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山东省淄博市高青县第一中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题（原卷版+解析版）
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这是一份山东省淄博市高青县第一中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题（原卷版+解析版），文件包含山东省淄博市高青县第一中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题原卷版docx、山东省淄博市高青县第一中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题解析版docx等2份试卷配套教学资源，其中试卷共40页， 欢迎下载使用。
注意事项：
1．本试题分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分。第Ⅰ卷为选择题，共45分；第Ⅱ卷为非选择题，共55分；满分100分，考试时间为90分钟。
2．客观题请将选出的答案标号（A、B、C、D）涂在答题卡上，主观题用0.5mm黑色签字笔答题。
第Ⅰ卷（共45分）
一、单项选择题：（共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题意。）
1. 清代袁枚在《随园食单》中，详尽记载了泡菜的制作工艺：“冬菜黄芽菜，泥头七日便熟“泥头”就是用泥密封容器口），然欲久放非盐不可，淡则味鲜，咸则味恶。常腌一大坛三伏时开之……香美异常，色白如玉。”以下有关说法错误的是（ ）
A. 泡菜制作过程中起主要作用的微生物是乳酸菌，“泥头”的目的是为该菌提供无氧环境
B. 为了确保“淡则味鲜”，盐水浓度不宜过高，可以配制质量百分比为3%的盐水用于发酵
C. “咸则味恶”的原因，可能是由于溶液浓度过高使乳酸菌失水死亡，从而影响发酵效果
D. 若腌制时间少于“七日”，可能导致泡菜中亚硝酸盐含量高，影响泡菜品质
2. 酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图Ⅰ所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基。下列说法正确的是（ ）
A. 传统葡萄酒发酵时，将葡萄冲洗去梗后榨汁装满消毒后的玻璃瓶
B. 对培养基进行高压蒸汽灭菌，需在压力为100kPa、温度为121℃的条件下
C. 用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为6.8×106个/L，此数值可能低于实际的活菌数
D. 由图Ⅱ可知，丙瓶出现的原因可能是培养瓶密封不严，丁组酵母菌产酒精能力比乙弱
3. 图中的已驯化菌群是从某肉制品加工厂污水处理池中初步筛选的可水解油脂并利用的菌群，为进一步筛选高效水解油脂的菌群进行了如图所示的操作。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 培养基中除了油脂提供的成分还需加入氮源和碳源
B. 随着培养基中油脂浓度变大导致菌群朝着高效水解油脂的变异方向发展
C. 在菌种分解油脂的过程中培养基的pH会呈现先下降再上升的变化趋势
D. 若要研究优秀菌的生长规律，可在液体培养的不同时间段采用稀释涂布平板法短时间内测定其数量
4. 啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的。酵母菌在最适pH条件下进行乙醇发酵，不产生甘油和醋酸；如果环境pH大于8，它的发酵产物除乙醇外，还会有甘油和醋酸。下列叙述错误的是（ ）
A 用赤霉素处理大麦种子，可以使其无须发芽就能产生α－淀粉酶
B. 啤酒的工业化生产中，先进行糖化分解淀粉，再焙烤杀死种子，否则淀粉酶会失活
C. 在发酵过程中，必须对pH进行控制，同时可根据不同目的，进行变pH发酵，从而控制产物和生产效率
D. 对发酵后的啤酒进行消毒，杀死其中的大多数微生物，以延长啤酒保质期
5. 化学需氧量（COD）是衡量污水中有机污染物含量的重要指标。从某污水处理系统中分离出多种细菌，经分离筛选获得具有高效降低COD能力的菌株，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 牛肉膏来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质
B. 挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是为了扩大培养该菌
C. 可用显微镜直接计数法统计菌液中的细菌数目，以确定接种时菌液的最佳稀释倍数
D. 在上述固体培养基上接种的方法是稀释涂布平板法，该过程中需要对涂布器灼烧灭菌一次
6. 废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 该生产过程中，一定有气体生成
B. 微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料
C. 该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
D. 沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理
7. 花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 图1培育杂种植株所用的技术体现了植物细胞全能性和细胞膜流动性原理
B. 图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行
C. 图2中属于杂种植株的是4和5，1可能是花椰菜
D. 病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗病性强的杂种植株
8. 基因组印记（通过甲基化实现受精卵中来自双亲两个等位基因一个表达另一个不表达）阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 体外培养卵母细胞时，需将培养皿置于95%氧气和5%二氧化碳的气体环境中进行培养
B. 甲基化可能会关闭基因的活性，对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达
C. “孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同
D. 移植后囊胚进一步扩大，会导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来
9. 华蟾素注射液是我国经典抗肿瘤药物，研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 为防止细胞培养过程发生污染，培养液中要加入抗生素
B. 每隔一段时间需更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害
C. 据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且只与浓度呈正相关
D. 图乙的结果进一步表明，华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制
10. 四种限制酶的切割位点如图所示，下列叙述错误的是（ ）
A. 上图中SmaⅠ、EcRV两种酶切割后的DNA片段不能用E．cliDNA连接酶连接
B. 图中SmaⅠ、EcRV两种酶切割后的DNA片段，可以用T4 DNA连接酶连接
C. DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段连接的化学键是磷酸二酯键
D. 限制酶能识别特定的核苷酸序列，有专一性，不同的限制酶切割不能产生相同的黏性末端
11. DNA琼脂糖凝胶电泳的分子筛选效应是指作为支持介质的琼脂糖，具有网络结构，使大分子物质在通过时受到较大阻力，借此分离不同大小的DNA片段。下列说法错误的是（ ）
A. 琼脂糖凝胶电泳可用于分离、鉴定DNA分子的混合物
B. 洋葱研磨液需要用滤纸过滤，以保证提取的DNA量
C. 凝胶制备中加入的核酸染料能与DNA分子结合，用于分离后DNA的检测
D. 用二苯胺试剂鉴定DNA时，需沸水浴加热冷却后再观察颜色变化
12. 某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带（引物与模板完全配对）外，还有2条非特异条带（引物和模板不完全配对）。为了减少反应非特异条带的产生，以下措施中有效的是（ ）
A. 增加模板DNA的量B. 延长热变性的时间
C. 延长延伸的时间D. 提高复性的温度
13. PCR引物的3'端为结合模板DNA的关键，5'端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列，dNTP是DNA合成的原料，还可供能。下列相关说法错误的是（ ）
A. 图示环节所需的温度比下一个环节的低
B. 引物的设计要有一段已知目的基因的核苷酸序列
C. TaqDNA聚合酶只能从引物的3'端开始延伸DNA链
D. 1个循环后，两个子代DNA分子的脱氧核苷酸数量相同
14. 纤维素酶广泛应用于医药、食品发酵、造纸、废水处理等领域。研究人员利用蛋白质工程将细菌纤维素酶的相应氨基酸替换后，纤维素酶热稳定性得到了提高。下列有关该技术的说法，正确的是（ ）
A. 改造后的纤维素酶的较高热稳定性不可遗传
B. 对纤维素酶的改造需要以基因工程为基础
C. 改造纤维素酶无需构建基因表达载体
D. 对纤维素酶的改造是通过直接改造mRNA实现的
15. 几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化其水解。将几丁质酶基因转入菊花体内，可增强其抗真菌病的能力。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 将几丁质酶基因插入Ti质粒的T-DNA上构建基因表达载体
B. 可通过显微注射法将农杆菌导入菊花受体细胞
C. 可用PCR等技术检测目的基因是否成功导入
D. 可用真菌接种实验检测转基因菊花对真菌的抗性程度
二、不定项选择题（共本题共5小题，题每小题3分分，共共15分分。每小题有一个或多个选项符合题目要得求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
16. 为了筛选高效分解纤维素的细菌，科学家进行了以下实验：①取白蚁的肠道菌悬液接种于CMC液体培养基A；②一段时间后，分瓶继续用CMC液体培养基培养；③将培养液梯度稀释并涂布于CMC固体培养基B；④将B中长出的菌落用牙签点种至CMC固体培养基C的同一位置；⑤向培养基B中加入刚果红，观察透明圈出现情况。下列说法错误的是（ ）
A. CMC培养基应以纤维素为唯一碳源，培养基A和B的区别在于有无琼脂
B. 用CMC液体培养基培养和分瓶有利于增加纤维素分解菌种类
C. 透明圈和菌落半径的比值大小可反映纤维素分解菌的分解能力强弱，应挑取比值较大的菌落用于培养
D. 培养基B起到鉴别作用，培养基C有利于对原菌种进行保存和挑选
17. 中国科研团队利用一只流产的雌性猕猴胚胎的成纤维细胞经克隆得到一对克隆猴“姐妹花”，它们的诞生具有重大意义。其中几个关键的技术创新与突破有：①在将供体细胞注入去核的卵母细胞前用灭活的病毒短暂处理；②通过反复试验，可以在10秒之内对卵母细胞进行去核操作，在15秒之内将供体细胞注入到去核的卵母细胞里；③将组蛋白去甲基化酶的mRNA和组蛋白脱乙酰酶抑制剂注入重构胚。以下相关叙述正确的是（ ）
A. 灭活是指用物理或化学手段破坏病毒或细菌的抗原结构使其失去感染能力
B. 克隆猴与人类遗传背景更接近，以其为模型研发药物可有效缩短药物研发进程
C. 组蛋白去甲基化和乙酰化有利于基因的表达从而促进重构胚的发育
D. 胚胎移植时进行同期发情处理，目的是降低代孕母猴对克隆猴“姐妹花”的免疫排斥反应
18. 荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针（探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段），当TaqDNA聚合酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则
B. 反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量关系不大
C. 若用cDNA（部分基因文库）作模板，上述技术也可检测某基因的转录水平
D. TaqDNA聚合酶催化DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸
19. 植物生物反应器主要以整株植物、植物组织或植物悬浮细胞为加工场所，生产药物蛋白。叶绿体遗传转化体系是近年发展起来的一种新的植物生物反应器。叶绿体转化是以同源重组原理将外源目的基因整合到目标叶绿体基因组中的一种方式，是一种高表达、安全性极高的遗传转化方法。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 植物生物反应器涉及的现代生物学技术是基因工程和植物细胞工程
B. 构建的基因表达载体中含有叶绿体特异启动子，使得目的基因只能在叶绿体中表达
C. 植物叶绿体表达体系可以防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散
D. 把目的基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子一定含有此目的基因
20. 某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期待能获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是（ ）
A. Gata3基因的启动子也能控制GFP基因的表达
B. 翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白
C. 2号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子，4号条带的小鼠是野生型
D. 若用引物1和引物3进行PCR，将不利于区分杂合子和纯合子
第Ⅱ卷（共55分）
三、非选择题（本题共5小题，共55分）
21. 微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题：
（1）已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是____。依照物理性质划分，驯化培养基属于____培养基，其中蛋白胨可提供____（至少答两点）。
（2）用于筛选的样品应来自____的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为____。
（3）将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的培养基C，培养24小时后，通过测定培养基中____，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了4个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、312、253，测得培养基C中菌落数为1.25×107个/mL，则涂布的菌液Y为____mL。该统计数据往往比活菌的实际数目____（填“多”或“少”），理由是____。
22. 紫草是一种重要的药用植物，其根部富含红色的萘醌类次生代谢产物——紫草宁及其衍生物。它们具有抗菌、消炎、活血、诱导癌细胞凋亡等功效，同时也是一种天然染料。科研人员利用紫草新生的营养芽为外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中进行悬浮培养，以获得更多的紫草宁。下图表示获得紫草宁的两种工艺路线。
（1）若要通过植物组培获得脱毒紫草植株，应优先选择紫草植株的____部位作为外植体，原因是____（答出两点）。
（2）外植体需经____处理，常用的试剂有____（答出两种即可）。
（3）在设计紫草植物组培培养基时，培养基中需要加入蔗糖，蔗糖的作用是____（答出两点）。
（4）研究人员将培养的愈伤组织分别接种到含有不同比例NAA（生长素类似物）和KT（细胞分裂素类似物）的培养基中培养。实验处理与结果如下表：
依据实验结果，可以得出的结论是：植物生长调节剂（NAA和KT）的比例会影响愈伤组织的分化，具体表现为____。
（5）通过高产细胞株提取细胞培养物途径中，紫草细胞的生长曲线如下图所示：
采用该途径时，需用____处理愈伤组织以获得单细胞。实验结果表明：接种后第3天左右，紫草宁及其衍生物开始形成；对数生长期及直线生长期，紫草宁含量逐步上升；静止期，紫草宁形成速度加快至最高水平。这说明细胞分裂生长缓慢____（填“有利于”或“不利于”）目的产物的形成。
23. 双特异性抗体（BsAb）是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原两个不同抗原表位相结合，双特异性抗体在自然状态下并不存在，可以通过重组DNA或细胞融合技术人工制备实现。长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术生产双特异性抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图示。回答下列问题。
（1）图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是_____。过程③所用的HAT培养基从用途上看属于选择培养基，在该培养基上，_____细胞不能生长，能生长的细胞具有的特点是_____。
（2）过程④中将杂交瘤细胞进行多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，然后利用_____原理检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体的优点有_____。
（3）图1方框内至少需要经过_____次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞因为_____（答出2点）和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_____。
24. 为使甘蓝具有抗除草剂能力，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入甘蓝植株，获得抗草甘膦转基因甘蓝。
（1）草甘膦抗性基因一条链的两端序列如下，采用PCR技术获取和扩增草甘膦抗性基因，应选用的引物组合为____。
A. 5’-CTTGGATGAT-3’和5’-TCTGTTGAAT-3’
B. 5’-CTTGGATGAT-3’和5’-TAAGTTGTCT-3’
C. 5’-ATTCAACAGA-3’和5’-ATCATCCAAG-3’
D. 5’-ATTCAACAGA-3’和5’-GAACCTACTA-3’
（2）与细胞内DNA复制相比，PCR技术扩增基因的特点是____（从酶的角度答出2点）。
（3）步骤②用____处理农杆菌后获得感受态细胞，以便将重组质粒导入。步骤③将农杆菌与甘蓝愈伤组织共培养后，在步骤④的培养基中添加____以便筛选出含目的基因的甘蓝植株。
（4）若目的基因用BamHI和BglII剪切，质粒用BamHI剪切，酶切后的目的基因存在正向与反向两种连接方式，可用____酶对两种重组质粒进行剪切。通过____技术分析产物大小进行区分，如下图所示，图中____（样品1/样品2）为所需的基因表达载体。
（5）若要检测转基因甘蓝植株是否产生抗除草剂蛋白，比较简单的方法是____。
25. 生态文明建设已成为我国的基本国策。水中雌激素类物质（E物质）污染会导致鱼类雌性化等异常，并通过食物链影响人体健康和生态安全。原产南亚的斑马鱼，其肌细胞、生殖细胞等存在E物质受体，且幼体透明。科学家将绿色荧光蛋白（GFP）等基因转入斑马鱼，建立了一种经济且快速的水体E物质监测方法。
（1）将基因表达载体导入斑马鱼受精卵的最佳方式是____。
（2）为监测E物质，研究者设计了下图所示的两种方案制备转基因斑马鱼，其中ERE和酵母来源的UAS是两种诱导型启动子，分别被E物质-受体复合物和酵母来源的Gal4蛋白特异性激活，启动下游基因表达。与方案1相比，方案2的主要优势是____，因而被用于制备监测鱼（MO）。
（3）现拟制备一种不育的监测鱼SM，用于实际监测。SM需经MO和另一亲本（X）杂交获得。欲获得X，需从以下选项中选择启动子和基因，构建基因表达载体并转入野生型斑马鱼受精卵，经培育后进行筛选。请将选项的序号填入相应的横线上。
Ⅰ．启动子：____
①ERE
②UAS
③使基因仅在生殖细胞表达的启动子（P生）
④使基因仅在肌细胞表达的启动子（P肌）
Ⅱ．基因：____
A．GFP
B．Gal4
C．雌激素受体基因（ER）
D．仅导致生殖细胞凋亡的基因（dg）
（4）为鉴定筛选出的受体细胞中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。如图所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的一对引物是____。某学生尝试用图中另外一对引物从某一受体细胞的质粒中扩增出了400bp片段，原因是____。
（5）SM不育的原因是：成体SM自身产生雌激素，与受体结合后____造成不育。编号
1
2
3
4
5
6
7
含量（mg/L）
NAA
0
0
2
0.2
2
0.02
2
KT
0
2
0
2
0.2
2
0.02
分化情况
不分化
分化芽
分化根
分化芽
不分化
分化芽
分化根
限制酶
识别序列和切割位点
BamHI
—G′GATCC—
BglII
—A′GATCT—
EcRI
—G′AATTC—
注意事项：
1．本试题分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分。第Ⅰ卷为选择题，共45分；第Ⅱ卷为非选择题，共55分；满分100分，考试时间为90分钟。
2．客观题请将选出的答案标号（A、B、C、D）涂在答题卡上，主观题用0.5mm黑色签字笔答题。
第Ⅰ卷（共45分）
一、单项选择题：（共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题意。）
1. 清代袁枚在《随园食单》中，详尽记载了泡菜的制作工艺：“冬菜黄芽菜，泥头七日便熟“泥头”就是用泥密封容器口），然欲久放非盐不可，淡则味鲜，咸则味恶。常腌一大坛三伏时开之……香美异常，色白如玉。”以下有关说法错误的是（ ）
A. 泡菜制作过程中起主要作用的微生物是乳酸菌，“泥头”的目的是为该菌提供无氧环境
B. 为了确保“淡则味鲜”，盐水浓度不宜过高，可以配制质量百分比为3%的盐水用于发酵
C. “咸则味恶”的原因，可能是由于溶液浓度过高使乳酸菌失水死亡，从而影响发酵效果
D. 若腌制时间少于“七日”，可能导致泡菜中亚硝酸盐含量高，影响泡菜品质
2. 酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图Ⅰ所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基。下列说法正确的是（ ）
A. 传统葡萄酒发酵时，将葡萄冲洗去梗后榨汁装满消毒后的玻璃瓶
B. 对培养基进行高压蒸汽灭菌，需在压力为100kPa、温度为121℃的条件下
C. 用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为6.8×106个/L，此数值可能低于实际的活菌数
D. 由图Ⅱ可知，丙瓶出现的原因可能是培养瓶密封不严，丁组酵母菌产酒精能力比乙弱
3. 图中的已驯化菌群是从某肉制品加工厂污水处理池中初步筛选的可水解油脂并利用的菌群，为进一步筛选高效水解油脂的菌群进行了如图所示的操作。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 培养基中除了油脂提供的成分还需加入氮源和碳源
B. 随着培养基中油脂浓度变大导致菌群朝着高效水解油脂的变异方向发展
C. 在菌种分解油脂的过程中培养基的pH会呈现先下降再上升的变化趋势
D. 若要研究优秀菌的生长规律，可在液体培养的不同时间段采用稀释涂布平板法短时间内测定其数量
4. 啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的。酵母菌在最适pH条件下进行乙醇发酵，不产生甘油和醋酸；如果环境pH大于8，它的发酵产物除乙醇外，还会有甘油和醋酸。下列叙述错误的是（ ）
A 用赤霉素处理大麦种子，可以使其无须发芽就能产生α－淀粉酶
B. 啤酒的工业化生产中，先进行糖化分解淀粉，再焙烤杀死种子，否则淀粉酶会失活
C. 在发酵过程中，必须对pH进行控制，同时可根据不同目的，进行变pH发酵，从而控制产物和生产效率
D. 对发酵后的啤酒进行消毒，杀死其中的大多数微生物，以延长啤酒保质期
5. 化学需氧量（COD）是衡量污水中有机污染物含量的重要指标。从某污水处理系统中分离出多种细菌，经分离筛选获得具有高效降低COD能力的菌株，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 牛肉膏来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质
B. 挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是为了扩大培养该菌
C. 可用显微镜直接计数法统计菌液中的细菌数目，以确定接种时菌液的最佳稀释倍数
D. 在上述固体培养基上接种的方法是稀释涂布平板法，该过程中需要对涂布器灼烧灭菌一次
6. 废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 该生产过程中，一定有气体生成
B. 微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料
C. 该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质
D. 沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理
7. 花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 图1培育杂种植株所用的技术体现了植物细胞全能性和细胞膜流动性原理
B. 图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行
C. 图2中属于杂种植株的是4和5，1可能是花椰菜
D. 病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗病性强的杂种植株
8. 基因组印记（通过甲基化实现受精卵中来自双亲两个等位基因一个表达另一个不表达）阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 体外培养卵母细胞时，需将培养皿置于95%氧气和5%二氧化碳的气体环境中进行培养
B. 甲基化可能会关闭基因的活性，对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达
C. “孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同
D. 移植后囊胚进一步扩大，会导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来
9. 华蟾素注射液是我国经典抗肿瘤药物，研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 为防止细胞培养过程发生污染，培养液中要加入抗生素
B. 每隔一段时间需更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害
C. 据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且只与浓度呈正相关
D. 图乙的结果进一步表明，华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制
10. 四种限制酶的切割位点如图所示，下列叙述错误的是（ ）
A. 上图中SmaⅠ、EcRV两种酶切割后的DNA片段不能用E．cliDNA连接酶连接
B. 图中SmaⅠ、EcRV两种酶切割后的DNA片段，可以用T4 DNA连接酶连接
C. DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段连接的化学键是磷酸二酯键
D. 限制酶能识别特定的核苷酸序列，有专一性，不同的限制酶切割不能产生相同的黏性末端
11. DNA琼脂糖凝胶电泳的分子筛选效应是指作为支持介质的琼脂糖，具有网络结构，使大分子物质在通过时受到较大阻力，借此分离不同大小的DNA片段。下列说法错误的是（ ）
A. 琼脂糖凝胶电泳可用于分离、鉴定DNA分子的混合物
B. 洋葱研磨液需要用滤纸过滤，以保证提取的DNA量
C. 凝胶制备中加入的核酸染料能与DNA分子结合，用于分离后DNA的检测
D. 用二苯胺试剂鉴定DNA时，需沸水浴加热冷却后再观察颜色变化
12. 某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带（引物与模板完全配对）外，还有2条非特异条带（引物和模板不完全配对）。为了减少反应非特异条带的产生，以下措施中有效的是（ ）
A. 增加模板DNA的量B. 延长热变性的时间
C. 延长延伸的时间D. 提高复性的温度
13. PCR引物的3'端为结合模板DNA的关键，5'端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列，dNTP是DNA合成的原料，还可供能。下列相关说法错误的是（ ）
A. 图示环节所需的温度比下一个环节的低
B. 引物的设计要有一段已知目的基因的核苷酸序列
C. TaqDNA聚合酶只能从引物的3'端开始延伸DNA链
D. 1个循环后，两个子代DNA分子的脱氧核苷酸数量相同
14. 纤维素酶广泛应用于医药、食品发酵、造纸、废水处理等领域。研究人员利用蛋白质工程将细菌纤维素酶的相应氨基酸替换后，纤维素酶热稳定性得到了提高。下列有关该技术的说法，正确的是（ ）
A. 改造后的纤维素酶的较高热稳定性不可遗传
B. 对纤维素酶的改造需要以基因工程为基础
C. 改造纤维素酶无需构建基因表达载体
D. 对纤维素酶的改造是通过直接改造mRNA实现的
15. 几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化其水解。将几丁质酶基因转入菊花体内，可增强其抗真菌病的能力。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 将几丁质酶基因插入Ti质粒的T-DNA上构建基因表达载体
B. 可通过显微注射法将农杆菌导入菊花受体细胞
C. 可用PCR等技术检测目的基因是否成功导入
D. 可用真菌接种实验检测转基因菊花对真菌的抗性程度
二、不定项选择题（共本题共5小题，题每小题3分分，共共15分分。每小题有一个或多个选项符合题目要得求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
16. 为了筛选高效分解纤维素的细菌，科学家进行了以下实验：①取白蚁的肠道菌悬液接种于CMC液体培养基A；②一段时间后，分瓶继续用CMC液体培养基培养；③将培养液梯度稀释并涂布于CMC固体培养基B；④将B中长出的菌落用牙签点种至CMC固体培养基C的同一位置；⑤向培养基B中加入刚果红，观察透明圈出现情况。下列说法错误的是（ ）
A. CMC培养基应以纤维素为唯一碳源，培养基A和B的区别在于有无琼脂
B. 用CMC液体培养基培养和分瓶有利于增加纤维素分解菌种类
C. 透明圈和菌落半径的比值大小可反映纤维素分解菌的分解能力强弱，应挑取比值较大的菌落用于培养
D. 培养基B起到鉴别作用，培养基C有利于对原菌种进行保存和挑选
17. 中国科研团队利用一只流产的雌性猕猴胚胎的成纤维细胞经克隆得到一对克隆猴“姐妹花”，它们的诞生具有重大意义。其中几个关键的技术创新与突破有：①在将供体细胞注入去核的卵母细胞前用灭活的病毒短暂处理；②通过反复试验，可以在10秒之内对卵母细胞进行去核操作，在15秒之内将供体细胞注入到去核的卵母细胞里；③将组蛋白去甲基化酶的mRNA和组蛋白脱乙酰酶抑制剂注入重构胚。以下相关叙述正确的是（ ）
A. 灭活是指用物理或化学手段破坏病毒或细菌的抗原结构使其失去感染能力
B. 克隆猴与人类遗传背景更接近，以其为模型研发药物可有效缩短药物研发进程
C. 组蛋白去甲基化和乙酰化有利于基因的表达从而促进重构胚的发育
D. 胚胎移植时进行同期发情处理，目的是降低代孕母猴对克隆猴“姐妹花”的免疫排斥反应
18. 荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针（探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段），当TaqDNA聚合酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则
B. 反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量关系不大
C. 若用cDNA（部分基因文库）作模板，上述技术也可检测某基因的转录水平
D. TaqDNA聚合酶催化DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸
19. 植物生物反应器主要以整株植物、植物组织或植物悬浮细胞为加工场所，生产药物蛋白。叶绿体遗传转化体系是近年发展起来的一种新的植物生物反应器。叶绿体转化是以同源重组原理将外源目的基因整合到目标叶绿体基因组中的一种方式，是一种高表达、安全性极高的遗传转化方法。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 植物生物反应器涉及的现代生物学技术是基因工程和植物细胞工程
B. 构建的基因表达载体中含有叶绿体特异启动子，使得目的基因只能在叶绿体中表达
C. 植物叶绿体表达体系可以防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散
D. 把目的基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子一定含有此目的基因
20. 某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期待能获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是（ ）
A. Gata3基因的启动子也能控制GFP基因的表达
B. 翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白
C. 2号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子，4号条带的小鼠是野生型
D. 若用引物1和引物3进行PCR，将不利于区分杂合子和纯合子
第Ⅱ卷（共55分）
三、非选择题（本题共5小题，共55分）
21. 微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题：
（1）已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是____。依照物理性质划分，驯化培养基属于____培养基，其中蛋白胨可提供____（至少答两点）。
（2）用于筛选的样品应来自____的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为____。
（3）将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的培养基C，培养24小时后，通过测定培养基中____，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了4个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、312、253，测得培养基C中菌落数为1.25×107个/mL，则涂布的菌液Y为____mL。该统计数据往往比活菌的实际数目____（填“多”或“少”），理由是____。
22. 紫草是一种重要的药用植物，其根部富含红色的萘醌类次生代谢产物——紫草宁及其衍生物。它们具有抗菌、消炎、活血、诱导癌细胞凋亡等功效，同时也是一种天然染料。科研人员利用紫草新生的营养芽为外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中进行悬浮培养，以获得更多的紫草宁。下图表示获得紫草宁的两种工艺路线。
（1）若要通过植物组培获得脱毒紫草植株，应优先选择紫草植株的____部位作为外植体，原因是____（答出两点）。
（2）外植体需经____处理，常用的试剂有____（答出两种即可）。
（3）在设计紫草植物组培培养基时，培养基中需要加入蔗糖，蔗糖的作用是____（答出两点）。
（4）研究人员将培养的愈伤组织分别接种到含有不同比例NAA（生长素类似物）和KT（细胞分裂素类似物）的培养基中培养。实验处理与结果如下表：
依据实验结果，可以得出的结论是：植物生长调节剂（NAA和KT）的比例会影响愈伤组织的分化，具体表现为____。
（5）通过高产细胞株提取细胞培养物途径中，紫草细胞的生长曲线如下图所示：
采用该途径时，需用____处理愈伤组织以获得单细胞。实验结果表明：接种后第3天左右，紫草宁及其衍生物开始形成；对数生长期及直线生长期，紫草宁含量逐步上升；静止期，紫草宁形成速度加快至最高水平。这说明细胞分裂生长缓慢____（填“有利于”或“不利于”）目的产物的形成。
23. 双特异性抗体（BsAb）是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原两个不同抗原表位相结合，双特异性抗体在自然状态下并不存在，可以通过重组DNA或细胞融合技术人工制备实现。长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术生产双特异性抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图示。回答下列问题。
（1）图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是_____。过程③所用的HAT培养基从用途上看属于选择培养基，在该培养基上，_____细胞不能生长，能生长的细胞具有的特点是_____。
（2）过程④中将杂交瘤细胞进行多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，然后利用_____原理检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体的优点有_____。
（3）图1方框内至少需要经过_____次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞因为_____（答出2点）和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_____。
24. 为使甘蓝具有抗除草剂能力，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入甘蓝植株，获得抗草甘膦转基因甘蓝。
（1）草甘膦抗性基因一条链的两端序列如下，采用PCR技术获取和扩增草甘膦抗性基因，应选用的引物组合为____。
A. 5’-CTTGGATGAT-3’和5’-TCTGTTGAAT-3’
B. 5’-CTTGGATGAT-3’和5’-TAAGTTGTCT-3’
C. 5’-ATTCAACAGA-3’和5’-ATCATCCAAG-3’
D. 5’-ATTCAACAGA-3’和5’-GAACCTACTA-3’
（2）与细胞内DNA复制相比，PCR技术扩增基因的特点是____（从酶的角度答出2点）。
（3）步骤②用____处理农杆菌后获得感受态细胞，以便将重组质粒导入。步骤③将农杆菌与甘蓝愈伤组织共培养后，在步骤④的培养基中添加____以便筛选出含目的基因的甘蓝植株。
（4）若目的基因用BamHI和BglII剪切，质粒用BamHI剪切，酶切后的目的基因存在正向与反向两种连接方式，可用____酶对两种重组质粒进行剪切。通过____技术分析产物大小进行区分，如下图所示，图中____（样品1/样品2）为所需的基因表达载体。
（5）若要检测转基因甘蓝植株是否产生抗除草剂蛋白，比较简单的方法是____。
25. 生态文明建设已成为我国的基本国策。水中雌激素类物质（E物质）污染会导致鱼类雌性化等异常，并通过食物链影响人体健康和生态安全。原产南亚的斑马鱼，其肌细胞、生殖细胞等存在E物质受体，且幼体透明。科学家将绿色荧光蛋白（GFP）等基因转入斑马鱼，建立了一种经济且快速的水体E物质监测方法。
（1）将基因表达载体导入斑马鱼受精卵的最佳方式是____。
（2）为监测E物质，研究者设计了下图所示的两种方案制备转基因斑马鱼，其中ERE和酵母来源的UAS是两种诱导型启动子，分别被E物质-受体复合物和酵母来源的Gal4蛋白特异性激活，启动下游基因表达。与方案1相比，方案2的主要优势是____，因而被用于制备监测鱼（MO）。
（3）现拟制备一种不育的监测鱼SM，用于实际监测。SM需经MO和另一亲本（X）杂交获得。欲获得X，需从以下选项中选择启动子和基因，构建基因表达载体并转入野生型斑马鱼受精卵，经培育后进行筛选。请将选项的序号填入相应的横线上。
Ⅰ．启动子：____
①ERE
②UAS
③使基因仅在生殖细胞表达的启动子（P生）
④使基因仅在肌细胞表达的启动子（P肌）
Ⅱ．基因：____
A．GFP
B．Gal4
C．雌激素受体基因（ER）
D．仅导致生殖细胞凋亡的基因（dg）
（4）为鉴定筛选出的受体细胞中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。如图所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的一对引物是____。某学生尝试用图中另外一对引物从某一受体细胞的质粒中扩增出了400bp片段，原因是____。
（5）SM不育的原因是：成体SM自身产生雌激素，与受体结合后____造成不育。编号
1
2
3
4
5
6
7
含量（mg/L）
NAA
0
0
2
0.2
2
0.02
2
KT
0
2
0
2
0.2
2
0.02
分化情况
不分化
分化芽
分化根
分化芽
不分化
分化芽
分化根
限制酶
识别序列和切割位点
BamHI
—G′GATCC—
BglII
—A′GATCT—
EcRI
—G′AATTC—
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