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河南省郑州市中原区郑州学森实验学校2023-2024学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版）
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一．选择题（每题3分，共60分）
1. 河南特色小吃“甜酒浮子”的主要制作流程：用温开水把甜酒曲化开→加入白米饭中拌匀压实，在中间挖个坑，盖上盖子→置于温度适宜的地方1～2天。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 制作“甜酒浮子”所用的酵母菌来自空气中
B. 白米饭可为酵母菌提供碳源、氮源、无机盐等营养
C. “中间挖个坑”的操作有利于酵母菌快速生长繁殖
D. 将温度维持在18~30℃有利于“甜酒浮子”制作
【答案】A
【解析】
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
【详解】A、制作“甜酒浮子”所用的酵母菌来甜酒曲中的菌种，A错误；
B、白米饭营养丰富，可为酵母菌提供碳源、氮源、无机盐等营养，B正确；
C、“中间挖个坑”可多存储一些空气，有利于酵母菌先进行有氧呼吸并增殖，C正确；
D、发酵需要适宜的温度在25℃左右，则将温度维持在18~30℃有利于“甜酒浮子”的制作，D正确。
故选A。
2. 下列关于传统发酵技术的叙述正确的是（ ）
A. 利用果酒制作果醋过程中，只需将温度提高到30℃～35℃即可进行果醋发酵
B. 果酒制作过程中发酵液pH先上升后下降，果醋制作过程中发酵液pH一直下降
C. 泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水，且在发酵过程中及时补水
D. 制作泡菜时，为了防止杂菌污染和加速醋酸菌发酵，可加入灭菌后的陈泡菜水
【答案】C
【解析】
【分析】1、果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核，属于真核生物。适宜酵母菌发酵的温度范围是18~30°C。
2、果醋制作的原理是在氧气充足的条件下，醋酸菌将葡萄糖或者乙醇转化成醋酸，醋酸菌无核膜包被的细胞核，是原核生物，属于好氧菌，醋酸菌适宜生长的温度范围是30-35℃。
3、泡菜制作的原理是在无氧环境下乳酸菌将葡萄糖转变为乳酸，乳酸菌是严格厌氧菌，因此泡菜制作过程中需要创造无氧环境。
【详解】A、利用果酒制作果醋过程中，需将温度提高到30℃～35℃、接种醋酸菌、充入氧气可进行果醋发酵，A错误；
B、果酒制作过程中酵母菌呼吸作用产生CO2，使培养液pH下降，B错误；
C、泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水创造无氧环境，C正确；
D、加入陈泡菜水的目的是增加乳酸菌的数量，使乳酸菌在短时间内发展为优势物种，而灭菌后的陈泡菜水中乳酸菌已经死亡，达不到这个效果，D错误；
故选C。
3. 鱼茶是海南黎族的一种传统发酵食品，鱼茶富含多种人体所需的氨基酸和蛋白质，具有润肺清肠、促进消化、养颜美肤和缓解血管硬化等作用。其制作方法是生鱼加盐、姜、蒜等处理后、拌入煮熟的干米饭，在特定条件下发酵一段时间后，开坛即可食用。鱼茶的发酵菌群主要是乳酸菌，发酵后的鱼肉蛋白质更易被人体消化吸收。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 鱼茶制作过程中，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸和CO2
B. 食用鱼茶可能会发生误食寄生虫或其他致病微生物的风险
C. 制作鱼茶过程中要通入无菌空气并搅拌以利于菌种的繁殖
D. 海南黎族家庭制作鱼茶所需菌种需经精心选育和扩大培养
【答案】B
【解析】
【分析】泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。
【详解】A、乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，不会生成CO2，A错误；
B、鱼茶是生鱼直接制作的，可能会有误食寄生虫或其他致病微生物的风险，B正确；
C、乳酸菌是厌氧型细菌，制作鱼茶过程中要密封发酵，C错误；
D、传统发酵技术中菌种来自于自然环境中，D错误。
故选B。
4. 谷氨酸除用于制造味精外，还可以用来治疗神经衰弱以及配制营养注射液等。通过发酵工程可以大量制备谷氨酸，下列有关谷氨酸发酵生产的叙述，错误的是（ ）
A. 发酵之前要对谷氨酸菌种进行扩大培养
B. 若发酵产品是产谷氨酸菌种，可采用过滤等方法分离
C. 发酵过程中，在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸
D. 分离、提纯发酵产物是发酵过程的中心环节
【答案】D
【解析】
【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产物的分离、提纯等方面；发酵工程以其生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉、产物专一、废弃物对环境的污染小和容易处理等特点，在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵工业。
【详解】A、发酵罐的体积很大，发酵之前要对谷氨酸菌种进行扩大培养，A正确；
B、如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品；故若发酵产品是产谷氨酸菌种，可采用过滤、沉淀等方法分离，B正确；
C、环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。例如，谷氨酸的发酵生产，在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，C正确；
D、发酵罐内的发酵是发酵过程的中心环节，D错误。
故选D。
5. 科研人员进行了土壤中分解尿素的细菌的分离和纯化培养，实验流程如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 步骤①获取土壤样品要遵循无菌操作原则，土壤样品要进行高压蒸汽灭菌
B. 步骤④选择的纯化培养基，加入尿素的目的是为微生物提供碳源和氮源
C. 通过步骤④培养基的筛选，科研人员可以获得土壤中分解尿素的细菌
D. 若步骤④平板上统计细菌菌落平均数为150，则每克土壤含该种细菌约1.5×108个
【答案】C
【解析】
【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。
【详解】A、步骤①土壤样品的获取过程要遵循无菌操作原则，但不能进行高压蒸汽灭菌，不然会杀死土壤中的根瘤菌，A错误；
B、步骤④选择的纯化培养基的营养成分应该包括碳源、氮源水和无机盐等，加入尿素的目的是为微生物提供氮源，B错误；
C、通过步骤④培养基的筛选，以尿素作为唯一氮源的培养基可以分离得到能分解尿素的细菌，C正确；
D、将10g土壤先稀释100倍，再进行梯度稀释1000倍，然后取0.1mL进行涂布平板，若步骤④平板上统计的菌落数平均为150个，则每克土壤含固氮菌约150÷0.1×100×1000÷10=1.5×107个，D错误。
故选C。
6. 为筛选高效降解淀粉的微生物，提高“生化"处理的效率，研究人员将厨余垃圾机械化处理后加入装有无菌水的锥形瓶中制备厨余垃圾浸出液，然后进行如图所示操作。下列叙述错误的是（ ）
A. 厨余垃圾浸出液接种在X培养基上，采用的是稀释涂布平板法
B. X培养基中①处菌落的周围没有透明圈，可能是自养型的杂菌
C. 获得高效降解淀粉的微生物，应挑⑤处的菌落接种到Y培养基
D. 微生物在Y培养基中与营养物质接触更充分，更容易形成菌落
【答案】D
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、分析题图可知，X培养基上接种细菌采用稀释涂布平板法，A正确；
B、X培养基中①处菌落的周围没有透明圈，可能该微生物可以利用空气中的二氧化碳作为碳源，是自养型的杂菌，B正确；
C、⑤处透明圈最大，说明降解淀粉的能力最强，故为获得高效降解淀粉的微生物，应挑⑤处的菌落接种到Y培养基，C正确；
D、Y培养基是液体培养基，不能形成菌落，D错误。
故选D。
7. 高浓度的铵盐对海水养殖中的对虾有一定的毒害作用，是制约其大规模养殖的环境因素之一，具有高降解能力的硝化细菌可有效净化水体中铵盐，降低对虾的死亡率。科研人员从当地对虾养殖池塘中筛选出对铵盐降解率高且稳定的硝化细菌菌株，将等量的三种候选菌甲、乙、丙分别接入等浓度的含铵盐培养液中，在适宜条件下培养一段时间后检测培养液中的铵盐浓度，操作流程如图1所示，结果如图2 所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 图1中M培养基上进行的是利用平板划线法纯化菌种，该过程中接种环需要灼烧5次
B. 图1中将候选菌接入含铵盐培养液的目的是对硝化细菌扩大化培养，需要不断振荡
C. 据图2分析，应选择候选菌甲作为菌种进行后续培养
D. 当配制选择培养基时，需要以铵盐为唯一氮源从而筛选出硝化细菌
【答案】D
【解析】
【分析】纯化菌种时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法，由图1可知本实验采用的是平板划线法。将等量的三种候选菌甲、乙、丙分别接入等浓度的含铵盐培养液中，在适宜条件下培养一段时间后，由图2可知，菌种乙对铵盐的降解能力最强。
【详解】A、采用平板划线法接种微生物时，每次划线前后都要灼烧接种环，图1所示的操作过程中划线5次，故接种环需要灼烧6次，A错误；
B、图1中将等量的三种候选菌甲、乙、丙分别接入等浓度的含铵盐培养液中，目的是检查候选菌甲、乙、丙对铵盐的降解能力，B错误；
C、据图2分析，乙的铵盐浓度最低，说明乙菌种对铵盐的降解效果最好，应选择候选菌乙作为菌种进行后续培养，C错误；
D、为了筛选出对铵盐降解率高且稳定的硝化细菌菌株，在配制选择培养基时，需要以铵盐为唯一氮源，D正确。
故选D。
8. 地膜的主要成分是聚乙烯，化学式是（C2H4）n。残留在土壤中的地膜难以被降解，为筛选出高效降解地膜的细菌，研究人员进行了如图所示操作。下列叙述错误的是（ ）
A. 富集培养过程中摇床振荡便于微生物获取营养和氧气
B. 富集培养后，利用平板划线法将微生物接种于X培养基
C. 应挑选降解地膜最高效的细菌⑤接种到Y培养基
D. 若要研究目的菌的生长规律，可用细菌计数板计数方法进行计数
【答案】B
【解析】
【分析】在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。
【详解】A、富集培养过程中摇床振荡便于微生物与营养物质充分接触，并增加溶氧量，所以摇床振荡便于微生物获取营养和氧气，A正确；
B、富集培养后，利用稀释涂布平板法将微生物接种于X培养基，B错误；
C、抑菌圈越大，说明降解地膜的效果越好，故可挑选⑤中的单菌落接种到Y培养基上，C正确；
D、若要研究目的菌的生长规律，可用细菌计数板计数方法进行计数，D正确。
故选B。
9. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA的菌种，流程图如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 步骤②可用稀释涂布平板法或平板划线法接种
B. 步骤③培养时为防止皿盖上的冷凝水滴落一般需要倒置培养皿
C. 步骤④扩大培养时需要用液体培养基并振荡培养
D. 步骤⑤用细菌计数板计数结果一般小于稀释涂布平板法计数结果
【答案】D
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、采用平板划线法或稀释涂布平板法，能将单个微生物分散在固体培养基上。之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物，所以步骤②可用稀释涂布平板法或平板划线法接种，A正确；
B、步骤③培养时为防止皿盖上的冷凝水滴落一般需要倒置培养皿，B正确；
C、步骤④扩大培养时需要用液体培养基，振荡培养有利于增加培养基中的溶解氧，并使菌体与培养基充分接触利用培养基，C正确；
D、稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。用细菌计数板计数时，计数结果一般是死菌数和活菌数的总和，因此会比实际值偏大，D错误。
故选D。
10. 某种物质A（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解A．研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株。图中③将M中的菌液稀释一定倍数后，取0．1mL涂布到平板上，初步估测摇瓶M中1mL菌液中细菌数为2．4x108个。相关叙述正确的是（ ）
A. 实验时，淤泥及盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
B. 乙中需要加琼脂和物质A等，实验需设平行重复实验，无需另外设置空白对照
C. ③接种方法为稀释涂布平板法，涂布时用涂布器蘸取菌液均匀涂布于平板上
D. 若乙平板上菌落数平均为240个，则接种的菌液的稀释倍数为105
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：①为淤泥取样进行稀释，②为接种到液体培养基上，③稀释涂布平板法接种到以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上，④为挑取单菌落接种，⑤在以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上进一步筛选出高效降解A的菌株。
【详解】A、实验时，要从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株，则图①为淤泥取样进行稀释，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，淤泥中有菌种，因此不能进行灭菌处理；盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，A错误；
B、识图分析可知，③是稀释涂布平板法接种到以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上，因此乙为固体培养基，需要加琼脂和物质A等，为了提高准确度，实验需设平行重复实验，且需要另外设置空白对照，检测培养基配制是否合格，B错误；
C、③接种方法为稀释涂布平板法，接种工具是涂布器，但是不能用涂布器蘸取菌液，应该将菌液用微量移液管加入到培养基中，用涂布器进行均匀涂抹，C错误；
D、若乙平板上长出的菌落数平均为240个，假设稀释倍数为a，根据摇瓶M中1mL菌液中细菌数为2.4×108个，在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，则有240×a÷0.1=2.4×108，则稀释倍数a=105，D正确。
故选D。
11. 铁皮石斛是非常好药材，但因为铁皮石斛自然繁殖力极弱，生长缓慢，再加上人们掠夺式采挖，资源已接近枯竭，植物组织培养技术为铁皮石斛的繁殖提供了新思路。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 利用铁皮石斛的体细胞进行组织培养的过程中发生了染色体数目的变异
B. 诱导愈伤组织形成和后续培养过程中，每日需要给予适当时间和适当强度的光照
C. 为获得无菌培养物，除了要无菌操作外，还需要对铁皮石斛的外植体进行严格灭菌
D. 植物组织培养过程中用适当诱变因素处理，可能筛选到高产的突变体进而培养成新品种
【答案】D
【解析】
【分析】植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的形成。
【详解】A、利用铁皮石斛的体细胞进行组织培养的过程中可能会发生染色体数目的变异，A 错误；
B、诱导愈伤组织期间不需要光，后续培养过程中，为了诱导叶绿素的形成，每日需要给予适当时间和适当强度的光照，B错误；
C、需要对外植体进行消毒，不能进行灭菌处理，以保持外植体的活性，C错误；
D、植物组织培养过程中，由于培养的细胞一直处于不断的分生状态，容易受到培养条件和外界压力的影响而发生突变，因此植物组织培养过程中用适当诱变因素处理，可能筛选到高产的突变体进而培养成新品种，D正确。
故选D。
12. 为拓宽蔬菜的育种资源，科学家用大白菜（2n=20）、青花菜（2n=18）和叶用芥菜（2n=36）为材料，进行体细胞融合获得大量再生植株。染色体计数显示，再生植株染色体数为38~64，未发现与3个亲本染色体总数一致的个体。下列说法正确的是（ ）
A. 杂种细胞培育成再生植株的过程中发生基因重组
B. 染色体数为38的再生植株，一定是大白菜和青花菜细胞的融合
C. 再生植株的染色体数目说明，三个细胞融合时发生了染色体的丢失
D. 再生植株的获得实现了远缘杂交育种，且获得的再生植株均可育
【答案】C
【解析】
【分析】植物细胞具有细胞壁，在进行体细胞融合之前需先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体，诱导原生质体融合的物理法包括振荡、离心、电激等，化学法一般是用聚乙二醇作为诱导剂来诱导细胞融合。
【详解】A、杂种细胞培育成再生植株的过程中发生的是有丝分裂，而自然状态下基因重组发生在减数分裂过程中，A错误；
BC、分析题意，大白菜的染色体数为20，青花菜的染色体数为18，叶用芥菜的染色体数目是36，三个细胞融合，染色体总数理论上是20+18+36=74，而事实上再生植株的染色体数为38~64，因此三个细胞融合时发生了染色体的丢失,染色体数为38的再生植株，最可能是大白菜和青花菜细胞的融合，也可能是三个细胞融合过程发生了染色体的丢失，B错误，C正确；
D、再生植株的获得实现了不同物种间的远缘杂交育种，但获得的再生植株的染色体不完全同源，减数分裂时可能会出现联会紊乱，因此再生植株不一定可育，D错误。
故选C。
13. “当归补血汤”是出自《内外伤辨惑论》的中药配方，主要组成中药是当归和黄芪，具有一定的补气生血的功效。科研人员想利用现代生物技术将当归与黄芪进行体细胞杂交，尝试培育能产生两种有效成分的植物，培育过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 过程①需要用纤维素酶或胰蛋白酶获得原生质体
B. 过程②可以用聚乙二醇或高pH诱导融合
C. 过程②结束后，原生质体融合代表植物体细胞杂交成功
D. 过程④和⑤的培养基中植物激素的种类和比例相同
【答案】B
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
2、植物体细胞杂交过程分析：（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂；（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成； （3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。
3、分析题图可知，①表示获取原生质体，②表示诱导原生质体融合，③表示获得杂种细胞，④表示去分化过程，⑤表示再分化获得杂种植物。
【详解】A、过程①需要用纤维素酶和果胶酶获得原生质体，A错误；
B、过程②表示人工诱导原生质体融合，方法可以分为两大类—物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等，B正确；
C、过程②结束后，细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成，即新的细胞壁生成代表植物体细胞杂交成功，C错误；
D、过程④和⑤的培养基中植物激素的种类和比例不相同，D错误。
故选B。
14. 甘薯由于能增强免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止动脉硬化等越来越被人们喜爱。但甘薯属无性繁殖作物，同时又是同源六倍体，具有自交不育和杂交不亲和性，这使甘薯生产和育种存在诸多常规方法难于解决的问题。下列相关操作不合理的是（ ）
A. 利用组织培养形成的胚状体制作人工种子，解决种苗用量大、成本高的问题
B. 利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株具备抗病毒的能力，产品质量得到提高
C. 利用原生质体融合实现体细胞杂交，可以克服杂交不亲和，充分利用遗传资源
D. 利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高变异频率，大大缩短育种年限
【答案】B
【解析】
【分析】植物的体细胞杂交是将不同种的植物体细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【详解】A、植物细胞工程应用之一是利用胚状体包囊人工胚乳和人工种皮制成人工种子，实现大规模生产，从而降低成本，A正确；
B、茎尖等分裂旺盛部位病毒极少或无病毒感染，所以利用茎尖分生组织培养出无病毒且保持优良性状的幼苗，脱毒苗不等于抗毒苗，通过基因工程将抗病毒基因转移至受体细胞从而培育出抗病毒的转基因植物，B错误；
C、通过植物体细胞杂交技术可以实现两个植物物种间的体细胞杂交，得到同时具有两种遗传物质的植物，可以实现种间的杂交，克服了远缘杂交不亲和的障碍，C正确；
D、愈伤组织具有分裂旺盛的优点，适于诱变育种的取材，能提高突变频率，D正确。
故选B。
15. 如图为动物细胞培养的基本过程，以下叙述错误的是（ ）
A. a中放置的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞分裂能力强
B. c过程属于原代培养，d过程属于传代培养
C. c、d瓶中的培养液需要加入血清等天然成分
D. 将培养的细胞置于95%O2和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
【详解】A、a中放置的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞分裂能力强，因而可以作为动物细胞培养的材料，A正确；
B、细胞培养过程中没有分瓶之前的培养称为原代培养，分瓶之后的培养称为传代培养，即c过程属于原代培养，d过程属于传代培养，B正确；
C、c、d瓶中的培养液属于合成培养基，通常还需要加入血清等天然成分，因为目前对于动物细胞增殖所需要的营养尚不完全清楚，C正确；
D、将培养的细胞置于95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养，其中二氧化碳起到了维持pH相对稳定的作用，D错误。
故选D。
16. 我国研究人员将体外培养的胎猴体细胞注射到去核卵母细胞，形成重构胚，最终培育了两只克隆猴“中中”和“华华”。以下说法正确的是（ ）
A. 体外培养体细胞的原理是动物体细胞具有全能性
B. 核移植技术中卵母细胞应该完成两次分裂后去核
C. 体细胞注射到透明带内体现了细胞膜具有流动性
D. 代孕母猴对植入的胚胎几乎不发生免疫排斥反应
【答案】D
【解析】
【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电刺激等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。
【详解】A、体外培养体细胞的原理是细胞增殖，A错误；
B、卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核，不是完成两次，B错误；
C、透明带不是生物膜，不能体现细胞膜具有流动性，C错误；
D、代孕母猴对植入的胚胎几乎不发生免疫排斥反应，才能保证移植的成功率，D正确。
故选D。
17. 利用治疗性克隆技术治疗胰岛功能异常型糖尿病患者的基本流程如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A. 胚胎干细胞可以取自囊胚期的内细胞团
B. 细胞培养需要含有95%氧气和5%二氧化碳的气体条件
C. 该流程利用了细胞培养、细胞核移植和胚胎移植技术
D. 患者对注入的胰岛细胞会产生免疫排斥
【答案】A
【解析】
【分析】治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞(如神经细胞、肌肉细胞和血细胞)，用于治疗。
【详解】A、囊胚期的内细胞团细胞具有全能性，可以作为胚胎干细胞，A正确；
B、细胞培养需要含有95%的空气和5%的二氧化碳的气体条件，B错误；
C、此流程中没有利用胚胎移植技术，C错误；
D、培养的健康胰岛细胞是由患者自身的胚胎干细胞发育而成，患者对注入的胰岛细胞不发生免疫排斥，D错误。
故选A。
18. 基因组印记（指基因根据亲代的不同而有不同的表达，印记基因的存在可导致细胞中等位基因一个表达另一个不表达）阻碍了哺乳动物的孤雌生殖。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 推测孤雌小鼠体细胞中染色体数目是卵母细胞中染色体数目的一半
B. 体外培养卵母细胞时，培养皿甲需定期更换培养基以去除代谢产物
C. 图中乙为囊胚，其中内细胞团部分细胞将来发育为胎盘、胎膜
D. 基因组印记导致一对等位基因中的一个基因发生突变而不能表达
【答案】B
【解析】
【分析】题图分析，从卵泡中取出卵母细胞，再将经过甲基化处理的卵母细胞进行早期胚胎培养、胚胎移植等获得孤雌小鼠。表观遗传是指DNA序列不发生变化，但基因的表达却发生了可遗传的改变，即基因型未发生变化而表现型却发生了改变，如DNA的甲基化，甲基化的基因不能与RNA聚合酶结合，故无法进行转录产生mRNA，也就无法进行翻译，最终无法合成相应蛋白，从而抑制了基因的表达。
【详解】A、“孤雌小鼠”是由修饰后的次级卵母细胞和一个第二极体结合后发育形成的，孤雌小鼠体细胞中染色体数目和卵母细胞中染色体数目相同，A错误；
B、体外培养卵母细胞时，培养皿甲需定期更换培养基以去除代谢产物，有利于卵母细胞的培养，B正确；
C、图中乙为囊胚，其滋养层细胞将来发育为胎盘、胎膜，C错误；
D、基因组印记导致一对等位基因中一个基因发生甲基化而不能表达，没有发生基因突变，D错误。
故选B。
19. 为了降低对国外奶牛种质的过度依赖，提高优良母牛的扩繁速度成为关键，而试管牛技术产业化则可以有效解决这一难题。如图是试管奶牛的生产流程示意图，下列有关叙述正确的是（ ）
A. ①是核移植技术，反映了动物细胞核具有全能性
B. 从优良母牛中采集卵母细胞可直接与获能精子进行体外受精
C. 在过程①中精卵识别阶段时，卵细胞正处于减数第二次分裂后期
D. 进行过程②胚胎移植前，需取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定
【答案】D
【解析】
【分析】1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。
【详解】A、由图可知，①是体外受精，是精卵结合的过程，A错误；
B、从卵巢中采集的卵母细胞需培养成熟（减数第二次分裂中期）后才可与获能的精子进行体外受精，B错误；
C、在过程①中精卵识别阶段时，卵细胞正处于减数第二次分裂中期，C错误；
D、在进行胚胎移植之前，需对早期胚胎进行性别鉴定，可取囊胚期的滋养层细胞进行DNA分析，D正确。
故选D。
20. 如图表示胚胎分割的过程，下列有关胚胎分割的说法，错误的是（ ）
A. 为了获得良种后代，可以取少量滋养层细胞进行DNA分析
B. 细胞A一定是受精卵
C. 为了获得更多的胚胎，采用胚胎分割技术，属于无性生殖或克隆
D. 对胚胎进行分割后得到的个体性别相同
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术，属于无性繁殖。该过程的材料是发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。（桑椹胚至囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割）操作过程中需要对囊胚阶段的胚胎分割时，要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发展。
【详解】A、为了获得良种后代，可在囊胚阶段取样滋养层进行DNA分析，因为滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜，不会对胚胎的发育造成影响，A 正确；
B、细胞A可能是受精卵、重组细胞或早期还未分化的胚胎细胞等，B错误；
C、胚胎分割可将早期胚胎分为2等份、4等份或8等份等，来自同一胚胎的遗传物质相同，因此属于无性生殖或克隆的方法之一，C正确；
D、对胚胎进行分割后得到同卵双胎或多胎，其染色体组成和遗传物质相同，所以个体的性别相同，D正确。
故选B。
二、填空题（共40分）
21. 利用微生物的发酵作用为人类造福，历史悠久，前景广阔。从传统发酵到现代大规模生产的发酵工程，不同微生物具有各自独特的作用。回答下列相关问题：
（1）利用传统发酵技术制作葡萄酒不需要对葡萄汁进行灭菌处理，原因是______。利用图1装置制作葡萄酒的过程中，发酵过程中需要定期打开______（填“A”或“B”）管的夹子放出产生的气体。
（2）夏天，葡萄酒暴露在空气中会变酸，这是因为当温度适宜、氧气______（填“充足”或“缺乏”）、糖源______（填“充足”或“缺乏”）时，醋酸菌能利用乙醇产生乙酸。
（3）工业生产实践中，可以先利用纤维素分解菌处理植物秸秆，再通过酵母菌发酵最终可以获得乙醇。为了分离纤维素分解菌，需要配制______的选择培养基。
（4）某同学欲从牛的瘤胃中分离得到纤维素分解菌。他将牛的瘤胃菌种提取液接种到适宜的培养基中，调节pH及温度至适宜条件，并持续通入无菌空气。一段时间后发现培养基中几乎没有菌落，原因可能是______。
【答案】（1） ①. 灭菌会杀死葡萄自身携带的野生酵母菌 ②. B
（2） ①. 充足 ②. 缺乏
（3）以纤维素为唯一氮源
（4）瘤胃中的微生物为厌氧菌，接触空气会死亡
【解析】
【分析】醋酸菌是好氧细菌，当氧气、糖源都充足时能将葡萄糖分解成乙酸；当缺少糖源时，则直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸。醋酸菌可用于制作各种风味的醋。
1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18～30℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【小问1详解】
在家庭制作果酒时，需要的菌种是野生的酵母菌，灭菌会杀死葡萄自身携带的野生酵母菌，因而利用传统发酵技术制作葡萄酒不需要对葡萄汁进行灭菌处理。制作葡萄酒的过程中，B管排气管口没有伸入液面，发酵过程中需要定期打开B管的夹子放出二氧化碳气体。
【小问2详解】
参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌为好氧菌，在夏天，葡萄酒暴露在空气中会变酸，这是因为当氧气充足、糖源缺乏时，醋酸菌能利用乙醇产生醋酸。
【小问3详解】
纤维素分解菌能合成纤维素酶，将纤维素分解，从中获取碳源，而其它微生物因不能合成纤维素酶而不能利用纤维素，故在工业生产实践中，为了分离纤维素分解菌，需要配制以纤维素为唯一碳源的选择培养基。
【小问4详解】
由于瘤胃中的微生物为厌氧菌，接触空气后会死亡（要在无氧条件下培养），所以将牛的瘤胃菌种提取液接种到适宜的培养基中，调节pH及温度至适宜条件，并持续通入无菌空气，一段时间后会发现培养基中几乎没有菌落。
22. 对厨余垃圾正确分类是减少细菌滋生污染环境的重要保障。某研究小组从一餐厨垃圾处理厂分离了能高效降解淀粉、脂肪等的细菌菌株并进行扩大培养和筛选，部分操作流程如下，请分析回答：
（1）实验室中，配置好的培养基通常采取______方式进行灭菌；倒平板时，防止杂菌污染的操作有______（写出两点）。图中接种后培养的效果图解，可判断其接种方法是______
（2）若以上流程图是筛选降解淀粉的微生物的培养基，则应______（加入/不加入）葡萄糖为微生物提供能源物质。鉴别降解脂肪的微生物的培养基中可以加入______作为指示剂。
（3）进行扩大培养的培养基与培养皿中的培养基，成分上的主要区别是______。
（4）经过步骤③，培养皿中出现了3种形态、颜色不一的菌落，这些菌落可以在此培养基上生长的重要因素之一是______，这些菌落之间存在______的种间关系。
（5）菌落甲与乙周围都产生了透明圈（白色表示无蓝色，深色表示蓝色），产生透明圈的原因是______。
【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌##湿热灭菌 ②. 在超净工作台中操作；拔掉棉塞后，锥形瓶口通过酒精灯火焰进行灼烧灭菌；左手将培养皿打开一条缝，右手倒培养基，及时盖上培养皿皿盖；在酒精灯火焰旁倒平板 ③. 稀释涂布平板法
（2） ①. 不加入 ②. 苏丹Ⅲ染液
（3）培养皿中是固体培养基，需要加入琼脂
（4） ①. 可以获得生存必需的碳源（有机物）或可以分解淀粉、脂肪 ②. 种间竞争
（5）淀粉被细菌分解后，不能被碘液染色，从而形成透明圈
【解析】
【分析】1、稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
2、培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。微生物培养基需要为微生物繁殖提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，此外还要满足微生物对特殊营养物质，pH和O2的需求。
【小问1详解】
配置好的培养基通常采取高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）；倒平板时，为防止杂菌污染，可在超净工作台中操作、拔掉棉塞后，锥形瓶口通过酒精灯火焰进行灼烧灭菌、左手将培养皿打开一条缝，右手倒培养基，及时盖上培养皿皿盖、在酒精灯火焰旁倒平板等；图中接种后培养皿上菌落分布较为均匀，故是稀释涂布平板法。
【小问2详解】
以上流程图是筛选降解淀粉的微生物的培养基，淀粉可作为碳源，因此培养基中不加入葡萄糖为微生物提供能源物质；脂肪可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，因此在鉴别降解脂肪的微生物的培养基中可以加入苏丹Ⅲ染液作为指示剂。
【小问3详解】
培养基M是扩大培养过程，可增加微生物的浓度，扩大培养的培养基为液体培养基，而通过③接种到选择培养基上，该过程是为了筛选分离高效降解淀粉、脂肪等的细菌菌株，即培养皿中的培养基为固体培养基，需要添加凝固剂琼脂。
【小问4详解】
选择培养基上有淀粉和脂肪，经过步骤③，培养皿中出现了3种形态、颜色不一的菌落，说明这些菌落可以获得生存必需的碳源（有机物）或可以分解淀粉、脂肪。这些菌落在空间和资源上相互竞争，因此种间关系为为种间竞争。
【小问5详解】
淀粉与碘液变蓝，淀粉被细菌分解后，不能被碘液染色，从而形成透明圈，菌落甲与乙可分解淀粉，因此周围都产生了透明圈。
23. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），过程如图1所示。
（1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自______。
（2）步骤①常用方法包括______融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
（3）过程②能在HAT选择培养基上生长的细胞是______，其特点是______，经过程②筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中进行过程③，原因是______。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行______培养的方式进行扩大培养。
（4）细胞内合成抗体时，其空间结构形成的场所主要是______。
（5）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致______。
（6）与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体一药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小，原因是______。
（7）制备单克隆抗体主要依赖的生物学技术有______和______。
（8）杂交瘤细胞的培养液中有各种营养物质，还需要添加______以补充细胞生长所需的未知营养物质。
【答案】（1）人的乳腺癌细胞
（2）PEG （3） ①. 杂交瘤细胞 ②. 既能大量增殖，又能产生特定抗体 ③. 小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种（筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体并不是单克隆抗体） ④. 体外
（4）内质网 （5）癌细胞凋亡
（6）将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤（靶点清楚，毒副作用小）
（7） ①. 动物细胞培养 ②. 动物细胞融合
（8）血清等一些天然成分
【解析】
【分析】由图1可知，①表示动物细胞的融合，②表示筛选杂交瘤细胞，③表示克隆化培养和专一抗体检测。
由图2可知，ADC不识别正常细胞，识别并结合乳腺癌细胞
【小问1详解】
要生产乳腺癌的单克隆抗体，应该选择乳腺癌细胞作为抗原对小鼠进行免疫处理。
【小问2详解】
①表示动物细胞的融合，常用化学药物PEG（聚乙二醇）处理，诱导细胞融合。
【小问3详解】
HAT培养基是特定的选择性培养基，只有杂交瘤细胞能在其上生长，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡。杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生特定抗体。②表示筛选杂交瘤细胞，由于从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种，筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体并不是单克隆抗体，故需要进行③克隆化培养和抗体检测；杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外（在培养液中）培养的方式进行扩大培养。
【小问4详解】
抗体的化学本质是蛋白质，合成场所是核糖体，需要经过内质网的加工才能形成特定的空间结构。
【小问5详解】
由图可知，ADC进入乳腺癌细胞，溶酶体可以将ADC水解，释放出的药物进入细胞质基质，最终作用于细胞核，引起乳腺癌细胞的凋亡。
【小问6详解】
因为将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤（靶点清楚，毒副作用小），故与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小。
【小问7详解】
制备单克隆抗体依赖的生物技术有动物细胞培养和动物细胞融合（诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合）等技术。
【小问8详解】
为补充细胞生长所需的未知营养物质和防止杂菌污染，需要在培养液中添加血清（含有细胞所必须的物质）和抗生素（避免杂菌污染）。
24. 2023年1月，由西北农林科技大学奶牛种业创新团队培育的首批优质克隆奶牛在宁夏灵武市出生，培育克隆奶牛的流程如图所示。回答下列问题：
（1）体外培养甲牛的体细胞时需给予一定量的O₂和CO₂，其中CO₂的主要作用是_____。若需获得大量卵母细胞，可用_____激素使乙牛超数排卵。卵母细胞去核前，需将其在体外培养至_____期。
（2）过程②表示_____，进行该过程前需对代孕丙牛进行_____处理。
（3）奶生丁的绝大部分性状和_____（填“甲”“乙”或“丙”）生的性状一致，理由是_____。
（4）与体细胞核移植技术相比，胚胎细胞核移植技术的成功率更高，原因是_____。
【答案】（1） ①. 维持培养液的pH ②. 促性腺 ③. 减Ⅱ中
（2） ①. 胚胎移植 ②. 同期发情
（3） ①. 甲 ②. 奶牛丁的绝大部分遗传物质来自甲牛
（4）胚胎细胞分化程度低，表现全能性较容易
【解析】
【分析】动物细胞核移植技术的一般步骤：①采集卵母细胞，体外培育到MII期，并通过显微操作去核；②将供体细胞注入去核的卵母细胞；③通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚；④用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程；⑤将胚胎移入受体（代孕母动物）体内，并发育成与供体遗传物质基本相同的个体。
【小问1详解】
动物细胞培养所需要的气体条件为95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。若需获得大量卵母细胞，可用促性腺激素使乙牛超数排卵。采集的卵母细胞需要在体外培养至MII期，此期的卵母细胞中含有促进细胞核全能性发挥的物质。
【小问2详解】
过程②表示重组胚胎后进行胚胎移植，植入代孕母体中，进行该过程前需对代孕丙牛进行同期发情，以保证其生理状态相似。
【小问3详解】
奶牛丁的绝大部分遗传物质来自甲牛，所以奶牛丁的绝大部分性状和甲牛的性状一致。
【小问4详解】
胚胎细胞相较于体细胞，细胞分化程度低，表现全能性较容易，因此，胚胎细胞核移植技术的成功率更高。
一．选择题（每题3分，共60分）
1. 河南特色小吃“甜酒浮子”的主要制作流程：用温开水把甜酒曲化开→加入白米饭中拌匀压实，在中间挖个坑，盖上盖子→置于温度适宜的地方1～2天。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 制作“甜酒浮子”所用的酵母菌来自空气中
B. 白米饭可为酵母菌提供碳源、氮源、无机盐等营养
C. “中间挖个坑”的操作有利于酵母菌快速生长繁殖
D. 将温度维持在18~30℃有利于“甜酒浮子”制作
【答案】A
【解析】
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
【详解】A、制作“甜酒浮子”所用的酵母菌来甜酒曲中的菌种，A错误；
B、白米饭营养丰富，可为酵母菌提供碳源、氮源、无机盐等营养，B正确；
C、“中间挖个坑”可多存储一些空气，有利于酵母菌先进行有氧呼吸并增殖，C正确；
D、发酵需要适宜的温度在25℃左右，则将温度维持在18~30℃有利于“甜酒浮子”的制作，D正确。
故选A。
2. 下列关于传统发酵技术的叙述正确的是（ ）
A. 利用果酒制作果醋过程中，只需将温度提高到30℃～35℃即可进行果醋发酵
B. 果酒制作过程中发酵液pH先上升后下降，果醋制作过程中发酵液pH一直下降
C. 泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水，且在发酵过程中及时补水
D. 制作泡菜时，为了防止杂菌污染和加速醋酸菌发酵，可加入灭菌后的陈泡菜水
【答案】C
【解析】
【分析】1、果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核，属于真核生物。适宜酵母菌发酵的温度范围是18~30°C。
2、果醋制作的原理是在氧气充足的条件下，醋酸菌将葡萄糖或者乙醇转化成醋酸，醋酸菌无核膜包被的细胞核，是原核生物，属于好氧菌，醋酸菌适宜生长的温度范围是30-35℃。
3、泡菜制作的原理是在无氧环境下乳酸菌将葡萄糖转变为乳酸，乳酸菌是严格厌氧菌，因此泡菜制作过程中需要创造无氧环境。
【详解】A、利用果酒制作果醋过程中，需将温度提高到30℃～35℃、接种醋酸菌、充入氧气可进行果醋发酵，A错误；
B、果酒制作过程中酵母菌呼吸作用产生CO2，使培养液pH下降，B错误；
C、泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水创造无氧环境，C正确；
D、加入陈泡菜水的目的是增加乳酸菌的数量，使乳酸菌在短时间内发展为优势物种，而灭菌后的陈泡菜水中乳酸菌已经死亡，达不到这个效果，D错误；
故选C。
3. 鱼茶是海南黎族的一种传统发酵食品，鱼茶富含多种人体所需的氨基酸和蛋白质，具有润肺清肠、促进消化、养颜美肤和缓解血管硬化等作用。其制作方法是生鱼加盐、姜、蒜等处理后、拌入煮熟的干米饭，在特定条件下发酵一段时间后，开坛即可食用。鱼茶的发酵菌群主要是乳酸菌，发酵后的鱼肉蛋白质更易被人体消化吸收。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 鱼茶制作过程中，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸和CO2
B. 食用鱼茶可能会发生误食寄生虫或其他致病微生物的风险
C. 制作鱼茶过程中要通入无菌空气并搅拌以利于菌种的繁殖
D. 海南黎族家庭制作鱼茶所需菌种需经精心选育和扩大培养
【答案】B
【解析】
【分析】泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。
【详解】A、乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，不会生成CO2，A错误；
B、鱼茶是生鱼直接制作的，可能会有误食寄生虫或其他致病微生物的风险，B正确；
C、乳酸菌是厌氧型细菌，制作鱼茶过程中要密封发酵，C错误；
D、传统发酵技术中菌种来自于自然环境中，D错误。
故选B。
4. 谷氨酸除用于制造味精外，还可以用来治疗神经衰弱以及配制营养注射液等。通过发酵工程可以大量制备谷氨酸，下列有关谷氨酸发酵生产的叙述，错误的是（ ）
A. 发酵之前要对谷氨酸菌种进行扩大培养
B. 若发酵产品是产谷氨酸菌种，可采用过滤等方法分离
C. 发酵过程中，在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸
D. 分离、提纯发酵产物是发酵过程的中心环节
【答案】D
【解析】
【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产物的分离、提纯等方面；发酵工程以其生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉、产物专一、废弃物对环境的污染小和容易处理等特点，在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵工业。
【详解】A、发酵罐的体积很大，发酵之前要对谷氨酸菌种进行扩大培养，A正确；
B、如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品；故若发酵产品是产谷氨酸菌种，可采用过滤、沉淀等方法分离，B正确；
C、环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。例如，谷氨酸的发酵生产，在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，C正确；
D、发酵罐内的发酵是发酵过程的中心环节，D错误。
故选D。
5. 科研人员进行了土壤中分解尿素的细菌的分离和纯化培养，实验流程如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 步骤①获取土壤样品要遵循无菌操作原则，土壤样品要进行高压蒸汽灭菌
B. 步骤④选择的纯化培养基，加入尿素的目的是为微生物提供碳源和氮源
C. 通过步骤④培养基的筛选，科研人员可以获得土壤中分解尿素的细菌
D. 若步骤④平板上统计细菌菌落平均数为150，则每克土壤含该种细菌约1.5×108个
【答案】C
【解析】
【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。
【详解】A、步骤①土壤样品的获取过程要遵循无菌操作原则，但不能进行高压蒸汽灭菌，不然会杀死土壤中的根瘤菌，A错误；
B、步骤④选择的纯化培养基的营养成分应该包括碳源、氮源水和无机盐等，加入尿素的目的是为微生物提供氮源，B错误；
C、通过步骤④培养基的筛选，以尿素作为唯一氮源的培养基可以分离得到能分解尿素的细菌，C正确；
D、将10g土壤先稀释100倍，再进行梯度稀释1000倍，然后取0.1mL进行涂布平板，若步骤④平板上统计的菌落数平均为150个，则每克土壤含固氮菌约150÷0.1×100×1000÷10=1.5×107个，D错误。
故选C。
6. 为筛选高效降解淀粉的微生物，提高“生化"处理的效率，研究人员将厨余垃圾机械化处理后加入装有无菌水的锥形瓶中制备厨余垃圾浸出液，然后进行如图所示操作。下列叙述错误的是（ ）
A. 厨余垃圾浸出液接种在X培养基上，采用的是稀释涂布平板法
B. X培养基中①处菌落的周围没有透明圈，可能是自养型的杂菌
C. 获得高效降解淀粉的微生物，应挑⑤处的菌落接种到Y培养基
D. 微生物在Y培养基中与营养物质接触更充分，更容易形成菌落
【答案】D
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、分析题图可知，X培养基上接种细菌采用稀释涂布平板法，A正确；
B、X培养基中①处菌落的周围没有透明圈，可能该微生物可以利用空气中的二氧化碳作为碳源，是自养型的杂菌，B正确；
C、⑤处透明圈最大，说明降解淀粉的能力最强，故为获得高效降解淀粉的微生物，应挑⑤处的菌落接种到Y培养基，C正确；
D、Y培养基是液体培养基，不能形成菌落，D错误。
故选D。
7. 高浓度的铵盐对海水养殖中的对虾有一定的毒害作用，是制约其大规模养殖的环境因素之一，具有高降解能力的硝化细菌可有效净化水体中铵盐，降低对虾的死亡率。科研人员从当地对虾养殖池塘中筛选出对铵盐降解率高且稳定的硝化细菌菌株，将等量的三种候选菌甲、乙、丙分别接入等浓度的含铵盐培养液中，在适宜条件下培养一段时间后检测培养液中的铵盐浓度，操作流程如图1所示，结果如图2 所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 图1中M培养基上进行的是利用平板划线法纯化菌种，该过程中接种环需要灼烧5次
B. 图1中将候选菌接入含铵盐培养液的目的是对硝化细菌扩大化培养，需要不断振荡
C. 据图2分析，应选择候选菌甲作为菌种进行后续培养
D. 当配制选择培养基时，需要以铵盐为唯一氮源从而筛选出硝化细菌
【答案】D
【解析】
【分析】纯化菌种时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法，由图1可知本实验采用的是平板划线法。将等量的三种候选菌甲、乙、丙分别接入等浓度的含铵盐培养液中，在适宜条件下培养一段时间后，由图2可知，菌种乙对铵盐的降解能力最强。
【详解】A、采用平板划线法接种微生物时，每次划线前后都要灼烧接种环，图1所示的操作过程中划线5次，故接种环需要灼烧6次，A错误；
B、图1中将等量的三种候选菌甲、乙、丙分别接入等浓度的含铵盐培养液中，目的是检查候选菌甲、乙、丙对铵盐的降解能力，B错误；
C、据图2分析，乙的铵盐浓度最低，说明乙菌种对铵盐的降解效果最好，应选择候选菌乙作为菌种进行后续培养，C错误；
D、为了筛选出对铵盐降解率高且稳定的硝化细菌菌株，在配制选择培养基时，需要以铵盐为唯一氮源，D正确。
故选D。
8. 地膜的主要成分是聚乙烯，化学式是（C2H4）n。残留在土壤中的地膜难以被降解，为筛选出高效降解地膜的细菌，研究人员进行了如图所示操作。下列叙述错误的是（ ）
A. 富集培养过程中摇床振荡便于微生物获取营养和氧气
B. 富集培养后，利用平板划线法将微生物接种于X培养基
C. 应挑选降解地膜最高效的细菌⑤接种到Y培养基
D. 若要研究目的菌的生长规律，可用细菌计数板计数方法进行计数
【答案】B
【解析】
【分析】在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。
【详解】A、富集培养过程中摇床振荡便于微生物与营养物质充分接触，并增加溶氧量，所以摇床振荡便于微生物获取营养和氧气，A正确；
B、富集培养后，利用稀释涂布平板法将微生物接种于X培养基，B错误；
C、抑菌圈越大，说明降解地膜的效果越好，故可挑选⑤中的单菌落接种到Y培养基上，C正确；
D、若要研究目的菌的生长规律，可用细菌计数板计数方法进行计数，D正确。
故选B。
9. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA的菌种，流程图如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 步骤②可用稀释涂布平板法或平板划线法接种
B. 步骤③培养时为防止皿盖上的冷凝水滴落一般需要倒置培养皿
C. 步骤④扩大培养时需要用液体培养基并振荡培养
D. 步骤⑤用细菌计数板计数结果一般小于稀释涂布平板法计数结果
【答案】D
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、采用平板划线法或稀释涂布平板法，能将单个微生物分散在固体培养基上。之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物，所以步骤②可用稀释涂布平板法或平板划线法接种，A正确；
B、步骤③培养时为防止皿盖上的冷凝水滴落一般需要倒置培养皿，B正确；
C、步骤④扩大培养时需要用液体培养基，振荡培养有利于增加培养基中的溶解氧，并使菌体与培养基充分接触利用培养基，C正确；
D、稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。用细菌计数板计数时，计数结果一般是死菌数和活菌数的总和，因此会比实际值偏大，D错误。
故选D。
10. 某种物质A（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解A．研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株。图中③将M中的菌液稀释一定倍数后，取0．1mL涂布到平板上，初步估测摇瓶M中1mL菌液中细菌数为2．4x108个。相关叙述正确的是（ ）
A. 实验时，淤泥及盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
B. 乙中需要加琼脂和物质A等，实验需设平行重复实验，无需另外设置空白对照
C. ③接种方法为稀释涂布平板法，涂布时用涂布器蘸取菌液均匀涂布于平板上
D. 若乙平板上菌落数平均为240个，则接种的菌液的稀释倍数为105
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：①为淤泥取样进行稀释，②为接种到液体培养基上，③稀释涂布平板法接种到以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上，④为挑取单菌落接种，⑤在以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上进一步筛选出高效降解A的菌株。
【详解】A、实验时，要从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株，则图①为淤泥取样进行稀释，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，淤泥中有菌种，因此不能进行灭菌处理；盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，A错误；
B、识图分析可知，③是稀释涂布平板法接种到以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上，因此乙为固体培养基，需要加琼脂和物质A等，为了提高准确度，实验需设平行重复实验，且需要另外设置空白对照，检测培养基配制是否合格，B错误；
C、③接种方法为稀释涂布平板法，接种工具是涂布器，但是不能用涂布器蘸取菌液，应该将菌液用微量移液管加入到培养基中，用涂布器进行均匀涂抹，C错误；
D、若乙平板上长出的菌落数平均为240个，假设稀释倍数为a，根据摇瓶M中1mL菌液中细菌数为2.4×108个，在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，则有240×a÷0.1=2.4×108，则稀释倍数a=105，D正确。
故选D。
11. 铁皮石斛是非常好药材，但因为铁皮石斛自然繁殖力极弱，生长缓慢，再加上人们掠夺式采挖，资源已接近枯竭，植物组织培养技术为铁皮石斛的繁殖提供了新思路。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 利用铁皮石斛的体细胞进行组织培养的过程中发生了染色体数目的变异
B. 诱导愈伤组织形成和后续培养过程中，每日需要给予适当时间和适当强度的光照
C. 为获得无菌培养物，除了要无菌操作外，还需要对铁皮石斛的外植体进行严格灭菌
D. 植物组织培养过程中用适当诱变因素处理，可能筛选到高产的突变体进而培养成新品种
【答案】D
【解析】
【分析】植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的形成。
【详解】A、利用铁皮石斛的体细胞进行组织培养的过程中可能会发生染色体数目的变异，A 错误；
B、诱导愈伤组织期间不需要光，后续培养过程中，为了诱导叶绿素的形成，每日需要给予适当时间和适当强度的光照，B错误；
C、需要对外植体进行消毒，不能进行灭菌处理，以保持外植体的活性，C错误；
D、植物组织培养过程中，由于培养的细胞一直处于不断的分生状态，容易受到培养条件和外界压力的影响而发生突变，因此植物组织培养过程中用适当诱变因素处理，可能筛选到高产的突变体进而培养成新品种，D正确。
故选D。
12. 为拓宽蔬菜的育种资源，科学家用大白菜（2n=20）、青花菜（2n=18）和叶用芥菜（2n=36）为材料，进行体细胞融合获得大量再生植株。染色体计数显示，再生植株染色体数为38~64，未发现与3个亲本染色体总数一致的个体。下列说法正确的是（ ）
A. 杂种细胞培育成再生植株的过程中发生基因重组
B. 染色体数为38的再生植株，一定是大白菜和青花菜细胞的融合
C. 再生植株的染色体数目说明，三个细胞融合时发生了染色体的丢失
D. 再生植株的获得实现了远缘杂交育种，且获得的再生植株均可育
【答案】C
【解析】
【分析】植物细胞具有细胞壁，在进行体细胞融合之前需先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体，诱导原生质体融合的物理法包括振荡、离心、电激等，化学法一般是用聚乙二醇作为诱导剂来诱导细胞融合。
【详解】A、杂种细胞培育成再生植株的过程中发生的是有丝分裂，而自然状态下基因重组发生在减数分裂过程中，A错误；
BC、分析题意，大白菜的染色体数为20，青花菜的染色体数为18，叶用芥菜的染色体数目是36，三个细胞融合，染色体总数理论上是20+18+36=74，而事实上再生植株的染色体数为38~64，因此三个细胞融合时发生了染色体的丢失,染色体数为38的再生植株，最可能是大白菜和青花菜细胞的融合，也可能是三个细胞融合过程发生了染色体的丢失，B错误，C正确；
D、再生植株的获得实现了不同物种间的远缘杂交育种，但获得的再生植株的染色体不完全同源，减数分裂时可能会出现联会紊乱，因此再生植株不一定可育，D错误。
故选C。
13. “当归补血汤”是出自《内外伤辨惑论》的中药配方，主要组成中药是当归和黄芪，具有一定的补气生血的功效。科研人员想利用现代生物技术将当归与黄芪进行体细胞杂交，尝试培育能产生两种有效成分的植物，培育过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 过程①需要用纤维素酶或胰蛋白酶获得原生质体
B. 过程②可以用聚乙二醇或高pH诱导融合
C. 过程②结束后，原生质体融合代表植物体细胞杂交成功
D. 过程④和⑤的培养基中植物激素的种类和比例相同
【答案】B
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
2、植物体细胞杂交过程分析：（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂；（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成； （3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。
3、分析题图可知，①表示获取原生质体，②表示诱导原生质体融合，③表示获得杂种细胞，④表示去分化过程，⑤表示再分化获得杂种植物。
【详解】A、过程①需要用纤维素酶和果胶酶获得原生质体，A错误；
B、过程②表示人工诱导原生质体融合，方法可以分为两大类—物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等，B正确；
C、过程②结束后，细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成，即新的细胞壁生成代表植物体细胞杂交成功，C错误；
D、过程④和⑤的培养基中植物激素的种类和比例不相同，D错误。
故选B。
14. 甘薯由于能增强免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止动脉硬化等越来越被人们喜爱。但甘薯属无性繁殖作物，同时又是同源六倍体，具有自交不育和杂交不亲和性，这使甘薯生产和育种存在诸多常规方法难于解决的问题。下列相关操作不合理的是（ ）
A. 利用组织培养形成的胚状体制作人工种子，解决种苗用量大、成本高的问题
B. 利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株具备抗病毒的能力，产品质量得到提高
C. 利用原生质体融合实现体细胞杂交，可以克服杂交不亲和，充分利用遗传资源
D. 利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高变异频率，大大缩短育种年限
【答案】B
【解析】
【分析】植物的体细胞杂交是将不同种的植物体细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【详解】A、植物细胞工程应用之一是利用胚状体包囊人工胚乳和人工种皮制成人工种子，实现大规模生产，从而降低成本，A正确；
B、茎尖等分裂旺盛部位病毒极少或无病毒感染，所以利用茎尖分生组织培养出无病毒且保持优良性状的幼苗，脱毒苗不等于抗毒苗，通过基因工程将抗病毒基因转移至受体细胞从而培育出抗病毒的转基因植物，B错误；
C、通过植物体细胞杂交技术可以实现两个植物物种间的体细胞杂交，得到同时具有两种遗传物质的植物，可以实现种间的杂交，克服了远缘杂交不亲和的障碍，C正确；
D、愈伤组织具有分裂旺盛的优点，适于诱变育种的取材，能提高突变频率，D正确。
故选B。
15. 如图为动物细胞培养的基本过程，以下叙述错误的是（ ）
A. a中放置的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞分裂能力强
B. c过程属于原代培养，d过程属于传代培养
C. c、d瓶中的培养液需要加入血清等天然成分
D. 将培养的细胞置于95%O2和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
【详解】A、a中放置的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞分裂能力强，因而可以作为动物细胞培养的材料，A正确；
B、细胞培养过程中没有分瓶之前的培养称为原代培养，分瓶之后的培养称为传代培养，即c过程属于原代培养，d过程属于传代培养，B正确；
C、c、d瓶中的培养液属于合成培养基，通常还需要加入血清等天然成分，因为目前对于动物细胞增殖所需要的营养尚不完全清楚，C正确；
D、将培养的细胞置于95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养，其中二氧化碳起到了维持pH相对稳定的作用，D错误。
故选D。
16. 我国研究人员将体外培养的胎猴体细胞注射到去核卵母细胞，形成重构胚，最终培育了两只克隆猴“中中”和“华华”。以下说法正确的是（ ）
A. 体外培养体细胞的原理是动物体细胞具有全能性
B. 核移植技术中卵母细胞应该完成两次分裂后去核
C. 体细胞注射到透明带内体现了细胞膜具有流动性
D. 代孕母猴对植入的胚胎几乎不发生免疫排斥反应
【答案】D
【解析】
【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电刺激等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。
【详解】A、体外培养体细胞的原理是细胞增殖，A错误；
B、卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核，不是完成两次，B错误；
C、透明带不是生物膜，不能体现细胞膜具有流动性，C错误；
D、代孕母猴对植入的胚胎几乎不发生免疫排斥反应，才能保证移植的成功率，D正确。
故选D。
17. 利用治疗性克隆技术治疗胰岛功能异常型糖尿病患者的基本流程如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A. 胚胎干细胞可以取自囊胚期的内细胞团
B. 细胞培养需要含有95%氧气和5%二氧化碳的气体条件
C. 该流程利用了细胞培养、细胞核移植和胚胎移植技术
D. 患者对注入的胰岛细胞会产生免疫排斥
【答案】A
【解析】
【分析】治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞(如神经细胞、肌肉细胞和血细胞)，用于治疗。
【详解】A、囊胚期的内细胞团细胞具有全能性，可以作为胚胎干细胞，A正确；
B、细胞培养需要含有95%的空气和5%的二氧化碳的气体条件，B错误；
C、此流程中没有利用胚胎移植技术，C错误；
D、培养的健康胰岛细胞是由患者自身的胚胎干细胞发育而成，患者对注入的胰岛细胞不发生免疫排斥，D错误。
故选A。
18. 基因组印记（指基因根据亲代的不同而有不同的表达，印记基因的存在可导致细胞中等位基因一个表达另一个不表达）阻碍了哺乳动物的孤雌生殖。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 推测孤雌小鼠体细胞中染色体数目是卵母细胞中染色体数目的一半
B. 体外培养卵母细胞时，培养皿甲需定期更换培养基以去除代谢产物
C. 图中乙为囊胚，其中内细胞团部分细胞将来发育为胎盘、胎膜
D. 基因组印记导致一对等位基因中的一个基因发生突变而不能表达
【答案】B
【解析】
【分析】题图分析，从卵泡中取出卵母细胞，再将经过甲基化处理的卵母细胞进行早期胚胎培养、胚胎移植等获得孤雌小鼠。表观遗传是指DNA序列不发生变化，但基因的表达却发生了可遗传的改变，即基因型未发生变化而表现型却发生了改变，如DNA的甲基化，甲基化的基因不能与RNA聚合酶结合，故无法进行转录产生mRNA，也就无法进行翻译，最终无法合成相应蛋白，从而抑制了基因的表达。
【详解】A、“孤雌小鼠”是由修饰后的次级卵母细胞和一个第二极体结合后发育形成的，孤雌小鼠体细胞中染色体数目和卵母细胞中染色体数目相同，A错误；
B、体外培养卵母细胞时，培养皿甲需定期更换培养基以去除代谢产物，有利于卵母细胞的培养，B正确；
C、图中乙为囊胚，其滋养层细胞将来发育为胎盘、胎膜，C错误；
D、基因组印记导致一对等位基因中一个基因发生甲基化而不能表达，没有发生基因突变，D错误。
故选B。
19. 为了降低对国外奶牛种质的过度依赖，提高优良母牛的扩繁速度成为关键，而试管牛技术产业化则可以有效解决这一难题。如图是试管奶牛的生产流程示意图，下列有关叙述正确的是（ ）
A. ①是核移植技术，反映了动物细胞核具有全能性
B. 从优良母牛中采集卵母细胞可直接与获能精子进行体外受精
C. 在过程①中精卵识别阶段时，卵细胞正处于减数第二次分裂后期
D. 进行过程②胚胎移植前，需取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定
【答案】D
【解析】
【分析】1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。
【详解】A、由图可知，①是体外受精，是精卵结合的过程，A错误；
B、从卵巢中采集的卵母细胞需培养成熟（减数第二次分裂中期）后才可与获能的精子进行体外受精，B错误；
C、在过程①中精卵识别阶段时，卵细胞正处于减数第二次分裂中期，C错误；
D、在进行胚胎移植之前，需对早期胚胎进行性别鉴定，可取囊胚期的滋养层细胞进行DNA分析，D正确。
故选D。
20. 如图表示胚胎分割的过程，下列有关胚胎分割的说法，错误的是（ ）
A. 为了获得良种后代，可以取少量滋养层细胞进行DNA分析
B. 细胞A一定是受精卵
C. 为了获得更多的胚胎，采用胚胎分割技术，属于无性生殖或克隆
D. 对胚胎进行分割后得到的个体性别相同
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术，属于无性繁殖。该过程的材料是发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。（桑椹胚至囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割）操作过程中需要对囊胚阶段的胚胎分割时，要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发展。
【详解】A、为了获得良种后代，可在囊胚阶段取样滋养层进行DNA分析，因为滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜，不会对胚胎的发育造成影响，A 正确；
B、细胞A可能是受精卵、重组细胞或早期还未分化的胚胎细胞等，B错误；
C、胚胎分割可将早期胚胎分为2等份、4等份或8等份等，来自同一胚胎的遗传物质相同，因此属于无性生殖或克隆的方法之一，C正确；
D、对胚胎进行分割后得到同卵双胎或多胎，其染色体组成和遗传物质相同，所以个体的性别相同，D正确。
故选B。
二、填空题（共40分）
21. 利用微生物的发酵作用为人类造福，历史悠久，前景广阔。从传统发酵到现代大规模生产的发酵工程，不同微生物具有各自独特的作用。回答下列相关问题：
（1）利用传统发酵技术制作葡萄酒不需要对葡萄汁进行灭菌处理，原因是______。利用图1装置制作葡萄酒的过程中，发酵过程中需要定期打开______（填“A”或“B”）管的夹子放出产生的气体。
（2）夏天，葡萄酒暴露在空气中会变酸，这是因为当温度适宜、氧气______（填“充足”或“缺乏”）、糖源______（填“充足”或“缺乏”）时，醋酸菌能利用乙醇产生乙酸。
（3）工业生产实践中，可以先利用纤维素分解菌处理植物秸秆，再通过酵母菌发酵最终可以获得乙醇。为了分离纤维素分解菌，需要配制______的选择培养基。
（4）某同学欲从牛的瘤胃中分离得到纤维素分解菌。他将牛的瘤胃菌种提取液接种到适宜的培养基中，调节pH及温度至适宜条件，并持续通入无菌空气。一段时间后发现培养基中几乎没有菌落，原因可能是______。
【答案】（1） ①. 灭菌会杀死葡萄自身携带的野生酵母菌 ②. B
（2） ①. 充足 ②. 缺乏
（3）以纤维素为唯一氮源
（4）瘤胃中的微生物为厌氧菌，接触空气会死亡
【解析】
【分析】醋酸菌是好氧细菌，当氧气、糖源都充足时能将葡萄糖分解成乙酸；当缺少糖源时，则直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸。醋酸菌可用于制作各种风味的醋。
1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18～30℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【小问1详解】
在家庭制作果酒时，需要的菌种是野生的酵母菌，灭菌会杀死葡萄自身携带的野生酵母菌，因而利用传统发酵技术制作葡萄酒不需要对葡萄汁进行灭菌处理。制作葡萄酒的过程中，B管排气管口没有伸入液面，发酵过程中需要定期打开B管的夹子放出二氧化碳气体。
【小问2详解】
参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌为好氧菌，在夏天，葡萄酒暴露在空气中会变酸，这是因为当氧气充足、糖源缺乏时，醋酸菌能利用乙醇产生醋酸。
【小问3详解】
纤维素分解菌能合成纤维素酶，将纤维素分解，从中获取碳源，而其它微生物因不能合成纤维素酶而不能利用纤维素，故在工业生产实践中，为了分离纤维素分解菌，需要配制以纤维素为唯一碳源的选择培养基。
【小问4详解】
由于瘤胃中的微生物为厌氧菌，接触空气后会死亡（要在无氧条件下培养），所以将牛的瘤胃菌种提取液接种到适宜的培养基中，调节pH及温度至适宜条件，并持续通入无菌空气，一段时间后会发现培养基中几乎没有菌落。
22. 对厨余垃圾正确分类是减少细菌滋生污染环境的重要保障。某研究小组从一餐厨垃圾处理厂分离了能高效降解淀粉、脂肪等的细菌菌株并进行扩大培养和筛选，部分操作流程如下，请分析回答：
（1）实验室中，配置好的培养基通常采取______方式进行灭菌；倒平板时，防止杂菌污染的操作有______（写出两点）。图中接种后培养的效果图解，可判断其接种方法是______
（2）若以上流程图是筛选降解淀粉的微生物的培养基，则应______（加入/不加入）葡萄糖为微生物提供能源物质。鉴别降解脂肪的微生物的培养基中可以加入______作为指示剂。
（3）进行扩大培养的培养基与培养皿中的培养基，成分上的主要区别是______。
（4）经过步骤③，培养皿中出现了3种形态、颜色不一的菌落，这些菌落可以在此培养基上生长的重要因素之一是______，这些菌落之间存在______的种间关系。
（5）菌落甲与乙周围都产生了透明圈（白色表示无蓝色，深色表示蓝色），产生透明圈的原因是______。
【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌##湿热灭菌 ②. 在超净工作台中操作；拔掉棉塞后，锥形瓶口通过酒精灯火焰进行灼烧灭菌；左手将培养皿打开一条缝，右手倒培养基，及时盖上培养皿皿盖；在酒精灯火焰旁倒平板 ③. 稀释涂布平板法
（2） ①. 不加入 ②. 苏丹Ⅲ染液
（3）培养皿中是固体培养基，需要加入琼脂
（4） ①. 可以获得生存必需的碳源（有机物）或可以分解淀粉、脂肪 ②. 种间竞争
（5）淀粉被细菌分解后，不能被碘液染色，从而形成透明圈
【解析】
【分析】1、稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
2、培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。微生物培养基需要为微生物繁殖提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，此外还要满足微生物对特殊营养物质，pH和O2的需求。
【小问1详解】
配置好的培养基通常采取高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）；倒平板时，为防止杂菌污染，可在超净工作台中操作、拔掉棉塞后，锥形瓶口通过酒精灯火焰进行灼烧灭菌、左手将培养皿打开一条缝，右手倒培养基，及时盖上培养皿皿盖、在酒精灯火焰旁倒平板等；图中接种后培养皿上菌落分布较为均匀，故是稀释涂布平板法。
【小问2详解】
以上流程图是筛选降解淀粉的微生物的培养基，淀粉可作为碳源，因此培养基中不加入葡萄糖为微生物提供能源物质；脂肪可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，因此在鉴别降解脂肪的微生物的培养基中可以加入苏丹Ⅲ染液作为指示剂。
【小问3详解】
培养基M是扩大培养过程，可增加微生物的浓度，扩大培养的培养基为液体培养基，而通过③接种到选择培养基上，该过程是为了筛选分离高效降解淀粉、脂肪等的细菌菌株，即培养皿中的培养基为固体培养基，需要添加凝固剂琼脂。
【小问4详解】
选择培养基上有淀粉和脂肪，经过步骤③，培养皿中出现了3种形态、颜色不一的菌落，说明这些菌落可以获得生存必需的碳源（有机物）或可以分解淀粉、脂肪。这些菌落在空间和资源上相互竞争，因此种间关系为为种间竞争。
【小问5详解】
淀粉与碘液变蓝，淀粉被细菌分解后，不能被碘液染色，从而形成透明圈，菌落甲与乙可分解淀粉，因此周围都产生了透明圈。
23. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），过程如图1所示。
（1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自______。
（2）步骤①常用方法包括______融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
（3）过程②能在HAT选择培养基上生长的细胞是______，其特点是______，经过程②筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中进行过程③，原因是______。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行______培养的方式进行扩大培养。
（4）细胞内合成抗体时，其空间结构形成的场所主要是______。
（5）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致______。
（6）与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体一药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小，原因是______。
（7）制备单克隆抗体主要依赖的生物学技术有______和______。
（8）杂交瘤细胞的培养液中有各种营养物质，还需要添加______以补充细胞生长所需的未知营养物质。
【答案】（1）人的乳腺癌细胞
（2）PEG （3） ①. 杂交瘤细胞 ②. 既能大量增殖，又能产生特定抗体 ③. 小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种（筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体并不是单克隆抗体） ④. 体外
（4）内质网 （5）癌细胞凋亡
（6）将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤（靶点清楚，毒副作用小）
（7） ①. 动物细胞培养 ②. 动物细胞融合
（8）血清等一些天然成分
【解析】
【分析】由图1可知，①表示动物细胞的融合，②表示筛选杂交瘤细胞，③表示克隆化培养和专一抗体检测。
由图2可知，ADC不识别正常细胞，识别并结合乳腺癌细胞
【小问1详解】
要生产乳腺癌的单克隆抗体，应该选择乳腺癌细胞作为抗原对小鼠进行免疫处理。
【小问2详解】
①表示动物细胞的融合，常用化学药物PEG（聚乙二醇）处理，诱导细胞融合。
【小问3详解】
HAT培养基是特定的选择性培养基，只有杂交瘤细胞能在其上生长，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡。杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生特定抗体。②表示筛选杂交瘤细胞，由于从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种，筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体并不是单克隆抗体，故需要进行③克隆化培养和抗体检测；杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外（在培养液中）培养的方式进行扩大培养。
【小问4详解】
抗体的化学本质是蛋白质，合成场所是核糖体，需要经过内质网的加工才能形成特定的空间结构。
【小问5详解】
由图可知，ADC进入乳腺癌细胞，溶酶体可以将ADC水解，释放出的药物进入细胞质基质，最终作用于细胞核，引起乳腺癌细胞的凋亡。
【小问6详解】
因为将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤（靶点清楚，毒副作用小），故与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小。
【小问7详解】
制备单克隆抗体依赖的生物技术有动物细胞培养和动物细胞融合（诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合）等技术。
【小问8详解】
为补充细胞生长所需的未知营养物质和防止杂菌污染，需要在培养液中添加血清（含有细胞所必须的物质）和抗生素（避免杂菌污染）。
24. 2023年1月，由西北农林科技大学奶牛种业创新团队培育的首批优质克隆奶牛在宁夏灵武市出生，培育克隆奶牛的流程如图所示。回答下列问题：
（1）体外培养甲牛的体细胞时需给予一定量的O₂和CO₂，其中CO₂的主要作用是_____。若需获得大量卵母细胞，可用_____激素使乙牛超数排卵。卵母细胞去核前，需将其在体外培养至_____期。
（2）过程②表示_____，进行该过程前需对代孕丙牛进行_____处理。
（3）奶生丁的绝大部分性状和_____（填“甲”“乙”或“丙”）生的性状一致，理由是_____。
（4）与体细胞核移植技术相比，胚胎细胞核移植技术的成功率更高，原因是_____。
【答案】（1） ①. 维持培养液的pH ②. 促性腺 ③. 减Ⅱ中
（2） ①. 胚胎移植 ②. 同期发情
（3） ①. 甲 ②. 奶牛丁的绝大部分遗传物质来自甲牛
（4）胚胎细胞分化程度低，表现全能性较容易
【解析】
【分析】动物细胞核移植技术的一般步骤：①采集卵母细胞，体外培育到MII期，并通过显微操作去核；②将供体细胞注入去核的卵母细胞；③通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚；④用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程；⑤将胚胎移入受体（代孕母动物）体内，并发育成与供体遗传物质基本相同的个体。
【小问1详解】
动物细胞培养所需要的气体条件为95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。若需获得大量卵母细胞，可用促性腺激素使乙牛超数排卵。采集的卵母细胞需要在体外培养至MII期，此期的卵母细胞中含有促进细胞核全能性发挥的物质。
【小问2详解】
过程②表示重组胚胎后进行胚胎移植，植入代孕母体中，进行该过程前需对代孕丙牛进行同期发情，以保证其生理状态相似。
【小问3详解】
奶牛丁的绝大部分遗传物质来自甲牛，所以奶牛丁的绝大部分性状和甲牛的性状一致。
【小问4详解】
胚胎细胞相较于体细胞，细胞分化程度低，表现全能性较容易，因此，胚胎细胞核移植技术的成功率更高。
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