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2022-2023学年北京市朝阳区高二（下）期末生物试卷（含解析）
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这是一份2022-2023学年北京市朝阳区高二（下）期末生物试卷（含解析），共25页。试卷主要包含了单选题，探究题等内容，欢迎下载使用。
2022-2023学年北京市朝阳区高二（下）期末生物试卷
一、单选题（本大题共15小题，共30.0分）
1. 家庭制作泡菜需要（ ）
A. 严格灭菌 B. 隔绝空气 C. 加入酒精 D. 加入乳酸
2. 秸秆中的木质素包裹在纤维素的外面，所以须先去除木质素才能提高纤维素的降解率。在混合培养时，拟康氏木霉与白腐菌的最佳接入时间间隔为3d。研究人员分别以拟康氏木霉、白腐菌的单一菌和混合菌发酵处理稻草秸秆，结果如表。
菌种
纤维素降解率（%）
木质素降解率（%）
拟康氏木霉
24.62
8.78
白腐霉
6.96
20.06
混合菌（间隔3d）
31.38
22.27
下列叙述错误的是（ ）
A. 混合菌发酵效率高于单一菌株 B. 混合菌发酵时应先接种白腐菌
C. 拟康氏木霉与白腐菌二者互利共生 D. 发酵时补充适量氮源，有利于菌体的繁殖
3. 为提高鱼体对饲料中脂肪源的利用效率，研究人员欲从罗非鱼肠道微生物中分离出油脂分解菌，下列说法错误的是（ ）
A. 用液体培养基对罗非鱼肠道微生物进行富集培养
B. 以豆油为唯一碳源的选择培养基筛选油脂分解菌
C. 可通过平板划线法分离得到油脂分解菌的单菌落
D. 未接种的全营养培养基作为对照防止灭菌不合格
4. 某实验小组利用滤膜法检测饮料中微生物的数量，原理是将待测样品通过微孔滤膜过滤富集后，再将滤膜置于培养基上培养，根据滤膜上的菌落数推算出样品中微生物的数量。过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 实验用到滤膜和水样都需要提前灭菌处理 B. 应选取菌落数为30～300的平板进行计数
C. 统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少 D. 滤膜孔径过大可能导致平板上长不出菌落
5. 与黄啤相比，黑啤的营养成分更加丰富，享有“黑牛奶”的美誉。黑啤的酿造工艺流程如图。下列叙述错误的是（ ）
A. 糖化是淀粉酶将粉碎原料分解成糖浆的过程
B. 麦汁煮沸的主要目的是杀菌和终止酶的作用
C. 发酵是酵母菌将糖转化为酒精和二氧化碳的过程
D. 罐装前用巴氏消毒法杀死啤酒中全部微生物
6. 柑橘水果“爱媛橙”因皮薄易剥、细腻多汁、口感似果冻等优点，被网友们称“果冻橙”，并迅速成为网红水果，“爱媛橙”由柑橘品种“南香”与“西子香”杂交获得，流程如图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 两种细胞均需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B. 通过灭活病毒诱导南香细胞与西子香细胞的融合
C. 杂种细胞重新形成细胞壁与高尔基体的活动有关
D. 爱媛橙的培育过程无需愈伤组织和试管苗的形成
7. 科学家将某些诱导基因转入小鼠成纤维细胞中成功获取诱导多能干细胞，这类细胞可用于一系列的研究，具体过程如图所示。
以下说法错误的是（ ）
A. 过程②实质是基因的选择性表达
B. 过程③可用聚乙二醇诱导细胞融合
C. 培养诱导多能干细胞时，需要定期更换培养液
D. 可将丁细胞注射到小鼠脾脏中提取单克隆抗体
8. 近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家期望通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，其过程如图。以下说法错误的是（ ）
A. 胚胎工程一般采用促性腺激素处理B使其超数排卵
B. 若过程①表示体外受精，C的精子可直接受精
C. 过程②通过显微操作法去除受体卵母细胞的细胞核
D. 过程③表示早期胚胎培养，获得的F后代是克隆动物
9. 蛛丝蛋白具有优良的特性，有广泛的应用前景。蛛丝蛋白核心结构中有以某氨基酸序列为单元的重复序列，据此设计了氨基酸单元相应的核心DNA片段以用于合成目的基因，借助质粒构建表达载体，使大肠杆菌表达蛛丝蛋白。下列对相关操作及结果叙述错误的是（ ）
A. 将多个核心DNA片段拼接获得目的基因时，可用到DNA连接酶
B. 连接目的基因和载体时，二者需要有相同的黏性末端
C. 构建表达载体时，需要限制酶和DNA连接酶
D. 表达载体插入大肠杆菌的拟核基因组中，即可表达蛛丝蛋白
10. 利用PCR方法克隆水通道蛋白的基因P。基因P的部分序列如图，请从①～④中选择扩增P基因的合适引物组合。（ ）
①5'-GAAGTCCTCT-3'
②3'-TGCTGCTTGG-5'
③3'-CTTCAGGAGA-5'
④5'-ACGACGAACC-3'
A. ①② B. ①③ C. ②③ D. ②④
11. 目前常用的生物反应器有乳腺生物反应器和膀胱生物反应器。采用基因工程将人凝血因子基因导入山羊受精卵，成功培育出了人凝血因子只存在于乳汁中的转基因羊。下列相关说法错误的是（ ）
A. 构建乳腺生物反应器时，需将药用蛋白基因和乳腺蛋白基因的启动子等重组在一起
B. 在转基因动物的乳腺细胞或膀胱上皮细胞以外的细胞中不含有药用蛋白基因
C. 与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别和年龄的限制
D. 用显微注射技术将表达载体导入受精卵细胞来获得转基因动物
12. 凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。科学家采用蛋白质工程技术对凝乳酶进行改造，将其第20位和第24位氨基酸改变为半胱氨酸，催化能力提高了2倍。下列叙述不正确的是（ ）
A. 该技术需要先预期蛋白质的功能 B. 该技术直接操作对象是凝乳酶基因
C. 该技术可直接在体外合成凝乳酶 D. 改造后的凝乳酶需进行生物功能检测
13. 理性看待转基因技术需要建立在完备的科学知识基础之上。下列观点不符合生物学原理的是（ ）
A. 外源基因随机插入宿主基因组可能出现意想不到的结果
B. 转基因食品中的基因组可能会整合进入人体基因组
C. 转基因生物合成的某些蛋白可能成为新的过敏原
D. 转基因植物对当地生态安全的影响可能是长远的
14. 以下应用实例中，不涉及生物技术安全性与伦理问题的是（ ）
A. 利用基因编辑技术获得身体健康和智力超群的“完美婴儿”
B. 利用克隆人解决不孕不育患者的生育难题
C. 利用人体的胚胎干细胞治疗阿尔兹海默症
D. 利用自己出生时保留的脐带血治疗白血病
15. 生物武器散布隐匿，危害极大，对生物武器的威胁，不能掉以轻心，下列应对生物武器的措施不正确的是（ ）
A. 任何情况下，不发展、不生产、不储存生物武器
B. 大力发展生物技术，提升应对未知病原体的能力
C. 多储存危害大的病原微生物，全面了解其特性
D. 号召各国共同签署并遵守《禁止生物武器公约》
二、探究题（本大题共6小题，共70.0分）
16. 食醋酿造是多种微生物共同作用的过程，主要微生物为霉菌、酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。食醋发酵过程分为淀粉糖化、酒精发酵和醋酸发酵三个阶段，期间有不同种类的微生物生长繁殖并产生各种酶类，经过一系列复杂的生物化学变化最终形成食醋。
（1）发酵原料中的淀粉属于 ______ 糖，为微生物提供 ______ （营养物质）。参与发酵的多种微生物种间关系属于 ______ 。
（2）研究人员对食醋固态发酵过程中微生物的生长变化规律进行研究。如图为醋醅不同层次的酵母菌和醋酸菌数量变化情况。
①用 ______ 获得单菌落后，挑选菌落数符合要求的平板进行计数。
②由图1可知，整个发酵过程中酵母菌数量呈现 ______ 的趋势，且在不同层次上随着深度增加而减少。初期，由于 ______ ，上层菌增殖速度高于中层及下层菌。之后，随着发酵条件的变化，酵母菌基本停止繁殖而主要进行 ______ 发酵。在第7天以后随发酵时间延长，酵母菌的数量呈降低趋势，原因是 ______ 。
③图2显示，醋酸菌在 ______ 天繁殖最快。醋酸菌将乙醇转化为醋酸，反应简式为： ______ 。
（3）根据国家相关规定，只有单独或混合使用各种含有淀粉、糖的物料、食用酒精，经微生物发酵酿制而成的液体才能在标签上标称“食醋”，以冰酸醋，添加水、酸味剂等勾兑生产的“食醋”只能归类为复合调味料。试说出发酵醋与勾兑“食醋”营养成分方面的区别。 ______ 。
17. 杀草丹是一种高效、广谱除草剂，但是残留成分对环境有较大影响。科学家分离高效降解杀草丹的微生物，对杀草丹污染的环境进行修复。
（1）为分离杀草丹降解菌，研究者进行如下操作：
①取排污口的活性泥接种至 ______ 的液体培养基富集培养一段时间后，通过紫外-可见分光光度法检测富集液中杀草丹的降解效果，紫外吸收图谱的结果如图1，图谱的峰形代表溶液中的溶质种类，峰值代表溶质的含量。
结果表明，富集液中含有能降解杀草丹的微生物，判断依据是： ______ 。
②对富集液进行 ______ ，涂布于含杀草丹的固体培养基表面，培养一段时间后，从若干菌落中挑取 ______ 的单菌落扩大培养，并将其命名为T1。此过程使用的培养基可用 ______ 法灭菌。
（2）根据 ______ 可对菌株T1初步鉴定，但还需通过分子技术扩增菌株的核糖体RNA（rRNA）序列进一步鉴定菌株的种属，下面是三种编码 rRNA的DNA片段的特点：
a：5S rDNA，序列短，遗传信息少。
b：16S rDNA，序列长度适中，含有保守区和可变区，可变区序列具有种的特异性。
c：23S rDNA，序列长，遗传信息量多，碱基突变速度较快。
应选择上述 ______ （填选项字母）序列设计引物PCR，并测序鉴定，理由是 ______ 。
（3）菌株T1彻底降解杀草丹需经多个中间产物依次降解。T1进行传代培养时，发现有一菌株（T1m）失去降解杀草丹的能力，但对杀草丹下游的中间产物仍具有较强降解能力。测序并比对菌株T1和T1m的基因组，发现T1m缺失tmoA和tmoB基因。为探究tmoA和tmoB两基因在杀草丹降解中的作用，将不同质粒分别导入菌株，培养一段时间后，结果如图2。
①图中1和2菌株分别是 ______ 。
②结合上述信息和实验结果，解释T1m对杀草丹降解能力变化的原因： ______ 。
18. 甘蓝型油菜引入我国历史较短，其遗传基础狭隘。菘蓝（别名“板蓝根”）是传统中药材，具有广谱抗病毒特性。研究人员利用甘蓝型油菜（体细胞中染色体数为38）与菘蓝（体细胞中染色体数为14）进行体细胞杂交，培育抗病毒的甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系，过程如图1。
（1）甘蓝型油菜与菘蓝的体细胞经 ______ 酶处理后获得原生质体，再经 ______ 诱导获得融合细胞。融合细胞接种到含有营养物质和 ______ 的培养基上，经 ______ 过程形成愈伤组织，发育形成完整的再生植株F1。植物体细胞杂交技术依据的生物学原理有： ______ 。（至少答出两个）
（2）将F1与甘蓝型油菜回交，获得BC1，其染色体组成为 ______ （只用字母表示）。用BC1与甘蓝型油菜再一次回交，得到的BC2植株群体的染色体数目范围是 ______ 。
（3）研究人员从BC2筛选出7种只含有1条菘蓝染色体的甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系（A、B、C、D、E、F、G）。为探究甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系在抗新冠病毒（SARS-CoV-2）中的作用，研究人员用其提取物处理动物细胞，24h后感染新冠病毒，一段时间后收集病毒细胞培养液，检测病毒的含量，结果如图2。
①作为标准参考的GADPH蛋白表达量 ______ ，可排除无关变量对实验结果的影响。
②结果表明： ______ 。
③尝试说出建立甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系在育种方面的意义： ______ 。
19. 阿尔茨海默病（AD）的典型病理表现为β淀粉样蛋白（Aβ）在脑内沉积造成突触功能损害。研究发现，Aβ的聚集体——Aβ寡聚体、纤维体是AD患者脑内的重要毒性物质。Aβ肽（ AβpE3）是所有Aβ的重要组成部分，由于其更易聚集和不易降解，表现出更强的毒性。为筛选一种靶向Aβ的单克隆抗体，研究人员做了以下实验。
（1）将Aβ3-10短肽疫苗作为 ______ 注射到小鼠体内，激活小鼠特异性免疫的 ______ 免疫，并取小鼠脾脏细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合，通过 ______ 培养基筛选出杂交瘤细胞，加入动物细胞培养液并置于 ______ 中培养，通过抗体阳性检测技术获得产单克隆抗体7B8的杂交瘤细胞。
（2）研究人员将不同种的Aβ肽用包被液稀释并固定在多孔板上，以不加Aβ肽的包被液稀释作为空白对照组，通过洗涤、加入单克隆抗体、再洗涤、加入酶标二抗等环节，检测相对结合量，结果如图1所示。
本实验的研究目的是： ______ 。
（3）为评估单克隆抗体7B8对AD的疗效，研究人员取16月龄的若干小鼠进行实验，组1、组2、组3的处理分别为 ______ （用所给选项的字母表示）。检测三组小鼠皮层中的突触前蛋白（在突触发挥正常功能中具有重要作用）水平，实验结果如图2，推测单克隆抗体7B8在一定程度上能保护皮层突触的正常功能，后续研究发现单克隆抗体7B8可以提高小鼠的认知功能。
A.正常小鼠，腹腔注射无关抗体
B.AD小鼠，腹腔注射无关抗体
C.AD小鼠，腹腔注射单克隆抗体7B8
（4）你认为7B8能否用于治疗AD，并简述理由： ______ 。
20. 雌性哺乳动物在早期胚胎发育过程中1条X染色体会发生整体范围内的沉默（基因转录活性被抑制），仅有少数“逃逸”基因仍能正常表达，这一生理过程称作X染色体失活（XCI）。XCI能保证雌、雄间X染色体上基因表达水平的一致，也造成体外受精胎儿性别比例的失衡。
（1）为制备体外受精（IVF）的胚胎，研究人员采用超数排卵方法采集小鼠 ______ 期卵母细胞，另一方面，将成年健康公鼠的精子在体外条件下进行 ______ 处理，将二者置于适当的培养液中完成体外受精。收集早期胚胎，移植到经过 ______ 处理的代孕母鼠中，获得的胚胎含有 ______ （单/双/三）亲的遗传物质。
（2）研究人员对体外受精胎儿性别进行鉴定，表中结果显示胎儿性别比例（雄/雌） ______ 自然生产（IVO）胎儿的性别比例。
组别
胚胎数
活仔率（ %）
雄 /雌
IVO
81
56.25
1.08
IVF
82
45.58
1.48
（3）为进一步揭示体外受精的胎儿性别比例失衡的原因，研究人员剖取第7.5天的小鼠胚胎进行胎儿发育情况统计，结果如图1。
①结果显示IVO组雌、雄胎儿形态异常比率相当，而在IVF组中， ______ 。
②研究人员收集不同组别的胚胎细胞，定量检测具代表性的“非逃逸”基因，结果显示这些基因的表达在IVF雌性胚胎中显著 ______ IVO雌性胚胎，说明IVF雌性胚胎XCI不足。
③已有研究表明，XCI高度依赖激活因子RNF12，研究人员利用免疫荧光技术检测RNF12蛋白的表达量如图2。
结果显示 ______ 。
（4）综上所述，XCI造成体外受精的胎儿性别比例失衡的可能原因是 ______ 。
21. 花青素是一类水溶性色素，其在花瓣中含量的增高或降低都可能改变花的颜色。在野生紫色矮牵牛中花青素的合成过程受查尔酮合酶（CHSA）催化，科研人员用基因工程技术研究了查尔酮合酶基因（chsA基因）转入野生紫色矮牵牛后对花色的影响。
（1）利用chsA基因与载体质粒（含T-DNA）构建重组质粒。
①将重组质粒先转入 ______ 细胞中，用此细胞侵染叶片细胞，培养诱导成为愈伤组织，进而获得转基因矮牵牛植株。
②重组质粒中T-DNA所含序列如图1所示。NptⅡ基因表达的蛋白，可以将ATP中的磷酸基团转移到物质K上。
在①过程获得的愈伤组织细胞提取液中，加入物质K和用32P标记的 ______ ，检测生成物，用于判断 ______ 。
（2）野生紫色矮牵牛自身chaA基因只在花冠组织中表达，花苞时、开花后均表达。转基因矮牵牛的花色为白色。
①uidA表达产物可以使物质X呈现蓝色，进而使植物组织或器官呈现蓝色。开花前检测用物质X处理的转基因矮牵牛花苞、叶等组织，均呈现蓝色。制备转基因矮牵牛时，转入chsA-uidA融合基因，并非只转入chsA基因，目的是 ______ 。
②检测野生紫色矮牵牛和转基因矮牵牛的不同组织chaA基因的mRNA含量，结果如图2。
由实验结果推测，转基因矮牵牛中，其自身chsA基因与转入的chsA基因的表达时间及功能关系是 ______ 。
（3）结合文中信息，解释转基因矮牵牛出现白花的原因。 ______ 。
答案和解析
1.【答案】B
【解析】解：A、家庭制作泡菜时利用的是环境中的乳酸菌菌种，不能严格灭菌，A错误；
B、家庭制作泡菜所需菌种为乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，故需要隔绝空气，B正确；
C、加入酒精对乳酸菌会造成伤害，不能加入酒精，C错误；
D、乳酸是制作泡菜过程中的产物，不需要加入乳酸，D错误。
故选：B。
泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
本题主要考查泡菜的腌制的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
2.【答案】C
【解析】解：A、根据表格分析，与拟康氏木霉、白腐菌的单一菌发酵处理相比，混合菌处理获得的纤维素降解率和木质素降解率均提高，即混合菌发酵效率高于单一菌株，A正确；
B、白腐霉对木质素降解率高，秸秆中的木质素包裹在纤维素的外面，应先去除木质素才能提高纤维素的降解率，故先接种白腐菌，B正确；
C、互利共生是指两种生物生活在一起，彼此有利，两者分开以后都不能独立生活，拟康氏木霉与白腐菌可单独生存，故二者不是互利共生，C错误；
D、微生物生长一般需要水、碳源、氮源和无机盐等物质，发酵时补充适量氮源，有利于菌体的繁殖，D正确。
故选：C。
人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养物质-培养基，用以培养、分离、鉴定和保存微生物或积累其代谢产物，其中，不含凝固剂、呈液体状态的培养基为液体培养基，呈固体状态的培养基为固体培养基。
本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
3.【答案】D
【解析】解：A、从肠道微生物中分离目的微生物时，进行富集培养的目的是为了增加目的微生物的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物，富集培养需要使用液体培养基，A正确；
B、从罗非鱼肠道微生物中分离出油脂分解菌，需要以豆油为唯一碳源的选择培养基筛选油脂分解菌，B正确；
C、可通过平板划线法分离得到油脂分解菌的单菌落，C正确；
D、未接种的以豆油为唯一碳源的选择培养基作为对照防止灭菌不合格，D错误。
故选：D。
1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。实验室中微生物的筛选，应用了同样的原理，即人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和pH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。
2、进行选择培养时，培养基中需加入脂肪作为唯一的碳源，其作用是允许降解脂肪的微生物生长，抑制或阻止其他种类微生物的生长。
本题考查微生物分离与培养的相关知识，要求考生理解并识记有关的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
4.【答案】A
【解析】解：A、实验用到滤膜需要提前灭菌处理，但水样不能提前灭菌，否则会杀死待测水样中的微生物，A错误；
B、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，B正确；
C、由于两个或多个细菌连在一起时在平板上只观察到一个菌落，因此统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少，C正确；
D、滤膜孔径过大时，水样中的细菌则不会留在滤膜上，可能导致平板上长不出菌落，D正确。
故选：A。
滤膜法是利用微孔滤膜截留液体样本中的微生物，并直接将滤膜置于培养基中进行培养的微生物计数方法，其大致流程为：先用滤膜过滤待测水样，水样中的细菌留在滤膜上，其他杂质则滤出，再将滤膜转移到培养基上培养并统计菌落数目，滤膜法常被用于饮料中微生物的检测。
本题考查微生物的计数，解答本题的关键是掌握滤膜法计数的原理和流程，能结合所学的知识准确答题。
5.【答案】D
【解析】解：A、糖化过程是将粉碎后的原料内含物在一定温度、pH等条件下，在淀粉酶等多种酶的作用下继续溶解和分解的过程，A正确；
B、麦汁煮沸的主要目的是终止酶的进一步作用，并对糖浆灭菌，B正确；
C、发酵是酵母菌将糖转化为酒精和二氧化碳的过程，C正确；
D、巴氏消毒法只能杀死部分微生物，不能杀死全部的微生物，D错误。
故选：D。
啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。
本题以啤酒生产酿造的过程为实验背景，考查发酵工程的应用的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
6.【答案】C
【解析】解：A、两种细胞均需使用纤维素酶和果胶酶处理，去除细胞壁获得原生质体，A错误；
B、诱导植物原生质体融合使用的方法有电融合法、离心法、聚乙二醇融合法等，灭火病毒是诱导动物细胞融合特有的方法，B错误；
C、杂种细胞重新形成细胞壁与高尔基体的活动有关，C正确；
D、爱媛橙的培育是通过植物体细胞杂交实现的，此过程中需要把杂种细胞培育成新植物体，需愈伤组织和试管苗的形成，D错误。
故选：C。
植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。此技术中首先应该使用纤维素酶和果胶酶处理，去除细胞壁获得原生质体，然后利用电融合法、离心法、聚乙二醇融合法等诱导原生质体融合。
本题主要考查的是植物体细胞杂交技术的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
7.【答案】D
【解析】解：A、诱导性多能干细胞具有分化成多种细胞的能力，分化程度较低，而分化成不同细胞的过程（过程②）就是基因选择性表达的过程，A正确；
B、过程③可采用化学试剂聚乙二醇诱导细胞融合，B正确；
C、在体外培养诱导性多能干细胞时，由于细胞在培养液中产生的代谢产物可能会对细胞本身有毒害作用，所以要定期更换培养液，C正确；
D、可将丁细胞注射到小鼠腹腔中提取单克隆抗体，D错误。
故选：D。
单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
本题主要考查单克隆抗体的相关知识，意在考查考生理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力，能够运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中。
8.【答案】B
【解析】解：A、为使驯养单峰骆驼超数排卵，可以给B注射适量的促性腺激素，A正确；
B、若①表示体外受精，可将C野化单峰骆驼的新鲜精子进行获能处理，然后与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用，B错误；
C、②去除受体卵母细胞的细胞核可采用显微操作法，C正确；
D、由图示可知，③表示早期胚胎培养，获得的F后代是通过体细胞核移植得到的克隆动物，D正确。
故选：B。
据图分析，E后代是试管动物，属于有性生殖，F后代是克隆动物，属于无性生殖，其中①表示体外受精，②表示去掉卵母细胞的细胞核，③表示早期胚胎培养。
本题考查试管动物和克隆动物，意在考查学生的理解与表达能力，准确判断题图信息是解题关键。
9.【答案】D
【解析】解：A、DNA连接酶可将两个不同的DNA片段连接在一起，因此将多个核心DNA片段拼接获得目的基因时，可用到DNA连接酶，A正确；
B、目的基因和载体需要通过碱基互补配对拼接在一起，因此连接目的基因和载体时，二者需要有相同的黏性末端，B正确；
C、构建表达载体时，需要使用限制酶切割，然后用DNA连接酶连接，形成重组DNA，C正确；
D、表达载体插入大肠杆菌的拟核基因组中，并不一定能表达蛛丝蛋白，还需要进行抗原抗体检测看蛛丝蛋白基因是否进行了表达，D错误。
故选：D。
基因表达载体的构建：①过程：一般用同一种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。②目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。③基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。
本题主要考查的是基因工程的操作的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
10.【答案】A
【解析】解：在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的，引物需要结合在模板链的3'端，与模板链3'端的碱基互补配对，故选①5'-GAAGTCCTCT-3'和②3'-TGCTGCTTGG-5'两对引物。
故选：A。
1、PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸。
本题主要考查的是DNA片段的扩增以及电泳鉴定的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
11.【答案】B
【解析】解：A、启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，可用于驱动基因的转录，构建乳腺生物反应器时，需将药用蛋白基因和乳腺蛋白基因的启动子等重组在一起，以保证目的基因在乳腺细胞中表达，A正确；
B、受体细胞是动物的受精卵，所以在转基因动物的乳腺细胞或膀胱细胞以外的其他细胞中也含有药用蛋白基因，只是没有表达，B错误；
C、乳腺细胞生物反应器”只能从哺乳期雌性个体的乳汁中获取产物，与“乳腺细胞生物反应器”相比，“膀胱生物反应器”的优点是雌雄个体的尿液中都可提取到产物，且不受性别、年龄等限制，因而受体来源更广泛，C正确；
D、将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术，受体细胞多是受精卵，因此，用显微注射技术将表达载体导入受精卵细胞来获得转基因动物，D正确。
故选：B。
基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒、动植物病毒。
本题主要考查基因工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力，能够运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中。
12.【答案】C
【解析】解：A、蛋白质工程的操作思路：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列 （基因），然后还要合成或改造DNA、构建基因表达载体，即按照基因工程的操作，最后获得所需要的目的蛋白质，A正确；
B、蛋白质工程技术直接操作对象是凝乳酶基因，B正确；
C、凝乳酶是由核糖体产生的，体外不能合成，C错误；
D、改造后的凝乳酶需进行生物功能检测，检测其是否达到改造目的，D正确。
故选：C。
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。
本题考查蛋白质工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
13.【答案】B
【解析】解：A、外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，有可能会出现意想不到的后果，因此存在安全性问题，A正确；
B、转基因食品被食用后，其成分会被消化道中的酶内水解并被人体吸收，其基因不会进入人体基因组，B错误；
C、转基因生物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原或者引起中毒，C正确；
D、转基因生物可能会对生物多样性构成威胁，也可能会影响生态系统的稳定性，故转基因植物对当地生态安全的影响可能是长远的，D正确。
故选：B。
转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。
本题考查转基因生物的安全性问题的相关知识，考生运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
14.【答案】D
【解析】解：A、利用基因编辑技术设计试管婴儿，以期得到身高标准和智力超群的“完美婴儿”，已经涉及到新生命的诞生，会造成生物技术安全与伦理问题，A错误；
B、利用克隆人解决不孕不育患者的生育难题，已经涉及到新生命的诞生，会造成生物技术安全与伦理问题，B错误；
C、胚胎干细胞需要从早期胚胎或原始性腺中分离出来，涉及伦理问题，C错误；
D、利用自己出生时保留的脐带血治疗白血病没有涉及伦理问题，D正确。
故选：D。
中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆。
本题主要考查的是生物技术的安全性和伦理问题的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
15.【答案】C
【解析】解：AC、《禁止生物武器公约》中强调在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，因此不能储存危害大的病原微生物，A正确，C错误；
B、大力发展生物技术，提升应对未知病原体的能力，B正确；
D、《禁止生物武器公约》中强调在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，应号召各国共同签署并遵守《禁止生物武器公约》，D正确。
故选：C。
1、生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。
2、生物武器的特点：单位面积效应大；有特定的伤害对象；具有传染性；危害时间久；不易被发现和鉴定；使用者本身易受伤害；生物武器造价低，技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。
本题主要考查生物武器的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
16.【答案】多 碳源 竞争 稀释涂布平板法 先快速升高后缓慢降低 溶解氧的存在 酒精 酒精的增多以及酸的产生不适宜酵母的生长繁殖 1-3（1-5） C2H5OH+O2→酶CH3COOH+H2O+能量 发酵醋除了含有醋酸，还含有糖类、氨基酸、乳酸以及少量和微量的醇类、醛类等
【解析】解：（1）淀粉属于多糖，元素组成为C、H、O，为微生物提供碳源。参与发酵的多种微生物为了生长繁殖，他们之间争夺营养物质和生存空间，其种间关系属于竞争关系。
（2）①稀释涂布平板法是指将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，为了了解醋醅不同层次的酵母菌和醋酸菌数量变化情况，利用稀释涂布平板法得到单菌落后计数。
②由图1可知，酵母菌在发酵过程中先快速升高后缓慢降低。发酵初期，上层溶解氧的浓度高，因而上层菌增殖速度高于中层及下层菌。之后，由于溶解氧的消耗殆尽，酵母菌进行无氧呼吸，产生酒精。由于酒精的增多以及酸的产生不适宜酵母的生长繁殖，在第7天以后酵母菌的数量呈降低趋势。
③由图2可知，醋酸菌在1-3天直线的斜率最大，其繁殖最快。醋酸菌将乙醇转化为醋酸，反应简式为：C2H5OH+O2 →酶CH3COOH+H2O+能。
（3）经发酵得到的醋除了含有醋酸，还含有糖类、氨基酸、乳酸以及少量和微量的醇类、醛类等营养成分，而以冰酸醋，添加水、酸味剂等勾兑生产的“食醋”，缺乏糖类、氨基酸、乳酸以及少量和微量的醇类、醛类等营养成分。
故答案为：
（1）多 碳源 竞争
（2）①稀释涂布平板法 ②先快速升高后缓慢降低 溶解氧的存在 酒精 酒精的增多以及酸的产生不适宜酵母的生长繁殖
③1-3（1-5）C2H5OH+O2 →酶CH3COOH+H2O+能量
（3）发酵醋除了含有醋酸，还含有糖类、氨基酸、乳酸以及少量和微量的醇类、醛类等（合理即可）
醋酸菌在氧气、糖源充足时，将糖分解成醋酸；当氧气充足、缺少糖源时，将乙醇变成乙醛，再将乙醛变为醋酸。
本题考查果酒和果醋制作的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。
17.【答案】含一定浓度杀草丹 与对照组相比，接种活性泥的富集液的峰值降低且峰形发生变化 梯度稀释 透明圈直径/菌落直径最大 高压蒸汽灭菌 菌落特征 b 16SrDNA，序列长度适中，遗传信息量适中；可变区的序列具有种的特性，能够鉴定菌种 导入空质粒的T1和导入空质粒的T1m 菌株T1m中降解杀草丹的起始关键酶基因tmoA缺失
【解析】解：（1）①为分离杀草丹降解菌，培养基中需要含有一定浓度的杀草丹，取排污口的活性泥接种至含一定浓度杀草丹的液体培养基富集培养一段时间，通过分析紫外吸收图谱，与对照组相比，接种活性泥的富集液的峰值降低且峰形发生变化，表明富集液中含有能降解杀草丹的微生物。
②将菌液涂布于含杀草丹的固体培养基表面需要使用稀释涂布平板法，需要首先对富集液进行梯度稀释，涂布培养一段时间后，从若干菌落中挑取透明圈直径/菌落直径最大的单菌落扩大培养，此菌落中的微生物的分解能力较强，此过程使用的培养基可用高压蒸汽灭菌法灭菌。
（2）每种微生物都有特定形态特征的菌落，根据菌落特征可对菌株T1初步鉴定，通过分子技术扩增菌株的核糖体RNA（rRNA） 序列进一步鉴定菌株的种属应选择16S rDNA，序列长度适中，遗传信息量适中；可变区的序列具有种的特性，能够鉴定菌种。
（3）①为探究tmoA和tmoB两基因在杀草丹降解中的作用，将不同质粒分别导入菌株，培养一段时间后，结果如图2，菌株1和2起对照作用，分别是导入空质粒的T1和导入空质粒的T1m。
②T1m对杀草丹降解能力变化的原因是菌株T1m中降解杀草丹的起始关键酶基因tmoA缺失。
故答案为：
（1）①含一定浓度杀草丹 与对照组相比，接种活性泥的富集液的峰值降低且峰形发生变化
②梯度稀释 透明圈直径/菌落直径最大 高压蒸汽灭菌/湿热灭菌
（2）菌落特征 b 16S rDNA，序列长度适中，遗传信息量适中；可变区的序列具有种的特性，能够鉴定菌种
（3）①导入空质粒的T1和导入空质粒的T1m
②菌株T1m中降解杀草丹的起始关键酶基因tmoA缺失
微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等。筛选目的微生物必须使用选择培养基。从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。常用的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法。
本题中举要考查的是微生物的分离和培养的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
18.【答案】纤维素（果胶） PEG 植物激素 脱分化 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 PPQQR 38-45 一致 甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系G能有效抑制新冠病毒 拓宽了甘蓝型油菜的遗传基础，为抗病甘蓝型油菜的研究奠定基础；可作为育种中间桥梁材料，将优良性状转移至近缘种
【解析】解：（1）植物体细胞杂交前需要使用纤维素酶和果胶酶处理，去除植物细胞的细胞壁，获得原生质体，再经PEG诱导原生质体融合获得融合细胞。融合细胞接种到含有营养物质和植物激素的培养基上，经脱分化过程形成愈伤组织，愈伤组织再经过再分化发育形成完整的再生植株F1。植物体细胞杂交技术依据的生物学原理有细胞膜的流动性、植物细胞的全能性。
（2）F1是经过植物体细胞杂交得到的，染色体组成为PPQQRR，将F1与甘蓝型油菜回交，获得BC1，其染色体组成为PPQQR。减数分裂时，联会的染色体能正常分离，不能联会的染色体则随机分配，BC1的染色体组成为PPQQR，与甘蓝型油菜（PPQQ）再一次回交，得到的BC2植株群体的染色体数目范围是38-45。
（3）①作为标准参考的GADPH蛋白表达量一致，可排除无关变量对实验结果的影响。
②结果表明甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系G能有效抑制新冠病毒。
③建立甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系在育种方面的意义是拓宽了甘蓝型油菜的遗传基础，为抗病甘蓝型油菜的研究奠定基础；可作为育种中间桥梁材料，将优良性状转移至近缘种。
故答案为：
（1）纤维素（果胶） PEG 植物激素（生长素和细胞分裂素） 脱分化 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
（2）PPQQR 38-45
（3）①一致
②甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系G能有效抑制新冠病毒
③拓宽了甘蓝型油菜的遗传基础，为抗病甘蓝型油菜的研究奠定基础；可作为育种中间桥梁材料，将优良性状转移至近缘种
植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。其意义是克服了远缘杂交不亲和的障碍。
本题主要考查的是植物体细胞杂交技术的操作和应用的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
19.【答案】抗原 体液 选择 5%CO2恒温培养箱 探究单克隆抗体7B8与不同类型Aβ结合的能力 C、B、A 可以，7B8一方面能高效结合多种Aβ聚集体，清除有毒物质；另一方面，7B8可以保护皮层突触的正常功能，提高认知功能，进而治疗AD。不可以，7B8只进行了动物实验，没有检测其对人体的疗效和安全性评估。
【解析】解：（1）短肽疫苗作为抗原，刺激小鼠的免疫系统发生体液免疫；取小鼠脾脏细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合，通过选择培养基的筛选，得到杂交瘤细胞；将杂交瘤细胞加入到动物细胞所需的培养液中，并置于5%CO2恒温培养箱中培养，通过抗体阳性检测技术获得产单克隆抗体7B8的杂交瘤细胞。
（2）结合题干所给信息以及题图，横坐标表示7B8，纵坐标表示与不同种的Aβ肽相对结合量，可知本实验探究单克隆抗体7B8与不同类型Aβ结合的能力。
（3）结合题干所给信息以及题图，“推测单克隆抗体7B8在一定程度上能保护皮层突触的正常功能，后续研究发现单克隆抗体7B8可以提高小鼠的认知功能”，可知组3的突触前蛋白（在突触发挥正常功能中具有重要作用）水平最高，说明是正常的小鼠，腹腔注射无关抗体；组2的突触前蛋白水平最低，为AD小鼠，腹腔注射无关抗体；故组1为AD小鼠，腹腔注射单克隆抗体7B8。因此组1、组2、组3的处理分别为C、B、A。
（4）综合以上所得到的结论，7B8一方面能高效结合多种Aβ聚集体，清除有毒物质；另一方面，7B8可以保护皮层突触的正常功能，提高认知功能，进而治疗AD。由于7B8只进行了动物实验，还没有检测其对人体的疗效和安全性评估，存在一定的安全问题。
故答案为：
（1）抗原 体液 选择 5%CO2恒温培养箱
（2）探究单克隆抗体7B8与不同类型Aβ结合的能力
（3）C、B、A
（4）可以，7B8一方面能高效结合多种Aβ聚集体，清除有毒物质；另一方面，7B8可以保护皮层突触的正常功能，提高认知功能，进而治疗AD。不可以，7B8只进行了动物实验，没有检测其对人体的疗效和安全性评估。
单克隆抗体的制备过程：
（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。
（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）克隆化培养和抗体检测。
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
本题考查单克隆抗体制备的有关知识，要求学生识记其制备过程和制备过程中的相关注意点，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。
20.【答案】MⅡ 获能 同期发情 双 高于 雌性形态异常胎儿的比例显著高于雄性形态异常胎儿 高于 IVF在4细胞和8细胞及桑葚胚时期RNF12蛋白表达水平显著低于IVO 体外受精过程引发小鼠部分雌性胚胎RNF12低表达，引发XCI下降，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高
【解析】解：（1）为获得IVF的胚胎，首先采用超数排卵方法采集小鼠MⅡ期卵母细胞，与获能的精子在适当的培养液中完成体外受精。然后收集早期胚胎，移植到经过同期发情处理的代孕母鼠中，获得具有双亲遗传物质的胚胎。
（2）分析表格数据可知，IVF胎儿性别比例（雄/雌）高于自然生产（IVO）胎儿的性别比例。
（3）①由柱形图可知，IVO组雌、雄胎儿形态异常比率相当，而IVF组雌性形态异常胎儿的比例显著高于雄性形态异常胎儿。
②由题干信息可知，雌性哺乳动物在早期胚胎发育过程中1条X染色体会发生整体范围内的沉默，仅有少数“逃逸”基因仍能正常表达，这一生理过程称作X染色体失活（XCI）。收集不同组别的胚胎细胞，定量检测具代表性的“非逃逸”基因，结果显示这些基因的表达在IVF雌性胚胎中显著高于IVO雌性胚胎，说明IVF雌性胚胎XCI不足。
③由图2看出，IVF在4细胞和8细胞及桑葚胚时期RNF12蛋白表达水平显著低于IVO。
（4）根据以上研究成果，XCI造成体外受精的胎儿性别比例失衡的可能原因是体外受精过程引发小鼠部分雌性胚胎RNF12低表达，引发XCI下降，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高。
故答案为：
（1）MⅡ获能 同期发情 双
（2）高于
（3）①雌性形态异常胎儿的比例显著高于雄性形态异常胎儿
②高于
③IVF在4细胞和8细胞及桑葚胚时期RNF12蛋白表达水平显著低于IVO
（4）体外受精过程引发小鼠部分雌性胚胎RNF12低表达，引发XCI下降，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高
1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
本题考查胚胎工程和动物细胞培养的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力，题目综合性较强。
21.【答案】农杆菌 ATP T-DNA是否导入愈伤组织细胞中 用uidA表达产物显示转入的chsA基因的表达位置（组织或器官）和时间 自身chsA基因只在花苞的花冠组织中表达；花开放前，转入的chsA基因在所有植物组织（花冠、叶）中均表达。开花后，自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达 因自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达，使得查尔酮合酶不合成或合成量极少，在花苞时难以催化花青素的合成（或花青素合成极少），导致白花
【解析】解：（1）①由于载体质粒含有T-DNA，说明所用的方法为农杆菌转化法，则应将重组质粒先转入农杆菌细胞中。
②由题干信息NptⅡ基因表达的蛋白，可以将ATP中的磷酸基团转移到物质K上，可以知道获得的愈伤组织细胞提取液中，加入物质K和用32P标记的ATP，若T-DNA成功导入愈伤组织细胞中则可观察到物质K带有放射性。
（2）①uidA表达产物可以使物质X呈现蓝色，进而使植物组织或器官呈现蓝色，转入chsA-uidA融合基因，可用uidA表达产物显示转入的chsA基因的表达位置（组织或器官）和时间。
②图2中可看到条带1、2只有条带1的chaA出现杂交带，说明自身chsA基因只在花苞的花冠组织中表达；条带3、4中chsA-uidA、和chaA均出现杂交带，说明花开放前，转入的chsA基因在所有植物组织（花冠、叶）中均表达；条带5、6均无任何杂交带，开花后，自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达。
（3）结合小题（2）因自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达，使得查尔酮合酶不合成或合成量极少，在花苞时难以催化花青素的合成（或花青素合成极少），导致白花。
故答案为：
（1）①农杆菌
②ATP T-DNA是否导入愈伤组织细胞中
（2）①用uidA表达产物显示转入的chsA基因的表达位置（组织或器官）和时间
②自身chsA基因只在花苞的花冠组织中表达；花开放前，转入的chsA基因在所有植物组织（花冠、叶）中均表达。开花后，自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达
（3）因自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达，使得查尔酮合酶不合成或合成量极少，在花苞时难以催化花青素的合成（或花青素合成极少），导致白花
图1为重组质粒中T-DNA所含序列，启动子与终止子之间为需要表达的基因，所以在受体细胞中将表达NptⅡ基因和chsA-uidA融合基因；
图2中，结合旁边的文字可以分析得到条带1、2只有条带1的chaA出现杂交带；条带3、4中chsA-uidA、和chaA均出现杂交带；条带5、6均无任何杂交带。出现杂交带说明含有对应基因的mRNA。
本题只要考查考生基因工程基本操作程序在实际生产中的应用，意在考查考生的识图分析能力和判断推理能力，具有一定的难度。
2022-2023学年北京市朝阳区高二（下）期末生物试卷
一、单选题（本大题共15小题，共30.0分）
1. 家庭制作泡菜需要（ ）
A. 严格灭菌 B. 隔绝空气 C. 加入酒精 D. 加入乳酸
2. 秸秆中的木质素包裹在纤维素的外面，所以须先去除木质素才能提高纤维素的降解率。在混合培养时，拟康氏木霉与白腐菌的最佳接入时间间隔为3d。研究人员分别以拟康氏木霉、白腐菌的单一菌和混合菌发酵处理稻草秸秆，结果如表。
菌种
纤维素降解率（%）
木质素降解率（%）
拟康氏木霉
24.62
8.78
白腐霉
6.96
20.06
混合菌（间隔3d）
31.38
22.27
下列叙述错误的是（ ）
A. 混合菌发酵效率高于单一菌株 B. 混合菌发酵时应先接种白腐菌
C. 拟康氏木霉与白腐菌二者互利共生 D. 发酵时补充适量氮源，有利于菌体的繁殖
3. 为提高鱼体对饲料中脂肪源的利用效率，研究人员欲从罗非鱼肠道微生物中分离出油脂分解菌，下列说法错误的是（ ）
A. 用液体培养基对罗非鱼肠道微生物进行富集培养
B. 以豆油为唯一碳源的选择培养基筛选油脂分解菌
C. 可通过平板划线法分离得到油脂分解菌的单菌落
D. 未接种的全营养培养基作为对照防止灭菌不合格
4. 某实验小组利用滤膜法检测饮料中微生物的数量，原理是将待测样品通过微孔滤膜过滤富集后，再将滤膜置于培养基上培养，根据滤膜上的菌落数推算出样品中微生物的数量。过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 实验用到滤膜和水样都需要提前灭菌处理 B. 应选取菌落数为30～300的平板进行计数
C. 统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少 D. 滤膜孔径过大可能导致平板上长不出菌落
5. 与黄啤相比，黑啤的营养成分更加丰富，享有“黑牛奶”的美誉。黑啤的酿造工艺流程如图。下列叙述错误的是（ ）
A. 糖化是淀粉酶将粉碎原料分解成糖浆的过程
B. 麦汁煮沸的主要目的是杀菌和终止酶的作用
C. 发酵是酵母菌将糖转化为酒精和二氧化碳的过程
D. 罐装前用巴氏消毒法杀死啤酒中全部微生物
6. 柑橘水果“爱媛橙”因皮薄易剥、细腻多汁、口感似果冻等优点，被网友们称“果冻橙”，并迅速成为网红水果，“爱媛橙”由柑橘品种“南香”与“西子香”杂交获得，流程如图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 两种细胞均需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B. 通过灭活病毒诱导南香细胞与西子香细胞的融合
C. 杂种细胞重新形成细胞壁与高尔基体的活动有关
D. 爱媛橙的培育过程无需愈伤组织和试管苗的形成
7. 科学家将某些诱导基因转入小鼠成纤维细胞中成功获取诱导多能干细胞，这类细胞可用于一系列的研究，具体过程如图所示。
以下说法错误的是（ ）
A. 过程②实质是基因的选择性表达
B. 过程③可用聚乙二醇诱导细胞融合
C. 培养诱导多能干细胞时，需要定期更换培养液
D. 可将丁细胞注射到小鼠脾脏中提取单克隆抗体
8. 近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家期望通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，其过程如图。以下说法错误的是（ ）
A. 胚胎工程一般采用促性腺激素处理B使其超数排卵
B. 若过程①表示体外受精，C的精子可直接受精
C. 过程②通过显微操作法去除受体卵母细胞的细胞核
D. 过程③表示早期胚胎培养，获得的F后代是克隆动物
9. 蛛丝蛋白具有优良的特性，有广泛的应用前景。蛛丝蛋白核心结构中有以某氨基酸序列为单元的重复序列，据此设计了氨基酸单元相应的核心DNA片段以用于合成目的基因，借助质粒构建表达载体，使大肠杆菌表达蛛丝蛋白。下列对相关操作及结果叙述错误的是（ ）
A. 将多个核心DNA片段拼接获得目的基因时，可用到DNA连接酶
B. 连接目的基因和载体时，二者需要有相同的黏性末端
C. 构建表达载体时，需要限制酶和DNA连接酶
D. 表达载体插入大肠杆菌的拟核基因组中，即可表达蛛丝蛋白
10. 利用PCR方法克隆水通道蛋白的基因P。基因P的部分序列如图，请从①～④中选择扩增P基因的合适引物组合。（ ）
①5'-GAAGTCCTCT-3'
②3'-TGCTGCTTGG-5'
③3'-CTTCAGGAGA-5'
④5'-ACGACGAACC-3'
A. ①② B. ①③ C. ②③ D. ②④
11. 目前常用的生物反应器有乳腺生物反应器和膀胱生物反应器。采用基因工程将人凝血因子基因导入山羊受精卵，成功培育出了人凝血因子只存在于乳汁中的转基因羊。下列相关说法错误的是（ ）
A. 构建乳腺生物反应器时，需将药用蛋白基因和乳腺蛋白基因的启动子等重组在一起
B. 在转基因动物的乳腺细胞或膀胱上皮细胞以外的细胞中不含有药用蛋白基因
C. 与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别和年龄的限制
D. 用显微注射技术将表达载体导入受精卵细胞来获得转基因动物
12. 凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。科学家采用蛋白质工程技术对凝乳酶进行改造，将其第20位和第24位氨基酸改变为半胱氨酸，催化能力提高了2倍。下列叙述不正确的是（ ）
A. 该技术需要先预期蛋白质的功能 B. 该技术直接操作对象是凝乳酶基因
C. 该技术可直接在体外合成凝乳酶 D. 改造后的凝乳酶需进行生物功能检测
13. 理性看待转基因技术需要建立在完备的科学知识基础之上。下列观点不符合生物学原理的是（ ）
A. 外源基因随机插入宿主基因组可能出现意想不到的结果
B. 转基因食品中的基因组可能会整合进入人体基因组
C. 转基因生物合成的某些蛋白可能成为新的过敏原
D. 转基因植物对当地生态安全的影响可能是长远的
14. 以下应用实例中，不涉及生物技术安全性与伦理问题的是（ ）
A. 利用基因编辑技术获得身体健康和智力超群的“完美婴儿”
B. 利用克隆人解决不孕不育患者的生育难题
C. 利用人体的胚胎干细胞治疗阿尔兹海默症
D. 利用自己出生时保留的脐带血治疗白血病
15. 生物武器散布隐匿，危害极大，对生物武器的威胁，不能掉以轻心，下列应对生物武器的措施不正确的是（ ）
A. 任何情况下，不发展、不生产、不储存生物武器
B. 大力发展生物技术，提升应对未知病原体的能力
C. 多储存危害大的病原微生物，全面了解其特性
D. 号召各国共同签署并遵守《禁止生物武器公约》
二、探究题（本大题共6小题，共70.0分）
16. 食醋酿造是多种微生物共同作用的过程，主要微生物为霉菌、酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。食醋发酵过程分为淀粉糖化、酒精发酵和醋酸发酵三个阶段，期间有不同种类的微生物生长繁殖并产生各种酶类，经过一系列复杂的生物化学变化最终形成食醋。
（1）发酵原料中的淀粉属于 ______ 糖，为微生物提供 ______ （营养物质）。参与发酵的多种微生物种间关系属于 ______ 。
（2）研究人员对食醋固态发酵过程中微生物的生长变化规律进行研究。如图为醋醅不同层次的酵母菌和醋酸菌数量变化情况。
①用 ______ 获得单菌落后，挑选菌落数符合要求的平板进行计数。
②由图1可知，整个发酵过程中酵母菌数量呈现 ______ 的趋势，且在不同层次上随着深度增加而减少。初期，由于 ______ ，上层菌增殖速度高于中层及下层菌。之后，随着发酵条件的变化，酵母菌基本停止繁殖而主要进行 ______ 发酵。在第7天以后随发酵时间延长，酵母菌的数量呈降低趋势，原因是 ______ 。
③图2显示，醋酸菌在 ______ 天繁殖最快。醋酸菌将乙醇转化为醋酸，反应简式为： ______ 。
（3）根据国家相关规定，只有单独或混合使用各种含有淀粉、糖的物料、食用酒精，经微生物发酵酿制而成的液体才能在标签上标称“食醋”，以冰酸醋，添加水、酸味剂等勾兑生产的“食醋”只能归类为复合调味料。试说出发酵醋与勾兑“食醋”营养成分方面的区别。 ______ 。
17. 杀草丹是一种高效、广谱除草剂，但是残留成分对环境有较大影响。科学家分离高效降解杀草丹的微生物，对杀草丹污染的环境进行修复。
（1）为分离杀草丹降解菌，研究者进行如下操作：
①取排污口的活性泥接种至 ______ 的液体培养基富集培养一段时间后，通过紫外-可见分光光度法检测富集液中杀草丹的降解效果，紫外吸收图谱的结果如图1，图谱的峰形代表溶液中的溶质种类，峰值代表溶质的含量。
结果表明，富集液中含有能降解杀草丹的微生物，判断依据是： ______ 。
②对富集液进行 ______ ，涂布于含杀草丹的固体培养基表面，培养一段时间后，从若干菌落中挑取 ______ 的单菌落扩大培养，并将其命名为T1。此过程使用的培养基可用 ______ 法灭菌。
（2）根据 ______ 可对菌株T1初步鉴定，但还需通过分子技术扩增菌株的核糖体RNA（rRNA）序列进一步鉴定菌株的种属，下面是三种编码 rRNA的DNA片段的特点：
a：5S rDNA，序列短，遗传信息少。
b：16S rDNA，序列长度适中，含有保守区和可变区，可变区序列具有种的特异性。
c：23S rDNA，序列长，遗传信息量多，碱基突变速度较快。
应选择上述 ______ （填选项字母）序列设计引物PCR，并测序鉴定，理由是 ______ 。
（3）菌株T1彻底降解杀草丹需经多个中间产物依次降解。T1进行传代培养时，发现有一菌株（T1m）失去降解杀草丹的能力，但对杀草丹下游的中间产物仍具有较强降解能力。测序并比对菌株T1和T1m的基因组，发现T1m缺失tmoA和tmoB基因。为探究tmoA和tmoB两基因在杀草丹降解中的作用，将不同质粒分别导入菌株，培养一段时间后，结果如图2。
①图中1和2菌株分别是 ______ 。
②结合上述信息和实验结果，解释T1m对杀草丹降解能力变化的原因： ______ 。
18. 甘蓝型油菜引入我国历史较短，其遗传基础狭隘。菘蓝（别名“板蓝根”）是传统中药材，具有广谱抗病毒特性。研究人员利用甘蓝型油菜（体细胞中染色体数为38）与菘蓝（体细胞中染色体数为14）进行体细胞杂交，培育抗病毒的甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系，过程如图1。
（1）甘蓝型油菜与菘蓝的体细胞经 ______ 酶处理后获得原生质体，再经 ______ 诱导获得融合细胞。融合细胞接种到含有营养物质和 ______ 的培养基上，经 ______ 过程形成愈伤组织，发育形成完整的再生植株F1。植物体细胞杂交技术依据的生物学原理有： ______ 。（至少答出两个）
（2）将F1与甘蓝型油菜回交，获得BC1，其染色体组成为 ______ （只用字母表示）。用BC1与甘蓝型油菜再一次回交，得到的BC2植株群体的染色体数目范围是 ______ 。
（3）研究人员从BC2筛选出7种只含有1条菘蓝染色体的甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系（A、B、C、D、E、F、G）。为探究甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系在抗新冠病毒（SARS-CoV-2）中的作用，研究人员用其提取物处理动物细胞，24h后感染新冠病毒，一段时间后收集病毒细胞培养液，检测病毒的含量，结果如图2。
①作为标准参考的GADPH蛋白表达量 ______ ，可排除无关变量对实验结果的影响。
②结果表明： ______ 。
③尝试说出建立甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系在育种方面的意义： ______ 。
19. 阿尔茨海默病（AD）的典型病理表现为β淀粉样蛋白（Aβ）在脑内沉积造成突触功能损害。研究发现，Aβ的聚集体——Aβ寡聚体、纤维体是AD患者脑内的重要毒性物质。Aβ肽（ AβpE3）是所有Aβ的重要组成部分，由于其更易聚集和不易降解，表现出更强的毒性。为筛选一种靶向Aβ的单克隆抗体，研究人员做了以下实验。
（1）将Aβ3-10短肽疫苗作为 ______ 注射到小鼠体内，激活小鼠特异性免疫的 ______ 免疫，并取小鼠脾脏细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合，通过 ______ 培养基筛选出杂交瘤细胞，加入动物细胞培养液并置于 ______ 中培养，通过抗体阳性检测技术获得产单克隆抗体7B8的杂交瘤细胞。
（2）研究人员将不同种的Aβ肽用包被液稀释并固定在多孔板上，以不加Aβ肽的包被液稀释作为空白对照组，通过洗涤、加入单克隆抗体、再洗涤、加入酶标二抗等环节，检测相对结合量，结果如图1所示。
本实验的研究目的是： ______ 。
（3）为评估单克隆抗体7B8对AD的疗效，研究人员取16月龄的若干小鼠进行实验，组1、组2、组3的处理分别为 ______ （用所给选项的字母表示）。检测三组小鼠皮层中的突触前蛋白（在突触发挥正常功能中具有重要作用）水平，实验结果如图2，推测单克隆抗体7B8在一定程度上能保护皮层突触的正常功能，后续研究发现单克隆抗体7B8可以提高小鼠的认知功能。
A.正常小鼠，腹腔注射无关抗体
B.AD小鼠，腹腔注射无关抗体
C.AD小鼠，腹腔注射单克隆抗体7B8
（4）你认为7B8能否用于治疗AD，并简述理由： ______ 。
20. 雌性哺乳动物在早期胚胎发育过程中1条X染色体会发生整体范围内的沉默（基因转录活性被抑制），仅有少数“逃逸”基因仍能正常表达，这一生理过程称作X染色体失活（XCI）。XCI能保证雌、雄间X染色体上基因表达水平的一致，也造成体外受精胎儿性别比例的失衡。
（1）为制备体外受精（IVF）的胚胎，研究人员采用超数排卵方法采集小鼠 ______ 期卵母细胞，另一方面，将成年健康公鼠的精子在体外条件下进行 ______ 处理，将二者置于适当的培养液中完成体外受精。收集早期胚胎，移植到经过 ______ 处理的代孕母鼠中，获得的胚胎含有 ______ （单/双/三）亲的遗传物质。
（2）研究人员对体外受精胎儿性别进行鉴定，表中结果显示胎儿性别比例（雄/雌） ______ 自然生产（IVO）胎儿的性别比例。
组别
胚胎数
活仔率（ %）
雄 /雌
IVO
81
56.25
1.08
IVF
82
45.58
1.48
（3）为进一步揭示体外受精的胎儿性别比例失衡的原因，研究人员剖取第7.5天的小鼠胚胎进行胎儿发育情况统计，结果如图1。
①结果显示IVO组雌、雄胎儿形态异常比率相当，而在IVF组中， ______ 。
②研究人员收集不同组别的胚胎细胞，定量检测具代表性的“非逃逸”基因，结果显示这些基因的表达在IVF雌性胚胎中显著 ______ IVO雌性胚胎，说明IVF雌性胚胎XCI不足。
③已有研究表明，XCI高度依赖激活因子RNF12，研究人员利用免疫荧光技术检测RNF12蛋白的表达量如图2。
结果显示 ______ 。
（4）综上所述，XCI造成体外受精的胎儿性别比例失衡的可能原因是 ______ 。
21. 花青素是一类水溶性色素，其在花瓣中含量的增高或降低都可能改变花的颜色。在野生紫色矮牵牛中花青素的合成过程受查尔酮合酶（CHSA）催化，科研人员用基因工程技术研究了查尔酮合酶基因（chsA基因）转入野生紫色矮牵牛后对花色的影响。
（1）利用chsA基因与载体质粒（含T-DNA）构建重组质粒。
①将重组质粒先转入 ______ 细胞中，用此细胞侵染叶片细胞，培养诱导成为愈伤组织，进而获得转基因矮牵牛植株。
②重组质粒中T-DNA所含序列如图1所示。NptⅡ基因表达的蛋白，可以将ATP中的磷酸基团转移到物质K上。
在①过程获得的愈伤组织细胞提取液中，加入物质K和用32P标记的 ______ ，检测生成物，用于判断 ______ 。
（2）野生紫色矮牵牛自身chaA基因只在花冠组织中表达，花苞时、开花后均表达。转基因矮牵牛的花色为白色。
①uidA表达产物可以使物质X呈现蓝色，进而使植物组织或器官呈现蓝色。开花前检测用物质X处理的转基因矮牵牛花苞、叶等组织，均呈现蓝色。制备转基因矮牵牛时，转入chsA-uidA融合基因，并非只转入chsA基因，目的是 ______ 。
②检测野生紫色矮牵牛和转基因矮牵牛的不同组织chaA基因的mRNA含量，结果如图2。
由实验结果推测，转基因矮牵牛中，其自身chsA基因与转入的chsA基因的表达时间及功能关系是 ______ 。
（3）结合文中信息，解释转基因矮牵牛出现白花的原因。 ______ 。
答案和解析
1.【答案】B
【解析】解：A、家庭制作泡菜时利用的是环境中的乳酸菌菌种，不能严格灭菌，A错误；
B、家庭制作泡菜所需菌种为乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，故需要隔绝空气，B正确；
C、加入酒精对乳酸菌会造成伤害，不能加入酒精，C错误；
D、乳酸是制作泡菜过程中的产物，不需要加入乳酸，D错误。
故选：B。
泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
本题主要考查泡菜的腌制的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
2.【答案】C
【解析】解：A、根据表格分析，与拟康氏木霉、白腐菌的单一菌发酵处理相比，混合菌处理获得的纤维素降解率和木质素降解率均提高，即混合菌发酵效率高于单一菌株，A正确；
B、白腐霉对木质素降解率高，秸秆中的木质素包裹在纤维素的外面，应先去除木质素才能提高纤维素的降解率，故先接种白腐菌，B正确；
C、互利共生是指两种生物生活在一起，彼此有利，两者分开以后都不能独立生活，拟康氏木霉与白腐菌可单独生存，故二者不是互利共生，C错误；
D、微生物生长一般需要水、碳源、氮源和无机盐等物质，发酵时补充适量氮源，有利于菌体的繁殖，D正确。
故选：C。
人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养物质-培养基，用以培养、分离、鉴定和保存微生物或积累其代谢产物，其中，不含凝固剂、呈液体状态的培养基为液体培养基，呈固体状态的培养基为固体培养基。
本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
3.【答案】D
【解析】解：A、从肠道微生物中分离目的微生物时，进行富集培养的目的是为了增加目的微生物的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物，富集培养需要使用液体培养基，A正确；
B、从罗非鱼肠道微生物中分离出油脂分解菌，需要以豆油为唯一碳源的选择培养基筛选油脂分解菌，B正确；
C、可通过平板划线法分离得到油脂分解菌的单菌落，C正确；
D、未接种的以豆油为唯一碳源的选择培养基作为对照防止灭菌不合格，D错误。
故选：D。
1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。实验室中微生物的筛选，应用了同样的原理，即人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和pH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。
2、进行选择培养时，培养基中需加入脂肪作为唯一的碳源，其作用是允许降解脂肪的微生物生长，抑制或阻止其他种类微生物的生长。
本题考查微生物分离与培养的相关知识，要求考生理解并识记有关的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
4.【答案】A
【解析】解：A、实验用到滤膜需要提前灭菌处理，但水样不能提前灭菌，否则会杀死待测水样中的微生物，A错误；
B、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，B正确；
C、由于两个或多个细菌连在一起时在平板上只观察到一个菌落，因此统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少，C正确；
D、滤膜孔径过大时，水样中的细菌则不会留在滤膜上，可能导致平板上长不出菌落，D正确。
故选：A。
滤膜法是利用微孔滤膜截留液体样本中的微生物，并直接将滤膜置于培养基中进行培养的微生物计数方法，其大致流程为：先用滤膜过滤待测水样，水样中的细菌留在滤膜上，其他杂质则滤出，再将滤膜转移到培养基上培养并统计菌落数目，滤膜法常被用于饮料中微生物的检测。
本题考查微生物的计数，解答本题的关键是掌握滤膜法计数的原理和流程，能结合所学的知识准确答题。
5.【答案】D
【解析】解：A、糖化过程是将粉碎后的原料内含物在一定温度、pH等条件下，在淀粉酶等多种酶的作用下继续溶解和分解的过程，A正确；
B、麦汁煮沸的主要目的是终止酶的进一步作用，并对糖浆灭菌，B正确；
C、发酵是酵母菌将糖转化为酒精和二氧化碳的过程，C正确；
D、巴氏消毒法只能杀死部分微生物，不能杀死全部的微生物，D错误。
故选：D。
啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。
本题以啤酒生产酿造的过程为实验背景，考查发酵工程的应用的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
6.【答案】C
【解析】解：A、两种细胞均需使用纤维素酶和果胶酶处理，去除细胞壁获得原生质体，A错误；
B、诱导植物原生质体融合使用的方法有电融合法、离心法、聚乙二醇融合法等，灭火病毒是诱导动物细胞融合特有的方法，B错误；
C、杂种细胞重新形成细胞壁与高尔基体的活动有关，C正确；
D、爱媛橙的培育是通过植物体细胞杂交实现的，此过程中需要把杂种细胞培育成新植物体，需愈伤组织和试管苗的形成，D错误。
故选：C。
植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。此技术中首先应该使用纤维素酶和果胶酶处理，去除细胞壁获得原生质体，然后利用电融合法、离心法、聚乙二醇融合法等诱导原生质体融合。
本题主要考查的是植物体细胞杂交技术的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
7.【答案】D
【解析】解：A、诱导性多能干细胞具有分化成多种细胞的能力，分化程度较低，而分化成不同细胞的过程（过程②）就是基因选择性表达的过程，A正确；
B、过程③可采用化学试剂聚乙二醇诱导细胞融合，B正确；
C、在体外培养诱导性多能干细胞时，由于细胞在培养液中产生的代谢产物可能会对细胞本身有毒害作用，所以要定期更换培养液，C正确；
D、可将丁细胞注射到小鼠腹腔中提取单克隆抗体，D错误。
故选：D。
单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
本题主要考查单克隆抗体的相关知识，意在考查考生理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力，能够运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中。
8.【答案】B
【解析】解：A、为使驯养单峰骆驼超数排卵，可以给B注射适量的促性腺激素，A正确；
B、若①表示体外受精，可将C野化单峰骆驼的新鲜精子进行获能处理，然后与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用，B错误；
C、②去除受体卵母细胞的细胞核可采用显微操作法，C正确；
D、由图示可知，③表示早期胚胎培养，获得的F后代是通过体细胞核移植得到的克隆动物，D正确。
故选：B。
据图分析，E后代是试管动物，属于有性生殖，F后代是克隆动物，属于无性生殖，其中①表示体外受精，②表示去掉卵母细胞的细胞核，③表示早期胚胎培养。
本题考查试管动物和克隆动物，意在考查学生的理解与表达能力，准确判断题图信息是解题关键。
9.【答案】D
【解析】解：A、DNA连接酶可将两个不同的DNA片段连接在一起，因此将多个核心DNA片段拼接获得目的基因时，可用到DNA连接酶，A正确；
B、目的基因和载体需要通过碱基互补配对拼接在一起，因此连接目的基因和载体时，二者需要有相同的黏性末端，B正确；
C、构建表达载体时，需要使用限制酶切割，然后用DNA连接酶连接，形成重组DNA，C正确；
D、表达载体插入大肠杆菌的拟核基因组中，并不一定能表达蛛丝蛋白，还需要进行抗原抗体检测看蛛丝蛋白基因是否进行了表达，D错误。
故选：D。
基因表达载体的构建：①过程：一般用同一种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。②目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。③基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。
本题主要考查的是基因工程的操作的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
10.【答案】A
【解析】解：在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的，引物需要结合在模板链的3'端，与模板链3'端的碱基互补配对，故选①5'-GAAGTCCTCT-3'和②3'-TGCTGCTTGG-5'两对引物。
故选：A。
1、PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸。
本题主要考查的是DNA片段的扩增以及电泳鉴定的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
11.【答案】B
【解析】解：A、启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，可用于驱动基因的转录，构建乳腺生物反应器时，需将药用蛋白基因和乳腺蛋白基因的启动子等重组在一起，以保证目的基因在乳腺细胞中表达，A正确；
B、受体细胞是动物的受精卵，所以在转基因动物的乳腺细胞或膀胱细胞以外的其他细胞中也含有药用蛋白基因，只是没有表达，B错误；
C、乳腺细胞生物反应器”只能从哺乳期雌性个体的乳汁中获取产物，与“乳腺细胞生物反应器”相比，“膀胱生物反应器”的优点是雌雄个体的尿液中都可提取到产物，且不受性别、年龄等限制，因而受体来源更广泛，C正确；
D、将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术，受体细胞多是受精卵，因此，用显微注射技术将表达载体导入受精卵细胞来获得转基因动物，D正确。
故选：B。
基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒、动植物病毒。
本题主要考查基因工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力，能够运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中。
12.【答案】C
【解析】解：A、蛋白质工程的操作思路：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列 （基因），然后还要合成或改造DNA、构建基因表达载体，即按照基因工程的操作，最后获得所需要的目的蛋白质，A正确；
B、蛋白质工程技术直接操作对象是凝乳酶基因，B正确；
C、凝乳酶是由核糖体产生的，体外不能合成，C错误；
D、改造后的凝乳酶需进行生物功能检测，检测其是否达到改造目的，D正确。
故选：C。
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。
本题考查蛋白质工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
13.【答案】B
【解析】解：A、外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，有可能会出现意想不到的后果，因此存在安全性问题，A正确；
B、转基因食品被食用后，其成分会被消化道中的酶内水解并被人体吸收，其基因不会进入人体基因组，B错误；
C、转基因生物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原或者引起中毒，C正确；
D、转基因生物可能会对生物多样性构成威胁，也可能会影响生态系统的稳定性，故转基因植物对当地生态安全的影响可能是长远的，D正确。
故选：B。
转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。
本题考查转基因生物的安全性问题的相关知识，考生运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
14.【答案】D
【解析】解：A、利用基因编辑技术设计试管婴儿，以期得到身高标准和智力超群的“完美婴儿”，已经涉及到新生命的诞生，会造成生物技术安全与伦理问题，A错误；
B、利用克隆人解决不孕不育患者的生育难题，已经涉及到新生命的诞生，会造成生物技术安全与伦理问题，B错误；
C、胚胎干细胞需要从早期胚胎或原始性腺中分离出来，涉及伦理问题，C错误；
D、利用自己出生时保留的脐带血治疗白血病没有涉及伦理问题，D正确。
故选：D。
中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆。
本题主要考查的是生物技术的安全性和伦理问题的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
15.【答案】C
【解析】解：AC、《禁止生物武器公约》中强调在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，因此不能储存危害大的病原微生物，A正确，C错误；
B、大力发展生物技术，提升应对未知病原体的能力，B正确；
D、《禁止生物武器公约》中强调在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，应号召各国共同签署并遵守《禁止生物武器公约》，D正确。
故选：C。
1、生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。
2、生物武器的特点：单位面积效应大；有特定的伤害对象；具有传染性；危害时间久；不易被发现和鉴定；使用者本身易受伤害；生物武器造价低，技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。
本题主要考查生物武器的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。
16.【答案】多 碳源 竞争 稀释涂布平板法 先快速升高后缓慢降低 溶解氧的存在 酒精 酒精的增多以及酸的产生不适宜酵母的生长繁殖 1-3（1-5） C2H5OH+O2→酶CH3COOH+H2O+能量 发酵醋除了含有醋酸，还含有糖类、氨基酸、乳酸以及少量和微量的醇类、醛类等
【解析】解：（1）淀粉属于多糖，元素组成为C、H、O，为微生物提供碳源。参与发酵的多种微生物为了生长繁殖，他们之间争夺营养物质和生存空间，其种间关系属于竞争关系。
（2）①稀释涂布平板法是指将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，为了了解醋醅不同层次的酵母菌和醋酸菌数量变化情况，利用稀释涂布平板法得到单菌落后计数。
②由图1可知，酵母菌在发酵过程中先快速升高后缓慢降低。发酵初期，上层溶解氧的浓度高，因而上层菌增殖速度高于中层及下层菌。之后，由于溶解氧的消耗殆尽，酵母菌进行无氧呼吸，产生酒精。由于酒精的增多以及酸的产生不适宜酵母的生长繁殖，在第7天以后酵母菌的数量呈降低趋势。
③由图2可知，醋酸菌在1-3天直线的斜率最大，其繁殖最快。醋酸菌将乙醇转化为醋酸，反应简式为：C2H5OH+O2 →酶CH3COOH+H2O+能。
（3）经发酵得到的醋除了含有醋酸，还含有糖类、氨基酸、乳酸以及少量和微量的醇类、醛类等营养成分，而以冰酸醋，添加水、酸味剂等勾兑生产的“食醋”，缺乏糖类、氨基酸、乳酸以及少量和微量的醇类、醛类等营养成分。
故答案为：
（1）多 碳源 竞争
（2）①稀释涂布平板法 ②先快速升高后缓慢降低 溶解氧的存在 酒精 酒精的增多以及酸的产生不适宜酵母的生长繁殖
③1-3（1-5）C2H5OH+O2 →酶CH3COOH+H2O+能量
（3）发酵醋除了含有醋酸，还含有糖类、氨基酸、乳酸以及少量和微量的醇类、醛类等（合理即可）
醋酸菌在氧气、糖源充足时，将糖分解成醋酸；当氧气充足、缺少糖源时，将乙醇变成乙醛，再将乙醛变为醋酸。
本题考查果酒和果醋制作的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。
17.【答案】含一定浓度杀草丹 与对照组相比，接种活性泥的富集液的峰值降低且峰形发生变化 梯度稀释 透明圈直径/菌落直径最大 高压蒸汽灭菌 菌落特征 b 16SrDNA，序列长度适中，遗传信息量适中；可变区的序列具有种的特性，能够鉴定菌种 导入空质粒的T1和导入空质粒的T1m 菌株T1m中降解杀草丹的起始关键酶基因tmoA缺失
【解析】解：（1）①为分离杀草丹降解菌，培养基中需要含有一定浓度的杀草丹，取排污口的活性泥接种至含一定浓度杀草丹的液体培养基富集培养一段时间，通过分析紫外吸收图谱，与对照组相比，接种活性泥的富集液的峰值降低且峰形发生变化，表明富集液中含有能降解杀草丹的微生物。
②将菌液涂布于含杀草丹的固体培养基表面需要使用稀释涂布平板法，需要首先对富集液进行梯度稀释，涂布培养一段时间后，从若干菌落中挑取透明圈直径/菌落直径最大的单菌落扩大培养，此菌落中的微生物的分解能力较强，此过程使用的培养基可用高压蒸汽灭菌法灭菌。
（2）每种微生物都有特定形态特征的菌落，根据菌落特征可对菌株T1初步鉴定，通过分子技术扩增菌株的核糖体RNA（rRNA） 序列进一步鉴定菌株的种属应选择16S rDNA，序列长度适中，遗传信息量适中；可变区的序列具有种的特性，能够鉴定菌种。
（3）①为探究tmoA和tmoB两基因在杀草丹降解中的作用，将不同质粒分别导入菌株，培养一段时间后，结果如图2，菌株1和2起对照作用，分别是导入空质粒的T1和导入空质粒的T1m。
②T1m对杀草丹降解能力变化的原因是菌株T1m中降解杀草丹的起始关键酶基因tmoA缺失。
故答案为：
（1）①含一定浓度杀草丹 与对照组相比，接种活性泥的富集液的峰值降低且峰形发生变化
②梯度稀释 透明圈直径/菌落直径最大 高压蒸汽灭菌/湿热灭菌
（2）菌落特征 b 16S rDNA，序列长度适中，遗传信息量适中；可变区的序列具有种的特性，能够鉴定菌种
（3）①导入空质粒的T1和导入空质粒的T1m
②菌株T1m中降解杀草丹的起始关键酶基因tmoA缺失
微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等。筛选目的微生物必须使用选择培养基。从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。常用的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法。
本题中举要考查的是微生物的分离和培养的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
18.【答案】纤维素（果胶） PEG 植物激素 脱分化 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 PPQQR 38-45 一致 甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系G能有效抑制新冠病毒 拓宽了甘蓝型油菜的遗传基础，为抗病甘蓝型油菜的研究奠定基础；可作为育种中间桥梁材料，将优良性状转移至近缘种
【解析】解：（1）植物体细胞杂交前需要使用纤维素酶和果胶酶处理，去除植物细胞的细胞壁，获得原生质体，再经PEG诱导原生质体融合获得融合细胞。融合细胞接种到含有营养物质和植物激素的培养基上，经脱分化过程形成愈伤组织，愈伤组织再经过再分化发育形成完整的再生植株F1。植物体细胞杂交技术依据的生物学原理有细胞膜的流动性、植物细胞的全能性。
（2）F1是经过植物体细胞杂交得到的，染色体组成为PPQQRR，将F1与甘蓝型油菜回交，获得BC1，其染色体组成为PPQQR。减数分裂时，联会的染色体能正常分离，不能联会的染色体则随机分配，BC1的染色体组成为PPQQR，与甘蓝型油菜（PPQQ）再一次回交，得到的BC2植株群体的染色体数目范围是38-45。
（3）①作为标准参考的GADPH蛋白表达量一致，可排除无关变量对实验结果的影响。
②结果表明甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系G能有效抑制新冠病毒。
③建立甘蓝型油菜—菘蓝单体附加系在育种方面的意义是拓宽了甘蓝型油菜的遗传基础，为抗病甘蓝型油菜的研究奠定基础；可作为育种中间桥梁材料，将优良性状转移至近缘种。
故答案为：
（1）纤维素（果胶） PEG 植物激素（生长素和细胞分裂素） 脱分化 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
（2）PPQQR 38-45
（3）①一致
②甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系G能有效抑制新冠病毒
③拓宽了甘蓝型油菜的遗传基础，为抗病甘蓝型油菜的研究奠定基础；可作为育种中间桥梁材料，将优良性状转移至近缘种
植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。其意义是克服了远缘杂交不亲和的障碍。
本题主要考查的是植物体细胞杂交技术的操作和应用的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
19.【答案】抗原 体液 选择 5%CO2恒温培养箱 探究单克隆抗体7B8与不同类型Aβ结合的能力 C、B、A 可以，7B8一方面能高效结合多种Aβ聚集体，清除有毒物质；另一方面，7B8可以保护皮层突触的正常功能，提高认知功能，进而治疗AD。不可以，7B8只进行了动物实验，没有检测其对人体的疗效和安全性评估。
【解析】解：（1）短肽疫苗作为抗原，刺激小鼠的免疫系统发生体液免疫；取小鼠脾脏细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合，通过选择培养基的筛选，得到杂交瘤细胞；将杂交瘤细胞加入到动物细胞所需的培养液中，并置于5%CO2恒温培养箱中培养，通过抗体阳性检测技术获得产单克隆抗体7B8的杂交瘤细胞。
（2）结合题干所给信息以及题图，横坐标表示7B8，纵坐标表示与不同种的Aβ肽相对结合量，可知本实验探究单克隆抗体7B8与不同类型Aβ结合的能力。
（3）结合题干所给信息以及题图，“推测单克隆抗体7B8在一定程度上能保护皮层突触的正常功能，后续研究发现单克隆抗体7B8可以提高小鼠的认知功能”，可知组3的突触前蛋白（在突触发挥正常功能中具有重要作用）水平最高，说明是正常的小鼠，腹腔注射无关抗体；组2的突触前蛋白水平最低，为AD小鼠，腹腔注射无关抗体；故组1为AD小鼠，腹腔注射单克隆抗体7B8。因此组1、组2、组3的处理分别为C、B、A。
（4）综合以上所得到的结论，7B8一方面能高效结合多种Aβ聚集体，清除有毒物质；另一方面，7B8可以保护皮层突触的正常功能，提高认知功能，进而治疗AD。由于7B8只进行了动物实验，还没有检测其对人体的疗效和安全性评估，存在一定的安全问题。
故答案为：
（1）抗原 体液 选择 5%CO2恒温培养箱
（2）探究单克隆抗体7B8与不同类型Aβ结合的能力
（3）C、B、A
（4）可以，7B8一方面能高效结合多种Aβ聚集体，清除有毒物质；另一方面，7B8可以保护皮层突触的正常功能，提高认知功能，进而治疗AD。不可以，7B8只进行了动物实验，没有检测其对人体的疗效和安全性评估。
单克隆抗体的制备过程：
（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。
（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）克隆化培养和抗体检测。
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
本题考查单克隆抗体制备的有关知识，要求学生识记其制备过程和制备过程中的相关注意点，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。
20.【答案】MⅡ 获能 同期发情 双 高于 雌性形态异常胎儿的比例显著高于雄性形态异常胎儿 高于 IVF在4细胞和8细胞及桑葚胚时期RNF12蛋白表达水平显著低于IVO 体外受精过程引发小鼠部分雌性胚胎RNF12低表达，引发XCI下降，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高
【解析】解：（1）为获得IVF的胚胎，首先采用超数排卵方法采集小鼠MⅡ期卵母细胞，与获能的精子在适当的培养液中完成体外受精。然后收集早期胚胎，移植到经过同期发情处理的代孕母鼠中，获得具有双亲遗传物质的胚胎。
（2）分析表格数据可知，IVF胎儿性别比例（雄/雌）高于自然生产（IVO）胎儿的性别比例。
（3）①由柱形图可知，IVO组雌、雄胎儿形态异常比率相当，而IVF组雌性形态异常胎儿的比例显著高于雄性形态异常胎儿。
②由题干信息可知，雌性哺乳动物在早期胚胎发育过程中1条X染色体会发生整体范围内的沉默，仅有少数“逃逸”基因仍能正常表达，这一生理过程称作X染色体失活（XCI）。收集不同组别的胚胎细胞，定量检测具代表性的“非逃逸”基因，结果显示这些基因的表达在IVF雌性胚胎中显著高于IVO雌性胚胎，说明IVF雌性胚胎XCI不足。
③由图2看出，IVF在4细胞和8细胞及桑葚胚时期RNF12蛋白表达水平显著低于IVO。
（4）根据以上研究成果，XCI造成体外受精的胎儿性别比例失衡的可能原因是体外受精过程引发小鼠部分雌性胚胎RNF12低表达，引发XCI下降，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高。
故答案为：
（1）MⅡ获能 同期发情 双
（2）高于
（3）①雌性形态异常胎儿的比例显著高于雄性形态异常胎儿
②高于
③IVF在4细胞和8细胞及桑葚胚时期RNF12蛋白表达水平显著低于IVO
（4）体外受精过程引发小鼠部分雌性胚胎RNF12低表达，引发XCI下降，导致雌性发育异常及雄/雌比例升高
1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
本题考查胚胎工程和动物细胞培养的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力，题目综合性较强。
21.【答案】农杆菌 ATP T-DNA是否导入愈伤组织细胞中 用uidA表达产物显示转入的chsA基因的表达位置（组织或器官）和时间 自身chsA基因只在花苞的花冠组织中表达；花开放前，转入的chsA基因在所有植物组织（花冠、叶）中均表达。开花后，自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达 因自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达，使得查尔酮合酶不合成或合成量极少，在花苞时难以催化花青素的合成（或花青素合成极少），导致白花
【解析】解：（1）①由于载体质粒含有T-DNA，说明所用的方法为农杆菌转化法，则应将重组质粒先转入农杆菌细胞中。
②由题干信息NptⅡ基因表达的蛋白，可以将ATP中的磷酸基团转移到物质K上，可以知道获得的愈伤组织细胞提取液中，加入物质K和用32P标记的ATP，若T-DNA成功导入愈伤组织细胞中则可观察到物质K带有放射性。
（2）①uidA表达产物可以使物质X呈现蓝色，进而使植物组织或器官呈现蓝色，转入chsA-uidA融合基因，可用uidA表达产物显示转入的chsA基因的表达位置（组织或器官）和时间。
②图2中可看到条带1、2只有条带1的chaA出现杂交带，说明自身chsA基因只在花苞的花冠组织中表达；条带3、4中chsA-uidA、和chaA均出现杂交带，说明花开放前，转入的chsA基因在所有植物组织（花冠、叶）中均表达；条带5、6均无任何杂交带，开花后，自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达。
（3）结合小题（2）因自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达，使得查尔酮合酶不合成或合成量极少，在花苞时难以催化花青素的合成（或花青素合成极少），导致白花。
故答案为：
（1）①农杆菌
②ATP T-DNA是否导入愈伤组织细胞中
（2）①用uidA表达产物显示转入的chsA基因的表达位置（组织或器官）和时间
②自身chsA基因只在花苞的花冠组织中表达；花开放前，转入的chsA基因在所有植物组织（花冠、叶）中均表达。开花后，自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达
（3）因自身chsA基因与转入的chsA基因彼此抑制表达，使得查尔酮合酶不合成或合成量极少，在花苞时难以催化花青素的合成（或花青素合成极少），导致白花
图1为重组质粒中T-DNA所含序列，启动子与终止子之间为需要表达的基因，所以在受体细胞中将表达NptⅡ基因和chsA-uidA融合基因；
图2中，结合旁边的文字可以分析得到条带1、2只有条带1的chaA出现杂交带；条带3、4中chsA-uidA、和chaA均出现杂交带；条带5、6均无任何杂交带。出现杂交带说明含有对应基因的mRNA。
本题只要考查考生基因工程基本操作程序在实际生产中的应用，意在考查考生的识图分析能力和判断推理能力，具有一定的难度。
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