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2021-2022学年陕西省西安中学高二下学期期中生物试题含解析
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这是一份2021-2022学年陕西省西安中学高二下学期期中生物试题含解析，共43页。试卷主要包含了选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
西安中学2021—2022学年度第二学期期中考试
高二生物试题
一、选择题
1. 基因工程操作中，需要筛选和获取目的基因。下列关于目的基因的说法，不正确的是（ ）
A. 目的基因是指用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因
B. 目的基因都有自我复制能力
C. 可以根据相应的表达产物，从序列数据库中寻找目的基因
D. 目的基因可以人工合成，也可以利用PCR快速获取或扩增
【1题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】PCR一般指聚合酶链式反应。 聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。
【详解】A、目的基因主要是能合成相关蛋白质的基因，如胰岛素基因，也可以是调控因子，A正确；
B、目的基因通常不具有自我复制能力，B错误；
C、我们可以根据目的基因的碱基序列、功能、表达产物等信息，从基因文库中寻找目的基因，C正确；
D、目的基因可以人工合成（如DNA合成仪合成目的基因），也可以利用PCR快速获取或扩增，D正确。
故选B。
2. 限制性核酸内切酶是切割DNA的工具。有关描述不符合事实的是（ ）
A. 主要从原核生物中分离纯化出来
B. 能识别双链DNA分子的特定的核苷酸序列
C. 使特定部位的两个核苷酸间的磷酸二酯键断开
D. 切割产生的DNA片段末端称为黏性末端
【2题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】有关限制酶，考生可以从以下几方面把握：（1）主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特点：具有特异性，即能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）作用结果：形成黏性末端和平末端两种。
【详解】A、限制酶主要来源于原核生物，A正确；
B、限制酶具有专一性，能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，B正确；
C、限制酶能识别双链DNA分子特定的核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，C正确；
D、限制酶切割产生的DNA片段末端有两种形式，分别是黏性末端、平末端，D错误。
故选D。
3. 下列有关基因表达载体的叙述，不正确的是（ ）
A. 具有复制原点，使目的基因能在受体细胞内扩增
B. 具有启动子，作为多肽链合成的起始信号
C. 具有标记基因，有利于目的基因的初步检测
D. 具有目的基因，以获得特定的基因表达产物
【3题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】基因工程是狭义的遗传工程，基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定高效地表达。为了实现基因工程的目标，通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按照一定的程序进行操作。基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。
【详解】A、基因表达载体必须使目的基因能够在受体细胞内进行扩增，因此具有复制原点，A正确；
B、基因表达载体必须使目的基因能够在受体细胞内进行表达，具有启动子（启动转录），作为RNA合成的起始信号，B错误；
C、具有标记基因，有利于目的基因的初步检测，如抗生素抗性基因，含目的基因的受体细胞在含抗生素的培养基上能生长，C正确；
D、构建基因表达载体的目的是为了使目的基因在受体细胞内高效、稳定地表达，因此具有目的基因，以获得特定的基因表达产物，D正确。
故选B。
4. 下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ）
A. DNA连接酶使粘性末端的碱基进行碱基互补配对
B. 限制性核酸内切酶可用于目的基因的获得
C. 目的基因需由载体导入受体细胞
D. 化学方法合成目的基因不需要限制性核酸内切酶
【4题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；
DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】A、DNA连接酶将黏性末端的磷酸二酯键连接起来，A错误；
B、限制性核酸内切酶可用于目的基因的获得和基因表达载体的构建，B正确；
C、目的基因需要与运载体构建成基因表达载体，然后导入受体细胞，C正确；
D、化学方法合成目的基因不需要限制性核酸内切酶，D正确。
故选A。
5. 下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中，不正确的是（ ）
A. cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有某种生物的全部基因
B. 如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同
C. cDNA文库中的基因都没有启动子
D. 一种生物的cDNA文库可以有许多种，但基因组文库往往只有一种
【5题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】基因文库包括基因组文库和部分基因文库。其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，如：cDNA文库。以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。
【详解】A、由分析中定义可知，cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有某种生物的全部基因，A正确；
B、mRNA是由基因中的外显子转录形成的，因此cDNA文库中的基因不包含启动子和内含子等结构，与该生物的基因组文库中的基因结构不同，B错误；
C、cDNA文库中的基因都没有启动子，只包含基因中的外显子，C正确；
D、由于cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，因此该种基因文库可能有多种，而基因组文库中含有某种生物的全部基因，因此只有一种，D正确。
故选B。
6. 下列有关目的基因导入受体细胞的说法中，正确的是
A. 大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钠离子处理
B. 通过显微注射法可将目的基因直接导入受体细胞中
C. 将目的基因导入受体细胞，并在受体细胞维持稳定和表达的过程，称为转化
D. 可用基因枪法将目的基因导入动物受精卵中
【6题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】1、将目基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等；
2、将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术，此方法的受体细胞多是受精卵；
3、将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
【详解】A、大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钙离子处理，使其成为感受态细胞，A错误；
B、目的基因需要和运载体结合后形成重组DNA分子才能注入，B错误；
C、目的基因导入受体细胞，并在细胞内维持稳定和表达的过程称为转化， C正确；
D、基因枪法是将目的基因导入植物细胞的方法，将目的基因导入动物细胞常用显微注射法，D错误；
故选C。
【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确判断各选项。
7. 基因工程的基本操作步骤如下图所示，其中甲、乙、丙表示结构，①表示过程。下列相关叙述正确的是
A. 甲、乙分别表示含有抗性基因的质粒、受体细胞
B. ①过程表示用有抗生素的培养基筛选含目的基因的受体细胞
C. 丙可以是单细胞、器官、植物或动物等
D. 若要使丙表达人的蛋白质，则乙是能分裂的人体细胞
【7题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】
【详解】A、甲为运载体，可能是质粒，也可能是噬菌体或动植物病毒，A错误；
B、①为筛选含有目的基因的受体细胞的过程，由于标记基因不一定是抗性基因，因此该过程不一定是用含有抗生素的培养基来筛选含目的基因的受体细胞，也可能是通过荧光标记来筛选含目的基因的受体细胞，B错误；
C、基因工程的受体细胞可以是微生物细胞、植物细胞或动物细胞，因此丙可以是单细胞、器官、植物或动物等，C正确；
D、若要使丙表达人的蛋白质，则乙应该是其他生物的细胞，D错误。
故选C
8. 如图为某一重组质粒示意图，下列叙述错误的是（ ）
A. 用限制酶EcoRV处理该质粒得到的分子共含有4个游离的磷酸基团
B. 同时用限制酶EcoRV和BamHI处理该质粒可得到3个双链DNA片段
C. 在获得目的基因时应该使用的限制酶是BamHI
D. 将受体细胞培养于含有卡那霉素的培养基中，可筛选出含有目的基因的细胞
【8题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】构建基因表达载体其目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。
【详解】A、限制酶EcoRV在图中含有两个切点，用限制酶EcoRV处理该质粒可得到2个线形DNA分子，每个线形DNA分子含有两个游离的磷酸基团，共含有4个游离的磷酸基团，A正确；
B、限制酶EcoRⅤ和BamHⅠ酶在图中共含有3个切点，同时用它们处理该质粒可得到3个双链DNA分子，B正确；
C、在获得该重组质粒时，不应该使用限制酶BamHⅠ，若使用该限制酶，则会破坏目的基因，C错误；
D、重组质粒含有卡那霉素抗性基因，故将受体细胞培养于含有卡那霉素的培养基中，可筛选出含有目的基因的细胞，D正确。
故选C。
9. 科研人员通过PCR获得肝细胞特异性启动子——白蛋白启动子，将该启动子与Cre重组酶基因结合构建表达载体，培育出在肝细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠。下列叙述正确的是
A. 将该表达载体导入肝细胞以获得转基因小鼠
B. PCR获得白蛋白启动子需设计特异性的引物
C. 构建该表达载体需要限制酶和DNA聚合酶
D. 通过核酸分子杂交技术检测目的基因是否完成表达
【9题答案】
【答案】B
【解析】
【详解】将该表达载体导入受精卵以获得转基因小鼠，A错误；PCR技术需设计特异性的引物，B正确；构建该表达载体需要限制酶和DNA连接酶，C错误；检测目的基因是否完成表达常用抗原抗体杂交技术，D错误。
10. 多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，PCR一般经历下列过程：95℃下使模板DNA变性→55℃下复性→72℃下引物链延伸。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是（ ）
A. 变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，在细胞中也可利用解旋酶实现
B. 复性过程中引物与DNA模板链的结合遵循碱基互补配对原则
C. 延伸过程中需要耐热的DNA聚合酶、四种核糖核苷酸、一定的缓冲液
D. m个DNA分子经过n轮循环后，理论上一共可以得到m·2n个DNA分子
【10题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】阅读题干可知，本题的知识点是PCR反应的原理、DNA分子体内复制与多聚酶链式反应扩增DNA片段的异同点等，先梳理相关知识点，然后分析选项进行解答。
【详解】A、多聚酶链式反应扩增DNA片段时，DNA变性过程是通过控制温度打开双链DNA分子中的氢键形成单链结构，而在细胞内是通过DNA解旋酶完成的，A正确；
B、复性过程中，引物的核苷酸序列上的碱基与单链DNA分子上的核苷酸序列的碱基的结合，遵循碱基互补配对原则，B正确；
C、延伸过程中需要耐热的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、一定的缓冲液，C错误；
D、PCR技术的原理是双链DNA分子的复制，因此m个DNA分子经过n轮循环后，理论上一共可以得到m·2n个DNA分子，D正确。
故选C。
11. 用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（ ）
A. 如图中两种酶识别的核苷酸序列不同
B. 如图中酶切产物可用于构建重组DNA
C. 泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物
D. 图中被酶切的DNA片段是单链DNA
【11题答案】
【答案】D
【解析】
【详解】【分析】该题考查DNA的结构、限制酶的特点和功能等。DNA一般是双螺旋结构；限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割。
【详解】限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，由电泳图可知XhoI和SalI两种酶分别切割时，识别的序列不同，A正确；同种限制酶切割出的DNA片段，具有相同的粘性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，B正确；Sal I将DNA片段切成4段，Xho I将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道①为Sal I，泳道②为Xho I，C正确；限制酶切割双链DNA，酶切后的DNA片段仍然是双链DNA，D错误，所以选D。
【点睛】注意图1两种限制酶的识别位点数量，Sal I有3个识别位点，能将DNA片段切成4段，Xho I有2个识别位点，能将DNA片段切成3段。
12. 为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞。下列操作与实验目的不符的是（ ）
A. 用限制酶BsaB I和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因
B. 与只用Kpn I相比，Kpn I和Xho I处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确
C. 将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞
D. 用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中
【12题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】
1、基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。
2、基因工程的基本操作程序：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。
【详解】A、雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）均有BsaB I酶切位点，所以用限制酶BsaB I和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因，A不符合题意；
B、图中质粒与ACA-GNA上都含有KpnⅠ和XhoⅠ的酶切位点，与只用KpnI相比，KpnI和XhoⅠ处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确，B不符合题意；
C、由于重组质粒含有卡那霉素的抗性基因，故将棉花细胞接种在含卡那霉素的培养基上可筛选出转基因细胞，C符合题意；
D、根据GNA-ACA融合基因的两端序列设计合适的引物，可以利用PCR技术检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中，D不符合题意。
故选C。
13. 为培育抗旱玉米，研究人员构建了含有抗旱基因E的重组Ti质粒，采用农杆菌转化法将基因E转入玉米幼胚组织细胞中，筛选出抗旱的转基因玉米。下列相关叙述错误的（ ）
A. 利用基因E的mRNA反转录为cDNA，通过PCR可获得大量目的基因
B. 将重组Ti质粒置于经CaCl2处理的农杆菌悬液中，可获得转化的农杆菌
C. 用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞后经组织培养获得转基因植株
D. 重组Ti质粒进入玉米幼胚组织细胞后与染色体整合并通过细胞增殖遗传给后代
【13题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】1、将目的基因导入受体细胞时根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法，将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法，将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
2、目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因常用DNA分子杂交技术，②检测目的基因是否转录出了mRNA，常用分子杂交技术，③检测目的基因是否翻译成蛋白质，常用抗原抗体杂交技术，个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、提取该微生物mRNA，在反转录酶的催化作用下，反转录为cDNA，再通过PCR可获得大量目的基因，A正确；
B、农杆菌经钙离子处理后，成为感受态，使其易于吸收周围的DNA分子，所以将重组质粒置于经CaCl2处理的农杆菌悬液中，可获得转化的农杆菌，B正确；
C、用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞后经过组织胚可以获得转基因植株，C正确；
D、重组Ti质粒进入玉米幼胚组织细胞后整合到DNA上，并通过细胞增殖遗传给后代，D错误。
故选D。
14. 如图为蛋白质工程操作的基本思路，下列叙述不正确的是 （ ）
A. 代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤
B. 代表中心法则内容的是①②
C. ①代表转录,②代表翻译,④代表分子设计,⑤代表DNA合成
D. 蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计
【14题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】本题考查蛋白质工程的基本思路，旨在考查考生的识记能力，属于考纲理解能力的考查。天然蛋白质合成的过程是按照中心法则进行的，而蛋白质工程的基本途径与之相反，即从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸序列(基因)。
【详解】代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤，A正确；代表中心法则内容的是①②，B正确；①代表转录，②代表翻译，④代表分子设计，⑤代表 DNA合成，C正确；蛋白质工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计，通过基因合成或修饰实现，D错误。
【点睛】解答此题需要理解中心法则和蛋白质结构的知识，熟记教材相关知识是解题关键。
15. 蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质的主要原因是（ ）
A. 缺乏改造蛋白质所必需的工具酶
B. 改造基因易于操作且改造后能够遗传
C. 人类对大多数蛋白质的高级结构知之甚少
D. 蛋白质中氨基酸的排列顺序千变万化，操作难度大
【15题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物系统，这个生物系统可以是转基因微生物、转基因植物、转基因动物，甚至可以是细胞系统。
【详解】蛋白质工程中，对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，若直接对蛋白质进行改造，工作量过大，改造的蛋白质数量有限，难以保证生产的需要；而通过基因修饰或基因合成来完成对蛋白质的改造，则易于操作且改造后能够遗传，生产的蛋白质量能保证生产的需要，所以B正确，ACD错误。
故选B。
16. 基因工程自20世纪70年代兴起后得到了飞速发展，目前已经成为生物科学的核心技术，下列有关基因工程的应用的描述正确的是（ ）
A. 利用农杆菌转化法培育得到的转基因植物，可能会引起基因污染
B. 从人类基因组文库中获得胰岛素基因导入大肠杆菌，可获得具生物学功能的胰岛素
C. 用基因枪法将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，可培育出产低乳糖牛乳的奶牛
D. 若将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者进行基因治疗，该基因可遗传给子代
【16题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】基因工程是指按照人类的愿望，将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载体重组后转入细胞内进行扩增，并表达产生所需蛋白质的技术，其原理是基因重组。
【详解】A、农杆菌转化法把目的基因导入到受体细胞的染色体DNA上，目的基因有可能通过减数分裂进入精子，若果精子与野生型同种生物的卵细胞受精则会造成基因污染，A正确；
B、从人类基因组文库中获得胰岛素基因有内含子，在大肠杆菌中，其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出胰岛素， B错误；
C、动物基因工程常用的是显微注射技术，基因枪法属于植物转基因方法之一，C错误；
D、由于此处基因治疗是把表达载体导入淋巴细胞，而淋巴细胞不会产生配子，故目的基因不会传给子代个体，D错误。
故选A。
17. 下列有关基因工程的成果及应用的说法中，正确的是（ ）
A. 用基因工程的方法培育出的抗虫植物也能抗病毒
B. 用转基因动物作为器官移植的供体时，导入的是调节因子，不是目的基因
C. 基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物
D. 目前，在发达国家，基因治疗已用于临床实践
【17题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】基因工程是指按人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外重组DNA分子和转基因技术，获得人们需要的新的生物类型和生物产品。其基因改变的方向是认为决定的。
【详解】基因工程培育的抗虫植物只含有抗虫特性，不能抗病毒，A选项错误；用转基因动物作为器官移植的供体时，导入的调节因子也属于目的基因，可以抑制抗原合成，B选项错误；基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物，C选项正确；目前基因治疗还处于初期的临床试验阶段，D选项错误。
【点睛】用转基因动物作为器官移植的供体时，可将器官供体基因组导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆器官。
18. 采用基因工程技术培育转基因羊，使其能合成人凝血因子且只存在于乳汁中。下列有关叙述，正确的是
A. 该过程的核心技术是获取人凝血因子基因
B. 显微注射前需要将含有人凝血因子基因的表达载体提纯
C. 在该转基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺细胞中
D. 人凝血因子基因与载体的结合不涉及碱基互补配对
【18题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。其中人工合成目的基因、基因表达载体的构建、目的基因的检测都进行碱基互补配对原则。基因工程的核心是基因表达载体的构建。
【详解】基因工程的核心技术是构建基因表达载体，A错误；将目的基因导入受体细胞之前需要构建基因表达载体，显微注射前需要将含有人凝血因子基因的表达载体提纯，B正确；用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，所形成的转基因羊中，人凝血因子基因存在于所有的体细胞中，C错误；人凝血因子基因与载体的结合涉及碱基互补配对，D错误。
故选B。
19. 下列关于基因工程技术应用的叙述中，错误的是（ ）
A. 基因工程技术可定向改良农作物的某些品质
B. 利用细菌代谢旺盛的特点生产基因工程药物
C. 运用基因工程技术让牛合成并分泌人类抗体
D. 噬菌体作为载体可以将重组 DNA 导入动物细胞获得转基因动物
【19题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】转基因技术是指运用科学手段从某种生物中提取所需要的基因，将其转入另一种生物中，使与另一种生物的基因进行重组，从而产生特定的变异性状。利用转基因技术可以改变动植物性状，培育新品种。也可以利用其它生物体培育出期望的生物制品，用于医药、食品等方面。
【详解】A、由分析可知，基因工程技术可定向改良农作物的某些品质，A正确；
B、利用细菌代谢旺盛的特点将细菌利用基因工程手段改造成工程菌，生产基因工程药物，B正确；
C、运用基因工程技术经所需抗体的相关基因导入牛的受精卵中，达到让牛合成并分泌人类抗体的目的，C正确；
D、噬菌体是细菌病毒，不能作为载体将重组 DNA 导入动物细胞，D错误。
故选D。
20. 下列有关抗病毒转基因植物的叙述中，正确的有几项：
①抗病毒转基因植物可以抵抗所有病毒②抗病毒转基因植物对病毒的抗性具有局限性或特异性③抗病毒转基因植物可以抗害虫④抗病毒转基因植物可以稳定遗传，不会变异⑤几丁质酶基因和抗毒素合成基因均不属于抗病毒基因
A. 1项 B. 2项 C. 3项 D. 4项
【20题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】植物基因工程的应用：抗虫转基因植物、抗病转基因植物、抗逆转基因植物、利用转基因改良植物的品质。
【详解】①抗病毒转基因植物只能抵抗某些病毒，①错误；②抗病毒转基因植物对病毒的抗性具有局限性或特异性，②正确；③抗病毒转基因植物不可以抗害虫，③错误；④抗病毒转基因植物通常为杂合子，后代会出现性状分离，不可以稳定遗传，④错误；⑤几丁质酶基因和抗毒素合成基因均不属于抗病毒基因，属于抗真菌基因，⑤正确。综上所述，ACD不符合题意，B符合题意。故选B。
21. 下列关于生物工程相关知识的叙述，错误的是 ( )
A. 在基因工程操作中为了获得重组质粒，一般用同种限制酶，切出的末端相同
B. 若要生产转基因抗病水稻，可将目的基因先导入到农杆菌中，再转入水稻细胞
C. 植物体细胞杂交与动物细胞融合技术，都能克服远源杂交不亲和的障碍
D. 基因治疗主要是对具有缺陷的基因进行全面修复
【21题答案】
【答案】D
【解析】
【详解】A、在基因工程操作中为了获得重组质粒，一般用相同的限制性核酸内切酶，露出的黏性末端相同，便于DNA连接酶的连接，A正确；
B、将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，因此若要生产转基因抗病水稻，可将目的基因先导入到农杆菌中，再转入水稻细胞，B正确；
C、植物体细胞杂交与动物细胞融合技术，都能克服远源杂交不亲和的障碍，C正确；
D、基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，D错误。
故选D。
22. 下图为烟草植物组织培养过程的示意图。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 对过程①获取的根组织块应做较彻底的灭菌处理
B. 过程②应使用适宜的培养基，在有光环境中进行
C. 过程③发生脱分化，其实质是基因的选择性表达
D. 从根组织块到幼苗形成的过程说明植物根细胞具有全能性
【22题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】植物组织培养原理是植物细胞具有全能性。植物组织培养广义上又叫离体培养，是指从植物体上分离出符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
【详解】A、植物组织培养技术应在无菌条件下进行，①为获取外植体的过程，所以对过程①应做消毒处理，而彻底灭菌会导致组织细胞死亡，A错误；
B、过程②为脱分化，需要避光，而再分化过程需要光照，B错误；
C、过程③表示再分化，C错误；
D、由植物细胞到完整个体的过程能说明植物细胞具有全能性，D正确。
故选D。
23. 下列关于植物体细胞杂交的叙述，正确的是（ ）
A. 去掉细胞壁获得有活力的原生质体的唯一方法是酶解法
B. 因基因选择性表达导致原生质体和植物细胞形态不同
C. 杂种细胞再生细胞壁主要与线粒体和高尔基体有关
D. 有丝分裂和减数分裂是植物体细胞杂交过程中细胞分裂的主要方式
【23题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】植物体细胞杂交的步骤及方法：利用植物体细胞杂交技术培育杂种植物细胞，具体过程包括诱导植物细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程。
①通过酶解法去除细胞壁获得原生质体，植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，去壁所用的是纤维素酶和果胶酶；
②通过物理或化学方法诱导原生质体融合，原生质体融合所用的方法有物理法和化学法，物理法包括离心、振动、电激等，化学法一般是用聚乙二醇；
③再生细胞壁形成杂种细胞；
④先脱分化过程形成愈伤组织，再分化生成完整植株。
【详解】A、去掉细胞壁获得有活力的原生质体的常用方法是酶解法，A错误；
B、原生质体和植物细胞形态不同是因为原生质体无细胞壁，B错误；
C、高尔基体与植物细胞壁的形成有关，因此杂种细胞再生细胞壁主要与线粒体和高尔基体有关，C正确；
D、植物体细胞杂交过程中细胞分裂的方式为有丝分裂，D错误。
故选C。
24. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株，流程如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 过程②中常用方法是物理刺激、化学诱导和灭活的病毒介导
B. 原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇有利于保持原生质体完整
C. 融合的活细胞中有无叶绿体的存在，作为初步筛选杂种细胞的标志
D. 对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可筛选出具有抗性的杂种植株
【24题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】分析题图可知，过程①表示原生质体的制备，用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞的细胞壁，过程②表示诱导原生质体融合，体现了细胞膜的流动性。
【详解】A、过程②表示两个原生质体的融合的过程，通常采用的方法是是聚乙二醇（PEG）法、高Ca法、高pH值法和电融合法，A错误；
B、原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇用于维持渗透压，有利于保持原生质体完整，B正确；
C、观察融合的活细胞中有无叶绿体的存在，可以作为初步筛选杂种细胞的标志，C正确；
D、对杂种植株接种黑腐病菌，能正常生长的即为具有高抗性的杂种植株，D正确。
故选A。
25. 紫杉醇是紫杉细胞的次级代谢产物，能抑制细胞的有丝分裂，具有良好抗癌作用。利用植物组织培养技术，可从紫杉的愈伤组织中提取紫杉醇。用MS培养基培养紫杉愈伤组织时需加入IAA和6-BA（细胞分裂素），两种激素对细胞内紫杉醇含量的影响如下表。下列说法错误的是（ ）
IAA（mg·L-1）
6·BA（mg·L-1）
紫杉醇含量（10-6mol·L-1）
4
2
350
6
360
8
190
A. 植物的愈伤组织是具有分生能力的薄壁细胞
B. 外植体经脱分化和再分化形成愈伤组织
C. 紫杉醇通常取自愈伤组织细胞的液泡内
D. 相对而言，IAA和6-BA浓度比为3：1时利于紫杉醇的合成
【25题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。
【详解】A、植物的愈伤组织是已经脱分化的，具有分生能力的薄壁细胞，A正确；
B、外植体经脱分化过程形成愈伤组织，B错误；
C、紫杉醇作为常见的细胞产物，抗癌效果显著，通常取自愈伤组织的液泡，C正确；
D、由表格数据可知，IAA和6-BA浓度比为3：1时紫杉醇含量最多，故此浓度比有利于紫杉醇的合成，D正确。
故选B。
26. 甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中。相关叙述错误的是（ ）
A. 形成杂种植株时，杂种细胞除了可以被直接诱导出芽根外，还可以通过形成人工种子获得杂种植株
B. 细胞融合成功的标志是杂种细胞再生成细胞壁
C. 杂种细胞经过外源生长素和赤霉素的诱导，直接再分化成为杂种植株
D. 杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，并能通过父本进行传递
【26题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】1、人工种子是指以植物组织培养技术获得的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，人工种植在适宜的条件下同样能够萌发成幼苗，其生产过程不受季节、气候和地域的限制，并省去了占用大量土地制种的麻烦。
2、题图分析：该图为体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以用酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因，该过程的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【详解】A、杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导，先经过脱分化形成愈伤组织，再分化成为杂种植株，人工种子的形成也需要经过脱分化和再分化过程获得胚状体、不定芽等，因此，杂种细胞除了可以被直接诱导出芽根外，还可以通过形成人工种子获得杂种植株，A正确；
B、杂种细胞再生出细胞壁是细胞融合成功的标志，B正确；
C、杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导，脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，进一步成为杂种植株，C错误；
D、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，杂种植株细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，精子中具备一半核基因，并可通过父本（精子）进行传递，D正确。
故选C。
27. 植物体细胞杂交可克服远缘杂交不亲和的障碍，两种植物细胞融合后会导致一方的染色体被排出，若在细胞融合前染色体发生断裂，形成的染色体片段可能不会被全部排出，而是整合到另一个细胞的染色体上留存在杂种细胞中。如图表示培养耐盐小麦新品种过程。下列说法错误的是（ ）
A. ①过程使用纤维素酶和果胶酶获得具有活力的原生质体
B. ②过程使染色体变异，外源染色体整合其上避免排出融合细胞
C. ③过程用PEG诱导原生质体融合与细胞膜流动性有关
D. ④过程杂种植株可通过在盐碱地种植来筛选耐盐小麦植株
【27题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。
【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，①过程使用纤维素酶和果胶酶获得具有活力的原生质体，A正确；
B、②过程染色体发生结构变异，便于中间偃麦草断裂的染色体整合到普通小麦的染色体上，B 错误；
C、过程③为诱导原生质体融合，常采用化学法(PEG) 或物理法(振动、离心、电刺激），利用的原理是细胞膜的流动性，C 正确；
D、④过程杂种植株可通过在盐碱地种植来筛选耐盐小麦植株，D正确。
故选B。
28. 人工种子是人们模仿天然种子结构制造出来的生命有机体，它能像天然种子一样萌发生长。人工种子的核心部分——胚状体可以通过悬浮培养的芽尖细胞获得，也可以通过试管培养的花粉或胚囊获得，由此人们把胚状体分为“体细胞胚”和“花粉胚”。请据此判断下列说法不正确的是（ ）
A. 人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结籽困难、发芽率低等问题
B. 培育胚状体利用了植物组织培养技术
C. 同一种植物的“体细胞胚”和“花粉胚”的染色体的数目比为1︰1
D. 该项技术的成功应用利用了植物细胞的全能性
【28题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】1.人工种子通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子。
2.优点：不受季节限制；可以很方便运输和储存；不会造成遗传性状的改变。
3.植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。
【详解】A、人工种子具有很多优点，如解决有些作物品种繁殖能力差、结籽困难、发芽率低等问题，A正确；
B、胚状体的形成是离体的细胞经脱分化和再分化形成的，即利用了植物组织培养技术，B正确；
C、体细胞胚是由植物的体细胞经脱分化和再分化形成的，而花粉胚是由花粉（经减数分裂形成）经脱分化和再分化形成的，因此，同一种植物的体细胞胚和花粉胚的染色体组的数目比是2∶1，C错误；
D、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，D正确。
故选C。
【点睛】
29. 动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于
A. 培养基不同
B. 动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C. 动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
D. 动物细胞能够大量培养，而植物细胞不能
【29题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
【详解】动物细胞培养利用的液体培养基，植物组织培养利用的是固体培养基，A正确；动物细胞培养与植物组织培养过程中均需要灭菌处理，并且需要在无菌条件下进行，B错误；动植物细胞都可以传代培养，C错误；植物细胞可以培养成植株，更能培养成大量细胞，D错误。故选A。
【点睛】本题主要考查学生对知识的理解和分析能力。通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。当培养超过50代时，大多数的细胞已经衰老死亡，但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性，即癌变．此时的细胞被称为细胞系。
30. 植物体细胞杂交和动物细胞融合比较，正确的是
A. 诱导融合的方法完全相同 B. 所用的技术手段基本相同
C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞
【30题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：
项目
原理
细胞融合方法
诱导手段
用途
植物体细胞杂交
细胞膜的流动性，细胞的全能性
去除细胞壁后诱导原生质体融合
离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导
克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
动物细胞融合
细胞膜的流动性
使细胞分散后，诱导细胞融合
离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导
制备单克隆抗体的技术之一
【详解】A、植物体细胞杂交诱导融合的方法有物理法和化学法，动物细胞融合的诱导方法有物理法、化学法和生物法，A错误；B、两者所用的技术手不相同，植物体细胞杂交还需要采用植物组织培养技术，而动物细胞融合不需要，B错误；
C、两者所采用的原理不完全相同，植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性，而动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，C错误；
D、两者都能形成杂种细胞，D正确。
故选D。
31. 下列关于细胞工程的叙述，错误的是( )
A. 电刺激可以诱导植物原生质体的融合或动物细胞的融合
B. 用花粉离体培养获得的抗病植株，其细胞仍具有全能性
C. 通过体细胞杂交技术培育杂种植株的过程不涉及染色体数目变异
D. 小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖
【31题答案】
【答案】C
【解析】
【详解】A、电刺激可以诱导植物原生质体的融合或动物细胞的融合，A项正确；
B、用花粉离体培养获得的抗病植株，其细胞具有全能性，B项正确；
C、通过体细胞杂交技术培育杂种植株的过程涉及染色体组成倍增加，C项错误；
D、小鼠杂交瘤细胞能无限增殖，可离体培养增殖，D项正确。
故选C。
32. 下列有关动物细胞培养所需条件的叙述，错误的是（ ）
A. 为保证培养的动物细胞处于无菌，无毒的环境，培养液和培养用具等需要进行消毒处理
B. 动物细胞培养应在含95%空气和5%的恒温箱中培养，的作用是维持培养液的pH
C. 培养液中有糖类、氨基酸、无机盐、维生素等
D. 使用合成培养基时，应加入动物的血清等一些天然成分
【32题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】动物细胞培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素。无毒--定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。
（2）营养：
成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。
培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）
（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的， CO2主要作用是维持培养液的pH。
【详解】A、动物细胞培养也需要无菌、无毒的环境，培养液和培养用具等需要进行灭菌处理，A错误；
B、动物细胞培养需要一定的气体环境：95%空气和5%的CO2，5%的CO2能维持培养液pH，B正确；
C、用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，C正确；
D、使用合成培养基时，应加入动物的血清等一些天然成分，D正确。
故选A。
【点睛】
33. 动物细胞培养中需要经常转换培养基，以下对其原因的说明不符合实际的是（ ）
A. 正常细胞贴壁生长一段时间后会出现接触抑制现象，即只能形成单细胞层，而不能重叠
B. 由于考虑到氧气等的供应而在培养瓶中加入的培养基不是很多，会出现营养供给不足的现象
C. 活细胞产生的一些代谢产物对细胞自身有毒害作用，需要定时“转管”加以清除
D. 细胞长到一定阶段，换成促分化培养基，诱导产生各种组织器官或系统，直至产生动物新个体
【33题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】A、正常细胞贴壁生长一段时间后会出现接触抑制现象即只能形成单细胞层，而不能重叠，A正确；
B、由于考虑到氧气等供应而在培养瓶中加入的培养基不是很多，会出现营养供给不足现象，B正确；
C、由于活细胞中产生一些代谢产物对细胞自身有毒害作用，需要定时转管加以清除，C正确；
D、动物细胞的全能性受到限制，不能培养成动物个体，动物细胞培养的结果是细胞株、细胞系，D错误。
故选D。
点睛】
34. 如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。有关叙述正确的是（ ）
A. 动物细胞培养选用的培养材料大多为动物的受精卵
B. 原代培养和传代培养的分界点是曲线中B点
C. 细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸
D. 培养过程中细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
【34题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养指从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
【详解】A、动物细胞培养选用材料多为早期胚胎组织或幼龄动物的组织器官， A错误；
B、AB段细胞几乎生长停滞，可能发生了接触抑制，原代培养和传代培养的分界点是曲线中B点，B正确；
C、细胞培养过程中，培养液中通入5%的CO2是为了维持培养液的pH，C错误；
D、培养过程中，会出现细胞接触抑制，不会形成多层细胞，D错误。
故选B。
35. 下图为肾脏上皮细胞培养过程示意图，下列叙述不正确的是（ ）
A. 甲→乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B. 丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中进行原代培养
C. 丙和丁过程均会出现细胞贴壁和接触抑制现象
D. 丁过程是传代培养的细胞，该过程体现了动物细胞的全能性
【35题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】图甲操作是剪碎成肾脏组织块，乙为用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成的单个细胞悬液，丙图为转入培养液中进行原代培养的过程，该过程中细胞会表现为贴壁生长以及接触抑制的特点，丁图为将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞培养，该过程为传代培养过程，传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了，一般情况下，细胞传至10~50代时增殖会逐渐缓慢，以至完全停止。
【详解】A、甲→乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理获得单细胞悬液然后进行细胞培养，A正确；
B、由分析可知，丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中原代培养的过程，B正确；
C、丙过程为原代培养，会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象，C正确；
D、丁过程为传代培养，属于细胞培养，没有发育成一个完整个体，不能体现全能性，D错误。
故选D。
36. 下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是（ ）
A. 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个细胞结合形成一个细胞的过程
B. 动物细胞融合后形成的单核细胞称为杂交细胞
C. 常用的诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法，灭活病毒诱导法，紫外线照射等
D. 细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能
【36题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞融合：
（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞；
（2）诱导动物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等；
（3）动物细胞融合的意义：打破了生殖隔离，使远缘杂交成为可能；成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段；
（4）最主要的用途：制备单克隆抗体。
【详解】A、动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，一般为两个细胞的融合，A正确；
B、动物细胞融合后，原来两个或多个动物细胞的遗传信息重新形成一个单核细胞，称为杂交细胞，例如骨髓瘤细胞和浆细胞融合，形成杂交瘤细胞，B正确；
C、诱导动物细胞融合的方法有电融合法、聚乙二醇融合法、灭活病毒诱导法，不能用紫外线照射法，C错误；
D、细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，克服远缘杂交不亲和的障碍，使远缘杂交成为可能，D正确。
故选C。
37. 被誉为中国“克隆先驱”的童第周教授和美籍华人牛满江教授在20世纪60年代就开展了鱼类的核移植工作。他们取出鲤鱼囊胚期胚胎的细胞核，放入鲫鱼的去核受精卵中，部分异核卵发育成了“杂种鱼”，它们的口须和咽区像鲤鱼，而脊椎骨的数目像鲫鱼，侧线鳞片数为中间类型，正确的是（ ）
A. “杂种鱼”的出现反映出动物细胞具有全能性
B. “杂种鱼”与克隆猴的培育过程中都需要进行胚胎移植
C. “杂种鱼”的性状说明生物体有些性状受细胞质基因的控制
D. 本实验也可选择鲫鱼的去核体细胞作受体细胞
【37题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术，就叫做动物克隆。
【详解】A、“杂种鱼”的出现反映了动物细胞核具有全能性，不能反映动物细胞有全能性，A 错误；
B、克隆猴的培育过程中需要进行胚胎移植，“杂种鱼”体外孵化，不需要胚胎移植，B 错误；
C、“杂种鱼”的某些性状与提供去核受精卵的鲫鱼相同，说明生物体有些性状受细胞质基因的控制，C正确；
D、本实验不能选择鲫鱼的去核体细胞作受体细胞，因为受精卵细胞的细胞质中可能含有某些促进细胞核发挥全能性的物质，而体细胞中没有，D错误。
故选C。
38. 将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（ ）
A. B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
B. B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生抗体
C. 骨髓瘤细胞不能无限增殖，但可以产生抗体
D. 骨髓瘤细胞只有与B细胞融合，才能产生抗体
【38题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】
【详解】A、B淋巴细胞可产生抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞不产生抗体，但能无限增殖，A正确；
B、B淋巴细胞能产生抗体，与是否与骨髓瘤细胞融合无关，B错误；
C、骨髓瘤细胞能无限增殖，但不可以产生抗体，C错误；
D、骨髓瘤细胞不能产生抗体，D错误。
故选A。
【点睛】本题考查单克隆抗体的制备的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
39. 已知骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长，效应B细胞有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），但不能无限增殖。如图是单克隆抗体制备过程示意图，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 过程①中注射的抗原能与产生的单克隆抗体特异结合
B. 过程②得到的三种类型的细胞不能在HAT培养液中增殖
C. 过程③采用抗原—抗体反应进行特定杂交瘤细胞的筛选
D. 过程④获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体
【39题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】分析题图：图示表示单克隆抗体制备过程示意图，其中①表示给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应（图中A、B、C为三种浆细胞），②表示浆细胞和骨髓瘤细胞（D细胞）融合的过程，③表示筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，④表示克隆化培养过程。
【详解】A、过程①中注射的抗原能与产生的单克隆抗体特异结合，A正确；
B、过程②得到的三种类型的细胞都是杂交瘤细胞，都能在HAT培养液中增殖，B错误；
C、过程③采用抗原-抗体反应进行特定杂交瘤细胞的筛选，C正确；
D、过程④为克隆化培养，该过程获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体，D正确。
故选B。
40. 某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，有几处不正确（ ）
植物细胞工程
动物细胞工程
技术手段
植物细胞培养、植物体细胞杂交
动物细胞培养和融合、动物细胞核
移植等
特殊处理
机械法去除细胞壁
胰蛋白酶处理、制细胞悬浮液
融合方法
物理方法、化学方法
物理方法、化学方法、生物方法
典型应用
人工种子、杂种植物
单克隆抗体的制备
培养液区别
蔗糖是离体组织赖以生长的成分
动物血清不可缺少
A. 1 B. 2 C. 3 D. 4
【40题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】1、植物细胞工程的技术手段主要有植物组织培养和植物体细胞杂交，其中植物组织培养是植物细胞工程的基础。
2、动物细胞工程的技术手段主要有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植和核移植，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
【详解】①技术手段：植物细胞工程技术手段包括植物组织培养和植物体细胞杂交，动物细胞工程的技术包括动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植技术，正确；
②特殊处理：植物体细胞杂交时，需要用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁，动物细胞培养时需要用胰蛋白酶处理制备细胞悬浮液，错误；
③融合方法：诱导植物原生质体融合的方法包括物理方法和化学方法，而诱导动物细胞融合的方法还包括生物方法，正确；
④典型应用：植物组织培养技术可用于制备人工种子，植物体细胞杂交技术可用于种间杂交等；而动物细胞融合和动物细胞培养技术可用于制备单克隆抗体，正确；
⑤培养液区别：植物组织培养过程中利用蔗糖，而动物细胞培养时需要加入动物血清等天然成分，正确。
故选A。
二、非选择题
41. 如表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的切割位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：
限制酶
BamHⅠ
BclⅠ
Sau3AⅠ
HindⅢ
识别序列及切割位点
（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用__________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过________酶的作用形成重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于__________态的大肠杆菌中。
（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加__________。
（3）若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为__________，对该部位，这两种酶__________（填“都能”“都不能”或“只有一种能”）切开。
（4）假设所用的酶均可将切割位点完全切开，若用Sau3AⅠ切割图1质粒，可能获得__________种大小不同的DNA片段。
（5）常用PCR技术扩增目的基因，所用的引物组成为图2中__________。该PCR反应体系的主要成分应该包含扩增缓冲液（含Mg2+）、水、引物、模板DNA、__________和__________。
【41题答案】
【答案】 ①. BclⅠ和HindⅢ ②. DNA连接 ③. 感受 ④. 四环素 ⑤. 或 ⑥. 都不能 ⑦. 3 ⑧. 引物甲和引物丙 ⑨. 4种脱氧核糖核苷酸 ⑩. 热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）
【解析】
【分析】1、基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
2、理解基因工程的概念：基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术操作环境 生物体外操作对象 基因操作水平 DNA分子水平基本过程 剪切→拼接→导入→表达结果 人类需要的基因产物。
3、获取目的基因的方法主要有两种：
（1）从供体细胞的DNA中直接分离基因，最常用的方法是“鸟枪法”又叫“散弹射击法“；
（2）人工合成基因，这种方法有两条途径，一是以目的基因转录的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，再在酶的作用下合成双链DNA，即目的基因；另一条途径是蛋白质的氨基酸序列，推测出信使RNA序列，再推测出结构基因的核苷酸序列，然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成。
【详解】（1）选择的限制酶在目的基因的两侧都应该有切割位点，又因为用BamHⅠ酶会将两个标记基因都破坏，所以构建基因表达载体时只能选择BclI和HindⅢ对质粒和目的基因进行切割，露出两种不同的粘性末端，再利用DNA连接酶将两者定向连接。再将重组质粒导入感受态的大肠杆菌进行扩增。
（2）由于构建重组质粒的时候，氨苄青霉素抗性基因被破坏，而四环素的抗性基因没有被破坏，所以为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加四环素。
（3）根据表格中碱基分析，若BamHI酶切DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为或，对于该部位，这两种酶都不能切开。
（4）根据表格分析可知Sau3A I可以切割BclI和BamH I的切割位点，所以若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得3种大小不同的DNA片段。
（5）根据图2可知对目的基因进行扩增时的引物应该是引物甲和引物丙。该PCR反应体系的主要成分应该包含扩增缓冲液（含Mg2+）、水、引物、模板DNA、4种脱氧核糖核苷酸、热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）。
【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤的相关细节，能结合所学的知识准确答题，旨在考查考生信息获取的能力与知识的迁移运用能力。
42. 某水稻品种体内含有基因Q，该基因在水稻体细胞和精子中正常表达，但在卵细胞中该基因不能与RNA聚合酶结合而无法表达。为了获得基因Q能够表达的卵细胞，研究人员进行了相关研究。回答下列问题：
（1）为了获取基因Q中编码蛋白质的核苷酸序列，可从水稻___________细胞中提取总RNA，然后经逆转录后构建___________。
（2）将基因Q中编码蛋白质的序列与Luc基因(荧光素酶基因，荧光素酶能催化荧光素产生荧光)拼接成Q－Luc融合基因(融合基因中的Q和Luc基因都能独立表达)，拼接过程需要的酶是___________。将融合基因插入到Ti质粒的___________中，利用___________法可将融合基因转入水稻愈伤组织。
（3）与诱导愈伤组织的培养基相比，将愈伤组织培育成转基因植株时，培养基组成成分的主要区别是___________，培养条件的主要差异是___________。
（4）将转基因水稻培育成熟后，其卵细胞中的基因Q能够进行正常表达，推测可能的原因是________________。在分离并培养转基因水稻卵细胞的过程中，可以筛选出能够表达基因Q的卵细胞，筛选的方法是______________________。
【42题答案】
【答案】 ①. 体细胞或精子 ②. 基因文库（cDNA文库） ③. DNA连接酶 ④. T-DNA ⑤. 农杆菌转化 ⑥. 植物激素种类及比例不同 ⑦. 需要光照 ⑧. T-DNA的启动子可与卵细胞的RNA聚合酶结合 ⑨. 向培养基中加入荧光素，筛选出能产生荧光的细胞
【解析】
【分析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】（1）为了获取基因Q中编码蛋白质的核苷酸序列可从水稻体细胞或精子细胞中提取总RNA，然后经逆转录后构建基因文库（cDNA文库）然后找到目的基因。
（2）将基因Q中编码蛋白质的序列与Luc基因（荧光素酶基因，荧光素酶能催化荧光素产生荧光）拼接成Q-Luc融合基因（融合基因中的Q和Luc基因都能独立表达），拼接过程需要的酶是DNA连接酶。然后将融合基因插入到Ti质粒的T-DNA中，利用农杆菌转化法可将融合基因转入水稻愈伤组织，并与水稻细胞的染色体DNA整合在一起。
（3）与诱导愈伤组织的培养基相比，将愈伤组织培育成转基因植株时，需要将其转接到分化培养基中，该培养基组成成分中的植物激素种类及比例有差异，且培养过程中需要光照，因为叶绿素的形成需要光。
（4）将转基因水稻培育成熟后，其卵细胞中的基因Q能够进行正常表达，同时Luc基因也进行了表达，可能的原因是T-DNA的启动子可与卵细胞中的RNA聚合酶结合，进而目的基因表达成功。为此，在分离并培养转基因水稻卵细胞的过程中，可向培养基中加入荧光素，根据荧光是否出现，筛选出能够表达基因Q的卵细胞。
【点睛】熟知基因工程的原理和操作要点是解答本题的 关键，明确植物组织培养技术的原理及其相关的应用是解答本题的前提，掌握农杆菌转化法在植物基因工程中的应用并能够掌握植物组织培养技术的过程是解答本题的另一关键。
43. 科学家利用单克隆抗体技术，分别获得鼠抗体与人抗体，再将抗体进行改造，生产出效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答：
（1）培养骨髓瘤细胞时，需用___________________处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞，此外还应定期更换____________，以清除代谢产物。
（2）制备单克隆抗体时，先用特定的选择性培养基进行筛选，获得________________；然后对上述细胞进行抗体检测，选取___________________________的细胞进行克隆化培养；最终获得单克隆抗体，其优点是____________________________________________。
（3）有人提出：将经特定抗原刺激产生的B淋巴细胞的细胞核移植到去核骨髓瘤细胞中来产生单克隆抗体，该技术称为________________。
（4）改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠—人嵌合抗体，属于_______________（生物工程）的范畴。该过程要根据________________________，设计嵌合抗体的结构，最终对基因进行操作。
【43题答案】
【答案】①. 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） ②. 培养液 ③. 杂交瘤细胞 ④. 专一抗体检验阳性（或能产生专一抗体） ⑤. 特异性强、灵敏度高、可大量制备 ⑥. 动物体细胞核移植技术 ⑦. 蛋白质工程 ⑧. 预期的嵌合抗体功能
【解析】
【分析】1.单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。
2.蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。
【详解】（1）培养骨髓瘤细胞时，需要将所选取的组织细胞分散开，以利于细胞融合，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理离体组织细胞使之分散开，此外还应定期更换培养液，以清除代谢产物，有利于细胞的生长。
（2）根据分析可知，制备单克隆抗体时，因为细胞的融合过程是随机的，因此融合后需要先用特定的选择性培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞；然后对上述细胞进行抗体检测，选取专一抗体检验阳性（或能产生专一抗体）的细胞进行克隆化培养；最终获得单克隆抗体，单克隆抗体表现的优点为特异性强、灵敏度高、可大量制备。
（3）有人设计用体细胞核移植技术将经特定抗原刺激产生的B淋巴细胞的细胞核移植到去核骨髓瘤细胞中来产生单克隆抗体，这是获得单克隆抗体的新举措。
（4）从免疫的角度考虑，对人体来说鼠源抗体为抗原，若利用人的抗体与之嵌合，则排斥作用会减轻，对人体的副作用会减少，因此设计改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠—人嵌合抗体，这属于蛋白质工程的技术范畴。该过程首先需要根据预期的嵌合抗体功能，设计嵌合抗体的结构，然后推测相应的基因片段，最终对基因进行操作，因此该工程又叫做第二代基因工程。
【点睛】熟知单克隆抗体的制备过程及其原理是解答本题的关键，蛋白质工程的设计思路也是本题的考查点，掌握单克隆抗体的优点是解答本题的另一关键。
44. 植物细胞工程技术在作物育种上具有广泛的应用。回答下列问题：
（1）植物组织培养技术：在_______和人工控制的条件下，将离体的组织和细胞在特定培养基上先_______得到愈伤组织，再分化得到胚状体等，进而得到新植株。该过程的原理是 ______________
（2）植物原生质体培养技术：首先用_______酶去除植物细胞的细胞壁得到原生质体，然后向原生质体中导入抗病基因或含有抗病基因的染色体片段，转移至合适的环境中，在_______（填细胞器）的作用下再生细胞壁、形成愈伤组织、得到胚状体，最终发育成完整的植株。
（3）植物体细胞杂交技术：该技术是先用酶解法将两种不同植物的细胞壁去除，再添加 _______（填化学法）诱导两种原生质体相融合，再生出细胞壁后形成杂种细胞，经组织培养技术得到杂种植株。该项技术的优点是 ________ ，该技术可能不会按照人们的意愿表达出双亲的优良性状，其原因可能是___________。
【44题答案】
【答案】 ①. 无菌 ②. 脱分化 ③. 植物细胞的全能性 ④. 纤维素酶和果胶 ⑤. 高尔基体 ⑥. 聚乙二醇 ⑦. 克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍（或克服生殖隔离） ⑧. 不同物种的基因在表达时相互干扰，从而不能有序表达
【解析】
【分析】植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养，以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
【详解】（1）植物组织培养技术：在无菌和人工控制的条件下，让离体的组织和细胞在特定培养基上先脱分化得到愈伤组织，再分化得到胚状体、丛芽等，进而得到新植株。该过程的原理是植物细胞的全能性。
（2）植物原生质体培养技术：首先用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁得到原生质体，然后向原生质体中导人抗病基因或含有抗病基因的染色体片段，转移至合适的环境中，在高尔基体的作用下再生细胞壁、形成愈伤组织、得到胚状体，最终发育成完整的植株。
（3）植物体细胞杂交技术：该技术是先用酶解法将两种不同植物的细胞壁去除，再添加聚乙二醇（化学法）或离心、电刺激（物理法）诱导两种原生质体相融合，再生出细胞壁后形成杂种细胞，经组织培养技术得到杂种植株。该项技术的优点是克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍（或克服生殖隔离），该技术可能不会按照人们的意愿表达出双亲的优良性状，其原因可能是不同物种的基因在表达时相互干扰，从而不能有序表达。
【点睛】本题考查植物组织培养和基因工程的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程及条件等基础知识，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确作答。
西安中学2021—2022学年度第二学期期中考试
高二生物试题
一、选择题
1. 基因工程操作中，需要筛选和获取目的基因。下列关于目的基因的说法，不正确的是（ ）
A. 目的基因是指用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因
B. 目的基因都有自我复制能力
C. 可以根据相应的表达产物，从序列数据库中寻找目的基因
D. 目的基因可以人工合成，也可以利用PCR快速获取或扩增
【1题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】PCR一般指聚合酶链式反应。 聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。
【详解】A、目的基因主要是能合成相关蛋白质的基因，如胰岛素基因，也可以是调控因子，A正确；
B、目的基因通常不具有自我复制能力，B错误；
C、我们可以根据目的基因的碱基序列、功能、表达产物等信息，从基因文库中寻找目的基因，C正确；
D、目的基因可以人工合成（如DNA合成仪合成目的基因），也可以利用PCR快速获取或扩增，D正确。
故选B。
2. 限制性核酸内切酶是切割DNA的工具。有关描述不符合事实的是（ ）
A. 主要从原核生物中分离纯化出来
B. 能识别双链DNA分子的特定的核苷酸序列
C. 使特定部位的两个核苷酸间的磷酸二酯键断开
D. 切割产生的DNA片段末端称为黏性末端
【2题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】有关限制酶，考生可以从以下几方面把握：（1）主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特点：具有特异性，即能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）作用结果：形成黏性末端和平末端两种。
【详解】A、限制酶主要来源于原核生物，A正确；
B、限制酶具有专一性，能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，B正确；
C、限制酶能识别双链DNA分子特定的核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，C正确；
D、限制酶切割产生的DNA片段末端有两种形式，分别是黏性末端、平末端，D错误。
故选D。
3. 下列有关基因表达载体的叙述，不正确的是（ ）
A. 具有复制原点，使目的基因能在受体细胞内扩增
B. 具有启动子，作为多肽链合成的起始信号
C. 具有标记基因，有利于目的基因的初步检测
D. 具有目的基因，以获得特定的基因表达产物
【3题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】基因工程是狭义的遗传工程，基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定高效地表达。为了实现基因工程的目标，通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按照一定的程序进行操作。基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。
【详解】A、基因表达载体必须使目的基因能够在受体细胞内进行扩增，因此具有复制原点，A正确；
B、基因表达载体必须使目的基因能够在受体细胞内进行表达，具有启动子（启动转录），作为RNA合成的起始信号，B错误；
C、具有标记基因，有利于目的基因的初步检测，如抗生素抗性基因，含目的基因的受体细胞在含抗生素的培养基上能生长，C正确；
D、构建基因表达载体的目的是为了使目的基因在受体细胞内高效、稳定地表达，因此具有目的基因，以获得特定的基因表达产物，D正确。
故选B。
4. 下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ）
A. DNA连接酶使粘性末端的碱基进行碱基互补配对
B. 限制性核酸内切酶可用于目的基因的获得
C. 目的基因需由载体导入受体细胞
D. 化学方法合成目的基因不需要限制性核酸内切酶
【4题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；
DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】A、DNA连接酶将黏性末端的磷酸二酯键连接起来，A错误；
B、限制性核酸内切酶可用于目的基因的获得和基因表达载体的构建，B正确；
C、目的基因需要与运载体构建成基因表达载体，然后导入受体细胞，C正确；
D、化学方法合成目的基因不需要限制性核酸内切酶，D正确。
故选A。
5. 下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中，不正确的是（ ）
A. cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有某种生物的全部基因
B. 如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同
C. cDNA文库中的基因都没有启动子
D. 一种生物的cDNA文库可以有许多种，但基因组文库往往只有一种
【5题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】基因文库包括基因组文库和部分基因文库。其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，如：cDNA文库。以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。
【详解】A、由分析中定义可知，cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有某种生物的全部基因，A正确；
B、mRNA是由基因中的外显子转录形成的，因此cDNA文库中的基因不包含启动子和内含子等结构，与该生物的基因组文库中的基因结构不同，B错误；
C、cDNA文库中的基因都没有启动子，只包含基因中的外显子，C正确；
D、由于cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，因此该种基因文库可能有多种，而基因组文库中含有某种生物的全部基因，因此只有一种，D正确。
故选B。
6. 下列有关目的基因导入受体细胞的说法中，正确的是
A. 大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钠离子处理
B. 通过显微注射法可将目的基因直接导入受体细胞中
C. 将目的基因导入受体细胞，并在受体细胞维持稳定和表达的过程，称为转化
D. 可用基因枪法将目的基因导入动物受精卵中
【6题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】1、将目基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等；
2、将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术，此方法的受体细胞多是受精卵；
3、将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
【详解】A、大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钙离子处理，使其成为感受态细胞，A错误；
B、目的基因需要和运载体结合后形成重组DNA分子才能注入，B错误；
C、目的基因导入受体细胞，并在细胞内维持稳定和表达的过程称为转化， C正确；
D、基因枪法是将目的基因导入植物细胞的方法，将目的基因导入动物细胞常用显微注射法，D错误；
故选C。
【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确判断各选项。
7. 基因工程的基本操作步骤如下图所示，其中甲、乙、丙表示结构，①表示过程。下列相关叙述正确的是
A. 甲、乙分别表示含有抗性基因的质粒、受体细胞
B. ①过程表示用有抗生素的培养基筛选含目的基因的受体细胞
C. 丙可以是单细胞、器官、植物或动物等
D. 若要使丙表达人的蛋白质，则乙是能分裂的人体细胞
【7题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】
【详解】A、甲为运载体，可能是质粒，也可能是噬菌体或动植物病毒，A错误；
B、①为筛选含有目的基因的受体细胞的过程，由于标记基因不一定是抗性基因，因此该过程不一定是用含有抗生素的培养基来筛选含目的基因的受体细胞，也可能是通过荧光标记来筛选含目的基因的受体细胞，B错误；
C、基因工程的受体细胞可以是微生物细胞、植物细胞或动物细胞，因此丙可以是单细胞、器官、植物或动物等，C正确；
D、若要使丙表达人的蛋白质，则乙应该是其他生物的细胞，D错误。
故选C
8. 如图为某一重组质粒示意图，下列叙述错误的是（ ）
A. 用限制酶EcoRV处理该质粒得到的分子共含有4个游离的磷酸基团
B. 同时用限制酶EcoRV和BamHI处理该质粒可得到3个双链DNA片段
C. 在获得目的基因时应该使用的限制酶是BamHI
D. 将受体细胞培养于含有卡那霉素的培养基中，可筛选出含有目的基因的细胞
【8题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】构建基因表达载体其目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。
【详解】A、限制酶EcoRV在图中含有两个切点，用限制酶EcoRV处理该质粒可得到2个线形DNA分子，每个线形DNA分子含有两个游离的磷酸基团，共含有4个游离的磷酸基团，A正确；
B、限制酶EcoRⅤ和BamHⅠ酶在图中共含有3个切点，同时用它们处理该质粒可得到3个双链DNA分子，B正确；
C、在获得该重组质粒时，不应该使用限制酶BamHⅠ，若使用该限制酶，则会破坏目的基因，C错误；
D、重组质粒含有卡那霉素抗性基因，故将受体细胞培养于含有卡那霉素的培养基中，可筛选出含有目的基因的细胞，D正确。
故选C。
9. 科研人员通过PCR获得肝细胞特异性启动子——白蛋白启动子，将该启动子与Cre重组酶基因结合构建表达载体，培育出在肝细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠。下列叙述正确的是
A. 将该表达载体导入肝细胞以获得转基因小鼠
B. PCR获得白蛋白启动子需设计特异性的引物
C. 构建该表达载体需要限制酶和DNA聚合酶
D. 通过核酸分子杂交技术检测目的基因是否完成表达
【9题答案】
【答案】B
【解析】
【详解】将该表达载体导入受精卵以获得转基因小鼠，A错误；PCR技术需设计特异性的引物，B正确；构建该表达载体需要限制酶和DNA连接酶，C错误；检测目的基因是否完成表达常用抗原抗体杂交技术，D错误。
10. 多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，PCR一般经历下列过程：95℃下使模板DNA变性→55℃下复性→72℃下引物链延伸。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是（ ）
A. 变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，在细胞中也可利用解旋酶实现
B. 复性过程中引物与DNA模板链的结合遵循碱基互补配对原则
C. 延伸过程中需要耐热的DNA聚合酶、四种核糖核苷酸、一定的缓冲液
D. m个DNA分子经过n轮循环后，理论上一共可以得到m·2n个DNA分子
【10题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】阅读题干可知，本题的知识点是PCR反应的原理、DNA分子体内复制与多聚酶链式反应扩增DNA片段的异同点等，先梳理相关知识点，然后分析选项进行解答。
【详解】A、多聚酶链式反应扩增DNA片段时，DNA变性过程是通过控制温度打开双链DNA分子中的氢键形成单链结构，而在细胞内是通过DNA解旋酶完成的，A正确；
B、复性过程中，引物的核苷酸序列上的碱基与单链DNA分子上的核苷酸序列的碱基的结合，遵循碱基互补配对原则，B正确；
C、延伸过程中需要耐热的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、一定的缓冲液，C错误；
D、PCR技术的原理是双链DNA分子的复制，因此m个DNA分子经过n轮循环后，理论上一共可以得到m·2n个DNA分子，D正确。
故选C。
11. 用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（ ）
A. 如图中两种酶识别的核苷酸序列不同
B. 如图中酶切产物可用于构建重组DNA
C. 泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物
D. 图中被酶切的DNA片段是单链DNA
【11题答案】
【答案】D
【解析】
【详解】【分析】该题考查DNA的结构、限制酶的特点和功能等。DNA一般是双螺旋结构；限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割。
【详解】限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，由电泳图可知XhoI和SalI两种酶分别切割时，识别的序列不同，A正确；同种限制酶切割出的DNA片段，具有相同的粘性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，B正确；Sal I将DNA片段切成4段，Xho I将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道①为Sal I，泳道②为Xho I，C正确；限制酶切割双链DNA，酶切后的DNA片段仍然是双链DNA，D错误，所以选D。
【点睛】注意图1两种限制酶的识别位点数量，Sal I有3个识别位点，能将DNA片段切成4段，Xho I有2个识别位点，能将DNA片段切成3段。
12. 为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞。下列操作与实验目的不符的是（ ）
A. 用限制酶BsaB I和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因
B. 与只用Kpn I相比，Kpn I和Xho I处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确
C. 将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞
D. 用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中
【12题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】
1、基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。
2、基因工程的基本操作程序：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。
【详解】A、雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）均有BsaB I酶切位点，所以用限制酶BsaB I和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因，A不符合题意；
B、图中质粒与ACA-GNA上都含有KpnⅠ和XhoⅠ的酶切位点，与只用KpnI相比，KpnI和XhoⅠ处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确，B不符合题意；
C、由于重组质粒含有卡那霉素的抗性基因，故将棉花细胞接种在含卡那霉素的培养基上可筛选出转基因细胞，C符合题意；
D、根据GNA-ACA融合基因的两端序列设计合适的引物，可以利用PCR技术检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中，D不符合题意。
故选C。
13. 为培育抗旱玉米，研究人员构建了含有抗旱基因E的重组Ti质粒，采用农杆菌转化法将基因E转入玉米幼胚组织细胞中，筛选出抗旱的转基因玉米。下列相关叙述错误的（ ）
A. 利用基因E的mRNA反转录为cDNA，通过PCR可获得大量目的基因
B. 将重组Ti质粒置于经CaCl2处理的农杆菌悬液中，可获得转化的农杆菌
C. 用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞后经组织培养获得转基因植株
D. 重组Ti质粒进入玉米幼胚组织细胞后与染色体整合并通过细胞增殖遗传给后代
【13题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】1、将目的基因导入受体细胞时根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法，将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法，将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
2、目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因常用DNA分子杂交技术，②检测目的基因是否转录出了mRNA，常用分子杂交技术，③检测目的基因是否翻译成蛋白质，常用抗原抗体杂交技术，个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、提取该微生物mRNA，在反转录酶的催化作用下，反转录为cDNA，再通过PCR可获得大量目的基因，A正确；
B、农杆菌经钙离子处理后，成为感受态，使其易于吸收周围的DNA分子，所以将重组质粒置于经CaCl2处理的农杆菌悬液中，可获得转化的农杆菌，B正确；
C、用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞后经过组织胚可以获得转基因植株，C正确；
D、重组Ti质粒进入玉米幼胚组织细胞后整合到DNA上，并通过细胞增殖遗传给后代，D错误。
故选D。
14. 如图为蛋白质工程操作的基本思路，下列叙述不正确的是 （ ）
A. 代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤
B. 代表中心法则内容的是①②
C. ①代表转录,②代表翻译,④代表分子设计,⑤代表DNA合成
D. 蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计
【14题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】本题考查蛋白质工程的基本思路，旨在考查考生的识记能力，属于考纲理解能力的考查。天然蛋白质合成的过程是按照中心法则进行的，而蛋白质工程的基本途径与之相反，即从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸序列(基因)。
【详解】代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤，A正确；代表中心法则内容的是①②，B正确；①代表转录，②代表翻译，④代表分子设计，⑤代表 DNA合成，C正确；蛋白质工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计，通过基因合成或修饰实现，D错误。
【点睛】解答此题需要理解中心法则和蛋白质结构的知识，熟记教材相关知识是解题关键。
15. 蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质的主要原因是（ ）
A. 缺乏改造蛋白质所必需的工具酶
B. 改造基因易于操作且改造后能够遗传
C. 人类对大多数蛋白质的高级结构知之甚少
D. 蛋白质中氨基酸的排列顺序千变万化，操作难度大
【15题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物系统，这个生物系统可以是转基因微生物、转基因植物、转基因动物，甚至可以是细胞系统。
【详解】蛋白质工程中，对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，若直接对蛋白质进行改造，工作量过大，改造的蛋白质数量有限，难以保证生产的需要；而通过基因修饰或基因合成来完成对蛋白质的改造，则易于操作且改造后能够遗传，生产的蛋白质量能保证生产的需要，所以B正确，ACD错误。
故选B。
16. 基因工程自20世纪70年代兴起后得到了飞速发展，目前已经成为生物科学的核心技术，下列有关基因工程的应用的描述正确的是（ ）
A. 利用农杆菌转化法培育得到的转基因植物，可能会引起基因污染
B. 从人类基因组文库中获得胰岛素基因导入大肠杆菌，可获得具生物学功能的胰岛素
C. 用基因枪法将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，可培育出产低乳糖牛乳的奶牛
D. 若将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者进行基因治疗，该基因可遗传给子代
【16题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】基因工程是指按照人类的愿望，将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载体重组后转入细胞内进行扩增，并表达产生所需蛋白质的技术，其原理是基因重组。
【详解】A、农杆菌转化法把目的基因导入到受体细胞的染色体DNA上，目的基因有可能通过减数分裂进入精子，若果精子与野生型同种生物的卵细胞受精则会造成基因污染，A正确；
B、从人类基因组文库中获得胰岛素基因有内含子，在大肠杆菌中，其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出胰岛素， B错误；
C、动物基因工程常用的是显微注射技术，基因枪法属于植物转基因方法之一，C错误；
D、由于此处基因治疗是把表达载体导入淋巴细胞，而淋巴细胞不会产生配子，故目的基因不会传给子代个体，D错误。
故选A。
17. 下列有关基因工程的成果及应用的说法中，正确的是（ ）
A. 用基因工程的方法培育出的抗虫植物也能抗病毒
B. 用转基因动物作为器官移植的供体时，导入的是调节因子，不是目的基因
C. 基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物
D. 目前，在发达国家，基因治疗已用于临床实践
【17题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】基因工程是指按人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外重组DNA分子和转基因技术，获得人们需要的新的生物类型和生物产品。其基因改变的方向是认为决定的。
【详解】基因工程培育的抗虫植物只含有抗虫特性，不能抗病毒，A选项错误；用转基因动物作为器官移植的供体时，导入的调节因子也属于目的基因，可以抑制抗原合成，B选项错误；基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物，C选项正确；目前基因治疗还处于初期的临床试验阶段，D选项错误。
【点睛】用转基因动物作为器官移植的供体时，可将器官供体基因组导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆器官。
18. 采用基因工程技术培育转基因羊，使其能合成人凝血因子且只存在于乳汁中。下列有关叙述，正确的是
A. 该过程的核心技术是获取人凝血因子基因
B. 显微注射前需要将含有人凝血因子基因的表达载体提纯
C. 在该转基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺细胞中
D. 人凝血因子基因与载体的结合不涉及碱基互补配对
【18题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。其中人工合成目的基因、基因表达载体的构建、目的基因的检测都进行碱基互补配对原则。基因工程的核心是基因表达载体的构建。
【详解】基因工程的核心技术是构建基因表达载体，A错误；将目的基因导入受体细胞之前需要构建基因表达载体，显微注射前需要将含有人凝血因子基因的表达载体提纯，B正确；用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，所形成的转基因羊中，人凝血因子基因存在于所有的体细胞中，C错误；人凝血因子基因与载体的结合涉及碱基互补配对，D错误。
故选B。
19. 下列关于基因工程技术应用的叙述中，错误的是（ ）
A. 基因工程技术可定向改良农作物的某些品质
B. 利用细菌代谢旺盛的特点生产基因工程药物
C. 运用基因工程技术让牛合成并分泌人类抗体
D. 噬菌体作为载体可以将重组 DNA 导入动物细胞获得转基因动物
【19题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】转基因技术是指运用科学手段从某种生物中提取所需要的基因，将其转入另一种生物中，使与另一种生物的基因进行重组，从而产生特定的变异性状。利用转基因技术可以改变动植物性状，培育新品种。也可以利用其它生物体培育出期望的生物制品，用于医药、食品等方面。
【详解】A、由分析可知，基因工程技术可定向改良农作物的某些品质，A正确；
B、利用细菌代谢旺盛的特点将细菌利用基因工程手段改造成工程菌，生产基因工程药物，B正确；
C、运用基因工程技术经所需抗体的相关基因导入牛的受精卵中，达到让牛合成并分泌人类抗体的目的，C正确；
D、噬菌体是细菌病毒，不能作为载体将重组 DNA 导入动物细胞，D错误。
故选D。
20. 下列有关抗病毒转基因植物的叙述中，正确的有几项：
①抗病毒转基因植物可以抵抗所有病毒②抗病毒转基因植物对病毒的抗性具有局限性或特异性③抗病毒转基因植物可以抗害虫④抗病毒转基因植物可以稳定遗传，不会变异⑤几丁质酶基因和抗毒素合成基因均不属于抗病毒基因
A. 1项 B. 2项 C. 3项 D. 4项
【20题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】植物基因工程的应用：抗虫转基因植物、抗病转基因植物、抗逆转基因植物、利用转基因改良植物的品质。
【详解】①抗病毒转基因植物只能抵抗某些病毒，①错误；②抗病毒转基因植物对病毒的抗性具有局限性或特异性，②正确；③抗病毒转基因植物不可以抗害虫，③错误；④抗病毒转基因植物通常为杂合子，后代会出现性状分离，不可以稳定遗传，④错误；⑤几丁质酶基因和抗毒素合成基因均不属于抗病毒基因，属于抗真菌基因，⑤正确。综上所述，ACD不符合题意，B符合题意。故选B。
21. 下列关于生物工程相关知识的叙述，错误的是 ( )
A. 在基因工程操作中为了获得重组质粒，一般用同种限制酶，切出的末端相同
B. 若要生产转基因抗病水稻，可将目的基因先导入到农杆菌中，再转入水稻细胞
C. 植物体细胞杂交与动物细胞融合技术，都能克服远源杂交不亲和的障碍
D. 基因治疗主要是对具有缺陷的基因进行全面修复
【21题答案】
【答案】D
【解析】
【详解】A、在基因工程操作中为了获得重组质粒，一般用相同的限制性核酸内切酶，露出的黏性末端相同，便于DNA连接酶的连接，A正确；
B、将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，因此若要生产转基因抗病水稻，可将目的基因先导入到农杆菌中，再转入水稻细胞，B正确；
C、植物体细胞杂交与动物细胞融合技术，都能克服远源杂交不亲和的障碍，C正确；
D、基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，D错误。
故选D。
22. 下图为烟草植物组织培养过程的示意图。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 对过程①获取的根组织块应做较彻底的灭菌处理
B. 过程②应使用适宜的培养基，在有光环境中进行
C. 过程③发生脱分化，其实质是基因的选择性表达
D. 从根组织块到幼苗形成的过程说明植物根细胞具有全能性
【22题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】植物组织培养原理是植物细胞具有全能性。植物组织培养广义上又叫离体培养，是指从植物体上分离出符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
【详解】A、植物组织培养技术应在无菌条件下进行，①为获取外植体的过程，所以对过程①应做消毒处理，而彻底灭菌会导致组织细胞死亡，A错误；
B、过程②为脱分化，需要避光，而再分化过程需要光照，B错误；
C、过程③表示再分化，C错误；
D、由植物细胞到完整个体的过程能说明植物细胞具有全能性，D正确。
故选D。
23. 下列关于植物体细胞杂交的叙述，正确的是（ ）
A. 去掉细胞壁获得有活力的原生质体的唯一方法是酶解法
B. 因基因选择性表达导致原生质体和植物细胞形态不同
C. 杂种细胞再生细胞壁主要与线粒体和高尔基体有关
D. 有丝分裂和减数分裂是植物体细胞杂交过程中细胞分裂的主要方式
【23题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】植物体细胞杂交的步骤及方法：利用植物体细胞杂交技术培育杂种植物细胞，具体过程包括诱导植物细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程。
①通过酶解法去除细胞壁获得原生质体，植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，去壁所用的是纤维素酶和果胶酶；
②通过物理或化学方法诱导原生质体融合，原生质体融合所用的方法有物理法和化学法，物理法包括离心、振动、电激等，化学法一般是用聚乙二醇；
③再生细胞壁形成杂种细胞；
④先脱分化过程形成愈伤组织，再分化生成完整植株。
【详解】A、去掉细胞壁获得有活力的原生质体的常用方法是酶解法，A错误；
B、原生质体和植物细胞形态不同是因为原生质体无细胞壁，B错误；
C、高尔基体与植物细胞壁的形成有关，因此杂种细胞再生细胞壁主要与线粒体和高尔基体有关，C正确；
D、植物体细胞杂交过程中细胞分裂的方式为有丝分裂，D错误。
故选C。
24. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株，流程如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 过程②中常用方法是物理刺激、化学诱导和灭活的病毒介导
B. 原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇有利于保持原生质体完整
C. 融合的活细胞中有无叶绿体的存在，作为初步筛选杂种细胞的标志
D. 对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可筛选出具有抗性的杂种植株
【24题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】分析题图可知，过程①表示原生质体的制备，用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞的细胞壁，过程②表示诱导原生质体融合，体现了细胞膜的流动性。
【详解】A、过程②表示两个原生质体的融合的过程，通常采用的方法是是聚乙二醇（PEG）法、高Ca法、高pH值法和电融合法，A错误；
B、原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇用于维持渗透压，有利于保持原生质体完整，B正确；
C、观察融合的活细胞中有无叶绿体的存在，可以作为初步筛选杂种细胞的标志，C正确；
D、对杂种植株接种黑腐病菌，能正常生长的即为具有高抗性的杂种植株，D正确。
故选A。
25. 紫杉醇是紫杉细胞的次级代谢产物，能抑制细胞的有丝分裂，具有良好抗癌作用。利用植物组织培养技术，可从紫杉的愈伤组织中提取紫杉醇。用MS培养基培养紫杉愈伤组织时需加入IAA和6-BA（细胞分裂素），两种激素对细胞内紫杉醇含量的影响如下表。下列说法错误的是（ ）
IAA（mg·L-1）
6·BA（mg·L-1）
紫杉醇含量（10-6mol·L-1）
4
2
350
6
360
8
190
A. 植物的愈伤组织是具有分生能力的薄壁细胞
B. 外植体经脱分化和再分化形成愈伤组织
C. 紫杉醇通常取自愈伤组织细胞的液泡内
D. 相对而言，IAA和6-BA浓度比为3：1时利于紫杉醇的合成
【25题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。
【详解】A、植物的愈伤组织是已经脱分化的，具有分生能力的薄壁细胞，A正确；
B、外植体经脱分化过程形成愈伤组织，B错误；
C、紫杉醇作为常见的细胞产物，抗癌效果显著，通常取自愈伤组织的液泡，C正确；
D、由表格数据可知，IAA和6-BA浓度比为3：1时紫杉醇含量最多，故此浓度比有利于紫杉醇的合成，D正确。
故选B。
26. 甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中。相关叙述错误的是（ ）
A. 形成杂种植株时，杂种细胞除了可以被直接诱导出芽根外，还可以通过形成人工种子获得杂种植株
B. 细胞融合成功的标志是杂种细胞再生成细胞壁
C. 杂种细胞经过外源生长素和赤霉素的诱导，直接再分化成为杂种植株
D. 杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，并能通过父本进行传递
【26题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】1、人工种子是指以植物组织培养技术获得的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，人工种植在适宜的条件下同样能够萌发成幼苗，其生产过程不受季节、气候和地域的限制，并省去了占用大量土地制种的麻烦。
2、题图分析：该图为体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以用酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因，该过程的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【详解】A、杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导，先经过脱分化形成愈伤组织，再分化成为杂种植株，人工种子的形成也需要经过脱分化和再分化过程获得胚状体、不定芽等，因此，杂种细胞除了可以被直接诱导出芽根外，还可以通过形成人工种子获得杂种植株，A正确；
B、杂种细胞再生出细胞壁是细胞融合成功的标志，B正确；
C、杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导，脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，进一步成为杂种植株，C错误；
D、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，杂种植株细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，精子中具备一半核基因，并可通过父本（精子）进行传递，D正确。
故选C。
27. 植物体细胞杂交可克服远缘杂交不亲和的障碍，两种植物细胞融合后会导致一方的染色体被排出，若在细胞融合前染色体发生断裂，形成的染色体片段可能不会被全部排出，而是整合到另一个细胞的染色体上留存在杂种细胞中。如图表示培养耐盐小麦新品种过程。下列说法错误的是（ ）
A. ①过程使用纤维素酶和果胶酶获得具有活力的原生质体
B. ②过程使染色体变异，外源染色体整合其上避免排出融合细胞
C. ③过程用PEG诱导原生质体融合与细胞膜流动性有关
D. ④过程杂种植株可通过在盐碱地种植来筛选耐盐小麦植株
【27题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。
【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，①过程使用纤维素酶和果胶酶获得具有活力的原生质体，A正确；
B、②过程染色体发生结构变异，便于中间偃麦草断裂的染色体整合到普通小麦的染色体上，B 错误；
C、过程③为诱导原生质体融合，常采用化学法(PEG) 或物理法(振动、离心、电刺激），利用的原理是细胞膜的流动性，C 正确；
D、④过程杂种植株可通过在盐碱地种植来筛选耐盐小麦植株，D正确。
故选B。
28. 人工种子是人们模仿天然种子结构制造出来的生命有机体，它能像天然种子一样萌发生长。人工种子的核心部分——胚状体可以通过悬浮培养的芽尖细胞获得，也可以通过试管培养的花粉或胚囊获得，由此人们把胚状体分为“体细胞胚”和“花粉胚”。请据此判断下列说法不正确的是（ ）
A. 人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结籽困难、发芽率低等问题
B. 培育胚状体利用了植物组织培养技术
C. 同一种植物的“体细胞胚”和“花粉胚”的染色体的数目比为1︰1
D. 该项技术的成功应用利用了植物细胞的全能性
【28题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】1.人工种子通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子。
2.优点：不受季节限制；可以很方便运输和储存；不会造成遗传性状的改变。
3.植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。
【详解】A、人工种子具有很多优点，如解决有些作物品种繁殖能力差、结籽困难、发芽率低等问题，A正确；
B、胚状体的形成是离体的细胞经脱分化和再分化形成的，即利用了植物组织培养技术，B正确；
C、体细胞胚是由植物的体细胞经脱分化和再分化形成的，而花粉胚是由花粉（经减数分裂形成）经脱分化和再分化形成的，因此，同一种植物的体细胞胚和花粉胚的染色体组的数目比是2∶1，C错误；
D、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，D正确。
故选C。
【点睛】
29. 动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于
A. 培养基不同
B. 动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C. 动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
D. 动物细胞能够大量培养，而植物细胞不能
【29题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
【详解】动物细胞培养利用的液体培养基，植物组织培养利用的是固体培养基，A正确；动物细胞培养与植物组织培养过程中均需要灭菌处理，并且需要在无菌条件下进行，B错误；动植物细胞都可以传代培养，C错误；植物细胞可以培养成植株，更能培养成大量细胞，D错误。故选A。
【点睛】本题主要考查学生对知识的理解和分析能力。通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。当培养超过50代时，大多数的细胞已经衰老死亡，但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性，即癌变．此时的细胞被称为细胞系。
30. 植物体细胞杂交和动物细胞融合比较，正确的是
A. 诱导融合的方法完全相同 B. 所用的技术手段基本相同
C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞
【30题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：
项目
原理
细胞融合方法
诱导手段
用途
植物体细胞杂交
细胞膜的流动性，细胞的全能性
去除细胞壁后诱导原生质体融合
离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导
克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
动物细胞融合
细胞膜的流动性
使细胞分散后，诱导细胞融合
离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导
制备单克隆抗体的技术之一
【详解】A、植物体细胞杂交诱导融合的方法有物理法和化学法，动物细胞融合的诱导方法有物理法、化学法和生物法，A错误；B、两者所用的技术手不相同，植物体细胞杂交还需要采用植物组织培养技术，而动物细胞融合不需要，B错误；
C、两者所采用的原理不完全相同，植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性，而动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，C错误；
D、两者都能形成杂种细胞，D正确。
故选D。
31. 下列关于细胞工程的叙述，错误的是( )
A. 电刺激可以诱导植物原生质体的融合或动物细胞的融合
B. 用花粉离体培养获得的抗病植株，其细胞仍具有全能性
C. 通过体细胞杂交技术培育杂种植株的过程不涉及染色体数目变异
D. 小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖
【31题答案】
【答案】C
【解析】
【详解】A、电刺激可以诱导植物原生质体的融合或动物细胞的融合，A项正确；
B、用花粉离体培养获得的抗病植株，其细胞具有全能性，B项正确；
C、通过体细胞杂交技术培育杂种植株的过程涉及染色体组成倍增加，C项错误；
D、小鼠杂交瘤细胞能无限增殖，可离体培养增殖，D项正确。
故选C。
32. 下列有关动物细胞培养所需条件的叙述，错误的是（ ）
A. 为保证培养的动物细胞处于无菌，无毒的环境，培养液和培养用具等需要进行消毒处理
B. 动物细胞培养应在含95%空气和5%的恒温箱中培养，的作用是维持培养液的pH
C. 培养液中有糖类、氨基酸、无机盐、维生素等
D. 使用合成培养基时，应加入动物的血清等一些天然成分
【32题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】动物细胞培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素。无毒--定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。
（2）营养：
成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。
培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）
（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的， CO2主要作用是维持培养液的pH。
【详解】A、动物细胞培养也需要无菌、无毒的环境，培养液和培养用具等需要进行灭菌处理，A错误；
B、动物细胞培养需要一定的气体环境：95%空气和5%的CO2，5%的CO2能维持培养液pH，B正确；
C、用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，C正确；
D、使用合成培养基时，应加入动物的血清等一些天然成分，D正确。
故选A。
【点睛】
33. 动物细胞培养中需要经常转换培养基，以下对其原因的说明不符合实际的是（ ）
A. 正常细胞贴壁生长一段时间后会出现接触抑制现象，即只能形成单细胞层，而不能重叠
B. 由于考虑到氧气等的供应而在培养瓶中加入的培养基不是很多，会出现营养供给不足的现象
C. 活细胞产生的一些代谢产物对细胞自身有毒害作用，需要定时“转管”加以清除
D. 细胞长到一定阶段，换成促分化培养基，诱导产生各种组织器官或系统，直至产生动物新个体
【33题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】A、正常细胞贴壁生长一段时间后会出现接触抑制现象即只能形成单细胞层，而不能重叠，A正确；
B、由于考虑到氧气等供应而在培养瓶中加入的培养基不是很多，会出现营养供给不足现象，B正确；
C、由于活细胞中产生一些代谢产物对细胞自身有毒害作用，需要定时转管加以清除，C正确；
D、动物细胞的全能性受到限制，不能培养成动物个体，动物细胞培养的结果是细胞株、细胞系，D错误。
故选D。
点睛】
34. 如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。有关叙述正确的是（ ）
A. 动物细胞培养选用的培养材料大多为动物的受精卵
B. 原代培养和传代培养的分界点是曲线中B点
C. 细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸
D. 培养过程中细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
【34题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养指从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
【详解】A、动物细胞培养选用材料多为早期胚胎组织或幼龄动物的组织器官， A错误；
B、AB段细胞几乎生长停滞，可能发生了接触抑制，原代培养和传代培养的分界点是曲线中B点，B正确；
C、细胞培养过程中，培养液中通入5%的CO2是为了维持培养液的pH，C错误；
D、培养过程中，会出现细胞接触抑制，不会形成多层细胞，D错误。
故选B。
35. 下图为肾脏上皮细胞培养过程示意图，下列叙述不正确的是（ ）
A. 甲→乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B. 丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中进行原代培养
C. 丙和丁过程均会出现细胞贴壁和接触抑制现象
D. 丁过程是传代培养的细胞，该过程体现了动物细胞的全能性
【35题答案】
【答案】D
【解析】
【分析】图甲操作是剪碎成肾脏组织块，乙为用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成的单个细胞悬液，丙图为转入培养液中进行原代培养的过程，该过程中细胞会表现为贴壁生长以及接触抑制的特点，丁图为将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞培养，该过程为传代培养过程，传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了，一般情况下，细胞传至10~50代时增殖会逐渐缓慢，以至完全停止。
【详解】A、甲→乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理获得单细胞悬液然后进行细胞培养，A正确；
B、由分析可知，丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中原代培养的过程，B正确；
C、丙过程为原代培养，会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象，C正确；
D、丁过程为传代培养，属于细胞培养，没有发育成一个完整个体，不能体现全能性，D错误。
故选D。
36. 下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是（ ）
A. 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个细胞结合形成一个细胞的过程
B. 动物细胞融合后形成的单核细胞称为杂交细胞
C. 常用的诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法，灭活病毒诱导法，紫外线照射等
D. 细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能
【36题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞融合：
（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞；
（2）诱导动物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等；
（3）动物细胞融合的意义：打破了生殖隔离，使远缘杂交成为可能；成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段；
（4）最主要的用途：制备单克隆抗体。
【详解】A、动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，一般为两个细胞的融合，A正确；
B、动物细胞融合后，原来两个或多个动物细胞的遗传信息重新形成一个单核细胞，称为杂交细胞，例如骨髓瘤细胞和浆细胞融合，形成杂交瘤细胞，B正确；
C、诱导动物细胞融合的方法有电融合法、聚乙二醇融合法、灭活病毒诱导法，不能用紫外线照射法，C错误；
D、细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，克服远缘杂交不亲和的障碍，使远缘杂交成为可能，D正确。
故选C。
37. 被誉为中国“克隆先驱”的童第周教授和美籍华人牛满江教授在20世纪60年代就开展了鱼类的核移植工作。他们取出鲤鱼囊胚期胚胎的细胞核，放入鲫鱼的去核受精卵中，部分异核卵发育成了“杂种鱼”，它们的口须和咽区像鲤鱼，而脊椎骨的数目像鲫鱼，侧线鳞片数为中间类型，正确的是（ ）
A. “杂种鱼”的出现反映出动物细胞具有全能性
B. “杂种鱼”与克隆猴的培育过程中都需要进行胚胎移植
C. “杂种鱼”的性状说明生物体有些性状受细胞质基因的控制
D. 本实验也可选择鲫鱼的去核体细胞作受体细胞
【37题答案】
【答案】C
【解析】
【分析】动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术，就叫做动物克隆。
【详解】A、“杂种鱼”的出现反映了动物细胞核具有全能性，不能反映动物细胞有全能性，A 错误；
B、克隆猴的培育过程中需要进行胚胎移植，“杂种鱼”体外孵化，不需要胚胎移植，B 错误；
C、“杂种鱼”的某些性状与提供去核受精卵的鲫鱼相同，说明生物体有些性状受细胞质基因的控制，C正确；
D、本实验不能选择鲫鱼的去核体细胞作受体细胞，因为受精卵细胞的细胞质中可能含有某些促进细胞核发挥全能性的物质，而体细胞中没有，D错误。
故选C。
38. 将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（ ）
A. B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
B. B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生抗体
C. 骨髓瘤细胞不能无限增殖，但可以产生抗体
D. 骨髓瘤细胞只有与B细胞融合，才能产生抗体
【38题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】
【详解】A、B淋巴细胞可产生抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞不产生抗体，但能无限增殖，A正确；
B、B淋巴细胞能产生抗体，与是否与骨髓瘤细胞融合无关，B错误；
C、骨髓瘤细胞能无限增殖，但不可以产生抗体，C错误；
D、骨髓瘤细胞不能产生抗体，D错误。
故选A。
【点睛】本题考查单克隆抗体的制备的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
39. 已知骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长，效应B细胞有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），但不能无限增殖。如图是单克隆抗体制备过程示意图，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 过程①中注射的抗原能与产生的单克隆抗体特异结合
B. 过程②得到的三种类型的细胞不能在HAT培养液中增殖
C. 过程③采用抗原—抗体反应进行特定杂交瘤细胞的筛选
D. 过程④获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体
【39题答案】
【答案】B
【解析】
【分析】分析题图：图示表示单克隆抗体制备过程示意图，其中①表示给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应（图中A、B、C为三种浆细胞），②表示浆细胞和骨髓瘤细胞（D细胞）融合的过程，③表示筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，④表示克隆化培养过程。
【详解】A、过程①中注射的抗原能与产生的单克隆抗体特异结合，A正确；
B、过程②得到的三种类型的细胞都是杂交瘤细胞，都能在HAT培养液中增殖，B错误；
C、过程③采用抗原-抗体反应进行特定杂交瘤细胞的筛选，C正确；
D、过程④为克隆化培养，该过程获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体，D正确。
故选B。
40. 某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，有几处不正确（ ）
植物细胞工程
动物细胞工程
技术手段
植物细胞培养、植物体细胞杂交
动物细胞培养和融合、动物细胞核
移植等
特殊处理
机械法去除细胞壁
胰蛋白酶处理、制细胞悬浮液
融合方法
物理方法、化学方法
物理方法、化学方法、生物方法
典型应用
人工种子、杂种植物
单克隆抗体的制备
培养液区别
蔗糖是离体组织赖以生长的成分
动物血清不可缺少
A. 1 B. 2 C. 3 D. 4
【40题答案】
【答案】A
【解析】
【分析】1、植物细胞工程的技术手段主要有植物组织培养和植物体细胞杂交，其中植物组织培养是植物细胞工程的基础。
2、动物细胞工程的技术手段主要有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植和核移植，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
【详解】①技术手段：植物细胞工程技术手段包括植物组织培养和植物体细胞杂交，动物细胞工程的技术包括动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植技术，正确；
②特殊处理：植物体细胞杂交时，需要用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁，动物细胞培养时需要用胰蛋白酶处理制备细胞悬浮液，错误；
③融合方法：诱导植物原生质体融合的方法包括物理方法和化学方法，而诱导动物细胞融合的方法还包括生物方法，正确；
④典型应用：植物组织培养技术可用于制备人工种子，植物体细胞杂交技术可用于种间杂交等；而动物细胞融合和动物细胞培养技术可用于制备单克隆抗体，正确；
⑤培养液区别：植物组织培养过程中利用蔗糖，而动物细胞培养时需要加入动物血清等天然成分，正确。
故选A。
二、非选择题
41. 如表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的切割位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：
限制酶
BamHⅠ
BclⅠ
Sau3AⅠ
HindⅢ
识别序列及切割位点
（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用__________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过________酶的作用形成重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于__________态的大肠杆菌中。
（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加__________。
（3）若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为__________，对该部位，这两种酶__________（填“都能”“都不能”或“只有一种能”）切开。
（4）假设所用的酶均可将切割位点完全切开，若用Sau3AⅠ切割图1质粒，可能获得__________种大小不同的DNA片段。
（5）常用PCR技术扩增目的基因，所用的引物组成为图2中__________。该PCR反应体系的主要成分应该包含扩增缓冲液（含Mg2+）、水、引物、模板DNA、__________和__________。
【41题答案】
【答案】 ①. BclⅠ和HindⅢ ②. DNA连接 ③. 感受 ④. 四环素 ⑤. 或 ⑥. 都不能 ⑦. 3 ⑧. 引物甲和引物丙 ⑨. 4种脱氧核糖核苷酸 ⑩. 热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）
【解析】
【分析】1、基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
2、理解基因工程的概念：基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术操作环境 生物体外操作对象 基因操作水平 DNA分子水平基本过程 剪切→拼接→导入→表达结果 人类需要的基因产物。
3、获取目的基因的方法主要有两种：
（1）从供体细胞的DNA中直接分离基因，最常用的方法是“鸟枪法”又叫“散弹射击法“；
（2）人工合成基因，这种方法有两条途径，一是以目的基因转录的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，再在酶的作用下合成双链DNA，即目的基因；另一条途径是蛋白质的氨基酸序列，推测出信使RNA序列，再推测出结构基因的核苷酸序列，然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成。
【详解】（1）选择的限制酶在目的基因的两侧都应该有切割位点，又因为用BamHⅠ酶会将两个标记基因都破坏，所以构建基因表达载体时只能选择BclI和HindⅢ对质粒和目的基因进行切割，露出两种不同的粘性末端，再利用DNA连接酶将两者定向连接。再将重组质粒导入感受态的大肠杆菌进行扩增。
（2）由于构建重组质粒的时候，氨苄青霉素抗性基因被破坏，而四环素的抗性基因没有被破坏，所以为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加四环素。
（3）根据表格中碱基分析，若BamHI酶切DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为或，对于该部位，这两种酶都不能切开。
（4）根据表格分析可知Sau3A I可以切割BclI和BamH I的切割位点，所以若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得3种大小不同的DNA片段。
（5）根据图2可知对目的基因进行扩增时的引物应该是引物甲和引物丙。该PCR反应体系的主要成分应该包含扩增缓冲液（含Mg2+）、水、引物、模板DNA、4种脱氧核糖核苷酸、热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）。
【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤的相关细节，能结合所学的知识准确答题，旨在考查考生信息获取的能力与知识的迁移运用能力。
42. 某水稻品种体内含有基因Q，该基因在水稻体细胞和精子中正常表达，但在卵细胞中该基因不能与RNA聚合酶结合而无法表达。为了获得基因Q能够表达的卵细胞，研究人员进行了相关研究。回答下列问题：
（1）为了获取基因Q中编码蛋白质的核苷酸序列，可从水稻___________细胞中提取总RNA，然后经逆转录后构建___________。
（2）将基因Q中编码蛋白质的序列与Luc基因(荧光素酶基因，荧光素酶能催化荧光素产生荧光)拼接成Q－Luc融合基因(融合基因中的Q和Luc基因都能独立表达)，拼接过程需要的酶是___________。将融合基因插入到Ti质粒的___________中，利用___________法可将融合基因转入水稻愈伤组织。
（3）与诱导愈伤组织的培养基相比，将愈伤组织培育成转基因植株时，培养基组成成分的主要区别是___________，培养条件的主要差异是___________。
（4）将转基因水稻培育成熟后，其卵细胞中的基因Q能够进行正常表达，推测可能的原因是________________。在分离并培养转基因水稻卵细胞的过程中，可以筛选出能够表达基因Q的卵细胞，筛选的方法是______________________。
【42题答案】
【答案】 ①. 体细胞或精子 ②. 基因文库（cDNA文库） ③. DNA连接酶 ④. T-DNA ⑤. 农杆菌转化 ⑥. 植物激素种类及比例不同 ⑦. 需要光照 ⑧. T-DNA的启动子可与卵细胞的RNA聚合酶结合 ⑨. 向培养基中加入荧光素，筛选出能产生荧光的细胞
【解析】
【分析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】（1）为了获取基因Q中编码蛋白质的核苷酸序列可从水稻体细胞或精子细胞中提取总RNA，然后经逆转录后构建基因文库（cDNA文库）然后找到目的基因。
（2）将基因Q中编码蛋白质的序列与Luc基因（荧光素酶基因，荧光素酶能催化荧光素产生荧光）拼接成Q-Luc融合基因（融合基因中的Q和Luc基因都能独立表达），拼接过程需要的酶是DNA连接酶。然后将融合基因插入到Ti质粒的T-DNA中，利用农杆菌转化法可将融合基因转入水稻愈伤组织，并与水稻细胞的染色体DNA整合在一起。
（3）与诱导愈伤组织的培养基相比，将愈伤组织培育成转基因植株时，需要将其转接到分化培养基中，该培养基组成成分中的植物激素种类及比例有差异，且培养过程中需要光照，因为叶绿素的形成需要光。
（4）将转基因水稻培育成熟后，其卵细胞中的基因Q能够进行正常表达，同时Luc基因也进行了表达，可能的原因是T-DNA的启动子可与卵细胞中的RNA聚合酶结合，进而目的基因表达成功。为此，在分离并培养转基因水稻卵细胞的过程中，可向培养基中加入荧光素，根据荧光是否出现，筛选出能够表达基因Q的卵细胞。
【点睛】熟知基因工程的原理和操作要点是解答本题的 关键，明确植物组织培养技术的原理及其相关的应用是解答本题的前提，掌握农杆菌转化法在植物基因工程中的应用并能够掌握植物组织培养技术的过程是解答本题的另一关键。
43. 科学家利用单克隆抗体技术，分别获得鼠抗体与人抗体，再将抗体进行改造，生产出效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答：
（1）培养骨髓瘤细胞时，需用___________________处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞，此外还应定期更换____________，以清除代谢产物。
（2）制备单克隆抗体时，先用特定的选择性培养基进行筛选，获得________________；然后对上述细胞进行抗体检测，选取___________________________的细胞进行克隆化培养；最终获得单克隆抗体，其优点是____________________________________________。
（3）有人提出：将经特定抗原刺激产生的B淋巴细胞的细胞核移植到去核骨髓瘤细胞中来产生单克隆抗体，该技术称为________________。
（4）改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠—人嵌合抗体，属于_______________（生物工程）的范畴。该过程要根据________________________，设计嵌合抗体的结构，最终对基因进行操作。
【43题答案】
【答案】①. 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） ②. 培养液 ③. 杂交瘤细胞 ④. 专一抗体检验阳性（或能产生专一抗体） ⑤. 特异性强、灵敏度高、可大量制备 ⑥. 动物体细胞核移植技术 ⑦. 蛋白质工程 ⑧. 预期的嵌合抗体功能
【解析】
【分析】1.单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。
2.蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。
【详解】（1）培养骨髓瘤细胞时，需要将所选取的组织细胞分散开，以利于细胞融合，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理离体组织细胞使之分散开，此外还应定期更换培养液，以清除代谢产物，有利于细胞的生长。
（2）根据分析可知，制备单克隆抗体时，因为细胞的融合过程是随机的，因此融合后需要先用特定的选择性培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞；然后对上述细胞进行抗体检测，选取专一抗体检验阳性（或能产生专一抗体）的细胞进行克隆化培养；最终获得单克隆抗体，单克隆抗体表现的优点为特异性强、灵敏度高、可大量制备。
（3）有人设计用体细胞核移植技术将经特定抗原刺激产生的B淋巴细胞的细胞核移植到去核骨髓瘤细胞中来产生单克隆抗体，这是获得单克隆抗体的新举措。
（4）从免疫的角度考虑，对人体来说鼠源抗体为抗原，若利用人的抗体与之嵌合，则排斥作用会减轻，对人体的副作用会减少，因此设计改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠—人嵌合抗体，这属于蛋白质工程的技术范畴。该过程首先需要根据预期的嵌合抗体功能，设计嵌合抗体的结构，然后推测相应的基因片段，最终对基因进行操作，因此该工程又叫做第二代基因工程。
【点睛】熟知单克隆抗体的制备过程及其原理是解答本题的关键，蛋白质工程的设计思路也是本题的考查点，掌握单克隆抗体的优点是解答本题的另一关键。
44. 植物细胞工程技术在作物育种上具有广泛的应用。回答下列问题：
（1）植物组织培养技术：在_______和人工控制的条件下，将离体的组织和细胞在特定培养基上先_______得到愈伤组织，再分化得到胚状体等，进而得到新植株。该过程的原理是 ______________
（2）植物原生质体培养技术：首先用_______酶去除植物细胞的细胞壁得到原生质体，然后向原生质体中导入抗病基因或含有抗病基因的染色体片段，转移至合适的环境中，在_______（填细胞器）的作用下再生细胞壁、形成愈伤组织、得到胚状体，最终发育成完整的植株。
（3）植物体细胞杂交技术：该技术是先用酶解法将两种不同植物的细胞壁去除，再添加 _______（填化学法）诱导两种原生质体相融合，再生出细胞壁后形成杂种细胞，经组织培养技术得到杂种植株。该项技术的优点是 ________ ，该技术可能不会按照人们的意愿表达出双亲的优良性状，其原因可能是___________。
【44题答案】
【答案】 ①. 无菌 ②. 脱分化 ③. 植物细胞的全能性 ④. 纤维素酶和果胶 ⑤. 高尔基体 ⑥. 聚乙二醇 ⑦. 克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍（或克服生殖隔离） ⑧. 不同物种的基因在表达时相互干扰，从而不能有序表达
【解析】
【分析】植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养，以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
【详解】（1）植物组织培养技术：在无菌和人工控制的条件下，让离体的组织和细胞在特定培养基上先脱分化得到愈伤组织，再分化得到胚状体、丛芽等，进而得到新植株。该过程的原理是植物细胞的全能性。
（2）植物原生质体培养技术：首先用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁得到原生质体，然后向原生质体中导人抗病基因或含有抗病基因的染色体片段，转移至合适的环境中，在高尔基体的作用下再生细胞壁、形成愈伤组织、得到胚状体，最终发育成完整的植株。
（3）植物体细胞杂交技术：该技术是先用酶解法将两种不同植物的细胞壁去除，再添加聚乙二醇（化学法）或离心、电刺激（物理法）诱导两种原生质体相融合，再生出细胞壁后形成杂种细胞，经组织培养技术得到杂种植株。该项技术的优点是克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍（或克服生殖隔离），该技术可能不会按照人们的意愿表达出双亲的优良性状，其原因可能是不同物种的基因在表达时相互干扰，从而不能有序表达。
【点睛】本题考查植物组织培养和基因工程的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程及条件等基础知识，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确作答。
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