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黑龙江省哈尔滨市第六中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷（原卷版+解析版）
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这是一份黑龙江省哈尔滨市第六中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷（原卷版+解析版），文件包含黑龙江省哈尔滨市第六中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷原卷版docx、黑龙江省哈尔滨市第六中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷解析版docx等2份试卷配套教学资源，其中试卷共38页， 欢迎下载使用。
一、单选题(本题共20个小题，每题2分，共40分。每题只有一个正确的选项。)
1. 下列有关传统发酵技术的描述，错误的是（ ）
A. 传统发酵技术所用的菌种一般是原料中天然存在的微生物
B. 传统发酵技术是微生物在有氧或无氧条件下物质的氧化分解
C. 传统发酵技术的目的是获得发酵产品或更多的微生物
D. 果酒、果醋、泡菜、酱油等是传统发酵技术的产物
2. 啤酒是以大麦为主要原料，经酿酒酵母发酵制得。啤酒的工业化生产分为主发酵和后发酵两个阶段。精酿啤酒的制作工艺与普通啤酒不同，不添加食品添加剂，不进行过滤消毒处理。下列叙述正确的是（ ）
A. 利用大麦作原料时，淀粉是酵母菌的直接碳源
B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成
C. 后发酵阶段会因pH或酒精含量升高而终止发酵
D. 精酿啤酒不进行过滤和消毒，故发酵过程不需要在无菌条件下进行
3. 有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养，下图所示为操作流程。有关叙述错误的是（ ）
A. 在称取土壤、稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作
B. 用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等需要进行灭菌处理
C. 步骤③中，将温度约50℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养
D. 步骤④中，划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
4. 由于发酵工程生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉等，在许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程在食品工业上应用的叙述，错误的是（ ）
A. 利用黑曲霉发酵制得的柠檬酸，广泛用于调节食品的酸度
B. 利用谷氨酸棒状杆菌发酵得到谷氨酸，经一系列处理制成味精
C. 利用乳酸菌在青贮饲料中乳酸发酵产生有机酸而实现饲料保鲜
D. 利用发酵工程从微生物细胞中提取单细胞蛋白制成微生物饲料
5. 在反刍动物瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能以尿素为唯一氮源。某小组计划从牛瘤胃中分离出该类微生物进行研究，如图为实验所用的培养基配方。下列说法正确的是（ ）
A. 该培养基为固体培养基，倒平板操作后，进行高压蒸汽灭菌
B. 该培养基上只有尿素分解菌能够存活，因而长出的菌落无须菌种鉴定
C. 接种针可以通过灼烧灭菌，灼烧时使用酒精灯的内焰效果更好
D. 尿素分解菌能够使培养基的pH升高，可据此初步确定所需菌种
6. 草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 方法一中，甲常选用茎尖，原因是其几乎未感染病毒
B. A、C两个过程属于植物组织培养，都经过脱分化和再分化
C. 通常采用70%的酒精和5%次氯酸钠溶液对甲进行消毒处理
D. 判断两种选育方法的效果都需要通过病毒接种实验
7. 随着植物花药培养以及植物体细胞杂交技术等得以确立和发展，标志着植物细胞工程技术进入了高速发展的阶段。花粉原生质体具备单倍体的优点，可直接与体细胞原生质体融合，实现配子与体细胞杂交。下列叙述错误的是（ ）
A. 花粉可培育成单倍体植株，是细胞全能性的体现
B 用低渗溶液配制纤维素酶和果胶酶溶液制备原生质体
C. 利用植物组织培养技术将融合细胞培育成完整植株
D. 配子与体细胞杂交能缩短三倍体无子果实培育年限
8. 铁皮石斛是非常好的药材，但其自然繁殖力极弱，生长缓慢，由于人们的掠夺式采挖，资源已接近枯竭，植物组织培养技术为铁皮石斛的繁殖提供了新思路。下列说法正确的是（ ）
A. 植物组织培养得到试管苗的过程中只需要更换一次培养基
B. 诱导愈伤组织形成时需要每日给予适当时间的光照
C. 降低培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生根
D. 用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异
9. 实时荧光 RT-PCR用于RNA病毒的核酸检测，其原理是：在PCR性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光，如图所示。下列有关叙述正确的有（ ）
A. 与细胞内DNA 制相比，该技术用的DNA聚合酶最适温度较高
B. 通过温度变化的控制为变性、复性和延伸等过程提供能量
C. 该过程中消耗引物量与发出的荧光强度之间呈负相关
D. 与抗体检测相比，核酸检测能更早发现患者并及时治疗
10. 大多数哺乳动物的晚期桑葚胚分割后，分离的卵裂球仍具有调整发育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而发育至囊胚。该调节能力随发育进程逐渐减弱甚至消失。下列说法错误的是（ ）
A. 胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴
B. 卵裂过程中所需营养主要来源于培养液
C. 桑葚胚及囊胚的内细胞团细胞具有发育的全能性
D. 囊胚期的细胞出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变
11. 胚胎干细胞存在于哺乳动物的早期胚胎中，具有自我更新能力，在科学和医学领域具有极高的研究价值。早期胚胎干细胞的发育和自我更新受多个基因调控（如图）。下列叙述错误的是（ ）
A. 早期胚胎干细胞可分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞
B. Nang基因突变可能使胚胎干细胞自我更新受阻
C. 促进Stat3和Oct3/4的表达会促进胚胎干细胞向滋养层分化
D. 将干细胞用于疾病的临床治疗可能存在导致肿瘤发生的风险
12. 科学家将大熊猫的体细胞和兔子的去核卵母细胞构建成重组细胞，使重组细胞成功发育为囊胚，标志着异种核质相容问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”。下列说法错误的是（ ）
A. 获取卵母细胞前，用含促性腺激素的饲料饲喂兔子可使其超数排卵
B. 可通过梯度离心法去除兔子卵母细胞中的细胞核
C. 可将大熊猫的体细胞直接注入兔子的去核卵母细胞
D. 选用的去核卵母细胞中的细胞质已成熟，可支持重组细胞发育成胚胎
13. 将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合形成抗体-药物偶联物（ADC），可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列叙述错误的是（ ）
A. 制备单克隆抗体应用的技术主要是动物细胞培养和动物细胞融合
B. 制备单克隆抗体时，至少需经过两次筛选才能得到分泌所需抗体的杂交瘤细胞
C. ADC与肿瘤细胞表面的抗原结合后，以胞吞的方式进入肿瘤细胞
D. ADC中的单克隆抗体起导向作用，能特异性结合并杀伤肿瘤细胞
14. 有部分人体内缺乏乳糖酶，饮用鲜牛奶后会导致肠胃不适、消化不良。“低乳糖奶牛”的诞生有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。下图是“低乳糖奶牛”的培育过程，相关叙述正确的是（ ）
A. 犊牛的性状和黑白花奶牛的性状完全一致
B. 去核的卵母细胞可用去核的乳腺细胞代替
C. 犊牛的出生体现了动物细胞的全能性
D. 体细胞核移植技术可用于保护濒危动物
15. 临床研究证明，全胚冷冻后的单囊胚移植能显著提高胚胎着床率、妊娠率及活产率，以及单胎新生儿的出生体重。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 囊胚的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织
B. 选择囊胚期进行胚胎移植的原因是该时期细胞还未分化
C. 通过胚胎分割技术可以获得基因型相同的双胞胎
D. 冷冻后再开展胚胎移植可能消除胚胎新鲜时移植存在的不利于胚胎着床的因素
16. 下表所示为常用的限制性内切核酸酶（限制酶）及其识别序列和切割位点。下列说法错误的是（ ）
A. 限制酶的作用底物都是双链DNA，都能切开磷酸二酯键
B. BglⅡ和MbI两种限制酶切后可形成相同的黏性末端
C. SmaI切DNA后成的末端可用Ecli DNA连接酶连接
D. 一种限制酶可能识别多种核苷酸序列
17. 天然胰岛素制剂容易发生聚合，会在一定程度上延缓药效。科学家通过蛋白质工程将胰岛素B链28位脯氨酸替换为天冬氨酸或者将它与B29位的赖氨酸交换位置，从而有效抑制了胰岛素的聚合，研发出速效胰岛素。下列说法错误的是（ ）
A. 设计速效胰岛素首先要从避免胰岛素形成聚合体这一预期功能开始
B. 该过程通过改造胰岛素基因实现了对相应氨基酸序列的改造
C. 速效胰岛素受体细胞中合成时遵循中心法则
D. 该过程若使用大肠杆菌作为受体细胞，可直接生产有生物活性的胰岛素
18. 某研究小组利用鸡血细胞进行”DNA的粗提取与鉴定”实验，下列叙述错误的是（ ）
A. 可用蒸馏水使细胞吸水涨破，释放DNA
B. 可用95%的冷酒精溶解过滤后留在纱布上的DNA
C. 使用玻璃棒时应沿一个方向轻缓搅拌，便于DNA的析出并保持结构完整
D. 将丝状物加入2ml/L的NaCl溶液，再加入二苯胺试剂，沸水浴冷却后出现蓝色
19. RT-PCR是将mRNA逆转录获得cDNA的方法和cDNA聚合酶链式反应相结合的技术。某兴趣小组为该过程设计了相关引物并进行实验。下列说法错误的是（ ）
A. PCR过程主要涉及的酶是耐高温的DNA聚合酶，反应缓冲溶液中一般要添加Mg2+
B. 一般情况下，引物A和B的长度越长C和G比例越高，则PCR循环步骤中的复性温度设定就越低
C. PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，其中的DNA分子可用核酸染料染色
D. 实验后发现几乎不能得到扩增产物，原因可能是引物B自身出现了局部碱基互补配对而失效
20. 研究人员利用下图所示的表达载体构建了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组表达载体。下列说法正确的是（ ）
A. 重组表达载体导入受体细胞这一过程没有涉及到碱基互补配对
B. 图中的表达载体具有多个限制酶切点，以便目的基因的表达
C. 复制原点的作用是保证标记基因在宿主细胞中复制并稳定保存
D. 甲、乙重组表达载体能在宿主细胞中表达目的基因产物
二、不定项选择题(本题共5 小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。)
21. 抗生素I-IV均可治疗黄色葡萄球菌（Sau）引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片置于Sau均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 配制培养基时应将培养基的pH调至微酸性
B. 测量菌落和抑菌圈直径时应直接在皿盖上测量
C. 抗生素IV治疗Sau感染引起的肺炎效果最好
D. 抑菌圈中出现的菌落可能是Sau发生了基因突变
22. 植物细胞工程技术包括植物组织培养技术和体细胞杂交技术，在快速繁殖、农作物育种及提高农作物产量等方面具有广泛应用。下列有关说法错误是（ ）
A. 可以利用植物组织培养脱分化所得到的胚状体，进而发育成完整植株
B. 由茎尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生基因突变和基因重组
C. 进行植物体细胞杂交的实验，不必考虑亲本细胞的生殖隔离问题
D. 利用灭活的病毒能诱导植物原生质体融合的原理是细胞膜具有流动性
23. 繁育“试管动物”时，合成培养液与共同培养体系被广泛用于早期胚胎的体外培养。共同培养体系是将受精卵和体细胞在体外共同培养，利用体细胞分泌的未知的分泌物来促进胚胎的发育。培养时，将体细胞处理后铺成单层细胞，作为胚胎发育的滋养层。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 采集到卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理
B. 合成培养液中通常要加入血清，还要定期更换
C. 共同培养体系能模拟体内环境，使细胞间能沟通信息，相互支撑
D. 代孕母畜可以是同种的或不同物种的，需对供体和受体进行同期发情处理
24. 下图是用CRISPR/Cas9系统对某生物B基因进行基因编辑的过程，CRISPR/Cas9系统主要由向导RNA(sgRNA)和Cas9蛋白两部分组成，SgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，Cas9蛋白的作用类似于限制酶，其机制如图所示，图中的Ⅱ片段被去除。下列说法正确的是（ ）
A. SgRNA通过与DNA分子双链互补配对引导Cas9蛋白到位
B. 图中sgRNA1的碱基序列和SgRNA2的碱基序列互补
C. 特异性识别DNA序列并切割特定位点功能的分子是sgRNA
D. 一般sgRNA序列越短，越容易因错误结合而出现“脱靶”现象
25. 用Xhl和Sall两种限制酶分别处理同一DNA片段(限制酶在对应切点一定能切开)，酶切位点及酶切产物分离结果如图。下列说法正确的是（ ）
A. 图2中泳道①中可能是用SalI处理得到的酶切产物
B. 电泳过程中，带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动
C. DNA分子片段长度越大，在琼脂糖中的移动速率越快
D. 用Xhl和Sall同时处理该DNA，电泳后得到6种产物
三、简答题(本题共5个小题，共计45分)
26. 不同动物乳汁的成分虽各有差异，但都含有丰富的营养成分，是微生物生长繁殖的良好培养基。乳制品一旦被微生物污染，会腐败变质而失去食用价值，甚至引起食物中毒。
（1）鲜乳汁常用巴氏消毒法处理，其优点是_______。若要制成发酵乳，需要对鲜乳汁进行灭菌后再接种乳酸菌发酵，此处的灭菌是指______。
（2）根据食品安全的有关标准，每毫升合格的牛奶中细菌总数不超过50000个。若要测定牛奶中微生物数量，可利用特定的_____在显微镜下直接计数，但该方法统计的结果往往比实际的活菌数要偏_____,原因是_____。
27. 新冠病毒外壳中的S蛋白具有很强的抗原性，S蛋白与人细胞膜上 ACE2受体结合后入侵人体细胞，导致人体患肺炎。单克隆抗体在新冠肺炎的短期预防与早期治疗上有较大的应用价值。
（1）单克隆抗体诊断某人是否感染新冠病毒时，能更准确的原因是_____。
（2）医学上常用双抗体夹心法定量检测S蛋白，基本原理如图1.固相抗体和S蛋白的结合部位应与酶标抗体和S蛋白的结合部位______(填“相同”或“不同”)。酶标抗体的作用是_________________________。
（3）利用小鼠制备的单克隆抗体，在给人体使用时，可能会被人体免疫细胞清除，影响抗体的作用效果。抗体的结构如图2所示，下列技术可以解决此问题：从杂交瘤细胞中提取编码鼠源单克隆抗体_____(填“5区”或“6区”)序列的基因，与从人体中获取的编码抗体_____(填“5区”或“6区”)序列的基因，进行拼接，然后导入骨髓瘤细胞中，进行培养获取新的抗体，这过程属于____工程。
（4）要获得含人的抗体基因片段的转基因小鼠，需要运用____技术将目的基因导入小鼠的____细胞中。
28. 下图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列有关问题。
（1）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别为生殖方式不同，前者是___________，后者是___________。
（2）②过程常用促性腺激素处理，目的是使B牛___________，从B牛体内获得的卵母细胞需要培养到___________（时期）。
（3）A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵子结合，完成受精作用，这个过程叫___________。卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到___________。
（4）生产上常用___________期的胚胎进行胚胎移植。若希望同时获得多个基因相同的家畜个体，可以使用___________技术，操作时要注意___________。
29. 宫颈癌是一种由HPV病毒（遗传物质是DNA）引发的癌症，至今已鉴定出200多种HPV类型。尤其是HPV16、HPV18，其检出率在宫颈癌中达到99.7%。2023年1月，国家卫生健康委等十个部门联合发布了《加速消除宫颈癌行动计划（2023—2030年）》，提出了“积极推动HPV疫苗接种”的要求。九价HPV疫苗在中国获批用于9-45岁女性，但却一针难求。将HPV16和HPV18两种病毒的衣壳蛋白基因（目的基因）与质粒连接，导入大肠杆菌表达后，就获得了疫苗的有效成分。
（1）在构建基因表达载体时要将HPV16和HPV18两种病毒的衣壳蛋白基因插入________和______之间。
（2）构建基因表达载体的目的是________。
（3）进行基因表达载体构建有两个方案：
方案一：只用EcRI酶同时切割质粒和含目的基因的DNA片段；
方案二：使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时切割质粒和含目的基因的DNA片段。
你认为哪个方案更好？_______。原因是_______。
（4）基因表达载体导入大肠杆菌前，需用________处理大肠杆菌，目的是______。
30. 哺乳动物体内一定含量的w—3多不饱和脂肪酸(LCPUFA)可以起到预防心血管疾病的作用，但LCPUFA在大多数动物体内不能合成，只能从食物中摄取。科研人员从秀丽隐杆线虫中获得LCPUFA 合成酶基因fat—1(1229bp), 培育转 fat-1 基因家兔, 其部分流程如图一所示。
（1）PCR扩增过程中，经过5轮循环后，得到的产物中只含一种引物的DNA分子占比为____。
（2）在构建PEBf质粒时，为确保fat-1 基因按正确方向插入，需要双酶切，还需对fat-1 基因的引物进行相应设计。已知 fat-1基因转录的模板链为a链，与b链结合的引物5 端添加了限制酶识别序列GAATTC 则另一引物5’端需添加的限制酶识别序列为 _________。
（3）转染是将外源分子如DNA、RNA 等导入真核细胞的技术。为了检验图一家兔成纤维细胞是否转染成功，科研人员分别提取培养液中各细胞的DNA，利用fat-1 基因引物进行PCR 扩增后电泳，部分结果如图二所示。据图分析，1组是_____细胞PCR 产物；2组是_____细胞 PCR 产物。(填“未成功转染”或 “成功转染”)
（4）检测转基因家兔细胞中是否含有LCPUFA 合成酶，可采用____技术。如果 fat-1基因已正确插入PEB质粒且成功转染，但在转基因家兔细胞中没有检测到LCPUFA 合成酶，从构建基因表达载体的角度分析，可能的原因是________________。限制酶名称
识别序列和切割位点
限制酶名称
识别序列和切割位点
注：Y=C或T，R=A或C
BglII
A↓GATCT
KpnI
CCTAC↓C
EcRI
G↓AATTC
MbI
↓GATC
HindI
GTY↓RAC
SmaI
CCC↓GGG
一、单选题(本题共20个小题，每题2分，共40分。每题只有一个正确的选项。)
1. 下列有关传统发酵技术的描述，错误的是（ ）
A. 传统发酵技术所用的菌种一般是原料中天然存在的微生物
B. 传统发酵技术是微生物在有氧或无氧条件下物质的氧化分解
C. 传统发酵技术的目的是获得发酵产品或更多的微生物
D. 果酒、果醋、泡菜、酱油等是传统发酵技术的产物
2. 啤酒是以大麦为主要原料，经酿酒酵母发酵制得。啤酒的工业化生产分为主发酵和后发酵两个阶段。精酿啤酒的制作工艺与普通啤酒不同，不添加食品添加剂，不进行过滤消毒处理。下列叙述正确的是（ ）
A. 利用大麦作原料时，淀粉是酵母菌的直接碳源
B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成
C. 后发酵阶段会因pH或酒精含量升高而终止发酵
D. 精酿啤酒不进行过滤和消毒，故发酵过程不需要在无菌条件下进行
3. 有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养，下图所示为操作流程。有关叙述错误的是（ ）
A. 在称取土壤、稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作
B. 用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等需要进行灭菌处理
C. 步骤③中，将温度约50℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养
D. 步骤④中，划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
4. 由于发酵工程生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉等，在许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程在食品工业上应用的叙述，错误的是（ ）
A. 利用黑曲霉发酵制得的柠檬酸，广泛用于调节食品的酸度
B. 利用谷氨酸棒状杆菌发酵得到谷氨酸，经一系列处理制成味精
C. 利用乳酸菌在青贮饲料中乳酸发酵产生有机酸而实现饲料保鲜
D. 利用发酵工程从微生物细胞中提取单细胞蛋白制成微生物饲料
5. 在反刍动物瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能以尿素为唯一氮源。某小组计划从牛瘤胃中分离出该类微生物进行研究，如图为实验所用的培养基配方。下列说法正确的是（ ）
A. 该培养基为固体培养基，倒平板操作后，进行高压蒸汽灭菌
B. 该培养基上只有尿素分解菌能够存活，因而长出的菌落无须菌种鉴定
C. 接种针可以通过灼烧灭菌，灼烧时使用酒精灯的内焰效果更好
D. 尿素分解菌能够使培养基的pH升高，可据此初步确定所需菌种
6. 草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 方法一中，甲常选用茎尖，原因是其几乎未感染病毒
B. A、C两个过程属于植物组织培养，都经过脱分化和再分化
C. 通常采用70%的酒精和5%次氯酸钠溶液对甲进行消毒处理
D. 判断两种选育方法的效果都需要通过病毒接种实验
7. 随着植物花药培养以及植物体细胞杂交技术等得以确立和发展，标志着植物细胞工程技术进入了高速发展的阶段。花粉原生质体具备单倍体的优点，可直接与体细胞原生质体融合，实现配子与体细胞杂交。下列叙述错误的是（ ）
A. 花粉可培育成单倍体植株，是细胞全能性的体现
B 用低渗溶液配制纤维素酶和果胶酶溶液制备原生质体
C. 利用植物组织培养技术将融合细胞培育成完整植株
D. 配子与体细胞杂交能缩短三倍体无子果实培育年限
8. 铁皮石斛是非常好的药材，但其自然繁殖力极弱，生长缓慢，由于人们的掠夺式采挖，资源已接近枯竭，植物组织培养技术为铁皮石斛的繁殖提供了新思路。下列说法正确的是（ ）
A. 植物组织培养得到试管苗的过程中只需要更换一次培养基
B. 诱导愈伤组织形成时需要每日给予适当时间的光照
C. 降低培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生根
D. 用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异
9. 实时荧光 RT-PCR用于RNA病毒的核酸检测，其原理是：在PCR性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光，如图所示。下列有关叙述正确的有（ ）
A. 与细胞内DNA 制相比，该技术用的DNA聚合酶最适温度较高
B. 通过温度变化的控制为变性、复性和延伸等过程提供能量
C. 该过程中消耗引物量与发出的荧光强度之间呈负相关
D. 与抗体检测相比，核酸检测能更早发现患者并及时治疗
10. 大多数哺乳动物的晚期桑葚胚分割后，分离的卵裂球仍具有调整发育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而发育至囊胚。该调节能力随发育进程逐渐减弱甚至消失。下列说法错误的是（ ）
A. 胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴
B. 卵裂过程中所需营养主要来源于培养液
C. 桑葚胚及囊胚的内细胞团细胞具有发育的全能性
D. 囊胚期的细胞出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变
11. 胚胎干细胞存在于哺乳动物的早期胚胎中，具有自我更新能力，在科学和医学领域具有极高的研究价值。早期胚胎干细胞的发育和自我更新受多个基因调控（如图）。下列叙述错误的是（ ）
A. 早期胚胎干细胞可分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞
B. Nang基因突变可能使胚胎干细胞自我更新受阻
C. 促进Stat3和Oct3/4的表达会促进胚胎干细胞向滋养层分化
D. 将干细胞用于疾病的临床治疗可能存在导致肿瘤发生的风险
12. 科学家将大熊猫的体细胞和兔子的去核卵母细胞构建成重组细胞，使重组细胞成功发育为囊胚，标志着异种核质相容问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”。下列说法错误的是（ ）
A. 获取卵母细胞前，用含促性腺激素的饲料饲喂兔子可使其超数排卵
B. 可通过梯度离心法去除兔子卵母细胞中的细胞核
C. 可将大熊猫的体细胞直接注入兔子的去核卵母细胞
D. 选用的去核卵母细胞中的细胞质已成熟，可支持重组细胞发育成胚胎
13. 将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合形成抗体-药物偶联物（ADC），可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列叙述错误的是（ ）
A. 制备单克隆抗体应用的技术主要是动物细胞培养和动物细胞融合
B. 制备单克隆抗体时，至少需经过两次筛选才能得到分泌所需抗体的杂交瘤细胞
C. ADC与肿瘤细胞表面的抗原结合后，以胞吞的方式进入肿瘤细胞
D. ADC中的单克隆抗体起导向作用，能特异性结合并杀伤肿瘤细胞
14. 有部分人体内缺乏乳糖酶，饮用鲜牛奶后会导致肠胃不适、消化不良。“低乳糖奶牛”的诞生有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。下图是“低乳糖奶牛”的培育过程，相关叙述正确的是（ ）
A. 犊牛的性状和黑白花奶牛的性状完全一致
B. 去核的卵母细胞可用去核的乳腺细胞代替
C. 犊牛的出生体现了动物细胞的全能性
D. 体细胞核移植技术可用于保护濒危动物
15. 临床研究证明，全胚冷冻后的单囊胚移植能显著提高胚胎着床率、妊娠率及活产率，以及单胎新生儿的出生体重。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 囊胚的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织
B. 选择囊胚期进行胚胎移植的原因是该时期细胞还未分化
C. 通过胚胎分割技术可以获得基因型相同的双胞胎
D. 冷冻后再开展胚胎移植可能消除胚胎新鲜时移植存在的不利于胚胎着床的因素
16. 下表所示为常用的限制性内切核酸酶（限制酶）及其识别序列和切割位点。下列说法错误的是（ ）
A. 限制酶的作用底物都是双链DNA，都能切开磷酸二酯键
B. BglⅡ和MbI两种限制酶切后可形成相同的黏性末端
C. SmaI切DNA后成的末端可用Ecli DNA连接酶连接
D. 一种限制酶可能识别多种核苷酸序列
17. 天然胰岛素制剂容易发生聚合，会在一定程度上延缓药效。科学家通过蛋白质工程将胰岛素B链28位脯氨酸替换为天冬氨酸或者将它与B29位的赖氨酸交换位置，从而有效抑制了胰岛素的聚合，研发出速效胰岛素。下列说法错误的是（ ）
A. 设计速效胰岛素首先要从避免胰岛素形成聚合体这一预期功能开始
B. 该过程通过改造胰岛素基因实现了对相应氨基酸序列的改造
C. 速效胰岛素受体细胞中合成时遵循中心法则
D. 该过程若使用大肠杆菌作为受体细胞，可直接生产有生物活性的胰岛素
18. 某研究小组利用鸡血细胞进行”DNA的粗提取与鉴定”实验，下列叙述错误的是（ ）
A. 可用蒸馏水使细胞吸水涨破，释放DNA
B. 可用95%的冷酒精溶解过滤后留在纱布上的DNA
C. 使用玻璃棒时应沿一个方向轻缓搅拌，便于DNA的析出并保持结构完整
D. 将丝状物加入2ml/L的NaCl溶液，再加入二苯胺试剂，沸水浴冷却后出现蓝色
19. RT-PCR是将mRNA逆转录获得cDNA的方法和cDNA聚合酶链式反应相结合的技术。某兴趣小组为该过程设计了相关引物并进行实验。下列说法错误的是（ ）
A. PCR过程主要涉及的酶是耐高温的DNA聚合酶，反应缓冲溶液中一般要添加Mg2+
B. 一般情况下，引物A和B的长度越长C和G比例越高，则PCR循环步骤中的复性温度设定就越低
C. PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，其中的DNA分子可用核酸染料染色
D. 实验后发现几乎不能得到扩增产物，原因可能是引物B自身出现了局部碱基互补配对而失效
20. 研究人员利用下图所示的表达载体构建了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组表达载体。下列说法正确的是（ ）
A. 重组表达载体导入受体细胞这一过程没有涉及到碱基互补配对
B. 图中的表达载体具有多个限制酶切点，以便目的基因的表达
C. 复制原点的作用是保证标记基因在宿主细胞中复制并稳定保存
D. 甲、乙重组表达载体能在宿主细胞中表达目的基因产物
二、不定项选择题(本题共5 小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。)
21. 抗生素I-IV均可治疗黄色葡萄球菌（Sau）引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片置于Sau均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 配制培养基时应将培养基的pH调至微酸性
B. 测量菌落和抑菌圈直径时应直接在皿盖上测量
C. 抗生素IV治疗Sau感染引起的肺炎效果最好
D. 抑菌圈中出现的菌落可能是Sau发生了基因突变
22. 植物细胞工程技术包括植物组织培养技术和体细胞杂交技术，在快速繁殖、农作物育种及提高农作物产量等方面具有广泛应用。下列有关说法错误是（ ）
A. 可以利用植物组织培养脱分化所得到的胚状体，进而发育成完整植株
B. 由茎尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生基因突变和基因重组
C. 进行植物体细胞杂交的实验，不必考虑亲本细胞的生殖隔离问题
D. 利用灭活的病毒能诱导植物原生质体融合的原理是细胞膜具有流动性
23. 繁育“试管动物”时，合成培养液与共同培养体系被广泛用于早期胚胎的体外培养。共同培养体系是将受精卵和体细胞在体外共同培养，利用体细胞分泌的未知的分泌物来促进胚胎的发育。培养时，将体细胞处理后铺成单层细胞，作为胚胎发育的滋养层。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 采集到卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理
B. 合成培养液中通常要加入血清，还要定期更换
C. 共同培养体系能模拟体内环境，使细胞间能沟通信息，相互支撑
D. 代孕母畜可以是同种的或不同物种的，需对供体和受体进行同期发情处理
24. 下图是用CRISPR/Cas9系统对某生物B基因进行基因编辑的过程，CRISPR/Cas9系统主要由向导RNA(sgRNA)和Cas9蛋白两部分组成，SgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，Cas9蛋白的作用类似于限制酶，其机制如图所示，图中的Ⅱ片段被去除。下列说法正确的是（ ）
A. SgRNA通过与DNA分子双链互补配对引导Cas9蛋白到位
B. 图中sgRNA1的碱基序列和SgRNA2的碱基序列互补
C. 特异性识别DNA序列并切割特定位点功能的分子是sgRNA
D. 一般sgRNA序列越短，越容易因错误结合而出现“脱靶”现象
25. 用Xhl和Sall两种限制酶分别处理同一DNA片段(限制酶在对应切点一定能切开)，酶切位点及酶切产物分离结果如图。下列说法正确的是（ ）
A. 图2中泳道①中可能是用SalI处理得到的酶切产物
B. 电泳过程中，带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动
C. DNA分子片段长度越大，在琼脂糖中的移动速率越快
D. 用Xhl和Sall同时处理该DNA，电泳后得到6种产物
三、简答题(本题共5个小题，共计45分)
26. 不同动物乳汁的成分虽各有差异，但都含有丰富的营养成分，是微生物生长繁殖的良好培养基。乳制品一旦被微生物污染，会腐败变质而失去食用价值，甚至引起食物中毒。
（1）鲜乳汁常用巴氏消毒法处理，其优点是_______。若要制成发酵乳，需要对鲜乳汁进行灭菌后再接种乳酸菌发酵，此处的灭菌是指______。
（2）根据食品安全的有关标准，每毫升合格的牛奶中细菌总数不超过50000个。若要测定牛奶中微生物数量，可利用特定的_____在显微镜下直接计数，但该方法统计的结果往往比实际的活菌数要偏_____,原因是_____。
27. 新冠病毒外壳中的S蛋白具有很强的抗原性，S蛋白与人细胞膜上 ACE2受体结合后入侵人体细胞，导致人体患肺炎。单克隆抗体在新冠肺炎的短期预防与早期治疗上有较大的应用价值。
（1）单克隆抗体诊断某人是否感染新冠病毒时，能更准确的原因是_____。
（2）医学上常用双抗体夹心法定量检测S蛋白，基本原理如图1.固相抗体和S蛋白的结合部位应与酶标抗体和S蛋白的结合部位______(填“相同”或“不同”)。酶标抗体的作用是_________________________。
（3）利用小鼠制备的单克隆抗体，在给人体使用时，可能会被人体免疫细胞清除，影响抗体的作用效果。抗体的结构如图2所示，下列技术可以解决此问题：从杂交瘤细胞中提取编码鼠源单克隆抗体_____(填“5区”或“6区”)序列的基因，与从人体中获取的编码抗体_____(填“5区”或“6区”)序列的基因，进行拼接，然后导入骨髓瘤细胞中，进行培养获取新的抗体，这过程属于____工程。
（4）要获得含人的抗体基因片段的转基因小鼠，需要运用____技术将目的基因导入小鼠的____细胞中。
28. 下图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列有关问题。
（1）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别为生殖方式不同，前者是___________，后者是___________。
（2）②过程常用促性腺激素处理，目的是使B牛___________，从B牛体内获得的卵母细胞需要培养到___________（时期）。
（3）A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵子结合，完成受精作用，这个过程叫___________。卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到___________。
（4）生产上常用___________期的胚胎进行胚胎移植。若希望同时获得多个基因相同的家畜个体，可以使用___________技术，操作时要注意___________。
29. 宫颈癌是一种由HPV病毒（遗传物质是DNA）引发的癌症，至今已鉴定出200多种HPV类型。尤其是HPV16、HPV18，其检出率在宫颈癌中达到99.7%。2023年1月，国家卫生健康委等十个部门联合发布了《加速消除宫颈癌行动计划（2023—2030年）》，提出了“积极推动HPV疫苗接种”的要求。九价HPV疫苗在中国获批用于9-45岁女性，但却一针难求。将HPV16和HPV18两种病毒的衣壳蛋白基因（目的基因）与质粒连接，导入大肠杆菌表达后，就获得了疫苗的有效成分。
（1）在构建基因表达载体时要将HPV16和HPV18两种病毒的衣壳蛋白基因插入________和______之间。
（2）构建基因表达载体的目的是________。
（3）进行基因表达载体构建有两个方案：
方案一：只用EcRI酶同时切割质粒和含目的基因的DNA片段；
方案二：使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时切割质粒和含目的基因的DNA片段。
你认为哪个方案更好？_______。原因是_______。
（4）基因表达载体导入大肠杆菌前，需用________处理大肠杆菌，目的是______。
30. 哺乳动物体内一定含量的w—3多不饱和脂肪酸(LCPUFA)可以起到预防心血管疾病的作用，但LCPUFA在大多数动物体内不能合成，只能从食物中摄取。科研人员从秀丽隐杆线虫中获得LCPUFA 合成酶基因fat—1(1229bp), 培育转 fat-1 基因家兔, 其部分流程如图一所示。
（1）PCR扩增过程中，经过5轮循环后，得到的产物中只含一种引物的DNA分子占比为____。
（2）在构建PEBf质粒时，为确保fat-1 基因按正确方向插入，需要双酶切，还需对fat-1 基因的引物进行相应设计。已知 fat-1基因转录的模板链为a链，与b链结合的引物5 端添加了限制酶识别序列GAATTC 则另一引物5’端需添加的限制酶识别序列为 _________。
（3）转染是将外源分子如DNA、RNA 等导入真核细胞的技术。为了检验图一家兔成纤维细胞是否转染成功，科研人员分别提取培养液中各细胞的DNA，利用fat-1 基因引物进行PCR 扩增后电泳，部分结果如图二所示。据图分析，1组是_____细胞PCR 产物；2组是_____细胞 PCR 产物。(填“未成功转染”或 “成功转染”)
（4）检测转基因家兔细胞中是否含有LCPUFA 合成酶，可采用____技术。如果 fat-1基因已正确插入PEB质粒且成功转染，但在转基因家兔细胞中没有检测到LCPUFA 合成酶，从构建基因表达载体的角度分析，可能的原因是________________。限制酶名称
识别序列和切割位点
限制酶名称
识别序列和切割位点
注：Y=C或T，R=A或C
BglII
A↓GATCT
KpnI
CCTAC↓C
EcRI
G↓AATTC
MbI
↓GATC
HindI
GTY↓RAC
SmaI
CCC↓GGG
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