甘肃省兰州第一中学2023-2024学年高二下学期6月月考+生物

这是一份甘肃省兰州第一中学2023-2024学年高二下学期6月月考+生物，共29页。试卷主要包含了 下列有关干细胞说法正确的是， 对下列生物分类错误的是等内容，欢迎下载使用。

说明：本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分，满分100分，考试时间75分钟，答案写在答题卡上，交卷时只交答题卡。
第I卷 单项选择题（每小题3分，共48分）
1. 传统发酵技术是人类在生活过程中对微生物的运用，下列叙述错误的是（ ）
A. 米酒制作：发酵液中的气泡来源于真核单细胞生物酵母菌的无氧呼吸
B. 果醋制作：原核生物醋酸菌在有氧条件下将糖或酒精转化为乙酸
C. 腐乳制作：真核生物毛霉将蛋白质分解产生小分子的肽和氨基酸
D. 酸奶制作：原核生物乳酸菌厌氧发酵产生乳酸，使产品具有特别风味
2. 多项生物技术中都需要经过“筛选”才能达到目的，下列与之相关的叙述中错误的是（ ）
A. 植物体细胞杂交后要进行筛选，选择出杂种细胞后才能进一步培养
B. 目的基因导入受体细胞后需要筛选，以确保目的基因已经成功导入
C. 单克隆抗体制备中第一次筛选，可选择出能产生特定抗体的杂交瘤细胞
D. 利用尿素为唯一氮源的选择培养基，可筛选出能分解尿素的细菌
3. 判断下列有关哺乳动物受精的表述，错误的是（ ）
A. 在自然条件下，受精是在雌性个体子宫中完成的
B. 精子需要获能才能与卵子结合
C. 精子入卵后，卵细胞膜会发生反应阻止其他精子入卵
D. 胚胎工程中，常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志
4. 下列有关干细胞说法正确的是（ ）
A. iPS细胞与植物组织培养过程中的愈伤组织一样具有全能性，能够发育成完整个体
B. 胚胎干细胞具有分化成所有组织器官甚至个体的潜能，成体干细胞无组织特异性
C. 培养iPS细胞的环境中需要95%O2和5%CO2
D. 干细胞分化规律是：全能干细胞→多能干细胞→单能干细胞
5. 下列有关DNA的粗提取与鉴定的叙述，错误的是（ ）
A. 以香蕉、人成熟的红细胞为实验材料也可以取得较好的实验效果
B DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，从而可以进一步纯化DNA
C. 预冷的酒精可以有效降低DNA酶活性，保证DNA的有效提取
D. 溶解在2ml/LNaCl溶液的DNA，加入二苯胺试剂后在沸水浴条件下呈蓝色
6. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 若采用PCR技术对一个THP9基因进行扩增，则复制n代共需要引物2n-1个
B. 构建基因表达载体时，用Mfe Ⅰ、Hind Ⅲ切割质粒，用EcR Ⅰ、Hind Ⅲ切割目的基因
C. 利用PCR技术扩增THP9基因时应选择引物1和引物4，子链的5＇端向3＇延伸与TaqDNA聚合酶的作用有关
D. PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg2+用于激活RNA聚合酶
7. 生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（ ）
A. 生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等
B. 治疗性克隆是为了获得治疗所用的克隆个体，且需要严格的监管
C. “设计试管婴儿”与“试管婴儿”主要区别在于前者需要进行遗传学诊断
D. 转基因植物进入自然生态系统后可能因具有较强的“选择优势”而影响生物多样性
8. 下列关于细胞学说的建立过程及内容的叙述正确的有几项（ ）
①细胞是一个有机体，一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成
②细胞学说揭示了细胞的多样性和生物体结构的统一性
③细胞学说完全由施莱登和施旺提出
④细胞学说认为细胞分为原核细胞和真核细胞
⑤列文虎克发现并命名了细胞
⑥细胞学说使人们对生命的认识由细胞水平进入到分子水平
A. 一项B. 两项C. 三项D. 四项
9. 生命系统存在着从细胞到生物圈各个不同的结构层次。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 草履虫可以看作是基本的生命系统，单细胞生物既是细胞层次又是个体层次
B. 生态系统中存在非生命的物质和成分，不属于生命系统
C. 病毒属于生物，但不属于任何生命系统结构层次
D. 植物体和动物体共有的生命系统层次有细胞、组织、器官、个体
10. 对下列生物分类错误的是( )
①颤蓝细菌 ②酵母菌 ③变形虫 ④小球藻 ⑤水绵 ⑥HIV ⑦大肠杆菌 ⑧甲型 H7N9流感病毒
A. 无核糖体的生物是⑥⑧B. 具核膜的生物只有③④⑤
C. ①⑦有核糖体但无染色体D. ①④⑤是自养型生物
11. 对下列图示的生物学实验的叙述正确的是（ ）
A. 若图①表示将镜头由a转换成b，则视野变明亮，观察到的细胞数目也增多
B. 若需放大观察图②中的c细胞，则只需向左方移动装片即可
C. 若图③是在显微镜下观察细胞质流动，发现细胞质的流动方向是顺时针，则实际上细胞质的流动方向是逆时针
D. 若图④是在显微镜目镜为10×，物镜为10×下观察的，视野中被相连的64个分生组织细胞所充满，目镜不变，物镜换成40×时，则视野中可检测到分生组织细胞数为4个
12. 下列有关细胞中元素及化合物的叙述，错误的是（ ）
A. ATP、DNA和磷脂分子的组成元素相同
B. Fe2+参与构成的血红蛋白的主要功能是运输血液中的O₂
C. 大多数糖类分子中H和O的数量之比类似于H2O，因而糖类又称为“碳水化合物”
D. 煮熟牛肉中的蛋白质，不能与双缩脲试剂发生反应
13. 某生物兴趣小组以一种白色野果为实验材料，对白色野果组织样液进行了有机物的鉴定下列叙述正确的是（ ）
A. 加入斐林试剂的本质是新制的Cu（OH）2，水浴加热，样液呈现砖红色，说明含有果糖
B. 双缩脲试剂在使用时需要等量混合，现用现配
C. 斐林试剂和双缩脲试剂中都有0.1g/mL的NaOH溶液
D. 鉴定组织样液中的脂肪需要制作临时装片在显微镜下观察，用苏丹Ⅲ染液染色后需要用75%酒精洗去浮色
14. 2024年3月22日第三十二届“世界水日”的主题是“Water fr Peace”，下列有关水的说法错误的是（ ）
A. 细胞内的自由水是良好的溶剂，能参与物质运输和细胞代谢
B. 氢键是水分子间的弱吸引力，决定了水的流动性，是物质运输所必需的
C. 将种子晒干是为了减少其中自由水的量而使其代谢水平下降，便于储藏
D. 气温逐渐降低使冬小麦体内结合水和自由水的比值逐渐降低，增强抗逆境能力。
15. 如图表示糖类的化学组成和种类，下列有关糖类的叙述正确的是（ ）
A. ①②③它们均可继续水解，其中①②还属于还原糖
B. ④⑤分别为纤维素、肌糖原，二者均储存能量，可作为储能物质
C. 图中均为提供能量的糖类
D. 几丁质又称壳多糖，多种生物含有，能与重金属离子有效结合，可用于废水处理
16. 下面是关于脂质的叙述，其中正确的是（ ）
A. 磷脂由C、H、O、N、P元素组成，是构成细胞各种膜结构的主要成分
B. 脂肪由一分子脂肪酸和三分子甘油组成，大多数动物脂肪含有饱和脂肪酸，具有储存能量和保护内脏等作用
C. 性激素可用双缩脲试剂检测，对动物的生长发育和生殖等起重要的调节作用
D. 胆固醇是细胞膜的必要组分，可以参与血液中脂质的运输
第II卷（非选择题，共52分）
17. 为提高作物产量，种植业往往使用大量的氮素化肥，既增加了生产成本，又易造成环境污染。自生固氮菌营独立生活，为改变这种现状带来了希望。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图，回答下列问题：

（1）土壤是微生物的天然培养基，该培养基能为微生物的提供的营养物质分别是_____。
（2）下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的培养基_____。
（3）纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是_____。
（4）④的平板上统计结果数一般用菌落数表示，一般选择数目 30-300在范围的平板上计数。若甲研究员做这个实验，统计的菌落数分别是132、136、128，则每克土壤中含有的固氮菌为_____个，运用这种方法统计的结果往往较实际值_____。原因是_____。除此之外还可以用_____，但运用这种方法统计的结果往往较实际值偏大。
（5）图3是某同学利用不同于图1方法从稀释液中分离菌株的示意图。下列对其操作及结果的叙述不正确的有_____（填字母）。

a.操作前用无水乙醇对双手进行消毒处理
b.划线时将沾有菌种的接种环插入培养基
c.只有在5这一区域中才能得到所需菌落
d.整个过程需要对接种环进行6次灼烧
18. 花椰菜（2n=18，用MM表示）属十字花科，经人工长期定向选育，对黑腐病无抗性。黑芥（2n=16用，NN表示）为花椰菜近缘野生种，对黑腐病等多种常见病害具有抗性。我国科学家将黑芥叶肉原生质体和花椰菜下胚轴原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株（过程如下图）：请回答下列问题：
（1）利用酶解法去除细胞壁获取原生质体，图①表示原生质体融合的过程，融合原理是_____，诱导过程常用的物理方法是_____（两种），融合成功的标志是_____。
（2）图②是图①经脱分化后形成愈伤组织。由图②经_____过程形成图③，细胞呈现特定的结构和功能，该过程的实质是_____，原理是_____。
（3）给予光照，在培养一定天数后，用显微镜观察细胞中是否存在_____（细胞器），作为早期鉴别杂合细胞的标志，初步筛选出融合细胞。获得的融合细胞染色体组成为_____（用字母M和N表示），染色体数为_____，染色体组数为_____。
（4）请说出鉴定新植株是否抗黑腐病的方法_____。
（5）与传统的有性杂交方法相比，植物体细胞杂交技术的主要优点是_____。
19. EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。抗原的选择和制备过程为：将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2、非EV71蛋白注射到小鼠体内，多次免疫后，取上述各组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如下图所示。
（1）EV71免疫的小鼠血清抗体_____（填“是”或“不是”）单一抗体，据图分析判断依据是_____。
（2）制备抗EV71单克隆抗体时，选用_____免疫的小鼠的B细胞效果最佳。单克隆抗体的制备流程图如下：
（3）相比较植物细胞，诱导融合动物细胞特有的方法是_____，融合后将获得_____种细胞（只考虑细胞两两融合的情况）。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得_____。将其接种到96孔板，进行_____培养和_____，目的是获得_____。
（4）图中体外的扩大培养，是从_____中获取大量的单克隆抗体。除此之外还可以使用的方法是_____，该单克隆抗体具有的优点是能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性识别，并且可大量制备。
20. 体细胞核移植已在很多物种中取得成功，但其效率较低，只有不足4%的重构胚能发育成健康的个体，原因可能是胚胎的基因表达异常所致。下图为提高克隆牛重构胚发育的技术流程，其中TSA为组蛋白脱乙酰化酶抑制剂。请回答以下问题：
（1）体外培养牛乳腺细胞会发生接触抑制，需进行_____处理，进而实现传代培养。
（2）采集的卵母细胞需要培养至_____时期，去除的“核”实际上是指_____。除了使用图中的显微操作法去核，还可使用梯度离心、_____和化学物质处理等方法去核。
（3）胚胎移植前需要对代孕母牛进行_____处理。一般选择发育至_____时期的胚胎进行移植。
（4）一次核移植技术后，若需要获得更多克隆小牛，可对早期胚胎进行胚胎分割，操作时要注意_____
21. “蓝白斑筛选”是一种基于质粒载体的DNA重组技术，它可通过改变质粒载体中的DNA序列，实现对菌落颜色的调控，如图所示。回答下列问题：
（1）构建重组载体时，应将目的基因插入到质粒的_____之间。将外源DNA片段与质粒连接成重组质粒时，所用的酶催化形成的化学键是_____。试从限制酶的角度提出一条避免载体自身环化的方法：_____。
（2）将重组质粒转入大肠杆菌前，需在低温﹑低浓度的_____溶液中处理大肠杆菌，目的是_____。
（3）在筛选导入重组质粒的大肠杆菌时，培养基中应加入_____。培养一段时间的平板上，含有重组质粒的大肠杆菌菌落呈白色的原因是_____。与“氨苄青霉素”筛选相比，“蓝白斑”筛选的优点是_____。EcRⅠ
BamHⅠ
KpnⅠ
MfeⅠ
HindⅢ
培养基类型
培养基组分
培养基甲
甘露醇、、、NaCl、、、蒸馏水
培养基乙
甘露醇、、、NaCl、、、蒸馏水、琼脂
氨苄青霉素
未导入质粒
×
导入空白质粒
√蓝色菌落
导入重组质粒
√白色菌落
兰州一中2023-2024-2学期5月考试试题
高二生物
说明：本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分，满分100分，考试时间75分钟，答案写在答题卡上，交卷时只交答题卡。
第I卷 单项选择题（每小题3分，共48分）
1. 传统发酵技术是人类在生活过程中对微生物的运用，下列叙述错误的是（ ）
A. 米酒制作：发酵液中的气泡来源于真核单细胞生物酵母菌的无氧呼吸
B. 果醋制作：原核生物醋酸菌在有氧条件下将糖或酒精转化为乙酸
C. 腐乳制作：真核生物毛霉将蛋白质分解产生小分子肽和氨基酸
D. 酸奶制作：原核生物乳酸菌厌氧发酵产生乳酸，使产品具有特别风味
【答案】A
【解析】
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌能将糖源或酒精转变成醋酸；参与腐乳制作的微生物有多种，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要是毛霉；参与泡菜制作的微生物是乳酸菌。
【详解】A、米酒制作原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精，酵母菌属于兼性厌氧生物，开始在有氧条件下大量繁殖，有氧呼吸产生二氧化碳和水，后期进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，因此发酵液中的气泡来源于酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸，A错误；
B、醋酸菌是好氧细菌，当氧气和糖源都充足时能将糖分解成醋酸；当氧气充足但是缺少糖源时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸，B正确；
C、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，真核生物毛霉产生的蛋白酶能将蛋白质分解产生小分子的肽和氨基酸，C正确；
D、制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸，使奶具有特别风味，D正确。
故选A。
2. 多项生物技术中都需要经过“筛选”才能达到目的，下列与之相关的叙述中错误的是（ ）
A. 植物体细胞杂交后要进行筛选，选择出杂种细胞后才能进一步培养
B. 目的基因导入受体细胞后需要筛选，以确保目的基因已经成功导入
C. 单克隆抗体制备中第一次筛选，可选择出能产生特定抗体的杂交瘤细胞
D. 利用尿素为唯一氮源的选择培养基，可筛选出能分解尿素的细菌
【答案】C
【解析】
【分析】1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达；2、制备单克隆抗体过程中涉及到两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；3、选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基．其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。
【详解】A、植物体细胞杂交后要筛选出杂种细胞才能进一步培养，A正确；
B、目的基因导入受体细胞后需要筛选，以确保目的基因已经成功导入，B正确；
C、单克隆抗体制备中第一次筛选，可选择出杂交瘤细胞，C错误；
D、只有能分解尿素的细菌采用在以尿素为唯一氮源的选择培养基上生产，因此用该培养基可筛选出能分解尿素的细菌，D正确。
故选C。
3. 判断下列有关哺乳动物受精的表述，错误的是（ ）
A. 在自然条件下，受精是在雌性个体子宫中完成的
B. 精子需要获能才能与卵子结合
C. 精子入卵后，卵细胞膜会发生反应阻止其他精子入卵
D. 胚胎工程中，常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志
【答案】A
【解析】
【分析】1、受精是精子与卵子结合形成合子（即受精卵）的过程，包括受精前的准备阶段和受精阶段。在自然条件下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。
2、试管动物技术是指通过人工操作使卵子在体外条件下受精，经培养发育成早期胚胎后，再经移植产生个体的技术。
【详解】A、自然条件下，哺乳动物的受精是在雌性动物的输卵管内完成的，A错误；
B、精子需要获能才能与卵子结合，排出的卵子需在输卵管内进一步发育到减数分裂Ⅱ中期，才具备与精子受精的能力，B正确；
C、精子入卵后，卵细胞膜会立即发生生理反应，拒绝其他精子再进入卵内，当精子触及卵细胞膜的瞬间，会产生阻止多个精子入卵受精的反应，称为透明带反应，C正确；
D、在实际胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志，D正确。
故选A。
4. 下列有关干细胞说法正确的是（ ）
A. iPS细胞与植物组织培养过程中的愈伤组织一样具有全能性，能够发育成完整个体
B. 胚胎干细胞具有分化成所有组织器官甚至个体的潜能，成体干细胞无组织特异性
C. 培养iPS细胞的环境中需要95%O2和5%CO2
D. 干细胞分化规律是：全能干细胞→多能干细胞→单能干细胞
【答案】D
【解析】
【分析】iPS细胞技术是借助基因导入技术将某些特定因子基因导入动物或人的体细胞，以将其重编程或诱导为ES细胞样的细胞，即iPS细胞。
【详解】A、植物组织培养过程中的愈伤组织具有全能性，能够发育成完整个体，虽然iPS细胞也具有全能性，它并不能直接发育成完整个体，而是具有分化成多种组织细胞的潜能，A错误；
B、成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力，B错误；
C、培养iPS细胞的环境中需要95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH），C错误；
D、全能干细胞可以分化成所有类型的细胞，多能干细胞可以分化成多种类型的细胞，而单能干细胞只能分化成一种类型的细胞，因此干细胞分化规律是：全能干细胞→多能干细胞→单能干细胞，D正确。
故选D。
5. 下列有关DNA的粗提取与鉴定的叙述，错误的是（ ）
A. 以香蕉、人成熟的红细胞为实验材料也可以取得较好的实验效果
B. DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，从而可以进一步纯化DNA
C. 预冷的酒精可以有效降低DNA酶活性，保证DNA的有效提取
D. 溶解在2ml/LNaCl溶液的DNA，加入二苯胺试剂后在沸水浴条件下呈蓝色
【答案】A
【解析】
【分析】根据DNA的溶解性提取DNA：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl中的溶解度不同。DNA不溶于酒精，但是某些蛋白质则溶于酒精。DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。
【详解】A、人成熟的红细胞没有细胞核，以其为实验材料不能提取到DNA，A错误；
B、 DNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些蛋白质则溶于酒精溶液，利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA，B正确；
C、预冷的酒精溶液一是抑制核酸水解酶的活性，防止DNA 降解；二是降低分子运动，易于形成沉淀析出；三是低温有利于增加DNA分子的柔韧性，减少断裂，因此预冷的酒精可以有效降低DNA酶活性，保证DNA的有效提取，C正确；
D、将丝状物溶解在2ml/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后在沸水浴条件下呈蓝色，D正确。
故选A。
6. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 若采用PCR技术对一个THP9基因进行扩增，则复制n代共需要引物2n-1个
B. 构建基因表达载体时，用Mfe Ⅰ、Hind Ⅲ切割质粒，用EcR Ⅰ、Hind Ⅲ切割目的基因
C. 利用PCR技术扩增THP9基因时应选择引物1和引物4，子链的5＇端向3＇延伸与TaqDNA聚合酶的作用有关
D. PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg2+用于激活RNA聚合酶
【答案】B
【解析】
【分析】由图分析可知，要保证将目的基因切割下来，但是又不破坏目的基因，不能选择MfeⅠ切割目的基因，要保证质粒结构的完整性，不能选择BamHⅠ切割质粒。
【详解】A、开始的THP9基因只有一个，复制n代结束后的基因有2n个，每个基因复制1次需要1对引物，即2n+1-2个，A错误；
B、构建基因表达载体时，用Mfe Ⅰ、Hind Ⅲ切割质粒时，形成的黏性末端分别是AATT-3'和AGCT-3'，用EcR Ⅰ、Hind Ⅲ切割目的基因时，形成的黏性末端分别是AATT-3'和AGCT-3'，形成的黏性末端对应相同，可以成功将目的基因插入质粒，同时避免目的基因自身环化和随意连接，B正确；
C、利用PCR技术扩增基因时，引物从5'端朝着3'端延伸，故应与模板链3'端配对，故应选择引物2和引物3，C错误；
D、PCR的产物是DNA，所以在过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg2+用于激活DNA聚合酶，D错误。
故选B。
7. 生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（ ）
A. 生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等
B. 治疗性克隆是为了获得治疗所用的克隆个体，且需要严格的监管
C. “设计试管婴儿”与“试管婴儿”的主要区别在于前者需要进行遗传学诊断
D. 转基因植物进入自然生态系统后可能因具有较强的“选择优势”而影响生物多样性
【答案】B
【解析】
【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）;
2、克隆技术：（1）治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。（2）生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。中国政府的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人;
3、生物武器的传播是把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
【详解】A、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，它可以直接或者通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，A正确；
B、治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的，需要在严格的监管下进行，B错误；
C、“设计试管婴儿”与“试管婴儿”的主要区别在于试管婴儿技术在植入前对胚胎进行遗传学诊断，即基因诊断，C正确；
D、转基因植物进入自然生态系统后可能因其具有较强的“选择优势”而占有较多的环境资源，使得其他物种的生存受到影响，从而严重影响生物多样性，D正确。
故选B。
8. 下列关于细胞学说的建立过程及内容的叙述正确的有几项（ ）
①细胞是一个有机体，一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成
②细胞学说揭示了细胞的多样性和生物体结构的统一性
③细胞学说完全由施莱登和施旺提出
④细胞学说认为细胞分为原核细胞和真核细胞
⑤列文虎克发现并命名了细胞
⑥细胞学说使人们对生命的认识由细胞水平进入到分子水平
A. 一项B. 两项C. 三项D. 四项
【答案】A
【解析】
【分析】细胞学说是由德植物学家施莱登和动物学家施旺提出的，其内容为：
（1）细胞是一个有机体，一切动植物都是由细胞发育而来，并由细胞和细胞的产物所构成；
（2）细胞是一个相对独立的单位，既有它自己的生命，又对与其他细胞共同组成的整体的生命起作用；
（3）新细胞可以从老细胞中产生。
【详解】①细胞是一个有机体，一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成，①正确；
②从细胞结构上说，除病毒等少数种类以外，生物体都是由细胞构成，细胞是生物体的结构和功能的基本单位，说明了统一性，未揭示细胞的多样性，②错误；
③细胞学说的建立者主要是德国的施莱登、施旺，魏尔肖对其进行了补充，③错误；
④细胞学说并没有提出细胞分为原核细胞和真核细胞，④错误；
⑤罗伯特·虎克发现并命名了细胞，⑤错误；
⑤细胞学说使人们对生命的认识进入到细胞水平，并为进入分子水平打下基础，⑤错误；
综上所述，①正确，即A正确。
故选A。
9. 生命系统存在着从细胞到生物圈各个不同的结构层次。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 草履虫可以看作是基本的生命系统，单细胞生物既是细胞层次又是个体层次
B. 生态系统中存在非生命的物质和成分，不属于生命系统
C. 病毒属于生物，但不属于任何生命系统结构层次
D. 植物体和动物体共有的生命系统层次有细胞、组织、器官、个体
【答案】B
【解析】
【分析】生命系统的结构层次从小到大进行划分，可以依次分为细胞、组织、器官、系统、个体、种群和群落、生态系统和生物圈。细胞是最小的生命系统。
【详解】A、草履虫是单细胞生物，细胞是基本的生命系统，因此草履虫可以看作是基本的生命系统，单细胞生物既是细胞层次又是个体层次，A正确；
B、生态系统的定义是在一定的地域内，生物与环境所形成的统一整体，不仅包含了生命系统，也包含了非生命的物质和成分，生态系统中的非生物成分是生命系统的一部分，它们与生物成分相互作用，共同维持生态系统的平衡和功能，B错误；
C、病毒属于生物，但是属于无细胞结构生物，最基本的生命系统是细胞，因此病毒不属于任何生命系统结构层次，C正确；
D、生命系统的结构层次从小到大进行划分，可以依次分为细胞、组织、器官、系统、个体、种群和群落、生态系统和生物圈，植物没有系统，因此动物与植物共有的生命系统层次有细胞、组织、器官、个体，D正确。
故选B。
10. 对下列生物分类错误的是( )
①颤蓝细菌 ②酵母菌 ③变形虫 ④小球藻 ⑤水绵 ⑥HIV ⑦大肠杆菌 ⑧甲型 H7N9流感病毒
A. 无核糖体的生物是⑥⑧B. 具核膜的生物只有③④⑤
C. ①⑦有核糖体但无染色体D. ①④⑤是自养型生物
【答案】B
【解析】
【分析】颤蓝细菌是原核生物，酵母菌是真核生物，变形虫是真核生物，小球藻和水绵是真核生物，HIV是病毒，大肠杆菌是原核生物，甲型H7N9流感病毒是病毒，肺炎链球菌是原核生物。
【详解】A、细胞生物都有核糖体，病毒没有细胞结构，无核糖体的是病毒，即⑥⑧，A正确；
B、具有核膜的生物是真核生物，真核生物有②酵母菌、③变形虫、④小球藻、⑤水绵，即②③④⑤，B错误；
C、原核细胞有核糖体但无染色体，颤蓝细菌、大肠杆菌都是原核生物，即①⑦有核糖体但无染色体，C正确；
D、颤蓝细菌虽没有叶绿体但含有叶绿素和藻蓝素，所以能进行光合作用，而小球藻和水绵含有叶绿体能进行光合作用，即①④⑤都是自养型生物，D正确。
故选B。
11. 对下列图示的生物学实验的叙述正确的是（ ）
A. 若图①表示将镜头由a转换成b，则视野变明亮，观察到的细胞数目也增多
B. 若需放大观察图②中的c细胞，则只需向左方移动装片即可
C. 若图③是在显微镜下观察细胞质流动，发现细胞质的流动方向是顺时针，则实际上细胞质的流动方向是逆时针
D. 若图④是在显微镜目镜为10×，物镜为10×下观察的，视野中被相连的64个分生组织细胞所充满，目镜不变，物镜换成40×时，则视野中可检测到分生组织细胞数为4个
【答案】D
【解析】
【分析】显微镜成像的特点：显微镜成像是倒立的虚像，即上下相反，左右相反，物像的移动方向与标本的移动方向相反，故显微镜下所成的像是倒立放大的虚像，若在视野中看到细胞质顺时针流动，则实际上细胞质就是顺时针流动。
【详解】A、由图1观察可知，a、b表示物镜与装片之间的距离，距离越近放大倍数越大，则b的放大倍数大于a，若图①表示将显微镜镜头由a转换成b，是低倍镜转换为高倍镜，则视野变暗，视野中观察到的细胞数目减少，细胞变大，A错误；
B、c细胞位于视野的左方，若需放大观察图②中的c细胞，则需要先将玻片向左方移动，使物像位于视野中央，再换上高倍物镜，调节光圈增加视野亮度，转动细准焦螺旋使视野变清晰，B错误；
C、显微镜下所成的像是倒立放大的虚像，视野中看到的细胞质流动方向与实际细胞质流动方向相同，若图③是在显微镜下观察细胞质流动，发现细胞质的流动方向是顺时针，则实际上细胞质的流动方向是顺时针，C错误；
D、若图④是在显微镜下目镜为10×，物镜为10×，视野中被相连的64个分生组织细胞所充满，目镜不变，物镜换成40×时，放大倍数为原来的4倍，则视野中可检测到分生组织细胞数为64÷42=4个，D正确。
故选D。
12. 下列有关细胞中元素及化合物的叙述，错误的是（ ）
A. ATP、DNA和磷脂分子的组成元素相同
B. Fe2+参与构成的血红蛋白的主要功能是运输血液中的O₂
C. 大多数糖类分子中H和O的数量之比类似于H2O，因而糖类又称为“碳水化合物”
D. 煮熟牛肉中的蛋白质，不能与双缩脲试剂发生反应
【答案】D
【解析】
【分析】糖类的元素组成一般是C、H、O，蛋白质的元素组成是C、H、O、N等，不同类的脂质的元素组成不同，脂肪和固醇的元素组成是C、H、O，磷脂的元素组成是C、H、O、N、P，核酸的元素组成是C、H、O、N、P。
【详解】A、ATP、DNA和NADPH的组成元素均为C、H、O、N、P，A正确；
B、构成血红蛋白的血红素中含有Fe元素，血红蛋白的主要功能是运输血液中的O₂，B正确；
C、多数糖类分子中氢原子和氧原子之比是2:1，类似水分子，因而糖类又称为“碳水化合物”，C正确；
D、煮熟牛肉中的蛋白质含有肽键，能与双缩脲试剂发生反应，D错误。
故选D。
13. 某生物兴趣小组以一种白色野果为实验材料，对白色野果组织样液进行了有机物的鉴定下列叙述正确的是（ ）
A. 加入斐林试剂的本质是新制的Cu（OH）2，水浴加热，样液呈现砖红色，说明含有果糖
B. 双缩脲试剂使用时需要等量混合，现用现配
C. 斐林试剂和双缩脲试剂中都有0.1g/mL的NaOH溶液
D. 鉴定组织样液中的脂肪需要制作临时装片在显微镜下观察，用苏丹Ⅲ染液染色后需要用75%酒精洗去浮色
【答案】C
【解析】
【分析】生物组织中化合物的鉴定：（1）斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀）。（2）蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应。（3）脂肪可用苏丹Ⅲ染液鉴定，呈橘黄色。
【详解】A、加入斐林试剂的本质是新制的Cu（OH）2，水浴加热，样液呈现砖红色，说明含有还原糖，但不一定是果糖，A错误；
B、斐林试剂在使用时需要等量混合，现用现配，双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂（0.1g/mLNaOH溶液）摇匀后，再加入试剂B（0.01g/mLCuSO4溶液），B错误；
C、斐林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成，它们中都有0.1g/mL的NaOH溶液，C正确；
D、鉴定组织样液中的脂肪需要制作临时装片在显微镜下观察，用苏丹Ⅲ染液染色后需要用50%酒精洗去浮色，D错误。
故选C。
14. 2024年3月22日第三十二届“世界水日”的主题是“Water fr Peace”，下列有关水的说法错误的是（ ）
A. 细胞内的自由水是良好的溶剂，能参与物质运输和细胞代谢
B. 氢键是水分子间的弱吸引力，决定了水的流动性，是物质运输所必需的
C. 将种子晒干是为了减少其中自由水的量而使其代谢水平下降，便于储藏
D. 气温逐渐降低使冬小麦体内结合水和自由水的比值逐渐降低，增强抗逆境能力。
【答案】D
【解析】
【分析】细胞中绝大部分的水以游离的形式存在，可以自由流动，叫做自由水。自由水是细胞内的良好溶剂，许多种物质溶解在这部分水中，细胞内的许多生物化学反应也都需要有水的参与。多细胞生物体的绝大多数细胞，必须浸润在以水为基确的液体环境中。水在生物体内的流动，可以把营养物质运送到各个细胞，同时也把各个细胞在新陈代谢中产生的废物，运送到排泄器官或者直接排出体外。
【详解】A、细胞内的自由水是细胞内良好的溶剂，有利于细胞中生化反应的顺利进行，同时参与物质运输，A正确；
B、水分子间弱吸引力氢键不断地断裂，又不断地形成，这决定了其具有流动性，是物质运输所必需，B正确；
C、将种子晒干失去的是自由水，自由水含量下降，细胞代谢减慢，因而储藏过程中失去的有机物减少，便于储藏，C正确；
D、气温逐渐降低后植物细胞内结合水/自由水比值升高，说明细胞液浓度上升，细胞代谢缓慢，有利于提高植物的抗寒、抗旱等抗性，D错误。
故选D。
15. 如图表示糖类的化学组成和种类，下列有关糖类的叙述正确的是（ ）
A. ①②③它们均可继续水解，其中①②还属于还原糖
B. ④⑤分别为纤维素、肌糖原，二者均储存能量，可作为储能物质
C. 图中均为提供能量的糖类
D. 几丁质又称壳多糖，多种生物含有，能与重金属离子有效结合，可用于废水处理
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：图示中①、②、③依次代表单糖、二糖、多糖，其中单糖不能继续水解；④是纤维素，是构成植物细胞壁的组成成分；⑤是肌糖原。
【详解】A、图示中①、②、③依次代表单糖、二糖、多糖，其中单糖不能继续水解，②中蔗糖不属于还原糖，A错误；
B、④⑤分别为纤维素、肌糖原，其中纤维素不能储存能量，不可作为储能物质，B错误；
C、图中五碳糖和纤维素等糖类不能提供能量，C错误；
D、几丁质又称壳多糖，广泛存在于甲壳类动物的外壳、昆虫的甲壳和真菌的胞壁中，也存在于一些绿藻中，即多种生物含有，能与重金属离子有效结合，可用于废水处理，D正确。
故选D。
16. 下面是关于脂质的叙述，其中正确的是（ ）
A. 磷脂由C、H、O、N、P元素组成，是构成细胞各种膜结构的主要成分
B. 脂肪由一分子脂肪酸和三分子甘油组成，大多数动物脂肪含有饱和脂肪酸，具有储存能量和保护内脏等作用
C. 性激素可用双缩脲试剂检测，对动物的生长发育和生殖等起重要的调节作用
D. 胆固醇是细胞膜的必要组分，可以参与血液中脂质的运输
【答案】A
【解析】
【分析】组成脂质的化学元素主要是C、H、O，细胞中常见的脂质有：
1、脂肪：①细胞内良好的储能物质；②保温、缓冲和减压作用。
2、磷脂：构成膜（细胞膜、核膜、细胞器膜）结构的重要成分。
3、固醇：维持新陈代谢和生殖起重要调节作用，分为胆固醇、性激素、维生素D等。（1）胆固醇：构成细胞膜的重要成分，参与血液中脂质的运输。（2）性激素：促进生殖器官的发育和生殖细胞的形成。（3）维生素D：促进肠道对钙和磷的吸收。
【详解】A、磷脂中除C、H、O三种元素外，还含有N、P元素，是构成细胞各种膜结构的主要成分，A正确；
B、脂肪是由三分子脂肪酸与一分子甘油发生反应而形成的酯，即三酰甘油，植物脂肪大多含有不饱和脂肪酸，大多数动物脂肪含有饱和脂肪酸，脂肪具有储存能量和保护内脏等作用，B错误；
C、性激素的化学本质是固醇，属于脂质，不能用双缩脲试剂检测，C错误；
D、胆固醇是动物细胞膜的重要组成成分，胆固醇不是细胞膜的必要组分，D错误。
故选A。
第II卷（非选择题，共52分）
17. 为提高作物产量，种植业往往使用大量的氮素化肥，既增加了生产成本，又易造成环境污染。自生固氮菌营独立生活，为改变这种现状带来了希望。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图，回答下列问题：

（1）土壤是微生物的天然培养基，该培养基能为微生物的提供的营养物质分别是_____。
（2）下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的培养基_____。
（3）纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是_____。
（4）④的平板上统计结果数一般用菌落数表示，一般选择数目 30-300在范围的平板上计数。若甲研究员做这个实验，统计的菌落数分别是132、136、128，则每克土壤中含有的固氮菌为_____个，运用这种方法统计的结果往往较实际值_____。原因是_____。除此之外还可以用_____，但运用这种方法统计的结果往往较实际值偏大。
（5）图3是某同学利用不同于图1方法从稀释液中分离菌株的示意图。下列对其操作及结果的叙述不正确的有_____（填字母）。

a.操作前用无水乙醇对双手进行消毒处理
b.划线时将沾有菌种的接种环插入培养基
c.只有在5这一区域中才能得到所需菌落
d.整个过程需要对接种环进行6次灼烧
【答案】（1）碳源，氮源，水，无机盐
（2）乙 （3）检验培养基制备是否合格（检验制备的培养基是否有杂菌污染）
（4） ①. 1.32×107 ②. 小 ③. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 ④. 显微镜直接计数法
（5）abc
【解析】
【分析】土壤有”微生物的天然培养基“之称。同其他生物环境相比，土壤中的微生物，数量最大，种类最多。在富含有机质的土壤表层，有更多的微生物生长，故步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中；由图观察可知，步骤③中的稀释梯度分别为10、100、1000倍，实验中取样进行培养的是稀释倍数为1000倍。
小问1详解】
培养基的主要成分是水、碳源、氮源、无机盐，土壤是微生物的天然培养基，也能为微生物的生长提供这些营养物质。
【小问2详解】
培养基甲不含琼脂，为液体培养基，不能用于涂布平板，故步骤④应选其中的培养基乙。
【小问3详解】
纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是检测培养过程中培养基是否被杂菌污染。
【小问4详解】
将土壤10g加入90mL无菌水中，稀释了10倍，步骤③中的稀释梯度分别为10、100、1000倍，故步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍，整个过程共稀释了10000倍，因此每克土壤中含有的固氮菌为（132+136+128）÷3÷0.1×104=1.32×107个，运用稀释涂布平板法统计的结果往往较实际值偏小的，原因是当两个或多个细胞连在一起时，只能观察计数为一个菌落。除此之外还可以用显微镜直接计数法，但运用这种方法统计的结果往往较实际值偏大。
【小问5详解】
a、操作前用70%的酒精对双手进行消毒处理，a错误；
b、划线时将沾有菌种的接种环涂抹在培养基表面，b错误；
c、在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养就能得到所需菌落，c错误；
d、每次划线前后都要对接种环进行灭菌，灭菌的方法是在火焰上灼烧，整个过程需要对接种环进行6次灼烧，d正确。
故选abc。
18. 花椰菜（2n=18，用MM表示）属十字花科，经人工长期定向选育，对黑腐病无抗性。黑芥（2n=16用，NN表示）为花椰菜近缘野生种，对黑腐病等多种常见病害具有抗性。我国科学家将黑芥叶肉原生质体和花椰菜下胚轴原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株（过程如下图）：请回答下列问题：
（1）利用酶解法去除细胞壁获取原生质体，图①表示原生质体融合的过程，融合原理是_____，诱导过程常用的物理方法是_____（两种），融合成功的标志是_____。
（2）图②是图①经脱分化后形成的愈伤组织。由图②经_____过程形成图③，细胞呈现特定的结构和功能，该过程的实质是_____，原理是_____。
（3）给予光照，在培养一定天数后，用显微镜观察细胞中是否存在_____（细胞器），作为早期鉴别杂合细胞的标志，初步筛选出融合细胞。获得的融合细胞染色体组成为_____（用字母M和N表示），染色体数为_____，染色体组数为_____。
（4）请说出鉴定新植株是否抗黑腐病的方法_____。
（5）与传统的有性杂交方法相比，植物体细胞杂交技术的主要优点是_____。
【答案】（1） ①. 细胞膜具有流动性 ②. 电融合法，离心法 ③. 融合细胞生出新的细胞壁
（2） ①. 再分化 ②. 基因的选择性表达 ③. 植物细胞具有全能性
（3） ①. 叶绿体 ②. MMNN ③. 34 ④. 4
（4）对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可鉴定出该植株是否具有抗病特性或者抗病程度
（5）克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍/能打破不同生物的生殖隔离
【解析】
【分析】据图分析，图①表示原生质体融合的过程，图②是图①经脱分化后形成的愈伤组织，图③由图②经再分化过程形成。
【小问1详解】
利用酶解法去除细胞壁获取原生质体，图①表示原生质体融合的过程，原生质体融合的过程体现了细胞膜的流动性，即体现了其结构特点。诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。原生质体融合后经过诱导生成新的细胞壁是杂种细胞形成的标志。
【小问2详解】
图②是图①经脱分化后形成的愈伤组织，由图②经再分化过程形成图③，细胞呈现特定的结构和功能，说明该过程出现了细胞分化，细胞分化的实质是基因的选择性表达，利用了植物细胞具有全能性的原理。
【小问3详解】
由题意可知，将紫外线（UV）照射处理的黑芥叶肉原生质体和花椰菜下胚轴原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株，黑芥叶肉原生质体是由叶肉细胞获得的，与下胚轴原生质体的区别是含有叶绿体，因此根据是否含有叶绿体作为初步筛选杂合细胞的标志。花椰菜染色体组成用MM表示，黑芥染色体组成用NN表示，植物体细胞杂交过程中发生染色体数目变异，后得到的细胞理论上应有34条染色体，4个染色体组，所以理论上获得的杂种植株染色体组成为MMNN。
【小问4详解】
鉴定新植株是否抗黑腐病，可对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可鉴定出该植株是否具有抗病特性或者抗病程度，若能抗黑腐病，说明培育成功。
【小问5详解】
传统的杂交育种是指不同种群、不同基因型个体间进行杂交，并在其杂种后代中通过选择而育成纯合品种的方法，其本质属于有性生殖；植物体细胞杂交可以将不同种的植物细胞融合成一个细胞，再利用植物组织培养技术将细胞培育成植株的过程，所以该方法打破了生殖隔离，克服了不同物种间远源杂交不亲和的障碍。
19. EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。抗原的选择和制备过程为：将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2、非EV71蛋白注射到小鼠体内，多次免疫后，取上述各组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如下图所示。
（1）EV71免疫的小鼠血清抗体_____（填“是”或“不是”）单一抗体，据图分析判断依据是_____。
（2）制备抗EV71单克隆抗体时，选用_____免疫的小鼠的B细胞效果最佳。单克隆抗体的制备流程图如下：
（3）相比较植物细胞，诱导融合动物细胞特有的方法是_____，融合后将获得_____种细胞（只考虑细胞两两融合的情况）。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得_____。将其接种到96孔板，进行_____培养和_____，目的是获得_____。
（4）图中体外的扩大培养，是从_____中获取大量的单克隆抗体。除此之外还可以使用的方法是_____，该单克隆抗体具有的优点是能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性识别，并且可大量制备。
【答案】（1） ①. 不是 ②. 用EV71免疫的小鼠血清的抗体与VP1和VP2抗原的结合强度都较高
（2）VP1 （3） ①. 灭活病毒诱导法 ②. 3 ③. 杂交瘤细胞 ④. 克隆化 ⑤. 抗体检测 ⑥. 既能大量增殖又能产生大量特异性抗体的杂交瘤细胞
（4） ①. 细胞培养液 ②. 注入小鼠腹腔培养（体内培养）
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞:向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞；（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合。②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够无限增殖又能产生单一抗体；（3）克隆化培养和抗体检测；（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【小问1详解】
该实验的自变量血清中抗原和抗体的种类，因变量是抗原与抗体结合程度。以抗原为自变量，看第1组血清与其结合情况，第1组血清能结合多种抗原，因此EV71免疫的小鼠血清抗体不是单一抗体，依据是，用 EV71免疫的小鼠血清的抗体与 VP1和 VP2抗原的结合强度都较高。
【小问2详解】
观察实验结果，第1、2组血清能结合EV71和VP1且强度接近，而第3组血清仅能结合VP2，对EV71没有作用。根据第一小问推测EV71刺激小鼠产生的抗体种类更多，为了减轻单克隆杂交瘤细胞筛选的工作量，选用VP1免疫小鼠效果最佳。
【小问3详解】
相比较植物细胞，诱导融合动物细胞特有的方法是灭活病毒诱导法。融合后将获得3种细胞（B细胞和B细胞融合、B细胞和骨髓瘤细胞融合、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合）。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得杂交瘤细胞，在该种培养基上未融合、同种融合的细胞均不能存活。将其接种到96孔板，进行克隆化培养和抗体检测，目的是为了获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
【小问4详解】
图中体外的扩大培养，是从细胞培养液中获取大量的单克隆抗体。除此之外还可以使用的方法是注入小鼠腹腔培养（体内培养）。单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备，所以该单克隆抗体具有的优点，能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性识别，并且可大量制备。
20. 体细胞核移植已在很多物种中取得成功，但其效率较低，只有不足4%的重构胚能发育成健康的个体，原因可能是胚胎的基因表达异常所致。下图为提高克隆牛重构胚发育的技术流程，其中TSA为组蛋白脱乙酰化酶抑制剂。请回答以下问题：
（1）体外培养牛乳腺细胞会发生接触抑制，需进行_____处理，进而实现传代培养。
（2）采集的卵母细胞需要培养至_____时期，去除的“核”实际上是指_____。除了使用图中的显微操作法去核，还可使用梯度离心、_____和化学物质处理等方法去核。
（3）胚胎移植前需要对代孕母牛进行_____处理。一般选择发育至_____时期的胚胎进行移植。
（4）一次核移植技术后，若需要获得更多克隆小牛，可对早期胚胎进行胚胎分割，操作时要注意_____。
【答案】（1）先用胰蛋白酶处理，再进行离心
（2） ①. MⅡ ②. 纺锤体—染色体复合物 ③. 紫外线短时间照射
（3） ①. 同期发情处理 ②. 桑葚胚或囊胚
（4）将囊胚的内细胞团均等分割
【解析】
【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
小问1详解】
在进行传代培养时，贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集，之后，将收集细胞制成细胞悬液，分瓶培养。
【小问2详解】
体外受精时，需要将所采集到的卵母细胞在体外培养到减数分裂第二次分裂中期，才可以与精子完成受精作用；去除的“核”实际上是指纺锤体—染色体复合物。目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法，除了使用图中的显微操作法去核，还可使用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法去核。
【小问3详解】
胚胎移植前需要对代孕母牛进行同期发情处理，使他与供体母牛的生理条件达到同步或一致；胚胎移植一般选择发育至桑葚胚或囊胚时期的的胚胎。
【小问4详解】
进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
21. “蓝白斑筛选”是一种基于质粒载体的DNA重组技术，它可通过改变质粒载体中的DNA序列，实现对菌落颜色的调控，如图所示。回答下列问题：
（1）构建重组载体时，应将目的基因插入到质粒的_____之间。将外源DNA片段与质粒连接成重组质粒时，所用的酶催化形成的化学键是_____。试从限制酶的角度提出一条避免载体自身环化的方法：_____。
（2）将重组质粒转入大肠杆菌前，需在低温﹑低浓度的_____溶液中处理大肠杆菌，目的是_____。
（3）在筛选导入重组质粒的大肠杆菌时，培养基中应加入_____。培养一段时间的平板上，含有重组质粒的大肠杆菌菌落呈白色的原因是_____。与“氨苄青霉素”筛选相比，“蓝白斑”筛选的优点是_____。
【答案】（1） ①. 启动子和终止子 ②. 磷酸二酯键 ③. 用两种不同的限制酶切割载体，使其产生不同的黏性末端
（2） ①. Ca2+ ②. 使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（使大肠杆菌细胞处于感受态）
（3） ①. 氨苄青霉素、X-Gal ②. 外源DNA破坏了LacZ基因的结构，使其无法表达产生β-半乳糖苷酶，培养基中无色的X-Gal不能被分解 ③. 能直接筛选出导入目的基因的大肠杆菌
【解析】
【分析】一个基因表达载体的组成，除目的基因、标记基因外，还必须有启动子、终止子等。启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游，紧挨转录的起始位点，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终表达出人类需要的蛋白质。
【小问1详解】
在构建重组载体时，为了确保目的基因能够正确地插入到质粒中，我们应将其插入到质粒的启动子和终止子之间。这样，目的基因的表达才能受到正确的调控。将外源DNADNA片段与质粒连接成重组质粒时，我们需要使用DNA连接酶，它催化形成的化学键是磷酸二酯键。从限制酶的角度来看，为了避免载体自身环化，我们可以选用两种或多种限制酶对载体和含目的基因的DNA片段进行切割。这样，即使载体和含目的基因的DNA片段都存在相同的黏性末端，由于使用的限制酶不同，它们之间也无法相互连接，从而避免了载体自身环化的发生。
【小问2详解】
将重组质粒导入大肠杆菌的方法是Ca2+处理法（感受态细胞法），导入之前需在低温、低浓度的Ca2+溶液中处理大肠杆菌，目的是使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（使大肠杆菌细胞处于感受态）。
【小问3详解】
由图可知，重组质粒的标记基因为抗氨苄青霉素基因，且LacZ基因被破坏，因此可在培养基中应加入氨苄青霉素、X-Gal，用于筛选导入重组质粒的大肠杆菌,。由于外源DNA破坏了LacZ基因的结构，使其无法表达产生β-半乳糖苷酶，培养基中无色的X-Gal不能被分解，导致含有重组质粒的大肠杆菌菌落呈白色。与“氨苄青霉素”筛选相比，“蓝白斑”筛选的优点是能直接筛选出导入目的基因的大肠杆菌。
EcRⅠ
BamHⅠ
KpnⅠ
MfeⅠ
HindⅢ
培养基类型
培养基组分
培养基甲
甘露醇、、、NaCl、、、蒸馏水
培养基乙
甘露醇、、、NaCl、、、蒸馏水、琼脂
氨苄青霉素
未导入质粒
×
导入空白质粒
√蓝色菌落
导入重组质粒
√白色菌落