统考版2024高考生物二轮专题复习整合训练17生物技术实践

这是一份统考版2024高考生物二轮专题复习整合训练17生物技术实践，共11页。试卷主要包含了12 g尿素)；CM12，1 g，89等内容，欢迎下载使用。

1.[2023·湖南师大附中三模]自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。回答下列问题：
(1)步骤①土样应取自表层土壤的原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的________培养基，原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)步骤④所用的接种工具是________，若在④的平板上统计的菌落的平均数量为126个，则每克土壤中含有的固氮菌为________个。
(4)将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩大培养48小时，经离心后收集下层细胞并转移至特定培养基中进行固氮能力的测定，筛选出固氮能力最强的菌种CM12，为进一步鉴定其固氮能力，科研人员选用发芽一致的玉米种子进行3组盆栽实验，30天后测定土壤微生物有机氮含量，结果如图。
注：CK：对照处理组；N：尿素处理组(每盆土壤中50 mL有氮全营养液：成分为在1 000 mL无氮植物营养液中加入0.12 g尿素)；CM12：自生固氮菌CM12处理组(每盆土壤浇50 mL，接种自生固氮菌的无氮植物营养液)。
①对照组(CK)的处理为________________________________。
②实验结果表明：施用尿素处理和接种固氮菌CM12处理均能显著增加土壤微生物有机氮含量。与CK组相比，CM12处理组土壤微生物有机氮含量增加了约____%。
③自生固氮菌较共生固氮菌(如根瘤菌)的应用范围更广，原因是________________________________________________________________________
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2．[2023·湖南长郡中学模拟预测]甘肃某地由于TNT(主要成分为2，4­二硝基甲苯磺酸盐)红水蒸发池渗漏，对土壤造成严重污染，威胁到黄河上游的水质安全。因此，TNT红水污染土壤修复是目前亟待解决的环境问题。某实验小组欲通过生物修复分离有效降解2，4­二硝基甲苯磺酸盐的菌株，进行了如下实验。请回答下列问题：
(1)LB培养基的制备：取胰蛋白胨、NaCl和酵母提取物溶于蒸馏水中，此过程中胰蛋白胨提供的营养物质是____________，用NaOH调节pH至7.2，用________________在121 ℃条件下灭菌15分钟。若要获得本研究所用的固体培养基，需在上述培养基中加入________。
(2)菌株分离与鉴定：取____________________________土壤放入装有100 mL无菌LB液体培养基的锥形瓶中，在30 ℃和120 rpm的恒温摇床上振荡24小时，此过程的目的是____________。取1 mL培养液，采用____________法分离纯化菌株。
(3)该实验小组欲进一步探究菌株对2，4­二硝基甲苯磺酸盐的降解能力，请帮助设计实验，写出实验思路：________________________________________________________________________
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(4)探究盐度对菌株生长的影响研究发现，纯化的菌株在NaCl浓度为0%～3%之间对2，4­二硝基甲苯磺酸盐的降解率在96小时后达到90%，但当NaCl浓度达到5%后，降解率几乎为0。研究中偶然发现菌株B1在NaCl浓度达到5%后，降解率却达到50%，说明________________________________________________________________________
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3．[2023·重庆市育才中学一模]杨梅果实风味独特，酸甜适中，具有很高的营养价值和保健价值。下图是制作杨梅酒和杨梅醋的流程图。请回答下列问题。
制取发酵液：向杨梅汁中加入白砂糖，将糖的质量分数调至8%，灭菌冷却→酒精发酵：接种酵母菌，恒温发酵→果醋发酵：加入酒精，接种醋酸菌→取样检测：对发酵产物进行检测
(1)传统发酵中，发酵液虽然未经过严格的灭菌处理，但杂菌却不能正常生长繁殖，这是由于果酒发酵的____________条件抑制了杂菌的生长。
(2)果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生酒精的场所是____________，该阶段应该将温度控制在____________；温度适宜时果酒发酵时间较短，原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)杨梅醋的发酵过程中，除去必需的营养物质外，还需要往发酵液中持续地通入____________________，发生的化学反应式是：__________________________________。
(4)下图表示果酒发酵过程中，发酵液的糖度(葡萄糖的质量分数)和酒精度(酒精的体积分数)随时间变化的关系。发酵前24 h，糖度变化很小，酒精度上升很慢，其原因是____________________________________________。96 h后酒精度和糖度的变化都趋于平缓，其原因是________________________________________________________________________
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4．[2023·黑龙江哈尔滨三中一模]下表是某同学列出的分离土壤中微生物的培养基配方，据此回答下列问题：
(1)从作用上看，该培养基属于________培养基，提供氮源的物质是________，细菌能利用该氮源是由于体内能合成________酶。
(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入________指示剂。若指示剂变________，说明有目的菌株存在。
(3)为了测定微生物的数量，接种时应采用________________法，某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1 mL，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为________个，测定的活菌数比实际活菌数________(填“低”“高”或“基本一致”)。
重点选做题
5.[2023·江西南昌二模]酶是高效的生物催化剂，在现代生活中具有广泛的应用。回答下列相关问题：
(1)制作果汁要解决两个主要问题：一是果肉的________________，二是榨取的果汁________________，易发生沉淀。人们可以使用________________来解决上述两个问题。
(2)洗衣粉中加入酶，可以有更好的去污能力。其中，______________和______________是最常用的两种酶。洗衣粉中的酶使用过后难以重复使用，增加了生产成本。将酶固定在________的载体上，可以提高酶的使用率，降低成本。如果将生产酶的细胞固定，理论上也能起到类似的效果，固定细胞常用的载体有____________________________________________等，固定细胞常采用________法。
6．[2023·福建厦门一中校考一模]苹果树腐烂病由真菌感染引起，为了开发生物防治该病的途径，研究者拟从土壤中分离筛选出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌，实验流程如下图。
(1)配制培养基时，培养基的灭菌应该在调pH________(填“之前”或“之后”)，培养基灭菌的常用方法是____________。
(2)图中①过程取5g土壤加入________ mL无菌水中，②③过程用______________法获得芽孢杆菌单菌落，若10－1、10－2悬液对应平板上菌落完全覆盖培养基，10－3、10－4、10－5对应平板平均菌落数分别为589、112、12个，则取样土壤中芽孢杆菌总数约________个。
(3)目的菌筛选时，应取直径为5mm的苹果腐烂病菌菌落移置于________(填“A”或“B”)处，将芽孢杆菌接种________(填“A”或“B”)处。
(4)检测各抗菌株发酵滤液的抑菌效果进行进一步筛选，尝试用于苹果树腐烂病防治。与化学防治相比，该方法的优势是______________________________________。
7．[2023·西藏日喀则统考一模]Ⅰ.无花果果肉绵软、不易长期贮藏，因此将无花果加工成果酒，无疑为无花果的深加工提供了一条新的途径。用无花果榨取果汁并制作果酒的简要流程如下：
(1)利用无花果制作果汁时，使用果胶酶的目的是____________________________。
(2)酵母菌是理想的酒精发酵菌种，其细胞内将葡萄糖分解为酒精的酶存在于____________。根据实际经验，添加适量的糖能够增加酒精度，原因是____________________________________________________________________。
Ⅱ.酿制成功的无花果果酒暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现醋酸味，兴趣小组想要通过培养细菌的方法验证醋酸杆菌的代谢类型。
(3)对培养基常用的灭菌方法是__________，接种细菌常用的方法是____________________________。
(4)该实验小组成功分离出醋酸杆菌后，用移液器设定1 mL的接种量并分别接种于三个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，放置在摇床上培养，设定摇床转速分别为210 r/min、230 r/min、250 r/min，检测结果如图所示。从图中数据你可以得出什么结论：______________________________________________________。由此可知醋酸杆菌的代谢类型为________(填“需氧型”或“厌氧型”或“兼性厌氧型”)。
8．[2023·四川成都石室中学校考模拟]泡菜是一种独特且具有悠久历史的发酵蔬菜制品，回答下列问题：
(1)泡菜发酵的原理是____________________________________。
(2)泡菜制作中，需注意控制食盐用量以及________________，否则容易造成______________而导致亚硝酸盐增加，影响泡菜品质。
(3)泡菜发酵过程中，乳酸菌的呼吸作用本来无气体产生，但是在实际腌制过程中，从外观上可以看到泡菜瓶中有间歇性的气泡冲出，坛盖有响声，其有气泡的原因可能是__________________________________________________________。
(4)泡菜发酵过程中，为确定最佳取食时间，需检测亚硝酸盐含量。回答下列问题：
补充检测步骤：①配置溶液；②________；③制备样品处理液；④__________。
检测亚硝酸盐含量的原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与____________发生重氮化反应后，与N­1­萘基乙二胺盐酸盐结合形成________色染料。
9．[2023·江西宜春统考模拟]生物技术实践会涉及微生物的筛选、物质的提取等内容。请回答下列问题：
(1)若以新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌，分离纯化时，首先需要用蒸馏水对泡菜滤液进行________，在所用________培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。推测培养基中加入碳酸钙的作用有鉴别乳酸菌和______________________，分离纯化时应挑出________的菌落作为候选菌。
(2)若以茉莉花瓣为原料，采用水蒸气蒸馏法可以提取茉莉油。如果在蒸馏过程中不进行冷却，则茉莉油提取量会下降，原因是______________________________。水蒸气蒸馏后得到油水混合物，在油水混合物中加入氯化钠的目的是______________________。
(3)β­胡萝卜素即维他命A，存在于在各种水果和蔬菜。胡萝卜素可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得。从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和________，以提高萃取效率，萃取过程中宜采用水浴方式加热以防止温度过高。天然胡萝卜素可医治维生素A缺乏症，是因为__________________________。
10．[2024·四川内江统考模拟]栀子果实因含有栀子黄而呈现橙黄色。栀子黄的主要成分是一类少有的水溶性类胡萝卜素，可作为抗氧化剂和着色剂应用于食品工业中。回答下列问题：
(1)实验中，提取栀子黄可选择的萃取剂是________(填“乙醇”或“石油醚”)，理由是______________________。
(2)萃取的效率主要取决于萃取剂的__________________________。为了提高萃取栀子黄的效率，萃取前需对栀子果实进行的处理是____________。
(3)萃取过程中，应该避免明火加热，采用水浴加热，原因是____________________；同时还需在加热瓶口安装回流冷凝装置，目的是______________________。
11．[2023·四川遂宁射洪中学校考模拟]研究显示溶藻细菌对控制水华有非常重要的作用。研究人员从某池塘中采集水样，加入无菌锥形瓶中，用摇床在37 ℃条件下振荡培养20 min，使其均匀分散成菌悬液，再通过分离、纯化、鉴定得到了溶藻细菌。请回答下列问题：
(1)分离前需用无菌移液管从菌悬液中吸取菌液1 mL，将其进行梯度稀释100倍的具体操作是__________________________________________________________。
(2)水华为蓝藻等暴发所致。研究人员尝试利用溶藻细菌限制蓝藻数量，相关实验如图甲所示(图中①～⑥表示实验步骤)。实验组中每个培养皿做三个重复实验。
请指出本实验设计方案的不合理之处：____________，并补充完善：________________________________________。
(3)科研人员发现溶藻细菌中富含果胶酶，通过酶解法和吸水涨破法释放出其中的果胶酶，分离该酶的方法有____________和电泳法，其中电泳法的原理是根据蛋白质分子的______________________、大小以及形状的不同，在电场中的________________不同而实现分离。
(4)本实验中用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳对所提取的酶进行鉴定。根据如上图的电泳结果，某同学得出“所提取的酶具有两条链”的结论，此结论是否可靠，理由是____________________________________________________________________。
12．[2023·广东惠州二模]果胶酶在食品、医药和纺织等领域有广泛应用，科研人员从芦苇植株中分离筛选出高产果胶酶的菌株4株，编号为Z1～Z4，并分别对菌株所产果胶酶的酶学特性进行了研究，酶活力测定结果如下表所示。根据资料回答下列问题：
注：Dp/Dc为透明圈的直径(Dp)与菌落直径(Dc)的比值，比值越大代表产生的果胶酶的量越多。
(1)为筛选产果胶酶的菌株，将芦苇根部中间部分浸出液接种至以________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于________培养基。配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是__________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)由表可知，最理想的产果胶酶的菌株是________，依据是________________________________________。
(3)用果胶酶处理果泥时，需要控制反应的温度，原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(4)研究表明，目的菌株所产果胶酶在30～80 ℃都是稳定且有活性的，如下图所示。现要缩小温度范围进一步探究果胶酶的最适温度，请补充完善实验思路：
①探究范围：在40～50 ℃范围内，设置一系列温度梯度；
②实验处理：___________________________________________________________
________________________________________________________________________，
其他条件相同且适宜；
③结果与结论：一段时间后检测各试管中果胶的剩余量，______________________________________即为最适温度。
整合训练(十七)
1．解析：(1)固氮菌一般是异养需氧型，所以在富含有机质的土壤表层，有更多的固氮菌生长，故步骤①土样取自当地表层土壤。(2)表格为两种培养基的配方，步骤④应选其中的Ashby培养基，原因是该培养基不含氮源，具有选择作用，自生固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源，LB培养基中的蛋白胨可以提供氮源，不具有选择作用。(3)实验采用的是稀释涂布平板法，所以步骤④中所用的接种工具是涂布器。若在④的平板上统计的菌落的平均数量为126个，则每克土壤中含有的固氮菌为126÷0.1×104＝1.26×107个。(4)①对照组的目的是排除无关变量对实验的影响，故对照组(CK)的处理为每盆土壤浇50mL无氮植物营养液。②由柱状图可知，空白对照组中土壤微生物有机氮含量为10，CM12处理组土壤微生物有机氮含量为22，故与对照组相比，CM12处理组土壤微生物有机氮含量增加值大概为(22－10)÷10×100%＝120%。③自生固氮菌比共生固氮菌(如根瘤菌)的应用范围更广，原因是自生固氮菌能在土壤中独立固氮，不受宿主的限制。
答案：(1)在富含有机质的土壤表层，有更多的固氮菌生长(或固氮菌一般为需氧型，生活在土壤表层)
(2)Ashby培养基 该培养基不含氮源，具有选择作用，自生固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源，LB培养基中的蛋白胨可以提供氮源，不具有选择作用
(3)涂布器 1.26×107
(4)每盆土壤浇50mL无氮植物营养液 120 自生固氮菌能在土壤中独立固氮，不受宿主的限制
2．解析：(1)蛋白胨既可以提供碳源，也可以提供氮源；用NaOH调节pH至7.2，在121℃条件下用高压蒸汽灭菌锅灭菌15分钟；若要获得本研究所用的固体培养基，需在上述培养基中加入琼脂。(2)自然界中目的菌株的筛选依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，本实验要分离有效降解2，4-二硝基甲苯磺酸盐的菌株，因此取甘肃某TNT红水污染场地污染土壤放入装有100mL无菌LB液体培养基的锥形瓶中，在30℃和120rpm的恒温摇床上振荡24小时，此过程的目的是富集培养，让微生物的数目增加；取1mL培养液，采用稀释涂布平板法分离纯化菌株。(3)要分析菌株对2，4-二硝基甲苯磺酸盐的降解能力，可以取人工配制的一定浓度的2，4-二硝基甲苯磺酸盐(TNT)溶液加入锥形瓶中，之后再在锥形瓶中加入一定量的纯化菌液，每隔一定时间取样，测定2，4-二硝基甲苯磺酸盐浓度。(4)由题干可知，纯化菌株在NaCl浓度为0%～3%之间对2，4-二硝基甲苯磺酸盐的降解率在96小时后达到90%，但当NaCl浓度达到5%后，降解率几乎为0。而偶然发现菌株B1在NaCl浓度达到5%后，降解率达到50%，说明菌株B1具有一定的耐盐能力，能在较高盐浓度条件下降解2，4-二硝基甲苯磺酸盐。
答案：(1)碳源和氮源 高压蒸汽灭菌锅 琼脂
(2)甘肃某TNT红水污染场地污染 富集培养 稀释涂布平板
(3)取人工配制的一定浓度的2，4-二硝基甲苯磺酸盐(TNT)溶液加入锥形瓶中，之后再在锥形瓶中加入一定量的纯化菌液，每隔一定时间取样，测定2，4-二硝基甲苯磺酸盐浓度
(4)菌株B1具有一定的耐盐能力，能在较高盐浓度条件下降解2，4-二硝基甲苯磺酸盐
3．解析：(1)分析题意可知，果酒发酵时需要无氧条件，且发酵液pH值会逐渐降低，即发酵液变酸，这种缺氧、酸性条件能抑制杂菌的生长。(2)酵母菌是真核生物，其无氧呼吸产生酒精的场所是细胞质基质。利用酵母菌进行发酵时，应将温度控制在18～25℃，在此温度条件下，酵母菌内与果酒发酵相关的酶活性高，发酵速度快。(3)醋酸菌是一种好氧细菌，故杨梅醋的发酵过程中，需要向发酵液中持续通入无菌氧气(无菌空气)，此时发生的化学反应式是C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O。(4)分析题图可知，随着发酵的进行，发酵液的糖度逐渐降低，酒精度逐渐升高然后保持相对稳定。发酵前24h，酵母菌主要进行有氧呼吸，大量增殖，消耗葡萄糖较少，因此糖度变化很小，酒精度上升很慢。随着发酵的进行，酵母菌进行无氧呼吸消耗葡萄糖产生酒精，96h后，营养物质消耗殆尽，高浓度的酒精和代谢废物会抑制酵母菌的代谢而影响发酵，导致酒精度和糖度的变化都趋于平缓。
答案：(1)无氧、酸性
(2)细胞质基质 18～25℃ 此时与果酒发酵相关的酶活性高，发酵速度快
(3)无菌氧气(无菌空气) C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O
(4)此阶段酵母菌主要进行有氧呼吸，大量增殖 营养物质消耗殆尽，高浓度的酒精和代谢废物会抑制酵母菌的代谢而影响发酵
4．解析：(1)该培养基从用途上属于选择培养基，其中提供氮源的是尿素。尿素的分解需要脲酶催化，因此，能利用尿素为唯一氮源的分解菌能在细胞内合成分解尿素的脲酶。(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，说明有目的菌株存在。(3)纯化微生物可以用稀释涂布法和平板划线法，其中稀释涂布平板法能用于微生物的计数。1毫升原土壤样液中上述微生物数量＝(180＋155＋176＋129)÷4×106÷0.1＝1.6×109个；用稀释涂布平板法进行微生物的计数，但统计的数量比实际数量会偏低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
答案：(1)选择 尿素 脲(或催化尿素分解的)
(2)酚红 红
(3)稀释涂布平板 1.6×109 低
5．解析：(1)制作果汁要解决两个主要问题：一是果肉的出汁率低、耗时长，二是榨取的果汁浑浊、黏度高，易发生沉淀。人们可以使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁来解决上述两个问题。(2)洗衣粉中需要加入的酶类有碱性蛋白酶、碱性脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶四类，其中碱性蛋白酶和碱性脂肪酶应用最广泛、效果最明显。固定化酶技术是酶固定在不溶于水的载体上，这样酶就可以反复利用，提高酶的使用率，降低成本。如果将生产酶的细胞固定，理论上也能起到类似的效果，固定细胞常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、聚丙烯酰胺等。因为细胞体积较大，难以被吸附或结合，故固定细胞常采用包埋法。
答案：(1)出汁率低、耗时长 浑浊、黏度高 纤维素酶、果胶酶
(2)碱性蛋白酶 碱性脂肪酶 不溶于水 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、聚丙烯酰胺 包埋
6．解析：(1)倒平板之前应先将培养基进行灭菌，培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。为避免混淆应在培养皿的皿底做标记，并将培养皿倒置培养。(2)要获得稀释了10倍的土壤悬液，应该将5g土壤加入45mL无菌水中充分振荡。由图可知在不同的稀释度下取0.1mL接种到三个平板上，这种接种方法是稀释涂布平板法。根据平板上的菌落计数，选取菌落数为30～300的平板计数，土壤中芽孢杆菌总数为1.12×106÷0.2÷0.1＝5.6×107。(3)目的菌筛选时，应取直径为5mm的苹果腐烂病菌菌落移置于A处，将芽孢杆菌接种B处，以便筛选出目的菌株。(4)与化学防治相比，该生物防治方法的优势是：降低环境污染；减少化学试剂的残留；对其他动物影响小等。
答案：(1)之后 高压蒸汽灭菌法
(2)45 稀释涂布平板法 5.6×107
(3)A B
(4)降低环境污染；减少化学试剂的残留；对其他动物影响小等
7．解析：(1)果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，可将构成细胞壁的果胶分解为可溶性的物质，因此制作果汁时加入果胶酶的目的是增加果汁的体积和提高澄清度。(2)将葡萄糖分解成酒精是无氧呼吸，场所是细胞质基质，因此将葡萄糖分解为酒精的酶存在于酵母菌的细胞质基质中。糖可为酵母菌的生长、繁殖提供能源物质，还可作为酵母菌酒精发酵的原料，因此增大糖量有利于酵母菌的无氧呼吸，产生更多酒精。(3)对培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法；接种细菌常用的方法是平板划线法、稀释涂布平板法。(4)据图可知，在一定转速范围内，摇床转速越高，该细菌种群密度越大，说明该细菌繁殖的速度和总量越大。依据题意，在一定转速范围内，摇床转速越高，提供的氧气就越充足，醋酸杆菌繁殖速度越快，说明其代谢类型为需氧型。
答案：(1)增加果汁的体积和提高澄清度
(2)细胞质基质 糖可为酵母菌的生长、繁殖提供能源物质，还可作为酵母菌酒精发酵的原料
(3)高压蒸汽灭菌法 平板划线法、稀释涂布平板法
(4)在一定转速范围内，摇床转速越高，该细菌繁殖的速度和总量越大 需氧型
8．解析：(1)泡菜发酵的原理是在无氧情况下，乳酸菌(厌氧菌)将葡萄糖分解成乳酸。(2)泡菜制作中，需注意控制食盐用量以及腌制时间、温度，否则容易造成细菌大量繁殖而导致亚硝酸盐增加，影响泡菜品质，所以泡菜制作过程中需要定期测定亚硝酸盐的含量，一般采用比色法，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。(3)在制作过程中，从外观上可以看到泡菜瓶中有间歇性的气泡冲出，坛盖有响声，其原因可能是泡菜中除乳酸菌外，还有酵母菌和大肠杆菌等，酵母菌能将葡萄糖分解为乙醇和二氧化碳等物质，使得坛里的气压大于外界气压，从而会有多余的空气排出坛子，造成声响。(4)亚硝酸盐含量测定的步骤：配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色(目测比较)。测定原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
答案：(1)在无氧情况下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸
(2)腌制时间、温度 细菌大量繁殖
(3)泡菜中除乳酸菌外，还有酵母菌和大肠杆菌等，酵母菌能将葡萄糖分解为乙醇和二氧化碳等
(4)制备标准显色液 比色(目测比较) 对氨基苯磺酸 玫瑰红
9．解析：(1)分离纯化乳酸菌时，由于泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接分离很难分离到单个菌落，因此需要先用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，且用固体培养基进行分离纯化。乳酸菌在代谢过程中会产生乳酸，在分离纯化乳酸菌时，可以用碳酸钙中和乳酸菌代谢过程产生的乳酸。由题意可知，培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，所以在平板上形成具有透明圈的菌落，这样有利于乳酸菌菌落的识别和分离，因此分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌。(2)茉莉油具有挥发性，所以如果在蒸馏过程中不进行冷却，则茉莉油提取量会下降，原因是部分茉莉油会随水蒸气挥发而流失。为了将油水混合物分开，向油水混合物中加入NaCl，增加盐浓度，可以使茉莉油与水出现明显的分层。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和干燥，以提高萃取效率。一分子的β－胡萝卜素可氧化成两分子维生素A，所以天然胡萝卜素可医治维生素A缺乏症，是因为胡萝卜素可被氧化为维生素A。
答案：(1)梯度稀释 固体 中和乳酸菌产生的乳酸 具有透明圈
(2)部分茉莉油会随水蒸气挥发而流失 使茉莉油与水出现明显的分层
(3)干燥 胡萝卜素可被氧化为维生素A
10．解析：(1)分析题意可知，栀子黄的主要成分是一类少有的水溶性类胡萝卜素，乙醇是水溶性有机溶剂，故可用乙醇提取栀子黄。(2)萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响；为了提高萃取栀子黄的效率，萃取前需对栀子果实进行的处理是粉碎和干燥，以提高萃取效率。(3)由于有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧爆炸，所以萃取过程中应采用水浴加热，操作过程中应该避免明火加热，采用水浴加热；为了防止加热时有机溶剂挥发，还需要在加热瓶口安装冷凝回流装置。
答案：(1)乙醇 乙醇是水溶性有机溶剂
(2)性质和使用量 粉碎和干燥
(3)直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸 防止加热时有机溶剂挥发
11．解析：(1)吸取菌液1mL，转移至9mL无菌水中，这样即稀释了10倍，再从这10mL稀释液中吸取1mL，转移至另一试管的9mL无菌水中，这样即稀释了100倍。(2)本实验缺少对照组，应设置多个培养皿，各滴加等量的、不含溶藻细菌的培养液，以保证实验结果的准确性。(3)凝胶色谱法根据被分离的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶，来进行分离；电泳的原理是蛋白质的相对分子质量、形状、带电情况不同，在电场中迁移速度不同，蛋白质在电场中的运动速度取决于其电荷性质和大小，电荷越大、分子量越小的蛋白质运动速度越快，反之则越慢。(4)SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中加入的SDS使蛋白质变性形成单链，并消除肽链本身所带电荷对迁移的影响，使迁移速度只取决于相对分子大小，图中两条带只能得出提取蛋白质含有两种大小不同的肽链，不一定是两条，因此“所提取的酶具有两条链”这一结论不可靠。
答案：(1)吸取菌液1mL，转移至9mL无菌水中，再从这10mL中吸取1mL，转移至9mL无菌水中
(2)缺少对照组 应设置多个培养皿，各滴加等量的、不含溶藻细菌的培养液
(3)凝胶色谱法 带电性质差异(带电情况) 迁移速度
(4)不可靠，只能得出提取蛋白质含有两种大小不同的肽链，不一定是两条
12．解析：(1)果胶酶的作用是分解果胶，因此为筛选产果胶酶的菌株，将芦苇根部中间部分浸出液接种至以果胶为唯一碳源的固体培养基上进行培养；依据培养基的分类，因为此培养基的碳源只有果胶，因此该培养基从功能上分类属于选择培养基；对培养基进行灭菌处理的目的是为了杀死培养基中的所有微生物(微生物和芽孢、孢子)，防止杂菌污染。(2)由于Dp/Dc为透明圈的直径(Dp)与菌落直径(Dc)的比值，比值越大代表产生的果胶酶的量越多，根据题表结果可知：最理想的产果胶酶的菌株是Z4，而且Z4的果胶酶活力也是最强的。(3)由于温度对果胶酶活性有影响，在最适温度下酶的活性最高，出汁率才最高，因此用果胶酶处理果泥时，需要控制反应的温度。(4)根据题图可知：该实验的自变量为温度，因变量为酶的活性，酶的活性越高代表果胶被果胶酶分解的越多，果胶的剩余量就越少；因此应分别将等量的果胶酶和果胶在设定的温度下保温一段时间后混合进行反应，观察果胶的剩余量，果胶剩余量最少的试管所对应的温度为最适温度。
答案：(1)果胶 选择 为了杀死培养基中的所有微生物(微生物和芽孢、孢子)，防止杂菌污染
(2)Z4 Z4菌株的Dp/Dc值和果胶酶活力均最大
(3)温度对果胶酶活性有影响，在最适温度下酶活性最高，出汁率最高
(4)分别将等量的果胶酶和果胶在设定的温度下保温一段时间后混合进行反应 果胶剩余量最少的试管所对应的温度
培养基类型
培养基组分
Ashby培养基
甘露醇(C6H14O6)、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸馏水、琼脂
LB培养基
蛋白胨、酵母提取物、NaCl、蒸馏水、琼脂
培养基配方
含量
KH2PO4
1.4 g
Na2HPO4
2.1 g
MgSO4·7H2O
0.2 g
葡萄糖
10.0 g
尿素
1.0 g
琼脂
15.0 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL
菌株
平板筛选(Dp/Dc)
果胶酶活力/(U·mL－1)
Z1
1.50
24.89
Z2
1.40
22.57
Z3
1.16
37.04
Z4
1.56
40.52