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2024届云南省昭通市正道中学高三下学期考前押题理科综合试卷-高中生物（学生版+教师版 ）
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1、本试卷分选择题和非选择题两部分。满分300分，考试时间150分钟。
2、答题前，考生务必用直径0.5毫米黑色墨水签字笔将密封线内项目填写清楚。
3.考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。
一、选择题：本题共13小题，每小题6分，共76分。在每个小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1. 某同学运用“结构与功能相适应”观念对细胞的结构及功能进行分析。下列叙述正确的是（ ）
A. 代谢旺盛的大肠杆菌核孔增多，细胞核体积增大
B. 染色体高度螺旋化，有利于细胞分裂中移动并分配
C. 溶酶体膜富含高度糖基化的蛋白质，有利于合成、储存多种水解酶
D. 叶绿体和线粒体内合成ATP的过程均在膜结构上完成
【答案】B
【解析】
【分析】1、线粒体是双层膜结构的细胞器，是有氧呼吸的主要场所。
2、核孔是核质之间频繁进行物质交换和信息交流的通道
【详解】A、大肠杆菌为原核生物，无核孔，A错误；
B、有丝分裂和减数分裂时染色体呈高度螺旋化状态，有利于纺锤丝（星射线）的附着和牵引，并使染色体精确的平均分配，B正确；
C、蛋白质的合成在核糖体上，而非溶酶体中，C错误；
D、线粒体基质中可以进行有氧呼吸的第二阶段，有ATP的合成，D错误。
故选B。
2. 植物组织培养所用的培养基中常添加蔗糖，植物细胞利用蔗糖的方式如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 转运蔗糖时蔗糖-H+共转运体的空间结构不会发生变化
B. 蔗糖进入植物细胞的方式属于ATP间接供能的主动运输
C. 培养基的pH值低于细胞内时，有利于植物细胞吸收蔗糖
D. 蔗糖酶将细胞外的蔗糖水解为单糖可提高蔗糖的利用率
【答案】A
【解析】
【分析】图示过程，植物细胞利用ATP水解的能量将H+运出，然后利用H+的浓度梯度产生的化学势能，将蔗糖和H+一起运进细胞。
【详解】A、植物细胞利用ATP水解的能量将H+运出，因此细胞外的H+浓度大于细胞内，蔗糖利用H+的浓度梯度产生的化学势能进入细胞，为主动运输，该过程被运输的物质需要与蔗糖-H+共转运体结合，蔗糖-H+共转运体的空间结构需要发生变化，才能进行转运，A错误；
B、蔗糖进入植物细胞的方式是消耗H+的浓度梯度化学势能的主动运输，而H+的浓度差的维持需要ATP的直接供能，因此蔗糖进入植物细胞的方式属于ATP间接供能的主动运输，B正确；
C、植物细胞运输蔗糖需要借助膜外的高浓度H+，因此培养基的pH值低于细胞内，有利于蔗糖的吸收，C正确；
D、单糖可直接被植物细胞吸收，因此蔗糖酶将细胞外的蔗糖水解为单糖可提高蔗糖的利用率，D正确。
故选A。
3. 下列有关细胞生命历程的叙述，正确的是（ ）
A. 抑癌基因甲基化导致基因突变或降低基因表达
B. 自由基学说认为自由基通过攻击磷脂直接导致核糖体损伤而使细胞衰老
C. 肝脏细胞不能合成血红蛋白的原因是没有与血红蛋白合成有关的基因
D. 靶细胞与细胞毒性T细胞结合后裂解属于细胞凋亡
【答案】D
【解析】
【分析】自由基学说：各种氧化反应产生自由基，辐射以及有害物质入侵也会产生自由基，这些自由基攻击和破坏细胞内各种执行正常功能的生物分子，对生物膜损伤比较大，如当自由基攻击生物膜的组成成分磷脂分子时，产物同样是自由基；自由基还会攻击DNA，可能引起基因突变；攻击蛋白质，使蛋白质活性下降，导致细胞衰老。
细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的结果：使细胞的种类增多，功能趋于专门化。
【详解】A、抑癌基因甲基化不会导致基因碱基序列改变，但会影响基因的表达，进而引起表型改变，A错误；
B、自由基学说认为，自由基会攻击和破坏细胞内各种执行正常功能的生物分子，如磷脂、DNA、蛋白质等，引起细胞衰老，B错误；
C、肝脏细胞不能合成血红蛋白的原因是血红蛋白基因没有表达，C错误；
D、细胞凋亡是细胞自动结束生命的过程，故靶细胞与细胞毒性T细胞结合后裂解属于细胞凋亡属于细胞凋亡，D正确。
故选D。
4. tRNA可分为空载tRNA（不携带氨基酸的tRNA）和负载tRNA（携带氨基酸的tRNA），当氨基酸供应不足时，空载tRNA的数量会增多，对DNA的转录和翻译过程产生抑制，从而减缓机体对氨基酸的利用，其过程如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A. tRNA可能位于细胞质基质中，也可能位于细胞器中
B. 空载tRNA对DNA的转录和翻译过程的调节属于正反馈调节
C. DNA的转录过程中没有A-U配对，翻译过程中没有T-A配对
D. 当环境中缺乏氨基酸时，细胞中空载tRNA/负载tRNA的值会降低
【答案】A
【解析】
【分析】转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，该过程需要核糖核苷酸作为原料；翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。
【详解】A、tRNA可在翻译过程中搬运氨基酸，翻译的场所包括细胞质基质和线粒体基质、叶绿体基质，故tRNA可能位于细胞质基质中，也可能位于细胞器中，A正确；
B、当氨基酸供应不足时，空载tRNA的数量会增多，对DNA的转录和翻译过程产生抑制，从而减缓机体对氨基酸的利用，因此空载tRNA对DNA的转录和翻译过程的调节属于负反馈调节，B错误；
C、DNA的转录过程中有A-U配对，翻译过程中没有T—A配对，C错误；
D、当环境中缺乏氨基酸时，空载tRNA数量会增多，细胞中空载tRNA/负载tRNA的值会升高，D错误。
故选A。
5. 补体是一种血清蛋白，它在识别和结合抗原—抗体复合物后被激活而具有酶活性，并能使带有抗原—抗体复合物的细胞裂解或被其他细胞吞噬。流感病毒侵入细胞后使细胞表面出现新的抗原，该抗原与相应抗体特异性结合后，在补体参与下使宿主细胞因细胞膜裂解而死亡。下列叙述错误的是（ ）
A. 带有补体—抗原—抗体结合物的细胞被吞噬的过程属于细胞免疫
B. 补体被激活后既能传递信号，又能降低某些反应的活化能
C. 流感病毒侵入细胞后可以引起B细胞增殖分化形成浆细胞
D. 补体需在细胞内经囊泡运输及高尔基体加工后才能进入血浆
【答案】A
【解析】
【分析】补体是一种血清蛋白，它在识别和结合抗原—抗体复合物后被激活而具有酶活性，并能使带有抗原—抗体复合物的细胞裂解或被其他细胞吞噬。
【详解】A、带有补体—抗原—抗体结合物的细胞被吞噬的过程属于机体的第二道防线，属于非特异性免疫，A错误；
B、补体既能识别抗原—抗体复合物传递信号，又具有酶活性（能降低某些反应的活化能），B正确；
C、流感病毒的抗原刺激人体免疫系统，使B细胞增殖分化为浆细胞，其能产生特异性抗体，与病毒结合，C正确；
D、补体是一种血清蛋白，属于分泌蛋白，需在细胞内经囊泡运输及高尔基体加工后才能进入血浆，D正确。
故选A。
6. 黄猄蚁食性杂，可捕食柑橘灰象甲、柑橘潜叶甲等多种害虫，并能驱赶天牛和蝽象等，防止它们在柑橘上产卵，是柑橘园中害虫最大的天敌。黄猄蚁的繁殖盛期及活跃期与柑橘园中害虫发生期基本吻合，果农利用黄猄蚁进行害虫防治，并辅之以人工捕捉害虫，基本上可在不使用化学农药的情况下，将害虫控制在较低水平。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 柑橘园中的全部柑橘、柑橘害虫和黄猄蚁不能构成柑橘园生物群落
B. 利用样方法调查柑橘害虫虫卵的密度，有利于监测和预报虫害的发生
C. 柑橘潜叶甲以柑橘为食时，通常可获得柑橘同化量的10%~20%
D. 利用黄猄蚁可防治柑橘害虫，这属于生物防治
【答案】C
【解析】
【分析】在相同时间聚集在一定地域中各种生物种群的集合，叫作生物群落。
【详解】A、柑橘园中除了柑橘、柑橘害虫和黄猄蚁外还有其他生物，柑橘园生物群落应当包含所有生物，A正确；
B、活动范围小，活动能力弱的害虫虫卵可以用样方法调查种群密度，有利于监测和预报虫害的发生，B正确；
C、10%~20%是指营养级之间的能量传递效率，第一营养级和第二营养级除了柑橘和柑橘潜叶甲还有其他生物，C错误；
D、利用黄猄蚁可防治柑橘害虫，这属于生物防治，D正确。
故选C。
二、非选择题：
7. 下列图示中，图甲表示Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种植物光合作用强度与光照强度之间的关系；图乙表示某绿色植物某些代谢过程中物质的变化，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别表示不同的代谢过程；图丙表示在种植植物的密闭玻璃温室中，CO2浓度随光照强度变化而变化的情况；图丁表示在最适温度下，麦芽糖酶的催化速率与麦芽糖浓度之间的关系。请据图回答：
（1）图甲三种植物中最适合间作的两种是____________；叶肉细胞在a、b点时都可以产生ATP的细胞器是______________________。
（2）图乙中Ⅰ中产生的O2参与Ⅲ的第________阶段；Ⅱ进行的场所是____________。
（3）从图丙曲线变化分析，图中代表光合速率与呼吸速率相等的点为____________。
（4）图丁中，如果温度上升5 ℃，b点将向________(填“左上”“右下”“左下”或“右上”)方移动。
（5）植物光合作用光饱和点可通过测定不同____________下的光合速率来确定。在一定条件下，某植物在温度由25 ℃降为5 ℃的过程中光饱和点逐渐减小，推测该植物在光照充足时的光合作用最适温度________(选填：＜、≤、＝、≥、＞)25 ℃。
（6）请用化学反应式来概括光合作用的过程：______________________________________。
【答案】（1） ①. Ⅰ和Ⅲ ②. 线粒体
（2） ①. 三 ②. 叶绿体基质
（3）b、c （4）左下
（5） ①. 光强度 ②. ≥
（6）CO2＋H2O (CH2O)＋O2
【解析】
【分析】光合作用是指绿色植物通过叶绿体，利用光能把二氧化碳和水转变成储存着能量的有机物，并释放出氧气的过程；呼吸作用是指生物体内的有机物在细胞内经过一系列的氧化分解，最终生成二氧化碳或其他产物，并且释放出能量的总过程；在光照条件下，植物既能光合作用又能呼吸作用，光合作用为呼吸作用提供氧气和有机物，呼吸作用为光合作用提供水和二氧化碳，二者是相互影响，相互作用的；在黑暗条件下，植物只能进行呼吸作用，由此分析。
【小问1详解】
由图甲可知，I需要强光条件，Ⅲ需要弱光条件，Ⅱ介于二者之间，因此I和Ⅲ最适合间作，图甲中a点光合作用等于细胞呼吸强度，产生ATP的细胞器是线粒体和叶绿体，b点无光，只进行细胞呼吸，产生ATP的细胞器是线粒体，因此在a、b点时都可以产生ATP的细胞器是线粒体。
【小问2详解】
图乙中Ⅰ是光反应阶段，Ⅱ是暗反应阶段，Ⅲ是有氧呼吸，O2参与有氧呼吸的第三阶段，暗反应进行的场所是叶绿体基质。
【小问3详解】
从图丙曲线变化分析，图中代表光合速率与呼吸速率相等的点为b、c，光照弱时，呼吸作用速率高于光合作用速率，密封玻璃温室中的二氧化碳浓度持续升高，随着光照强度的增加，光合速率增加，直到b点两者速率相等；bc段光合作用速率开始大于呼吸作用速率，随着二氧化碳浓度逐渐减少，光合作用速率降低，直至c点与呼吸作用速率相等。
【小问4详解】
图丁表示在最适温度下，麦芽糖酶的催化速率与麦芽糖浓度的关系，因此如果温度上升5℃，麦芽糖酶的活性将下降，催化速率降低，b点将向左下方移动。
【小问5详解】
光饱和点是植物光合速率达到最大值时的最低光照强度，可以通过测定不同的光照强度下的光合速率来确定，温度由25℃降为5℃的过程中光饱和点逐渐减小，推测该植物在光照充足时的光合作用最适温度应该大于或等于25℃。
【小问6详解】
光合作用的过程可表示为：CO2＋H2O (CH2O)＋O2。
8. 糖尿病是一种慢性代谢性疾病，其发病率呈逐年上升趋势。部分糖尿病患者的患病原因是巨噬细胞分泌的肿瘤坏死因子TNF-α异常升高导致的胰岛素抵抗等炎症反应（如图），请回答相关问题：
（1）激素可以通过____运向全身各处，并定向作用于靶器官，激素调节有_______的特点（至少写出两点）。机体内有多种激素都具有分级调节，这种调节的意义是_______。
（2）研究表明，胆碱能抗炎通路和GC 都有抑制巨噬细胞分泌TNF-α的抗炎作用，但效果不同，这两种调节过程中反应速度更快的是______，二者作用途径的区别是_______。胆碱是兴奋性神经递质，能使突触后膜两侧发生电位变化是________。当GC的含量过高会作用于下丘脑和垂体，下丘脑和垂体分泌的CRH和ACTH会减少，这种调节方式称为_________。
（3）肺炎支原体接触易感人群后，首先突破人体第一道防线皮肤和黏膜以及第二道防线_________，再到达人体第三道防线，激活特异性免疫。机体对肺炎支原体的免疫体现了免疫系统的________功能。严重肺炎患者会感觉肌肉酸痛，原因可能是_____。人体内B细胞和T细胞成熟的场所分别是_________。
【答案】（1） ①. 体液 ②. 微量高效，通过体液运输，作为信使传递信息，作用于靶器官、靶细胞 ③. 可以放大激素的调节效应，形成多级反馈调节，有利于精细调控，从而维持机体的稳态
（2） ①. 胆碱能抗炎通路 ②. GC调节通过体液运输，胆碱能抗炎通路调节通过反射弧 ③. 由外正内负变为外负内正 ④. 反馈调节
（3） ①. 体液中的杀菌物质和吞噬细胞 ②. 免疫防御 ③. 人体代谢快，耗氧量增加，由于供养不足，部分肌肉细胞进行无氧呼吸，乳酸含量升高 ④. 骨髓和胸腺
【解析】
【分析】1、激素是由内分泌腺或内分泌细胞分泌的高效生物活性物质，经血液或组织液传输与特异性受体结合而发挥调节作用，激素一经靶细胞接受并起作用后就被灭活了，因此，体内源源不断地产生激素，以维持激素含量的动态平衡。
2、下丘脑在相关刺激下，合成并分泌CRH，CRH作用于垂体使其合成并分泌ACTH，ACTH作用于肾上腺皮质，肾上腺皮质合成并分泌GC，当GC含量升高时，会负反馈抑制下丘脑和垂体的活动，从而维持GC含量的相对稳定；当ACTH含量上升时，也会负反馈抑制下丘脑的分泌活动。
【小问1详解】
激素是由内分泌腺或内分泌细胞分泌的，经血液或组织液传输与特异性受体结合而发挥调节作用，所以激素可以通过体液运向全身各处，并定向作用靶器官。激素调节特点有微量高效，通过体液运输，作为信使传递信息，作用于靶器官、靶细胞。机体内有多种激素都具有分级调节，这种调节的意义是可以放大激素的调节效应，形成多级反馈调节，有利于精细调控，从而维持机体的稳态。
【小问2详解】
据图可知，胆碱能抗炎通路涉及神经调节，而GC调节是激素调节。这两种调节过程中反应速度和作用途径的区别是GC反应慢，胆碱能抗炎通路反应快；GC调节通过体液运输，胆碱能抗炎通路调节通过反射弧。胆碱是兴奋性神经递质，能使突触后膜两侧发生电位变化是由外正内负变为外负内正。当GC的含量过高会作用于下丘脑和垂体，下丘脑和垂体分泌的CRH和ACTH会减少，这种调节方式称为反馈调节。
【小问3详解】
肺炎支原体接触易感人群后，首先突破人体第一道防线皮肤和黏膜以及第二道防线体液中的杀菌物质和吞噬细胞，再到达人体第三道防线，激活特异性免疫。机体对肺炎支原体的免疫体现了免疫系统的免疫防御功能。严重肺炎患者会感觉肌肉酸痛，原因可能是人体代谢快，耗氧量增加，由于供养不足，部分肌肉细胞进行无氧呼吸，乳酸含量升高。人体内B细胞和T细胞成熟的场所分别是骨髓和胸腺。
9. 如图为某地建立的农业生态系统示意图。请回答下列问题：
（1）食用菌在此生态系统中属于______（填成分），其作用是_____。
（2）长期饲养的家禽、家禽听到主人的呼唤声就集聚在一起等待喂食，主人的声音属于________信息。不同性别的同种家禽之间，通过相互的气味产生求偶或交配行为，这体现了信息传递的作用是________。
（3）图示生态系统具有________等优点。（答出2点）
（4）图中农作物同化的能量都有哪些去路_________。
【答案】（1） ①. 分解者 ②. 将动植物遗体和动物的排遗物分解为无机物
（2） ①. 物理 ②. 生物种群的繁衍离不开信息的传递
（3）实现了物质循环利用和能量的多级利用，而且还减少了环境的污染
（4）呼吸作用以热能形式散失的能量、流入下一营养级、流向分解者和未被利用
【解析】
【分析】一个完整的生态系统包括生物部分和非生物部分，非生物部分包括阳光、空气、水、温度等，生物部分由生产者（植物）、消费者（动物）和分解者（细菌、真菌）组成。
小问1详解】
食用菌属于真菌，在生态系统中属于分解者，分解者的作用是将动植物遗体和动物的排遗物分解为无机物。
【小问2详解】
声音属于物理信息，家畜通过气味产生求偶和交配行为体现的信息传递的作用是生物种群的繁衍离不开信息的传递。
【小问3详解】
与传统农业相比，图示生态系统具有实现了物质循环利用和能量的多级利用，而且还减少了环境的污染等优点。
【小问4详解】
图中农作物属于生产者，其同化能量去路有呼吸作用以热能形式散失的能量、流入下一营养级、流向分解者和未被利用。
10. 某种鹦鹉（2N=60）羽毛颜色由位于Z染色体上的复等位基因D+、D、d控制，它们的显隐性关系为D+>D>d。研究人员用甲、乙、丙三种基因型的个体做了以下实验。回答下列问题：
（1）根据上述实验结果可推测D+、D、d基因控制三种羽毛颜色的对应关系是：__________。在一个染色体数目均正常的鹦鹉种群中，D+、D、d能组成___________种基因型。群体中羽毛颜色为__________的个体的基因型种类最多，在雄性中一定为纯合子的鹦鹉的羽毛颜色是__________。
（2）上述实验中，甲的基因型可能是__________。两个实验的F1中羽毛颜色为巧克力色个体的基因型___________（填“相同”或“不相同”）。
（3）让实验二F1中羽毛为蓝色的雌雄鹦鹉随机交配，在考虑子代性别的前提下，F2的表型及比例是________。若杂交后代中雌性鹦鹉的羽毛颜色都是巧克力色、雄性鹦鹉的羽毛颜色都和母本相同且不是巧克力色，请写出杂交亲本的基因型组合：__________。
【答案】（1） ①. D+基因控制灰红色，D基因控制蓝色，d基因控制巧克力色 ②. 9 ③. 灰红色 ④. 巧克力色
（2） ①. ZD+Zd或ZD+W ②. 相同
（3） ①. 蓝色雄性：蓝色雌性：巧克力色雌性=4：3：1 ②. ZdZd×ZD+W、ZdZd×ZDW
【解析】
【分析】由性染色体上的基因所控制性状的遗传上总是和性别相关，这种与性别相关联的性状遗传方式就称为伴性遗传。鸟类的性别决定方式为ZW型，性染色体组成为ZZ的个体为雄性，性染色体组成为ZW的个体为雌性。
【小问1详解】
由实验一可知F1出现的新性状巧克力色是由基因d控制的，控制灰红色基因的显性能力最强，因此D+基因控制灰红色，D基因控制蓝色，d基因控制巧克力色。在一个染色体数目均正常的鹦鹉种群中，D+、D，d能组成ZD+ZD+、ZD+ZD、ZD+Zd、ZDZD、ZDZd、ZdZd、ZD+W、ZDW、ZdW共9种基因型。群体中灰红色的基因型有4种，种类最多，在雄性中一定为纯合子的鹦鹉的羽毛颜色是巧克力色；
【小问2详解】
上述实验中，甲的基因型是ZD+Zd或ZD+W。两个实验的F1中羽毛颜色为巧克力色个体的基因型相同，都是ZdW；
【小问3详解】
让实验二F1中羽毛为蓝色的雌（ZDW）雄（1/2ZDZD、1/2ZDZd）鹦鹉随机交配，雌配子为1/2ZD、1/2W，雄配子为3/4ZD、1/4Zd，雌雄鹦鹉随机交配，在考虑子代性别的前提下，F2的基因型及比例为3/8ZDZD（蓝色雄性）、1/8ZDZd（蓝色雄性）、3/8ZDW（蓝色雌性）、1/8ZdW（巧克力色雌性），表型及比例是蓝色雄性：蓝色雌性：巧克力色雌性=4：3：1。若杂交后代中雌性鹦鹉的羽毛颜色都是巧克力色、雄性鹦鹉的羽毛颜色都和母本相同且不是巧克力色，则可以选择的杂交亲本组合是ZdZd×ZD+W、ZdZd×ZDW。
11. M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M 基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M 基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：
（1）在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是_____，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的_____断开。
（2）在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是_____。
（3）与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是_____。
（4）鉴定转基因动物：以免疫小鼠的_____淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M 基因是否失活的实验思路。_____。
【答案】（1） ①. 限制性核酸内切酶（限制酶） ②. 磷酸二酯键
（2）清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，同时给细胞提供足够营养
（3）动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难
（4） ①. B ②. 取动物A和克隆动物A的肝组织细胞，分别提取蛋白质进行抗原—抗体杂交
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。
【小问1详解】
基因工程中切割DNA的工具酶是限制性核酸内切酶（限制酶），故在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是限制性核酸内切酶（限制酶）。限制酶是作用于其所识别序列中两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
【小问2详解】
在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，从培养液吸收营养，往培养液排出代谢产物，所以需要定期更换培养液，清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，同时给细胞补充足够营养。
【小问3详解】
由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，故与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率低。
【小问4详解】
先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，制备M蛋白的单克隆抗体；若要利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活，如果M基因已经失活，则克隆动物A中无法产生M蛋白的单克隆抗体，则可利用抗原—抗体杂交技术进行检测，故实验思路为：提取克隆动物A的肝细胞，培养肝细胞，在肝细胞加入带有荧光标记的抗Mda，检测有无荧光出现。若有荧光出现，说明克隆动物A中的M基因未失活；若无荧光出现，说明克隆动物A中的M基因失活。
1、本试卷分选择题和非选择题两部分。满分300分，考试时间150分钟。
2、答题前，考生务必用直径0.5毫米黑色墨水签字笔将密封线内项目填写清楚。
3.考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。
一、选择题：本题共13小题，每小题6分，共76分。在每个小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1. 某同学运用“结构与功能相适应”观念对细胞的结构及功能进行分析。下列叙述正确的是（ ）
A. 代谢旺盛的大肠杆菌核孔增多，细胞核体积增大
B. 染色体高度螺旋化，有利于细胞分裂中移动并分配
C. 溶酶体膜富含高度糖基化的蛋白质，有利于合成、储存多种水解酶
D. 叶绿体和线粒体内合成ATP的过程均在膜结构上完成
【答案】B
【解析】
【分析】1、线粒体是双层膜结构的细胞器，是有氧呼吸的主要场所。
2、核孔是核质之间频繁进行物质交换和信息交流的通道
【详解】A、大肠杆菌为原核生物，无核孔，A错误；
B、有丝分裂和减数分裂时染色体呈高度螺旋化状态，有利于纺锤丝（星射线）的附着和牵引，并使染色体精确的平均分配，B正确；
C、蛋白质的合成在核糖体上，而非溶酶体中，C错误；
D、线粒体基质中可以进行有氧呼吸的第二阶段，有ATP的合成，D错误。
故选B。
2. 植物组织培养所用的培养基中常添加蔗糖，植物细胞利用蔗糖的方式如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 转运蔗糖时蔗糖-H+共转运体的空间结构不会发生变化
B. 蔗糖进入植物细胞的方式属于ATP间接供能的主动运输
C. 培养基的pH值低于细胞内时，有利于植物细胞吸收蔗糖
D. 蔗糖酶将细胞外的蔗糖水解为单糖可提高蔗糖的利用率
【答案】A
【解析】
【分析】图示过程，植物细胞利用ATP水解的能量将H+运出，然后利用H+的浓度梯度产生的化学势能，将蔗糖和H+一起运进细胞。
【详解】A、植物细胞利用ATP水解的能量将H+运出，因此细胞外的H+浓度大于细胞内，蔗糖利用H+的浓度梯度产生的化学势能进入细胞，为主动运输，该过程被运输的物质需要与蔗糖-H+共转运体结合，蔗糖-H+共转运体的空间结构需要发生变化，才能进行转运，A错误；
B、蔗糖进入植物细胞的方式是消耗H+的浓度梯度化学势能的主动运输，而H+的浓度差的维持需要ATP的直接供能，因此蔗糖进入植物细胞的方式属于ATP间接供能的主动运输，B正确；
C、植物细胞运输蔗糖需要借助膜外的高浓度H+，因此培养基的pH值低于细胞内，有利于蔗糖的吸收，C正确；
D、单糖可直接被植物细胞吸收，因此蔗糖酶将细胞外的蔗糖水解为单糖可提高蔗糖的利用率，D正确。
故选A。
3. 下列有关细胞生命历程的叙述，正确的是（ ）
A. 抑癌基因甲基化导致基因突变或降低基因表达
B. 自由基学说认为自由基通过攻击磷脂直接导致核糖体损伤而使细胞衰老
C. 肝脏细胞不能合成血红蛋白的原因是没有与血红蛋白合成有关的基因
D. 靶细胞与细胞毒性T细胞结合后裂解属于细胞凋亡
【答案】D
【解析】
【分析】自由基学说：各种氧化反应产生自由基，辐射以及有害物质入侵也会产生自由基，这些自由基攻击和破坏细胞内各种执行正常功能的生物分子，对生物膜损伤比较大，如当自由基攻击生物膜的组成成分磷脂分子时，产物同样是自由基；自由基还会攻击DNA，可能引起基因突变；攻击蛋白质，使蛋白质活性下降，导致细胞衰老。
细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的结果：使细胞的种类增多，功能趋于专门化。
【详解】A、抑癌基因甲基化不会导致基因碱基序列改变，但会影响基因的表达，进而引起表型改变，A错误；
B、自由基学说认为，自由基会攻击和破坏细胞内各种执行正常功能的生物分子，如磷脂、DNA、蛋白质等，引起细胞衰老，B错误；
C、肝脏细胞不能合成血红蛋白的原因是血红蛋白基因没有表达，C错误；
D、细胞凋亡是细胞自动结束生命的过程，故靶细胞与细胞毒性T细胞结合后裂解属于细胞凋亡属于细胞凋亡，D正确。
故选D。
4. tRNA可分为空载tRNA（不携带氨基酸的tRNA）和负载tRNA（携带氨基酸的tRNA），当氨基酸供应不足时，空载tRNA的数量会增多，对DNA的转录和翻译过程产生抑制，从而减缓机体对氨基酸的利用，其过程如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A. tRNA可能位于细胞质基质中，也可能位于细胞器中
B. 空载tRNA对DNA的转录和翻译过程的调节属于正反馈调节
C. DNA的转录过程中没有A-U配对，翻译过程中没有T-A配对
D. 当环境中缺乏氨基酸时，细胞中空载tRNA/负载tRNA的值会降低
【答案】A
【解析】
【分析】转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，该过程需要核糖核苷酸作为原料；翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。
【详解】A、tRNA可在翻译过程中搬运氨基酸，翻译的场所包括细胞质基质和线粒体基质、叶绿体基质，故tRNA可能位于细胞质基质中，也可能位于细胞器中，A正确；
B、当氨基酸供应不足时，空载tRNA的数量会增多，对DNA的转录和翻译过程产生抑制，从而减缓机体对氨基酸的利用，因此空载tRNA对DNA的转录和翻译过程的调节属于负反馈调节，B错误；
C、DNA的转录过程中有A-U配对，翻译过程中没有T—A配对，C错误；
D、当环境中缺乏氨基酸时，空载tRNA数量会增多，细胞中空载tRNA/负载tRNA的值会升高，D错误。
故选A。
5. 补体是一种血清蛋白，它在识别和结合抗原—抗体复合物后被激活而具有酶活性，并能使带有抗原—抗体复合物的细胞裂解或被其他细胞吞噬。流感病毒侵入细胞后使细胞表面出现新的抗原，该抗原与相应抗体特异性结合后，在补体参与下使宿主细胞因细胞膜裂解而死亡。下列叙述错误的是（ ）
A. 带有补体—抗原—抗体结合物的细胞被吞噬的过程属于细胞免疫
B. 补体被激活后既能传递信号，又能降低某些反应的活化能
C. 流感病毒侵入细胞后可以引起B细胞增殖分化形成浆细胞
D. 补体需在细胞内经囊泡运输及高尔基体加工后才能进入血浆
【答案】A
【解析】
【分析】补体是一种血清蛋白，它在识别和结合抗原—抗体复合物后被激活而具有酶活性，并能使带有抗原—抗体复合物的细胞裂解或被其他细胞吞噬。
【详解】A、带有补体—抗原—抗体结合物的细胞被吞噬的过程属于机体的第二道防线，属于非特异性免疫，A错误；
B、补体既能识别抗原—抗体复合物传递信号，又具有酶活性（能降低某些反应的活化能），B正确；
C、流感病毒的抗原刺激人体免疫系统，使B细胞增殖分化为浆细胞，其能产生特异性抗体，与病毒结合，C正确；
D、补体是一种血清蛋白，属于分泌蛋白，需在细胞内经囊泡运输及高尔基体加工后才能进入血浆，D正确。
故选A。
6. 黄猄蚁食性杂，可捕食柑橘灰象甲、柑橘潜叶甲等多种害虫，并能驱赶天牛和蝽象等，防止它们在柑橘上产卵，是柑橘园中害虫最大的天敌。黄猄蚁的繁殖盛期及活跃期与柑橘园中害虫发生期基本吻合，果农利用黄猄蚁进行害虫防治，并辅之以人工捕捉害虫，基本上可在不使用化学农药的情况下，将害虫控制在较低水平。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 柑橘园中的全部柑橘、柑橘害虫和黄猄蚁不能构成柑橘园生物群落
B. 利用样方法调查柑橘害虫虫卵的密度，有利于监测和预报虫害的发生
C. 柑橘潜叶甲以柑橘为食时，通常可获得柑橘同化量的10%~20%
D. 利用黄猄蚁可防治柑橘害虫，这属于生物防治
【答案】C
【解析】
【分析】在相同时间聚集在一定地域中各种生物种群的集合，叫作生物群落。
【详解】A、柑橘园中除了柑橘、柑橘害虫和黄猄蚁外还有其他生物，柑橘园生物群落应当包含所有生物，A正确；
B、活动范围小，活动能力弱的害虫虫卵可以用样方法调查种群密度，有利于监测和预报虫害的发生，B正确；
C、10%~20%是指营养级之间的能量传递效率，第一营养级和第二营养级除了柑橘和柑橘潜叶甲还有其他生物，C错误；
D、利用黄猄蚁可防治柑橘害虫，这属于生物防治，D正确。
故选C。
二、非选择题：
7. 下列图示中，图甲表示Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种植物光合作用强度与光照强度之间的关系；图乙表示某绿色植物某些代谢过程中物质的变化，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别表示不同的代谢过程；图丙表示在种植植物的密闭玻璃温室中，CO2浓度随光照强度变化而变化的情况；图丁表示在最适温度下，麦芽糖酶的催化速率与麦芽糖浓度之间的关系。请据图回答：
（1）图甲三种植物中最适合间作的两种是____________；叶肉细胞在a、b点时都可以产生ATP的细胞器是______________________。
（2）图乙中Ⅰ中产生的O2参与Ⅲ的第________阶段；Ⅱ进行的场所是____________。
（3）从图丙曲线变化分析，图中代表光合速率与呼吸速率相等的点为____________。
（4）图丁中，如果温度上升5 ℃，b点将向________(填“左上”“右下”“左下”或“右上”)方移动。
（5）植物光合作用光饱和点可通过测定不同____________下的光合速率来确定。在一定条件下，某植物在温度由25 ℃降为5 ℃的过程中光饱和点逐渐减小，推测该植物在光照充足时的光合作用最适温度________(选填：＜、≤、＝、≥、＞)25 ℃。
（6）请用化学反应式来概括光合作用的过程：______________________________________。
【答案】（1） ①. Ⅰ和Ⅲ ②. 线粒体
（2） ①. 三 ②. 叶绿体基质
（3）b、c （4）左下
（5） ①. 光强度 ②. ≥
（6）CO2＋H2O (CH2O)＋O2
【解析】
【分析】光合作用是指绿色植物通过叶绿体，利用光能把二氧化碳和水转变成储存着能量的有机物，并释放出氧气的过程；呼吸作用是指生物体内的有机物在细胞内经过一系列的氧化分解，最终生成二氧化碳或其他产物，并且释放出能量的总过程；在光照条件下，植物既能光合作用又能呼吸作用，光合作用为呼吸作用提供氧气和有机物，呼吸作用为光合作用提供水和二氧化碳，二者是相互影响，相互作用的；在黑暗条件下，植物只能进行呼吸作用，由此分析。
【小问1详解】
由图甲可知，I需要强光条件，Ⅲ需要弱光条件，Ⅱ介于二者之间，因此I和Ⅲ最适合间作，图甲中a点光合作用等于细胞呼吸强度，产生ATP的细胞器是线粒体和叶绿体，b点无光，只进行细胞呼吸，产生ATP的细胞器是线粒体，因此在a、b点时都可以产生ATP的细胞器是线粒体。
【小问2详解】
图乙中Ⅰ是光反应阶段，Ⅱ是暗反应阶段，Ⅲ是有氧呼吸，O2参与有氧呼吸的第三阶段，暗反应进行的场所是叶绿体基质。
【小问3详解】
从图丙曲线变化分析，图中代表光合速率与呼吸速率相等的点为b、c，光照弱时，呼吸作用速率高于光合作用速率，密封玻璃温室中的二氧化碳浓度持续升高，随着光照强度的增加，光合速率增加，直到b点两者速率相等；bc段光合作用速率开始大于呼吸作用速率，随着二氧化碳浓度逐渐减少，光合作用速率降低，直至c点与呼吸作用速率相等。
【小问4详解】
图丁表示在最适温度下，麦芽糖酶的催化速率与麦芽糖浓度的关系，因此如果温度上升5℃，麦芽糖酶的活性将下降，催化速率降低，b点将向左下方移动。
【小问5详解】
光饱和点是植物光合速率达到最大值时的最低光照强度，可以通过测定不同的光照强度下的光合速率来确定，温度由25℃降为5℃的过程中光饱和点逐渐减小，推测该植物在光照充足时的光合作用最适温度应该大于或等于25℃。
【小问6详解】
光合作用的过程可表示为：CO2＋H2O (CH2O)＋O2。
8. 糖尿病是一种慢性代谢性疾病，其发病率呈逐年上升趋势。部分糖尿病患者的患病原因是巨噬细胞分泌的肿瘤坏死因子TNF-α异常升高导致的胰岛素抵抗等炎症反应（如图），请回答相关问题：
（1）激素可以通过____运向全身各处，并定向作用于靶器官，激素调节有_______的特点（至少写出两点）。机体内有多种激素都具有分级调节，这种调节的意义是_______。
（2）研究表明，胆碱能抗炎通路和GC 都有抑制巨噬细胞分泌TNF-α的抗炎作用，但效果不同，这两种调节过程中反应速度更快的是______，二者作用途径的区别是_______。胆碱是兴奋性神经递质，能使突触后膜两侧发生电位变化是________。当GC的含量过高会作用于下丘脑和垂体，下丘脑和垂体分泌的CRH和ACTH会减少，这种调节方式称为_________。
（3）肺炎支原体接触易感人群后，首先突破人体第一道防线皮肤和黏膜以及第二道防线_________，再到达人体第三道防线，激活特异性免疫。机体对肺炎支原体的免疫体现了免疫系统的________功能。严重肺炎患者会感觉肌肉酸痛，原因可能是_____。人体内B细胞和T细胞成熟的场所分别是_________。
【答案】（1） ①. 体液 ②. 微量高效，通过体液运输，作为信使传递信息，作用于靶器官、靶细胞 ③. 可以放大激素的调节效应，形成多级反馈调节，有利于精细调控，从而维持机体的稳态
（2） ①. 胆碱能抗炎通路 ②. GC调节通过体液运输，胆碱能抗炎通路调节通过反射弧 ③. 由外正内负变为外负内正 ④. 反馈调节
（3） ①. 体液中的杀菌物质和吞噬细胞 ②. 免疫防御 ③. 人体代谢快，耗氧量增加，由于供养不足，部分肌肉细胞进行无氧呼吸，乳酸含量升高 ④. 骨髓和胸腺
【解析】
【分析】1、激素是由内分泌腺或内分泌细胞分泌的高效生物活性物质，经血液或组织液传输与特异性受体结合而发挥调节作用，激素一经靶细胞接受并起作用后就被灭活了，因此，体内源源不断地产生激素，以维持激素含量的动态平衡。
2、下丘脑在相关刺激下，合成并分泌CRH，CRH作用于垂体使其合成并分泌ACTH，ACTH作用于肾上腺皮质，肾上腺皮质合成并分泌GC，当GC含量升高时，会负反馈抑制下丘脑和垂体的活动，从而维持GC含量的相对稳定；当ACTH含量上升时，也会负反馈抑制下丘脑的分泌活动。
【小问1详解】
激素是由内分泌腺或内分泌细胞分泌的，经血液或组织液传输与特异性受体结合而发挥调节作用，所以激素可以通过体液运向全身各处，并定向作用靶器官。激素调节特点有微量高效，通过体液运输，作为信使传递信息，作用于靶器官、靶细胞。机体内有多种激素都具有分级调节，这种调节的意义是可以放大激素的调节效应，形成多级反馈调节，有利于精细调控，从而维持机体的稳态。
【小问2详解】
据图可知，胆碱能抗炎通路涉及神经调节，而GC调节是激素调节。这两种调节过程中反应速度和作用途径的区别是GC反应慢，胆碱能抗炎通路反应快；GC调节通过体液运输，胆碱能抗炎通路调节通过反射弧。胆碱是兴奋性神经递质，能使突触后膜两侧发生电位变化是由外正内负变为外负内正。当GC的含量过高会作用于下丘脑和垂体，下丘脑和垂体分泌的CRH和ACTH会减少，这种调节方式称为反馈调节。
【小问3详解】
肺炎支原体接触易感人群后，首先突破人体第一道防线皮肤和黏膜以及第二道防线体液中的杀菌物质和吞噬细胞，再到达人体第三道防线，激活特异性免疫。机体对肺炎支原体的免疫体现了免疫系统的免疫防御功能。严重肺炎患者会感觉肌肉酸痛，原因可能是人体代谢快，耗氧量增加，由于供养不足，部分肌肉细胞进行无氧呼吸，乳酸含量升高。人体内B细胞和T细胞成熟的场所分别是骨髓和胸腺。
9. 如图为某地建立的农业生态系统示意图。请回答下列问题：
（1）食用菌在此生态系统中属于______（填成分），其作用是_____。
（2）长期饲养的家禽、家禽听到主人的呼唤声就集聚在一起等待喂食，主人的声音属于________信息。不同性别的同种家禽之间，通过相互的气味产生求偶或交配行为，这体现了信息传递的作用是________。
（3）图示生态系统具有________等优点。（答出2点）
（4）图中农作物同化的能量都有哪些去路_________。
【答案】（1） ①. 分解者 ②. 将动植物遗体和动物的排遗物分解为无机物
（2） ①. 物理 ②. 生物种群的繁衍离不开信息的传递
（3）实现了物质循环利用和能量的多级利用，而且还减少了环境的污染
（4）呼吸作用以热能形式散失的能量、流入下一营养级、流向分解者和未被利用
【解析】
【分析】一个完整的生态系统包括生物部分和非生物部分，非生物部分包括阳光、空气、水、温度等，生物部分由生产者（植物）、消费者（动物）和分解者（细菌、真菌）组成。
小问1详解】
食用菌属于真菌，在生态系统中属于分解者，分解者的作用是将动植物遗体和动物的排遗物分解为无机物。
【小问2详解】
声音属于物理信息，家畜通过气味产生求偶和交配行为体现的信息传递的作用是生物种群的繁衍离不开信息的传递。
【小问3详解】
与传统农业相比，图示生态系统具有实现了物质循环利用和能量的多级利用，而且还减少了环境的污染等优点。
【小问4详解】
图中农作物属于生产者，其同化能量去路有呼吸作用以热能形式散失的能量、流入下一营养级、流向分解者和未被利用。
10. 某种鹦鹉（2N=60）羽毛颜色由位于Z染色体上的复等位基因D+、D、d控制，它们的显隐性关系为D+>D>d。研究人员用甲、乙、丙三种基因型的个体做了以下实验。回答下列问题：
（1）根据上述实验结果可推测D+、D、d基因控制三种羽毛颜色的对应关系是：__________。在一个染色体数目均正常的鹦鹉种群中，D+、D、d能组成___________种基因型。群体中羽毛颜色为__________的个体的基因型种类最多，在雄性中一定为纯合子的鹦鹉的羽毛颜色是__________。
（2）上述实验中，甲的基因型可能是__________。两个实验的F1中羽毛颜色为巧克力色个体的基因型___________（填“相同”或“不相同”）。
（3）让实验二F1中羽毛为蓝色的雌雄鹦鹉随机交配，在考虑子代性别的前提下，F2的表型及比例是________。若杂交后代中雌性鹦鹉的羽毛颜色都是巧克力色、雄性鹦鹉的羽毛颜色都和母本相同且不是巧克力色，请写出杂交亲本的基因型组合：__________。
【答案】（1） ①. D+基因控制灰红色，D基因控制蓝色，d基因控制巧克力色 ②. 9 ③. 灰红色 ④. 巧克力色
（2） ①. ZD+Zd或ZD+W ②. 相同
（3） ①. 蓝色雄性：蓝色雌性：巧克力色雌性=4：3：1 ②. ZdZd×ZD+W、ZdZd×ZDW
【解析】
【分析】由性染色体上的基因所控制性状的遗传上总是和性别相关，这种与性别相关联的性状遗传方式就称为伴性遗传。鸟类的性别决定方式为ZW型，性染色体组成为ZZ的个体为雄性，性染色体组成为ZW的个体为雌性。
【小问1详解】
由实验一可知F1出现的新性状巧克力色是由基因d控制的，控制灰红色基因的显性能力最强，因此D+基因控制灰红色，D基因控制蓝色，d基因控制巧克力色。在一个染色体数目均正常的鹦鹉种群中，D+、D，d能组成ZD+ZD+、ZD+ZD、ZD+Zd、ZDZD、ZDZd、ZdZd、ZD+W、ZDW、ZdW共9种基因型。群体中灰红色的基因型有4种，种类最多，在雄性中一定为纯合子的鹦鹉的羽毛颜色是巧克力色；
【小问2详解】
上述实验中，甲的基因型是ZD+Zd或ZD+W。两个实验的F1中羽毛颜色为巧克力色个体的基因型相同，都是ZdW；
【小问3详解】
让实验二F1中羽毛为蓝色的雌（ZDW）雄（1/2ZDZD、1/2ZDZd）鹦鹉随机交配，雌配子为1/2ZD、1/2W，雄配子为3/4ZD、1/4Zd，雌雄鹦鹉随机交配，在考虑子代性别的前提下，F2的基因型及比例为3/8ZDZD（蓝色雄性）、1/8ZDZd（蓝色雄性）、3/8ZDW（蓝色雌性）、1/8ZdW（巧克力色雌性），表型及比例是蓝色雄性：蓝色雌性：巧克力色雌性=4：3：1。若杂交后代中雌性鹦鹉的羽毛颜色都是巧克力色、雄性鹦鹉的羽毛颜色都和母本相同且不是巧克力色，则可以选择的杂交亲本组合是ZdZd×ZD+W、ZdZd×ZDW。
11. M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M 基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M 基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：
（1）在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是_____，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的_____断开。
（2）在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是_____。
（3）与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是_____。
（4）鉴定转基因动物：以免疫小鼠的_____淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M 基因是否失活的实验思路。_____。
【答案】（1） ①. 限制性核酸内切酶（限制酶） ②. 磷酸二酯键
（2）清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，同时给细胞提供足够营养
（3）动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难
（4） ①. B ②. 取动物A和克隆动物A的肝组织细胞，分别提取蛋白质进行抗原—抗体杂交
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。
【小问1详解】
基因工程中切割DNA的工具酶是限制性核酸内切酶（限制酶），故在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是限制性核酸内切酶（限制酶）。限制酶是作用于其所识别序列中两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
【小问2详解】
在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，从培养液吸收营养，往培养液排出代谢产物，所以需要定期更换培养液，清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，同时给细胞补充足够营养。
【小问3详解】
由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，故与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率低。
【小问4详解】
先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，制备M蛋白的单克隆抗体；若要利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活，如果M基因已经失活，则克隆动物A中无法产生M蛋白的单克隆抗体，则可利用抗原—抗体杂交技术进行检测，故实验思路为：提取克隆动物A的肝细胞，培养肝细胞，在肝细胞加入带有荧光标记的抗Mda，检测有无荧光出现。若有荧光出现，说明克隆动物A中的M基因未失活；若无荧光出现，说明克隆动物A中的M基因失活。
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