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    浙江省台州十校联盟2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试卷(含答案)
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    浙江省台州十校联盟2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试卷(含答案)

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    这是一份浙江省台州十校联盟2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试卷(含答案),共18页。试卷主要包含了单选题,填空题,读图填空题,实验探究题等内容,欢迎下载使用。


    一、单选题
    1.人们将苏云金杆菌中的抗虫基因导入棉花细胞中成功培育出抗虫棉。这个过程中利用的主要原理是( )
    A.基因突变B.自然选择C.基因重组D.染色体变异
    2.用于动物细胞培养的组织和细胞,大多来自胚胎和出生不久的幼龄动物,其主要原因是这样的组织细胞( )
    A.容易产生各种变异B.具有更强的分裂能力
    C.取材十分方便D.可进行基因的选择性表达
    3.下列不属于微生物生长所需营养物质的是( )
    A.碳源B.琼脂C.氮源D.水
    4.某良种公司引进了纯种荷斯坦奶牛,并利用胚胎工程技术止引进的良种奶牛快速、大量地繁殖,此过程对供体和受体进行的操作,不包括( )
    A.胚胎移植B.体外受精C.超数排卵D.免疫检查
    5.对人参皂苷干粉工厂化生产,下列哪种技术是必需的( )
    A.诱变育种B.作物脱毒C.植物细胞培养D.花药离体培养
    6.基因工程需要特定的工具,下列不属于基因工程基本工具的是( )
    A.限制酶B.DNA连接酶C.质粒D.解旋酶
    7.下列关于植物原生质体特点的叙述中,错误的是( )
    A.容易摄取外来的遗传物质B.有利于进行细胞融合,形成杂交细胞
    C.与完整细胞一样具有全能性D.不能再生细胞壁
    8.发酵工程可实现发酵产品的大规模生产,下图为发酵工程的基本环节,相关叙述正确的是( )
    A.①、②可以是诱变育种或基因工程育种
    B.③是发酵工程的中心环节
    C.产物浓度的检测必须在发酵结束后进行
    D.发酵条件为室温和近中性的pH等
    9.下列有关动物细胞培养的表述正确的是( )
    A.培养环境中需要O2,不需要CO2
    B.细胞要经过脱分化形成愈伤组织
    C.培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
    D.培养瓶中的细胞需定期用胰蛋白酶处理,分瓶后才能继续增殖
    10.人的糖蛋白必须经过内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术,可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( )
    A.大肠杆菌B.酵母菌C.T4噬菌体D.质粒DNA
    11.图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作,乙是平板划线法操作结果。下列叙述中,错误的是( )
    A.甲图中的涂布前要将沾有少量酒精的涂布器引燃,冷却后才能涂布菌液
    B.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养
    C.乙中培养皿中所得的菌落不都符合要求
    D.乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端
    12.下列关于培养基的叙述,正确的是( )
    A.在培养霉菌时,需将培养基调至中性或弱碱性
    B.倒平板时,应将皿盖放在一边,以免培养基溅到皿盖上
    C.制作培养基时,灭菌后还需调pH
    D.在培养乳酸菌时,要给乳酸菌创造无氧环境
    13.如图是体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图,有关叙述错误的是( )
    A.后代丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定
    B.进行胚胎移植时,代孕母体应用免疫抑制剂处理,避免发生免疫排斥反应
    C.过程②常使用显微操作对卵母细胞进行去核处理
    D.过程③将重组细胞可以培养至囊胚期移植
    14.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,需要的条件是( )
    ①无菌环境
    ②一定浓度的植物激素
    ③适宜的温度
    ④充足的光照
    ⑤充足的养料
    A.①③④⑤B.②④⑤C.①②③D.①②③⑤
    15.下图是利用三倍体香蕉的茎尖培养脱毒香蕉植株的过程示意图。下列叙述正确的是( )
    A.过程①~③中发生了有丝分裂和减数分裂
    B.X是愈伤组织
    C.过程②为脱分化
    D.过程①没有进行基因的选择性表达
    16.普洱茶分为生普和熟普,其中熟普是以云南大叶种晒青茶为原料,经后发酵(人为加水提温,加速茶叶熟化去除生茶苦涩以达到入口纯和汤色红浓之独特品性)加工形成的。熟普的汤色红浓明亮,香气独特陈香,滋味醇厚回甘,叶底红褐均匀。熟普的香味会随着陈化的时间而变得越来越柔顺、浓郁。下列相关叙述错误的是( )
    A.人为加水提温可以促进微生物繁殖,进而缩短原料发酵的时间
    B.熟普发酵过程中环境条件变化会影响微生物的生长繁殖和代谢
    C.熟普发酵一段时间后要进行灭菌并密封,有利于茶的长期保存
    D.饮用熟普后回甘,可能是因为发酵后茶叶中单糖、二糖含量增加
    17.下列有关人工种子的叙述,错误的是( )
    A.人工种皮中通常需要加入适量的抗生素
    B.胚状体是由未分化的、具有分裂能力的细胞构成的
    C.人工胚乳可以为人工种子提供营养
    D.通过植物组织培技术获得
    18.λ噬菌体的线性双链DNA两端各有一段单链序列。这种噬菌体在侵染大肠杆菌后其DNA会自连环化(如图),该线性分子两端能够相连的主要原因是( )
    A.单链序列脱氧核苷酸数量相等B.分子骨架同为脱氧核糖与磷酸
    C.单链序列的碱基能够互补配对D.自连环化后两条单链方向相同
    19.以下关于活动“PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定”的叙述,错误的是( )
    A.4种脱氧核苷三磷酸为PCR扩增提供原料和能量
    B.上(载)样缓冲液中的电泳指示剂可使核酸显色
    C.带有负电荷的核酸需要加在电泳槽的负极
    D.不同大小的核酸迁移速率不同,从而实现其分离
    20.关于DNA粗提取及鉴定的操作实验,下列叙述正确的是( )
    A.将猪的成熟红细胞置于清水中,红细胞涨破后DNA会释放出来
    B.提取过程中加入EDTA,目的是抑制DNA酶活性,防止核DNA被酶解
    C.提取DNA时加入酒精,目的是使不溶于酒精的蛋白质等物质析出
    D.将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后,溶液即变为蓝色
    阅读下列材料,完成下面小题。
    酵母菌是一种单细胞真菌,能将糖发酵成酒精和二氧化碳,分布于整个自然界,是一种天然发酵剂。在生活中人们常用茶酵母、面包酵母和啤酒酵母来制作食品。
    资料1: 《书经》中的“若作酒醴,尔惟曲蘖”提到酿酒必须要用酒曲。酒曲是以谷物为原料,破碎加水压制而成的。酒曲富含酵母菌和霉菌等多种微生物,经水浸泡活化后投入蒸熟的米即可用于酿酒。
    资料2:酵母菌细胞壁的主要成分是几丁质。酿酒酵母产酒精能力强,但没有合成淀粉酶的能力;糖化酵母能合成淀粉酶,但酒精发酵能力弱。为了实现以谷物为原料高效生产酒精的目的,科研人员进行了酵母菌种的改良实验。
    21.下列叙述错误的是( )
    A.夏季气温升高,需用沸水浸泡酒曲以防杂菌污染
    B.夏酒曲中霉菌分泌的蛋白酶可将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸
    C.酒曲经水浸泡活化有利于提高酶的活性和酵母菌的代谢
    D.酿酒过程中,应适时放气
    22.下图为资料2中提到的改良酵母菌种的实验。请据图分析,下列叙述正确的是( )
    A.用PEG诱导之前需用纤维素酶去除两种酵母的细胞壁
    B.以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标
    C.在培养基X中以淀粉为唯一碳源即可筛选出杂种酵母
    D.以谷物为原料用酿酒酵母酿酒时,需对原料进行糖化处理
    23.葡萄糖异构酶能将葡萄糖转化为果糖,其最适温度约为60℃,生产上常用于高果糖浆的生产。科学家将葡萄糖异构酶的第138位甘氨酸用脯氨酸替代,结果它的最适温度提高了约10℃。下列有关叙述正确的是( )
    A.编码葡萄糖异构酶的基因的脱氧核苷酸序列会有相应的改变
    B.蛋白质工程直接对蛋白质进行操作,从而改造或制造自然界没有的蛋白质
    C.经改造后的葡萄糖异构酶热稳定性提高这一性状不可遗传
    D.改造后的葡萄糖异构酶在60℃时催化活性高于70℃时
    24.下面是几种不同限制性内切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述错误的是( )
    A.以上DNA片段由4种限制酶切割后产生
    B.②片段是在识别序列为的限制酶作用下形成的
    C.①和④两个片段在T4DNA连接酶的作用下不能连接形成重组DNA分子
    D.限制酶、DNA连接酶和DNA聚合酶作用的部位都是磷酸二酯键
    25.镰状细胞贫血是一种单基因遗传病,由正常血红蛋白基因(HbA)突变为异常血红蛋白基因(Hbs)引起,它们的某片段如图甲。现对一胎儿进行基因检测,主要原理:限制酶MstⅡ处理扩增后的DNA,加热使酶切片段解旋后用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交,最后电泳分离。图乙为电泳后荧光出现的三种可能性。下列叙述错误的是( )
    A.正常血红蛋白基因与异常血红蛋白基因的根本区别在于碱基的排列顺序不同
    B.若该胎儿检测结果为图乙一b,则其为镰状细胞贫血患者
    C.荧光标记序列越长,图乙-c中两个DNA条带间的距离越大
    D.用限制酶MstⅡ处理DNA不充分,可能把正常人误判为携带者
    二、填空题
    26.为建设社会主义新农村,解决农村生产生活垃圾处理的问题,某办事处给出了处理方案:
    (1)某团队从土壤中筛选出降解玉米秸秆的复合菌的过程中,用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌,灭菌从________开始计时;全部工作结束后,为了不污染环境,所有使用过的器皿、废弃物都必须进行________处理后再洗涤倾倒。
    (2)若要筛选出能分解包装塑料的细菌应使用________培养基(从功能角度回答)。
    (3)调查小组为了从被污染的湖水中分离获得能降解环境污染物M(一种含有C、H、O、N的有机物)的细菌的单菌落,设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
    ①据表判断,其中成分M主要是作为________起作用,培养基________(填“甲”或“乙”)可用于分离能降解M的目的菌。
    ②如何判断该培养基有无杂菌污染________(请回答出判断方法和结果)。
    ③在接种时选用________法接种,可以计数细菌的增殖情况;接种前需用无菌水对菌液进行______,得到稀释倍数为105的土壤样品;在3个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为156、178和191。1mL原土壤样液中的细菌数量为________个。
    三、读图填空题
    27.玉米中含有β-胡萝卜素,为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”,科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题。
    (1)甲方案中,β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是________________。
    (2)乙方案中,在体细胞杂交前需要用________酶除去细胞壁获得原生质体,获得原生质体后,将其置于________溶液中防止其吸水涨破。诱导原生质体融合的物理方法________(请至少答出一点)。杂种细胞形成的标志是_________。
    (3)通过⑤获得“黄金大米”幼苗过程中,植物需要依赖培养基中的蔗糖,其中蔗糖的作用是________(请至少答出两点)。杂种细胞脱分化形成愈伤组织,愈伤组织再分化发育成芽、根。生根培养基中________比值高时促进生根。植物组织培养技术得到的组培苗需要进行________处理,目的是提高试管苗对外部环境的适应能力。在植物组织培养的过程中,一直保持湿润环境,在进行该处理时,湿度逐渐________,以及应该避免强光直射等问题。
    (4)甲乙两方案在育种工作中都具有广泛的应用价值,两者共有的优点是________。
    28.Ⅰ.赖氨酸是人体细胞不能合成的必需氨基酸。科学家把某种必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因(R)导入玉米中,使玉米中赖氨酸的含量提高30%。回答下列问题。
    (1)随着测序技术的发展,通过检索________查询R基因序列,通过化学合成法得到R基因。利用PCR技术扩增R基因时,需要在一定的缓冲液中才能进行,其中需要加入________酶。为了特异性扩增R基因序列,需根据________设计特异性引物。
    (2)在构建基因表达载体时,其中载体上启动子的作用________,若为了避免R基因和质粒的自连或反向连接,提高重组效率,应该选择的限制酶是________________。
    (3)随着转化方法的突破,农杆菌侵染玉米这种单子叶植物也取得了成功。科研人员从新鲜的玉米叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养,当农杆菌侵染玉米细胞后,能将Ti质粒上的________转移到被侵染的细胞,并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。
    (4)检测R基因是否表达的方法是________。
    (5)在基因工程中若要培养转基因小鼠,将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是________。
    Ⅱ.乳腺生物反应器是将外源基因定位表达于哺乳动物的乳腺中,通过转基因动物分泌的乳汁来生产重组蛋白,例如,生产可用于治疗血液病、创伤性出血等疾病的重组人凝血因子VⅡ(rhFVⅡ)。请回答下列问题:
    (1)为获得人凝血因子,首先要从细胞中获取总RNA,通过________获得cDNA,再进行PCR获得人凝血因子基因。该方法获得的基因不具有________(至少答出3点)。
    (2)人凝血因子cDNA中不含限制酶识别序列,无法直接构建基因表达载体,因此,在PCR时需要在引物上加入限制酶的识别序列,应加在引物的________(填“3'”或“5'”)端才能不影响PCR的顺利进行。
    (3)膀胱生物反应器与乳腺生物反应器的优点相同:收集产物蛋白比较容易,不会对动物造成损伤。此外,膀胱生物反应器还具有的显著优势在于不受转基因动物的________(答出1点即可)限制,而且从尿液中提取蛋白质比从乳汁中提取更简便、高效。
    四、实验探究题
    29.Ⅰ.为降低人乳腺癌治疗药物的副作用,科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上,构建抗体药物偶联物(ADC),过程如图1所示。
    (1)本实验中,小鼠注射的特定抗原应取自________________。
    (2)步骤②是选择出杂交瘤细胞,杂交瘤细胞的特点是________,步骤③中对于抗体检测呈________性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化培养,克隆化培养使每个孔内不多于一个细胞,达到单个克隆培养的目的。
    (3)请写出单克隆抗体的优点_________(请至少答出两点)。
    (4)体外培养杂交瘤细胞应置于________培养箱中,动物细胞培养过程为避免代谢物的毒害作用,需要进行________________。
    Ⅱ.目前,临床上癌症治疗的方法一般是先通过手术切除肿瘤,为杀死体内残留的癌细胞,在手术后进行化疗。有研究小组从资料上获知:二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。由此推测:二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,可作为一种癌症的化疗药物,并就此问题设计实验进行了探究。
    实验材料:肝部长有肿瘤的小鼠,不同浓度的二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血细胞计数板,试管,吸管,培养皿等等。
    (1)请你帮助该研究小组设计实验思路(具体操作细节不做要求)。
    a.取洁净的培养皿一个,加入适量培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用________处理,使其分散开来,置于培养皿中培养;
    b.取洁净的试管5支,编号A、B、C、D、E,并在________,E号培养基加入等量的生理盐水;
    c.从培养皿中吸取等量的培养液置于A-E号试管中,振荡后,在________条件下培养一段时间;
    d.从摇匀的5支试管中吸取适量的培养液置于________上,在显微镜下计数,记录数据.
    实验分析,
    (2)根据实验结果,你能得出的结论是:
    第一,________________; 第二,________________。
    (3)图1步骤④是将获得的单克隆抗体和治疗乳腺癌的药物,通过接头结合在一起,从而获得ADC。研究发现,ADC在患者体内的作用如图2所示。
    ①ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用,是因为________能精确地定位乳腺癌细胞,该过程依赖于________的原理。
    ②据图2可知ADC进入乳腺癌细胞后,细胞中的溶酶体可将其水解,释放出的药物最终作于________可导致癌细胞凋亡。
    参考答案
    1.答案:C
    解析:
    2.答案:B
    解析:动物细胞培养利用细胞增殖的原理,高度分化的动物细胞不能分裂,所以动物细胞培养必须选不断分裂的细胞进行培养,而胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛,因此动物细胞培养时,所用组织和细胞大都来自胚胎或出生不久的幼龄动物,即B符合题意,具有更强的分裂能力,ACD不符合题意。
    故选B。
    3.答案:B
    解析:微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、氮源和无机盐四类,其中培养基中加琼脂会得到固体培养基,琼脂起凝固剂的作用,不属于微生物生长所需营养物质。
    故选B。
    4.答案:D
    解析:胚胎工程技术包含体外受精,胚胎分割等,其中在进行体外受精时,需要对供体母牛进行超数排卵,受体不会对植入的胚胎发生免疫排斥,所以不需要进行免疫检查,D错误。
    5.答案:C
    解析:可利用人参细胞培养来生产人参中的人参皂苷,C正确。
    6.答案:D
    解析:基因工程的基本工具包括限制酶、DNA连接酶和质粒,不包括解旋酶。
    故选:D。
    7.答案:D
    解析:A、原生质体可作为遗传操作与生理生化研究的良好材料,是由于原生质体容易摄取外来的遗传物质,A正确;B、由于原生质体没有细胞壁,所以有利于进行细胞融合、体细胞杂交等操作,B正确;C、原生质体具有除细胞壁以外的细胞结构,且含有个体发育的全部基因,仍然具有发育成完整生物体的潜能。所以与完整细胞一样具有全能性,C正确; D、原生质体与完整细胞一样具有全能性,细胞中相关基因的表达使其仍可产生细胞壁,经诱导分化成完整植株,D错误。故选D。
    8.答案:A
    解析:A、发酵工程的基本环节有选育菌种、扩大培养、配制培养基、灭菌、接种和发酵、产品的分离和纯化,其中优良菌种可以从自然界中筛选出来,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得,因此①、②可以是诱变育种或基因工程育种,A正确;
    B、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节,③是培养基的灭菌,不是发酵工程的中心环节,B错误;
    C、在发酵过程中,要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度,以了解发酵进程,同时要严格控制发酵条件,如温度、pH、溶解氧,故可能需要适时添加营养物质等,C错误;
    D、不同微生物的最适温度和pH值有所不同,因此不同发酵过程温度和pH也有所不同,D错误。
    故选A。
    9.答案:C
    解析:A、动物细胞培养过程既需要O2,也需要CO2,A错误;B、动物细胞培养不需要脱分化,植物细胞培养要经过脱分化形成愈伤组织,B错误;C、培养夜中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等,C正确;D、在进行传代培养时,悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶处理,使之分散成单个细胞,再用离心法收集。之后将收集的细胞制成细胞悬液再分瓶培养,D错误。故选C。
    10.答案:B
    解析:糖蛋白在内质网上形成,大肠杆菌属于原核生物,没有内质网,质粒是环状DNA分子,噬菌体是细菌病毒,不含内质网。
    11.答案:B
    解析:A、甲图中的涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能取菌液, A正确;
    B、稀释涂布平板法使用固体培养基,B错误;
    C、乙培养皿中一般在5区域才能得到由单个细菌繁殖而形成的菌落,C正确;
    D、乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端,这样能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落,D正确。
    故选B。
    12.答案:D
    解析:
    13.答案:B
    解析:A、①~③过程(①表示脱分化,②表示再分化,③④表示个体发育过程)中发生了有丝分裂,没有发生减数分裂,A错误;
    B、X是经过①脱分化形成的愈伤组织,B正确;
    C、②阶段表示再分化形成胚状体,C错误;
    D、过程①为脱分化,进行了基因的选择性表达,使细胞的全能性增加,D错误。
    故选B。
    14.答案:D
    解析:植物组织培养过程中,在幼苗形成之前都需要在无菌环境中培养,①正确;
    诱导外植体脱分化形成愈伤组织的培养基中需要添加一定浓度的植物激素,②正确;
    植物组织培养过程需要适宜的温度,③正确;
    脱分化形成愈伤组织时需要避光,④错误;
    植物组织培养需要充足的养料,⑤正确。
    15.答案:B
    解析:
    16.答案:C
    解析:A、人为加水提温,温度适当提高可以提高相应酶的活性进而可以促进微生物繁殖,进而缩短原料发酵的时间,A正确;B、发酵一般为微生物的无氧呼吸(部分为有氧呼吸),温度、pH、氧气含量等发酵条件,都会影响微生物的生长繁殖和代谢途径,B正确; C、熟普的香味会随着陈化时间而变得越来越柔顺、浓郁,说明熟普保存过程中仍在发酵,因此新茶发酵完成后进行灭菌并密封不利于进一步发酵,C错误;D、饮用熟普后回甘,可能是因为发酵后茶叶中单糖、二糖含量增加,D正确。
    故选C。
    17.答案:B
    解析:A、种皮中可加入适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等,也可以添加植物生长调节剂以调节植物的生长发育,A正确;B、人工种子的主体部分是经过脱分化和再分化过程形成的胚状体,B错误;C、人工胚乳可为人工种子提供营养,C正确;D、人工种子是通过微型繁殖技术(植物组织培养技术)获得的,D正确。故选B。
    18.答案:C
    解析:本题考查DNA的结构。由题图可知,λ噬菌体的线性双链DNA两端的单链序列的碱基能够互补配对,使线性DNA分子两端相连,C项符合题意。
    19.答案:B
    解析:脱氧核苷三磷酸有高能磷酸键,可以断裂为PCR提供能量,同时形成的脱氧核糖核苷酸可以提供原料,A正确;上(载)样缓冲液中的电泳指示剂(溴酚蓝)不能使核酸显色,它迁移速率较快,在其迁移出凝胶前关闭电泳仪电源,可以保证核酸分子还在凝胶内,B错误;带有负电荷的核酸会向其携带电荷相反的电极迁移,故需要加在电泳槽的负极,使其向正极迁移,C正确;不同大小的核酸迁移速率不同,从而实现其分离,D正确。
    20.答案:B
    解析:A、猪的成熟红细胞不含细胞核和细胞器,不含DNA,不能作为提取DNA的材料,A错误; BC、DNA不溶于酒精,细胞中的某些蛋白质可溶于酒精,因此离心后取上清液加入等体积的冷酒精进行DNA的粗提取,B正确;C错误; D、二苯胺试剂可作为鉴定DNA的试剂,将析出的DNA溶解在2ml/L的NaCl溶液中,加入二苯胺试剂沸水浴后才可呈现蓝色,D错误。
    故选:B。
    21.答案:A
    22.答案:D
    23.答案:A
    24.答案:B
    解析:A、碱基序列具有方向性,图中①④的黏性末端不能互补配对,是两种限制酶切割的产物:②是第三种限制酶切割的部分产物;③是第四种限制酶切割的部分产物,共是由4种限制酶切割后产生的,A正确;
    B、②片段是在酶切位点为的限制酶作用下形成的,B错误;
    C、碱基序列具有方向性,图中①④的黏性末端不能互补配对,在T4DNA连接酶的作用下不能连接形成重组DNA分N子,C正确;
    D、限制酶识别DNA分子中特定核苷酸序列,在特定的部位将两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,DNA聚合酶和DNA连接酶是催化磷酸二酯键的形成,都是作用于磷酸二酯键,D正确。
    故选B。
    25.答案:C
    26.答案:(1)达到设定的温度或压力时;高压蒸汽灭菌(或灭菌)
    (2)选择;乙;选择一个未接种的培养基作为空白对照组,若该对照组无杂菌生长,则培养基
    (3)氮源;无杂菌污染;稀释涂布平板法梯度稀释;1.75×108
    27.答案:(1)玉米和水稻共用一套遗传密码(或生物共用一套遗传密码)
    (2)纤维素酶和果胶酶;等渗;电刺激(或离心,震荡);再生出细胞壁
    (3)作为碳源,能源物质,参与维持培养基的渗透压;生长素与细胞分裂素;炼苗;降低
    (4)克服远缘杂交不亲和的障碍(或打破生殖隔离)
    解析:(1)自然界中所有生物共用一套遗传密码,因此一种生物的基因能在另一种生物体内表达。
    (2)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,在植物体细胞杂交前需用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁获得原生质体;获得原生质体后,将其置于等渗溶液中防止其吸水张破。诱导植物原生质体融合常用的物理方法是电刺激(或离心,震荡)。杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁,而植物细胞壁的形成与高尔基体有关。
    (3)⑤表示将杂交细胞培育成杂交植株,需要采用植物组织培养技术。其中蔗糖可作为外植体的碳源,能源物质,还可参与维持培养基的渗透压。植物组织培养时,培养基中生长素与细胞分裂素比值高时有利于生根,植物组织培养技术得到的组培苗需要进行炼苗处理,目的是提高试管苗对外部环境的适应能力。在植物组织培养的过程中,一直保持湿润环境,在进行该处理时,湿度逐渐降低,直到与自然湿度接近后,移栽至土壤定植,同时还应该避免强光直射等问题。
    (4)植物体细胞杂交的优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍。
    28.答案:Ⅰ.(1)基因数据库(或序列数据库或基因Bank);耐高温的DNA聚合酶(或TaqDNA聚合酶,只写DNA聚合酶不给分);R基因两端的碱基(核苷酸)序列(或R基因的已知序列)
    (2)RNA聚合酶特异性识别和结合的位点,起始转录;PstI、EcRI(顺序可对调)
    (3)T-DNA
    (4)抗原—抗体杂交
    (5)显微注射法
    Ⅱ.(1)逆转录法;启动子,终止子,内含子
    (2)5'
    (3)性别(或年龄)
    解析:(1)随着测序技术的发展,通过检索基因数据库(或序列数据库或基因Bak)查询基因序列,通过化学合成法得到R基因。
    利用PCR技术扩增R基因时,进行的是DNA复制过程,因为过程中涉及到高温环境,因此需要加入耐高温的DNA聚合酶。扩增前,需要根据R基因两端的碱基(核苷酸)序列设计特异性引物,这样能够利用模板链特异性扩增出R基因片段。
    (2)在构建基因表达载体时,其中载体上启动子能与RNA聚合酶特异性识别和结合的位点,起始转录,若为了避免R基因和质粒的自连或反向连接,需要使用两种不同的限制酶形成两个不同的末端,HindⅢ会破坏抗四环素基因(抗性基因),因此应该选取PstⅠ、EcRⅠ。
    (3)农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA转移到被侵染的细胞,并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。
    (4)R基因正常表达将会产生对应的蛋白质,可用抗原抗体杂交技术检测该蛋白质的产生。
    (5)转基因动物中最常采用将目的基因导入受体细胞(动物细胞)的技术是显微注射技术,常用的受体细胞是受精卵。
    (6)PCR不能直接以RNA为模板,RNA必须通过逆转录获得cDNA,才可作为PCR的模板;RNA只对应基因结构中的编码区,所以利用该方法获得的基因不具有编码区上下游的启动子,终止子,内含子。
    (7)在PCR时需要在引物上加入限制酶的识别序列,因为子链合成的方向为5'→3',应加在引物的5'端才能不影响PCR的顺利进行。
    (8)乳腺生物反应器是将外源基因定位表达于哺乳动物的乳腺中,通过转基因动物分泌的乳汁来生产重组蛋白,转基因动物必须是雌性,而目需要到泌乳期才能产生乳汁。膀胱生物反应器是将外源基因定位表达于哺乳动物的膀胱中,通过转基因动物产生的尿液来生产重组蛋白,膀胱生物反应器具有的显著优势在于不受转基因动物的性别、年龄。
    29.答案:Ⅰ.(1)人乳腺癌细胞
    (2)既能无限增值,又能产生特定抗体;阳
    (3)纯度高,可大量制备,特异性强,灵敏度高
    (4)CO2;定期更换培养液
    Ⅱ.(1)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶);A-D号试管分别加等量的0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL的二氯二乙胺溶液;相同且适宜;血细胞计数板
    (2)在一定范围内,二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖;在一定范围内,随二氯二乙胺浓度的增大,抑制作用逐渐增强
    (3)单克隆抗体;抗原抗体特异性结合;细胞核
    解析:(1)本实验目的是生产治疗乳腺癌的单克隆抗体,故应给小鼠注射的特定抗原应取自人的乳腺癌细胞,从而引起小鼠发生特异性免疫,保证能从体内获得产生相应抗体的浆细胞。
    (2)步骤②是初步筛选出的杂交瘤细胞,具有既能无限增殖,又能产生特定抗体的特点,步骤③中对于抗体检测呈阳性(说明该杂交瘤细胞产生的是抗乳腺癌抗原的抗体)的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化培养,克隆化培养使每个孔内不多于一个细胞,达到单个克隆培养的目的。
    (3)单克隆抗体具有纯度高、可大量制备,特异性强,灵敏度高的优点。
    (4)体外培养杂交瘤细胞应置于CO2恒温培养箱中,动物细胞培养过程为避免代谢物的毒害作用,需要进行定期更换培养液。
    (5)胰蛋白酶能水解细胞表面的蛋白质,使组织细胞分散开,所以动物细胞培养常用胰蛋白酶处理。
    b.实验目的是研究二氯二乙胺作为化疗药物的适宜浓度,实验设置应遵循对照原测,所以取洁净的试管5支,编号A、B、C、D、E,并在A-D号试管中分别加入等量的0.lmg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL的二氯二乙胺溶液,E号试管中加入等量的生理盐水,和前4只试管进行对照。
    c其它无关变量应相同且适宜,故从培养皿中吸取等量的培养液置于A-E号试管中,振荡后,在相同且适宜条件下培养一段时间。
    d从摇匀的5支试管中吸取适量的培养液置于血细胞计数板上,在显微镜下计数,记录数据。
    (6)根据表格数据可知,与E组相比,前四组的细胞数目均减少,且随着二氯二乙胺浓度的增加,细胞数量越来越少,因此可说明在一定范围内,二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖;且在一定范围内,随二氯二乙胺浓度的增大,抑制作用逐渐增强。
    (7)①由于单克隆抗体通过特异性的抗原抗体反应,能精确地定位乳腺癌细胞,因此ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用。
    ②ADC进入乳腺癌细胞后,细胞中的溶酶体释放水解酶可将其水解,释放出的药物最终作用于细胞核,可导致癌细胞凋亡。
    成分
    无机盐
    淀粉
    M
    琼脂糖

    培养基甲
    +
    +
    +
    -
    +
    培养基乙
    +
    +
    +
    +
    +
    实验组别
    A
    B
    C
    D
    E
    二氯二乙胺浓度(mg/mL)
    0.1
    0.2
    0.3
    0.4
    0
    细胞数目(个/mL)
    320
    275
    186
    96
    560
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