2022扬州中学高二下学期6月月考生物试题含解析

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2021-2022学年度第二学期6月月考测试试题
高二生物
一、单项选择题
1. 肺炎是由病原微生物、理化因素、免疫损伤、过敏及药物等因素引起的炎症，可分为细菌性肺炎、非典型病原体肺炎（如支原体肺炎等）、病毒性肺炎（如新冠肺炎），下列相关叙述正确的是（ ）
A. 细菌、支原体和新冠病毒的遗传物质彻底水解得到的碱基类型相同
B. 细菌、支原体和新冠病毒都含有糖类且都不具有细胞核和细胞器
C. 抑制细胞壁合成的药物对非典型病原体肺炎和病毒性肺炎均无效
D. 对细菌、支原体和新冠病毒的研究培养需要将其接种在营养齐全的培养基上
【答案】C
【解析】
【分析】1、生物病毒是一类个体微小， 结构简单，只含单一核酸(DNA或RNA) ， 必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型微生物。
2、肺炎支原体是原核生物，没有以核膜为界限的细胞核，有唯一的细胞器(核糖体)。
【详解】A、细菌、支原体的遗传物质是DNA，彻底水解以后的碱基是A、T、G、C，新冠病毒的遗传物质是RNA，彻底水解得到的碱基是A、U、G、C，所以细菌、支原体和新冠病毒的遗传物质彻底水解得到的碱基类型不完全相同，A错误；
B、细菌、支原体含有核糖体这一种细胞器， B错误；
C、支原体没有细胞壁，病毒没有细胞结构，抑制细胞壁合成的药物对支原体肺炎和病毒性肺炎均无效，C正确；
D、新冠病毒没有细胞结构，必须在活细胞内寄生，因此不能直接将其接种在营养齐全的培养基上，D错误。
故选C。
2. 无机盐是构成细胞的重要成分，对维持细胞和生物体的生命活动具有重要作用，下列解释不正确的是（ ）
A. 光合作用需要叶绿素的参与，植物缺Mg会影响光合作用
B. Fe是构成血红素的元素，缺Fe会使红细胞运氧能力下降，造成缺铁性贫血症
C. P是组成细胞膜、细胞核的重要成分，也是细胞许多重要化合物的成分
D. N元素不仅参与叶绿素组成，也是核酸、纤维素等多种物质的构成元素
【答案】D
【解析】
【分析】细胞内的无机盐主要以离子的形式存在，有些无机盐是细胞内某些复杂化合物的组成成分，如铁是血红蛋白的组成成分，镁是叶绿素的组成成分；许多无机盐对于维持细胞和生物体的生命活动具有重要作用，有的无机盐还参与维持细胞酸碱平衡和渗透压。
【详解】A、Mg是叶绿素的成分，缺Mg不能合成叶绿素，也就不能进行光合作用，A正确；
B、Fe是构成血红素的元素，缺铁造成血红素不能合成，从而使红细胞运氧能力下降，从而出现缺铁性贫血，B正确；
C、细胞膜、细胞核中的核膜，染色质等成分都含有P元素，P是构成磷脂和核酸等化合物的组成元素，植物缺P影响生长发育，C正确；
D、N元素不仅参与叶绿素组成，也是核酸等多种物质的构成元素，但纤维素是糖类，元素组成为C、H、O，没有N元素，D错误。
故选D。
3. 显微镜观察法在生物学研究中发挥着重要作用。下列：①观察多种多样的细胞；②生物组织细胞中脂肪的鉴定（苏丹Ⅲ染色）；③观察叶绿体和细胞质流动；④探究植物细胞的吸水和失水等实验，将有关生物材料直接制成临时装片，并进行相关处理后使用显微镜观察。下列叙述正确的是（ ）
A. ①中用高倍显微镜可观察到大肠杆菌中有核糖体分布
B. ②中高倍镜下可观察到花生子叶中被染成橘黄色的脂肪颗粒
C. ③中可观察到黑藻的细胞质环流方向与实际流动方向相反
D. ④中可观察到水分子从洋葱鳞片叶表皮细胞的液泡进入高渗蔗糖溶液
【答案】B
【解析】
【分析】1、生物组织中化合物的鉴定：（1）斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，产生砖红色沉淀。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖（如葡萄糖、麦芽糖、果糖）存在与否，而不能鉴定非还原性糖（如淀粉）。（2）蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应。（3）脂肪可用苏丹Ⅲ染液鉴定，呈橘黄色。
2、亚显微结构能看到所有细胞器，显微结构只能看到液泡、叶绿体、线粒体、细胞壁、染色体相比之下，亚显微结构下对细胞观察更加仔细。
【详解】A、核糖体属于亚显微结构，需要电子显微镜才能观察到，高倍显微镜不能观察到核糖体，A错误；
B、脂肪被苏丹Ⅲ染成橘黄色，②中高倍镜下可观察到花生子叶中被染成橘黄色的脂肪颗粒，B正确；
C、显微镜成像特点是倒立的，显微镜观察到黑藻的细胞质环流方向与实际流动方向相同的，C错误；
D、光学显微镜无法观察到水分子的运动，D错误。
故选B。
4. 研究发现一类称做“分子伴侣”的蛋白质可识别正在合成的多肽或部分折叠的多肽，并通过改变自身空间结构与多肽的某些部位相结合，从而帮助这些多肽折叠、组装或转运，其本身不参与组成最终产物并可循环发挥作用。下列叙述正确的是（ ）
A. 乳酸菌内“分子伴侣”发挥作用的场所可能在内质网上
B. “分子伴侣”介导加工直链八肽化合物中含有9个氧原子和8个氮原子
C. “分子伴侣”的空间结构一旦发生改变，则不可逆转
D. 经高温处理后的“分子伴侣”也能与双缩脲试剂发生作用产生紫色反应
【答案】D
【解析】
【分析】蛋白质变性是指天然蛋白质因受物理、化学因素的影响，使蛋白质分子的构象发生了异常变化，从而导致生物活性的丧失以及物理、化学性质的异常变化。蛋白质变性不涉及蛋白质一级结构的改变，即由氨基酸构成的肽链并不发生改变。
【详解】A、乳酸菌是原核生物，没有内质网，A错误；
B、每一个氨基酸至少含有一个氨基（-NH2）和一个羧基（-COOH），直链八肽化合物由 8 个氨基酸脱去7个水形成，其中 8 个氨基酸中至少的氧原子数为 8×2=16，至少的氮原子数为 8×1=8，7分子水（H2O）包含的氧原子数 7，氮原子数为 0，则直链八肽化合物至少有氧原子 8×2－7=9，氮原子 8×1=8，B错误；
C、由题干信息可知：分子伴侣在发挥作用时会改变自身空间结构，并可循环发挥作用，因此可以判断“分子伴侣”的空间结构的改变是可以逆转的，C错误；
D、经高温处理后的“分子伴侣”其肽键并没有断裂，能与双缩脲试剂发生作用产生紫色反应，D正确。
故选D。
5. 如图为两种小分子物质（甲、乙）跨膜运输方式的运输速率与浓度差的关系，两种物质分子的运输都与能量供应无关。下列叙述错误的是（ ）

A. 两种物质分子的运输动力都来自细胞膜内外侧物质的浓度差
B. 脂溶性小分子以物质甲的方式运输，其运输速率与分子大小无关
C. 物质乙运输过程可能是通过载体蛋白发生可逆的构象变化实现的
D. 使用蛋白变构剂处理对物质甲的运输无影响，而物质乙运输速率会降低
【答案】B
【解析】
【分析】据图可知：物质甲随着浓度差的增大，运输速率一直在增加，说明物质甲的运输方式为自由扩散；物质乙在一定的浓度差范围内，随着浓度差的增大，运输速率增大，超过一定的浓度差，浓度差再增大，运输速率不发生改变，说明物质乙的运输方式为协助扩散。
【详解】A、据柱形图分析可知，物质甲的运输方式为自由扩散，而物质乙的运输方式为协助扩散，两者的运输动力都来自细胞膜内外侧物质的浓度差，A正确；
B、脂溶性小分子的运输方式为自由扩散，其取决于分子的大小和其脂溶性，B错误；
C、物质乙的运输方式为协助扩散，运输过程可能是通过载体蛋白发生可逆的构象变化实现的，C正确；
D、自由扩散不需要载体蛋白的协助，而协助扩散需要载体蛋白的协助，使用蛋白变构剂处理对物质甲的运输无影响，而物质乙运输速率会降低，D正确。
故选B。
6. 某科研小组利用差速离心法获得了某细胞的多种细胞器，并对它们的部分成分和结构进行分析，结果如表所示（“+”表示含有对应成分或结构，“表示不含对应成分或结构），下列推测正确的是（ ）
细胞器
双层膜
单层膜
DNA
RNA
蛋白质成分
色素
①
＋
－
＋
＋
＋
－
②
－
－
－
＋
＋
－
③
＋
－
＋
＋
＋
＋
④
－
＋
－
－
＋
＋
⑤
－
－
－
－
＋
－

A. 该实验的材料应该是高等植物的叶肉细胞
B. ②参与蛋白质的加工与运输过程
C. ①内膜表面积/外膜表面积的值大于③的这一比值
D. 细胞生命活动过程中④可以合成ATP
【答案】C
【解析】
【分析】分析表格可知，①③含有双层膜，且③含有色素，推测①为线粒体，③为叶绿体；②无膜结构，含RNA和蛋白质，可能为核糖体；④为单层膜结构，含有色素，可能为液泡；⑤无膜结构且不含核酸，推测⑤可能为中心体。
【详解】A、结合分析可知，该细胞中含有叶绿体和中心体，则该实验所用的材料可能为低等植物细胞，A错误；
B、②无膜结构，含有蛋白质和RNA，推测其是核糖体，核糖体参与蛋白质的合成，但不参与蛋白质的加工与运输，B错误；
C、①为线粒体，③为叶绿体，线粒体内膜向内折叠形成嵴使内膜的表面积大于外膜，但叶绿体内膜的表面积通常小于外膜，C正确；
D、④含有单层膜且含有色素，推测其为液泡，其不能合成ATP，D错误。
故选C。
7. 酶和ATP是细胞代谢不可缺少的。相关叙述正确的是（ ）
A. 酶和ATP的合成都需要核酸作为模板
B. 细胞中酶的合成离不开核糖体、内质网的参与
C. 能合成酶的细胞都能合成ATP，反之亦然
D. 同一种酶在不同条件下最适温度可能不同
【答案】D
【解析】
【分析】1.酶是由活细胞产生的具有催化活性的有机物，其中大部分是蛋白质、少量是RNA；
2.酶的特性。
①高效性：酶的催化效率大约是无机催化剂的107～1013倍；
②专一性：每一种酶只能催化一种或者一类化学反应；
③酶的作用条件较温和：在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高；温度和pH偏高或偏低，酶的活性都会明显降低。
【详解】A、酶的化学本质是绝大多数是蛋白质，少数是RNA，无论是蛋白质还是RNA，其合成过程都需要以核酸为模板，而ATP的合成不需要模板，A错误；
B、酶的化学本质是绝大多数是蛋白质，少数是RNA，化学本质是蛋白质的酶需要在核糖体上合成，有些胞外酶还需要内质网进行加工，但化学本质是 RNA的酶合成时不需要核糖体，更不需要内质网，B错误；
C、能合成酶的细胞都能合成ATP，能合成ATP的细胞不一定能合成酶，如哺乳动物成熟的红细胞，C错误；
D、在底物不同、pH不同以及生存环境不同的 条件下，同一种酶的最适温度可能不同，D正确。
故选D。
8. 作为我国“十四五”初期举办的重大标志性活动，北京冬奥会、冬残奥会始终落实生态保护优先原则，提交了一份绿色低碳的中国答卷。北京延庆赛区在生物多样性保护上，采取植物就地保护、移植保护、人工鸟巢建设和临时动物通道建设等措施。延庆赛区在野生动物栖息地保护、现有水源地保护等方面做出了合理规划，以减少冬奥会活动对生态系统的影响，守护了赛区的青山绿水，实现了“山林场馆、生态冬奥”的目标。下列说法错误的是（ ）
A. 为确保生物多样性建立野生动物通道，其意义是将割裂的栖息地连接，促进了野生动物种内的基因交流
B. 通过设置防虫网、释放天敌昆虫积极进行有效防治，分别属于物理防治、生物防治措施
C. 生态系统的结构包括生产者、消费者、分解者和非生物的物质和能量
D. 就地保护是对生物多样性最有效的保护
【答案】C
【解析】
【分析】1、保护生物多样性的措施：
（1）就地保护：主要形式是建立自然保护区，是保护生物多样性最有效的措施。
（2）迁地保护：将濒危生物迁出原地，移入动物园、植物园、水族馆和濒危动物繁育中心，进行特殊的保护和管理，是对就地保护的补充。
（3）建立濒危物种种质库，保护珍贵的遗传资源。
（4）加强教育和法制管理，提高公民的环境保护意识。
2、物理防治一般是用棍棒驱赶、利用笼子、捕虫网等工具捕捉害虫；化学防治一般是利用化学药物杀死害虫；生物防治一般可以利用天敌、竞争者，或者影响害虫的性别比例等来降低害虫密度。
【详解】A、将割裂的栖息地连接，增加了种群个体之间基因交流的概率，促进了濒危物种种群数量的增加，也能使种群中的个体具有较大的变异性，A正确；
B、通过设置防虫网防虫害属于物理防治，释放天敌昆虫积极进行有效防治，降低害虫种群密度属于生物防治，B正确；
C、生态系统的结构包括组成成分和营养结构，其中组程成分包括生产者、消费者、分解者和非生物的物质和能量，C错误；
D、就地保护的主要形式是建立自然保护区，这是保护生物多样性最有效的措施，D正确。
故选C。
9. 如图表示某生态系统受到一定程度的干扰后，生态系统稳定性的变化。下列相关叙述错误的是（ ）

A. S3面积越小说明该生态系统的稳定性越高
B. 若某生态系统S1面积小，则S2面积一定小
C. S2面积越大说明该生态系统的恢复力稳定性越弱
D. 受到干扰后能恢复生态平衡，说明该生态系统具有一定的自我调节能力
【答案】B
【解析】
【分析】分析图形：在受到干扰之前，曲线在正常范围内波动是由于该生态系统具有自我调节能力，生态系统的稳定性与营养结构相关，营养结构越复杂生态系统的稳定性越高，反之则越低。S3所代表的面积表示生态系统的总稳定性，S2所代表的面积越大，生态系统的恢复力稳定性越低，S1所代表的面积越大，生态系统的抵抗力稳定性越高。
【详解】A、S3所代表的面积越小，表明生态系统在遭到干扰后偏离正常范围越小，生态系统的稳定性越高，A正确；
B、S1所代表的面积越小，表明生态系统在遭到干扰后偏离正常范围越大，生态系统的抵抗力稳定性越低；恢复力稳定性可能较高，也可能小，故S2面积不一定小，B错误；
C、S2所代表的面积越大，表明生态系统在遭到干扰破坏后，恢复到原状所用的时间越长，生态系统的恢复力稳定性越弱，C正确；
D、受到干扰后能恢复生态平衡，说明该生态系统具有一定的自我调节能力，D正确。
故选B。

10. 人参是名贵的中药材，但长期以来，由于过度采挖，野生人参濒临灭绝。研究人员利用植物组织培养技术，实现了人参的快速繁殖（如图）。下列叙述错误的是（ ）


A. 同一株人参不同根细胞经培养获得的新的人参植株的基因型相同
B. ①号培养瓶使用液体培养基且可用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞
C. ②、③号培养瓶中的培养液成分中植物生长调节剂的比例有所不同
D. 利用射线等诱变因素处理②中的细胞团并进一步培养可获得突变体
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养技术：
1、过程:离体的植物组织、器官或细胞(外植体)→愈伤组织→胚状体→植株(新植体)。
2、原理：植物细胞的全能性。
3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等)；②定的营养(无机、 有机成分)和植物激素(生长素和细胞分裂素) 。
4、 植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径(包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等)、作物新品种的培育(单倍体育种、突变体的利用)，细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、同一株人参不同根细胞中具有发育成完整植株的全套遗传信息，同一株人参不同根细胞经培养获得的新的人参植株的基因型相同，A正确；
B、根据悬浮培养可知，①号培养瓶使用液体培养基，只要是为了培养细胞，将植物细胞分散成单个细胞不能使用胰蛋白酶处理，B错误；
C、②号培养瓶是为了让单细胞脱分化，③号培养瓶是为了再分化，②和③中生长素与细胞分裂素的比例不同，C正确；
D、②号培养瓶中细胞团为愈伤组织，其分裂旺盛，DNA复制过程中易受到射线、化学物质等诱变而发生基因突变，因此对经诱变处理的愈伤组织培养，可获得突变体，D正确。
故选B。
11. 1988年，美国默克公司以仅700万美元的价格，向我国全部转让当时最先进的重组乙肝疫苗的生产技术。该技术利用酿酒酵母来表达乙肝病毒的表面抗原(HBsAg)，然后将表面抗原(HB-sAg)纯化后混合佐剂制成乙肝疫苗。下列相关说法，正确的是（ ）
A. 传统乙肝疫苗的生产方式是在培养液中培养乙肝病毒，再对乙肝病毒进行减毒或灭活处理
B. HBsAg基因能成功插入到酵母的染色体DNA中，是由于酵母和乙肝病毒共用一套遗传密码
C. 科学家不选大肠杆菌作受体，可能是因为HBsAg需要依赖内质网和高尔基体进行后期加工和包装
D. 该技术的原理是基因重组，通过该技术生产出的疫苗，化学本质是DNA而非蛋白质
【答案】C
【解析】
【分析】基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术。所谓基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。结合题干可知，目的基因为乙肝病毒的表面抗原(HBsAg)对应的基因。基因工程的产物是乙肝疫苗。
【详解】A、病毒没有独立的新陈代谢能力，不能用培养液培养病毒，A错误；
B、HBsAg基因能成功插入到酵母的染色体DNA中，是由于两者的DNA均为双螺旋结构，B错误；
C、大肠杆菌是原核生物，而疫苗是蛋白质，可能是因为HBsAg需要依赖内质网和高尔基体进行后期加工和包装，因此不用大肠杆菌作为受体，C正确；
D、该技术的原理是基因重组，通过该技术生产出的疫苗，化学本质是蛋白质，D错误。
故选C。
12. 某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如表所示。限制酶a、b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是（ ）
酶a切割产物长度（bp）
酶b再次切割产物长度（bp）
2100；1400；1000；500
1900；200；800；600；1000；500

A. 酶a与酶b切断的化学键不相同
B. 酶a与酶b切出的黏性末端不能相互连接
C. 该DNA分子中酶a与酶b的识别序列分别有3个和2个
D. 若酶a完全切割与该DNA序列相同的质粒，得到的切割产物有4种
【答案】C
【解析】
【分析】由图可知，酶a、b的识别序列不同，但产生的黏性末端相同，均为GATC，由酶切产物可知，酶a单独切割后会形成4个片段，说明含有3个酶a的酶切位点；酶b再次酶切后，又新形成4种片段，说明有2个酶b的酶切位点。
【详解】A、酶a与酶b切断的化学键均为磷酸二酯键，A错误；
B、a酶与b酶切出的黏性末端相同，用DNA连接酶可以将它们连接起来，B错误；
C、由酶切产物可知，该DNA分子中，酶a与酶b的识别序列分别有3个和2个，C正确；
D、用酶a切割与该DNA序列相同的质粒（环状的），也可得到3种大小不同的切割产物，D错误。
故选C。
13. 生殖性克隆和治疗性克隆既有相同点，又有本质的区别。下列相关叙述错误的是（　　）
A. 前者面临伦理问题，后者不会面临伦理问题
B. 两者都涉及体细胞核移植技术
C. 前者为了产生新个体，后者为了治疗疾病
D. 我国允许生殖性克隆动物，但禁止生殖性克隆人
【答案】A
【解析】
【分析】1、生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆。即用生殖技术制造完整的克隆人，目的是产生一个独立生存的个体。与此相对的是研究性克隆或医学性克隆，指的是产生研究所用的克隆细胞．不产生可独立生存的个体。
2、治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞）用于治疗。
【详解】A、生殖性克隆和治疗性克隆都涉及伦理问题，我国政府不允许进行任何生殖性克隆人实验，也同样重视治疗性克隆所涉及的伦理问题，A错误；
B、由分析可知，生殖性克隆和治疗性克隆两种技术都涉及体细胞核移植技术，B正确；
C、生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆，而治疗性克隆是为了治疗疾病，C正确；
D、我国允许生殖性克隆动物，用于科学研究，但禁止生殖性克隆人，D正确。
故选A。
14. 下图是利用生物工程技术培育转荧光蛋白基因克隆猪的过程。下列叙述正确的是（ ）

A. ①②过程分别属于胚胎工程和基因工程的范畴
B. ③过程常用显微注射技术，注射前需先用Ca2＋处理重组细胞
C. ④过程胚胎须发育到囊胚或原肠胚阶段
D. ⑤过程为胚胎移植技术，可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
【答案】D
【解析】
【分析】据图分析，图示为利用生物工程技术培育转荧光蛋白基因克隆猪的过程，其中①表示核移植技术，②表示基因表达载体的构建，③表示将目的基因（重组质粒）导入受体细胞，④表示早期胚胎培养，⑤表示胚胎移植。
【详解】A、①表示核移植技术，属于细胞工程的范畴，②表示基因表达载体的构建，属于基因工程，A错误；
B、③表示将目的基因（重组质粒）导入受体细胞（动物细胞），常用显微注射技术，但是注射前不需要用 Ca2+处理重组细胞（该方法为将目的基因导入微生物的方法），B错误；
C、④表示早期胚胎培养，在进行⑤胚胎移植前通常需要培养到桑椹（桑葚）胚或囊胚阶段，C错误；
D、⑤过程为胚胎移植技术，其优点是可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，D正确。
故选D。
二、多项选择题
15. 如图中X代表某一生物学概念，其内容包括①②③④四部分。下列与此概念图相关的描述错误的是（　　）

A. 若X是人体细胞干重中含量最多的4种元素，则①~④代表C、O、N，H
B. 若X表示植物细胞的结构，则①~④代表细胞壁、细胞膜、细胞器、细胞核
C. 若X为DNA中的四种含氨碱基，则①~④表示腺嘌呤、鸟嘌呤、尿嘧啶、胸腺嘧啶
D. 若X为叶绿体中提取出来的四种色素在滤纸条上由上到下的顺序，则①~④是分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b
【答案】BC
【解析】
【分析】在生物学上干重是指细胞除去全部自由水后的重量。DNA由脱氧核苷酸组成的大分子聚合物。脱氧核苷酸由碱基、脱氧核糖和磷酸构成。其中碱基有4种：腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T）和胞嘧啶（C）。
【详解】A、人体细胞干重中含量最多的是蛋白质（主要元素组成为C、O、N、H），因此人体细胞干重最多的4种元素是C、O、N、H，A正确；
B、若X表示植物细胞的结构，则①～④代表细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核，B错误；
C、DNA的四种含氮碱基为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶，C错误；
D、由于溶解度的差异，胡萝卜素的溶解度最大，在滤纸条上扩散最快，因此①~④是分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b，D正确。
故选BC。
16. 城市绿园生态农场的能量流动过程如图所示，其中A~M表示能量值（单位相同）、甲~丁表示生态系统的生物成分。在该生态系统中，某些以植物为食，能将植物食料转化为肉、蛋、乳、皮、毛和骨等产品的动物类群，称之为次级生产者。调查发现，该生态农场的主要害虫是烟粉虱，繁殖能力强，其成虫对黄色很敏感。下列叙述错误的是（ ）

A. 乙属于次级消费者，丁粪便中的能量被包含在I中
B. 食物链中，乙到丙的能量传递效率为（I＋J＋D）/（B＋L）×100%
C. E、F、J、K表示各营养级呼吸作用中以热能形式散失的能量
D. 设置黄色板诱杀烟粉虱成虫利用了行为信息
【答案】ABD
【解析】
【分析】1、能量传递效率＝本营养级从上一营养级获得的同化量（不含人工输入量）÷上一营养级的总同化量（含人工输入量）。
2、生物防治就是利用生物来防治病虫害。生物来防常用的方法有以菌治虫、以虫治虫和以鸟治虫等；它利用了生态系统中的信息传递的作用，降低有害动物的数量。 它的最大优点是不污染环境，是农药等非生物防治病虫害方法所不能比的。
【详解】A、异养生物都属于消费者，乙以甲生产者为食，故乙属于初级消费者；丁粪便中的能量不属于该营养级，是上一营养级（丙）同化量中流入分解者中能量的一部分，即属于I的一部分，A错误；
B、乙的总同化量为B＋L，丙通过食物链从乙获取的同化量为C，故乙到丙的能量传递效率为C/（B＋L）×l00%，（I＋J＋D）为丙的总同化量，B错误；
C、E、F、J、K表示各营养级在生长发育过程中通过呼吸作用以热能形式散失的能量，C正确；
D、利用烟粉虱成虫对黄色敏感，设置黄色板诱杀烟粉虱成虫属于生物防治，D错误。
故选ABD。
17. 以鲜山楂为主要原料酿制的山楂酒，将山楂的营养成分充分释放，更易被人体吸收，具有防治疾病的功效和较高的保健价值。如图所示是进行山楂酒发酵的装置。下列叙述正确的是（ ）

A. 制作山楂酒时，为减少杂菌污染，应将山楂清洗后切块
B. 扩大培养时，进气口要通入无菌空气使酵母菌大量繁殖
C. 发酵产酒时，搅拌可增加溶解氧和使培养液与酵母菌充分接触
D. 传统发酵制作山楂酒为纯种发酵且利用厌氧条件抑制杂菌污染
【答案】AB
【解析】
【分析】果酒的酒精发酵是指果汁中所含的己糖，在酵母菌的一系列酶的作用下，通过复杂的化学变化，最终产生乙醇和CO2的过程。
【详解】A、制作山楂酒时，若先切块再清洗，容易引起杂菌污染，A正确；
B、扩大培养时，进气口要通入无菌空气使酵母菌得以大量繁殖，为发酵阶段提供更多的菌种，B正确；
C、发酵产酒利用酵母菌无氧呼吸产生酒精的原理，不需要增加溶解氧，C错误；
D、传统发酵制作山楂酒为自然发酵，酵母菌为山楂自带的多种微生物，利用无氧条件抑制其他微生物的生长，保证酵母菌为优势菌，D错误。
故选AB。
18. 蛋白酶应用于洗涤剂、制革及丝绸工业。某研究小组利用蛋白质工程将该蛋白酶中第188位丙氨酸替换为脯氨酸、第239位谷氨酰胺替换为精氨酸、第262位缬氨酸替换为亮氨酸，结果发现该酶的催化活性大幅度提高。下列叙述正确的是（ ）
A. 对枯草杆菌蛋白酶进行改造通过直接改造蛋白酶的分子结构来实现
B. 通过基因工程和蛋白质工程生产的枯草杆菌蛋白酶的氨基酸序列相同
C. 改造后枯草杆菌蛋白酶可能使空间结构发生改变导致其催化活性提高
D. 对枯草杆菌蛋白酶进行分子设计必须从预期蛋白酶的功能特点入手
【答案】CD
【解析】
【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或者制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产生活需求。
【详解】A、对枯草杆菌蛋白酶进行改造通过基因来实现，A错误；
B、基因工程生产的蛋白质是自然界已有的蛋白质，而蛋白质工程能生产出自然界中不存在的新型蛋白质分子，两者的氨基酸序列不同，B错误；
C、该蛋白酶中第188位丙氨酸替换为脯氨酸、第239位谷氨酰胺替换为精氨酸、第262位缬氨酸替换为亮氨酸，结果发现该酶的催化活性大幅度提高，其原因可能是改变了蛋白酶的空间结构，提高了酶与底物的亲和力，C正确；
D、对蛋白质进行分子设计应从预期的蛋白质功能出发，对蛋白质的结构进行设计，D正确。
故选CD。
19. 北京冬奥会食堂餐余垃圾在垃圾集中点处理后可达到无污染的标准。为筛选对抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，研究人员制备餐余垃圾浸出液，进行如图所示操作，下列叙述正确的是（ ）

A. 餐余垃圾浸出液在接种前通常需要进行高压蒸汽灭菌处理
B. 可用稀释涂布平板法将餐余垃圾浸出液接种在X培养基上
C. X培养基含有淀粉和抗生素，Y培养基是不含琼脂的液体培养基
D. 图中降解淀粉最高效的微生物是⑤，可根据菌落特征初步判断微生物类型
【答案】BCD
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、餐余垃圾浸出液中含有目的菌，因此不能对其进行高压蒸汽灭菌处理，A错误；
B、根据培养后培养基上形成的菌落分布可知，将含目的菌的餐余垃圾浸出液接种在X培养基上采用的是稀释涂布平板法，B正确；
C、实验目的是筛选对抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，根据图示中在X培养基上滴加碘液后形成了透明圈，说明X培养基上含有淀粉，菌体分解淀粉的能力强，在其周围形成的透明圈就大，同时为了筛选到对抗生素有抗性的菌体，因此X培养基还应该含有抗生素，Y培养基是将筛选到的目的菌扩大培养，为不含琼脂的液体培养基，C正确；
D、碘液遇碘变蓝，淀粉被分解，蓝色消失，图中⑤的透明圈最大，说明菌体降解淀粉的能力最强，不同菌体形成的菌落特征不同，因此可根据菌落特征初步判断微生物类型，D正确。
故选BCD。
三、非选择题
20. 尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示。请分析回答。
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
1.4 g
2.1 g
0.2 g
10.0 g
1.0 g
15.0 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。

（1）此培养基不能用于植物组织培养，理由是营养成分不适宜，且缺少_________________。
（2）该培养基能筛选出高效降解尿素的细菌，是由于该培养基______________________，只有能分解尿素的细菌才能在该培养基上生长和繁殖。
（3）培养基中的葡萄糖的作用是为“目的菌”生长提供所需的__________和__________，实验需要振荡培养，是由于尿素分解菌是_________________型生物。
（4）图中将细菌转到固体培养基上时，可采用_________________________法在含尿素的培养基上接种，获得单菌落并进行计数。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若菌落周围出现红色环带，则可准确说明该菌种能够分解尿素。
（5）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是________（填序号）。
①培养细菌用的培养基与培养皿　②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管　③实验操作者的双手
（6）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________（填序号）。
①土样不同　②培养基污染　③操作失误　④没有设置对照
【答案】（1）缺少植物激素
（2）以尿素为唯一氮源
（3） ①. 碳源 ②. 能源 ③. 需氧
（4） ①. 稀释涂布平板 ②. 酚红
（5）①② （6）①②③
【解析】
【分析】1、微生物的培养基含有较多的有机物，培养基的主要营养物质包括碳源、氮源水和无机盐等。用于植物组织培养的MS培养基含有较多的大量元素和微量元素及植物激素。
2、选择培养基是在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。
3、灭菌的定义，用物理或化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌。消毒的定义，用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化。
【小问1详解】
进行植物组织培养培养基需要添加植物激素，由题表可知，该培养基的成分中没有植物激素，因此不能用于植物组织培养。
【小问2详解】
该实验的目的是筛选到能高效降解尿素的细菌，因此培养基中以尿素为唯一氮源，不能分解尿素的细菌将因缺少氮源无法生长繁殖，只有能分解尿素的细菌才能在该培养基上生长和繁殖。
【小问3详解】
葡萄糖中含有碳，且葡萄糖是能源物质，培养基中的葡萄糖的作用是为“目的菌”生长提供所需的碳源和能源；由于分解尿素的菌是需氧微生物，因此需要振荡培养。
【小问4详解】
图中将细菌转到固体培养基上时，常采用稀释涂布平板法进行接种，获得单菌落后并进行计数。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若菌落周围出现红色环带，则可准确说明该菌种能够分解尿素。
【小问5详解】
在实验中，①培养细菌用的培养基与培养皿、②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管需要灭菌，③实验操作者的双手需要消毒，故需要灭菌的是①②。
【小问6详解】
A同学与其他同学获得的菌落数差异很大，可能的原因是采用的土样不同，培养基灭菌不彻底，培养基被污染；或者是实验过程中操作失误，没有进行无菌操作，即①②③。
【点睛】本题考查了微生物培养技术的相关知识，考生要明确选择培养基的选择作用；识记培养基为微生物提供的营养成分，识记植物组织培养的培养基的成分；识记常用的接种方法和具体操作过程；特别注意灭菌和消毒的对象和区别。
21. 人类不断地在对生态系统进行研究，以解决目前存在的生态环境问题，请结合以下的两种生态系统，回答相关问题。
Ⅰ.2021年10月11日，联合国《生物多样性公约》缔约方大会在昆明召开，“生态文明：共建地球生命共同体”是此次大会的主题。生物多样性是人类赖以生存和发展的重要基础，保护生物多样性，其实就是保护生态环境和人类本事。结合下列实例，回答相关问题：
（1）袁隆平成功培育出高产杂交水稻的关键是发现了雄性不育植株，这是利用了生物多样性中的____________多样性，杂交水稻的成功培育体现了生物多样性的___________价值。
（2）栖息地遭到破坏是许多野生动物数量锐减的重要原因。栖息地丹顶鹤每年4-5月间迁至东北，秋季迁至江苏，该现象体现了群落的季节性。我国在江苏对丹顶鹤越冬栖息地进行了生态修复，属于对丹顶鹤进行______保护，通过改善栖息环境，提高其_________是保护丹顶鹤的根本措施。
（3）我国塞罕坝林场的建设者结合当地半湿润半干旱的特点，通过引入适合该地区的华北落叶松、樟子松和云杉等主要树种，提高了造林的成功率，使塞罕坝林场由高原荒丘变成万顷林海。该过程提高了生态系统的___________能力，其基础是______________；该过程主要遵循了生态工程的自生和____________原理；该过程经历了群落的_________演替，说明了人类活动可以使群落演替按照不同于自然演替的__________________进行。
Ⅱ.某研究小组开展了对某湖泊污染问题的研究，他们首先选取了该湖泊中5种不同的生物A、B、C、D、E，并对其进行消化道内食物组成的分析；然后又请当地湖泊研究所的专家对这5种生物体内2种污染物的含量进行了测定，如下表所示。分析回答：
生物种类
消化道内生物组成
千克重鱼污染物含量/mg
汞
某种杀虫剂
A
鱼（甲）
鱼（乙）
78
96
B
河蚌
水蚤、小球藻
25
57
C
小球藻
/
3
5
D
鱼（乙）
水蚤
10
31
E
水蚤
小球藻
5
15

（4）生态系统的功能包括_______________________________________________。
（5）表中生物可能形成的食物链（网)为_______________（请用字母和箭头表示)。
（6）若C中的能量不变，将B的食物比例由C∶E＝1∶1调整为2∶1，能量传递效率按10%计算，该生态系统传递给B的能量是原来的________倍（用分数表示）。
【答案】（1） ①. 基因 ②. 直接
（2） ①. 就地 ②. 环境容纳量
（3） ①. 自我调节 ②. 负反馈调节 ③. 协调 ④. 次生 ⑤. 速度和方向
（4）物质循环、能量流动、信息传递
（5） （6）11/8
【解析】
【分析】生物的多样性包括基因多样性、物种多样性和生态系统多样性。生物多样性的保护包括就地保护和易地保护。群落的演替包括初生演替和次生演替。
【小问1详解】
生物多样性包括基因多样性、物种多样性和生态系统多样性，袁隆平发现的雄性不育株体现了基因的多样性；直接价值是指对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的价值，杂交水稻的成功体现了生物多样性的直接价值（用于科学研究）。
【小问2详解】
在越冬地进行的生态修复，属于就地保护，可以改善其生存环境，提高环境容纳量，就地保护是保护丹顶鹤的根本措施。
【小问3详解】
使塞罕坝林场由高原荒丘变成万顷林海的过程中，提高了生态系统的自我调节能力，生态系统自我调节能力的基础是负反馈调节；该过程中结合当地半湿润半干旱的特点，引入适合该地区的树种，主要遵循了生态工程的协调与自生原理；由于演替过程中具有土壤和一定的植被条件，故该过程属于次生演替；该演替使塞罕坝林场由高原荒丘变成万顷林海，说明了人类活动可以改变群落演替的速度和方向，即人类活动可以使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向进行。
小问4详解】
生态系统的功能包括物质循环、能量流动、信息传递。
【小问5详解】
据表中的统计结果可知，小球藻是生产者，再根据消化道中的食物组成确定消费者的类型判断，小球藻被水蚤和河蚌所捕食，而水蚤又是鱼（乙）和河蚌的食物，鱼（乙）又被鱼（甲）所捕食，由此可确定食物链： 。
【小问6详解】
设B的食物比例由C：E=1：1时，B获得的能量是x，B的食物比例由C：E=2：1时，B获得的能量是y，则消耗的生产者的量是：1/2x÷10%+1/2x÷10%÷10%=55x，2/3y÷10%+1/3y÷10%÷10%=40y，y/x=11/8，故该生态系统传递给B的能量是原来的11/8倍。
22. 据国际糖尿病联盟最新数据，2021年全球约5.37亿成人患有糖尿病，670万成人因糖尿病或其并发症死亡。下图是研究人员提出的治疗方案，请回答下列问题：

（1）从患者体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为___________，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为___________。
（2）一般来说，动物细胞培养需要的条件有__________________________（至少答出两点），培养过程中我们还需要定期更换培养液，目的是_________________(答出1点即可）。
（3）利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是___________________________________。目前临床用的胰岛素生效较慢，科学家将胰岛素β链的第28和29个氨基酸调换顺序，成功获得了速效胰岛素。生产速效胰岛素，需要对___________进行定向改造。
A.胰岛素   B.胰岛素mRNA     C.胰岛素基因   D.胰岛
（4）欲检测胰岛类似细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能，可设计如下实验：将等量的胰岛类似细胞与正常胰岛B细胞分别加入两组相等浓度的___________培养液中，并在相同且适宜的条件下进行培养，一段时间后分别检测两组培养液中___________________________。
（5）该治疗糖尿病方法与异体移植相比，突出的优点是___________________。
【答案】（1） ①. 原代培养 ②. 接触抑制
（2） ①. 无菌、无毒环境；营养；温度、pH；气体环境 ②. 清除代谢产物，防止代谢产物积累，对细胞自身造成危害(为细胞提供充足的营养)
（3） ①. 要有一段已知正常胰岛素基因的脱氧核苷酸序列 ②. C
（4） ①. 葡萄糖 ②. 胰岛素的分泌量（胰岛素的浓度或胰岛素的含量）
（5）不发生免疫排斥反应
【解析】
【分析】分析题图：①是患者体内的体细胞，从患者体内的体细胞分离得到的细胞核和去核卵母细胞进行融合，形成重组细胞A，培养到囊胚时，提取内细胞团细胞与正常胰岛素基因融合形成重组细胞B，加入分化诱导因子，定向诱导形成胰岛类似细胞，检测出能分泌胰岛素的细胞输入患者体内。过程图中涉及到的现代生物技术有基因工程、核移植技术、动物细胞培养、早期胚胎培养等技术。
【小问1详解】
动物体细胞初次培养称为原代培养，靠在内壁时停止分裂的现象称为接触抑制。
【小问2详解】
动物细胞培养需要的条件为：无菌、无毒的环境；营养物质；合适的温度和pH、气体环境(95%的空气+5%CO2的混合气体)。为了清除代谢产物，防止代谢产物积累，对细胞自身造成危害(为细胞提供充足的营养)，培养过程中我们还需要定期更换培养液。
【小问3详解】
PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，因此利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是要有一段已知正常胰岛素基因的脱氧核苷酸序列。科学家将胰岛素β链的第28和29个氨基酸调换顺序，成功获得了速效胰岛素，因此要生产速效胰岛素，可采用蛋白质工程技术，这就需要对胰岛素基因进行定向改造，C正确。
故选C。
【小问4详解】
由题可知，实验的自变量为细胞种类（胰岛类似细胞、胰岛B细胞），结合胰岛B细胞的生理功能是分泌胰岛素，可知因变量为胰岛素的分泌量（胰岛素的浓度或胰岛素的含量），故可设计如下实验：将等量的胰岛类似细胞与正常胰岛B细胞分别加入两组相等浓度的葡萄糖培养液中，适宜且相同条件下进行培养，一段时间后分别检测两组培养液中胰岛素的分泌量（胰岛素的浓度或胰岛素的含量）。
【小问5详解】
因为该治疗糖尿病的方法利用的是患者自身的细胞，该方法与异体移植相比，突出的优点是不发生免疫排斥反应。
23. 两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。请回答下列问题：

（1）过程①需要用___________________去除细胞壁，③要用到方法有物理法如______________和化学法如PEG诱导法两大类.
（2）过程②紫外线的作用是_________________________________。
（3）原生质体不能在低渗培养液中培养，原因是_________________________，原生质体融合成功的标志是______________________。
（4）杂种细胞通过过程④培养得到杂种植株要借助________________技术，该技术的原理是___________________。
（5）④技术有许多现实应用，例如可进行植物的快速繁殖、制作人工种子等，如果在这个过程中想获得次生代谢产物，需培养至____________阶段，原因是___________________。
（6）现采用特异性引物对普通小麦和中间偃麦草的基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，用于过程④培养的杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1-4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1-4中一定是杂种植株的有____________，判断依据是__________________________。若要筛选得到耐盐的小麦，需要将杂种植株种植在是____________的土壤中。

【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 离心法、电融合法
（2）使中间偃麦草的染色体断裂
（3） ①. 维持原生质体正常的形态和结构（或避免原生质体吸水胀破） ②. 杂种细胞再生细胞壁
（4） ①. 植物组织培养 ②. 植物细胞的全能性
（5） ①. 愈伤组织 ②. 愈伤组织细胞分裂快，代谢旺盛
（6） ①. 1、2、4 ②. 它们同时具有普通小麦和中间偃麦草的DNA片段 ③. 高盐
【解析】
【分析】分析题图：①表示去壁过程，常用酶解法；②表示用紫外线照射使中间偃麦草的染色体断裂；③表示人工诱导原生质体间的融合，形成杂种细胞；④表示植物组织培养；⑤表示筛选出耐盐小麦。
【小问1详解】
过程①表示去植物细胞壁过程，常用酶解法，根据酶的专一性，用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁；③是人工诱导原生质体间的融合，要用到方法有物理方法如离心、振动、电激和化学方法如聚乙二醇两大类；
【小问2详解】
根据题意分析可知，过程②紫外线的作用是使中间偃麦草的染色体断裂，形成的染色体片段可以整合到普通小麦细胞的染色体上，而留存在杂种细胞中。
【小问3详解】
原生质体不能在低渗培养液中培养，原因是防止原生质体因失去细胞壁的保护而吸水涨破，以维持原生质体正常的形态和结构；植物细胞原生质体融合成功的标志是杂种细胞形成新的细胞壁。
【小问4详解】
杂种细胞通过植物组织培养技术可培养得到杂种植株；植物组织培养技术体现的原理是植物体细胞具有全能性。
【小问5详解】
如果在这个过程中想获得次生代谢产物，需培养至愈伤组织阶段，因为愈伤组织细胞分裂快，代谢旺盛；
【小问6详解】
根据题意，杂种植株应同时具有普通小麦和中间偃麦草的DNA片段，根据图谱，普通小麦含有碱基对为300 和600 的DNA 片段，中间偃麦草含有碱基对为1000、1300 和1500 的片段；再生植株3，只含有长度为300 和600 的片段，与普通小麦一致；1、2、4 既含有普通小麦DNA 片段，又含有中间偃麦草DNA 片段，为杂种植株；需要用高盐培养条件筛选杂种植株，将杂种植株种植在高盐的土壤中能正常生长的即为耐盐的杂种植株。
【点睛】本题结合植物体细胞杂交、植物组织培养过程图解，考查植物体细胞杂交、生物变异等知识，要求考生分析图中各过程的名称，提取题干信息，再结合所学的知识准确答题。
24. 人乳铁蛋白(hLF)对细菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人员开展人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体构建及转染研究，主要流程如下图。图中Ase I、Nhe I、Sal I、BamH I代表相关限制酶切点，neor为新霉素抗性基因，BLG基因为B乳球蛋白基因，GFP基因为绿色荧光蛋白基因。请回答下列问题。

（1）过程①中，不能从人肌肉细胞中提取RNA用于RT－PCR，是因为_______________________。荧光RT﹣PCR技术所用的试剂盒中通常都应该含有________、Taq酶、荧光标记的核酸探针、引物、dNTP、缓冲体系。
（2）在RT—PCR过程中，加入的引物需在________端添加_____________两种限制酶的识别序列，便于hLF基因插入pEB中。利用 RT－PCR 技术获取的目的基因________(填“能”或“不能”)在物种之间交流；该技术还可用于对某些微量 RNA 病毒的检测，可提高检测的灵敏度，原因是_____________________________。若利用PCR技术扩增某基因片段时消耗了126个引物分子，则该过程扩增了________次。
（3）过程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是__________________________________；该过程中，两个基因共用的调控元件是BLG基因的__________。
（4）PEBL质粒导入受体细胞的方法是________，依据的主要原理是______________________。
（5）将转染后的山羊乳腺上皮细胞先置于含新霉素的培养液中培养，再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞中________，以筛选出转染成功的细胞。该过程________(填“能”或“不能”)区分普通质粒或重组质粒，接下来还可采用________技术检验基因是否成功转录。
【答案】（1） ①. hLF基因在人肌肉细胞中不转录(表达) ②. 逆反转录酶##反转录酶
（2） ①. 5' ②. SalⅠ和BamHⅠ ③. 能 ④. 增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量(或浓度)，便于检测 ⑤. 6##六
（3） ①. 使人乳铁蛋白基因在山羊的乳腺细胞中表达(或使目的基因表达) ②. 启动子
（4） ①. 脂质体介导 ②. 生物膜具有一定的流动性
（5） ①. 是否有绿色荧光 ②. 不能 ③. 分子杂交
【解析】
【分析】分题题图：图中①是利用逆转录法结合PCR技术获取目的基因的过程，②是基因表达载体的构建，③是用脂质体将目的基因导入受体细胞。
【小问1详解】
由于人肌肉细胞中没有人乳铁蛋白相应的mRNA（即hLF基因在人肌肉细胞中不转录或表达），因此①过程中不能从人肌肉细胞中提取RNA用于RT-PCR。由于荧光RT﹣PCR技术首先需要逆转录过程合成DNA，而后进行扩增，因此该技术所用的试剂盒中通常都应该含有逆（反）转录酶、Taq酶、荧光标记的核酸探针、引物、dNTP、缓冲体系。
【小问2详解】
结合质粒中的限制酶位点可知，Ase I、Nhe I分别会破坏BLG基因、GFP基因，且DNA模板被转录方向是从3′端向5′端，因此在扩增目的基因时，需要在RT—PCR过程中，在加入的引物的5′端添加SalⅠ和BamHⅠ两种限制酶的识别序列，便于hLF基因插入pEB中。利用 RT－PCR 技术获取的目的基因无内含子和非编码区，能在物种之间交流。通过该技术增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量（或浓度），可提高检测的灵敏度，便于检测，因此该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测。若扩增过程中消耗引物分子126个，说明通过DNA复制产生(126+2) ÷2=64个DNA分子，26=64，因此DNA扩增了6次。
【小问3详解】
过程②中，BLG基因在复制原点之后终止子之前，因此 ，为了使人乳铁蛋白基因在山羊的乳腺细胞中表达（或使目的基因表达），需要将hLF基因插入到BLG基因之后。这样可使两个基因（BLG基因和人乳铁蛋白基因）共用同一个调控元件，即BLG基因的启动子。
【小问4详解】
利用生物膜的流动性使脂质体与山羊乳腺上皮细胞融合，可以将重组质粒导入受体细胞，即利用脂质体介导法将PEBL质粒导入受体细胞的原理是生物膜具有一定的流动性。
【小问5详解】
PEBL质粒上有新霉素抗性基因，即neor，可使导入重组质粒的细胞在含新霉素的培养基中生存，将转染后的山羊乳腺上皮细胞先置于含新霉素的培养液中培养，能够存活的细胞应该是导入PEBL质粒（或普通质粒）的细胞；PEBL质粒上有GFP基因（绿色荧光蛋白基因），可使细胞产生绿色荧光，故再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞中是否有绿色荧光，以筛选出转染成功的细胞。结合图示可知，普通质粒上也有新霉素抗性基因和绿色荧光蛋白基因，因此用上述方法不能区分成功导入的是普通质粒还是重组质粒。检验基因是否成功转录的技术是分子杂交技术。