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福建省龙岩市连城县第一中学2023-2024学年高二下学期5月月考生物试题
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这是一份福建省龙岩市连城县第一中学2023-2024学年高二下学期5月月考生物试题，共9页。试卷主要包含了单项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
一、单项选择题: （1-10题每题2分，11-15题每题4分，共40分）
1．下图表示应用基因工程技术生产干扰素的三条途径，下列相关叙述错误的是（ ）
A．途径甲中，过程Ⅰ应将干扰素基因和乳腺中特异性表达的基因的启动子重组
B．途径乙中，过程Ⅱ一般采用的方法是农杆菌转化法
C．途径丙中，过程Ⅱ可用Ca2+处理大肠杆菌
D．三条途径中,过程Ⅲ依据的生物学原理相同
2．CD47是一种细胞膜表面的糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的功能。为验证抗CD47的单克隆抗体能减弱CD47对巨噬细胞的抑制作用，某科研小组进行了实验，实验过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．CD47与巨噬细胞结合后会抑制后者的抗原处理、呈递功能
B．通常向肿瘤细胞共培养体系加入血清，可提供某些营养物质
C．融合、筛选得到的杂交瘤细胞都能产生抗CD47的单克隆抗体
D．预期实验结果为实验组的巨噬细胞的吞噬能力高于对照组的
3．小曲白酒清香纯正，以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌等。酿酒的原理主要是酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述错误的是（ ）
A．糖化主要是淀粉水解为葡萄糖的过程
B．发酵液样品的蒸馏产物有无酒精，可用酸性重铬酸钾溶液检测
C．蒸熟并摊晾的原料加入糟醅，立即密封可高效进行酒精发酵
D．若酿造过程中酒变酸，则发酵坛密封可能不严
4．桂林豆腐乳历史悠久，颇负盛名，其制作流程包括磨浆、过滤、定型、压干、霉化、加盐腌制等。制出的豆腐乳块质地细滑松软，表面橙黄透明，味道鲜美奇香，可增进食欲，帮助消化。下列有关叙述正确的是（ ）
A．在腐乳制作过程中有能产生蛋白酶的微生物参与
B．腐乳发酵过程中有多种微生物的参与，起主要作用的是曲霉
C．家庭制作腐乳时，发酵过程的控制有严格标准
D．将豆腐块分层放入瓶中腌制时，随层数加高所加盐减少
5．传统泡菜腌制过程中，乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化如图所示，其中亚硝酸盐是硝酸盐还原菌促进硝酸盐还原形成的，硝酸盐还原菌适宜的酸碱度为中性。若摄入过多亚硝酸盐，则对人体有害。下列说法错误的是（ ）
A．发酵初期，亚硝酸盐含量升高，主要是由于硝酸盐还原菌大量繁殖
B．发酵中期，乳酸菌进行有氧呼吸而大量繁殖产生大量的乳酸
C．发酵后期，乳酸菌数量下降与营养物质的消耗和乳酸的积累都相关
D．取食泡菜的时间宜在发酵的中期靠后期
6．为探究某种抗生素对细菌的选择作用，实验人员在接种了大肠杆菌的培养基中1号区放置不含抗生素的圆形纸片，在2、3、4号区放置大小相等且含等量该抗生素的圆形纸片，如图1所示。培养一段时间后观察并测量抑菌圈的直径，然后从适宜位置挑取细菌，并重复上述步骤培养3代，结果如图2所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A．培养过程中抑菌圈越大说明大肠杆菌的抗药性越弱
B．探究抗生素对细菌的选择作用时，宜用平板划线法接种细菌
C．抗生素的使用导致抗药基因频率升高
D．每代都需计算2、3、4区抑菌圈的平均值，重复培养时应从抑菌圈边缘挑取细菌
7．研究发现，生长素能够维持拟南芥bZIP59蛋白的稳定性，并增强其与LBD形成复合物的能力，bZIP59－LBD复合体直接靶向FAD－BD基因，并促进其转录，这有助于愈伤组织的形成。下列相关叙述错误的是（ ）
A．生长素通过调控植物细胞的基因表达而影响植物细胞全能性的表达
B．植物是自养型生物，培养基中不需要添加有机碳源
C．培养基中添加激素的种类和含量会影响植物细胞发育的方向
D．脱分化期间一般不需要光照，再分化时需要适当光照诱导叶绿素产生
8．精准爆破肿瘤细胞的“生物导弹”—抗体—药物偶联物（ADC）能对肿瘤细胞进行选择性杀伤，该物质由抗体、药物（如细胞毒素）和接头三部分组成，其作用机制如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．ADC通过主动运输进入肿瘤细胞，需要消耗细胞代谢产生的ATP
B．ADC中抗体的制备过程运用了动物细胞培养和动物细胞融合等技术手段
C．ADC中的抗体能特异性识别肿瘤细胞表面的抗原并与之结合
D．ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞凋亡，从而杀伤肿瘤细胞
9．下图为幼鼠肾脏上皮细胞培养过程示意图，已知肾脏上皮细胞属于需要贴附于某些基质表面才能生长增殖的细胞。
下列叙述不正确的是（ ）
A．甲→乙过程需要用机械的方法和特定的酶处理
B．丙过程会出现细胞贴壁生长和接触抑制的现象
C．丙在CO2培养箱中培养以维持培养液pH相对稳定
D．丁过程为传代培养，利用了动物细胞全能性的原理
10．科学家将小鼠多能干细胞的4种基因Oct3/4，Sx2，c-Myc和Klf4，同时导入已分化的小鼠成纤维细胞中，结果后者被诱导成类似胚胎干细胞的一类细胞，被称为诱导多能干细胞（iPS细胞）。iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的过程如图所示，下列叙述错误的是（ ）
A．相比于成纤维细胞，iPS细胞的分化程度更低
B．小鼠成纤维细胞中不含Oct3/4、Sx2、c-Myc和Klf4基因
C．若诱导iPS细胞定向分化为原始生殖细胞，则可用于濒危物种的克隆研究
D．已分化的T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞
11．2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线：下列叙述错误的是（ ）
A．卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因能够遗传给“三亲婴儿”
B．该技术可以有效避免母亲线粒体DNA中的致病基因遗传给后代
C．捐赠者的卵子去核实质是指去掉细胞中的蛋白质—染色体复合物
D．“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
12．以洋葱为材料进行DNA的粗提取与鉴定实验，相关叙述错误的是（ ）
A．用二苯胺试剂鉴定DNA时，进行沸水浴5分钟后会显现蓝色
B．将粗提取的DNA（白色丝状物）溶解在2ml/L的NaCl溶液中用来进行鉴定
C．向含DNA的滤液中加入预冷的体积分数为95%的酒精溶液，有利于DNA析出
D．可将洋葱换成哺乳动物家兔的血液进行该实验
13．CRISPR/dCas9基因抑制系统来源于CRISPR/Cas9，Cas9酶能够切割核酸片段，当其特定的结构区域发生改变后，失去切割功能，称为dCas9，但仍然能由gRNA引导后与DNA结合，如下图所示。对该系统理解错误的是（ ）
A．CRISPR/dCas9是由蛋白质与RNA构成的复合体
B．正常的Cas9酶不能催化磷酸二酯键的断裂
C．gRNA能与DNA上特定的碱基序列互补配对
D．dCas9与靶位点结合可以直接干扰转录的进行
14．下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，错误的是（ ）
A．在凝胶中DNA分子的迁移速率主要和DNA分子的大小、构象等有关
B．PCR扩增产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来进行鉴定
C．反应过程中的每一轮循环依次包括变性、复性、延伸三步
D．耐高温的DNA聚合酶只能从引物的5′端开始连接脱氧核苷酸
15．研究人员将PCR扩增得到的毒物诱导型启动子S（箭头表示转录方向）插入图中载体P区，构建表达载体，转入大肠杆菌，获得能够检测水中毒物的大肠杆菌。
下列叙述不正确的是（ ）
A．引物I、Ⅱ中应分别含有BamHI、XhI的识别序列
B．质粒载体上除具有图中所示的元件外还应有复制原点
C．用含氨苄青霉素的培养基对转入操作后的菌株进行筛选
D．可通过转基因大肠杆菌的荧光情况判断水中毒物情况
二、非选择题
16．二苯乙烯苷是我国传统药材何首乌特有的药效成分，具有抗氧化、清除自由基等功效。合成二苯乙烯苷的关键酶是芪合酶（STS），为获得大量的STS，研究人员利用质粒（如图2）将STS基因（如图1）转化到大肠杆菌细胞内进行表达。回答下列问题：
(1)采用PCR技术可以快速、大量获得目的基因，据图1分析，利用该技术扩增STS基因时，应选择的引物是 。
(2)为使STS基因与质粒正确连接，需在所选引物的 （填“3”或“5’”）端分别增加相应限制酶的酶切位点，同时选用 两种限制酶切割质粒。
(3)启动子是 识别和结合的部位。很多启动子具有物种特异性，在图2质粒中插入STS基因，其上游启动子应选择 （填写字母）。
A．何首乌启动子 B．大肠杆菌启动子 C．农杆菌启动子
(4)可将转化后的大肠杆菌接种到含 的培养基上进行筛选。能在该培养基上生长的大肠杆菌是否一定含有STS基因?请判断并说明理由： 。
17．人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。如图所示为科学家培育转入t-PA蛋白基因山羊的过程，该转基因山羊可大规模生产t-PA蛋白（从乳汁中提取）。亮氨酸是维持山羊细胞生命活动必不可少的一种必需氨基酸，其合成与质粒 S中的 Leu基因有关，GFP 基因控制合成绿色荧光蛋白。回答下列问题。
(1)A 为mRNA，则过程①需要的酶是 。过程②需使用的限制酶是 。
(2)为检测基因表达载体是否构建成功，培养基中不应含有 。将山羊成纤维细胞培养一段时间后，筛选出 （填“显示”或“不显示”）绿色荧光的细胞用于过程⑤。
(3)心梗患者注射大剂量的经基因工程生产的t-PA 蛋白会诱发颅内出血，将t-PA 蛋白第84位的半胱氨酸替换成丝氨酸后，能显著降低出血的副作用。据此，需要先对 进行改造，进而制造出性能优异的改良t-PA 蛋白，该过程即 工程。
(4)过程⑨表示 。该过程之所以能够成功依赖于一定的生理学基础，即 （答一点）。
18．我国科研人员对秸秆资源的合理利用进行了研究。
(1)秸秆的主要成分包括植物细胞壁中的纤维素和半纤维素等多种物质，纤维素彻底水解后得到 ，半纤维素水解后可得到木糖及醋酸盐等。
(2)科研人员首先从土壤中分离纤维素分解菌和半纤维素分解菌。其中，分离纤维素分解菌的大致流程如下。
①制备培养基：制备以 的选择培养基，并加入刚果红。
②取样：从秸秆还田的农田或覆盖枯枝败叶的林下收集土壤样品，原因是这些地方 。
③接种：将收集的土壤加入到一定量的 中后摇匀，然后，进行梯度稀释并接种在过程①制备的平板上。
④纤维素分解菌的分离：纤维素分解菌能够分泌纤维素酶，依据 的比值，筛选得到能高效分解纤维素的菌种。
(3)用所得菌种进行发酵，分解秸秆中的纤维素和半纤维素，其中，半纤维素水解产物中的醋酸盐是进一步发酵的抑制剂。科研人员尝试利用代谢途径较多的酵母菌株S将醋酸盐消耗掉，并在此基础上改造菌种，发酵产生维生素A等更多有价值的产物。
①科研人员进行图1所示实验，探究不同底物条件下醋酸盐对菌株S的影响。该实验结果表明 。
②研究发现，菌株S能吸收木糖和醋酸盐等物质进行发酵，代谢途径如图2。由图2可知，葡萄糖和木糖进入酵母细胞后，通过 过程为酵母菌的生长和分裂提供大量能量。据图2分析，图1中3组酵母细胞干重小于6组的原因是：葡萄糖可以通过 两个方面，减少维生素A等脂类物质的合成。
(4)将工程菌加入到含有秸秆水解产物的发酵罐中，严格控制发酵条件，随时检测培养液中微生物数量和 等，以便及时补充发酵原料，实现秸秆资源的充分利用。
19．常规种植的棉花（陆地棉）含有棉酚，棉酚具有一定毒性，主要分布在茎、叶、苞片、铃壳及种子里的许多黑色细小的腺体中，高棉酚植株的这些腺体也比较丰富。科研人员选取低棉酚的野生棉（2n=26）和品质好的陆地棉（4n=52）来培育棉酚含量低且品质好的棉花新品种。
(1)科研人员用 酶处理野生棉和陆地棉的悬浮细胞，分别获得两种棉的原生质体，
(2)用一定剂量的紫外线处理野生棉原生质体，破坏部分染色体。用流式细胞仪测定上述各种原生质体中DNA的相对含量，结果如图1所示。未经处理的野生棉、紫外线处理后的野生棉、陆地棉原生质体的检测结果依次对应图中 （请选填图）中的字母）。
(3)将紫外线处理后的野生棉原生质体与陆地棉原生质体用化学诱导剂 诱导融合，获得的原生质体经过 过程，成为完整植物细胞，进而分裂和脱分化形成 ，最终经过 过程形成完整的再生植株。
(4)①用特异性引物对陆地棉和野生棉基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。图2是用该引物对双亲及再生植株1~6进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1~6中属于杂种植株的有 。
②在个体水平上，可通过观察杂种植株 ，筛选出低棉酚的杂种植物，并对其产棉品质进行鉴定，以获得所需棉花新品种。
(5)上述培育棉花新品种所用到的生物技术称为 ，该技术的原理是 。
20．长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的重要因素。下图为科学家设计的快速繁育良种奶牛的部分流程示意图。回答下列问题：
过程①为同期发情处理，其目的是 。
(2)受精的标志是观察到两个极体或者 。若过程②为体内受精，则受精过程在良种母牛的 中完成；若过程②为体外受精，则良种公牛的精子需要进行 处理。
(3)受精卵经过程③发育为 胚，用分割针对其进行分割时，要注意 。图中采集的甲为 细胞，其可用于做DNA分析、基因诊断，还可用于 等。
1-5、DCCAB 6-10、BBADB 11-15、ADBDA
16．（14分，每空2分）
(1) 引物2 和引物 3
(2) 5' XhI 和 NdeI
(3) RNA 聚合酶 B
(4) 氨苄青霉素 不一定，含氨苄青霉素抗性基因的未重组载体（空质粒）也可导入大肠杆菌，使大肠杆菌在培养基上形成菌落
17．（16分，每空2分）
(1) 逆转录酶 BamHⅠ、HindⅢ
(2) 亮氨酸 不显示
(3) t-PA基因 蛋白质
(4) 胚胎移植 早期胚胎不与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态；受体子宫不会对来自供体的胚胎发生免疫排斥
18．（11分，每空1分，特别说明除外）
(1)葡萄糖
(2)①纤维素为唯一碳源
②纤维素分解菌较多
③无菌水
④菌落直径与透明圈直径
（3）①葡萄糖为底物的条件下，不同浓度醋酸盐均抑制菌株S生长，浓度越高抑制作用越强；木糖为底物的条件下则相反 （2分）
②有氧呼吸 抑制醋酸盐转运进入酵母细胞、抑制醋酸盐转化为乙酰辅酶A （2分）
(4)产物浓度
19．（10分，每空1分）
(1)纤维素酶、果胶酶
(2)B、C、A
(3) 聚乙二醇 再生细胞壁 愈伤组织 再分化
(4) 1、3、5、6 茎、叶等结构中黑色细小腺体的数量
(5) 植物体细胞杂交技术 细胞膜的流动性、细胞全能性
20．（9分，每空1分，特别说明除外）
(1)使供、受体具有相同的生理状况 ，为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境（2分）
(2) 雌雄原核 输卵管 获能
(3) 囊胚 将内细胞团均等分割 滋养层 性别鉴定
一、单项选择题: （1-10题每题2分，11-15题每题4分，共40分）
1．下图表示应用基因工程技术生产干扰素的三条途径，下列相关叙述错误的是（ ）
A．途径甲中，过程Ⅰ应将干扰素基因和乳腺中特异性表达的基因的启动子重组
B．途径乙中，过程Ⅱ一般采用的方法是农杆菌转化法
C．途径丙中，过程Ⅱ可用Ca2+处理大肠杆菌
D．三条途径中,过程Ⅲ依据的生物学原理相同
2．CD47是一种细胞膜表面的糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的功能。为验证抗CD47的单克隆抗体能减弱CD47对巨噬细胞的抑制作用，某科研小组进行了实验，实验过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．CD47与巨噬细胞结合后会抑制后者的抗原处理、呈递功能
B．通常向肿瘤细胞共培养体系加入血清，可提供某些营养物质
C．融合、筛选得到的杂交瘤细胞都能产生抗CD47的单克隆抗体
D．预期实验结果为实验组的巨噬细胞的吞噬能力高于对照组的
3．小曲白酒清香纯正，以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌等。酿酒的原理主要是酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述错误的是（ ）
A．糖化主要是淀粉水解为葡萄糖的过程
B．发酵液样品的蒸馏产物有无酒精，可用酸性重铬酸钾溶液检测
C．蒸熟并摊晾的原料加入糟醅，立即密封可高效进行酒精发酵
D．若酿造过程中酒变酸，则发酵坛密封可能不严
4．桂林豆腐乳历史悠久，颇负盛名，其制作流程包括磨浆、过滤、定型、压干、霉化、加盐腌制等。制出的豆腐乳块质地细滑松软，表面橙黄透明，味道鲜美奇香，可增进食欲，帮助消化。下列有关叙述正确的是（ ）
A．在腐乳制作过程中有能产生蛋白酶的微生物参与
B．腐乳发酵过程中有多种微生物的参与，起主要作用的是曲霉
C．家庭制作腐乳时，发酵过程的控制有严格标准
D．将豆腐块分层放入瓶中腌制时，随层数加高所加盐减少
5．传统泡菜腌制过程中，乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化如图所示，其中亚硝酸盐是硝酸盐还原菌促进硝酸盐还原形成的，硝酸盐还原菌适宜的酸碱度为中性。若摄入过多亚硝酸盐，则对人体有害。下列说法错误的是（ ）
A．发酵初期，亚硝酸盐含量升高，主要是由于硝酸盐还原菌大量繁殖
B．发酵中期，乳酸菌进行有氧呼吸而大量繁殖产生大量的乳酸
C．发酵后期，乳酸菌数量下降与营养物质的消耗和乳酸的积累都相关
D．取食泡菜的时间宜在发酵的中期靠后期
6．为探究某种抗生素对细菌的选择作用，实验人员在接种了大肠杆菌的培养基中1号区放置不含抗生素的圆形纸片，在2、3、4号区放置大小相等且含等量该抗生素的圆形纸片，如图1所示。培养一段时间后观察并测量抑菌圈的直径，然后从适宜位置挑取细菌，并重复上述步骤培养3代，结果如图2所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A．培养过程中抑菌圈越大说明大肠杆菌的抗药性越弱
B．探究抗生素对细菌的选择作用时，宜用平板划线法接种细菌
C．抗生素的使用导致抗药基因频率升高
D．每代都需计算2、3、4区抑菌圈的平均值，重复培养时应从抑菌圈边缘挑取细菌
7．研究发现，生长素能够维持拟南芥bZIP59蛋白的稳定性，并增强其与LBD形成复合物的能力，bZIP59－LBD复合体直接靶向FAD－BD基因，并促进其转录，这有助于愈伤组织的形成。下列相关叙述错误的是（ ）
A．生长素通过调控植物细胞的基因表达而影响植物细胞全能性的表达
B．植物是自养型生物，培养基中不需要添加有机碳源
C．培养基中添加激素的种类和含量会影响植物细胞发育的方向
D．脱分化期间一般不需要光照，再分化时需要适当光照诱导叶绿素产生
8．精准爆破肿瘤细胞的“生物导弹”—抗体—药物偶联物（ADC）能对肿瘤细胞进行选择性杀伤，该物质由抗体、药物（如细胞毒素）和接头三部分组成，其作用机制如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．ADC通过主动运输进入肿瘤细胞，需要消耗细胞代谢产生的ATP
B．ADC中抗体的制备过程运用了动物细胞培养和动物细胞融合等技术手段
C．ADC中的抗体能特异性识别肿瘤细胞表面的抗原并与之结合
D．ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞凋亡，从而杀伤肿瘤细胞
9．下图为幼鼠肾脏上皮细胞培养过程示意图，已知肾脏上皮细胞属于需要贴附于某些基质表面才能生长增殖的细胞。
下列叙述不正确的是（ ）
A．甲→乙过程需要用机械的方法和特定的酶处理
B．丙过程会出现细胞贴壁生长和接触抑制的现象
C．丙在CO2培养箱中培养以维持培养液pH相对稳定
D．丁过程为传代培养，利用了动物细胞全能性的原理
10．科学家将小鼠多能干细胞的4种基因Oct3/4，Sx2，c-Myc和Klf4，同时导入已分化的小鼠成纤维细胞中，结果后者被诱导成类似胚胎干细胞的一类细胞，被称为诱导多能干细胞（iPS细胞）。iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的过程如图所示，下列叙述错误的是（ ）
A．相比于成纤维细胞，iPS细胞的分化程度更低
B．小鼠成纤维细胞中不含Oct3/4、Sx2、c-Myc和Klf4基因
C．若诱导iPS细胞定向分化为原始生殖细胞，则可用于濒危物种的克隆研究
D．已分化的T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞
11．2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线：下列叙述错误的是（ ）
A．卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因能够遗传给“三亲婴儿”
B．该技术可以有效避免母亲线粒体DNA中的致病基因遗传给后代
C．捐赠者的卵子去核实质是指去掉细胞中的蛋白质—染色体复合物
D．“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
12．以洋葱为材料进行DNA的粗提取与鉴定实验，相关叙述错误的是（ ）
A．用二苯胺试剂鉴定DNA时，进行沸水浴5分钟后会显现蓝色
B．将粗提取的DNA（白色丝状物）溶解在2ml/L的NaCl溶液中用来进行鉴定
C．向含DNA的滤液中加入预冷的体积分数为95%的酒精溶液，有利于DNA析出
D．可将洋葱换成哺乳动物家兔的血液进行该实验
13．CRISPR/dCas9基因抑制系统来源于CRISPR/Cas9，Cas9酶能够切割核酸片段，当其特定的结构区域发生改变后，失去切割功能，称为dCas9，但仍然能由gRNA引导后与DNA结合，如下图所示。对该系统理解错误的是（ ）
A．CRISPR/dCas9是由蛋白质与RNA构成的复合体
B．正常的Cas9酶不能催化磷酸二酯键的断裂
C．gRNA能与DNA上特定的碱基序列互补配对
D．dCas9与靶位点结合可以直接干扰转录的进行
14．下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，错误的是（ ）
A．在凝胶中DNA分子的迁移速率主要和DNA分子的大小、构象等有关
B．PCR扩增产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来进行鉴定
C．反应过程中的每一轮循环依次包括变性、复性、延伸三步
D．耐高温的DNA聚合酶只能从引物的5′端开始连接脱氧核苷酸
15．研究人员将PCR扩增得到的毒物诱导型启动子S（箭头表示转录方向）插入图中载体P区，构建表达载体，转入大肠杆菌，获得能够检测水中毒物的大肠杆菌。
下列叙述不正确的是（ ）
A．引物I、Ⅱ中应分别含有BamHI、XhI的识别序列
B．质粒载体上除具有图中所示的元件外还应有复制原点
C．用含氨苄青霉素的培养基对转入操作后的菌株进行筛选
D．可通过转基因大肠杆菌的荧光情况判断水中毒物情况
二、非选择题
16．二苯乙烯苷是我国传统药材何首乌特有的药效成分，具有抗氧化、清除自由基等功效。合成二苯乙烯苷的关键酶是芪合酶（STS），为获得大量的STS，研究人员利用质粒（如图2）将STS基因（如图1）转化到大肠杆菌细胞内进行表达。回答下列问题：
(1)采用PCR技术可以快速、大量获得目的基因，据图1分析，利用该技术扩增STS基因时，应选择的引物是 。
(2)为使STS基因与质粒正确连接，需在所选引物的 （填“3”或“5’”）端分别增加相应限制酶的酶切位点，同时选用 两种限制酶切割质粒。
(3)启动子是 识别和结合的部位。很多启动子具有物种特异性，在图2质粒中插入STS基因，其上游启动子应选择 （填写字母）。
A．何首乌启动子 B．大肠杆菌启动子 C．农杆菌启动子
(4)可将转化后的大肠杆菌接种到含 的培养基上进行筛选。能在该培养基上生长的大肠杆菌是否一定含有STS基因?请判断并说明理由： 。
17．人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。如图所示为科学家培育转入t-PA蛋白基因山羊的过程，该转基因山羊可大规模生产t-PA蛋白（从乳汁中提取）。亮氨酸是维持山羊细胞生命活动必不可少的一种必需氨基酸，其合成与质粒 S中的 Leu基因有关，GFP 基因控制合成绿色荧光蛋白。回答下列问题。
(1)A 为mRNA，则过程①需要的酶是 。过程②需使用的限制酶是 。
(2)为检测基因表达载体是否构建成功，培养基中不应含有 。将山羊成纤维细胞培养一段时间后，筛选出 （填“显示”或“不显示”）绿色荧光的细胞用于过程⑤。
(3)心梗患者注射大剂量的经基因工程生产的t-PA 蛋白会诱发颅内出血，将t-PA 蛋白第84位的半胱氨酸替换成丝氨酸后，能显著降低出血的副作用。据此，需要先对 进行改造，进而制造出性能优异的改良t-PA 蛋白，该过程即 工程。
(4)过程⑨表示 。该过程之所以能够成功依赖于一定的生理学基础，即 （答一点）。
18．我国科研人员对秸秆资源的合理利用进行了研究。
(1)秸秆的主要成分包括植物细胞壁中的纤维素和半纤维素等多种物质，纤维素彻底水解后得到 ，半纤维素水解后可得到木糖及醋酸盐等。
(2)科研人员首先从土壤中分离纤维素分解菌和半纤维素分解菌。其中，分离纤维素分解菌的大致流程如下。
①制备培养基：制备以 的选择培养基，并加入刚果红。
②取样：从秸秆还田的农田或覆盖枯枝败叶的林下收集土壤样品，原因是这些地方 。
③接种：将收集的土壤加入到一定量的 中后摇匀，然后，进行梯度稀释并接种在过程①制备的平板上。
④纤维素分解菌的分离：纤维素分解菌能够分泌纤维素酶，依据 的比值，筛选得到能高效分解纤维素的菌种。
(3)用所得菌种进行发酵，分解秸秆中的纤维素和半纤维素，其中，半纤维素水解产物中的醋酸盐是进一步发酵的抑制剂。科研人员尝试利用代谢途径较多的酵母菌株S将醋酸盐消耗掉，并在此基础上改造菌种，发酵产生维生素A等更多有价值的产物。
①科研人员进行图1所示实验，探究不同底物条件下醋酸盐对菌株S的影响。该实验结果表明 。
②研究发现，菌株S能吸收木糖和醋酸盐等物质进行发酵，代谢途径如图2。由图2可知，葡萄糖和木糖进入酵母细胞后，通过 过程为酵母菌的生长和分裂提供大量能量。据图2分析，图1中3组酵母细胞干重小于6组的原因是：葡萄糖可以通过 两个方面，减少维生素A等脂类物质的合成。
(4)将工程菌加入到含有秸秆水解产物的发酵罐中，严格控制发酵条件，随时检测培养液中微生物数量和 等，以便及时补充发酵原料，实现秸秆资源的充分利用。
19．常规种植的棉花（陆地棉）含有棉酚，棉酚具有一定毒性，主要分布在茎、叶、苞片、铃壳及种子里的许多黑色细小的腺体中，高棉酚植株的这些腺体也比较丰富。科研人员选取低棉酚的野生棉（2n=26）和品质好的陆地棉（4n=52）来培育棉酚含量低且品质好的棉花新品种。
(1)科研人员用 酶处理野生棉和陆地棉的悬浮细胞，分别获得两种棉的原生质体，
(2)用一定剂量的紫外线处理野生棉原生质体，破坏部分染色体。用流式细胞仪测定上述各种原生质体中DNA的相对含量，结果如图1所示。未经处理的野生棉、紫外线处理后的野生棉、陆地棉原生质体的检测结果依次对应图中 （请选填图）中的字母）。
(3)将紫外线处理后的野生棉原生质体与陆地棉原生质体用化学诱导剂 诱导融合，获得的原生质体经过 过程，成为完整植物细胞，进而分裂和脱分化形成 ，最终经过 过程形成完整的再生植株。
(4)①用特异性引物对陆地棉和野生棉基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。图2是用该引物对双亲及再生植株1~6进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1~6中属于杂种植株的有 。
②在个体水平上，可通过观察杂种植株 ，筛选出低棉酚的杂种植物，并对其产棉品质进行鉴定，以获得所需棉花新品种。
(5)上述培育棉花新品种所用到的生物技术称为 ，该技术的原理是 。
20．长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的重要因素。下图为科学家设计的快速繁育良种奶牛的部分流程示意图。回答下列问题：
过程①为同期发情处理，其目的是 。
(2)受精的标志是观察到两个极体或者 。若过程②为体内受精，则受精过程在良种母牛的 中完成；若过程②为体外受精，则良种公牛的精子需要进行 处理。
(3)受精卵经过程③发育为 胚，用分割针对其进行分割时，要注意 。图中采集的甲为 细胞，其可用于做DNA分析、基因诊断，还可用于 等。
1-5、DCCAB 6-10、BBADB 11-15、ADBDA
16．（14分，每空2分）
(1) 引物2 和引物 3
(2) 5' XhI 和 NdeI
(3) RNA 聚合酶 B
(4) 氨苄青霉素 不一定，含氨苄青霉素抗性基因的未重组载体（空质粒）也可导入大肠杆菌，使大肠杆菌在培养基上形成菌落
17．（16分，每空2分）
(1) 逆转录酶 BamHⅠ、HindⅢ
(2) 亮氨酸 不显示
(3) t-PA基因 蛋白质
(4) 胚胎移植 早期胚胎不与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态；受体子宫不会对来自供体的胚胎发生免疫排斥
18．（11分，每空1分，特别说明除外）
(1)葡萄糖
(2)①纤维素为唯一碳源
②纤维素分解菌较多
③无菌水
④菌落直径与透明圈直径
（3）①葡萄糖为底物的条件下，不同浓度醋酸盐均抑制菌株S生长，浓度越高抑制作用越强；木糖为底物的条件下则相反 （2分）
②有氧呼吸 抑制醋酸盐转运进入酵母细胞、抑制醋酸盐转化为乙酰辅酶A （2分）
(4)产物浓度
19．（10分，每空1分）
(1)纤维素酶、果胶酶
(2)B、C、A
(3) 聚乙二醇 再生细胞壁 愈伤组织 再分化
(4) 1、3、5、6 茎、叶等结构中黑色细小腺体的数量
(5) 植物体细胞杂交技术 细胞膜的流动性、细胞全能性
20．（9分，每空1分，特别说明除外）
(1)使供、受体具有相同的生理状况 ，为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境（2分）
(2) 雌雄原核 输卵管 获能
(3) 囊胚 将内细胞团均等分割 滋养层 性别鉴定
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