精讲82 DNA的粗提取与DNA片段的扩增和电泳鉴定-【备战一轮】最新高考生物一轮复习名师精讲课件
展开1、落实考点。一轮复习时要在熟读课本、系统掌握基础知识、基本概念和基本原理后,要找出重点和疑点;通过结合复习资料,筛选出难点和考点,有针对地重点复习。这就需要在掌握重点知识的同时,要善于进行知识迁移和运用,提高分析归纳的能力。2、注重理论联系实际。生物的考试并不仅仅是考概念,学会知识的迁移非常重要,并要灵活运用课本上的知识。不过特别强调了从图表、图形提取信息的能力。历年高考试题,图表题都占有比较大的比例。那些图表题虽不是教材中的原图,但它源于教材而又高于教材,是对教材内容和图表的变换、深化、拓展,使之成了考查学生读图能力、综合分析能力、图文转换能力的有效途径。3、一轮复习基础知识的同时,还要重点“攻坚”,突出对重点和难点知识的理解和掌握。这部分知识通常都是学生难于理解的内容,做题时容易出错的地方。分析近几年的高考生物试题,重点其实就是可拉开距离的重要知识点。 4、学而不思则罔,思而不学则殆。这一点对高三生物一轮复习很重要。尤其是对于错题。错题整理不是把错题抄一遍。也不是所有的错题都需要整理。
【新教材•选择性必修三】2023-82【DNA的粗提取与鉴定和DNA片段的扩增与电泳鉴定】
Teaching Prcess
2.课堂教 学内容
DNA片段的扩增、鉴定
(1)基本原理 ①原理:利用DNA、RNA、蛋白质和脂质等在 方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 ②DNA的性质:DNA不溶于 ,但某些蛋白质溶于 ;DNA能溶于2 ml·L-1的 。 ③DNA的鉴定:在一定温度下,DNA遇 试剂会呈现蓝色。
一.DNA的粗提取与鉴定和DNA片段的扩增与电泳鉴定
1.DNA的粗提取与鉴定
加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要 ,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
(1)实验基础 ①PCR原理:利用了 原理,通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合。 ②电泳:DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这些带电分子会向着与它所带电荷 的电极移动,这个过程就是电泳。 ③PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的 等有关。
2.DNA片段的扩增及电泳鉴定
(2)PCR实验操作步骤
(3)DNA的电泳鉴定
①为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行 处理。②每吸取一种试剂后,移液器上的 都必须更换。③电泳时,DNA分子的相对分子质量越大,受到的阻力越 ,迁移速率越 ,DNA分子的相对分子质量越小,受到的阻力越 ,迁移速率越 。
例1.下列利用洋葱进行“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是( )A.将研磨液加入切碎的洋葱,充分研磨后过滤,要弃去上清液B.采用体积分数为95%酒精溶液析出DNA的方法可去除部分杂质C.用塑料离心管是因为用玻璃离心管容易破损D.将白色丝状物溶解在NaCl溶液中,加入二苯胺试剂后振荡,观察颜色 变化
例2.下图是“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图。下列相关叙述不正确的是( )A.选用植物细胞提取DNA时需先 研磨破碎细胞B.图2所示实验操作中有一处明 显错误,可能导致试管2中蓝 色变化不明显C.图1所示操作的原理是DNA不 能溶于酒精,而蛋白质等杂质能溶于酒精D.图2试管1的作用是证明物质的量浓度为2 ml/L的NaCl溶液遇二苯胺 试剂出现蓝色
例3.利用PCR可以在体外进行DNA片段的扩增,下列有关“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的相关叙述,错误的是( )A.PCR实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高 压蒸汽灭菌处理B.PCR利用了DNA的热变性原理C.PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后,迅速融化D.在向微量离心管中添加反应组分时,每吸取一种试剂后,移液器上的 枪头都必须更换
例4.下列有关电泳的叙述,不正确的是( )A.电泳是指带电分子在电场的作用下发生迁移的过程B.待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率C.进行电泳时,带电分子会向着与其所带电荷相同的电极移动D.PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定
例5.利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是( )A.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基 因的全部序列B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基 互补配对而造成引物自连C.复性温度过高可能导致PCR反应得不到 任何扩增产物D.第四轮循环产物中同时含有引物A和引 物B的DNA片段所占的比例为15/16
例6.(2022·扬州市高三期中)实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是( )
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