20251月内蒙古自治区普通高等学校招生考试适应性测试（八省联考）生物试题含解析

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注意事项：
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号、座位号填写在答题卡上，本试卷满分100分。
2．作答时，将答案写在答题卡上。写在试卷上无效。
3．考试结束后，将试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。
1. 关于膜融合的相关对象，下列叙述正确的是（ ）
A. 胰蛋白酶分泌过程中，内质网产生的囊泡会与细胞膜融合
B. 克隆羊过程中，电融合法促进供体细胞核和卵细胞融合
C. 制备单克隆抗体过程中，将骨髓瘤细胞和T细胞融合
D. 清除衰老细胞器过程中，会存在囊泡与溶酶体的融合
【答案】D
【解析】
【分析】分泌蛋白的合成、加工和运输过程：最初是在核糖体中由氨基酸形成肽链，肽链进入内质网进行加工，形成有一定空间结构的蛋白质，再到高尔基体，高尔基体对其进行进一步加工，然后形成囊泡分泌到细胞外。该过程消耗的能量由线粒体提供。
【详解】A、胰蛋白酶分泌过程中，内质网产生的囊泡会与高尔基体膜融合，A错误；
B、克隆羊过程中，供体细胞被注入卵母细胞后，可通过电融合法促进细胞融合，而非促进细胞核与卵细胞融合，B错误；
C、制备单克隆抗体过程中，将骨髓瘤细胞和B细胞融合，C错误；
D、溶酶体含多种水解酶，能够清除衰老细胞器，清除衰老细胞器过程中，会存在囊泡与溶酶体的融合，D正确。
故选D。
2. 大兴安岭林区某鹿科动物是国家Ⅱ级重点保护野生动物，对维持当地生物多样性有重要作用。下列保护措施不当的是（ ）
A. 建立保护区，对其种群实施易地保护B. 开展当地生态修复，提高环境承载力
C. 对受伤个体开展救助并及时放归野外D. 建立生态廊道，防止其种群遗传衰退
【答案】A
【解析】
【分析】自然保护区就是就地保护该地区珍贵稀有的动植物资源和生存环境，迁地保护则是把濒临灭绝的珍稀物种迁移到动物园、科研所等进行保护和繁殖，对于珍稀濒危物种，国家立法禁止一切形式的猎采并买卖。
【详解】A、建立保护区，对其种群实施就地保护，A错误；
B、开展当地生态修复，提高环境承载力，增加当地生物多样性，B正确；
C、对受伤个体开展救助并及时放归野外，可以保护生物物种多样性，C正确；
D、通过建立生态廊道，消除地理隔离，使同一物种的生物能在不同小生境间相互迁移，有利于减少种群的变异量，提高遗传多样性，D正确。
故选A。
3. 通过生态工程技术构建小型水生人工生物群落，可有效地去除水体中过量的N、P，解决水体富营养化问题。下列叙述错误的是（ ）
A. 选择物种时应优先考虑使用本地物种
B. 水体中N、P可被植物吸收参与生命活动
C. 应防止水体中的鱼类等动物啃食群落中的植物
D. 科学的群落空间结构可提高富营养化成分的去除效率
【答案】C
【解析】
【分析】生物群落的结构包括空间结构—垂直结构和水平结构：群落垂直结构，在垂直方向上，大多数群落具有明显的分层现象；植物主要受阳光的影响，动物主要受食物和栖息空间的影响；群落水平结构，由于地形的变化、土壤湿度和盐碱的差异、光照强度的不同等因素，不同地段往往分布着不同的种群，同一地段上种群密度也有差异。
【详解】A、为防止物种入侵，因此选择物种时优先考虑使用本地物种，A正确；
B、N、P元素可以参与构成植物体的酶等成分，因此水体中N、P可被植物吸收参与生命活动，B正确；
C、水体中的鱼类等动物可以啃食群落中的植物，从而加快物质的循环，C错误；
D、科学的群落空间结构，可以充分的利用空间，增加水体的生物多样性，提高富营养化成分的去除效率，D正确。
故选C。
4. 草原生态系统的利用和管理方式有放牧、刈割（距地面一定高度割除植物地上部分）和围封等。下列叙述错误的是（ ）
A. 适度放牧能促进草原生态系统的物质循环
B. 高强度刈割会引起草场退化
C. 长期围封禁牧能提高草原生态系统的能量利用率
D. 对草原生态系统利用的强度决定了其演替方向
【答案】C
【解析】
【分析】演替类型：（1）初生演替：发生于以前没有植被覆盖过的原生裸地上的群落演替叫做初生演替，如光裸岩石上进行的演替；（2）次生演替：在次生裸地（原群落被破坏、有植物繁殖体）上发生的演替，如火灾过后的草原发生的演替。
【详解】A、适度放牧过程消费者可以以植物为食，促进植物的生长等过程，能促进草原生态系统的物质循环，A正确；
B、高强度刈割会导致生态环境的承载力改变，可能会引起草场退化，B正确；
C、长期围封禁牧导致生产者与消费者的平衡被破坏，不能提高草原生态系统的能量利用率，C错误；
D、对草原生态系统利用的强度决定了其演替方向，如适度放牧可促进多样性增加，而高强度刈割可能导致草原退化，D正确。
故选C。
5. 下列关于植物细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 诱导愈伤组织形成和后续培养过程中均需提供适宜的温度和光照
B. 诱导愈伤组织再分化需改变激素的浓度和比例
C. 获得的试管苗通常直接移栽大田
D. 获得的脱毒苗具有抗病毒能力
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。
【详解】A、诱导愈伤组织形成过程中不需要光照，A错误；
B、生长素与细胞分裂素比值高时有利于促进分化形成根，细胞分裂素与生长素比值高时，有利于促进分化形成芽，生长素和细胞分裂素的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向，因此诱导愈伤组织再分化需改变激素的浓度和比例，B正确；
C、获得的幼苗需要先移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长状后再移栽到大田中，C错误；
D、茎尖等分裂旺盛部位无病毒感染，利用茎尖分生组织能培养出无病毒且保持优良性状的幼苗，即脱毒苗，脱毒苗不等于抗毒苗，即获得的脱毒苗不具备抗病毒能力，D错误。
故选B。
6. 动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。下列叙述正确的是（ ）
A. 配制细胞培养基时，加血清（含细胞生长必需蛋白）和氯霉素后湿热灭菌
B. 在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素
C. 考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，直接涂布在平板上培养后计数
D. 采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染
【答案】B
【解析】
【分析】微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌是常用的防止杂菌入侵的方法。
微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、配制细胞培养基时，湿热灭菌后通过过滤灭菌加入血清（含细胞生长必需的蛋白）和氯霉素，A错误；
B、在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素，保证动物细胞的正常生长，同时抑制细菌的生长，B正确；
C、考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，稀释后涂布在平板上培养，待菌落数目稳定后计数，C错误；
D、采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作都不能清除“黑胶虫”污染，D错误。
故选B。
7. 下列有关牛体外受精的叙述错误的是（ ）
A. 精子需经过获能步骤，才可用于体外受精
B. 卵母细胞需培养至MⅡ期，与精子结合完成受精
C. 体外受精需加入聚乙二醇等诱导精卵结合
D. 精子入卵后卵细胞膜发生生理反应，阻止其他精子进入
【答案】C
【解析】
【分析】哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能和受精等几个主要步骤。
【详解】A、体外受精时，采集到的成熟精子经获能处理后才具有受精能力，A正确；
B、动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力，B正确；
C、聚乙二醇常用于细胞融合，而不是体外受精过程，C错误；
D、卵细胞膜反应是指精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程，这是防止多精入卵的第二道屏障，D正确。
故选C。
8. 蒙古羊对北方寒冷环境有很强的适应性，下列有关其冬季体温调节叙述错误的是（ ）
A. 冷觉感受器兴奋，下丘脑-垂体-甲状腺轴被激活
B. 运动神经元兴奋使骨骼肌战栗性产热增多
C. 交感神经兴奋使皮肤血管收缩，散热减少
D. 甲状腺激素分泌增加，代谢旺盛，利于贮存脂肪
【答案】D
【解析】
【分析】代谢产热是机体热量的主要来源。在安静状态下，人体主要通过肝、脑等器官的活动提供热量；运动时，骨骼肌成为主要的产热器官。而皮肤是人体最主要的散热器官，皮肤散热主要通过辐射（如以红外线等形式将热量传到外界）、传导（机体热量直接传给同它接触的物体）、对流（通过气体来交换热量）以及蒸发（如汗液的蒸发）的方式进行。体温调节是通过调节上述器官的产热和散热实现的。
【详解】A、冷觉感受器兴奋，下丘脑-垂体-甲状腺轴被激活，分泌甲状腺激素，促进产热增加，A正确；
B、运动神经元兴奋使骨骼肌不自主战栗，从而增加产热，B正确；
C、交感神经兴奋使皮肤血管收缩，血流量减少，散热减少，C正确；
D、甲状腺激素分泌增加，代谢旺盛，葡萄糖用于氧化分解，转化为脂肪的糖类减少，不利于脂肪的贮存，D错误。
故选D。
9. 某人近期体重异常下降，空腹体检结果显示血糖明显高于参考值，尿中出现葡萄糖。下列关于该患者的叙述正确的是（ ）
A. 集合管内液体的渗透压升高，促进水的重吸收
B. 机体缺水，抗利尿激素释放增多，促进水的重吸收
C. 感到口渴后，大量饮水，血浆渗透压上升
D. 体重下降的原因是尿量增加，体液渗透压上升
【答案】B
【解析】
【分析】人体的水平衡调节过程：当人体失水过多、饮水不足或吃的食物过咸时→细胞外液渗透压升高→下丘脑渗透压感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素增多→肾小管、集合管对水分的重吸收增加→尿量减少。同时大脑皮层产生渴觉（主动饮水）。
【详解】A、该患者尿中出现葡萄糖，会有大量水分随之排出，说明集合管对水的重吸收减弱，A错误；
B、水分随血糖排出，尿液中渗透压高，肾小管和集合管对水的重吸收减弱，表现为多尿，血浆渗透压升高，抗利尿激素分泌增多，B正确；
C、感到口渴后，大量饮水，细胞外液渗透压降低，C错误；
D、体重下降的原因是血糖被排出无法利用， 机体消耗脂肪，D错误。
故选B。
10. 为探究植物生长调节剂6-BA对月季种子萌发的影响，用不同浓度6-BA浸种一段时间后检测部分指标，结果见下表。下列叙述正确的是（ ）
A. 6-BA是通过为种子提供营养物质来打破种子的休眠
B. 6-BA能通过影响脱落酸和赤霉素的比值影响月季种子发芽率
C. 6-BA浸种浓度增至200mg·L-1，会对月季种子萌发产生抑制
D. 探究6-BA最佳浸种浓度，应在50~100mg·L-1增设浓度梯度
浸种浓度（mg·L-1）
检测指标
0
50
100
200
发芽率（%）
22.2
46.7
40.0
26.7
赤霉素含量（ng·g-1）
180
305
305
253
脱落酸含量（ng·g-1）
530
380
390
340
【答案】B
【解析】
【分析】从表格中看出，随着6-BA浓度增加，种子发芽率和赤霉素先升高后降低，脱落酸含量不断下降。
【详解】A、6-BA是植物生长调节剂，可以作为信号分子调节植物生长，不能为种子萌发提供营养，A错误；
B、从表格中看出，随着添加6-BA浓度的不同，种子中赤霉素和脱落酸含量不同，因此种子萌发率不同，可以推测6-BA能通过影响脱落酸和赤霉素的比值影响月季种子发芽率 ，B正确；
C、6-BA浸种浓度增至200mg·L-1，种子萌发率比不添加6-BA高，因此此时还是说明6-BA对种子萌发有促进作用，C错误；
D、种子萌发率最高是在6-BA浓度为100mg·L-1时，所以为探究6-BA最佳浸种浓度，应在0~100mg·L-1增设浓度梯度，D错误。
故选B。
11. 乳铁蛋白是一种分泌型糖蛋白，由一条多肽链折叠形成具有叶状空间结构的蛋白质分子，能携带Fe3+共同进入细胞。下列叙述错误的是（ ）
A. 分泌到胞外的乳铁蛋白被用来形成糖被参与信息传递
B. 乳铁蛋白携带Fe3+进入细胞的过程需要消耗能量
C. 乳铁蛋白加工的场所是内质网和高尔基体
D. 乳铁蛋白多肽链形成的叶状结构存在氢键的作用
【答案】A
【解析】
【分析】分泌蛋白合成、加工和运输过程参与的细胞器有核糖体、内质网和高尔基体、线粒体。
【详解】A、乳铁蛋白是一种分泌型糖蛋白，能携带Fe3+共同进入细胞，说明乳铁蛋白不是用来形成糖被参与信息传递，而是起到运输Fe3+进入细胞的作用，A错误；
B、乳铁蛋白为大分子物质，进入细胞的方式为胞吞，因此乳铁蛋白携带Fe3+进入细胞的过程需要消耗能量，B正确；
C、乳铁蛋白是一种分泌蛋白，其加工的场所是内质网和高尔基体，C正确；
D、乳铁蛋白是一种分泌型糖蛋白，由一条多肽链折叠形成具有叶状空间结构的蛋白质分子，氢键的作用使得叶状结构的形成，D正确。
故选A。
12. 某酵母菌以葡萄糖为底物的3种呼吸途径中，部分物质变化如图，下列叙述正确的是（ ）

A. 途径二葡萄糖中的能量最终都转移到了乙醇和少量ATP中
B. 途径二和途径三的存在，降低了酵母菌对环境的适应力
C. 酵母菌仅通过途径三不能获得满足生长必需的能量
D. 生物界中，途径一仅发生在具有线粒体的细胞中
【答案】C
【解析】
【分析】有氧呼吸是在氧气充足的条件下，细胞彻底氧化分解有机物产生二氧化碳和水同时释放能量的过程，有氧呼吸的第一阶段是葡萄糖酵解产生丙酮酸和还原氢的过程，发生在细胞质基质中，第二阶段是丙酮酸和水反应形成二氧化碳和还原氢的过程，发生在线粒体基质中，第三阶段是还原氢与氧气结合形成水的过程，发生在线粒体内膜上；无氧呼吸是在无氧条件下，有机物不彻底氧化分解，产生二氧化碳和酒精或者乳酸，同时释放少量能量的过程，第一阶段是葡萄糖酵解形成丙酮酸和还原氢，第二阶段是丙酮酸和还原氢在不同酶的作用下形成二氧化碳和酒精或者乳酸，两个阶段都发生在细胞质基质中。
【详解】A、途径二为无氧呼吸，无氧呼吸中的能量大部分储存乙醇中，少部分能量转移到ATP，还有一部分以热能散失，A错误；
B、径二和途径三的存在，使酵母菌在无氧环境中也能生存，提高了酵母菌对环境的适应力，B错误；
C、途径三为无氧条件，产生的ATP较少，因此仅通过途径三不能获得满足生长必需的能量，C正确；
D、途径一过程也可发生在不含线粒体的细胞中，如硝化细菌、蓝细菌等，D错误。
故选C。
13. UUU和UUC为苯丙氨酸（Phe）密码子，CCU、CCC、CCA和CCG为脯氨酸（Pr）密码子，AAA和AAG为赖氨酸（Lys）密码子。以下模板链中，能表达出Phe-Pr-Lys三肽的是（ ）
A. 5'-CTTCGGGAA-3'B. 5'-AAGGGCTTC-3'
C. 5'-ATCCCGAAG-3'D. 5'-CAACGGGTT--3'
【答案】A
【解析】
【分析】转录过程以四种核糖核苷酸为原料，以DNA分子的一条链为模板，在RNA聚合酶的作用下消耗能量，合成RNA；翻译过程以氨基酸为原料，以转录过程产生的mRNA为模板，在酶的作用下，消耗能量产生多肽链。多肽链经过折叠加工后形成具有特定功能的蛋白质。
【详解】A、模板链为5'-CTTCGGGAA-3'，根据碱基互补配对可知mRNA序列为3'-GAAGCCCUU-5'，翻译时核糖体沿着mRNA从5'移向3'端，因此mRNA5'-UUCCCGAAG-3'，则翻译出的三肽序列为Phe-Pr-Lys，A正确；
B、模板链为5'-AAGGGCTTC-3'，根据碱基互补配对可知mRNA序列为3'-UUCCCGAAG-5'，翻译时核糖体沿着mRNA从5'移向3'端，因此mRNA5'-GAAGCCCUU-3'，则翻译出的三肽序列为谷氨酸-丙氨酸-亮氨酸，B错误；
C、模板链为5'-ATCCCGAAG-3'，根据碱基互补配对可知mRNA序列为3'-UAGGGCUUG-5'，翻译时核糖体沿着mRNA从5'移向3'端，因此mRNA5'-GUUCGGGUA-3'，则翻译出的三肽序列为缬氨酸-精氨酸-缬氨酸，C错误；
D、模板链为5'-CAACGGGTT-3'，根据碱基互补配对可知mRNA序列为3'-GUUGCCCAA-5'，翻译时核糖体沿着mRNA从5'移向3'端，因此mRNA5'-AACCCGUUG-3'，则翻译出的三肽序列为天冬氨酸-Pr-亮氨酸，D错误。
故选A。
14. 正常小鼠的Sry基因只位于Y染色体上，是雄性性腺形成的关键基因。有一只小鼠的性染色体是XX，其中一条X上带有Sry基因。下列叙述正确的是（ ）
A. 其母本卵细胞形成过程中发生了染色体易位B. 其父本精子形成过程中发生了染色体易位
C. 其母本卵细胞形成过程中发生了基因突变D. 其父本精子形成过程中发生了基因突变
【答案】B
【解析】
【分析】染色体结构变异包括缺失、重复、易位和倒位。
【详解】由题意可知，正常小鼠的Sry基因只位于Y染色体上，是雄性性腺形成的关键基因，有一只小鼠的性染色体是XX，其中一条X上带有Sry基因，其两条X染色体，从父母双方个获得一条，而来自母本的X染色体正常，来自父本的X染色体带有Sry基因，说明是在其父本精子形成过程中发生了染色体易位，ACD错误，B正确。
故选B。
15. 锥实螺壳的右旋和左旋是一对相对性状，由一对等位基因（T/t）控制，右旋为显性。已知t基因没有表
达产物。下列实验结果中能直接支持“子代螺壳的转向不受自身的基因型控制，而是卵的细胞质中母本T基因的表达产物决定右旋”的是（ ）
A. 取tt螺卵的细胞核植入去核的TT螺卵细胞，与TT螺精子受精，发育成右旋螺
B. 取TT螺卵的细胞核植入去核的tt螺卵细胞，与TT螺精子受精，发育成左旋螺
C. 将tt螺卵的细胞质注入TT螺卵细胞，与tt螺精子受精，发育成右旋螺
D. 将TT螺卵的细胞质注入tt螺卵细胞，与tt螺精子受精，发育成右旋螺
【答案】D
【解析】
【分析】基因分离定律的实质：杂合体内，等位基因在减数分裂生成配子时随同源染色体的分开而分离，进入两个不同的配子，独立的随配子遗传给后代。
【详解】实验目的是验证子代螺壳的转向不受自身的基因型控制，而是卵的细胞质中母本T基因的表达产物决定右旋，实验自变量是细胞质中是否有母本T基因的表达产物，因此实验思路是将TT螺卵的细胞质注入tt螺卵细胞，与tt螺精子受精，由于细胞质中含有卵的细胞质中母本T基因的表达产物，所以将发育成右旋螺，D正确，ABC错误。
故选D。
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分，在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。
16. 某种芽孢酸性环境下不萌发，碱性环境下萌发。为探究其机理，研究不同pH下两种促进芽孢萌发的酶（M和N）的活性和结构变化。发现酸性环境下M的活性和α-螺旋（肽链有规律的盘曲）含量增高，而碱性环境下N的活性和α-螺旋的含量增高，下列叙述正确的是（ ）
A. 碱性环境中N为芽孢萌发供能来降低其催化反应的活化能
B. 酸性环境主要通过改变氨基酸序列影响M的α-螺旋含量
C. 碱性环境主要通过调节N活性来影响该种芽孢萌发
D. 酸碱环境调节芽孢萌发过程中M、N活性均受到pH影响
【答案】CD
【解析】
【分析】酶是由活细胞产生的具有催化作用的有机物，绝大多数酶是蛋白质，极少数酶是RNA。酶的作用机理：能够降低化学反应的活化能。
【详解】A、酶的作用机理是降低化学反应的活化能，不能为化学反应供能，因此N不能为芽孢萌发供能，A错误；
B、酸性环境会使蛋白质的空间结构改变，不会改变蛋白质中氨基酸序列，因此酸性环境不能通过改变氨基酸序列影响M的α-螺旋含量，B错误；
C、根据题意可知，酸性环境下M的活性和α-螺旋（肽链有规律的盘曲）含量增高，而碱性环境下N的活性和α-螺旋的含量增高，即酸性和碱性条件下α-螺旋的含量都增高，但酸性环境下芽孢不萌发，碱性环境下萌发，因此可推测碱性环境主要通过调节N活性来影响该种芽孢萌发，C正确；
D、pH可影响酶的活性进而影响反应速率，因此酸碱环境调节芽孢萌发过程中M、N活性均受到pH影响，D正确。
故选CD。
17. 下表是对短花针茅草原绵羊放牧系统能量流动的部分研究结果。下列叙述错误的是（ ）
注：平均载畜量单位为只羊·公顷-1·半年-1；能量单位为千焦·只羊-1·天-1
A. 呼吸代谢能是未被绵羊利用的能量
B. 绵羊粪便中的能量是绵羊流向草原的能量
C. 载畜量为1.3时，绵羊用于生长、发育和繁殖的能量约为2.27×104
D. 载畜量为2.0时，短花针茅草原的能量得到更充分的利用
【答案】ABC
【解析】
【分析】能量流动的途径是沿着食物链和食物网传递的。能量流动的特点是：单向流动，逐级递减的，相邻两个营养级之间的传递效率通常为10%～20%之间，相邻两个营养级的传递效率=能量传递效率=下一营养级的同化量/上一营养级的同化量×100%。
【详解】A、未被利用的能量是指未被自身呼吸作用消耗、也未被下一个营养级和分解者利用的能量，呼吸代谢能是指被绵羊呼吸作用散失的能量，而非未被绵羊利用的能量，A错误；
B、绵羊粪便中的能量不属于绵羊的同化量，而属于草的同化量，因此绵羊粪便中的能量不是绵羊流向草
平均载蓄量
生长季草原植物光能利用率
草原植物供给能
（×104）
摄入能
（×104）
粪便中的能量
（×104）
呼吸代谢能
（×104）
1.3
0.27%
8.86
3.22
0.95
1.86
2.0
0.25%
5.28
2.62
0.92
1.39
3.0
0.17%
3.32
1.86
0.94
0.76
原的能量，而是草的同化量流向分解者的部分，B错误；
C、摄入量－粪便量=同化量，同化量－呼吸作用散失的能量=用于生长、发育和繁殖的能量，因此载畜量为1.3时，绵羊用于生长、发育和繁殖的能量约为（3.22－0.95－1.86）×104=0.41×104，C错误；
D、根据表格信息可知，载畜量为2.0时，动物的同化量÷草原植物供给能×100%=（2.62－0.92）÷5.28×100%≈32.2%，而载畜量为3.0时，动物的同化量÷草原植物供给能×100%=（1.86－0.94）÷3.32×100%≈27.7%，载畜量为1.3时，动物的同化量÷草原植物供给能×100%=（3.22－0.95）÷8.86×100%≈25.6%，所以载畜量为2.0时，短花针茅草原的能量得到更充分的利用，D正确。
故选ABC。
18. 谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述正确的是（ ）
A. 提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酸合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺产量
B. 发酵初期控制pH为7.0，后调为5.6，有利于提高L-谷氨酰胺产量
C. 通过显微镜观察，可以判断发酵过程中是否发生球状细菌污染
D. 发酵结束后，采用过滤、沉淀的方法将菌体分离和干燥即可获得产品
【答案】B
【解析】
【分析】1、发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。发酵过程：菌种选育→菌种的扩大培养→培养基的配制→灭菌和接种→发酵条件的控制→分离和提纯。2、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。
3、产品不同，分离提纯的方法一般不同。（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来。（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
4、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
5、发酵过程般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、由图可知，提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酰胺合成酶活性有利于提高L-谷氨酰胺产量，但谷氨酸合成酶会使L-谷氨酰胺再转化为L-谷氨酸，反而降低L-谷氨酰胺产量，A错误；
B、谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，谷氨酰胺合成酶最适pH为5.6，因此发酵初期控制pH为7.0，
有利于增加谷氨酸棒状杆菌的数量，后调为5.6，有利于提高谷氨酰胺合成酶的活性，进而提高L-谷氨酰胺产量，B正确；
C、通过显微镜观察，不能判断发酵过程中是否发生球状细菌污染，可利用稀释涂布平板法，通过观察菌落特征，判断是否发生球状细菌污染，C错误；
D、L-谷氨酰胺是细胞代谢产物，对细胞代谢产物可通过提取、分离和纯化措施来获得产品，D错误。
故选B。
19. 小鼠胰岛素样生长因子Ⅱ基因G和其受体基因R均位于常染色体上，突变或不表达会导致胚胎发育和生长迟缓。已知父源G基因在仔鼠表达，而母源G基因不表达；父源R基因在仔鼠不表达，而母源R基因表达。下列推论正确的是（ ）
A. GgRR小鼠互相交配，能得到正常体型和矮小仔鼠，比例约1:1
B. GGRr小鼠互相交配，能得到正常体型和矮小仔鼠，比例约3:1
C. Gg雌性小鼠与Rr雄性小鼠交配，不能得到正常体型的仔鼠
D. Gg雄性小鼠与Rr雌性小鼠交配，能得到正常体型的仔鼠
【答案】ACD
【解析】
【分析】1、基因分离定律的实质：在杂合子的细胞中，位于一对同源染色体上的等位基因，具有一定的独立性；生物体在进行减数分裂形成配子时，等位基因会随着同源染色体的分开而分离，分别进入到两个配子中，独立地随配子遗传给后代。
2、基因自由组合定律的实质是：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或自由组合是互不干扰的；在减数分裂过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。
【详解】A、GgRR小鼠互相交配，产生后代的基因型为GGRR（正常）、GgRR（矮小）、GgRR（正常）、ggRR（矮小），可见子代中能得到正常体型和矮小仔鼠，比例约1∶1，A正确；
B、GGRr小鼠互相交配，产生后代的基因型为GGRR（正常）、GGRr（矮小）、GGRr（正常）、GGrr（矮小），能得到正常体型和矮小仔鼠，比例约1∶1，B错误；
C、Gg雌性小鼠能产生含有G和g的卵细胞，且G基因不表达，Rr雄性小鼠能产生含有R和r的精子，且R基因也不表达，因而二者交配，不能得到正常体型的仔鼠，C正确；
D、Gg雄性小鼠产生含有G和g的精子，且G基因正常表达，与Rr雌性小鼠能产生含有R和r的卵细胞，且R基因正常表达，因而能得到正常体型的仔鼠，D正确。
故选ACD。
20. 霍乱弧菌毒素进入肠道后，经肠黏膜组织激活免疫系统产生特异性抗体，该过程中霍乱弧菌毒素不进入
血液循环，为研究家兔被霍乱弧菌毒素口服免疫后产生特异性抗体的过程和特点，进行图中实验，①②③为正常家兔，④为去除胸腺的家兔，下列叙述正确的是（ ）

A. 兔①与兔③体内细胞因子参与抗体产生
B. 第14天兔②体内可以检测到抗体
C. 第28+14天兔②与第14天兔①的抗体水平相同
D. 第60天兔③与兔④的抗体水平相同
【答案】BD
【解析】
【分析】体液免疫过程：①一些病原体可以和B细胞接触，为激活B细胞提供第一个信号；②树突状细胞、B细胞等抗原呈递细胞摄取病原体，而后对抗原进行处理，呈递在细胞表面，然后传递给辅助性T细胞；③辅助性T细胞表面特定分子发生变化并与B细胞结合，这是激活B细胞的第二个信号；辅助性T细胞开始分裂、分化，并分泌细胞因子；④B细胞受到两个信号的刺激后开始分裂、分化，大部分分化为浆细胞，小部分分化为记忆B细胞。细胞因子能促进B细胞的分裂、分化过程。⑤浆细胞产生和分泌大量抗体，抗体可以随体液在全身循环并与病原体结合。抗体与病原体的结合可以抑制病原体的增殖或对人体细胞的黏附。
【详解】A、兔③与兔②发生了血浆互换，兔③直接获得了兔②血浆中的抗体，霍乱弧菌毒素不进入血液循环，因此兔③体内细胞因子没有参与抗体产生，A错误；
B、由图可知，7~14天抗体水平还在升高，说明第8天与兔③发生了血浆互换后兔②体内还会产生抗体，因此第14天兔②体内可以检测到抗体，B正确；
C、第28天用相同抗原再次免疫兔②，即兔②体内发生二次免疫，体内记忆细胞数量和抗体水平都高于初次免疫，即第28+14天兔②比第14天兔①的抗体水平高，C错误；
D、由图可知，28天时抗体水平为0，即抗体在生物代谢过程会消失，因此第60天兔③体内水平为0，B
细胞的活化需要辅助性T细胞表面发生变化的特定分子与B细胞结合，④为去除胸腺的家兔，体内不能发生特异性免疫，因此兔④体内抗体水平为0，即第60天兔③与兔④的抗体水平相同，都为0，D正确。
故选BD。
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21. 为提高温室反季种植番茄的产量，探究相同光照强度下不同红光与蓝光的比例及光周期（24h中光/暗时长比例）对光合作用等生理过程的影响，结果如下图。回答下列问题：
（1）光合色素吸收、传递光能，在类囊体薄膜上经过一系列转化和电子传递，将能量储存在______、______中。这两种物质在______（填场所）中发挥作用。
（2）实验发现1:0.8组的光合速率最高，结合图1结果和色素对光的吸收光谱，分析可能的原因是______和______。
（3）在类囊体薄膜上，光合色素需要与相关蛋白质组成捕光色素蛋白复合体来行使功能。结合图2分析，在适宜的光周期下，细胞中感受光周期的光敏色素吸收______光后，将信号传入______增加______基因的表达，提高叶绿体对光的捕获能力。
（4）在北方某地，冬季日照时长约为10h。利用上述实验结果，给出对温室种植番茄进行补光增产的关键措施______。
【答案】（1） ①. ATP ②. NADPH ③. 叶绿体基质
（2） ①. 1：0.8条件下，叶绿素含量最高 ②. 叶绿素主要吸收红光和蓝紫光，类胡萝卜素主要吸收红光
（3） ①. 红光 ②. 细胞核 ③. 调控叶绿素合成
（4）调整光质红光与蓝光为1:0.8，以提升叶绿素含量，从而提高光合速率，达到增产的目的
【解析】
【分析】光合作用包括光反应和暗反应两个阶段：光反应发生场所在叶绿体的类囊体薄膜上，色素吸收光能、传递光能，并将一部分光能用于水的光解生成NADPH和氧气，另一部分光能用于合成ATP；暗反应发生场所是叶绿体基质中，首先发生二氧化碳的固定，即二氧化碳和五碳化合物结合形成两分子的三碳化合物，三碳化合物在光反应产生的NADPH和ATP的作用下被还原，进而合成有机物。
【小问1详解】
光合色素吸收、传递光能，在类囊体薄膜上经过一系列转化和电子传递，即光反应的过程，将能量储存在ATP和NADPH中，这两种物质在暗反应过程中还原C3，该反应发生在叶绿体基质。
【小问2详解】
由图1可知，各光质比例下，叶绿素相差较大，但类胡萝卜素相差不大，且在红光与蓝光比例为1：0.8条件下，叶绿素含量最高，叶绿素主要吸收红光和蓝紫光，类胡萝卜素主要吸收红光，所以该条件下光合速率最高。
【小问3详解】
光敏色素主要吸收红光和远红光，在该光质条件下，光敏色素吸收红光，由图2可知，在适宜的光周期下，叶绿素含量显著提升，说明光敏色素吸收红光后，将信号传入细胞核，增加调控叶绿素合成的基因的表达，提高叶绿素含量，从而提高叶绿体对光的捕获能力。
【小问4详解】
由图2可知，光照在8-12h时，叶绿素含量相对较低，此时可通过调整光质红光与蓝光为1:0.8，以提升叶绿素含量，从而提高光合速率，达到增产的目的。
22. 为寻找适宜干旱地区生态修复的物种，研究者在荒漠区开展生态调查。回答下列问题：
（1）植物种群密度调查应采用的方法是______，通常采用五点取样和等距取样，其目的是保证取样的______。
（2）调查发现荒漠区分布着红砂建群的植物群落。珍珠柴常与红砂伴生，两者聚集成丛可以降低蒸腾失水。从这一角度分析，它们的种间关系是______。
（3）下图是红砂和珍珠柴地上与地下部分的形态结构示意图，从地上与地下部分的结构分析，它们适应干旱环境的原因是______。
（4）从红砂与珍珠柴的根系空间分布可以看出，两种植物地下部分对资源占用不同，判断这两种植物的地下部分发生了______分化。
（5）当干旱逐渐加剧时，______（填“红砂”或“珍珠柴”）的数量会首先减少，其原因是______。因此，进行荒漠区生态修复时，要根据当地的干旱程度选择适宜的物种，这主要遵循了生态工程的______原理。
【答案】（1） ①. 样方法 ②. 随机性
（2）原始合作 （3）红砂和珍珠柴冠幅直径小，地上部分少，可以降低蒸腾作用，减少水分的散失；地下部分根幅直径大，根系发达，吸水能力强，可加强对水的摄取，因此更适应干旱环境。
（4）生态位 （5） ①. 红砂 ②. 珍珠柴的根系更发达，吸水能力更强，在竞争水的过程中占优势 ③. 协调
【解析】
【分析】1、种群密度的调查方法主要有样方法和标记重捕法，样方法主要适用于对植物和活动能力弱的动物的调查。用样方法调查植物的种群密度时，应随机取样，样本量足够大，调查不同的植物类型时样方面积应不同，样方大小根据调查的对象来确定，调查双子叶草本植物时，样方通常为lm×lm，常用各样方的平均值估算种群密度。
2、种间关系（不同种生物之间的关系）：（1）互利共生：两种生物长期共同生活在一起，相互依存，彼此有利。例如，豆科植物与根瘤菌之间：植物向根瘤菌提供有机养料，根瘤菌则将空气中的氮气转变为含氮的养料，供植物利用。（2）捕食 ：一种生物以另一种生物为食的现象。例如，翠鸟捕鱼（3）种间竞争：两种或更多种生物共同利用同样的有限资源和空间而产生的相互排斥的现象。例如，大小草履虫；水稻与稗草等。（4）寄生：一种生物从另一种生物(宿主)的体液组织或已消化的物质中获取营养并通常对宿主产生危害的现象。例如，马蛔虫与马。（5）原始合作：两种生物共同生活在一起时，双方都受益，但分开后，各自也能独立生活。例如，海葵固着于寄居蟹的螺壳上，寄居蟹的活动，可以使海葵更有效地捕食；海葵则用有毒的刺细胞为寄居蟹提供保护。
3、生态工程所遵循的基本原理为：整体、协调、循环、自生等。①自生：由生物组分而产生的自组织、自我优化、自我调节、自我更新和维持就是系统的自生。遵循自生原理，需要在生态工程中有效选择生物组分并合理布设。②循环：循环是指在生态工程中促进系统的物质迁移与转化，既保证各个环节的物质迁移顺畅，也保证主要物质或元素的转化率较高。③协调：处理好生物与环境、生物与生物的协调与平衡，需要考虑环境容纳量。④整体：遵循整体原理，首先要遵从从自然生态系统的规律，各组分之间要有适当的比例，不同组分之间应构成有序的结构，通过改变和优化结构，达到改善系统功能的目的。
【小问1详解】
样方法主要适用于对植物和活动能力弱的动物的调查，因此植物种群密度调查应采用的方法是样方法，取样方法为五点取样和等距取样，其目的是保证取样的随机性，不掺入主观因素。
【小问2详解】
珍珠柴常与红砂伴生，两者聚集成丛可以降低蒸腾失水，两种生物共同生活在一起时，双方都受益，但分开后，各自也能独立生活，因此珍珠柴常与红砂伴生的种间关系为原始合作。
【小问3详解】
红砂和珍珠柴冠幅直径小，地上部分少，可以降低蒸腾作用，减少水分的散失；地下部分根幅直径大，根系发达，吸水能力强，可加强对水的摄取，因此更适应干旱环境。
【小问4详解】
一个物种在群落中的地位或作用，包括所处的空间位置，占用资源的情况，以及与其他物种的关系等，称为这个物种的生态位。从红砂与珍珠柴的根系空间分布可以看出，两种植物地下部分对资源占用不同，可知两种植物的地下部分发生了生态位分化。
【小问5详解】
由图可知，与珍珠柴相比，红砂的根系更发达，吸水能力更强，因此当干旱逐渐加剧时红砂的数量会首先减少。协调原理是指处理好生物与环境、生物与生物的协调与平衡，需要考虑环境容纳量，进行荒漠区生态修复时，要根据当地的干旱程度选择适宜的物种，遵循了生态工程的协调原理。
23. 体育锻炼能缓解焦虑。为研究其机制，利用慢性束缚应激模型（CRS）小鼠和正常小鼠做了系列实验，结果见下图，已知SNAP91为突触蛋白，乳酸化（和乳酸通过共价键结合）后功能改变：DCA是一种乳酸生成抑制剂，回答下列问题：
（1）图1实验中①②③组的结果能说明______。①②③④组的结果还不足以证明运动产生的乳酸能缓解CRS小鼠焦虑行为，为了进一步完善实验，需增设第⑤组，写出设计思路______。
（2）测得运动后CRS小鼠大脑前额叶中乳酸化SNAP91表达量上升，突触小泡的数量增加、突触后膜增厚。因此，乳酸化的SNAP91使突触后膜动作电位频率提高，其原因是突触小泡的变化使______，与突触后膜的受体结合导致______。该突触传递过程中的信号变化是______。
（3）将SNAP91乳酸化位点突变失活后，突触后膜不容易兴奋。结合图2分析，其原因是______。
（4）综上所述，加强运动可使CRS小鼠在______的结构和功能上改变进而缓解焦虑。
【答案】（1） ①. 注射乳酸能够缓解CRS小鼠焦虑行为 ②. CRS＋乳酸＋跑动
（2） ①. 突触前膜释放神经递质 ②. 钠离子内流产生动作电位 ③. 电信号→化学信号→电信号
（3）SNAP91乳酸化位点突变后大脑前额叶中突触后膜厚度增加 （4）突触蛋白
【解析】
【分析】兴奋在神经元之间的传递：（1）神经元之间的兴奋传递就是通过突触实现的。突触：包括突触前膜、突触间隙、突触后膜。（2）兴奋的传递方向：由于神经递质只存在于突触小体的突触小泡内，所以兴奋在神经元之间（即在突触处）的传递是单向的，只能是：突触前膜→突触间隙→突触后膜（上个神经元的轴突→下个神经元的细胞体或树突）。（3）传递形式：电信号→化学信号→电信号。
【小问1详解】
据图分析，图中的自变量是小鼠类型和对CRS的处理情况，因变量是非焦虑行为持续时间，图1实验中①②③组中对照组的非焦虑时间最长，CRS明显缩短，CRS＋注射乳酸的非焦虑时间增加，说明注射乳酸能够缓解CRS小鼠焦虑行为；
为了进一步证明运动产生的乳酸能缓解CRS小鼠焦虑行为，除图中的对照组、CRS＋注射乳酸、CRS＋跑动组外，还需要增加一组实验，即CRS＋乳酸＋跑动，测定运动和乳酸共同作用下非焦虑行为时间。
【小问2详解】
突触小泡内含神经递质，而神经递质是神经元之间传递信息的物质，结合题意可知，乳酸化的SNAP91使突触后膜动作电位频率提高，其原因是突触小泡的变化使神经递质释放，与突触后膜的受体结合导致钠离子通道开放，钠离子内流，从而产生兴奋；该突触传递过程中的信号变化是电信号→化学信号→电信号。
【小问3详解】
已知SNAP91为突触蛋白，乳酸SNAP化（和乳酸通过共价键结合）后功能改变，据图2可知，实验的自变量是SNAP91位点是否突变，据图可知，SNAP91乳酸化位点突变后大脑前额叶中突触后膜厚度增加，可能是突触后膜不容易兴奋的原因。
【小问4详解】
蛋白质的结构决定功能，综上所述，加强运动可使CRS小鼠在突触蛋白的结构和功能上改变进而缓解焦虑。
24. 某品种鹦鹉大多数的胸羽是红色或黄色，偶尔也出现胸羽上既没有红色也没有黄色（无红黄羽）的个体，对其进行遗传分析。
（1）红、黄羽鹦鹉杂交结果如下表。
若上述杂交组合的性状受一对等位基因（A/a）控制，则黄羽为______（填“显性”或“隐性”）性状，判断的理由是______，纯种红羽鹦鹉与纯种黄羽鹦鹉杂交，子代间相互交配，预期子二代中红羽：黄羽的比例是______。
（2）研究发现上述A基因的表达产物是催化红色素转变为黄色素的酶，而a基因无相应功能。鹦鹉红、黄羽色的形成还受D/d基因的控制。为研究D/d在色素形成中的功能，通过基因工程构建了3个酵母品系。检测其中的红、黄色素，结果如下表。
组合
①
②
③
亲本
红羽×红羽
黄羽×红羽
黄羽×黄羽
子代
红羽
黄羽
黄羽和红羽
酵母品系
A基因
D基因
色素
①
有
有
红和黄
则D基因的功能是______。鹦鹉的基因能在酵母中表达，表明在翻译过程中共用______。酵母品系①中同时检测到红色素和黄色素，用同样的方法检测鹦鹉的黄色胸羽（各种基因型），均可检测到黄色素和少量的红色素，原因是______。
（3）另一个杂交组合的亲本为红羽鹦鹉和黄羽鹦鹉，子代有红羽、黄羽、无红黄羽三种类型，如果A/a和D/d这两对基因位于常染色体上且独立遗传，子代中无红黄羽个体的基因型是______，预期此组合的子代中红羽:黄羽:无红黄羽的比例为______。
【答案】（1） ①. 显性 ②. 由组合②或③可知，黄羽×红羽子代全为黄羽，黄羽×黄羽子代同时出现黄羽和红羽 ③. 1：3
（2） ①. 调控红色素的合成 ②. 一套密码子 ③. D基因的表达产物可催化红色素转变为黄色素，但该过程需要一定的时间，A基因调控形成的红色素在短时间内还没有完全转化为黄色素
（3） ①. aa_ _ ②. 3：3：2
【解析】
【分析】由上表组合②或③可知，黄羽×红羽子代全为黄羽，黄羽×黄羽子代同时出现黄羽和红羽，说明黄羽为显性性状。由下表可知，有D基因在时，可形成色素，有A在时，红色素可转变为黄色素，无D基因是，无色素形成，说明D基因的功能是调控红色素的合成。
【小问1详解】
由组合②或③可知，黄羽×红羽子代全为黄羽，黄羽×黄羽子代同时出现黄羽和红羽，若上述杂交组合的性状受一对等位基因（A/a）控制，则黄羽为显性性状。纯种红羽鹦鹉aa与纯种黄羽鹦鹉AA杂交，子代Aa间相互交配，预期子二代中红羽aa：黄羽A_的比例是1：3。
【小问2详解】
由表可知，有D基因在时，可形成色素，有A在时，红色素可转变为黄色素，无D基因是，无色素形成，说明D基因的功能是调控红色素的合成。鹦鹉的基因能在酵母中表达，表明在翻译过程中共用一套密码子。酵母品系①中同时检测到红色素和黄色素，用同样的方法检测鹦鹉的黄色胸羽（各种基因型），均可检测到黄色素和少量的红色素，说明D基因的表达产物可催化红色素转变为黄色素，但该过程需要一定的时间，A基因调控形成的红色素在短时间内还没有完全转化为黄色素。
【小问3详解】
红羽鹦鹉A_dd和黄羽鹦鹉A_D_，子代有红羽A_dd、黄羽A_D_、无红黄羽aa_ _三种类型，由于子代有
②
无
有
红
③
有
无
无
aa，说明亲本均为Aa，由于子代有dd，说明亲本为dd和Dd，即亲本为Aadd和AaDd，预期此组合的子代中红羽A_dd:黄羽A_D_:无红黄羽aa_ _的比例为3/4×1/2：3/4×1/2：1/4×1=3：3：2。
25. 在人胰岛素A链基因前端加入甲硫氨酸编码序列，置于β-半乳糖苷酶基因（不含终止编码序列）末端，插入到质粒中，并转化大肠杆菌（缺失内源性β-半乳糖苷酶基因），经培养、切割和纯化等得到成熟胰岛素A链，回答下列问题：
（1）使用限制酶______和______对质粒和插入DNA片段进行切割。
（2）在转化大肠杆菌前，一般先用______处理大肠杆菌细胞，使其处于容易吸收重组DNA分子的生理状态。
（3）重组DNA分子在大肠杆菌中开始转录时，RNA聚合酶首先结合的位点是______。
（4）将经过转化的大肠杆菌涂布在含氨苄青霉素和X-gal的培养基中培养，若观察到______色菌落，可以确定大肠杆菌成功表达胰岛素A链，原因是______。另一种颜色的菌落中可能不含重组DNA分子，在不考虑突变的情况下，这些菌落不含重组DNA分子的原因是______。
（5）溴化氰可以在甲硫氨酸残基C端切割肽链，成熟的人胰岛素A链不含甲硫氨酸残基。使用溴化氰在甲硫氨酸残基C端切割的目的是______。
【答案】（1） ①. HindIII ②. BamHI
（2）Ca2＋ （3）启动子
（4） ①. 蓝 ②. 大肠杆菌缺失内源性β-半乳糖苷酶基因，而导入成功后含有内源性β-半乳糖苷酶基因，表达出的β-半乳糖苷酶分解X-gal产生蓝色 ③. z目的基导入不成功因
（5）保证目的基因与质粒的连接
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、
终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【小问1详解】
据图分析，EcRI和EcRV都会破坏目的基因，故不能选择，且SacI会破坏复制原点，也不能选择，则目的基因左侧只能选择BamHI，右侧应选择与质粒共同的酶，即HindIII，故使用限制酶BamHI和HindIII对质粒和插入DNA片段进行切割。
【小问2详解】
在转化大肠杆菌前，一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞，使其处于容易吸收重组DNA分子的生理状态。
小问3详解】
启动子是RNA聚合酶识别与结合的位点，可用于驱动基因的转录，故重组DNA分子在大肠杆菌中开始转录时，RNA聚合酶首先结合的位点是启动子。
【小问4详解】
分析题意，大肠杆菌缺失内源性β-半乳糖苷酶基因，若导入成功，则重组质粒中含有β-半乳糖苷酶基因，表达出的β-半乳糖苷酶分解X-gal产生蓝色；另一种颜色（白色）的菌落中可能不含重组DNA分子，在不考虑突变的情况下，这些菌落不含重组DNA分子的原因是导入率并非100%，故可能是因为导入不成功。
【小问5详解】
分析题意 ，溴化氰可以在甲硫氨酸残基C端切割肽链，成熟的人胰岛素A链不含甲硫氨酸残基。使用溴化氰在甲硫氨酸残基C端切割的目的是保证目的基因与质粒的正确连接。