2021-2022学年黑龙江省双鸭山市第一中学高二下学期6月月考生物试题Word版含答案

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 黑龙江省双鸭山市一中2021-2022学年高二6月月考
生物试题
一、单选题
1. 下列有关发酵的叙述，正确的是（ ）
A. 植物细胞无氧呼吸产生酒精的过程属于发酵
B. 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸的过程属于发酵
C. 动物细胞无氧呼吸产生乳酸的过程属于发酵
D. 发酵特指微生物细胞进行无氧呼吸的过程
2. 泡菜发酵过程中乳酸菌数量和亚硝酸盐含量的变化情况如下图所示，下列叙述错误的是（ ）

A. 中期乳酸菌数量最多与中期乳酸菌抑制了其它微生物的活动有关
B. 乳酸菌后期数量减少与乳酸积累，PH下降，抑制乳酸菌活动有关
C. 在硝酸盐还原菌的作用下，发酵容器中硝酸盐含量在初期呈现上升趋势
D. 发酵容器中乳酸含量的变化趋势与亚硝酸盐含量的变化趋势一致
3. 微生物接种方法很多，平板划线法是最常用的一种，据下图分析下列操作方法正确的是（　　）

A. 在该操作过程中只需要灼烧接种环5次
B. 第5区域的划线与第1区域的划线不得相连
C. 确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数
D. 划线操作时，如接种环不慎划破培养基，可以继续正常操作
4. 下图是从土壤中筛选产纤维素分解菌的过程，其中在3个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为27、179和334。相关说法中错误的是（ ）

A. 图中的选择培养基和鉴别培养基都是以纤维素为唯一碳源，其中鉴别培养基中还应加入刚果红
B. 筛选培养时应设置牛肉膏蛋白胨培养基相同条件下接种培养作为对照
C. 每克土壤样品中的细菌数量为1.8×108个，此计数结果往往比活菌的实际数目少
D. 保留菌种时应选择“透明圈直径/菌落直径”最大的菌落
5. 精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，下图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变和筛选获得精氨酸依赖型菌过程示意图，过程②将紫外线照射处理过的菌液接种在培养基甲上，培养至菌落不再增加。过程③向培养基甲中添加某种物质，继续培养。下列相关说法错误的是（ ）


A. 紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生基因突变
B. 过程②所用的培养基是缺少精氨酸的选择培养基
C. 图甲中菌落A是采用平板划线法接种后培养得到
D. 图乙中菌落B应为精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌
6. 下表所示为某培养基的配方，有关叙述错误的是（ ）
成分
含量
成分
含量
NaNO3
3g
FeSO4
0．01g
K2HPO4
1g
（CH2O）
30g
琼脂
15g
H2O
1000mL
MgSO4·7H2O
0．5g
青霉素
0．1万单位

A. 依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养基属于选择培养基
B. 由培养基的成分可知，该培养基所培养微生物的同化作用类型是异养型
C. 用该培养基培养霉菌时，应将培养基的pH调至中性或弱碱性
D. 若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO3，并加入尿素
7. 下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项（ ）
①生产谷氨酸需将pH调至中性偏碱
②发酵工程具有生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉等特点
③发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
④利用发醇工程生产的根瘤菌肥作为微生物农药可以促进植物生长
⑤啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成
⑥单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，可作为微生物饲料等
A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项
8. 发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品。常用好氧菌谷氨酸棒状杆菌利用图1的发酵罐来大量生产味精，发酵流程如图2所示。下列叙述正确的是（　　）

A. 发酵中所使用的谷氨酸棒状杆菌菌种可从自然界筛选也可通过杂交育种获得
B. 为了保证发酵产品的产量和品质，图中发酵配料及发酵罐需经过严格的灭菌
C. 在发酵过程中，通过加料口取样，随时监测产物浓度和微生物数量
D. 发酵过程中需通入无菌空气，并通过搅拌使培养液与菌种充分接触后关闭通气口
9. 利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株。已知野生黑芥（2n=16）具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜（2n=18）易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，技术人员用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力，再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，流程如下图。下列说法错误的是（ ）

A. 将杂种植株栽培在含有黑腐病菌的环境中，可筛选出高抗性杂种植株
B. 经过②操作后，显微镜下观察融合的活细胞中有供体的叶绿体存在可作为初步筛选杂种细胞的标志
C. 融合成功的杂种细胞中染色体数目可能不同
D. 此项技术可以打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，定向改造生物性状
10. 下图表示植物激素X和植物激素Y的浓度比对未分化细胞群变化情况的影响，图2为利用某种耐酸植物甲（4N）和高产植物乙（2N）培育高产耐酸植物丙的过程。下列相关叙述正确的是（ ）

A. 植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，诱导未分化细胞群分化出根
B. 该实验用的未分化细胞群可来自于不同种植物
C. 过程①表示在低渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体
D. 植物丙是六倍体，③是筛选出具有高产性状植株的过程
11. 如下表示矮牵牛的植物组织培养过程，相关叙述正确的是（ ）
矮牵牛愈伤组织生有芽和根的幼苗植株
A. 矮牵牛是自养生物，培养基中无需添加有机碳源
B. ①、②、③过程均可发生基因突变和基因重组
C. 此过程说明分化的植物细胞仍具有全套的遗传信息
D. 光照条件既有利于步骤①诱导形成愈伤组织，又有利于诱导步骤②形成叶绿体
12. 下列育种实例中，主要利用了基因重组原理的是（ ）
A. 通过杂交获得抗病高产小麦 B. 太空育种获得航育1号水稻品种
C. 秋水仙素处理获得多倍体草莓 D. “多莉羊”的获得
13. 中国首创的人造麦类新作物八倍体小黑麦，由于具有品质佳、抗逆性强和抗病害等特点，在生产上有广阔的应用前景。其培育过程如下图所示（其中A、B、D、R分别代表不同物种的一个染色体组）。有关叙述正确的是（ ）
普通小麦AABBDD×黑麦RR→杂种一小黑麦
A. 将小黑麦的花粉粒进行花药离体培养得到的四倍体高度不育
B. 图中秋水仙素抑制了杂种--细胞分裂过程中着丝点的分裂
C. 普通小麦与黑麦杂交产生了后代，说明二者间不有在生殖隔离
D. 杂种一的部分细胞染色体组数与小黑麦部分细胞染色体组数相同
14. 现有甲、乙两种二倍体纯种植物，甲植物的光合产量高于乙植物，但乙植物更适宜在盐碱地种植（相关性状均由核基因控制）。现要利用甲、乙两种植物培育出高产、耐盐的植株。下列所采用的技术手段，不可行的是（ ）
A. 利用植物体细胞杂交技术获得目的植株
B. 两种植物杂交获得F1，再利用单倍体育种技术获得目的植株
C. 利用人工诱变的方法处理乙种植株以获得满足要求的目的植株
D. 将乙种植株耐盐基因导入到甲种植株的受精卵中，可培育出目的植株
15. 下图是利用体细胞核移植技术获得克隆奶牛的流程图。下列叙述错误的是（ ）


A. 过程①除去的是卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物
B. 过程②需要对供体细胞进行离体培养
C. 过程④可用电刺激技术处理
D. 过程⑤要求代孕母牛具有较多的优良性状
16. 下图表示动物细胞培养的相关过程，相关叙述正确的是（ ）

A. 甲过程需要用胰蛋白酶处理，乙、丙分别代表脱分化、再分化
B. 细胞在代谢过程中会积累有害物质，因而需加抗生素加以中和，通入5%的CO2刺激细胞呼吸
C. 若培养的细胞为能分泌单一抗体的杂交瘤细胞，则可从培养液中提取单克隆抗体
D. 若培养细胞为成纤维细胞，则可为基因工程和核移植提供受体细胞
17. 下列有关发酵工程和细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 稀释涂布平板法统计的结果一般用活菌数而不是菌落数来表示
B. 可用无机盐、琼脂和石油配置的选择培养基从被石油污染的土壤中筛选出一种石油降解菌
C. 利用植物组织培养技术提高单个细胞中次生代谢物的含量可实现细胞产物工厂化生产
D. 动物细胞传代培养时，贴壁细胞需要用离心法分散成单个细胞
18. 紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种次生代谢物，具有高抗癌活性，利用植物细胞培养生产紫杉醇是扩大紫杉醇来源的重要途径，紫杉醇工厂化生产的主要过程为：红豆杉→愈伤组织→筛选稳定高产紫杉醇细胞系→细胞悬液→生物反应器进行培养→细胞破碎→提取紫杉醇，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 以红豆杉叶为原料获得愈伤组织过程中发生了细胞分裂和细胞分化
B. 在培养过程中，要不断通入无菌空气并进行搅拌，其目的是保证O2 供应充足，使细胞与培养液充分接触
C. 次生代谢物是生物生长所必需的
D. 紫杉醇的工厂化生产利用了植物细胞的全能性
19. 下图为单克隆抗体制备过程（图中的抗原表位指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团），下列相关叙述错误的是（ ）

A. 小鼠经抗原多次免疫，目的是取其脾脏获取浆细胞，1号试管内可能含有多种浆细胞
B. 3号试管的杂交瘤细胞既能迅速大量增殖又能合成和分泌特异性抗体
C. 杂交瘤细胞经筛选并克隆化培养获得的4种抗体都能与抗原特异性结合
D. 用以治疗癌症的“抗体—药物偶联物”就是以单克隆抗体作为抗癌药物定向杀死癌细胞的
20. 以下说法正确的是（ ）
①基因工程的原理是基因重组          
②动物细胞培养的原理是细胞增殖   
③制备单克隆抗体时得到杂交瘤细胞还要克隆化培养和抗体检测才能确定是否能产生特异性抗体
④克隆动物的成功证明动物细胞有全能性
⑤稀释涂布平板法除了用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目
⑥接种针和接种环常用高压蒸汽灭菌
⑦多数动物细胞培养液的pH为7．35～7．45
A. ①②③⑤ B. ①②③④⑤⑦
C. ①②③④⑤ D. ①②③④⑤⑥⑦
21. 以下关于试管动物和克隆动物的说法正确的是（ ）
A. 试管动物与母本性状相同 B. 两者均为无性生殖的产物
C. 一般遵循孟德尔的遗传定律 D. 不是都需要细胞核移植技术
22. 下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述正确的是（ ）
A. 受精完成并开始发育的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体
B. 受精卵在输卵管内进行卵裂形成桑葚胚的过程中，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加
C. 受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期阶段
D. 精子入卵后，精子的核体积直接变大发育成雄原核
23. 杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为钻石级肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示，下列叙述正确的是（ ）

A. 为了获得更多的卵母细胞，用主要含雌激素的促排卵剂对雌性杜泊羊进行超数排卵处理
B. 从雄性杜泊羊那里采集到的精子获得能量后才能够穿入卵细胞内部
C. 若想进一步扩大繁殖规模，还可借助胚胎分割技术
D. 早期胚胎必须体外培养至囊胚才可移植到普通绵羊的输卵管中
24. 下列有关生物工程描述正确的有（　　）
①植物体细胞杂交技术可打破生殖隔离，培育出的新品种一定不是单倍体②利用普通植物茎尖进行植物组织培养可以培育出抗病毒植株③在植物体细胞杂交过程中可采用质壁分离实验检测制备的原生质体的活性④通过对引物的设计，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变、在目的基因两端增加限制酶识别位点等目的⑤在试管牛培育过程中需用物理或化学法激活重构胚，使其完成分裂和发育⑥在“克隆羊”、“试管羊”和“转基因羊”的形成过程中，一般都有卵母细胞的参与⑦设计试管婴儿与试管婴儿的区别是前者在胚胎植入前需进行遗传学诊断⑧把目的基因导入蛙的受精卵，待培养成早期胚胎后再移植到雌蛙体内
A. 四项 B. 三项 C. 两项 D. 一项
25. 下列为高中生物学中的重要实验，相关描述错误的是（ ）
①DNA的粗提取与鉴定 ②绿叶中色素的提取和分离
③探究植物细胞的吸水和失水 ④观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂
⑤调查草地中某双子叶植物的种群密度 ⑥探究抗生素对细菌的选择作用
A. ①②④均使用到乙醇 B. ③④均需使用显微镜
C. ①②实验原理是物质的溶解度不同 D. ⑤⑥选取样方、挑选菌落时均需随机取样
26. 下图表示“DNA的粗提取与鉴定”实验中的部分操作步骤，相关说法正确的是（ ）

A. 为避免颜色干扰，实验中不能采用菠菜叶片作为实验材料
B. 过程③所示操作中加入的试剂甲应是0.14mol/L的NaC1溶液
C. A组为对照组，B组为实验组，该实验自变量为是否加入了DNA
D. 过程④加入二苯胺试剂沸水浴后即可观察到较为明显颜色反应
27. 下表为常用的限制性核酸内切酶（限制酶）及其识别序列和切割位点，由此推断的以下说法中，正确的是（ ）
限制酶名称
识别序列和切割位点|
限制酶名称
识别序列和切割位点
BarmH I
G↓GATCC
KpnI
GGTAC↓C
EcoRI
G↓AATTC
Sau3A I
↓GATC
Hind I
GTY↓RAC
Sma I
CCC↓GGG
（注：Y＝C或T，R＝A或G）
A. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
B. 限制酶切割后一定形成黏性末端
C. 不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端
D. 限制酶的切割位点在识别序列内部
28. 限制酶HindⅢ和XhoⅠ的识别序列及切割位点分别为A↓AGCTT和C↓TCGAG。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越小
B. 两种限制酶切割形成的黏性末端都是—AGCT
C. 用HindⅢ切割目的基因和用XhoⅠ切割质粒后，可形成重组质粒
D. 操作中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果
29. 以下是几种不同限制酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述正确的是（ ）。

A. 以上DNA片段是由4种限制酶切割后产生的
B. ②片段是在识别序列为的限制酶作用下形成的
C. ①和④两个片段在DNA聚合酶的作用下可形成重组DNA分子
D. 限制酶和DNA连接酶作用的部位都是磷酸二酯键
30. 新冠疫情的快速控制，离不开我国对新冠病毒（RNA病毒）的快速检测能力。荧光定量PCR技术可检测样本中DNA含量，其原理是：在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成（如图）。Ct值的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法不正确的是（ ）

A. 检测新冠病毒时，需加入逆转录酶将新冠病毒RNA转化为cDNA
B. 子链延伸时，脱氧核苷酸原料首先加到引物的3'端
C. Ct值越大表示被检测样本中病毒数目越多，患者危险性更高
D. 若样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，检测结果可能为阴性
31. 2021年12月，我国科学家研制的全人源抗新冠病毒单克隆抗体产品，首次获批开展临床试验。科学家从新冠肺类康复患者外周血单个核细胞（PBMC）中获取新冠病毒的抗体DNA，插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，通过侵染宿主菌构建基因文库后，最终获得全人源抗新冠病毒单克隆抗体。下列说法错误的是（ ）
A. 该种单克隆抗体可作为药物用于新冠肺炎的治疗
B. 研制获得该种单克隆抗体的过程，需要对B细胞进行大规模体外培养
C. 研制获得该种单克隆抗体的过程，应用了基因工程和发酵工程技术
D. 该种单克隆抗体并非在人体中表达，可能因空间结构改变而失去特异性
32. 下列表示抗凝血酶乳腺生物反应器的制备过程，下列说法正确的是（　　）

A. 该转基因牛中的抗凝血酶基因只存在于乳腺细胞中
B. ②表示性别为雄性的胚胎
C. 常用农杆菌转化法将基因导入受体细胞
D. ①表示受精卵
33. 在治疗人类疾病时，转基因克隆动物的细胞、组织和器官可以作为异种移植的供体，欧洲哥廷根小型猪已经成为国际上理想的异种器官移植研究材料，为了解决免疫排斥的问题，科学家采用的方法是将器官供体基因组中导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达或设法除去抗原决定基因。下列相关叙述错误的是 (　　)
A. 上述方法需要用到基因工程和动物细胞核移植技术
B. 器官短缺和免疫排斥是目前制约人体器官移植的两大难题
C. 猪的内脏构造、大小和血管分布与人极为相似，而且病毒数量少于灵长类动物
D. 在供体基因组中导入的某种调节因子属于标记基因
34. 枯草杆菌蛋白酶能催化蛋白质水解为氨基酸，在有机溶剂中也能催化多肽的合成。这些碱性蛋白酶具有重要的应用价值，被广泛应用于洗涤剂、制革及丝绸工业。1987年福什特通过将枯草杆菌蛋白酶分子表面的Asp（99）和Glu（156）改成Lys，而导致了活性中心His（64）质子pKa从7下降到6，使酶在pH=6时的活力提高10倍。下列说法正确的是（ ）
A. 完成氨基酸的替换需要通过改造基因实现
B. 该成果体现了蛋白质工程在培育新物种方面具有独特的优势
C. 经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶活性提高这一性状不可遗传
D. 蛋白质工程最终要达到的目的是获取编码蛋白质的基因序列信息
35. 下列说法中正确的是（ ）
A. 可以根据某毒蛋白中的氨基酸序列推mRNA中的核糖核苷酸序列，进而推测出毒蛋白基因的核苷酸序列
B. 载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
C. 转基因食品中含有外源基因，食用后能进入人体细胞并改变人体遗传物质
D. 自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后，其DNA整合到细菌DNA上属于基因工程
36. 为了防止转基因作物的目的基因通过花粉转移到自然界中其他植物，研究人员设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中，其原因是（　　）
A. 叶绿体基因不会进入到生殖细胞中
B. 受精卵中的细胞质基因几乎全部来自卵细胞
C. 转基因植物与其他植物不能通过花粉进行基因交流
D. 转基因植物与其他植物杂交的后代不出现一定的性状分离比
37. 所谓“设计试管婴儿”，实际上就是指体外受精形成的胚胎（几个细胞期）在植入母体孕育前，根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测。当检测结果符合人们需要时，再把胚胎植入母体孕育。设计试管婴儿不同于为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿。下列关于设计试管婴儿的问题，哪项不合乎道德规范（ ）
A. 利用设计试管婴儿的脐带血
B. 设计试管婴儿，不一定非考虑他的性别
C. 利用设计试管婴儿技术设计畸形胎儿，以供展览
D. 利用设计试管婴儿提供骨髓造血干细胞，救治病人
38. 将生物技术运用于战争或恐怖活动，后果非常可怕，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 由转基因微生物制成的生物武器具有目前人类难以预防和治疗的特点
B. 生物武器是致病微生物、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等的总称
C. 与常规武器相比，生物武器具有传染性强、不易被发现、不受自然条件影响等特点
D. 经过基因重组的生物武器可能使受害国居民感染而施放者不易感染
39. 下列关于DNA片段的扩增及电泳鉴定原理的说法，正确的是（ ）
A. 在一定的pH条件下DNA分子可带上正电荷或负电荷
B. 带电DNA分子在电场的作用下会向着与它所带电荷相同的电极移动
C. DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA分子大小、构象等有关，与凝胶等无关
D. 凝胶中的DNA分子直接可以在波长为300nm的紫外灯下被检测
40. 细胞DNA合成途径有两条，过程如下图。正常细胞内含有辅助途径所必需转移酶和激酶，其主要途径可被A物质所阻断。制备单克隆抗体所使用的骨髓瘤细胞缺乏转移酶。现用加入H、A、T三种物质的HAT培养基来筛选特定的杂交瘤细胞。下列关于筛选原理的叙述，正确的是（ ）


A. HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体
B. 杂交瘤细胞在HAT培养基上可进行上述两条途径，所以能大量繁殖
C. 骨髓瘤细胞及其相互融合的细胞因无法进行上述两条途径而在HAT培养基上不能增殖
D. 浆细胞及其相互融合的细胞因主要途径被阻断而在HAT培养基上不能增殖
41. 抗体药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如下图所示。相关叙述正确的是

A. ADC进入肿瘤细胞的过程体现了细胞膜的流动性
B. 抗体进入细胞后激活溶酶体酶导致肿瘤细胞凋亡
C. 单克隆抗体携带的细胞毒素与肿瘤细胞特异结合
D. 肿瘤细胞的溶酶体中含有能特异性水解药物的酶
42. 2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述不正确的是（ ）

A. 三亲婴儿的出生属于有性生殖
B. 三亲婴儿同时拥有父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
C. 该技术可避免母亲细胞质中的致病基因传递给后代
D. 该技术可避免母亲的色盲基因传递给后代
43. “X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如下图1所示。下列叙述错误的是（ ）

A. 第一轮复制得到2个DNA分子，即①②各一个
B. 第二轮复制得到4个DNA分子，即①②③④各一个
C. 第四轮复制得到16个DNA分子，其中有4个X基因
D. 经五轮循环后产物中有五种不同长度的DNA分子
44. 下图为我国新型冠状病毒（RNA病毒）核酸检测的基本流程，采用的是“实时荧光定量RT-RCR”技术，1~2h内即可得到检测结果。其基本原理是DNA的复制，过程中加入与特定模板链互补的荧光探针，这样每新合成一条DNA链，就会产生一个荧光分子，通过检测荧光信号即可确定是否为阳性。下列相关说法错误的是（ ）

A. ①②过程都需要加入四种游离的脱氧核糖核苷酸作为原料
B. 若只考虑一个DNA，其复制了n次，则整个过程中可以检测到2n+1-2个荧光信号
C. 若样本RNA中A占碱基总数的20%，则其产生的DNA中C占碱基总数的30%
D. 在核酸检测过程中出现假阳性，可能是外源DNA片段的污染
45. 农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入到被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环，并以此环为模板进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列相关叙述错误的是（ ）

A. PCR技术依据的原理是DNA半保留复制
B. PCR技术需要解旋酶和耐高温的DNA聚合酶
C. 选择图中的引物①④组合可扩增出两侧的未知序列
D. 通过与受体细胞的基因组序列比对来确定插入位置
46. 下图表示利用PCR技术扩增目的基因的部分过程，其原理与细胞内DNA复制类似。下列叙述错误的是（ ）

A. 耐高温的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3′端
B. 在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段
C. 引物之间或引物自身发生碱基互补配对，则不能有效扩增目的基因
D. 从理论上推测，第五轮循环产物中含有引物A的DNA片段占15/16
47. 科学家将人的生长激素基因与某种细菌（不含抗生素抗性基因）的DNA分子进行重组，并成功地在该细菌中得以表达（如下图）。下列相关叙述错误的是（ ）

A. 过程①合成人生长激素基因的过程需要用到逆转录酶
B. 过程③是将重组质粒溶于缓冲液后与经Ca2+处理的细菌B混合
C. 可采用抗原-抗体杂交技术检测工程菌中生长激素基因是否成功表达
D. 成功导入了重组质粒的细菌B在含有氨苄青霉素和四环素的培养基上可以生长
48. 限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ的识别序列和切割位点分别是－G↓GATCC-和－↓GATC-，利用下图所示的质粒构建基因表达载体，仅考虑图中识别序列。下列叙述错误的是（ ）


A. 用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割DNA后获得的黏性末端相同
B. 若用限制酶Ⅱ切割质粒，则可得到两种DNA片段
C. 若用限制酶Ⅰ切割目的基因，则有两个磷酸二酯键会被水解
D. 构建基因表达载体时，应用限制酶Ⅱ切割质粒，用限制酶Ⅰ切割目的基因
49. 如图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物1—4在含有目的基因的DNA上的结合位置如甲图所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindDI在质粒上的识别位点如乙图所示。以下说法中错误的是（　　）

A. PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物30个
B. 若已经合成了甲图所示4种引物，应选择引物2和3扩增目的基因
C. 过程①中应使用限制酶BamHI切割质粒
D. 对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，以防其污染环境
50. 棉花容易受棉铃虫的侵袭，当棉铃虫大量繁殖后，会使产量大大下降。科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了能抵御棉铃虫侵害的转基因棉花。图甲有三种限制酶及在目的基因上的切割位点，图乙有三种限制酶的切割位点和标记基因。下列关于限制酶的选择和基因表达载体构建的叙述正确的是（ ）

A. 选择Sma Ⅰ限制酶断开目的基因和质粒，构建的基因表达载体更容易成功
B. 选用Pst Ⅰ限制酶断开目的基因和质粒，构建的基因表达载体更容易成功
C. 选用限制酶Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ断开目的基因和质粒，构建的基因表达载体更容易成功
D. 用一种限制酶或两种限制酶断开目基因和质粒，构建的基因表达载体都一样成功
二、综合题
51. 2018年1月，两只克隆小猴“中中”和“华华”登上《细胞》，成了举世瞩目的大明星。这是世界首例非人灵长类动物的体细胞整。它们的诞生意味着以体细胞克隆猴为实验动物模型的时代就此开启。下图是该项技术的流程图，请据图回答问题：

（1）图中选择A猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是_______________。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为________________。
（2）对B猴使用________________处理，使其超数排卵。收集并选取处于__________（时期）卵母细胞用于核移植，选择该时期细胞的原因_____________________________（答2点即可）。
（3）为获得更多的“中中”华华”，可在胚胎移植前对_______________时期的胚胎进行胚胎分割。胚胎移植的实质是早期胚胎_______________________________。将胚胎植入代孕母猴过程中，胚胎能在受体子宫中存活的生理学基础是__________________。基因人源化动物模型用于研究时，人的基因可以在猴细胞中表达，其原因是_________________
（4）“中中”“华华”的诞生意味着以体细胞克隆猴为实验动物模型的时代就此开启，相较于其他实验猴，其明显优势是____________________________________________。
52. 凝乳酶是食品生产中常用的凝结剂，科研人员从动物体内获得了凝乳酶mRNA，拟利用基因工程生产凝乳酶。据下图回答下列问题：

（1）利用凝乳酶mRNA，在______酶的作用下，可以得到凝乳酶的cDNA，进一步通过PCR扩增时需要引物，引物的作用是______。
（2）图1和图2是选用的质粒及其几种相关限制酶的识别位点，在构建基因表达载体时，最好选用的限制酶是______，这样选择的优点是______（答出两点）。
（3）若将构建的重组质粒导入大肠杆菌，需要用钙离子处理，使大肠杆菌处于________________。
（4）若利用转基因动物通过分泌的乳汁来生产所需要的药品， 将药用蛋白基因与__________________等调控组件重组在一起，通过___________的方法，导入哺乳动物的__________中，然后使其生长发育成转基因动物。
53. 科学网2022年2月10报道，我国科学家建立了蛋白质从头设计新方法。报道中记述我国科研人员从头设计的9种蛋白质分子的高分辨晶体结构，其中5种蛋白质具有不同于已知天然蛋白的新颖结构。请回答下列相关问题：
（1）可以通过蛋白质工程对相关蛋白质进行改造，其基本途径是从预期____________出发，通过设计蛋白质的结构和推测____________序列，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因。该工程是一种通过______________________，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
（2）若要利用我国科学家建立的蛋白质从头设计的新方法获得全新的氨基酸序列，通过蛋白质工程、基因工程等途径从大肠杆菌中获得蛋白质，利用PCR技术对目的基因扩增，使用PCR技术扩增的前提______________________
（3）构建基因表达载体的目的是使________________。构建的基因表达载体除含目的基因外，还必须有________________（至少答出三点）等。
（4）艾弗里等人肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么这一启示是________________________。
54. 新型冠状病毒是一种RNA病毒，其表面的棘突蛋白（简称S蛋白）是主要的病毒抗原。单克隆抗体既可作为诊断试剂，又可阻断病毒的粘附和入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。制备抗S蛋白单克隆抗体的流程如下图。


回答下列问题。
（1）步骤①必须给小鼠注射新型冠状病毒的S蛋白，目的是_____，取小鼠的脾脏剪碎后用_________处理一段时间，再加入培养液可制成单细胞悬液。
（2）步骤②中常用的诱导因素有_____________（答2点），融合完成后，体系中出现多种类型细胞的原因是________________。
（3）步骤③是使用具有筛选作用的培养基进行细胞培养，培养的结果是_______; 需进行步骤④的原因是_________，步骤④含多次筛选，筛选依据的基本原理是____________。
（4）细胞A和细胞B的特点是______________。
参考答案
1. 【答案】B
2. 【答案】D
3. 【答案】B
4. 【答案】C
5. 【答案】C
6. 【答案】C
7. 【答案】B
8. 【答案】B
9. 【答案】D
10. 【答案】D
11. 【答案】C
12. 【答案】A
13. 【答案】D
14. 【答案】B
15. 【答案】D
16. 【答案】C
17. 【答案】B
18. 【答案】B
19. 【答案】D
20. 【答案】A
21. 【答案】D
22. 【答案】B
23. 【答案】C
24. 【答案】A
25. 【答案】D
26. 【答案】C
27. 【答案】C
28. 【答案】D
29. 【答案】D
30. 【答案】C
31. 【答案】B
32. 【答案】D
33. 【答案】D
34. 【答案】A
35. 【答案】A
36. 【答案】B
37. 【答案】C
38. 【答案】C
39. 【答案】A
40. 【答案】C
41. 【答案】A
42. 【答案】D
43. 【答案】C
44. 【答案】C
45. 【答案】B
46. 【答案】D
47. 【答案】D
48. 【答案】D
49. 【答案】B
50. 【答案】C
51. 【答案】（1） ①. 胚胎成纤维细胞增殖能力更强，更易于培养 ②. 接触抑制
（2） ①. 促性腺激素 ②. 减数第二次分裂中期##MⅡ中期 ③. 细胞质中含有激发细胞核体现全能性的物质，体积大易操作，营养物质丰富
（3） ①. 桑椹胚或囊胚 ②. 在相同生理环境条件下空间位置的转移 ③. 受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应 ④. 猴和人体共用一套密码子
（4）体细胞克隆猴遗传背景相同，避免个体间差异对实验结果的干扰，大大减少实验动物的使用数量
52. 【答案】（1） ①. 逆转录 ②. 使DNA聚合酶在引物的3，端连接脱氧核苷酸
（2） ①. EcoRⅠ、BglⅡ或EcoRⅠ、BamHⅠ ②. 避免标记基因被破坏、目的基因自身环化、质粒自身环化和目的基因的反向连接（确保目的基因与质粒正向连接）
（3）感受态（容易吸收外源DNA分子的状态）
（4） ①. 乳腺中特异性表达基因的启动子 ②. 显微注射 ③. 受精卵
53. 【答案】（1） ①. 蛋白质功能 ②. 应有的氨基酸序列 ③. 基因修饰或基因合成
（2）目的基因一段已知的碱基序列
（3） ①. 使目的基因在受体细胞中稳定存在,，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用 ②. 复制原点、标记基因、启动子、终止子
（4）DNA可以从一种生物个体转移到另一个体
54. 【答案】（1） ①. 诱导小鼠产生能够分泌抗S蛋白抗体的B淋巴细胞 ②. 胰蛋白酶##胶原蛋白酶
（2） ①. 聚乙二醇（PEG）、灭活病毒、电激 ②. 细胞融合是随机的，且融合率达不到100%
（3） ①. 只有杂交瘤细胞能够生存 ②. 小鼠生活中还会受到其他抗原的刺激，提取的B淋巴细胞有很多种 ③. 抗原与抗体的结合具有特异性
（4）无限增殖且能产生专一抗体