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    [生物]山东省济南市2023-2024学年高二下学期期末考试试题(解析版)
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    [生物]山东省济南市2023-2024学年高二下学期期末考试试题(解析版)

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    这是一份[生物]山东省济南市2023-2024学年高二下学期期末考试试题(解析版),共25页。试卷主要包含了 我国卫生部门规定饮用水标准等内容,欢迎下载使用。

    注意事项:
    1.答卷前,考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置。
    2.回答选择题时,选出每小题答案后,用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动,用橡皮擦干净后,再选涂其他答案标号。回答非选择题时,将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
    一、选择题:本题共15小题,每小题2分,共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
    1. 蓝细菌通过光合作用将碳元素从无机物转变为有机物,还具有生物固氮功能,可以利用火星风化层中的碳、氮元素,将成为人类移民火星的拓荒者。下列相关说法正确的是( )
    A. 碳原子因性质活泼易与其他原子形成共价键,而使碳成为生命的核心元素
    B. 可以用高倍显微镜观察到蓝细菌游离的核糖体
    C. 蓝细菌可以在无氧环境下进行光合作用并产生氧气
    D. 蓝细菌可以通过化能合成作用进行生物固氮
    【答案】C
    【分析】碳原子性质不活泼,它的最外层有4个电子,不易失去或得到电子而形成离子。在含碳化合物中,碳原子与其他原子通过共用电子对结合在一起。原子间通过共用电子对而形成的化学键叫共价键。碳原子之间也可以形成共价键,这样多个碳原子可以相互结合形成稳定的碳链。
    碳是构成细胞的基本元素,碳原子之间也可以形成共价键,这样多个碳原子可以相互结合形成稳定的碳链,从而形成各种生物大分子,如多糖、蛋白质和核酸,而使碳成为生命的核心元素。
    【详解】A、碳原子性质不活泼,碳原子之间可以形成共价键,这样多个碳原子可以相互结合形成稳定的碳链,从而形成各种生物大分子,而使碳成为生命的核心元素,A错误;
    B、在电子显微镜下才能观察到游离的核糖体,B错误;
    C、蓝细菌含有叶绿素和藻蓝素,可以在无氧环境下进行光合作用并产生氧气,C正确;
    D、蓝细菌能够进行光合作用,不能进行化能合成作用,通过固氮酶的作用进行生物固氮,D错误。
    故选C。
    2. SNARE 假说认为:高尔基体产生的囊泡,在细胞内由驱动蛋白沿着细胞骨架运输至细胞膜附近,囊泡膜上的 Rab-GTP(GTP 为鸟苷三磷酸,一种高能磷酸化合物)复合物与细胞膜上的锚定蛋白识别并结合后转变为 Rab-GDP(GDP 为鸟苷二磷酸),囊泡膜上的蛋白质v-SNARE与位于细胞膜上的t-SNARE 结合,囊泡膜与细胞膜融合将内容物释放到细胞外。下列说法错误是( )
    A. 运输囊泡的细胞骨架由蛋白质纤维组成
    B. 囊泡膜与细胞膜融合过程体现了细胞膜具有一定的流动性
    C. GTP可以为上述过程提供能量
    D. SNARE蛋白基因缺陷型小鼠出现雄性激素分泌障碍
    【答案】D
    【分析】分泌蛋白是在细胞内合成后,分泌到细胞外起作用的蛋白质,分泌蛋白的合成、加工和运输过程:最初是在内质网上的核糖体中由氨基酸形成肽链,肽链进入内质网进行加工,形成有一定空间结构的蛋白质由囊泡包裹着到达高尔基体,高尔基体对其进行进一步加工,然后形成囊泡经细胞膜分泌到细胞外,该过程消耗的能量由线粒体提供。
    【详解】A、细胞骨架是由蛋白质纤维组成的,与细胞的运动、分裂,物质运输等有关,A正确;
    B、细胞膜具有一定的流动性才能与囊泡膜融合,B正确;
    C、GTP 为鸟苷三磷酸,一种高能磷酸化合物,可以为该过程提供能量,C正确;
    D、SNARE蛋白基因缺陷型小鼠的分泌蛋白分泌过程会出现障碍,雄性激素是脂质类物质,分泌方式是自由扩散,SNARE蛋白基因缺陷型小鼠与雄性激素分泌无关,D错误。
    故选D。
    3. 细胞核是细胞代谢和遗传的控制中心。下列事实不能体现这一观点的是( )
    A. 失去细胞核的变形虫对外界刺激不发生反应
    B. 细胞核中 DNA上含有丰富的遗传信息
    C. 无核白色美西螈卵细胞移入黑色美西螈的细胞核后发育成黑色美西螈
    D. 母牛甲的去核卵细胞移入母牛乙的体细胞核后发育成与母牛乙性状一样的小牛
    【答案】B
    【分析】细胞核的结构和功能:
    核膜:
    (1)结构:核膜是双层膜,外膜上附有许多核糖体,常与内质网相连;其上有核孔,是核质之间频繁进行物质交换和信息交流的通道;在代谢旺盛的细胞中,核孔的数目较多。
    (2)化学成分:主要是脂质分子和蛋白质分子。
    (3)功能:起屏障作用,把核内物质与细胞质分隔开;控制细胞核与细胞质之间的物质交换和信息交流。
    核仁:与某种 RNA的合成以及核糖体的形成有关。在有丝分裂过程中,核仁有规律地消失和重建。
    核孔:实现核质之间频繁的物质交换和信息交流。
    染色质:细胞核中能被碱性染料染成深色的物质,其主要成分是 DNA 和蛋白质。
    【详解】A、失去细胞核的变形虫不能摄取食物,对外界刺激不再产生反应,说明细胞核控制着细胞的代谢,A符合题意;
    B、细胞核中 DNA上含有丰富的遗传信息,因此细胞核是遗传信息库,B不符合题意;
    C、黑色美西螈的细胞核与白色美西螈的去核卵母细胞融合后的重组细胞会发育成黑色美西螈,说明细胞核控制着细胞的遗传,C符合题意;
    D、母牛甲的去核卵细胞移入母牛乙的体细胞核后发育成与母牛乙性状一样的小牛,说明细胞核控制着生物的性状,D符合题意。
    故选B。
    4. 菊花在遭受低温时,通过调节细胞膜和类囊体膜上两种脂肪酸相对含量来适应低温,图1 和图2 表示在不同温度下菊花叶片细胞膜、类囊体膜不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸的比例,图 3表示低温处理下脂肪酸去饱和酶基因的表达情况。以下说法错误的是( )

    A. 低温影响下,细胞膜上的饱和脂肪酸含量增加,更容易提高植物的抗寒能力
    B. 低温诱导菊花脂肪酸去饱和酶基因表达,从而保持类囊体膜流动性
    C. 图1与图2 比较,脂肪酸去饱和酶基因对类囊体膜脂肪酸不饱和程度的调控比细胞膜更显著
    D. 类囊体膜饱和脂肪酸在脂肪酸中所占的比例高于细胞膜
    【答案】A
    【分析】由题图信息可知,实验的自变量是不同的温度条件,因变量是菊花叶片细胞膜、类囊体膜不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸的比例以及脂肪酸去饱和酶基因的表达情况。
    【详解】A、由图1可知,与25℃和4℃相比,在低温(-4℃)影响下,细胞膜中不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比例升高了,说明细胞膜上的饱和脂肪酸含量减少,更容易提高植物的抗寒能力,A错误;
    B、由图3可知,与25℃和4℃相比,低温(-4℃)影响下,菊花脂肪酸去饱和酶基因表达量增加,由图2可知,类囊体膜不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸的比例升高,推测脂肪酸去饱和酶基因表达量增加,使类囊体膜上不饱和脂肪酸含量升高,从而保持类囊体膜流动性,B正确;
    C、由图1和图2可知,与25℃和4℃相比,在低温(-4℃)影响下,细胞膜和类囊体膜中不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比例都升高了,且类囊体膜中不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比例升高更多,说明脂肪酸去饱和酶基因对类囊体膜脂肪酸不饱和程度的调控比细胞膜更显著,C正确;
    D、由图1和图2可知,类囊体膜中不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比例的值低于细胞膜,说明类囊体膜饱和脂肪酸在脂肪酸中所占的比例高于细胞膜,D正确。
    故选A。
    5. 下图表示线粒体内膜合成和运输ATP的生理过程,ATP 合成酶、电子转运体、Pi转运体、AAC 为线粒体内膜上具有一定功能的蛋白质。长时间泡发的黑木耳含有较多的米酵菌酸,米酵菌酸能抑制 AAC。下列说法错误的是( )

    A. ATP合成酶转运 H⁺是一种蛋白质载体介导的主动运输过程
    B. 线粒体内膜表现为外正内负的膜电位与电子转运体泵出 H⁺有关
    C. Pi转运体和 AAC 为 ATP 合成分别提供 Pi和 ADP
    D. 食用过多长时间泡发的黑木耳可能导致因细胞缺少能量而出现中毒症状
    【答案】A
    【分析】据题意可知:电子传递链或呼吸链主要分布于线粒体内膜上,由一系列能可逆地接受和释放电子或H+的化学物质所组成,参与有氧呼吸的第三阶段。
    【详解】A、H⁺是顺浓度梯度运输,ATP合成酶转运 H⁺是一种蛋白质载体介导的协助扩散的过程,A错误;
    B、电子转运体将 H⁺从基质转移到线粒体内外膜间隙,线粒体内膜表现为外正内负的膜电位与电子转运体泵出 H⁺有关,B正确;
    C、Pi转运体将Pi从线粒体内外膜间隙转移至基质,AAC将ADP从线粒体内外膜间隙转移至基质,Pi转运体和 AAC 为 ATP 合成分别提供 Pi和 ADP,C正确;
    D、长时间泡发的黑木耳含有较多的米酵菌酸,米酵菌酸能抑制 AAC,而AAC 为 ATP 合成分别转运 ADP,故食用过多长时间泡发的黑木耳可能导致因细胞缺少能量而出现中毒症状,D正确。
    故选A。
    6. 酵母菌破碎并处理后,获得细胞质基质和线粒体,分装在4 支试管中分别加入不同的物质,并向试管中通入有18O标记的氧气。实验在适宜温度下进行,分组实验及实验现象如下表,下列说法错误的是( )
    A. 可以用差速离心法获得线粒体
    B. 试管2中的[H]又被称为还原型辅酶I,可以降低化学反应的活化能
    C. 试管 1 和 2 对照,推测出线粒体中可以产生14CO₂和H₂18O
    D. 3试管中葡萄糖的量不变
    【答案】B
    【分析】酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,无氧条件下进行无氧呼吸。有氧呼吸三个阶段的场所分别为细胞质基质、线粒体基质、线粒体内膜,无氧呼吸两个阶段都发生细胞质基质中。
    由表格可知,1试管含有细胞质基质和线粒体,进行了有氧呼吸;2试管只有细胞质基质,只能进行有氧呼吸第一阶段;3试管中线粒体不能分解葡萄糖,所以不能进行呼吸作用;4试管加入线粒体,线粒体可以将丙酮酸氧化分解。
    【详解】A、分离各种细胞器的常用方法是差速离心法,A正确;
    B、试管2中的[H]也叫做还原型辅酶I(NADH),还原型辅酶I不是酶,不能降低化学反应的活化能,B错误;
    C、对比试管 1 和 2,自变量为是否有线粒体,分析试管内的物质变化,可推测出线粒体中可以产生14CO₂和H₂18O,C正确;
    D、葡萄糖氧化分解的场所在细胞质基质,3试管中只含有线粒体悬液,不能分解葡萄糖,因此葡萄糖的量不变,D正确。
    故选B。
    7. 下列关于使用紫色葡萄和带盖玻璃瓶等依次制作葡萄酒和葡萄醋,相关叙述错误的是( )
    A. 选择新鲜的葡萄,用清水冲洗,再除去枝梗和腐烂的籽粒,沥干后榨汁
    B. 酵母菌发酵产生的花青素使发酵液的颜色逐渐加深
    C. 酒精发酵温度应控制在 18℃~30℃,并适时拧松瓶盖放气
    D. 葡萄醋发酵产生的气泡明显少于葡萄酒发酵
    【答案】B
    【分析】果酒和果醋制作过程中的相关实验操作:
    (1)材料的选择与处理:选择新鲜的葡萄,榨汁前先将葡萄进行冲洗,除去枝梗。
    (2)灭菌:①榨汁机要清洗干净,并晾干。②发酵装置要清洗干净,并用70%的酒精消毒。
    (3)榨汁:将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。
    (4)发酵:①将葡萄汁装人发酵瓶,要留要大约1/3的空间,并封闭充气口。
    ②制葡萄酒的过程中,将温度严格控制在18℃~30℃,时间控制在10~12d左右,可通过出料口对发酵的情况进行,及时的监测。
    ③制葡萄醋的过程中,将温度严格控制在30℃~35℃,时间控制在前7~8d左右,并注意适时通过充气口充气。
    【详解】A、选择新鲜的葡萄,榨汁前先用清水冲洗,再除去枝梗和腐烂的籽粒,沥干后榨汁,A正确;
    B、花青素是存在于葡萄液泡中的色素,不是酵母菌发酵产生的,B错误;
    C、酒精发酵温度应控制在 18℃~30℃,酒精发酵会产生二氧化碳,故需适时拧松瓶盖放气,C正确;
    D、使用紫色葡萄和带盖玻璃瓶等依次制作葡萄酒和葡萄醋,该实验是先进行酒精发酵再进行果醋发酵,乙醇发酵过程中产生CO2,而果醋发酵过程中,醋酸菌以乙醇为底物形成醋酸不产生气体,故葡萄醋发酵产生的气泡明显少于葡萄酒发酵,D正确。
    故选B。
    8. 我国卫生部门规定饮用水标准:1mL 自来水检出的菌落总数不可以超过100个( 培养48 h),不得检出总大肠菌群。某生物兴趣小组对某自来水厂新产的自来水进行微生物菌落含量检测与鉴定,下列说法错误的是( )
    A. 检测时不需要对饮用水进行梯度稀释
    B. 若使用的伊红—亚甲蓝琼脂培养基上未出现深紫色菌落,说明饮用水符合标准
    C. 用涂布平板法进行接种,需要设置不进行涂布或者用无菌水涂布的对照组
    D. 饮用煮沸后的自来水可以降低微生物对人体造成危害
    【答案】B
    【分析】微生物常见的接种方法:平板划线法和稀释涂布平板法,稀释涂布平板法可用于微生物计数。
    稀释涂布平板法统计菌落数的原理:当样品的稀释倍数足够高时,培养基表面生长的一个菌落来自于样品稀释液中的一个活菌,可通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数。
    【详解】A、自来水中的活菌本来可能数量就较少,浓度较低,检测时不需要对饮用水进行梯度稀释,A正确;
    B、若使用的伊红—亚甲蓝琼脂培养基上未出现深紫色菌落,只能说明没有大肠杆菌污染,但其他杂菌数可能超标,并不能说明饮用水符合标准,B错误;
    C、为检验平板灭菌合格以及无菌操作正确,需要设置不进行涂布或者用无菌水涂布的对照组,C正确;
    D、煮沸消毒法能一定程度杀死自来水中的部分微生物,故饮用煮沸后的自来水可以降低微生物对人体造成危害,D正确。
    故选B。
    9. 铜绿假单胞菌能产生水解部分抗生素的β-内酰胺酶,给抗感染治疗带来很大困难。将两个含不同抗生素的检测试条放置在涂布有铜绿假单胞菌的培养基上,抗生素在试条左右两侧呈一定浓度梯度的对称分布,并在一侧添加克拉维酸(一种β-内酰胺酶抑制剂,不影响抗生素的代谢),培养一段时间后,结果如下图所示。下列说法正确的是( )
    A. 产β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的出现是大量使用抗生素的结果
    B. 由实验结果可知,越靠近试条两端的抗生素浓度越大
    C. 试条 2 中克拉维酸添加在试条左侧
    D. 使用试条1中所含抗生素治疗铜绿假单胞菌感染的效果更好
    【答案】B
    【分析】题干分析,某些细菌能产生β-内酰胺酶水解抗生素,从而产生抗药性。试条两侧含有抗生素,并在试条一侧添加β-内酰胺酶抑制剂(能抑制β-内酰胺酶的活性,从而不能水解抗生素),将其放在不含有抗生素的待测菌株上培养,一段时间后发现,试条1右侧和试条2的左右两侧都出现了抑菌圈,说明该部位的菌株能产生β-内酰胺酶。
    【详解】A、基因突变具有不定向性,抗生素使用之前,产β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌已经出现,抗生素只是起到选择作用,A错误;
    B、由实验结果可知,越靠近试条两端抑菌圈较大,说明抗生素浓度较大,B正确;
    C、该菌能产生β-酰胺酶,使用克拉维酸能抑制该菌产生的β-酰胺酶的活性,进而不能抵抗抗生素,试条2的左右两侧都出现了抑菌圈,由于突变的低频性,能产生水解部分抗生素的β-内酰胺酶的菌比较少,产生的抑菌圈小些,说明没有添加克拉维酸时也具有抑菌效果,据题干信息“在一侧添加克拉维酸”和图示分析可知,右侧的抑菌圈大于左侧的抑菌圈,故判断试条2中克拉维酸添加在试条右侧,C错误;
    D、据图分析可知,试条2左右两侧的抑菌圈大于试条1,说明使用试条2中所含抗生素治疗该菌感染的效果更好,D错误。
    故选B。
    10. 黑胫病对甘蓝型油菜的危害十分严重,黑芥能抗黑胫病,两者不能直接杂交。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并失去复制能力。下图为科研人员利用植物细胞工程获得抗病甘蓝型油菜品系的过程,下列相关叙述错误的( )
    A. 过程①可使用纤维素酶和果胶酶,过程②可利用PEG 进行诱导
    B. 图中培育的抗病甘蓝型油菜是新品种,是利用植物体细胞杂交技术实现的
    C. 过程④体现出植物细胞具有全能性,抗病植株发生的变异是基因重组和染色体变异
    D. 获得抗病甘蓝型油菜品系的过程打破生殖隔离,实现远缘杂交育种
    【答案】C
    【分析】据图分析可知,图示为采用植物体细胞杂交技术和植物组织培养技术获得抗黑胫病杂种植株的流程图,图中①表示采用酶解法(纤维素酶和果胶酶)去除细胞壁的过程;②表示诱导原生质体融合的过程。原生质体融合后利用植物组织培养技术得到杂种植株。
    【详解】A、过程①表示去除细胞壁的过程,根据酶的专一性可知,可以用纤维素酶和果胶酶处理;过程②表示诱导原生质体融合的过程,可利用PEG进行诱导,A正确;
    B、图中培育的抗病甘蓝型油菜含有两种生物的遗传物质,是利用植物体细胞杂交技术获得的新品种,B正确;
    C、由题意可知,过程④体现了植物细胞具有全能性,抗病植株发生的变异是基因突变和染色体变异,C错误;
    D、根据题意可知,黑芥与甘蓝型油菜不能直接杂交,说明两者存在生殖隔离,该技术打破了黑芥与甘蓝型油菜之间的生殖隔离,实现远缘杂交育种,D正确。
    故选C。
    11. 单克隆抗体在多种疾病的诊断和治疗中发挥重要的作用,下图为利用小鼠制备单克隆抗体的过程,相关叙述正确的是( )
    A. 从免疫小鼠脾脏中可获取大量浆细胞进行细胞融合
    B. 细胞融合可以用PEG 或者灭活的病毒进行诱导,不需要无菌环境
    C. 图中细胞筛选是利用梯度离心的办法获得杂交瘤细胞
    D. 单抗检测时取培养液滴加相应抗原出现反应说明含有目标细胞
    【答案】D
    【分析】单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
    【详解】A、从免疫小鼠脾脏中可获取少量浆细胞,A错误;
    B、细胞融合可以用PEG 或者灭活的病毒进行诱导,需要在无菌环境中进行,B错误;
    C、细胞筛选时为获得杂交瘤细胞需要在选择培养基上筛选,C错误;
    D、单抗检测时可用抗原-抗体实验鉴定:取培养液滴加相应抗原,出现阳性反应为目标细胞,D正确。
    故选D。
    12. 胚胎工程中各种胚胎操作技术如图所示。下列分析正确的是( )
    A. 从良种公牛体内获得的精子可以直接与获能的卵细胞结合受精
    B. 早期囊胚a、b、c的基因型相同,可用滋养层细胞进行性别鉴定
    C. 胚胎干细胞是一类未分化的细胞,可以从原肠胚细胞获得
    D. 胚胎移植时因代孕牛几乎对胚胎无免疫排斥,因此无需使用免疫抑制剂
    【答案】D
    【分析】试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经移植后产生后代的技术。
    【详解】A、受精前,精子经过获能处理才能获得受精能力,因而从良种公牛体内获得的精子不能直接与获能的卵细胞结合受精,A错误;
    B、早期囊胚a、b、c是由不同的受精卵经胚胎体外培养获得,因而基因型不一定相同,对未知性别的胚胎可以取滋养层,做DNA分析进行性别鉴定,B错误;
    C、胚胎干细胞是早期胚胎(原肠胚期之前)中分离出来的一类细胞,它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性,因而不能从原肠胚细胞获取,C错误;
    D、胚胎移植时,代孕牛为同种的、生理状况相同的母牛,几乎不会对胚胎产生免疫排斥反应,因此无需使用免疫抑制剂,D正确;
    故选D。
    13. 下列关于DNA粗提取、分离与鉴定技术的说法正确的是( )
    A. DNA 的溶解度与 NaCl溶液的浓度成正相关
    B. 在一定温度条件下,DNA 遇组胺试剂呈现蓝色
    C. 电泳时,DNA分子会向着与它所带电荷相反的电极移动
    D. 将电泳缓冲液加入电泳槽中,电泳缓冲液不能没过凝胶
    【答案】C
    【分析】DNA粗提取和鉴定的原理:(1)DNA的溶解性:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精;DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。(2)DNA的鉴定:在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
    【详解】A、DNA在2ml/L的氯化钠溶液中溶解度最高,并不是DNA 的溶解度与 NaCl溶液的浓度成正相关,A错误;
    B、在一定温度(沸水浴)条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,B错误;
    C、电泳是指带电粒子在电场的作用下,向与其携带电荷相反的电极迁移的过程,因此电泳时,DNA分子会向着与它所带电荷相反的电极移动,C正确;
    D、将电泳缓冲液加入电泳槽中,电泳缓冲液需要没过凝胶,D错误。
    故选C。
    14. 蛛丝蛋白有着超强的抗张强度,可制成防弹背心、降落伞绳等。下图是培育转基因蜘蛛羊生产蛛丝蛋白的方案。以下叙述错误的是( )
    A. 通过逆转录得到蛛丝蛋白基因不含有启动子和内含子
    B. 构建含蛛丝蛋白基因的重组质粒是培育转基因蜘蛛羊的核心工作
    C. 过程②通常选用基因枪法将重组质粒导入山羊的受精卵中
    D. 可利用 PCR 检测山羊的染色体DNA 是否插入了蛛丝蛋白基因
    【答案】C
    【分析】基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品.基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术
    【详解】A、启动子和终止子不会转录形成mRNA,所以提取mRNA再经过逆转录形成的蛛丝蛋白基因不含有启动子和内含子,A正确;
    B、基因工程的核心工作是构建基因表达载体,所以构建含蛛丝蛋白基因的重组质粒是培育转基因蜘蛛羊的核心工作,B正确;
    C、将重组质粒导入动物细胞受精卵常用显微注射技术,C错误;
    D、在分子水平的检测,可以使用PCR等技术检测山羊的染色体DNA是否插入了丝蛋白基因,D正确。
    故选C。
    15. 下列有关基因工程应用的叙述错误的是( )
    A. 因牲畜的胃液呈酸性,且消化道细胞无Bt抗虫蛋白的受体,转基因抗虫棉对牲畜的影响较害虫小
    B. 将外源生长激素基因导入鲤鱼受精卵获得的转基因鲤鱼生长速率显著提高
    C. 将乳糖酶基因导入奶牛基因组,使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量增加,营养价值提高
    D. 重组人工干扰素α-1b,具有干扰病毒复制的作用,被广泛应用于治疗病毒感染性疾病
    【答案】C
    【分析】基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种的DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。
    【详解】A、因牲畜的胃液呈酸性(Bt抗虫蛋白会失活),且消化道细胞无Bt抗虫蛋白的受体(Bt抗虫蛋白对牲畜起不到作用),因此转基因抗虫棉对牲畜的影响较害虫小,A正确;
    B、将外源生长激素基因导入鲤鱼受精卵,发育成的转基因鲤鱼能表达出生长激素,使转基因鲤鱼生长速率显著提高,B正确;
    C、将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,肠乳糖酶基因表达产物是乳糖酶,可分解乳糖,使乳糖含量降低,C错误;
    D、重组人工干扰素α-1b具有干扰病毒复制的作用,能抑制病毒遗传物质的复制,故被广泛应用于治疗病毒感染性疾病,D正确。
    故选C。
    二、选择题:本题共5小题,每小题3分,共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求,全部选对得3分,选对但不全的得1分,有选错的得0分。
    16. 信号学说认为,分泌蛋白的合成是从游离核糖体开始,先合成一段叫做信号肽的氨基酸序列,被位于细胞质基质中的信号识别颗粒(SRP,一种蛋白质)识别后,肽链延伸终止,SRP与内质网膜上的SRP受体(DP)结合引导核糖体附着到内质网上,SRP脱离信号肽后肽链继续合成并进入内质网修饰加工。不能合成信号肽的游离核糖体,仍散布于细胞质中,合成细胞内的蛋白质。下列相关推论正确的是( )
    A. 附着核糖体的形成与肽链中是否含有信号肽有关
    B. 信号肽需借助DP 和SRP 的识别结合才能转移至内质网膜中
    C. 核糖体合成SRP 的过程需要先合成一段信号肽
    D. 信号肽合成缺陷的细胞中,分泌蛋白会聚集在内质网中
    【答案】AB
    【分析】分析题意可知,信号肽是核糖体上合成的多肽链,信号肽借助DP和SRP的识别结合,可以穿过内质网膜,进入内质网腔,由信号肽酶切将信号肽切下,多肽链通过信号肽的诱导进行内质网腔内,在内质网中进行加工。
    【详解】A、能合成信号肽的核糖体将成为附着型核糖体,与内质网结合,故附着核糖体的形成与信号肽的合成有关,A正确;
    B、由题图可知,信号肽需借助DP和SRP的识别结合,引导核糖体附着于内质网上,才能转移至内质网膜中,B正确;
    C、由题意可知,核糖体合成SRP的过程不需要先合成一段信号肽,因为SRP是位于细胞质基质中的信号识别颗粒,能与信号肽结合,C错误;
    D、由题意可知,信号肽需借助DP和SRP的识别结合,引导核糖体附着于内质网上,才能转移至内质网膜上,肽链才能进入内质网,因此信号肽合成缺陷的细胞中,肽链不能进入内质网,不会形成分泌蛋白,即分泌蛋白不会在内质网腔中聚集,D错误。
    故选AB。
    17. 如图表示丙酮酸进入线粒体后与辅酶A 结合,形成活化的乙酰辅酶A,并释放CO2还原NAD+的过程。下列说法正确的是( )
    A. 乙酰辅酶 A继续参与有氧呼吸第二阶段反应,产生 CO₂和 H₂O
    B. 细胞呼吸是糖类、脂肪、蛋白质等代谢的枢纽
    C. 该过程不需要氧直接参与,可以在无氧环境下进行
    D. 该过程丙酮酸中的化学能可以转移到 NADH 和乙酰辅酶 A 中
    【答案】BD
    【分析】有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜,有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和NADH,合成少量ATP;第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和NADH,合成少量ATP;第三阶段是氧气和NADH反应生成水,合成大量ATP。
    【详解】A、根据图示信息可知,丙酮酸进入线粒体后与辅酶A 结合,形成活化的乙酰辅酶A,并释放CO2、还原NAD+,乙酰辅酶A可向氨基酸,甘油、脂肪酸等物质进行转化,A错误;
    B、根据图示信息可知,细胞呼吸过程当中产生的产物,乙酰辅酶可以向氨基酸,甘油、脂肪酸等物质进行转化,因此说明细胞呼吸是糖类,脂肪,蛋白质等代谢的枢纽,B正确:
    C、根据题干信息可知,该图示表示的为丙酮酸进入到线粒体滞后于辅酶A结合的过程,因此在该过程当中,虽然不需要氧气的直接参与,但是一定要在有氧的条件下才能进行,C错误;
    D、由图可知,该过程丙酮酸中的化学能可以转移到 NADH 和乙酰辅酶 A 中,D正确。
    故选BD。
    18. 液体深层培养是指以获得大量发酵产物为目的的发酵罐大容量液体培养,可通过调节培养液的pH和温度、营养条件以及气体环境促使微生物迅速生长,产生大量代谢产物,是发酵工业生产的基本培养方法。下列叙述错误的是( )
    A. 传统发酵技术不需要防止杂菌污染,液体深层培养前需要对发酵罐中的培养基进行严格灭菌
    B. 单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质,可作为食品添加剂、微生物饲料等
    C. 可通过过滤、沉淀等方法获得微生物代谢产物
    D. 利用液体深层培养进行谷氨酸发酵生产应在中性或弱碱性条件下进行
    【答案】ABC
    【分析】发酵工程的基本环节:发酵工程一般包括菌种的选育,扩大培养,培养基的配制、灭菌,接种,发酵,产品的分离、提纯等方面。
    (1)灭菌:发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种。一旦有杂菌污染,可能导致产量大大下降。例如,在青霉素生产过程中如果污染了杂菌,某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解掉。因此,培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。
    (2)发酵:发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中,要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等,以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分,要严格控制温度、pH 和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖,而且会影响微生物代谢物的形成。例如,谷氨酸的发酵生产:在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸;在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺。
    (3)产品的分离、提纯:如果发酵产品是微生物细胞本身,可在发酵结束之后,采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥,即可得到产品。如果产品是代谢物,可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
    【详解】A、传统发酵技术利用混合菌种发酵,没有进行严格灭菌,但是也需要采取一些措施防止杂菌污染,液体深层培养属于发酵工程,发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种,为了防止微生物的污染,需要对发酵罐中的培养基进行严格灭菌,A错误;
    B、单细胞蛋白是发酵获得的大量的微生物菌体,B错误;
    C、如果发酵产品是微生物细胞本身,可在发酵结束之后,采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥,即可得到产品。如果产品是代谢物,可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品,C错误;
    D、环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖,而且会影响微生物代谢物的形成。利用液体深层培养进行谷氨酸发酵生产应在中性或弱碱性条件下进行,在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺,D正确。
    故选ABC。
    19. 蓝莓果实中普遍富含多酚类化合物。在蓝莓组织培养过程中,外植体切口处细胞被破坏,多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物,这一过程称为褐变。褐变会引起细胞生长停滞甚至死亡,导致蓝莓组织培养失败。下列叙述错误的是( )
    A. 外植体需用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒
    B. 离体器官或组织细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织
    C. 再分化过程中,细胞中控制多酚类化合物合成酶的基因选择性表达
    D. 为减少褐变,可以在培养基中添加适量的抗氧化剂
    【答案】AC
    【分析】植物组织培养过程是:离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织,然后再分化生成根、芽,最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
    【详解】A、自然生长茎段的消毒属于外植体消毒,先用70%乙醇,再用无菌水清洗,再用5%次氯酸钠消毒处理,最后再用无菌水清洗,A错误;
    B、离体器官或组织细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织,B正确;
    C、根据题干信息“外植体切口处细胞被破坏,多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物,这一过程称为褐变”,所以多分化合物合成酶基因的表达是在外植体形成愈伤组织过程中,这是发生在脱分化过程中,C错误;
    D、多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物,为减少褐变,可以在培养基中添加适量的抗氧化剂,D正确。
    故选AC。
    20. 研究人员发现高强度光照下,番茄会通过NPQ(一种光保护机制)散失过多热能,避免高强度光照造成损伤。为研究 V基因对NPQ的作用机制,科研人员利用病毒诱导基因沉默技术(VIGS技术)特异性地使V基因沉默,发现高强度光照下番茄叶片的损伤明显增强。技术原理如图所示。下列叙述正确的是( )
    A. 本实验中的目的基因应选用V基因,该基因可通过 PCR 技术获得
    B. 该过程中目的基因整合到特殊农杆菌的 T-DNA 上
    C. 该过程中 VIGS技术通过降解 V 基因的 mRNA 进而抑制 V 基因的表达
    D. V基因的表达可能促进了NPQ机制的活化
    【答案】D
    【分析】基因的表达:①转录:以DNA为模板,通过碱基互补配对原则,在RNA聚合酶的作用下合成mRNA;②翻译:以mRNA为模板,在核糖体的参与和酶的催化作用下,合成多肽链。
    【详解】A、分析题意可知,本实验目的是研究V基因在高光条件下对NPQ机制的作用,且需要令V基因沉默,故本实验中目的基因应选用基因V的反义基因,A错误;
    B、目的基因与烟草病毒载体形成重组病毒载体,该目的基因没有整合到特殊农杆菌的 T-DNA 上,B错误;
    C、 VIGS技术是将反义V基因转录的的RNA切割形成小分子RNA,小分子RNA与V基因的mRNA结合,抑制了V基因的翻译的过程,C错误;
    D、’V基因沉默,发现高强度光照下番茄叶片的损伤明显增强,推测V基因的表达可能促进了NPQ机制的活化,D正确。
    故选D。
    三、非选择题:本题共5小题,共55分。
    21. 无机盐对于维持细胞和生物体的生命活动都有重要作用,用的主要无机氮源。下图表示植物根细胞吸收相关物质的转运机制,请回答相关问题:
    (1)植物利用NH4+中的 N 元素合成_________作为构成遗传物质的单体,这体现无机盐的________功能。根毛细胞含有核酸的细胞器有________ 。
    (2)根毛细胞吸收NO3- 的方式是________,判断依据是_________。质子泵体现了蛋白质具有________功能。
    (3)生长期玉米幼苗需要大量吸收无机氮源。为给农民合理施肥提供建议,请利用生长期玉米幼苗、含适宜浓度的硝酸铵 (NH4NO3)培养液、NO3-和 NH4+浓度检测仪,设计实验,探究生长期玉米幼苗主要吸收的无机氮源种类。请写出实验思路:_________。
    预期结果及结论:_________。
    【答案】(1)①. 脱氧核苷酸 ②. 组成复杂的化合物 ③. 核糖体、线粒体
    (2)①. 主动运输 ②. 逆浓度梯度运输,需要载体,消耗能量 ③. 运输
    (3)①. 把生长期的玉米幼苗放在以含适宜浓度的硝酸铵 (NH4NO3)培养液中进行培养,培养一段时间后,测定比较培养前后NO3-和 NH4+浓度。 ②. 若营养液中NO3-剩余量小于NH4+剩余量,则说明生长期玉米幼苗主要吸收的无机氮源是NO3-;若营养液中NH4+剩余量小于NO3-剩余量,则说明生长期玉米幼苗主要吸收的无机氮源是NH4+。
    【分析】(1)植物的遗传物质是DNA,其单体为脱氧核苷酸,因此植物利用元素中的氮元素合成脱氧核苷酸作为构成遗传物质的单体,这体现了无机盐能够组成复杂的化合物的功能。在真核细胞中,核糖体中含有RNA,线粒体和叶绿体中含有DNA,因此根毛细胞当中含有核酸的细胞器,有核糖体和线粒体。
    (2)根据图示信息可知,根毛细胞吸收硝酸根离子是逆浓度梯度,需要载体,需要消耗能量,因此为主动运输。质子泵体现了蛋白质具有转运物质跨膜运输的功能
    (3)探究生长期玉米幼苗主要吸收的无机氮源种类,可以把生长期的玉米幼苗放在以含适宜浓度的硝酸铵 (NH4NO3)培养液中进行培养,培养一段时间后,测定比较培养前后NO3-和 NH4+浓度。若营养液中NO3-剩余量小于NH4+剩余量,则说明生长期玉米幼苗主要吸收的无机氮源是NO3-;若营养液中NH4+剩余量小于NO3-剩余量,则说明生长期玉米幼苗主要吸收的无机氮源是NH4+。
    22. 光呼吸是指植物的绿色细胞在光照条件下O2含量与 CO2含量比值高时,吸收 O2放出CO₂ 的过程,光呼吸与光合作用暗反应都需要 Rubisc羧化酶的参与。如图所示,回答下列问题:
    (1)Rubisc羧化酶催化的底物有_________,植物进行光呼吸需要的条件有_________(至少写出两点)。
    (2)光呼吸会消耗有机物释放CO₂降低了植物的净光合效率,影响农作物产量,可适当的抑制光呼吸以增加作物产量,可采取的措施有(至少写出两点)________。
    (3)光呼吸也有积极意义,在干旱高温天气或过强光照下,光呼吸可以消耗植物体内过多的_________,又可以为光合作用提供_________。
    【答案】(1)①. C5、CO2、O2 ②. 光照、高O2含量或低CO2含量
    (2)提高Rubisc酶催化C5与CO2的反应速率、减少其C5与O2的反应速率、多通风、大棚内释放干冰、使用农家肥、使用光呼吸抑制剂
    (3)①. NADPH和ATP ②. CO2
    【分析】光合作用包括光反应和暗反应两个阶段,其中光反应包括水的光解和ATP的生成,暗反应包括二氧化碳的固定和三碳化合物的还原等。
    (1)分析题图,Rubisc酶能催化CO2和C5反应生成C3,还能催化C5与O2反应生成C2,所以Rubisc羧化酶催化的底物有C5、CO2、O2,光呼吸是指植物的绿色细胞在光照条件下O2含量与 CO2含量比值高时,吸收O2放出CO2的过程,所以植物进行光呼吸需要的条件有光照、高O2含量或低CO2含量。
    (2)光呼吸会消耗有机物释放CO2降低了植物的净光合效率,影响农作物产量,可适当的抑制光呼吸以增加作物产量,植物进行光呼吸需要的条件有光照、高O2含量或低CO2含量。由图可知可采取的措施有提高Rubisc酶催化C5与CO2的反应速率、减少其C5与O2的反应速率、多通风、大棚内释放干冰、使用农家肥、使用光呼吸抑制剂等。
    (3)由图可知,光呼吸也有积极意义,在干旱高温天气或过强光照下,气孔会关闭,光合作用暗反应减慢,消耗的NADPH和ATP减少,导致NADPH和ATP积累,而光呼吸中C2会在NADPH和ATP作用下,生成CO2和C3,消耗植物体内过多的NADPH和ATP,同时又可以为光合作用提供CO2。
    23. 某兴趣小组同学从土壤中分离分解尿素的细菌并对其进行计数。其实验设计流程如图所示,每个浓度设置4个平板,其中平板1、2、3是选择培养基,平板4是牛肉膏蛋白胨
    (1)获得纯净的微生物培养物的关键是_________。涂布器使用前用到的无菌技术包括________。
    (2)图中选择培养基中对氮源的要求是________。牛肉膏蛋白胨培养基中牛肉膏提供的主要营养是________。
    (3)图中四组平板采用的接种方法是________。微生物的数量测定还可以用显微镜直接计数,该方法需要利用特定的_________,在显微镜下观察、计数,但统计结果比实际值________(填“大或小”),原因是________。
    (4)若乙组4个平板,统计菌落数分别为260、268、252、358,则 1g 土样中分解尿素细菌菌落数是________个。比较四组实验中1、2、3平板和4号平板中的菌落数,可知此选择培养基能够_________。
    【答案】(1)①. 防止杂菌污染 ②. 消毒和灭菌
    (2)①. 以尿素为唯一氮源 ②. 碳源、磷酸盐和维生素等
    (3)①. 稀释涂布平板法法 ②. 细菌计数板或血细胞计数板 ③. 大 ④. 统计结果一般是活菌数和死菌数的总和
    (4)①. 2.6×109 ②. 从土壤中分离分解尿素的细菌
    【分析】获得纯培养物的关键是防止杂菌污染,无菌技术包括消毒和灭菌。接种的方法有稀释涂布平板法法和平板划线法,稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分布涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。稀释涂布平板法可以进行微生物的培养和计数。
    (1)获得纯培养物的关键是防止杂菌污染,无菌技术包括消毒和灭菌。
    (2)图中选择培养基要能从土壤中分离分解尿素的细菌,所以应该以尿素为唯一氮源,牛肉膏蛋白胨培养基中的牛肉膏提供的主要营养是碳源、磷酸盐和维生素等。
    (3)图中的菌落分布比较均匀,采用的接种方法是稀释涂布平板法。用显微镜直接计数需要利用特定的细菌计数板或血细胞计数板来进行计数,该方法的统计结果偏大,因为显微镜下无法区分死菌和活菌,统计结果一般是活菌数和死菌数的总和。
    (4)计算公式C/V×M,C是平均菌落数(260+268+252)÷3=260(不包括358,该数据是牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数),V是涂布体积0.1,M是稀释倍数106,所以 1g 土样中分解尿素细菌菌落数是2.6×109,比较四组实验中1、2、3平板和4号平板中的菌落数,可知此选择培养基的菌落数小于牛肉膏蛋白胨培养基中的菌落数,说明能够从土壤中分离分解尿素的细菌。
    24. 下图为应用基因编辑去除CFTR 基因(控制CFTR 蛋白的合成),获得患囊性纤维化的基因编辑小鼠4的培育流程。请回答下列问题:
    (1)对1号小鼠使用________进行超数排卵处理,培养收集处在________期的卵母细胞用于核移植。对卵母细胞进行去核操作的原因是________。
    (2)采集2号小鼠的组织细胞,用________处理获得分散的成纤维细胞,放置于37℃的CO₂培养箱中培养,其中CO₂的作用是________。在细胞培养过程中,需要定期更换培养液的目的是________。
    (3)图中显微注射将供体细胞注入去核的卵母细胞后,要通过_________法使两细胞融合,形成重构胚。重构胚一般需要培养至________阶段进行胚胎移植。
    (4)胚胎移植作为胚胎工程最终技术环节,优势是________,为了获得更多的遗传背景一致的基因编辑小鼠4,可以采用________技术。
    【答案】(1)①. 促性腺激素 ②. MⅡ(减数分裂Ⅱ中)③. 使核基因全部来源于2号小鼠基因编辑后的供体细胞
    (2)①. 胶原蛋白酶或胰蛋白酶 ②. 维持培养液的pH ③. 防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害
    (3)①. 电融合法 ②. 桑葚胚或囊胚
    (4)①. 充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能 ②. 胚胎分割
    【分析】(1)超数排卵指的是应用外源促性腺激素,诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子,采集的卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期才能使用。
    供体细胞的细胞核拥有完整的遗传信息,对后代的性状表达起主要作用,对卵母细胞进行去核操作,使核基因全部来源于2号小鼠基因编辑后的供体细胞。
    (2)常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织块,使其分散成单个细胞。动物细胞培养所需气体主要有O2,和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的作用是维持培养液的pH。
    动物细胞培养过程中,需要为细胞创造无菌无毒的环境,定期更换培养液可防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害。
    (3)动物体细胞核移植技术中,通过电融合法使两细胞融合,形成重构胚。通过体外受精及其他技术获得的胚胎需要发育到桑葚胚或囊胚时期才能进行胚胎移植。桑葚胚有利于筛选出发育潜能好的胚胎,而和桑葚胚相比,囊胚培育的时间比较长,分裂的细胞数多,移植时更易着床成功,但是对外界培养条件要求比较高。
    (4)胚胎移植的优势:能充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能、保存品种资源和濒危物种。若要获得更多基因编辑猪,可采用胚胎分割技术对移植前的胚胎进行分割。
    25. 研究发现,大部分白血病患者细胞中存在异常的融合基因 UBA2-WTIP,可作为检测白血病的特异性分子标志物。科研人员通过 RT-PCR 方法克隆得到融合基因UBA2-WTIP,为了研究该基因的作用和致病机制,需要构建重组载体并把目的基因和FLAG标签基因序列连接起来,分别获得带有 FLAG 肽链的 UBA2-WTIP 融合蛋白和WTIP 蛋白。FLAG肽链由8个氨基酸残基组成,可作为基因工程中蛋白质是否表达的标记。
    (1)科研人员以提取的某白血病人外周血细胞总 RNA为模板,经过_________过程合成cDNA,设计________种引物,经RT-PCR扩增出融合基因 UBA2-WTIP,对测序结果进行数据分析,推测融合基因UBA2-WTIP 是在 UBA2基因的第16 外显子与 WTIP 基因的第2 外显子处拼接而成,如图1所示。为了验证该融合基因的产生是基因组DNA融合而不是不同的RNA 剪接后逆转录所产生的,可提取该病人的________(填“DNA”或“RNA”)为模板,使用图中F₁ 和 R₁ 引物进行PCR扩增,若出现_________bp扩增片段,说明该融合基因的融合方式是基因组水平融合。
    (2)为了构建重组载体,科研人员设计了以下2种引物,如图2所示:上游引物F2为:5’TATGGTACCATG①GCACTGTCGCGGGGG3’,GGTACC 为 KpnI酶切位点;下游引物R2为:5’TAT②TCA③GAGCTCAGTGACGTG3’;FLAG标签基因编码链序列可以插入目的基因编码区的首端或者末端。已知引物中 ATG对应起始密码。若UBA2-WTIP融合基因编码的蛋白质前端有一段信号肽,则 FLAG 标签基因序列一般不能插入①位置,原因是_________;已知引物中 TCA 对应终止密码,则FLAG 标签基因序列和EcRⅠ酶切位点应分别插入在下游引物_________、________处。
    (3)制备的重组载体体外转染人类白血病细胞株 KG-1a细胞,提取各组细胞总蛋白,用FLAG 单克隆抗体检测蛋白表达情况,并分别测定转染空质粒的对照细胞、转录 UBA2-WTIP 融合基因及转录 WTIP 基因的KG-1a细胞增殖情况,结果分别如图3所示。
    检测相关蛋白质是否表达的方法是________;上述生长曲线结果说明________。
    【答案】(1)①. 逆(反)转录 ②. 2 ③. DNA ④. 239
    (2)①. 蛋白质前端的信号肽一般会在蛋白质成熟时被切割掉,所以不能得到带有FLAG肽链的蛋白质 ②. R2② ③. R2③
    (3)①. 抗原—抗体杂交 ②. UBA2—WTIP融合基因能在体外促进白血病细胞增殖,WTIP基因能抑制白血病细胞的增殖
    【分析】(1)科研人员以提取的某白血病人外周血细胞总RNA为模板,经过逆(反)转录过程合成cDNA。DNA分子是双链,PCR时以每一条为模板,合成子代DNA,因此需要2种引物。据图1可知,如果融合基因UBA2—WTIP是在UBA2基因的第16外显子与WTIP基因的第2外显子处拼接而成,那么该基因长度为239bp,能以F1和R1引物进行PCR扩增,因此如果提取该病人的DNA,使用图中F1和R1引物进行PCR扩增,若出现239bp扩增片段,该融合基因的融合方式是基因组水平融合。
    (2)PCR时,在引物作用下,DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链,即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的,①位置前面为ATG,是翻译的起始位置,若FLAG标签基因序列插入①位置,UBA2—WTIP融合基因编码的蛋白质前端有一段信号肽,蛋白质前端的信号肽一般会在蛋白质成熟时被切割掉,不能得到带有FLAG肽链的蛋白质,因此一般不能插入①位置。已知引物中 TCA 对应终止密码,标签基因序列本身含有启动子和终止子序列,不需要在目的基因中的启动子和终止子之间,因此可在下游引物R2②③处分别插入FLAG标签基因序列和EcR Ⅰ酶切位点。
    (3)检测相关蛋白质是否表达的方法是抗原—抗体杂交。据图3结果可知,与转染空质粒的对照细胞相比,转录WTIP基因的KG-la细胞增殖较少,转录UBA2—WTIP融合基因的KG-la细胞增殖较多,据此可知,UBA2—WTIP融合基因能在体外促进白血病细胞增殖,WTIP基因能抑制白血病细胞的增殖。试管号
    试管中物质
    添加物质
    试管内物质变化
    1
    含细胞质基质和线粒体
    14C标记的葡萄糖
    葡萄糖的量减少,有14CO₂、H₂18O的生成
    2
    细胞质基质
    14C标记的葡萄糖
    葡萄糖的量减少,有14C标记的丙酮酸、[H]的生成
    3
    含线粒体悬液
    14C标记的葡萄糖
    葡萄糖的量?
    4
    含线粒体悬液
    14C标记的丙酮酸
    丙酮酸的量减少,14CO₂、H₂18O的生成
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