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山东省大联考2023-2024学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版）
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这是一份山东省大联考2023-2024学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版），文件包含山东省大联考2023-2024学年高二下学期3月月考生物试题原卷版docx、山东省大联考2023-2024学年高二下学期3月月考生物试题解析版docx等2份试卷配套教学资源，其中试卷共30页， 欢迎下载使用。
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考场号、座位号、准考证号填写在答题卡上。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
考试时间为90分钟，满分100分
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 如图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图，有关叙述正确的是（ ）
A. 利用此过程获得的试管苗可能为杂合子
B. ①、②过程中均发生细胞的增殖和分化
C. 多倍体植株的培育需经过如图所示过程
D. 对愈伤组织细胞进行处理使其发生突变，就可以得到对人们有用的新品种
【答案】A
【解析】
【分析】分析题图可知，图示为植物组织培养技术。图中①是脱分化过程，②为再分化并发育为试管苗的过程。
【详解】A、分析题图可知，图示为植物组织培养技术，利用此过程获得的试管苗的基因型与亲本的基因型相同，可能为杂合子，也可能为纯合子，A正确；
B、图中①是脱分化过程，没有发生细胞分化，B错误；
C、多倍体植株的培育需利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，不需要经过组织培养，C错误；
D、对愈伤组织细胞进行处理使其发生突变，由于基因突变具有不定向性，因此不一定能得到人们有用的品种，D错误。
故选A。
2. 下列有关菊花组织培养的叙述，错误的是（ ）
A. 外植体一般选自于未开花植株的茎上部新萌生的嫩枝
B. 培育菊花丛状苗的过程可以不经历脱分化过程
C. 培养形成的愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株
D. 用药剂对外植体消毒时，要兼顾消毒效果和植物的耐受性
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、在以快速繁殖为主要目的时，菊花未开花植株的茎上部新萌生的侧枝是最为常用的外植体，因为该处细胞分裂能力强、分化程度低，全能性容易表达，A正确；
B、从带芽的茎段上长出丛状苗不需要经历脱分化，长出的丛状苗需分株，B正确；
C、培养形成的愈伤组织需要转移到分化培养基中才能再分化形成根和芽，进而发育成植株，C错误；
D、外植体接种前常进行流水冲洗、酒精处理、消毒液处理等消毒措施，要兼顾消毒效果和植物的耐受性，最后为了避免消毒液的危害，还需要用无菌水清洗三次，D正确。
故选C。
3. 下图表示用仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 细胞a和细胞b必须为同种细胞才能融合
B. 细胞c同时有细胞a和细胞b的遗传物质
C. 该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性
D. 植物细胞的融合过程与动物细胞完全相同
【答案】B
【解析】
【分析】细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说，它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。当前细胞工程所涉及的主要技术领域有细胞培养、细胞融合、细胞拆合、染色体操作及基因转移等方面。通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株，并可以产生新的物种或品系。
【详解】A、不同种的细胞也能融合，如人、鼠细胞融合，A错误；
B、如题图所示，细胞a和细胞b融合成一个细胞，细胞c同时有细胞a和细胞b的遗传物质，B正确；
C、该融合过程体现了细胞膜具有一定的流动性，C错误；
D、植物细胞的融合通常要先去除细胞壁，其细胞融合的过程与动物细胞不完全相同，D错误。
故选B。
4. 理论上来说，正常的植物细胞都具有全能性。下列有关植物细胞全能性的叙述，错误的是（ ）
A. 植物细胞具有全能性的原因是细胞中含有与发育成完整个体的全部信息
B. 一粒玉米种子发育成完整植株的过程体现了植物细胞全能性
C. 一般来说，植物体内分化程度越高的体细胞，其全能性越低
D. 花药在体外被诱导成完整的单倍体植株不能体现体细胞全能性
【答案】B
【解析】
【分析】细胞的全能性：
（1）概念：细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。
（2）细胞具有全能性的原因：细胞中含有该生物生长发育所需要的全部遗传信息。
（3）细胞全能性大小：受精卵>干细胞>生殖细胞>体细胞。
（4）细胞表现出全能性的条件：离体、适宜的营养条件、适宜的环境条件。
【详解】A、正常的植物体细胞经受精卵有丝分裂产生相同的细胞，这些相同的细胞再经基因的选择性表达分化成不同功能的细胞，这些细胞仍含有与受精卵相同的本物种生长、发育所需的全部遗传信息；正常的植物生殖细胞经原始生殖细胞减数分裂产生，仍含有本物种生长、发育所需的全套遗传信息，因此植物细胞即使分化后仍具全能性，A正确；
B、玉米种子中含有胚，种子发育成植株是胚发育成个体的过程，是正常的生长发育过程，不能体现细胞的全能性，B错误；
C、植物细胞的全能性与植物细胞的分化程度相关，一般来说，分化程度越高，越难体现出细胞的全能性，C正确；
D、植物花药在体外被诱导成为完整的单倍体植株，利用的是植物组织培养技术，体现的是生殖细胞的全能性而不是体细胞全能性，D正确。
故选B。
5. 粉美人萱草形态优美、色彩艳丽，具有极大的栽培价值。剪取健壮、无病虫害的单株粉美人萱草的新鲜花茎进行离体培养，下列相关说法错误的是（ ）
A. 首选花序轴作为外植体，脱分化后形成具有特定结构和功能的愈伤组织
B. 取样时间也会影响粉美人萱草无菌材料的获得
C. 不同种类植物对培养基成分如激素浓度、比例要求不同，再生能力也存在差异
D. 为防止一些代谢产物的积累等因素影响培养物生长，一般需要在2～4周后将培养物转移至新鲜培养基中继续培养
【答案】A
【解析】
【分析】1、植物组织培养的过程：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）愈伤组织胚状体→植株（新植体）。2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）；决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。
【详解】A、细胞若离体后在培养基上培养时会由原来的分化状态，失去原有的某些具有特定结构和功能的细胞结构（如叶肉细胞的叶绿体等），变成分生状态的细胞，分裂产生愈伤组织，即愈伤组织是没有特定功能的，A错误；
B、幼嫩的材料容易在酒精中失绿或被酒精杀死，不同取样时期消毒处理方法有差别，故取样时间也会影响粉美人萱草无菌材料的获得，B正确；
C、植物生命活动受到激素、环境以及基因表达的共同调控，不同种类植物对培养基的成分如激素浓度、比例要求不同，再生能力也存在差异，C正确；
D、为了防止由于营养物质的枯竭，水分的散失，以及一些组织代谢产物的积累，必须将组织及时转移到新的培养基上，以免影响细胞正常生命活动，D正确。
故选A。
6. 制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括 ( )
①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植
A. ①②B. ①③
C. ②③D. ③④
【答案】A
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体，整个过程不涉及胚胎移植和细胞核移植这两项技术。 单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术等。
【详解】本题考查单克隆抗体的制备原理。制备单克隆抗体时，首先采用细胞融合技术得到杂交瘤细胞，再采用动物细胞培养技术获得能产生所需抗体的细胞群，故选A。
7. 试管婴儿、试管苗和克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果，下面叙述正确的是（ ）
A. 都需细胞工程的技术支持B. 都能保持母本性状属于无性生殖
C. 都充分体现了体细胞的全能性D. 都可能发生突变和基因重组
【答案】A
【解析】
【分析】1、试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。
2、植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。
3、动物核移植是将将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物。
【详解】A、试管婴儿涉及到的技术是体外受精和胚胎移植，属于胚胎工程的技术，胚胎工程需要动物细胞工程的技术支持，通过植物组织培养获得试管苗，以及核移植和胚胎移植获得的克隆羊属于细胞工程的相关技术，A正确；
B、试管婴儿属于有性生殖，具有两个亲本的遗传特性，植物组织培养获得试管苗，属于无性生殖，克隆羊属于无性生殖，遗传特性主要来源于供体细胞，B错误；
C、试管婴儿体现受精卵的全能性，试管苗体现植物体细胞的全能性，克隆羊体现动物体细胞的细胞核具有全能性，C错误；
D、植物组织培养获得试管苗和克隆羊都属于无性生殖，不能发生基因重组，D错误。
故选A。
8. 将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，融合后的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（ ）
A. 骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
B. B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生抗体
C. 骨髓瘤细胞可以无限增殖，且能产生抗体
D. B淋巴细胞可以产生抗体，但在体外培养不能无限增殖，骨髓瘤细胞可以无限增殖
【答案】D
【解析】
【分析】在单克隆抗体的制备过程中，需要用浆细胞与骨髓瘤细胞融合；诱导动物细胞融合时，使用聚乙二醇或灭活的病毒作为诱导剂；动物细胞融合后，经过筛选获得的杂交瘤细胞具有既能无限增殖又能分泌单一抗体的特点。
【详解】A、骨髓瘤细胞不能产生专一性抗体，但在体外能无限繁殖，A错误；
B、B淋巴细胞只有在抗原的刺激下才能增殖分化形成效应B细胞（浆细胞），才能产生特异性抗体，B错误；
C、骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体，C错误；
D、B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖，骨髓瘤细胞可以无限增殖，D正确。
故选D。
9. 如图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程，下列相关叙述正确的是（ ）
A. “人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，但环境污染严重
B. 用胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞
C. 生物反应器内应控制适宜的温度，并充入纯氧保证细胞呼吸
D. 培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
【答案】D
【解析】
【分析】用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培养不仅产量高，并可以减少成本和降低环境污染。
【详解】A、理论上来说，仅来自1只动物的干细胞，可制成的肉品数量，比宰杀1头牛还多100万倍，可有利于牛肉的工厂化生产，同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，A错误；
B、胰蛋白酶处理动物组织，可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，B错误；
C、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2，C错误；
D、动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上，培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。
故选D。
10. 列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述正确的是（ ）
A. 受精完成并开始发育标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体
B. 受精卵在输卵管内进行卵裂时，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加
C. 受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期
D. 胚胎发育至原肠胚时期即开始了细胞分化，随后发育形成三个胚层
【答案】B
【解析】
【分析】1、卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。
2、受精作用的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体，还有一个是第二极体）。
【详解】A、在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体，说明卵细胞已经完成了受精，这是判断卵细胞是否受精的重要标志，不是判断开始发育的标志，A错误；
B、形成的受精卵在输卵管内开始进行卵裂，卵裂过程中，每个细胞的体积不断缩小，细胞的总体积基本不变或略有缩小，故卵裂过程中细胞数量增加但胚胎总体积基本不增加，B正确；
C、孵化是指囊胚从透明带出来，孵化后进入原肠胚阶段，C错误；
D、细胞分化开始于囊胚时期，D错误。
故选B。
11. 我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”。研究流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 睾丸中的精原干细胞也属于胚胎干细胞
B. ③处的细胞将来可发育成胎儿的各种组织
C. 需要在充满CO2的培养箱中培养胚胎干细胞
D. 人工“猴胚胎”的遗传特性与代孕受体保持一致
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎干细胞具有全能性，利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，是利用了胚胎干细胞的全能性。
【详解】A、由胚胎干细胞来自于早期胚胎或早期原始性腺，精原干细胞不属于胚胎干细胞，A错误；
B、③是内细胞团的细胞，具有发育全能性，可发育成胎儿各种组织，B正确；
C、动物细胞培养和早期胚胎培养需要在95%空气和5%二氧化碳环境中培养，C错误；
D、人工“猴胚胎”的遗传特性与提供胚胎干细胞的供体基本一致，代孕受体提供营养，D错误。
故选B。
12. 采用机械方法将早期胚胎切割后移植，可以获得同卵双胎或多胎，下列说法正确的是（ ）
A. 胚胎分割时，应选取发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚
B. 利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎
C. 胚胎分割时，需将囊胚的滋养层进行均等分割
D. 胚胎移植充分发挥雌性优良受体的繁殖潜能
【答案】B
【解析】
【分析】1、胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。2、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
【详解】A、胚胎分割时，应选取发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，A错误；
B、来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎，B正确；
C、胚胎分割时需将囊胚阶段的内细胞团进行均等分割，C错误；
D、胚胎移植充分发挥雌性优良供体的繁殖潜能，产生更多的优良后代，D错误。
故选B。
13. 下列关于DNA重组技术基本工具的说法，正确的是（ ）
A. DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键
B. 限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端
C. 质粒是基因工程中唯一的载体
D. 微生物中的限制性核酸内切酶对自身DNA无损害作用
【答案】D
【解析】
【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。（2）DNA连接酶：据酶的来源不同分为两类：E．cliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。（3）运载体：常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
【详解】A、DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成磷酸二酯键，A错误；
B、限制酶切割DNA后能产生黏性末端或平末端，B错误；
C、质粒是基因工程中常用的载体，噬菌体的衍生物、动植物病毒也可以作为基因工程的运载体，C错误；
D、微生物中的限制酶对自身DNA无损害作用，主要用于切割外源DNA，D正确。
故选D。
14. 关于“DNA的粗提取及鉴定”实验的叙述，错误的是（ ）
A. 初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精
B. 鉴定提取物中有DNA的原理是在常温下，DNA遇二苯胺试剂呈蓝色
C. 在提取白色丝状物时单向搅拌比双向搅拌更有利于获得结构完整的DNA
D. 往洋葱研磨液经离心后的上清液中加入冷酒精的目的是获得含杂质少的DNA
【答案】B
【解析】
【分析】DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。
【详解】A、初步分离 DNA 与蛋白质的原理是 DNA 不溶于酒精而蛋白质溶于酒精，A正确；
B、鉴定提取物中有DNA 的原理是在水浴加热条件下，DNA 遇二苯胺试剂呈蓝色，B错误；
C、在提取白色丝状物时单向搅拌比双向搅拌更有利于获得结构完整的 DNA，C正确；
D、往洋葱研磨液经离心后的上清液中加入冷酒精的目的是获得含杂质少的 DNA，D正确。
故选B。
15. RDX是一种弹药使用后残留的危险污染物。研究人员将两个源于细菌的RDX 降解酶基因 XplA 和 XplB 插入柳枝稷草染色体中，如图所示，使柳枝稷草获得降解实弹射击场土壤中RDX的能力。若要通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA 和 XplB 基因，应选择的引物组合是（ ）
A. 引物 1+引物3
B 引物 1+引物4
C. 引物2 +引物3
D. 引物2+引物4
【答案】A
【解析】
【分析】引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸，检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA 和 XplB 基因，应该是扩增包括XplA 和 XplB 基因和两侧T-DNA基因片段。
【详解】ABCD、根据启动子位置，若正确插入，模板链应为甲图中下链，则引物1应与下链的3'端结合，引物3可以结合甲图上链的3'端，引物 1+引物3可通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA 和 XplB 基因，A正确，BCD错误。
故选A。
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。为培育抗黑腐病杂植株，研究者设计如下流程。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 过程①需要使用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶来处理两种细胞
B. 过程②后，显微镜下观察到有叶绿体的细胞即为融合细胞
C. 过程③的培养基中需加入植物激素来诱导脱分化和再分化
D. 可借助PCR技术、黑腐病菌接种实验对杂种植株进行鉴定
【答案】D
【解析】
【分析】1、植物的体细胞杂交就是将同种或不同种的细胞经过一定的诱导方法诱导融合形成一个细胞，再将细胞培育成植株的过程。
2、杂种细胞再生出新的细胞壁是植物原生质体融合的标志，细胞中高尔基体与细胞壁的形成有关。
3、植物体细胞杂交的优点是：克服远缘杂交不亲和的障碍，培育远缘杂种植株。
4、杂种细胞经过植物组织培养的再分化过程，可选择性表达出亲本细胞的相应性状。
5、分析题图：图示为采用植物体细胞杂交技术获得抗黑腐病杂种植株的流程图，其中①表示采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁的过程；②表示诱导原生质体融合的过程；③是脱分化形成愈伤组织的过程。
【详解】A、过程①是去除细胞壁，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A错误；
B、过程②表示诱导原生质体融合的过程，显微镜下观察有无叶绿体作为初步筛选的标志，还需要鉴定是否具有抗黑腐病特性来确定融合细胞，B错误；
C、过程③是脱分化形成愈伤组织的过程，没有再分化，C错误；
D、在分子水平上可通过PCR技术对杂种植株进行鉴定，在个体水平上可以通过对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株，D正确。
故选D。
17. 我国科学家首次通过把食蟹猴的胚胎干细胞注射到猪的胚胎中，培育出了“猪—猴嵌合体”仔猪（如下图所示）。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 细胞培养过程中细胞会因接触抑制而停止分裂，需用胃蛋白酶处理后继续传代培养
B. 采集的卵母细胞需培养至MII期才能与获能的精子受精，进而获得猪胚胎
C. 从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能
D. 培育出的“仔猪”细胞遗传物质是猴细胞与猪细胞之和，具有猴和猪的融合性状
【答案】AD
【解析】
【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、动物细胞培养过程中会因接触抑制而停止分裂增殖，需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理后继续培养，A错误；
B、体外受精时，需要将所采集到的卵母细胞在体外培养到减数第二次分裂中期，才可以与获能精子完成受精作用，进而获得猪胚胎，B正确；
C、胚胎干细胞具有发育的全能性，故从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取的胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能，C正确；
D、培育出的“仔猪”细胞遗传物质一部分来自猴细胞，一部分来自猪细胞，不是猴细胞与猪细胞之和，D错误。
故选AD。
18. 我国科学家将含有人凝血因子基因的DNA片段导入到羊的受精卵中，由该受精卵发育而成的羊，分泌的乳汁中含有人的凝血因子，可用于治疗血友病。下列叙述正确的是（ ）
A. 这项研究说明人和羊共用一套遗传密码
B. 该羊的乳腺细胞中含有人的凝血因子基因
C. 该羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子基因
D. 该羊的后代也可能含有人的凝血因子基因
【答案】ABD
【解析】
【分析】基因能控制蛋白质的合成，生物界共用同一套遗传密码。基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
【详解】A、自然界中的所有生物共用同一套遗传密码，这是人的凝血因子基因能在羊的乳腺细胞中表达的基础，A正确；
BC、该羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子，说明该羊的乳腺细胞中含有人的凝血因子基因，但该羊的乳汁中不含有人的凝血因子基因，B正确，C错误；
D、将含有人凝血因子基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，培育出的转基因羊的性腺细胞含有该基因，通过减数分裂产生的卵细胞可能含有该基因，其后代也可能含有人的凝血因子基因，D正确。
故选ABD。
19. 图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcRI、BamHI、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcRI
B. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcRI酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcRI酶切点有1个
C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时处理
D. 一个图1所示的质粒分子经EcRI切割后，含有2个游离的磷酸基团
【答案】ACD
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定：
(1)分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
(2)个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、目的基因两侧都有，且质粒也有的限制酶是EcRI，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcRI，A正确；
B、如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcRI酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcRI酶切点有2个，B错误；
C、为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理，C正确；
D、一个图l所示的质粒分子经EcRⅠ切割后，产生两个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，D正确。
故选ACD。
20. 研究者用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，用以解决杂交瘤细胞传代培养中B淋巴细胞染色体丢失的问题。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活。下图为该实验操作示意图。相关叙述错误的是（ ）
A. B淋巴细胞可从多次间歇注射抗原的动物脾脏中获得
B. HAT培养基的作用主要是为了去除未融合的EBV转化细胞
C. 未融合的EBV转化细胞和骨髓瘤细胞死亡的原因相同
D. 筛选后的杂交瘤细胞具有产生抗EBV抗体的能力
【答案】BCD
【解析】
【分析】单克隆抗体制备时，首先要给小鼠免疫，产生相应的浆细胞，然后将浆细胞与骨髓瘤细胞融合，经过选择培养基两次筛选，最后获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。在单克隆抗体的制备过程中，使用了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术。
【详解】A、B淋巴细胞在骨髓中发育成熟，可分布于淋巴结和脾脏等处，故B淋巴细胞可来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等处，A正确；
B、HAT培养基的作用主要是为让细胞存活，而乌本苷（Oua）起筛选作用，B错误；
C、未融合的EBV转化细胞的死亡为Oua的作用，而骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活，C错误；
D、本实验中EBV的作用是获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，而不是刺激B细胞分化成浆细胞产生抗体，所以该杂交瘤细胞不能产生抗EBV的抗体，D错误。
故选BCD。
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域，辣椒素的获得途径如图所示。回答下列问题：
（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的__________和__________过程，要获得脱毒苗，对外植体的取材要求是__________。
（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是__________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值__________（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是___________。
（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是___________。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是__________和纤维素酶。
（4）细胞产物工厂化生产是植物组织培养技术的重要应用。高产细胞系须培养至__________，再从中提取辣椒素。
【答案】（1） ①. 脱分化 ②. 再分化 ③. 切取一定大小的茎尖进行组织培养
（2） ①. 琼脂 ②. 低 ③. 湿热灭菌法（高压蒸汽灭菌法）
（3） ①. 70% ②. 果胶酶
（4）愈伤组织
【解析】
【分析】分析题图：①是脱分化过程、②是再分化过程。上面一种途径是通过植物组织培养技术获得脱毒苗，再从果实中获得相应的产物；下面一种途径是采用植物细胞培养技术获得大量细胞产物。
【小问1详解】
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程称为脱分化，脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。要获得脱毒苗，对外植体的取材要求是切取一定大小的茎尖进行组织培养。
【小问2详解】
培养基中常用的凝固剂是琼脂。生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化；反之则利于根的分化。培养基应用湿热灭菌法灭菌（高压蒸汽灭菌法）。
【小问3详解】
外植体消毒所用酒精的体积分数是70%；植物细胞的细胞壁含有纤维素和果胶，故用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是果胶酶和纤维素酶。
【小问4详解】
人们期望利用植物细胞培养来获得目标产物，这个过程就是细胞产物的工厂化生产。植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。高产细胞系须在培养基培养至愈伤组织，再从中提取辣椒素。
22. 动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。现在已经广泛应用于多种学科的研究：新发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径。研究表明DNA合成有两条途径：“S途径”和“D途径”，淋巴细胞(浆细胞)有“S途径”和“D途径”；骨髓瘤细胞只有“D途径”；HAT培养液中氨基蝶呤可以阻断DNA合成的“D途径”。下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。回答下列问题：
⑴___________技术是单克隆抗体技术的基础。
⑵单克隆细胞是指__________________________________________________。
⑶单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是____________。
⑷杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_____________特点，又具备淋巴细胞的__________特点。
⑸图示过程，有两次的筛选。第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞，那么淋巴细胞(浆细胞)在HAT培养液中不生长的原因是_________，骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是_______。
【答案】（1）细胞培养技术、细胞融合技术 （2）单个细胞增殖，形成的细胞群
（3）特异性强，灵敏度高 （4）在体外大量增殖（无限增殖） 分泌特异性抗体
（5）缺乏在体外培养液中增殖的能力 其DNA合成途径被氨基蝶呤阻断而不能进行DNA复制
【解析】
【分析】单克隆抗体制备过程中两次筛选的方法及目的：
【详解】（1）细胞培养技术、细胞融合技术是单克隆抗体技术的基础。
（2）单克隆细胞是指单个细胞增殖，形成的细胞群。
（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是特异性强，灵敏度高，可大量制备。
（4）杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的在体外大量增殖（无限增殖）的特点，又具备淋巴细胞能分泌特异性抗体的特点。
（5）图示过程中有两次的筛选，第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞，那么淋巴细胞（效应B细胞）在HAT培养液中不生长的原因是缺乏在体外培养液中增殖的能力；骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是其DNA合成途径被氨基蝶呤阻断而不能进行DNA复制。
23. 近年来，由于世界人口的迅速增长、生物资源的过度开发和环境污染的日渐增重等诸多问题，导致野生动物郊狼的物种数量不断减少、濒临灭绝，采集精子或卵子开展常规辅助生殖较为困难，甚至无法完成。科研人员利用种间体细胞核移植技术（iSCNT）在野生动物遗传资源的保护中发挥了重要作用。具体流程如下：
（1）图示过程中①是___，②是___，③通常需要激活，使其完成___进程。
（2）与胚胎细胞核移植技术相比，iSCNT技术难度更___，原因是___。
（3）一般来说，郊狼的耳廓组织在培养时除营养外，还需提供的条件是适宜的温度、pH和渗透压、___、___。
（4）从生态的角度分析，iSCNT技术的优点是___。
【答案】（1） ①. 第一极体 ②. 透明带 ③. 细胞分裂和发育
（2） ①. 大 ②. 体细胞分化程度高，表现全能性更困难
（3） ①. 无菌、无毒的环境 ②. 适宜的气体环境
（4）利于保护生物多样性，维持生态系统稳定性
【解析】
【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。）
【小问1详解】
据图可知，图中①是第一极体，②是透明带；③是重组细胞，通常需要激活，使其完成细胞分裂和发育进程。
【小问2详解】
与胚胎细胞核移植技术相比，种间体细胞核移植技术（iSCNT）的成功率更低，这是由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，故与胚胎细胞核移植技术相比，iSCNT技术难度更大。
【小问3详解】
郊狼的耳廓组织在培养时除营养外，还需提供的条件是适宜的温度、pH和渗透压、无菌、无毒的环境以及适宜的气体环境（95%空气和5%的CO2）。
【小问4详解】
从生态的角度分析，iSCNT技术的优点是利于保护生物多样性，维持生态系统稳定性，故iSCNT在野生动物遗传资源的保护中发挥了重要作用。
24. 北极比目鱼体内含有抗冻基因A，其编码的抗冻蛋白中含有一段具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数与其抗冻能力呈显著正相关。如图是利用抗冻基因 A获得转基因抗冻番茄植株的过程示意图。回答下列问题：
（1）进行过程①时需要____（答3种）等基本条件。
（2）过程②属于可遗传变异中的____，判断的依据是____。
（3）图中表示构建表达载体的步骤是____（填序号），该过程需要的工具酶有____。
（4）为了检测抗冻番茄植株是否成功培育，应将该植株放在____环境中培养。
（5）欲获得无籽番茄，应该对番茄花进行的处理有____。（编号选填）
①人工授粉 ②人工去雄 ③施加生长素类似物 ④施加秋水仙素
【答案】（1）模板（RNA）、原料（脱氧核苷三磷酸/dNTP）、能量（ATP）、酶（逆转录酶）、引物
（2） ①. 基因突变 ②. 该过程中抗冻基因A内部发生了碱基序列的改变（碱基增添）
（3） ①. ③ ②. 限制酶（限制性内切核酸酶）和DNA连接酶
（4）低温（寒冷） （5）②③
【解析】
【分析】题图分析，过程①是以mRNA为模板通过逆转录方法合成DNA并获得目的基因，②是扩增目的基因的过程，获得具有多个重复序列的基因A，③是构建基因表达载体，④是通过组织培养形成植株的过程。
【小问1详解】
过程①是以RNA为模板合成DNA的过程，为逆转录，该过程需要mRNA做模板、四种脱氧核苷酸（或dNTP）为原料，ATP提供能量，逆转录酶催化，即该过程需要的条件包括模板（RNA）、原料（脱氧核苷三磷酸/dNTP）、能量（ATP）、酶（逆转录酶）、引物等。
【小问2详解】
过程②是基因A内部中多个序列重复导致碱基序列改变，从而引起基因结构改变，因此，该变异类型为基因突变。
【小问3详解】
转基因工程的核心工作是构建基因表达，即③过程；该过程需要限制酶（切割目的基因和运载体）和DNA连接酶（连接切割后的目的基因和运载体）的参与。
【小问4详解】
本实验的目的是为了获得抗冻番茄植株，因此，为了检测抗冻番茄植株是否成功培育，应将该植株放在低温（寒冷）环境中培养，该方法属于个体生物学鉴定。
【小问5详解】
①人工授粉可获得有子番茄；
②人工去雄能避免授粉获得种子，因而可以获得无籽番茄；
③施加生长素类似物能促进子房发育成果实，进而获得无子番茄；
④施加秋水仙素不能获得无子番茄。
可见为了获得无子番茄应该对番茄花进行的处理有②③。
25. 人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：
（1）科学家用PCR的方法对htPA基因进行体外扩增，基本过程如下图，请据图回答：
①PCR包括三个步骤I___________、Ⅱ___________、Ⅲ___________。
②加热至94℃的目的是使DNA样品的___________键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过___________酶的作用来完成的。
③如果htPA基因的部分序列是：
5'-ATGGCT……AGGAAC-3'
3'-TACCGA……TCCTTG-5'
根据上述序列，应选择引物___________（填字母）进行PCR。
A．引物：5'-GTTCCT-3'B．引物：5'-TACCGA-3'C．引物：5'-ATGGCT-3' D．引物：5'-AUGGCU-3'
（2）为获得更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其___________。采集的精子需要经过___________，才能具备受精能力。
（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是___________，通常用___________等技术检测htPA基因是否插入到早期胚胎的染色体DNA上。
【答案】（1） ①. 变性 ②. 复性 ③. 延伸 ④. 氢 ⑤. 解旋 ⑥. AC
（2） ①. 超数排卵 ②. 获能
（3） ①. 显微注射法 ②. PCR
【解析】
【分析】PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。
【小问1详解】
①PCR技术中每轮循环依次包括Ⅰ变性、Ⅱ复性、Ⅲ延伸三个步骤。
②加热至94℃的目的是使DNA样品的氢键断裂，将DNAA双链解开成单链，这一过程在生物体细胞内是通过解旋酶的作用来完成的。
③已知htPA基因的部分序列是：，由于PCR技术中，子链合成的方向是从5'到3'，且引物要与基因的两条链两端部分序列碱基互补，因此应选择引物5'-GTTCCT-3'和引物5'-ATGGCT-3'进行PCR扩增。AC正确，BD错误。
故选AC。
【小问2详解】
为获得更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵。采集的精子需要经过获能（处理），才能具备受精能力。
【小问3详解】
将含有目的基因的重组表达载体导入受精卵的方法是显微注射法，检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用PCR技术。
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考场号、座位号、准考证号填写在答题卡上。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
考试时间为90分钟，满分100分
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 如图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图，有关叙述正确的是（ ）
A. 利用此过程获得的试管苗可能为杂合子
B. ①、②过程中均发生细胞的增殖和分化
C. 多倍体植株的培育需经过如图所示过程
D. 对愈伤组织细胞进行处理使其发生突变，就可以得到对人们有用的新品种
【答案】A
【解析】
【分析】分析题图可知，图示为植物组织培养技术。图中①是脱分化过程，②为再分化并发育为试管苗的过程。
【详解】A、分析题图可知，图示为植物组织培养技术，利用此过程获得的试管苗的基因型与亲本的基因型相同，可能为杂合子，也可能为纯合子，A正确；
B、图中①是脱分化过程，没有发生细胞分化，B错误；
C、多倍体植株的培育需利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，不需要经过组织培养，C错误；
D、对愈伤组织细胞进行处理使其发生突变，由于基因突变具有不定向性，因此不一定能得到人们有用的品种，D错误。
故选A。
2. 下列有关菊花组织培养的叙述，错误的是（ ）
A. 外植体一般选自于未开花植株的茎上部新萌生的嫩枝
B. 培育菊花丛状苗的过程可以不经历脱分化过程
C. 培养形成的愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株
D. 用药剂对外植体消毒时，要兼顾消毒效果和植物的耐受性
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、在以快速繁殖为主要目的时，菊花未开花植株的茎上部新萌生的侧枝是最为常用的外植体，因为该处细胞分裂能力强、分化程度低，全能性容易表达，A正确；
B、从带芽的茎段上长出丛状苗不需要经历脱分化，长出的丛状苗需分株，B正确；
C、培养形成的愈伤组织需要转移到分化培养基中才能再分化形成根和芽，进而发育成植株，C错误；
D、外植体接种前常进行流水冲洗、酒精处理、消毒液处理等消毒措施，要兼顾消毒效果和植物的耐受性，最后为了避免消毒液的危害，还需要用无菌水清洗三次，D正确。
故选C。
3. 下图表示用仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 细胞a和细胞b必须为同种细胞才能融合
B. 细胞c同时有细胞a和细胞b的遗传物质
C. 该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性
D. 植物细胞的融合过程与动物细胞完全相同
【答案】B
【解析】
【分析】细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说，它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。当前细胞工程所涉及的主要技术领域有细胞培养、细胞融合、细胞拆合、染色体操作及基因转移等方面。通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株，并可以产生新的物种或品系。
【详解】A、不同种的细胞也能融合，如人、鼠细胞融合，A错误；
B、如题图所示，细胞a和细胞b融合成一个细胞，细胞c同时有细胞a和细胞b的遗传物质，B正确；
C、该融合过程体现了细胞膜具有一定的流动性，C错误；
D、植物细胞的融合通常要先去除细胞壁，其细胞融合的过程与动物细胞不完全相同，D错误。
故选B。
4. 理论上来说，正常的植物细胞都具有全能性。下列有关植物细胞全能性的叙述，错误的是（ ）
A. 植物细胞具有全能性的原因是细胞中含有与发育成完整个体的全部信息
B. 一粒玉米种子发育成完整植株的过程体现了植物细胞全能性
C. 一般来说，植物体内分化程度越高的体细胞，其全能性越低
D. 花药在体外被诱导成完整的单倍体植株不能体现体细胞全能性
【答案】B
【解析】
【分析】细胞的全能性：
（1）概念：细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。
（2）细胞具有全能性的原因：细胞中含有该生物生长发育所需要的全部遗传信息。
（3）细胞全能性大小：受精卵>干细胞>生殖细胞>体细胞。
（4）细胞表现出全能性的条件：离体、适宜的营养条件、适宜的环境条件。
【详解】A、正常的植物体细胞经受精卵有丝分裂产生相同的细胞，这些相同的细胞再经基因的选择性表达分化成不同功能的细胞，这些细胞仍含有与受精卵相同的本物种生长、发育所需的全部遗传信息；正常的植物生殖细胞经原始生殖细胞减数分裂产生，仍含有本物种生长、发育所需的全套遗传信息，因此植物细胞即使分化后仍具全能性，A正确；
B、玉米种子中含有胚，种子发育成植株是胚发育成个体的过程，是正常的生长发育过程，不能体现细胞的全能性，B错误；
C、植物细胞的全能性与植物细胞的分化程度相关，一般来说，分化程度越高，越难体现出细胞的全能性，C正确；
D、植物花药在体外被诱导成为完整的单倍体植株，利用的是植物组织培养技术，体现的是生殖细胞的全能性而不是体细胞全能性，D正确。
故选B。
5. 粉美人萱草形态优美、色彩艳丽，具有极大的栽培价值。剪取健壮、无病虫害的单株粉美人萱草的新鲜花茎进行离体培养，下列相关说法错误的是（ ）
A. 首选花序轴作为外植体，脱分化后形成具有特定结构和功能的愈伤组织
B. 取样时间也会影响粉美人萱草无菌材料的获得
C. 不同种类植物对培养基成分如激素浓度、比例要求不同，再生能力也存在差异
D. 为防止一些代谢产物的积累等因素影响培养物生长，一般需要在2～4周后将培养物转移至新鲜培养基中继续培养
【答案】A
【解析】
【分析】1、植物组织培养的过程：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）愈伤组织胚状体→植株（新植体）。2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）；决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。
【详解】A、细胞若离体后在培养基上培养时会由原来的分化状态，失去原有的某些具有特定结构和功能的细胞结构（如叶肉细胞的叶绿体等），变成分生状态的细胞，分裂产生愈伤组织，即愈伤组织是没有特定功能的，A错误；
B、幼嫩的材料容易在酒精中失绿或被酒精杀死，不同取样时期消毒处理方法有差别，故取样时间也会影响粉美人萱草无菌材料的获得，B正确；
C、植物生命活动受到激素、环境以及基因表达的共同调控，不同种类植物对培养基的成分如激素浓度、比例要求不同，再生能力也存在差异，C正确；
D、为了防止由于营养物质的枯竭，水分的散失，以及一些组织代谢产物的积累，必须将组织及时转移到新的培养基上，以免影响细胞正常生命活动，D正确。
故选A。
6. 制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括 ( )
①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植
A. ①②B. ①③
C. ②③D. ③④
【答案】A
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体，整个过程不涉及胚胎移植和细胞核移植这两项技术。 单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术等。
【详解】本题考查单克隆抗体的制备原理。制备单克隆抗体时，首先采用细胞融合技术得到杂交瘤细胞，再采用动物细胞培养技术获得能产生所需抗体的细胞群，故选A。
7. 试管婴儿、试管苗和克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果，下面叙述正确的是（ ）
A. 都需细胞工程的技术支持B. 都能保持母本性状属于无性生殖
C. 都充分体现了体细胞的全能性D. 都可能发生突变和基因重组
【答案】A
【解析】
【分析】1、试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。
2、植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。
3、动物核移植是将将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物。
【详解】A、试管婴儿涉及到的技术是体外受精和胚胎移植，属于胚胎工程的技术，胚胎工程需要动物细胞工程的技术支持，通过植物组织培养获得试管苗，以及核移植和胚胎移植获得的克隆羊属于细胞工程的相关技术，A正确；
B、试管婴儿属于有性生殖，具有两个亲本的遗传特性，植物组织培养获得试管苗，属于无性生殖，克隆羊属于无性生殖，遗传特性主要来源于供体细胞，B错误；
C、试管婴儿体现受精卵的全能性，试管苗体现植物体细胞的全能性，克隆羊体现动物体细胞的细胞核具有全能性，C错误；
D、植物组织培养获得试管苗和克隆羊都属于无性生殖，不能发生基因重组，D错误。
故选A。
8. 将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，融合后的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（ ）
A. 骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
B. B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生抗体
C. 骨髓瘤细胞可以无限增殖，且能产生抗体
D. B淋巴细胞可以产生抗体，但在体外培养不能无限增殖，骨髓瘤细胞可以无限增殖
【答案】D
【解析】
【分析】在单克隆抗体的制备过程中，需要用浆细胞与骨髓瘤细胞融合；诱导动物细胞融合时，使用聚乙二醇或灭活的病毒作为诱导剂；动物细胞融合后，经过筛选获得的杂交瘤细胞具有既能无限增殖又能分泌单一抗体的特点。
【详解】A、骨髓瘤细胞不能产生专一性抗体，但在体外能无限繁殖，A错误；
B、B淋巴细胞只有在抗原的刺激下才能增殖分化形成效应B细胞（浆细胞），才能产生特异性抗体，B错误；
C、骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体，C错误；
D、B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖，骨髓瘤细胞可以无限增殖，D正确。
故选D。
9. 如图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程，下列相关叙述正确的是（ ）
A. “人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，但环境污染严重
B. 用胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞
C. 生物反应器内应控制适宜的温度，并充入纯氧保证细胞呼吸
D. 培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
【答案】D
【解析】
【分析】用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培养不仅产量高，并可以减少成本和降低环境污染。
【详解】A、理论上来说，仅来自1只动物的干细胞，可制成的肉品数量，比宰杀1头牛还多100万倍，可有利于牛肉的工厂化生产，同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，A错误；
B、胰蛋白酶处理动物组织，可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，B错误；
C、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2，C错误；
D、动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上，培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。
故选D。
10. 列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述正确的是（ ）
A. 受精完成并开始发育标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体
B. 受精卵在输卵管内进行卵裂时，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加
C. 受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期
D. 胚胎发育至原肠胚时期即开始了细胞分化，随后发育形成三个胚层
【答案】B
【解析】
【分析】1、卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。
2、受精作用的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体，还有一个是第二极体）。
【详解】A、在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体，说明卵细胞已经完成了受精，这是判断卵细胞是否受精的重要标志，不是判断开始发育的标志，A错误；
B、形成的受精卵在输卵管内开始进行卵裂，卵裂过程中，每个细胞的体积不断缩小，细胞的总体积基本不变或略有缩小，故卵裂过程中细胞数量增加但胚胎总体积基本不增加，B正确；
C、孵化是指囊胚从透明带出来，孵化后进入原肠胚阶段，C错误；
D、细胞分化开始于囊胚时期，D错误。
故选B。
11. 我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”。研究流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 睾丸中的精原干细胞也属于胚胎干细胞
B. ③处的细胞将来可发育成胎儿的各种组织
C. 需要在充满CO2的培养箱中培养胚胎干细胞
D. 人工“猴胚胎”的遗传特性与代孕受体保持一致
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎干细胞具有全能性，利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，是利用了胚胎干细胞的全能性。
【详解】A、由胚胎干细胞来自于早期胚胎或早期原始性腺，精原干细胞不属于胚胎干细胞，A错误；
B、③是内细胞团的细胞，具有发育全能性，可发育成胎儿各种组织，B正确；
C、动物细胞培养和早期胚胎培养需要在95%空气和5%二氧化碳环境中培养，C错误；
D、人工“猴胚胎”的遗传特性与提供胚胎干细胞的供体基本一致，代孕受体提供营养，D错误。
故选B。
12. 采用机械方法将早期胚胎切割后移植，可以获得同卵双胎或多胎，下列说法正确的是（ ）
A. 胚胎分割时，应选取发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚
B. 利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎
C. 胚胎分割时，需将囊胚的滋养层进行均等分割
D. 胚胎移植充分发挥雌性优良受体的繁殖潜能
【答案】B
【解析】
【分析】1、胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。2、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
【详解】A、胚胎分割时，应选取发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，A错误；
B、来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎，B正确；
C、胚胎分割时需将囊胚阶段的内细胞团进行均等分割，C错误；
D、胚胎移植充分发挥雌性优良供体的繁殖潜能，产生更多的优良后代，D错误。
故选B。
13. 下列关于DNA重组技术基本工具的说法，正确的是（ ）
A. DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键
B. 限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端
C. 质粒是基因工程中唯一的载体
D. 微生物中的限制性核酸内切酶对自身DNA无损害作用
【答案】D
【解析】
【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。（2）DNA连接酶：据酶的来源不同分为两类：E．cliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。（3）运载体：常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
【详解】A、DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成磷酸二酯键，A错误；
B、限制酶切割DNA后能产生黏性末端或平末端，B错误；
C、质粒是基因工程中常用的载体，噬菌体的衍生物、动植物病毒也可以作为基因工程的运载体，C错误；
D、微生物中的限制酶对自身DNA无损害作用，主要用于切割外源DNA，D正确。
故选D。
14. 关于“DNA的粗提取及鉴定”实验的叙述，错误的是（ ）
A. 初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精
B. 鉴定提取物中有DNA的原理是在常温下，DNA遇二苯胺试剂呈蓝色
C. 在提取白色丝状物时单向搅拌比双向搅拌更有利于获得结构完整的DNA
D. 往洋葱研磨液经离心后的上清液中加入冷酒精的目的是获得含杂质少的DNA
【答案】B
【解析】
【分析】DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。
【详解】A、初步分离 DNA 与蛋白质的原理是 DNA 不溶于酒精而蛋白质溶于酒精，A正确；
B、鉴定提取物中有DNA 的原理是在水浴加热条件下，DNA 遇二苯胺试剂呈蓝色，B错误；
C、在提取白色丝状物时单向搅拌比双向搅拌更有利于获得结构完整的 DNA，C正确；
D、往洋葱研磨液经离心后的上清液中加入冷酒精的目的是获得含杂质少的 DNA，D正确。
故选B。
15. RDX是一种弹药使用后残留的危险污染物。研究人员将两个源于细菌的RDX 降解酶基因 XplA 和 XplB 插入柳枝稷草染色体中，如图所示，使柳枝稷草获得降解实弹射击场土壤中RDX的能力。若要通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA 和 XplB 基因，应选择的引物组合是（ ）
A. 引物 1+引物3
B 引物 1+引物4
C. 引物2 +引物3
D. 引物2+引物4
【答案】A
【解析】
【分析】引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸，检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA 和 XplB 基因，应该是扩增包括XplA 和 XplB 基因和两侧T-DNA基因片段。
【详解】ABCD、根据启动子位置，若正确插入，模板链应为甲图中下链，则引物1应与下链的3'端结合，引物3可以结合甲图上链的3'端，引物 1+引物3可通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA 和 XplB 基因，A正确，BCD错误。
故选A。
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。为培育抗黑腐病杂植株，研究者设计如下流程。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 过程①需要使用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶来处理两种细胞
B. 过程②后，显微镜下观察到有叶绿体的细胞即为融合细胞
C. 过程③的培养基中需加入植物激素来诱导脱分化和再分化
D. 可借助PCR技术、黑腐病菌接种实验对杂种植株进行鉴定
【答案】D
【解析】
【分析】1、植物的体细胞杂交就是将同种或不同种的细胞经过一定的诱导方法诱导融合形成一个细胞，再将细胞培育成植株的过程。
2、杂种细胞再生出新的细胞壁是植物原生质体融合的标志，细胞中高尔基体与细胞壁的形成有关。
3、植物体细胞杂交的优点是：克服远缘杂交不亲和的障碍，培育远缘杂种植株。
4、杂种细胞经过植物组织培养的再分化过程，可选择性表达出亲本细胞的相应性状。
5、分析题图：图示为采用植物体细胞杂交技术获得抗黑腐病杂种植株的流程图，其中①表示采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁的过程；②表示诱导原生质体融合的过程；③是脱分化形成愈伤组织的过程。
【详解】A、过程①是去除细胞壁，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A错误；
B、过程②表示诱导原生质体融合的过程，显微镜下观察有无叶绿体作为初步筛选的标志，还需要鉴定是否具有抗黑腐病特性来确定融合细胞，B错误；
C、过程③是脱分化形成愈伤组织的过程，没有再分化，C错误；
D、在分子水平上可通过PCR技术对杂种植株进行鉴定，在个体水平上可以通过对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株，D正确。
故选D。
17. 我国科学家首次通过把食蟹猴的胚胎干细胞注射到猪的胚胎中，培育出了“猪—猴嵌合体”仔猪（如下图所示）。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 细胞培养过程中细胞会因接触抑制而停止分裂，需用胃蛋白酶处理后继续传代培养
B. 采集的卵母细胞需培养至MII期才能与获能的精子受精，进而获得猪胚胎
C. 从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能
D. 培育出的“仔猪”细胞遗传物质是猴细胞与猪细胞之和，具有猴和猪的融合性状
【答案】AD
【解析】
【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、动物细胞培养过程中会因接触抑制而停止分裂增殖，需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理后继续培养，A错误；
B、体外受精时，需要将所采集到的卵母细胞在体外培养到减数第二次分裂中期，才可以与获能精子完成受精作用，进而获得猪胚胎，B正确；
C、胚胎干细胞具有发育的全能性，故从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取的胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能，C正确；
D、培育出的“仔猪”细胞遗传物质一部分来自猴细胞，一部分来自猪细胞，不是猴细胞与猪细胞之和，D错误。
故选AD。
18. 我国科学家将含有人凝血因子基因的DNA片段导入到羊的受精卵中，由该受精卵发育而成的羊，分泌的乳汁中含有人的凝血因子，可用于治疗血友病。下列叙述正确的是（ ）
A. 这项研究说明人和羊共用一套遗传密码
B. 该羊的乳腺细胞中含有人的凝血因子基因
C. 该羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子基因
D. 该羊的后代也可能含有人的凝血因子基因
【答案】ABD
【解析】
【分析】基因能控制蛋白质的合成，生物界共用同一套遗传密码。基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
【详解】A、自然界中的所有生物共用同一套遗传密码，这是人的凝血因子基因能在羊的乳腺细胞中表达的基础，A正确；
BC、该羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子，说明该羊的乳腺细胞中含有人的凝血因子基因，但该羊的乳汁中不含有人的凝血因子基因，B正确，C错误；
D、将含有人凝血因子基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，培育出的转基因羊的性腺细胞含有该基因，通过减数分裂产生的卵细胞可能含有该基因，其后代也可能含有人的凝血因子基因，D正确。
故选ABD。
19. 图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcRI、BamHI、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcRI
B. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcRI酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcRI酶切点有1个
C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时处理
D. 一个图1所示的质粒分子经EcRI切割后，含有2个游离的磷酸基团
【答案】ACD
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定：
(1)分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
(2)个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、目的基因两侧都有，且质粒也有的限制酶是EcRI，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcRI，A正确；
B、如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcRI酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcRI酶切点有2个，B错误；
C、为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理，C正确；
D、一个图l所示的质粒分子经EcRⅠ切割后，产生两个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，D正确。
故选ACD。
20. 研究者用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，用以解决杂交瘤细胞传代培养中B淋巴细胞染色体丢失的问题。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活。下图为该实验操作示意图。相关叙述错误的是（ ）
A. B淋巴细胞可从多次间歇注射抗原的动物脾脏中获得
B. HAT培养基的作用主要是为了去除未融合的EBV转化细胞
C. 未融合的EBV转化细胞和骨髓瘤细胞死亡的原因相同
D. 筛选后的杂交瘤细胞具有产生抗EBV抗体的能力
【答案】BCD
【解析】
【分析】单克隆抗体制备时，首先要给小鼠免疫，产生相应的浆细胞，然后将浆细胞与骨髓瘤细胞融合，经过选择培养基两次筛选，最后获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。在单克隆抗体的制备过程中，使用了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术。
【详解】A、B淋巴细胞在骨髓中发育成熟，可分布于淋巴结和脾脏等处，故B淋巴细胞可来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等处，A正确；
B、HAT培养基的作用主要是为让细胞存活，而乌本苷（Oua）起筛选作用，B错误；
C、未融合的EBV转化细胞的死亡为Oua的作用，而骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活，C错误；
D、本实验中EBV的作用是获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，而不是刺激B细胞分化成浆细胞产生抗体，所以该杂交瘤细胞不能产生抗EBV的抗体，D错误。
故选BCD。
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域，辣椒素的获得途径如图所示。回答下列问题：
（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的__________和__________过程，要获得脱毒苗，对外植体的取材要求是__________。
（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是__________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值__________（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是___________。
（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是___________。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是__________和纤维素酶。
（4）细胞产物工厂化生产是植物组织培养技术的重要应用。高产细胞系须培养至__________，再从中提取辣椒素。
【答案】（1） ①. 脱分化 ②. 再分化 ③. 切取一定大小的茎尖进行组织培养
（2） ①. 琼脂 ②. 低 ③. 湿热灭菌法（高压蒸汽灭菌法）
（3） ①. 70% ②. 果胶酶
（4）愈伤组织
【解析】
【分析】分析题图：①是脱分化过程、②是再分化过程。上面一种途径是通过植物组织培养技术获得脱毒苗，再从果实中获得相应的产物；下面一种途径是采用植物细胞培养技术获得大量细胞产物。
【小问1详解】
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程称为脱分化，脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。要获得脱毒苗，对外植体的取材要求是切取一定大小的茎尖进行组织培养。
【小问2详解】
培养基中常用的凝固剂是琼脂。生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化；反之则利于根的分化。培养基应用湿热灭菌法灭菌（高压蒸汽灭菌法）。
【小问3详解】
外植体消毒所用酒精的体积分数是70%；植物细胞的细胞壁含有纤维素和果胶，故用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是果胶酶和纤维素酶。
【小问4详解】
人们期望利用植物细胞培养来获得目标产物，这个过程就是细胞产物的工厂化生产。植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。高产细胞系须在培养基培养至愈伤组织，再从中提取辣椒素。
22. 动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。现在已经广泛应用于多种学科的研究：新发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径。研究表明DNA合成有两条途径：“S途径”和“D途径”，淋巴细胞(浆细胞)有“S途径”和“D途径”；骨髓瘤细胞只有“D途径”；HAT培养液中氨基蝶呤可以阻断DNA合成的“D途径”。下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。回答下列问题：
⑴___________技术是单克隆抗体技术的基础。
⑵单克隆细胞是指__________________________________________________。
⑶单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是____________。
⑷杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_____________特点，又具备淋巴细胞的__________特点。
⑸图示过程，有两次的筛选。第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞，那么淋巴细胞(浆细胞)在HAT培养液中不生长的原因是_________，骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是_______。
【答案】（1）细胞培养技术、细胞融合技术 （2）单个细胞增殖，形成的细胞群
（3）特异性强，灵敏度高 （4）在体外大量增殖（无限增殖） 分泌特异性抗体
（5）缺乏在体外培养液中增殖的能力 其DNA合成途径被氨基蝶呤阻断而不能进行DNA复制
【解析】
【分析】单克隆抗体制备过程中两次筛选的方法及目的：
【详解】（1）细胞培养技术、细胞融合技术是单克隆抗体技术的基础。
（2）单克隆细胞是指单个细胞增殖，形成的细胞群。
（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是特异性强，灵敏度高，可大量制备。
（4）杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的在体外大量增殖（无限增殖）的特点，又具备淋巴细胞能分泌特异性抗体的特点。
（5）图示过程中有两次的筛选，第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞，那么淋巴细胞（效应B细胞）在HAT培养液中不生长的原因是缺乏在体外培养液中增殖的能力；骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是其DNA合成途径被氨基蝶呤阻断而不能进行DNA复制。
23. 近年来，由于世界人口的迅速增长、生物资源的过度开发和环境污染的日渐增重等诸多问题，导致野生动物郊狼的物种数量不断减少、濒临灭绝，采集精子或卵子开展常规辅助生殖较为困难，甚至无法完成。科研人员利用种间体细胞核移植技术（iSCNT）在野生动物遗传资源的保护中发挥了重要作用。具体流程如下：
（1）图示过程中①是___，②是___，③通常需要激活，使其完成___进程。
（2）与胚胎细胞核移植技术相比，iSCNT技术难度更___，原因是___。
（3）一般来说，郊狼的耳廓组织在培养时除营养外，还需提供的条件是适宜的温度、pH和渗透压、___、___。
（4）从生态的角度分析，iSCNT技术的优点是___。
【答案】（1） ①. 第一极体 ②. 透明带 ③. 细胞分裂和发育
（2） ①. 大 ②. 体细胞分化程度高，表现全能性更困难
（3） ①. 无菌、无毒的环境 ②. 适宜的气体环境
（4）利于保护生物多样性，维持生态系统稳定性
【解析】
【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。）
【小问1详解】
据图可知，图中①是第一极体，②是透明带；③是重组细胞，通常需要激活，使其完成细胞分裂和发育进程。
【小问2详解】
与胚胎细胞核移植技术相比，种间体细胞核移植技术（iSCNT）的成功率更低，这是由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，故与胚胎细胞核移植技术相比，iSCNT技术难度更大。
【小问3详解】
郊狼的耳廓组织在培养时除营养外，还需提供的条件是适宜的温度、pH和渗透压、无菌、无毒的环境以及适宜的气体环境（95%空气和5%的CO2）。
【小问4详解】
从生态的角度分析，iSCNT技术的优点是利于保护生物多样性，维持生态系统稳定性，故iSCNT在野生动物遗传资源的保护中发挥了重要作用。
24. 北极比目鱼体内含有抗冻基因A，其编码的抗冻蛋白中含有一段具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数与其抗冻能力呈显著正相关。如图是利用抗冻基因 A获得转基因抗冻番茄植株的过程示意图。回答下列问题：
（1）进行过程①时需要____（答3种）等基本条件。
（2）过程②属于可遗传变异中的____，判断的依据是____。
（3）图中表示构建表达载体的步骤是____（填序号），该过程需要的工具酶有____。
（4）为了检测抗冻番茄植株是否成功培育，应将该植株放在____环境中培养。
（5）欲获得无籽番茄，应该对番茄花进行的处理有____。（编号选填）
①人工授粉 ②人工去雄 ③施加生长素类似物 ④施加秋水仙素
【答案】（1）模板（RNA）、原料（脱氧核苷三磷酸/dNTP）、能量（ATP）、酶（逆转录酶）、引物
（2） ①. 基因突变 ②. 该过程中抗冻基因A内部发生了碱基序列的改变（碱基增添）
（3） ①. ③ ②. 限制酶（限制性内切核酸酶）和DNA连接酶
（4）低温（寒冷） （5）②③
【解析】
【分析】题图分析，过程①是以mRNA为模板通过逆转录方法合成DNA并获得目的基因，②是扩增目的基因的过程，获得具有多个重复序列的基因A，③是构建基因表达载体，④是通过组织培养形成植株的过程。
【小问1详解】
过程①是以RNA为模板合成DNA的过程，为逆转录，该过程需要mRNA做模板、四种脱氧核苷酸（或dNTP）为原料，ATP提供能量，逆转录酶催化，即该过程需要的条件包括模板（RNA）、原料（脱氧核苷三磷酸/dNTP）、能量（ATP）、酶（逆转录酶）、引物等。
【小问2详解】
过程②是基因A内部中多个序列重复导致碱基序列改变，从而引起基因结构改变，因此，该变异类型为基因突变。
【小问3详解】
转基因工程的核心工作是构建基因表达，即③过程；该过程需要限制酶（切割目的基因和运载体）和DNA连接酶（连接切割后的目的基因和运载体）的参与。
【小问4详解】
本实验的目的是为了获得抗冻番茄植株，因此，为了检测抗冻番茄植株是否成功培育，应将该植株放在低温（寒冷）环境中培养，该方法属于个体生物学鉴定。
【小问5详解】
①人工授粉可获得有子番茄；
②人工去雄能避免授粉获得种子，因而可以获得无籽番茄；
③施加生长素类似物能促进子房发育成果实，进而获得无子番茄；
④施加秋水仙素不能获得无子番茄。
可见为了获得无子番茄应该对番茄花进行的处理有②③。
25. 人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：
（1）科学家用PCR的方法对htPA基因进行体外扩增，基本过程如下图，请据图回答：
①PCR包括三个步骤I___________、Ⅱ___________、Ⅲ___________。
②加热至94℃的目的是使DNA样品的___________键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过___________酶的作用来完成的。
③如果htPA基因的部分序列是：
5'-ATGGCT……AGGAAC-3'
3'-TACCGA……TCCTTG-5'
根据上述序列，应选择引物___________（填字母）进行PCR。
A．引物：5'-GTTCCT-3'B．引物：5'-TACCGA-3'C．引物：5'-ATGGCT-3' D．引物：5'-AUGGCU-3'
（2）为获得更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其___________。采集的精子需要经过___________，才能具备受精能力。
（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是___________，通常用___________等技术检测htPA基因是否插入到早期胚胎的染色体DNA上。
【答案】（1） ①. 变性 ②. 复性 ③. 延伸 ④. 氢 ⑤. 解旋 ⑥. AC
（2） ①. 超数排卵 ②. 获能
（3） ①. 显微注射法 ②. PCR
【解析】
【分析】PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。
【小问1详解】
①PCR技术中每轮循环依次包括Ⅰ变性、Ⅱ复性、Ⅲ延伸三个步骤。
②加热至94℃的目的是使DNA样品的氢键断裂，将DNAA双链解开成单链，这一过程在生物体细胞内是通过解旋酶的作用来完成的。
③已知htPA基因的部分序列是：，由于PCR技术中，子链合成的方向是从5'到3'，且引物要与基因的两条链两端部分序列碱基互补，因此应选择引物5'-GTTCCT-3'和引物5'-ATGGCT-3'进行PCR扩增。AC正确，BD错误。
故选AC。
【小问2详解】
为获得更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵。采集的精子需要经过获能（处理），才能具备受精能力。
【小问3详解】
将含有目的基因的重组表达载体导入受精卵的方法是显微注射法，检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用PCR技术。
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