常向肿瘤细胞共培养体系加入血清，可提供某些营养物质
C. 融合、筛选得到的杂交瘤细胞都能产生抗CD47的单克隆抗体
D. 预期实验结果为实验组的巨噬细胞的吞噬能力高于对照组的
【答案】C
【分析】单克隆抗体制备流程：（1）对小鼠注射特定的抗原使小鼠产生免疫反应；（2）从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长；（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；（6）最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。这样从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。
【详解】A、CD47与巨噬细胞结合后会抑制巨噬细胞的功能，巨噬细胞具有吞噬消化、抗原处理和呈递功能，A正确；
B、动物细胞培养时通常会在培养液中加入一些天然成分，肿瘤细胞共培养体系加入的血清可提供某些营养物质，B正确；
C、融合、筛选得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，才可以获得足够数量的能分泌抗CD47的单克隆抗体的细胞，C错误；
D、实验组中加入了单克隆抗体，抗体与肿瘤细胞表面的CD47发生特异性结合，从而解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，而对照组中没有加入单克隆抗体，不能与肿瘤细胞表面的CD47结合，因而无法解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，因此，预期实验结果为实验组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于对照组，D正确。
故选C。
35. 牙齿再生术的难点在于牙髓再生和牙周组织再生。空军军医大学口腔医院金岩教授率领团队经历多年潜心努力，从患者脱落的乳牙中获取牙髓干细胞，经过体外培养，将形成的干细胞聚合体植入患者牙髓腔里，使得牙齿神经、血管再生，完全恢复牙齿原有功能。针对以上技术，下列叙述正确的是（ ）
A. 此技术的原理与植物组织培养的原理相同
B. 此技术需要适宜的温度（36.5℃）和pH（6.8—7.8）
C. 牙髓干细胞与胚胎干细胞一样都可以分化为成年动物体内任何一种类型的细胞，甚至产生个体
D. 对于牙髓干细胞的培养过程需要经历原代培养，用胰蛋白酶处理后再用离心法收集悬液中的细胞进行传代
【答案】D
【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。）
【详解】A、该技术属于动物细胞培养，原理是细胞增殖，而植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，两者不同，A错误；
B、此技术即动物细胞培养需要适宜的温度（36.5±0.5℃）和pH（7.2-7.4），B错误；
C、由于技术条件等的制约，目前不能将动物体细胞培养为完整个体，且牙髓干细胞属于分化程度较高的细胞，不能分为任何一种类型的细胞，C错误；
D、对于牙髓干细胞的培养过程需要经历原代培养（分瓶前的培养过程），用胰蛋白酶处理后再用离心法收集悬液中的细胞进行传代，D正确。
故选D。
36. 铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一、研究人员通过培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱，过程及结果如下图。相关叙述不正确的是（ ）

A. 过程①获得的幼芽应先用乙醇灭菌30s，再用次氯酸钠溶液处理30min
B. 过程③涉及的生物学原理是细胞膜的流动性和植物细胞增殖及其全能性
C. 过程②固体培养基中生长素与细胞分裂素比例适中有利于拟原球茎的形成
D. 结果表明，生物碱含量与PLBs重量成正相关，光照条件有利于PLBs的生长
【答案】B
【分析】一、左图分析：图示表示应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的试验流程，①是取外植体，②是脱分化，过程③拟原球茎的长大。
二、右图分析：图示表示在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化，三者均随着时间的推移逐渐增多，最终趋于稳定，且PLBs在光照下的重量明显大于在黑暗中的重量。
【详解】A、消毒的原则是既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害，故外植体消毒可先用体积分数为70%的酒精处理30s，再用次氯酸钠溶液处理30min，A正确；
B、过程③拟原球茎的长大，涉及的生物学原理是细胞增殖，拟原球茎经有丝分裂而不断生长，B错误；
C、过程②为脱分化，固体培养基中生长素与细胞分裂素比例适中有利于拟原球茎（类似愈伤组织）的形成，C正确；
D、据右图可知，生物碱含量与PLBs重量成正相关，PLBs在光照下的重量明显大于在黑暗中的重量，说明光照条件有利于PLBs的生长，D正确。
故选B。
37. 肉苁蓉具有较高的药用价值，自然条件下的产量较低，其次生代谢产物苯乙醇苷（PeGs）是主要活性成分。研究人员以外植体诱导出愈伤组织，进一步进行细胞悬浮培养。在不同的初始接种浓度下培养一段时间后，对悬浮培养液的PeGs进行测定，结果如下图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 植物细胞培养几乎不受季节、天气等限制，条件可控
B. 愈伤组织培养时需用液体培养基，细胞悬浮培养时需用固体培养基
C. 若工厂化大量生产PeGs,细胞悬浮培养时就应选择接种细胞的浓度为3.2g·L-1
D. 若需进一步了解细胞生成PeGs的能力，则要检测培养后培养液中的细胞密度
【答案】AD
【分析】一、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
二、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
【详解】A、植物细胞培养使用人工配制的培养液，可以人为控制其生长环境，故植物细胞培养几乎不受季节、天气等限制，条件可控，A正确；
B、愈伤组织培养时需用固体培养基，细胞悬浮培养时需用液体培养基，有利于细胞增殖，B错误；
C、若工厂化大量生产PeGs，细胞悬浮培养时选择接种细胞的浓度应在2.4至4.0g·L⁻¹之间设置梯度浓度找到最适浓度，C错误；
D、若需进一步了解细胞生成PeGs的能力，细胞密度若过大影响其产量，因此要检测培养后培养液中的细胞密度，D正确。
故选AD。
38. 如图为诺贝尔奖获得者山中伸弥团队制备iPS细胞（诱导多能干细胞）的过程示意图：①小鼠胚胎成纤维细胞培养→②用分别含有Oct4、Sx2、c-Myc、Klf4基因的四种慢病毒载体感染小鼠胚胎成纤维细胞→③置于含有饲养层细胞的胚胎干细胞培养基中培养→④鼠胚胎成纤维细胞脱分化，形成iPS细胞。相关叙述正确的是（ ）

A. 步骤①应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH
B. 步骤②由于慢病毒载体会受到免疫细胞的攻击，可能导致感染效率的降低
C. 步骤③培养基中的饲养层细胞可为成纤维细胞提供所必需的生长因子
D. 步骤④形成iPS细胞的实质是基因的选择性表达，使其功能趋向于专门化
【答案】AC
【分析】诱导的多能性干细胞可以通过基因转染等细胞重编程技术人工诱导获得的，具有类似于胚胎干细胞多能性分化潜力的干细胞。干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能APSC多能细胞。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。
【详解】A、据图可知，步骤①是小鼠胚胎成纤维细胞培养，应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，其中O2是细胞代谢必需的，CO2的作用是维持培养液的pH，A正确；
B、图中培养基中培养的是胚胎成纤维细胞，没有免疫细胞，因此不会受到免疫细胞的攻击，B错误；
C、诱导多能干细胞需依赖于饲养层细胞所分泌的生长因子，以维持自身生长、繁殖的需要，因此步骤③培养基中的饲养层细胞可为成纤维细胞提供所必需的生长因子，C正确；
D、步骤④是脱分化形成iPS细胞，未发生基因的选择性表达，其功能未趋向于专门化，在诱导因子的作用下，iPS细胞可分化成多种细胞，D错误。
故选AC。
39. 现已建立一种简便快捷、适用于诺如病毒常见流行株的胶体金免疫层析检测方法。即用常见流行株GII。4型诺如病毒的衣壳蛋白P颗粒作为抗原利用小鼠制备单克隆抗体1B10（浓度为5mg/mL）和1D6（浓度2.2mg/mL）。利用羊制备羊抗鼠抗体作为质控线组装成胶体金试纸条（见图）。下列说法正确的是（ ）
A. 单克隆抗体1B10和单克隆抗体1D6特异性识别同一种抗原
B. 胶体金试纸条上使用的三种抗体由同一种杂交瘤细胞合成并分泌
C. 检测时，在控制线和检测线出现两条色带时，表示结果阴性
D. 胶体金试纸条可以用来检测所有类型诺如病毒感染导致的胃肠炎
【答案】A
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高以及可大量制备的特点。
【详解】A、分析题干，单克隆抗体1B10和单克隆抗体1D6都是由GII.4型诺如病毒的衣壳蛋白P颗粒作为抗原制备的，因此它们特异性识别同一种抗原，但作用于不同位点，A正确；
B、经筛选后的一种杂交瘤细胞只能合成并分泌一种抗体，B错误；
C、检测时，在控制线和检测线出现两条色带时，说明抗原和抗体发生了反应，表示结果阳性，C错误；
D、检测时利用的原理是抗原抗体特异性结合，因此胶体金试纸条不可以用来检测所有类型诺如病毒感染导致的胃肠炎，D错误。
故选A。
40. 新型冠状病毒的抗原检测采用胶体金试纸条，待测样本加入样孔后，样本沿着硝酸纤维素膜向前移动，如果样本中含有新冠病毒（新冠病毒有N蛋白），首先会被结合垫上的金标抗体（N蛋白抗体—胶体金颗粒）结合，形成“新冠病毒抗原—金标抗体”复合物，继续向试纸吸水垫方向移动。在T线（检测线）上被T线抗体截获后，T线呈现红色，试纸中金标抗体数量是富余的，会继续向前移动到C线（质控线），被C线抗体截获后，C线也呈现红色。下图为新冠病毒的抗原检测原理，下列说法错误的是（ ）
A. N蛋白应是新型冠状病毒中保守性较高的蛋白质
B. 试纸条C线的抗体为N蛋白抗体，T线的抗体为抗N蛋白抗体的抗体
C. 若该试纸条C线与T线都不出现红色，说明被检测者尚未感染新冠病毒
D. 胶体金试纸条检测在过冷、过热或过度潮湿环境中会导致检测结果异常
【答案】BC
【分析】抗原检测：在实际检测过程中，通过采用双抗夹心法，采用两种抗原特异性抗体，去识别并结合一个靶点抗原的不同靶位，能够促使交叉反应概率得到有效的降低，有效提升抗原检测的特异性。对于新型冠状病毒而言，自身有N蛋白、E蛋白和S蛋白等抗原，这些抗原能够作为免疫原，在人体遭受病毒感染后，能够对浆细胞产生一种刺激，从而生产出一种特异性抗体，而根据抗原检测双抗夹心ELISA原理，在样本垫上滴加样本，通过液相层析方式，依次通过结合垫，而在结合垫内部，由于含有标记的抗原特异性抗体，因此能够与样本中的抗原（病毒蛋白）进行结合，当液流到达检测线（T线）时，固定在这条线上的第二种抗原特异性抗体再次与抗原结合，将会呈现阳性结果。
【详解】A、N蛋白应是新型冠状病毒中保守性较高的蛋白质，结合垫上的金标抗体（N蛋白抗体—胶体金颗粒）能与新冠病毒结合，继续向试纸吸水垫方向移动，A正确；
B、试纸条C线的抗体为抗N蛋白抗体，能与胶体金中的抗原-抗体复合物结合，T线的抗体为另一种抗体识别抗原，B错误；
C、若被检测者尚未感染新冠病毒，应该是T线不显色，而C线显色，若C线也不显色，说明该试纸无效，C错误；
D、胶体金试纸条检测在过冷、过热或过度潮湿环境中会影响抗原与抗体的结合，从而导致检测结果异常，D正确。
故选BC。
二、非选择题
41. 某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了随机取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下：

请分析并回答下列问题：
（1）该实验中含有琼脂的培养基从物理性质来说，属于_____培养基，培养基中只选择了_____作为唯一氮源。
（2）分解尿素的细菌能产生_____酶，将尿素分解为_____。
（3）在采用稀释涂布平板法对微生物进行计数时，需要进行梯度稀释的原因是_____。
（4）实验结果：6号试管涂布的三个平板的菌落数为550、501、688，7号试管涂布的三个平板的菌落数为58、73、97，8号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。该10g土壤样品中含有分解尿素的细菌的估算数目是_____个。
【答案】（1）①. 固体 ②. 尿素
（2）①. 脲 ②. NH3和CO2
（3）只有在稀释度足够高时，聚集在一起的微生物才被分散成单个细胞，并形成单个菌落（但稀释度过高时，得到的平板菌落数太少，实验的偶然性太大。进行梯度稀释时，取菌落数为30～300个的平板进行计数，所得的实验结果最准确）
（4）7．6×1011
【分析】一、稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。
二、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。
【小问1详解】琼脂为凝固剂，含有琼脂的培养基从物理性质来说，属于固体培养基；在配制从土壤中筛选分解尿素的细菌的培养基时，需加入尿素作为唯一的氮源。
【小问2详解】分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解成氨NH3和CO2。
【小问3详解】在进行上述系列梯度稀释时，需用移液管吸取前一试管（或锥形瓶）中1 mL菌液注入到后一试管中。需要进行梯度稀释的原因是：只有在稀释度足够高时，聚集在一起的微生物才被分散成单个细胞，并形成单个菌落；但稀释度过高时，得到的平板菌落数太少，实验的偶然性太大。进行梯度稀释时，取菌落数为30～300个的平板进行计数，所得的实验结果最准确。
【小问4详解】为了保证实验结果的准确性，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，应将菌落数明显最少和最大的舍弃，据此结合题意可知：应选择稀释108倍的7号试管涂布的三个平板的菌落数（58、73、97）进行计数，所以该10g土壤样品中含有分解尿素的细菌的估算数目是 [(58＋73＋97)÷3]÷0.1×108×10＝7.6×1011个。
42. 化妆品中含有丰富的营养物质，是日勾维多细菌源菌生长的优良环境。为建立化妆品中日勾维多细菌源菌的检验机制，科研人员利用化妆品中常用的十六烷基三甲基溴化铵制成培养基对4株日勾维多细菌源菌进行生长特性研究，这4株日勾维多细菌源菌分别为；ATCC33028、2507，3526、6286．回答下列问题：
（1）4株日勾维多细菌源菌应从_____中提取。常在化妆品的生产、运输、储存中添加防腐剂，作用是_____。
（2）菌落是指_____。科研人员分别将等浓度的四种菌株：ATCC33028，2507，3526，6286接种于十六烷基三甲基溴化铵培养基、十六烷基三甲基溴化铵—KH2PO4培养基、十六烷基三甲基溴化铵—KH2PO4—葡萄糖培养基，置于36℃培养箱中培养48h，观察4株日勾维多细菌源菌的生长情况如表所示，据表可知，只有_____未形成菌落。结果表明；KH2PO4可_____（填“增强”或“减弱”）菌株2507对十六烷基三甲基溴化铵的耐受性。
日勾维多细菌源菌在十六烷基三甲基溴化铵固体平板上的生长情况
注：“-”表示用肉眼观察。固体平板未观察到菌落；“+”敲示用肉眼观察，固体平板有菌落
（3）如图是上述日勾维多细菌源菌在十六烷基三甲基溴化铵培养基上36℃环境下培养96h的结果，可推测接种方法为_____，此结果表明所使用的十六烷基三甲基溴化铵_____（填“能”或“不能”）使菌株2507全部死亡。

【答案】（1）①. （被污染的）化妆品 ②. 抑制微生物（日勾维多细菌源菌）的生长繁殖
（2）①. 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体 ②. 菌株2507在十六烷基三甲基溴化铵培养基中 ③. 增强
（3）①. 平板划线法 ②. 不能
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】由于化妆品中含有丰富的营养物质，是日勾维多细菌源菌生长的优良环境，因此4株日勾维多细菌源菌应从化妆品中提取。常在化妆品的生产、运输﹑储存中添加防腐剂，作用是抑制微生物（日勾维多细菌源菌）的生长繁殖。
菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。据表可知，只有菌株2507在十六烷基三甲基溴化铵培养基中未形成菌落。菌株2507在十六烷基三甲基溴化铵培养基添加KH2PO4后可形成菌落，因此表明：KH2PO4可增强菌株2507对十六烷基三甲基溴化铵的耐受性。
据图可推测接种方法为平板划线法，图中出现了2507菌落，说明所使用的十六烷三甲基溴化铵不能使菌株2507全部死亡。
43. 供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAmA修饰（即RNA某位点的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者进行系列实验。
（1）核移植的受体是_____细胞，核移植后的重构胚发育至_____阶段可利用_____技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体，从早期胚胎中分离获得的具有自我更新和分化潜能的_____可用于医学研究。
（2）RNAm6A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如图1、2。结果表明，核供体细胞的分化程度越高，_____和_____越低。
Ⅱ、兰花人工种子由人工种皮、原球茎和人工胚乳构成。原球茎是由胚性细胞组成、形态类似球茎的结构，可发育成完整植株，人工胚乳可调控原球茎的休眠，并为原球茎的发育提供营养成分和激素。回答下列问题：
（3）从盆兰花获取茎尖，对其进行_____处理后接种于培养基，茎尖通过_____后生长为原球茎。原球茎在发芽培养基上可很快长出幼叶，然后在生根培养基中形成完整植株。
（4）将原球茎切成小块，转入增殖培养基进行继续培养，可以得到大量原球茎，实现兰花的快速繁殖。在增殖培养基中添加椰子水，原球茎会长得更饱满。不同成熟度椰子的椰子水对原球茎生长的促进效果不同，推测原因是不同成熟度椰子的椰子水中_____和_____的含量存在差异。
（5）某实验研究发现，与添加用过滤除菌法处理的椰子水（A组）相比，人工胚乳中添加用湿热灭菌法处理的椰子水（B组）使原球茎的休眠时间变短。研究人员推测B组原球茎休眠时间短的原因是脱落酸被破坏。作出上述推测的依据是：椰子水中有脱落酸；_____；脱落酸不耐高温。为了验证上述推测，可增加一组实验（C组），C组的处理是：_____。
【答案】（1）①. 去核的卵母 ②. 桑葚胚（或囊胚） ③. 胚胎移植 ④. 胚胎干细胞
（2）①. RNA修饰水平 ②. 核移植重构胚的发育效率
（3）①. 消毒 ②. 脱分化
（4）①. 营养物质 ②. 激素
（5）①. 脱落酸促进休眠 ②. 人工胚乳中先添加用高压蒸汽灭菌法处理的椰子水后再加脱落酸
【分析】植物组织培养：（1）幼嫩的组织脱分化较为容易，如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化，而植物的茎、叶和成熟的组织则较难。（2）对外植体要进行消毒处理，而对各种器械要彻底灭菌。（3）植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖，用葡萄糖也可以，但后者的成本高。（4）诱导愈伤组织再分化形成胚状体或丛芽及生根的过程中，要进行换瓶处理，以改变培养基中的激素配比及浓度。
【小问1详解】核移植的受体一般是去核的卵母细胞，当胚胎发育到桑葚胚或囊胚时，可以进行胚胎移植；从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，由于具有自我更新和分化潜能，可用于医学研究。
【小问2详解】猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞，前者分化程度比后者低，由图1和图2分析可知，实验的自变量是细胞类型等，因变量是RNAm6A修饰和发育至该阶段的胚胎数量占重构胚总数大的比例，据图可知，核供体细胞的分化程度越高，RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率越低。
【小问3详解】进行植物组织培养时，需要进行无菌操作，需要对外植体进行消毒，对培养基及其他器械进行灭菌等；将消毒后的外植体接种在培养基上，通过控制培养基中各种激素的比例来控制细胞的分裂分化，先诱导茎尖脱分化形成原球茎，再转移至发芽培养基上诱导其发芽，然后转移至生根培养基上诱导其生根。
【小问4详解】由于椰子水中含有营养物质和激素，故增殖培养基中添加椰子水，原球茎会长得更饱满，但由于不同成熟度椰子的椰子水中营养物质和激素的含量存在差异，故对原球茎生长的促进效果不同。
【小问5详解】脱落酸主要由根冠和萎蔫的叶片合成，作用是抑制细胞分裂、促进气孔关闭、促进叶和果实衰老和脱落、维持种子休眠；高压蒸汽灭菌法处理的椰子水（B 组）使原球茎的休眠时间短于过滤除菌法处理的椰子水（A组），由于椰子水中有脱落酸、脱落酸促进休眠、脱落酸不耐高温，可推测B 组原球茎休眠时间短的原因是脱落酸被破坏。可增加一组实验：人工胚乳中先添加用高压蒸汽灭菌法处理的椰子水后加脱落酸，若原球茎的休眠时间比B组长，即可验证推测。
44. 癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。

（1）某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1，如图1。PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。单克隆抗体最主要的优点在于_____、_____等。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是_____。然后取小鼠的脾脏细胞用_____试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。
（2）一段时间后，将（1）所得细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，检测原理如上图。
①在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面制成_____，并加入多孔板培养槽中的_____（细胞、上清液），即待测样本。
②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与_____结合的酶标抗体洗去。
③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表_____。
（3）CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此，科研人员尝试构建既能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，诱导T细胞定向杀伤癌细胞，如图2．制备过程为：先将_____和_____分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，由于L链和H链的随机组合会_____。因此还需进行筛选才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。

（4）在肿瘤患者的治疗中，被动免疫治疗是指被动地将具有抗肿瘤活性的免疫制剂或细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗，该治疗方案适用于肿瘤晚期患者，除了单克隆抗体治疗外，还可以进行过继性细胞治疗，过继性细胞治疗相关过程如图所示：过继性细胞治疗中，从肿瘤患者体内获取的免疫细胞置于适宜环境下培养，培养过程中会出现分裂受阻，其原因主要有_____、_____、_____，培养过程中出现接触抑制现象时，可用_____酶处理贴壁细胞使之分散成单个细胞进行传代培养。

【答案】（1）①. 特异性强（或灵敏度高） ②. 可大量制备 ③. 刺激机体产生更多的浆细胞 ④. PEG
（2）①. 固相抗原 ②. 上清液 ③. 抗PD-1抗体抗 ④. PD-1抗体的量
（3）①. PSMA ②. CD28 ③. 产生多种抗体
（4）①. 细胞密度大 ②. 有害代谢物积累 ③. 培养液中营养物质缺乏 ④. 胰蛋白酶（或胶原蛋白）
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】 单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的优点；加强免疫可刺激机体产生更多的浆细胞，产生更多的抗体；可用PEG试剂诱导小鼠的脾脏细胞和骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。
【小问2详解】 ①在检测时需要将PD-1蛋白固定于周相载体表面制成固相抗原；单克隆抗体是分泌蛋白，分布在上清液中，所以在固定抗原上加入多孔板培养槽中的上清液，即待测样本。②加入酶标抗体后一段时间，为了排除干扰，则需要用洗涤剂将未与抗PD-1抗体结合的酶标抗体洗去。③PD-1蛋白与抗PD-1抗体的结合量越多颜色越深，所以加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表与抗PD-1抗体的量。
【小问3详解】 抗体具有特异性，所以为了获取既能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMAXCD28，则需要先将PSMA、CD28分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞，再诱导两种细胞融合；成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，由于L链和H链的随机组合会产生多种抗体，但所需的双特异性抗体PSMA×CD28是特定的L链和H链结合，因此还需进行筛选才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。
【小问4详解】 在动物细胞的培养时，由于细胞密度大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏，则培养过程中出现接触抑制现象时，可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理贴壁细胞，使之分散成单个细胞进行传代培养。
光照条件
接种干重g. L-l
收获干重g.I-l
紫杉醇含量%(干重)
光照
4.33
9.13
0.0070
黑暗
4.38
12.10
0.0164
菌株
十六烷基三甲基溴化铵培养基
十六烷基三甲基溴化铵—KH2PO4培养基
十六烷基三甲基溴化铵—KH2PO4—葡萄糖培养基
ATCC33028
+
+
+
2507
-
+
+
3526
+
+
+
6286
+
+
+