2023届河北省衡水中学、泰华中学高三 决胜新高考 生物密卷（18）（word版）

2023届河北省衡水中学、泰华中学高三 决胜新高考

生物密卷（18）

一、单选题(共30分)

 1．据《周礼》记载酸菜又称为“范”，汉代刘熙《释名·释饮食》解释道：“落，阻也，生酿之，遂使阻于寒温之间，不得烂也。”这就是我国古代劳动人民发明的保藏蔬菜使其不坏的一种方法—腌藏法。下列叙述错误的是（       ）

A．“生酿之”指的是将新鲜的蔬菜和合适的材料，制作成酸菜

B．“遂使阻于寒温之间”保持适宜温度，有利于微生物的发酵

C．食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成某些细菌大量繁殖

D．发酵过程中适量氧气和产酸的环境，有助于酸菜“不得烂也”

2．微生物纯培养过程中需要配制固体培养基。下列叙述正确的是（　　）

A．配制固体培养基都需要添加琼脂

B．稀释涂布平板法是在固体培养基中加入无菌水稀释，再用涂布器刮涂均匀

C．可以利用固体培养基上的菌落特征来初步判断和鉴别细菌的类型

D．如果固体培养基上单菌落太多，则未达到菌种纯化的目的

3．2020年，安徽某候鸟监测站检出一只死亡天鹅，其带有的H5N8基因序列与几年前埃及和俄罗斯发现的毒株基因相似性很高。下列叙述正确的是（　　）

A．在候鸟迁徙过程中，沿线的居民都已经感染过此病毒

B．该病毒的遗传物质是单链，PCR时只需要设计一个引物

C．病毒出现变异会扩大其基因库，这是定向突变的结果

D．该病毒基因出现了基因序列差异，这很可能是一种可遗传变异

4．关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（       ）

A．过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解

B．离心研磨液是为了加速DNA的沉淀

C．在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色

D．粗提取的DNA中可能含有蛋白质

5．棉花全株含有对动物生长繁殖存在潜在危害的有毒物质-棉酚，限制了以棉花秸秆为原料来生产青贮饲料。研究人员试图以棉花田的土壤为分离基质，筛选出高效分解棉酚的菌株。下列相关叙述错误的是（       ）

A．棉酚分解菌可利用培养基中的棉酚是因为能合成相应的酶

B．筛选过程中所用的培养基应该以棉酚为唯一的营养物质

C．稀释涂布平板法或平板划线法均可用来分离纯化棉酚分解菌

D．实验过程中除做好消毒、灭菌工作外，还要避免环境中微生物污染

6．下列化学试剂在相关操作中具有相同作用的是（       ）

A．酒精在“新冠病毒预防”和“检测生物组织中的脂肪”中的作用

B．盐酸在“低温诱导植物染色体数目变化”和“生物体维持pH稳定的机制”中的作用

C．CuSO4在“检测生物组织中的还原糖”和“检测生物组织中的蛋白质"中的作用

D．蒸馏水在“提取纯净的动物细胞膜”和“利用鸡血细胞粗提取DNA”中对动物细胞处理时的作用

7．洗涤剂中的碱性蛋白酶受到其他成分的影响而改变构象，部分解折叠后可被正常碱性蛋白酶特异性识别并降解（自溶）失活。此外，加热也能使碱性蛋白酶失活，如图所示。下列叙述错误的是（　　）

A．碱性蛋白酶在一定条件下可发生自溶失活

B．加热导致碱性蛋白酶构象改变是不可逆的

C．添加酶稳定剂可提高加碱性蛋白酶洗涤剂的去污效果

D．添加碱性蛋白酶可降低洗涤剂使用量，减少环境污染

8．菜籽粕含有35%～45%蛋白质，是畜禽饲料的重要原料，但其中的单宁等限制了菜籽粕的应用。研究者将不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的固体培养基中发酵48 h，测定菜籽粕中单宁的含量，结果如下图。

下列相关叙述错误的是（       ）

A．菜籽粕与麸皮可为微生物提供碳源和氮源

B．避免发酵过程受到杂菌污染，培养基添加适量抗生素

C．黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想

D．对照组应为不接种微生物的固体培养基

9．金黄色葡萄球菌具有对磺胺类药物敏感性低，对青霉素、红霉素等敏感度高和高度耐盐化等特性。菌株可在血琼脂平板（完全培养基中添加适量血液）上生长，并能产生溶血毒素（可使红细胞完全溶解）、血浆凝固酶（可使血液中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固）等物质。研究发现，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的mecA基因可编码新的青霉素结合蛋白2a（PBP2a），该蛋白对青霉素类抗菌药物亲和力低，继而对青霉素产生了一定的抗药性。下列说法正确的是（       ）

A．在金黄色葡萄球菌的分离培养过程中，须在选择培养基中加入10%-15%的NaCl、青霉素

B．培养在血琼脂平板上的金黄色葡萄球菌菌落周围会出现红色的溶血圈

C．当金黄色葡萄球菌侵入人体后，其产生的血浆凝固酶会促进吞噬细胞的吞噬作用

D．可利用DNA分子杂交技术或PCR技术检测mecA基因，从而检测筛选出MRSA

10．大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中。利用上述原理可初步获得质粒DNA。下列关于质粒的粗提取和鉴定的分析正确的是（       ）

A．提取DNA时可加入酒精，使不溶于酒精的蛋白质等物质析出

B．将提取的DNA溶于0.14mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂在沸水条件进行鉴定

C．用限制酶Ⅰ和Ⅱ分别处理提取的产物，电泳出现如图结果，说明未提取到质粒

D．溶菌酶能溶解大肠杆菌细胞壁，洗涤剂能瓦解其细胞膜，但对DNA没有影响

11．如图是研究人员从土壤中筛选高效分解石油的细菌的过程示意图，有关叙述错误的是（       ）

A．在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌

B．步骤③的培养基是在牛肉膏蛋白胨培养基的基础上加入石油配制而成

C．步骤③纯化分解石油细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞分裂形成的菌落

D．若要验证②培养基有选择作用，可在牛肉膏蛋白胨培养基中加入2ml①中上清液作为对照

12．脱氧核苷三磷酸（dNTP）和双脱氧核苷三磷酸（ddNTP，ddN-Pα～Pβ～Pγ）的结构均与核苷三磷酸（NTP）类似，仅是所含五碳糖的羟基（-OH）数目不同。在DNA复制时，ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，从而终止DNA片段延伸。现有一些序列为5＇-GACTATGATCGTA-3＇的DNA分子单链片段，将其作为模板与引物、底物、Taq DNA聚合酶、Mg2﹢及缓冲溶液加入反应管中，底物中仅有一种被32P标记。通过PCR获得被32P标记且3＇端为碱基A的不同长度子链DNA．下列叙述错误的是（       ）

A．dNTP做PCR的原料时也可为DNA复制提供能量

B．反应底物是dCTP、dGTP、dTTP和α位32P标记的ddATP

C．ddNTP与dNTP竞争的延长位点是脱氧核苷酸链的3＇末端

D．实验结束后最多可得到4种被32P标记的子链DNA

13．为研究植物提取物W的抑菌效果，某同学在平板中央打孔并加入W，在适宜条件下培养一段时间后，测量抑菌圈大小并计算抑菌圈平均增幅速率，绘制曲线如图所示。下列叙述错误的是（       ）

A．将一定量菌液与灭菌培养基混匀后，再冷却倒平板可得到实验菌平板

B．金属打孔器在打孔前需要进行灼烧灭菌，目的是防止微生物污染平板

C．提取物W在图中24h时扩散速率最快，可获得最佳的实验抑菌效果

D．提取物W浓度、加入量和扩散时间，以及菌体浓度均会影响抑菌圈直径大小

14．通过引物设计，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变，如图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。有关叙述正确的是（       ）

A．限制酶a和限制酶b的识别位点分别加在引物1和引物2的3’端

B．PCR反应体系中需要加入脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、Ca2+等

C．第2轮PCR中，引物1与图中②结合并形成两条链等长的突变基因

D．在第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4

15．啤酒是以麦芽汁为原料，经酿酒酵母发酵制得。传统啤酒酿造过程中，发酵在敞开式发酵池中进行，麦芽汁中接入酵母后通入大量无菌空气，之后会产生大量气体翻腾逸出，在麦芽汁表面形成25～30cm厚的气泡层（泡盖），然后停止通气，进入静止发酵阶段。一段时间后可得啤酒。下列说法正确的是（       ）

A．酿酒的原理是酵母菌可以将淀粉转化为酒精和CO2

B．用脱落酸溶液浸泡大麦种子可以有效促进α-淀粉酶合成，增加麦芽汁中可发酵糖的含量

C．泡盖的形成是由于酵母菌有氧呼吸产生CO2，能将麦芽汁与空气隔绝

D．现代发酵工程选育出性状优良的菌种后，即可进行发酵罐内的发酵

16．某兴趣小组为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，将每道菜分为3盘，一盘取样冷藏，一盘使用公筷，一盘不用公筷，实验过程如下图。下列相关操作或叙述正确的是（       ）

A．配制培养基X并在121℃、100kPa条件下处理15~30min

B．固体培养基X对菜品中的细菌有选择性

C．在固体培养基X上可用平板划线法或涂布法接种细菌

D．根据菌落的特征可以准确判断细菌的种类

17．老五甑（蒸馏酒用的锅>酿造法主要特点是混蒸混烧、续渣配料、多轮次发酵蒸酒。将发酵后的四甑酒醅分层出窖，按一定比例加入新粮，分成五甑后依次蒸酒。蒸酒后－甑糟丢弃，另四甑料重新放回窖池发酵。槽醅配料时雷润料、拌匀并堆积；蒸酒出甑后的粮糟需加水、摊凉、撒曲；粮糟入窖后需踩窖，以压紧发酵材料并封窖；窖泥是已酸菌、甲烷菌、丁酸菌的载体，主要位于窖池底部和四壁，是生产浓香型白酒的基础。下列叙述错误的是（       ）

A．该工艺可以提高酒粮的利用率和出酒率，增加呈香物质在酒醅中的积累

B．窖泥的作用主要是提供酿酒微生物和以淀粉酶、蛋白酶为主的各种糖化酶类

C．摊凉可防止酵母等微生物死亡，踩窖可抑制好气性细菌繁殖

D．可采用抽样检测法对窖池底部和四壁的窖泥微生物进行计数

18．我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了”下列有关叙述错误的是（       ）

A．“米过酒甜”是因为米中有糖类物质未被完全消耗

B．“酒冷沸止”说明酵母菌的代谢产热和释放CO2逐渐停止

C．酿制米酒的过程中会发现发酵的器皿发热

D．“曲势尽”的原因可能是米酒中pH或酒精含量升高

19．酵母的蛋白含量高，可用作饲料蛋白，且有些酵母能利用工业废甲醇作为碳源进行繁殖，既可减少污染，又可降低成本。研究人员拟从土壤中分离该类酵母并大量培养，操作流程如下图。下列相关叙述正确的是（       ）

（注：25× 16型血细胞计数板，表示计数室中有25个中格，每个中格又分成16个小格。）

A．取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约70℃的培养基倒入培养皿混匀

B．只有③过程中使用的培养基需以甲醇作为唯一的碳源

C．⑤过程扩大培养时需要保证充足的营养并营造无氧环境

D．将发酵液稀释1000倍后，用25×16（1mm×1mm×0.1mm）血细胞计数板计数5个中格中的细胞数为60个，则发酵液中每毫升有3×109个细胞

20．2022年3.15晚会节目播出了土坑腌制“老坛酸菜事件，再次引起人们对食品卫生安全的高度关注。某同学尝试自己制作酸菜，制作时向酸菜坛中加入了一些“陈酸菜水”，用质量百分比为5%的食盐水进行腌制。并在不同的腌制时间测定了酸菜中亚硝酸盐的含量。下列说法错误的是（       ）

A．加入白酒的目的是抑制杂菌生长和增加醇香，不能加快发酵进行

B．不同的腌制时间，酸菜中亚硝酸盐的含量可能相同

C．灭菌的食盐水和低pH在腌制过程中可以起保藏作用

D．泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是为了解乳酸菌的生长状况

二、简答题

21．铁皮石斛是名贵的中药材，由于人工的长期过度采收，种质资源急剧减少。近年来，SSR分子标记技术被广泛应用于动植物的生物多样性和保护生物学方面的研究。SSR（简单序列重复），也称微卫星DNA，是近年来发展起来的建立在PCR基础上的分子标记技术，它是由2-5个核苷酸组成的简单重复序列。在生物的基因组中，含有大量的SSR。科研人员采用了磁珠富集法高效率地进行了铁皮石斛SSR标记的开发。请回答下列问题：

获取铁皮石斛的基因组DNA。

(1)加______进行酶切，获得铁皮石斛的基因片段。然后向其中加入T4连接酶、接头。接头的作用是为PCR引物设计提供模板。

(2)酶切产物检测、切胶回收以及PCR扩增

用______方法对连接产物进行检测，在紫外灯下进行观察，选取条带在300-900bp的范围内进行切胶，所切的条带用胶回收试剂盒进行纯化，纯化之后进行PCR扩增。所得到的PCR扩增产物再用PCR产物纯化试剂盒进行纯化。

(3)探针杂交

在杂交缓冲液中，用探针1（8次AC重复），探针2（15次AC重复）和纯化连接产物进行杂交。杂交的程序是95℃7min，70℃1h，52℃1h，探针杂交的同时清洗磁珠。和探针1杂交的序列中含有SSR的序列是：______。

磁珠富集微卫星以及富集产物的扩增和检测

(4)微卫星片段的克隆、菌落PCR检测及测序

用大肠杆菌制备感受态细胞，需要使用______对菌种进行处理。涂布器通常用______法灭菌。

(5)科学家将人的8次AC重复的DNA片段与pBR322质粒进行重组。pBR322质粒含氨苄青霉素抗性基因（Ampr）和四环素抗性基因（Tetr），含5个限制酶切点（PstI，EcoRI，HindⅢ，BamHI和SalI），如图1所示。重组质粒形成与否需要鉴定和筛选，方法是将重组DNA分子导入大肠杆菌并在含抗生素的培养基上培养，观察大肠杆菌的生长、繁殖情况以进行判断，如图2所示。

若受体菌在A培养基中不能形成菌落，在B培养基中能形成菌落。则使用的限制酶可能是______，即目的基因插入了______基因中。

(6)除抗药性筛选法外，显色筛选也是常用的方法。很多大肠杆菌的质粒上含有lacZ，标记基因（图3中甲），其表达的酶蛋白可将一种无色的化合物（X-gal）水解成蓝色产物。若重组DNA技术常用的大肠杆菌质粒pUC18同时携带Ampr和lacZ两个标记基因，据图3分析，若想筛选出重组质粒，配制的固体培养基的成分中，除营养物质和琼脂外，还需含有______，经转化、扩增、涂布，图3乙中含重组质粒的是______（白色/蓝色）菌落。

(7)用通用引物对挑取的菌落进行PCR扩增。菌落PCR直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增，与传统PCR相比省事时省力，其原因是______。

22．木质林产品（HWP）是指从森林中采伐的，用于生产诸如家具等的木质材料，是缓解温室效应的重要碳库。请分析并回答下列问题：

(4)图2为森林及HWP的碳储或碳排放随时间变化关系示意图。

①某些HWP可以替代部分非木质材料，从而减少这些材料在加工及使用过程中的能源消耗及CO2的排放。这种替代减排效应与HWP的使用时间呈______（填“正”或“负”）相关的关系。

②研究发现，自t时刻砍伐森林至HWP形成，大气中的CO2量出现不降反升现象。造成这种现象的原因可能有______。

A．森林砍伐剩余物的腐烂会导致碳的释放量增加       B．演替而来的次生林碳汇效应低于砍伐前的森林

C．木材的运输和加工等过程需要化石燃料的供能       D．HWP中的细胞能进行呼吸作用产生二氧化碳

③从图2中可看出，上述现象完全消除的时刻为______。

23．我国是全球第一柑橘种植和消费国，然而白地霉侵染引起的酸腐病在贮运过程中导致柑橘腐烂，造成损失。研究者对酸腐病进行系列研究。

(1)白地霉从柑橘果实伤口处获得其生长繁殖所必需的_____、水以及微量元素等营养物质，二者之间的种间关系是_____。

(2)将桔梅奇酵母与白地霉菌种用_____法分别接种到不同的平板上进行培养，再用无菌水分别制备菌种悬液，利用_____在显微镜下计数，并稀释至实验所需浓度。

(3)探究桔梅奇酵母对酸腐病的生物防治作用。

①在柑橘果实中部等距离刺两个孔，其中一孔接种白地霉和桔梅奇酵母菌悬液。一段时间后统计果实发病率并测量白地霉菌丝生长情况如下图：

另一个孔作为对照组的处理是_____。

综合图1、图2结果，推测_____。

②铁是真菌生长的必需元素，是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究者配制含有不同浓度FeCl3（单位：mg/L）的培养基，实验处理及结果如下图3所示。

桔梅奇酵母菌落周围出现红色抑菌圈的原因是_____；随培养基中FeCl3浓度的增加，红色抑菌圈颜色加深但变窄的原因是_____。

③研究者利用普切明酸合成基因敲除的酵母突变体，参照②的方法进行实验，观察到_____，从而证明普切明酸的产生是桔梅奇酵母具有生物防治效力的重要原因。

(4)基于上述研究，你是否支持桔梅奇酵母推广应用于柑橘防腐保鲜，并说明理由。_____

24．测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基（EMB培养基）上培养→统计菌落数目。据图回答问题：

(1)过滤待测水样用到的滤杯、滤膜和滤瓶首先需要进行消毒灭菌处理，保证实验不受其它微生物干扰。与过滤有关的操作都要在___________________旁进行。

(2)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的_______________操作。从物理状态角度分析，EMB培养基属于_______________培养基，制备培养基时需要采用_______________法灭菌。

(3)某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将10ml待测水样加入到90ml无菌水中，稀释后的100ml菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为___________________个。

(4)该同学进一步思考，利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，从中检测到两种微生物，它们在结构上的主要区别是___________________。另一份来自某公园的观赏湖，若要通过测量蓝细菌的数目来研究水华，培养基配方中则必需添加___________________（水、无机盐、碳源、氮源）。

25．黄酒源于中国，与啤酒、葡萄酒并称世界三大发酵酒。发酵酒的酿造过程中除了产生乙醇外，也产生不利于人体健康的氨基甲酸乙酯（EC）。EC主要由尿素与乙醇反应形成，各国对酒中的EC含量有严格的限量标准。回答下列问题:

(1)某黄酒酿制工艺流程如图所示，图中加入的菌种a是_______，工艺b是_______（填“消毒”或“灭菌”），采用工艺b的目的是____________________。

(2)以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂，根据颜色变化，可以初步鉴定分解尿素的细菌。尿素分解菌产生的脲酶可用于降解黄酒中的尿素，脲酶固定化后稳定性和利用效率提高，固定化方法有_________________________（答出两种即可）。

(3)研究人员利用脲酶基因构建基因工程菌L，在不同条件下分批发酵生产脲酶，结果如图所示。推测________是决定工程菌L高脲酶活力的关键因素，理由是__________________。

(4)某公司开发了一种新的黄酒产品，发现EC含量超标。简要写出利用微生物降低该黄酒中EC含量的思路_____________________________。

参考答案

一、单选每题2.5分共50分

1．DCDBB    5-10DBBDD    11-15BBADC    16-20ABDDD

二、简答题共50分

21．(1)限制性内切酶/内切酶

(2)聚丙烯酰胺凝胶电泳/电泳

(3) TGTGTGTGTGTGTGTG

(4)     Ca2+     灼烧灭菌

(5)     PstⅠ     氨苄青霉素抗性

(6)     氨苄青霉素和无色的化合物X-gal     白色

(7)不需要从细胞中提取目的基因或人工合成目的基因

22． (1)     正     ABC     t1

23．(1)     无机盐     寄生

(2)     平板划线法（或稀释涂布平板法）     稀释涂布平板法

(3)     白地霉和等量的蒸馏水     梅奇酵母可以抑制果实发病率和菌丝生长     普切明酸与Fe3+形成红色复合物，菌落分泌的酶将普切明酸降解后，复合物消失     普切明酸与Fe3+的结合增强，红色加深；相关酶的分解能力增强，红色变窄     无红色复合物产生

(4)支持；梅奇酵母既可以抑制菌丝的生长，也能抑制真菌生长酶的合成，故桔梅奇酵母可推广应用于柑橘防腐保鲜

24．(1)酒精灯火焰

(2)     接种     固体     高压蒸汽灭菌

(3)3100

(4)     有无核膜为界限的（成形的）细胞核     水、无机盐、氮源

25．(1)     酵母菌     灭菌

     杀死黄酒中全部的微生物及芽孢、孢子，防止成品酒变酸或腐败变质

(2)     酚红     化学结合法、包埋法、物理吸附法

(3)     pH      两图中脲酶活力随时间变化的曲线基本一致，而维持pH在6.5不变与pH从6.5降为4.5相比较而言，酶活力值始终要高

(4)方案一：配置一种选择培养基，筛选出产生EC降解酶的细菌，从细菌中分离得到EC降解酶，纯化的EC降解酶进行固定化操作后，加入该黄酒中。

方案二：配置一种选择培养基，筛选出产生脲酶的细菌，从细菌中分离得到脲酶，纯化的脲酶进行固定化操作后，在黄酒工艺流程的发酵环节中加入。